化妆品的制作方法

1.本公开涉及一种保湿用的化妆品。


背景技术：

2.为了保湿皮肤，化妆品等领域中一直使用具有保湿功能的透明质酸。
3.专利文献1中公开了一种化妆品，其含有担载了透明质酸的纳米颗粒，该纳米颗粒由聚乳酸、聚乙醇酸及乳酸-乙醇酸共聚物中的任一者形成且在其内部或表面的至少一方担载了透明质酸。
4.专利文献2中公开了一种含有复合纳米颗粒的皮肤外用剂，该复合纳米颗粒包含(a)透明质酸及(b)两性离子化合物，且粒径为100nm以下。
5.现有技术文献
6.专利文献
7.专利文献1：日本特开2010-150151号公报
8.专利文献2：国际公开wo2018/182003号


技术实现要素：

9.发明所要解决的课题
10.位于皮肤最外层的角质层具有防止来自外界的异物侵入的屏障功能，因而具有使应用于皮肤的有效成分难以到达皮肤内部的性质。因此，如果只是将透明质酸涂抹在皮肤上，则透明质酸的保湿效果容易停留于皮肤表面，只能发挥短期的保湿效果。其结果，在要改善皮肤的皱纹等的情况下，需要频繁、长期地持续涂抹透明质酸。
11.例如，如果采用注射方式将透明质酸注入至皮肤内部，则与涂抹情形相比，保湿效果的持续性得到提高，但该方法存在着伴有注射侵袭所导致的疼痛感的问题。
12.如专利文献1及2中所记载的那样，包含透明质酸的纳米级颗粒可侵入至比角质层更深的皮肤内部。然而，专利文献1中记载的颗粒中的透明质酸的含有比例低至约3质量％左右，另外，专利文献2中记载的颗粒中的透明质酸的含有比例也仅止于50质量％以下，因此存在无法确保充足保湿性的情况。
13.因此，本公开的主题是提供一种能够以非侵袭方式长期维持优异的保湿性的含有透明质酸颗粒的化妆品。
14.用于解决课题的手段
15.〈方案1〉
16.一种化妆品，其含有水性介质及分散于所述水性介质中的透明质酸颗粒，且所述透明质酸颗粒的平均粒径为200nm以下。
17.〈方案2〉
18.根据方案1所述的化妆品，所述透明质酸的重均分子量为10,000,000以下。
19.〈方案3〉
20.根据方案1或2所述的化妆品，含有选自无机盐及有机酸盐中的至少一种盐。
21.〈方案4〉
22.根据方案3所述的化妆品，所述盐的离子强度为0.01以上。
23.〈方案5〉
24.根据方案1～4中任一项所述的化妆品，所述透明质酸颗粒的含量为0.005质量％以上。
25.〈方案6〉
26.根据方案1～5中任一项所述的化妆品，其中离子性化合物、二醇类、乙醇及尿素的含量分别为15质量％以下。
27.〈方案7〉
28.根据方案1～6中任一项所述的化妆品，其被应用于皮肤。
29.〈方案8〉
30.一种方案1～7中任一项所述的化妆品的制造方法，在水或缓冲液中配入盐后，再配入透明质酸来制备透明质酸颗粒。
31.〈方案9〉
32.根据方案1～7中任一项所述的化妆品的制造方法，在水或缓冲液中配入透明质酸，使透明质酸溶解后，再配入盐来制备透明质酸颗粒。
33.发明效果
34.根据本公开，可提供一种能够以非侵袭方式长期维持优异的保湿性的含有透明质酸颗粒的化妆品。
附图说明
35.图1是关于用氯化钠制备的透明质酸颗粒的z平均粒径和离子强度的图。
36.图2是关于用氯化钠制备的各种透明质酸浓度的组合物中透明质酸颗粒的z平均粒径和离子强度的图。
37.图3是关于用氯化钠制备的透明质酸浓度为0.4质量％和0.5质量％的组合物中透明质酸颗粒的z平均粒径和离子强度的图。
38.图4是关于透明质酸颗粒的z平均粒径和保湿性能的图。
