一种重瓣百合离体快繁育苗方法

1.本发明涉及百合培养技术领域，尤其涉及一种重瓣百合离体快繁育苗方法。


背景技术：

2.百合是百合科百合属的多年生草本植物，具地下鳞茎。作为一种具有极高观赏价值的花卉，适宜庭园、花坛栽培以及盆栽，以“百年好合”的寓意而深受人们的喜爱，成为市场上十分畅销的花卉之一；作为四大鲜切花之一，百合的种球与切花销量一直位居世界前列，有“球根花卉之王”的美称，重瓣百合是百合的园艺新品种，具有极高的观赏和经济价值。
3.现有的重瓣百合一般采用分球、分珠芽、鳞片扦插等方法进行繁殖，但繁殖系数低，从而影响百合的产量；植物组织培养技术是生命科学中重要的研究技术和手段之一。利用组织培养技术，可加快百合的繁殖速度，因此如何利用植物阻止培养进行百合离体快速繁育是目前亟需解决的问题。


技术实现要素：

4.本发明的目的是为了解决背景技术中的问题，而提出的一种重瓣百合离体快繁育苗方法。
5.为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
6.一种重瓣百合离体快繁育苗方法，包括以下步骤：
7.s1,培养体选取：选取带有嫩芽的百合茎段，并将茎段从主干上切割取下；
8.s2，茎段处理：用棉球蘸取浓度为75％的酒精擦拭茎段的切口部位，进行消毒灭菌处理；
9.s3，茎段培养：削除茎段下端部分，将茎段置入培养基ⅰ中；
10.s4，诱导培养：待步骤3中的茎段出现新生芽1-4个后，将茎段均匀分成2-4段，再置入培养基ⅱ中进行诱导培养，待生长出新生芽后，重复此步骤，实现连续诱导增殖；
11.s5，膨大生根，步骤4中新生芽在培养基ⅱ中培养10-30天后移入培养基ⅲ中，加快芽的生长和生根。
12.优选地，所述步骤2中在酒精对茎段消毒灭菌处理前先用流水对茎段进行冲洗，去除茎段粘附的杂质，酒精擦拭消毒后再采用流水进行二次冲洗，去除多余的酒精。
13.优选地，所述培养基ⅰ和培养基ⅱ进行黑暗培养，所述培养基ⅲ进行光暗交替培养，且光照和黑暗时间为1:2，光照强度1000-4000lx。
14.优选地，所述培养基1、培养基ⅱ、培养基ⅲ的培养温度为昼间温度22
±
1℃，夜间温度18
±
1℃。
15.优选地，所述培养基1为b5 naa 0.8mg/l 6-ba 1.1mg/l zt 0.2mg/l 艾叶汁液0.1mg/l；
16.所述培养基ⅱ为b5 naa 0.9mg/l 6-ba 1.4mg/l zt 0.3mg/l kt0.1mg/l；
17.所述培养基ⅲ为b5 naa 0.9mg/l 6-ba 1.2mg/l zt 0.3mg/l kt0.1mg/l g630.25 mg/l。
18.优选地，所述培养基1为n6 naa 0.8mg/l 6-ba 1.1mg/l zt 0.2mg/l 艾叶汁液0.1mg/l；
19.所述培养基ⅱ为n6 naa 0.9mg/l 6-ba 1.4mg/l zt 0.3mg/l kt0.1mg/l；
20.所述培养基ⅲ为n6 naa 0.9mg/l 6-ba 1.2mg/l zt 0.3mg/l kt0.1mg/l g630.25 mg/l。
21.优选地，所述培养基1为ms naa 0.8mg/l 6-ba 1.1mg/l zt 0.2mg/l 艾叶汁液0.1mg/l；
22.所述培养基ⅱ为ms naa 0.9mg/l 6-ba 1.4mg/l zt 0.3mg/l kt0.1mg/l；
