一种鹿茸干细胞体外扩增培养体系及其方法与流程

技术特征：
1.一种鹿茸干细胞体外扩增培养体系，其特征在于，包括无血清培养基、细胞生长因子、血清替代物、叶酸、l-谷氨酰胺、二巯基乙醇、青霉素、链霉素和非必须氨基酸。2.根据权利要求1所述的一种鹿茸干细胞体外扩增培养体系，其特征在于，细胞生长因子为10ng/ml的il-3和100ng/ml的il-6。3.根据权利要求1所述的一种鹿茸干细胞体外扩增培养体系，其特征在于，无血清培养基为dmem培养基，含量为培养体系的80％-95％。4.根据权利要求1所述的一种鹿茸干细胞体外扩增培养体系，其特征在于，鹿茸干细胞来自生茸区骨膜与角柄骨膜中。5.根据权利要求1所述的一种鹿茸干细胞体外扩增培养体系，其特征在于，叶酸含量为培养体系的0.1％-0.5％；l-谷氨酰胺含量为培养体系的0.5％-2％；血清替代物含量为培养体系的5％-8％；二巯基乙醇为培养体系的0.1％-0.5％；非必须氨基酸为培养体系的0.1％-0.5％。6.根据权利要求1所述的一种鹿茸干细胞体外扩增培养体系，其特征在于，青霉素和链霉素均为100u/ml。7.一种鹿茸干细胞体外扩增培养方法，其特征在于，将鹿茸干细胞接种至权利要求1-6任一项所述的培养体系中。8.根据权利要求7所述的一种鹿茸干细胞体外扩增培养方法，其特征在于，步骤如下：s1、采用水浴方式融化冷冻的鹿茸干细胞，使其复苏；s2、提前采用明胶、胶原蛋白、层粘连蛋白、纤连蛋白中的一种或几种组合对培养器皿进行包被处理；s3、在培养器皿中建立鹿茸干细胞体外扩增培养体系；将复苏的干细胞接种至培养体系；在co2浓度为5％，37℃的培养箱中进行培养3-5天；s4、离心、换液，每天观察细胞状态；s5、扩大培养。

技术总结
本发明涉及干细胞体外扩增培养技术领域，尤其涉及一种鹿茸干细胞体外扩增培养体系及其方法。本发明以无血清培养基为基础培养基，更利于干细胞生长，便于纯化和下游加工，也可以消除来自血清的不均一性，避免病毒污染造成的危害。添加叶酸，使其刺激干细胞增殖。细胞生长因子促进干细胞的分裂、繁殖和分化。L-谷氨酰胺是培养杆细胞的能量来源，参与蛋白质的合成和核酸代谢。二巯基乙醇作为一种强还原剂，可以中和干细胞培养基中积累的氧自由基，使得细胞分裂到很高的密度而不死亡，从而便于进行细胞增殖。青霉素、链霉素利于控制、消除细胞培养过程中的污染。养过程中的污染。养过程中的污染。


技术研发人员：陈丽晶
受保护的技术使用者：玺瑞生命科学（深圳）有限公司
技术研发日：2022.02.09
技术公布日：2022/4/12