39.图5是关于用柠檬酸缓冲液制备的透明质酸颗粒的z平均粒径和离子强度的图。
40.图6是关于伴随添加尿素的透明质酸颗粒的z平均粒径的图。
具体实施方式
41.以下，对本公开的实施方式进行详细描述。本公开不限于以下实施方式，可以在发明主旨的范围内进行各种变形来实施。
42.本公开的化妆品含有水性介质及分散于该水性介质中的透明质酸颗粒，且透明质酸颗粒的平均粒径为200nm以下。
43.本公开的含有透明质酸颗粒的化妆品，虽然不受原理限定，但可以认为其能够以非侵袭方式长期维持优异的保湿性的作用原理，以及可以制备高度地含有透明质酸成分的平均粒径为200nm以下的透明质酸颗粒的作用原理如以下所述。
44.即，可以认为虽然200nm以下，尤其是100nm以下的透明质酸颗粒容易通过皮肤的角质层或毛孔等以非侵袭方式侵入到皮肤内部，但这样大小的颗粒并非可以无限制地侵入到皮肤内部，颗粒的侵入量在某种程度上受到限制。
45.例如，专利文献2中记载的复合纳米颗粒，颗粒中的透明质酸的含量为50质量％以下，与此相对，本公开的透明质酸颗粒中以超过50质量％的比例含有透明质酸。其结果可想而知，在例如专利文献2中记载的复合纳米颗粒的粒径与本公开的透明质酸颗粒的粒径相同，且侵入到皮肤内部的颗粒的数量相同的情况下，由于本公开的透明质酸颗粒中透明质酸的含有比例大，因此可提高其在皮肤内部的保湿效果及其持续性。
46.另外，一般来说，暴露于干燥环境下的皮肤会在不知不觉中被剥夺水分，变成无法保持肌肤表面的含水量的状态。一旦肌肤表面的水分不足，则肌肤自身产生的保湿成分(天然保湿因子nature moisturizing factor(nmf))无法顺利地生成。其结果，肌肤表面的屏障功能及保湿功能降低，肌肤容易受损，因此会失去湿润性，从而引起皱纹、肌肤粗糙等问题。可以认为本公开的化妆品能够使作为保湿剂发挥作用的透明质酸成分高度地侵入到皮肤内部，长期保持肌肤内部的表面附近的含水量，因此也可改善皱纹等肌肤问题。
47.一般来说，透明质酸因羧基的存在而具有负电荷。由于该负电荷的静电排斥，导致透明质酸的分子容易呈丝状扩散，存在难以颗粒化的倾向。因此，为了使透明质酸分子颗粒化，尤其是为了制备200nm以下的颗粒，就如专利文献1及2那样，需要能够担载透明质酸分子的纳米级支撑材料，因此使颗粒中的透明质酸的含有比例受到限制。
48.本发明人着眼于发挥着使透明质酸分子呈丝状扩散的作用的该静电排斥、及发挥着吸引作用的基于透明质酸中的羟基等而产生的氢键，发现了，通过利用氯化钠等电解质的静电屏蔽效应，在表观上中和透明质酸的负电荷，使氢键占主导地位，能够抑制透明质酸分子的扩散，即便是透明质酸分子单独也可以微粒化成纳米级。其结果，无需使用如上所述的支撑材料即可制备本公开的透明质酸颗粒，因此在理论上能够使颗粒中的透明质酸的含有比例达到100质量％。
49.另外，即便在透明质酸水溶液中存在氯化钠等电解质的情况下，如果包含下述尿素、离子性表面活性剂等对负电荷的表观中和或氢键产生不良影响的成分等，有时也难以获得抑制透明质酸分子扩散的效果和/或吸引透明质酸分子的效果。
50.另外，本公开的透明质酸颗粒即使不使用交联剂，也可以在化妆品中保持颗粒形态。这被认为是在透明质酸分子的分子内和/或分子间发挥吸引作用的氢键所带来的结果。
51.《含有透明质酸颗粒的化妆品》
52.本公开的化妆品含有水性介质及分散在该水性介质中的透明质酸颗粒。
53.〈透明质酸颗粒〉