23.所述培养基ⅲ为ms naa 0.9mg/l 6-ba 1.2mg/l zt 0.3mg/l kt0.1mg/l g630.25 mg/l。
24.与现有的技术相比，本重瓣百合离体快繁育苗方法的优点在于：
25.本发明通过切割重瓣百合茎段作为培养体，经消毒后进行诱导不定芽，再经不定芽的增殖、生根从而获得组培苗，实现离体快速繁育培苗，进而大幅度提高重瓣百合的繁殖速度。
具体实施方式
26.下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
27.实施例一
28.一种重瓣百合离体快繁育苗方法，包括以下步骤：
29.s1,培养体选取：选取带有嫩芽的百合茎段，并将茎段从主干上切割取下；
30.s2，茎段处理：用棉球蘸取浓度为75％的酒精擦拭茎段的切口部位，进行消毒灭菌处理；
31.s3，茎段培养：削除茎段下端部分，将茎段置入培养基ⅰ中；
32.s4，诱导培养：待步骤3中的茎段出现新生芽3个后，将茎段均匀分成3段，再置入培养基ⅱ中进行诱导培养，待生长出新生芽后，重复此步骤，实现连续诱导增殖；
33.s5，膨大生根，步骤4中新生芽在培养基ⅱ中培养20天后移入培养基ⅲ中，加快芽的生长和生根。
34.步骤2中在酒精对茎段消毒灭菌处理前先用流水对茎段进行冲洗，去除茎段粘附的杂质，酒精擦拭消毒后再采用流水进行二次冲洗，去除多余的酒精，避免了多余酒精粘附持续对茎段造成伤害，避免影响茎段的活性，保证能正常进行生长发育。
35.培养基1、培养基ⅱ、培养基ⅲ的培养温度为昼间温度22℃，夜间温度18℃。
36.培养基ⅰ和培养基ⅱ进行黑暗培养，培养基ⅲ进行光暗交替培养，且光照和黑暗时间为1:2，光照强度2500lx，暗培养能防止迅速分裂的愈伤细胞老化，在培养初期能快速诱导愈伤，降低褐化率，进而保证茎段后续能正常生长，在置入培养基ⅲ中进行光暗交替，光照能促进细胞分化，促进生长发育。
37.培养基1为b5 naa 0.8mg/l 6-ba 1.1mg/l zt 0.2mg/l 艾叶汁液0.1mg/l，艾叶
汁液具有较好的灭菌效果，同时无类似酒精的刺激，能杀伤大部分茎段上的细菌，进而保证茎段正常生长发育；
38.培养基ⅱ为b5 naa 0.9mg/l 6-ba 1.4mg/l zt 0.3mg/l kt0.1mg/l；
39.培养基ⅲ为b5 naa 0.9mg/l 6-ba 1.2mg/l zt 0.3mg/l kt0.1mg/l g630.25 mg/l，培养基ⅲ中添加g63，促进细胞生长发育，促进分裂，使切割的茎段快速生根以及芽的膨大。
40.b5培养基具有较低的铵，能避免了铵对培养物的抑制效果。
41.实施例二
42.一种重瓣百合离体快繁育苗方法，包括以下步骤：
43.s1,培养体选取：选取带有嫩芽的百合茎段，并将茎段从主干上切割取下；
44.s2，茎段处理：用棉球蘸取浓度为75％的酒精擦拭茎段的切口部位，进行消毒灭菌处理；
45.s3，茎段培养：削除茎段下端部分，将茎段置入培养基ⅰ中；
46.s4，诱导培养：待步骤3中的茎段出现新生芽3个后，将茎段均匀分成3段，再置入培养基ⅱ中进行诱导培养，待生长出新生芽后，重复此步骤，实现连续诱导增殖；
47.s5，膨大生根，步骤4中新生芽在培养基ⅱ中培养20天后移入培养基ⅲ中，加快芽的生长和生根。
48.步骤2中在酒精对茎段消毒灭菌处理前先用流水对茎段进行冲洗，去除茎段粘附的杂质，酒精擦拭消毒后再采用流水进行二次冲洗，去除多余的酒精，避免了多余酒精粘附持续对茎段造成伤害，避免影响茎段的活性，保证能正常进行生长发育。
