石刁柏雄性特异的引物及生物性别鉴定方法

技术特征：
1.石刁柏雄性特异的引物，其特征在于，包括asp-ys1引物和asp-ys2引物：asp-ys1引物：asp-ys1-f(5
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cctatctaatacatcataacacg-3’)，asp-ys1-r(5
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ccgagatcaagttgtatataatc3
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)；asp-ys2引物：asp-ys2-f(5
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tttcactagaagattacattgtg3
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)，asp-ys2-r(5
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)；所述asp-ys1引物和asp-ys2引物通过pcr扩增，用以在生物样本中对雄性石刁柏实现筛选。2.根据权利要求1所述一种芦笋的sts标记引物，其特征在于，所述asp-ys1引物的扩增序列为：cctatctaatacatcataacacgttgctgttgaatccacatattctctgagaaacaacagtacttgatatactaacttagcacatttaaaacacctgtagttgttttctccactcccttcccgtagtaggaagaacaaaaaacaccatttctcaaactataagctccataatttaccaagccatgtgaattcaatcataattagtatcactatcatctgaaataatgtaatttgaaaagagacacgaaacggaacatctataacaccaaaacccatttttatatgtaatcaagagttggttctggtgccccatcttgccaatgcaaagggaagccttcaagctttttttcatgagtggcattgaaacaaaacccacgtagcaagaaatgaactggtaaacaaggttctcagaatattttgacttggaccaggcgcaactaagtcaagttacatgggagcttaaaatcgattatatacaacttgatctcgg；所述asp-ys2引物的扩增序列为：tttcactagaagattacattgtgaggaagatagtggaaaggcaccatggaaagtgtttgatttgggtactcggtagggtgcggattttggtgcttccaaatgcctcgcatattgagaatcctcagcaactattcacgccaagcttatgttagtcttgtgacctcattgactggtcatatttcagtattttttttttaattctcgtttggaatgcttgtttaaagaattttgctttgatggtaatgtagatttttatttcaattatatcatgttttacacataccagaatggaaaac。3.石刁柏的生物性别鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：获取石刁柏的目标生物样本，并提取目标生物样本的基因组dna；使用如权利要求1所述的引物，通过pcr扩增获得pcr产物；对pcr产物进行凝胶电泳检测，获得电泳条带，有扩增条带鉴定为雄性，无扩增条带鉴定为雌性。4.根据权利要求3所述石刁柏的生物性别鉴定方法，其特征在于，所述pcr扩增设计的反应体系为：5.根据权利要求3所述石刁柏的生物性别鉴定方法，其特征在于，所述pcr扩增设计的反应过程为：1)98℃预变性2min；2)循环扩增：a)98℃变性30s；
b)56℃退火30sc)72℃延伸30s重复a—c 30个循环；3)72℃延伸5min。6.根据权利要求3所述石刁柏的生物性别鉴定方法，其特征在于，所述对pcr产物进行凝胶电泳检测包括，对pcr产物在1.0％琼脂糖凝胶中以120v电压继续电泳30min，而后利用凝胶成像系统拍照。

技术总结
本发明公开了石刁柏雄性特异的引物及生物性别鉴定方法，主要涉及农业生物工程领域。包括Asp-YS1引物和Asp-YS2引物，用以在生物样本中对雄性石刁柏实现筛选。本发明的有益效果在于：它解决现有分子标记对芦笋性别鉴定不准确的问题，提高芦笋育种的效率以及进行精准育种。种。种。


技术研发人员：王兴军 赵术珍 纳维德
受保护的技术使用者：山东省农业科学院
技术研发日：2021.11.24
技术公布日：2022/4/15