54.已知透明质酸颗粒对皮肤侵入存在个体差异，可能会随着角质层的状态、毛孔的数量或大小等而变化，但只要是平均粒径计为200nm以下的颗粒，就可使颗粒侵入到大部分的皮肤。从对皮肤的侵入性、颗粒制备的容易性等角度考虑，作为透明质酸颗粒的平均粒径，可设定为例如，150nm以下、120nm以下或100nm以下，另外可设定为10nm以上、30nm以上或50nm以上。此处，平均粒径是指假定透明质酸颗粒的颗粒形状为球状时通过动态光散射法进行光学测定得到的透明质酸颗粒的z平均粒径。所述平均粒径例如可使用激光粒度仪(zeta sizer，
マルバーン
·
パナリティカル
公司制)或动态光散射光度计dls-8000(大塚电
子公司制)进行测定。这些测定装置可基于各种透明质酸的交叠浓度进行适当选定。例如，若未达交叠浓度，则可使用动态光散射光度计dls-8000，若为交叠浓度以上，则可使用激光粒度仪。交叠浓度例如可通过共聚焦荧光漂白恢复法(confocal-frap)算出。
55.本公开的透明质酸颗粒被认为是呈现透明质酸的分子相互缠结并凝集而成的丝状球形态。该颗粒可不使用上述支撑材料而进行制备，因此在理论上可以使颗粒中的透明质酸的含有比例达到100质量％。即，本公开的透明质酸颗粒可以由作为聚合物成分的透明质酸分子单独构成。
56.但是，本公开的透明质酸颗粒也可以在不对平均粒径、保湿性能等产生不良影响的范围含有透明质酸以外的其他聚合物成分。作为其他聚合物成分的含有比例，相对于透明质酸颗粒中所含的总聚合物量，可设定为例如20质量％以下、10质量％以下、5质量％以下、3质量％以下或1质量％以下。即，本公开中的“透明质酸颗粒”意指象这样高度地含有透明质酸成分的颗粒，不包含如专利文献1及2中所记载那样的透明质酸成分的比率为50质量％以下的颗粒。此处，关于透明质酸颗粒中透明质酸的含有比例，例如可使用紫外可见分光光度计(v-530，日本分光株式会社制，测定波长270nm)进行测定。
57.作为化妆品中的透明质酸颗粒的含量，例如从保湿性、成本等角度考虑，相对于化妆品的总量可设定为0.005质量％以上、0.01质量％以上、0.05质量％以上、0.10质量％以上、0.15质量％以上、0.20质量％以上或0.25质量％以上，另外可设定为1.0质量％以下、0.80质量％以下、0.60质量％以下、0.50质量％以下或0.45质量％以下。如上所述，本公开的化妆品，如上所述那样，包含透明质酸的含有比例高且容易以非侵袭方式侵入到皮肤内的平均粒径为200nm以下的透明质酸颗粒，因此即使化妆品中透明质酸颗粒的含量较低，也可以呈现出充分的保湿效果。
58.(透明质酸)
59.作为能够构成透明质酸颗粒的透明质酸，没有特别的限制。一般来说，透明质酸是指n-乙酰基-d-葡糖胺残基与d-葡糖醛酸残基交替键合而形成的直链状高分子，该透明质酸例如可通过从鸡冠或其他动物组织中分离提取而获得，或通过使用了链球菌属等微生物的发酵法而获得。
60.透明质酸也可以是其衍生物，例如作为透明质酸的衍生物，可使用透明质酸钠盐、透明质酸钾盐、透明质酸镁盐、透明质酸钙盐、透明质酸铝盐等透明质酸金属盐；将透明质酸的羟基、羧基等进行醚化、酯化、酰胺化、乙酰化、缩醛化、缩酮化而获得的透明质酸衍生物等。此处，本公开中的所谓“透明质酸”可包含透明质酸及其衍生物的概念。