49.培养基1、培养基ⅱ、培养基ⅲ的培养温度为昼间温度22℃，夜间温度18℃。
50.培养基ⅰ和培养基ⅱ进行黑暗培养，培养基ⅲ进行光暗交替培养，且光照和黑暗时间为1:2，光照强度2500lx，暗培养能防止迅速分裂的愈伤细胞老化，在培养初期能快速诱导愈伤，降低褐化率，进而保证茎段后续能正常生长，在置入培养基ⅲ中进行光暗交替，光照能促进细胞分化，促进生长发育。
51.培养基1为n6 naa 0.8mg/l 6-ba 1.1mg/l zt 0.2mg/l 艾叶汁液0.1mg/l，艾叶汁液具有较好的灭菌效果，同时无类似酒精的刺激，能杀伤大部分茎段上的细菌，进而保证茎段正常生长发育；
52.培养基ⅱ为n6 naa 0.9mg/l 6-ba 1.4mg/l zt 0.3mg/l kt0.1mg/l；
53.培养基ⅲ为n6 naa 0.9mg/l 6-ba 1.2mg/l zt 0.3mg/l kt0.1mg/l g630.25 mg/l，培养基ⅲ中添加g63，促进细胞生长发育，促进分裂，使切割的茎段快速生根以及芽的膨大。
54.n6无机盐含量偏低，能减少对茎段的冲击。
55.实施例三
56.一种重瓣百合离体快繁育苗方法，包括以下步骤：
57.s1,培养体选取：选取带有嫩芽的百合茎段，并将茎段从主干上切割取下；
58.s2，茎段处理：用棉球蘸取浓度为75％的酒精擦拭茎段的切口部位，进行消毒灭菌处理；
59.s3，茎段培养：削除茎段下端部分，将茎段置入培养基ⅰ中；
60.s4，诱导培养：待步骤3中的茎段出现新生芽3个后，将茎段均匀分成3段，再置入培养基ⅱ中进行诱导培养，待生长出新生芽后，重复此步骤，实现连续诱导增殖；
61.s5，膨大生根，步骤4中新生芽在培养基ⅱ中培养20天后移入培养基ⅲ中，加快芽的生长和生根。
62.步骤2中在酒精对茎段消毒灭菌处理前先用流水对茎段进行冲洗，去除茎段粘附的杂质，酒精擦拭消毒后再采用流水进行二次冲洗，去除多余的酒精，避免了多余酒精粘附持续对茎段造成伤害，避免影响茎段的活性，保证能正常进行生长发育。
63.培养基1、培养基ⅱ、培养基ⅲ的培养温度为昼间温度22℃，夜间温度18℃。
64.培养基ⅰ和培养基ⅱ进行黑暗培养，培养基ⅲ进行光暗交替培养，且光照和黑暗时间为1:2，光照强度2500lx，暗培养能防止迅速分裂的愈伤细胞老化，在培养初期能快速诱导愈伤，降低褐化率，进而保证茎段后续能正常生长，在置入培养基ⅲ中进行光暗交替，光照能促进细胞分化，促进生长发育。
65.培养基1为ms naa 0.8mg/l 6-ba 1.1mg/l zt 0.2mg/l 艾叶汁液0.1mg/l，艾叶汁液具有较好的灭菌效果，同时无类似酒精的刺激，能杀伤大部分茎段上的细菌，进而保证茎段正常生长发育；
66.培养基ⅱ为ms naa 0.9mg/l 6-ba 1.4mg/l zt 0.3mg/l kt0.1mg/l；
67.培养基ⅲ为ms naa 0.9mg/l 6-ba 1.2mg/l zt 0.3mg/l kt0.1mg/l g630.25 mg/l，培养基ⅲ中添加g63，促进细胞生长发育，促进分裂，使切割的茎段快速生根以及芽的膨大。
68.ms培养基营养成分充足，提高生长发育需的营养。
69.以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。