淀粉酶变体的制作方法

技术特征：
no:9,seq id no:11,seq id no:13,seq id no:15,seq id no:17,seq id no:19,seq id no:21,seq id no:23,seq id no:25,seq id no:27,seq id no:29,seq id no:31,seq id no:33,seq id no:35或seq id no:37具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性的氨基酸序列；(b)由与seq id no:55,seq id no:2,seq id no:4,seq id no:6,seq id no:8,seq id no:10,seq id no:12,seq id no:14,seq id no:16,seq id no:18,seq id no:20,seq id no:22,seq id no:24,seq id no:26,seq id no:28,seq id no:30,seq id no:32,seq id no:34,seq id no:36或seq id no:38具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性的多核苷酸编码的氨基酸序列，(c)由多核苷酸编码的氨基酸序列，所述多核苷酸在高严格条件下与以下序列的互补序列杂交：(i)seq id no:54,seq id no:1,seq id no:3,seq id no:5,seq id no:7,seq id no:9,seq id no:11,seq id no:13,seq id no:15,seq id no:17,seq id no:19,seq id no:21,seq id no:23,seq id no:25,seq id no:27,seq id no:29,seq id no:31,seq id no:33,seq id no:35或seq id no:37的编码序列；或者(ii)seq id no:55,seq id no:2,seq id no:4,seq id no:6,seq id no:8,seq id no:10,seq id no:12,seq id no:14,seq id no:16,seq id no:18,seq id no:20,seq id no:22,seq id no:24,seq id no:26,seq id no:28,seq id no:30,seq id no:32,seq id no:34,seq id no:36或seq id no:38所示的多核苷酸；或者(d)具有淀粉酶活性的(a)、(b)或(c)的片段。14.根据前述权利要求中任一项所述的多肽，其中所述淀粉酶与seq id no:39或seq id no:40所示的淀粉酶相比，具有增加的表达、活性、热稳定性、稳定性、洗衣性能、比活性、底物特异性、ph依赖的活性、ph依赖的稳定性、氧化稳定性、ca2 依赖性或其任意组合，优选地，与seq id no:39或seq id no:40所示的淀粉酶相比，所述淀粉酶具有增加的热稳定性。15.一种分离的、合成的或重组的核酸，其包含：(a)核酸序列，其与seq id no:55,seq id no:2,seq id no:4,seq id no:6,seq id no:8,seq id no:10,seq id no:12,seq id no:14,seq id no:16,seq id no:18,seq id no:20,seq id no:22,seq id no:24,seq id no:26,seq id no:28,seq id no:30,seq id no:32,seq id no:34,seq id no:36或seq id no:38具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，其中所述核酸编码具有淀粉酶活性的多肽；(b)核酸序列，所述核酸序列编码与seq id no:54,seq id no:1,seq id no:3,seq id no:5,seq id no:7,seq id no:9,seq id no:11,seq id no:13,seq id no:15,seq id no:17,seq id no:19,seq id no:21,seq id no:23,seq id no:25,seq id no:27,seq id no:29,seq id no:31,seq id no:33,seq id no:35或seq id no:37具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、
至少98％、至少99％或100％的序列同一性的多肽，其中所述多肽具有淀粉酶活性，或者所述核酸序列编码前述权利要求中任一项的多肽；(c)多核苷酸，所述多核苷酸在高严格条件下与以下序列的互补序列杂交：(i)seq id no:54,seq 1d no:1,seq id no:3,seq id no:5,seq id no:7,seq id no:9,seq id no:11,seq id no:13,seq id no:15,seq id no:17,seq id no:19,seq id no:21,seq id no:23,seq id no:25,seq id no:27,seq id no:29,seq id no:31,seq id no:33,seq id no:35或seq id no:37的编码序列；或者(ii)seq id no:55,seq id no:2,seq id no:4,seq id no:6,seq id no:8,seq id no:10,seq id no:12,seq id no:14,seq id no:16,seq id no:18,seq id no:20,seq id no:22,seq id no:24,seq id no:26,seq id no:28,seq id no:30,seq id no:32,seq id no:34,seq id no:36或seq id no:38所示的多核苷酸；(d)(a)、(b)或(c)的片段，其中所述片段编码具有淀粉酶活性的多肽；或者(e)与(a)至(d)中任一项完全互补的核酸序列。16.一种核酸构建体，其包含权利要求15所述的多核苷酸。17.一种表达载体，其包含权利要求15所述的多核苷酸或权利要求16所述的核酸构建体。18.一种宿主细胞，其包含权利要求15所述的多核苷酸、权利要求16所述的核酸构建体或权利要求17所述的表达载体。19.一种组合物，其包含根据权利要求1-14中任一项所述的具有α-淀粉酶活性的分离的、合成的或重组的多肽。20.根据权利要求19所述的组合物，其还包含至少一种选自以下的第二酶：第二淀粉酶、脂酶、蛋白酶、纤维素酶、漆酶、甘露聚糖酶、果胶酶、木聚糖酶和核酸酶。21.一种制备如权利要求1-14中任一项所述的具有α-淀粉酶活性的分离的、合成的或重组的多肽的方法，所述方法包括：提供编码所述多肽的核酸序列，将所述核酸序列转化到表达宿主中，培养表达宿主以产生多肽，和任选地纯化多肽。22.一种制备面团或由所述面团制备的烘焙产品的方法，所述方法包括将如权利要求1-14中任一项所述的具有α-淀粉酶活性的分离的、合成的或重组的多肽添加到所述面团中，和烘焙所述面团。23.一种使用根据权利要求1-14中任一项所述的具有α-淀粉酶活性的分离的、合成的或重组的多肽的方法，用于清洁或洗涤纺织品、硬表面或餐具、用于加工淀粉、用于制造乙醇、用于加工纸浆或纸、或用于饲养动物，优选地，用于清洁或洗涤纺织品、硬表面或餐具。24.一种制备具有α-淀粉酶活性的分离的、合成的或重组的多肽的方法，所述方法包括从至少两种不同的淀粉酶制备杂合体的步骤，其中所述杂合体包含a和b结构域以及c结构域，其中所述a和b结构域的氨基酸序列与seq id no:42的氨基酸序列至少75％相同，并且所述c结构域的氨基酸序列与seq id no:44的氨基酸序列至少75％相同。25.第一淀粉酶的c结构域的使用方法，其用于改善第二α淀粉酶的一种或多种选自以下的性质：稳定性、ph曲线、表达、活性、热稳定性、比活性、底物特异性、ph依赖的活性、ph依赖的稳定性、氧化稳定性、ca2 依赖性、洗衣性能、加工淀粉、清洁纺织品、清洁硬表面、清洁餐具、制造乙醇、加工纸浆或纸、和饲养动物，所述c结构域具有与seq id no:44的氨基酸序
列具有至少75％同一性的氨基酸序列，所述第二α淀粉酶具有与seq id no：42的氨基酸序列具有至少75％同一性的a和b结构域，所述使用包括用第一α淀粉酶的c结构域替换第二α淀粉酶的c结构域。

技术总结
具有淀粉酶活性的基因工程化的酶、包含所述酶的组合物以及制备和使用所述酶的方法。基因工程化的淀粉酶可用于许多不同的应用，例如衣物洗涤剂、餐具洗涤剂和用于家庭的清洁产品、工业、车辆护理、烘焙、动物饲料、纸浆和纸加工、淀粉加工、酿造和乙醇生产。酿造和乙醇生产。


技术研发人员：S
受保护的技术使用者：巴斯夫欧洲公司
技术研发日：2020.08.21
技术公布日：2022/4/15