61.作为透明质酸的重均分子量，没有特别的限制，可设定为例如，10,000,000以下。一般来说，可以认为重均分子量不足500的较低分子量的透明质酸即使不进行微颗粒化也容易侵入到皮肤内。但是，会存在以下情况，即这样的低分子量的透明质酸难以停留于皮肤内部，与高分子量的透明质酸相比，水分的保持性能较差，因此难以长期维持皮肤内部的保湿效果。另一方面，本公开的透明质酸颗粒可使用高分子量的透明质酸进行制备，另外，可以使颗粒中高度地含有该透明质酸，因此所获得的透明质酸颗粒容易停留于皮肤内部，可长期维持皮肤内部的保湿效果。从这样的皮肤内部的水分保持性能角度，以及从颗粒的制备容易性等角度考虑，作为透明质酸的重均分子量，可设定为例如，500以上、1,000以上、5,000以上、10,000以上、50,000以上、100,000以上、300,000以上、500,000以上、800,000以上
或1,000,000以上，另外可设定为10,000,000以下、8,000,000以下、5,000,000以下、3,000,000以下、2,000,000以下或1,500,000以下。此处，重均分子量意指利用凝胶渗透色谱法测定并进行了聚苯乙烯换算的重均分子量。
62.对于透明质酸，可以将透明质酸及其衍生物单独使用或组合两种以上使用。另外，所使用的透明质酸及其衍生物的分子量可以相同或不同。
63.透明质酸也可以使用市售品。作为市售的透明质酸，可以列举例如，透明质酸ha-lq(
キュピー
株式会社制)、透明质酸fch(
キッコーマンバイオケミファ
株式会社制)、生物透明质酸钠ha12n(
バイオヒアルロン
酸
ナトリウム
ha12n、株式会社资生堂制)等。
64.〈水性介质〉
65.作为水性介质，没有特别的限制，可使用化妆品、准药品等中所使用的水性介质。可以使用例如，离子交换水、蒸馏水、超纯水、自来水、缓冲液等。
66.作为缓冲液，可列举柠檬酸缓冲液、乳酸缓冲液、磷酸缓冲液、乙酸缓冲液、酒石酸缓冲液、硼酸缓冲液、tris缓冲液等。从缓冲能力高的角度考虑，优选柠檬酸缓冲液、乳酸缓冲液及磷酸缓冲液，更优选柠檬酸缓冲液。
67.作为缓冲液的ph值，可设定为7.0以下、6.8以下或6.5以下。缓冲液的ph值的下限值没有特别的限制，但从对皮肤刺激性等角度考虑，优选为例如，4.5以上、5.5以上或6.0以上。
68.〈盐〉
69.本公开的化妆品，在制备透明质酸颗粒时使用盐，因此化妆品中可含有盐。作为化妆品中可含有的盐，只要是能够在表观上中和透明质酸的负电荷的盐即可，没有特别的限制。作为这种盐，例如可列举选自无机盐及有机酸盐中的至少一种盐。在考虑用作化妆品的情况下，优选是无机盐及有机酸盐中不易对皮肤产生不良影响的盐。此处，“无机盐”意指仅由无机成分构成的盐，也可称为由无机酸和无机碱产生的离子所构成的盐。另外，“有机酸盐”意指有机酸与金属离子键合所形成的盐。另外，盐在化妆品中通常以来自盐的离子的形态存在。因此，在本公开中，例如“包含盐的化妆品”意指以这样的离子的形态含有盐。另外，本公开的“盐”中不包含离子性表面活性剂。
70.作为无机盐，可列举例如，硝酸钠、硫酸钠、氯化钠、硝酸钾、硫酸钾、氯化钾、硝酸钙、硫酸钙、氯化钙、硝酸镁、硫酸镁、氯化镁、硝酸铝、硫酸铝、氯化铝等。这些盐可单独使用或两种以上组合使用。
71.作为有机酸盐，可列举例如，柠檬酸盐、乙酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、苹果酸盐、乙醇酸盐、水杨酸盐、吡咯烷酮羧酸盐等。具体来说，可以列举柠檬酸、乙酸、乳酸、酒石酸、琥珀酸、苹果酸、乙醇酸、水杨酸、吡咯烷酮羧酸等有机酸，与钠离子、钾离子、钙离子、镁离子、铝离子等金属离子键合而形成的盐。这些盐可单独使用或两种以上组合使用。
72.可将化妆品中盐的配入量定义为盐的离子强度。作为盐的离子强度，可设定为例如，0.01以上、0.03以上或0.05以上。对于离子强度的上限值没有特别的限制，可设定为例如，4.0以下、3.0以下、2.0以下或1.0以下。此处，例如，在向缓冲液中添加盐而制备化妆品的情况下，离子强度是基于包括缓冲液本身所含的盐成分和缓冲液中另外添加的盐成分的所有盐成分进行计算的。
73.本公开的化妆品可在不影响本发明的效果的范围内适当配入各种成分。作为这样
的成分，可列举例如，能够应用于皮肤营养剂、维生素、医药品、准药品、化妆品等中的水溶性药剂、紫外线吸收剂、抗氧化剂、防腐剂、抗氧化助剂、增粘剂、颜料、染料、色素、香料等。这些任选成分可以单独使用或两种以上组合使用。
74.如上所述，本公开的透明质酸颗粒可通过使透明质酸的负电荷在表观上中和，使透明质酸的分子内或分子间的氢键占优势地发挥作用来制备。因此，例如，阻碍透明质酸的负电荷的表观上中和和/或氢键而使透明质酸颗粒的平均粒径超过200nm的添加剂，或者与透明质酸的负电荷键合和/或与透明质酸形成氢键而使透明质酸粒子的平均粒径超过200nm的添加剂，相对于化妆品的总量，可以分别以15质量％以下、10质量％以下、5质量％以下、1质量％以下、0.5质量％以下或0.1质量％以下的范围含有，但优选不含这些添加剂。
75.作为这样的添加剂，可列举例如，离子性表面活性剂等的离子性化合物、1,3-丁二醇、二丙二醇、异戊二醇等二醇类、乙醇、尿素等。尤其是呈现阳离子性的表面活性剂或化合物可能与具有负电荷的透明质酸静电性地结合而使粒径增大，二醇类、乙醇也可能与透明质酸形成氢键而使粒径增大。另外，尿素呈现出切断对于颗粒化而言重要的氢键的作用，因此有可能使粒径增大。
76.《化妆品的制备方法》
77.本公开的化妆品例如可使用以下方法进行制备。
78.可以在水或缓冲液中配入盐来制备溶液，在该溶液中配入透明质酸，一边搅拌混合一边使透明质酸溶解，形成透明质酸颗粒，从而制成化妆品。
79.或者，可以在水或缓冲液中配入透明质酸，进行搅拌混合使透明质酸溶解，然后再配入盐来形成透明质酸颗粒，从而制成化妆品。
80.另外，在缓冲液本身通过缓冲液中含有的盐的作用而呈现上文所述的特定离子强度的情况下，可省略盐的添加。
81.另外，关于可用于化妆品的制备方法中的透明质酸、水、缓冲液、任意成分等各种材料，可使用上文所述的化妆品的项目中的各种材料。此处，在配入任意成分的情况下，该任意成分可在形成透明质酸颗粒之前配入，但优选以不影响颗粒化的方式，在制备透明质酸颗粒后配入。
82.作为透明质酸的配入量，相对于化妆品的总量，可设定为0.005质量％以上、0.01质量％以上、0.05质量％以上、0.10质量％以上、0.15质量％以上、0.20质量％以上或0.25质量％以上，另外可设定为1.0质量％以下、0.80质量％以下、0.60质量％以下、0.50质量％以下或0.45质量％以下。
83.《化妆品的应用部位》
84.本公开的化妆品可应用于身体所有部分的皮肤表面上的任意部位。例如可适当地应用于脸(嘴唇、眼周、眼睑、脸颊、额头、眉间、鼻子等)、耳、手、手臂、颈、腿、脚、胸、腹、后背等的皮肤表面。此处，皮肤还包括皮肤的表皮的角质发生变化而硬化所形成的指甲等。
85.《透明质酸颗粒的其他用途》
86.除化妆品以外，本公开的透明质酸颗粒也可用于例如皮肤外用剂、医药品、准药品等用途。
87.实施例
88.以下，列举试验例及实施例对本发明进行更详细地说明，但是本发明并不受此限
制。
89.《试验例1～6》
90.〈组合物的评价〉
91.对于通过下述制造方法获得的组合物，实施以下所示的各种评价，并将其结果汇总于表1～6及附图1～6中。另外，表及附图中的“ha”意指透明质酸。
92.(平均粒径的评价)
93.关于组合物中的透明质酸颗粒的平均粒径，使用激光粒度仪(zeta sizer，
マルバーン
·
パナリティカル
公司制)或动态光散射光度计dls-8000(大塚电子公司制)，基于通过动态光散射法获得的z平均粒径进行评价。
94.(含水量比的评价)
95.用肥皂清洗受试者的上臂内侧部后，使受试者在温度21
±
1℃，相对湿度45
±
5％的恒温恒湿室中度过20分钟，进行受试者的环境调整。接着，使用皮肤水分测定仪
コルネオメーター
(商标)cm825(courage and khazaka公司制)测定经清洗过的上臂内侧部的皮肤表面在组合物应用前的含水量，以及对皮肤表面涂抹1滴(2
×
2cm2)组合物后经过了20分钟时、30分钟时、60分钟时及120分钟时的含水量。由所获得的各含水量通过以下的式1算出含水量比：
96.含水量比＝应用组合物后的含水量/应用组合物前的含水量
…
式1
97.〈试验例1：离子强度的影响〉
98.在试验例1中，关于离子强度对透明质酸颗粒的粒径所产生的影响进行了研究。其结果示于表1及附图1中。
99.(组合物的制备方法)
100.将透明质酸(株式会社资生堂制，
バイ
才
ヒア
口12：重均分子量120万)以形成0.1质量％的含量的方式添加到离子交换水中，利用旋涡混合器进行搅拌混合来制备组合物a。使透明质酸溶解后，以使盐的离子强度达到0.001、0.003、0.01、0.02、0.03及0.10的方式，向分别取用的各组合物a中，以0.01m(mol/l)、0.003m、0.01m、0.02m、0.03m及0.10m的浓度添加氯化钠，利用旋涡混合器进行搅拌混合来分别制备各含有透明质酸颗粒的组合物。这里，在由一价阳离子和一价阴离子构成的氯化钠的情况下，氯化钠的浓度与离子强度的值一致。
101.表1
[0102][0103]
(结果)
[0104]
如表1及附图1的结果所表明那样，可确认通过添加盐可以得到纳米级的透明质酸颗粒。另外，可以确认随着盐的添加量的增加，即随着离子强度的增加，透明质酸颗粒的粒径表现出减小的趋势，尤其是当离子强度为0.03以上时，可获得100nm以下的透明质酸颗粒。
[0105]
《试验例2：透明质酸的浓度及离子强度的影响》
[0106]
在试验例2中，关于制备组合物时透明质酸的浓度及离子强度对透明质酸颗粒的
粒径所产生的影响进行了研究。其结果示于表2及附图2中。
[0107]
(组合物的制备方法)
[0108]
将制备组合物时的透明质酸的浓度设定为0.01质量％、0.1质量％、0.2质量％、0.3质量％、0.4质量％、0.5质量％，以使离子强度达到表2中所记载的比率的方式配入氯化钠，除此以外，通过与试验例1相同的方式分别制备各含有透明质酸颗粒的组合物。
[0109]
表2
[0110][0111]
(结果)
[0112]
如表2及附图2的结果所表明的那样，可以确认即使透明质酸的浓度变高，也可通过添加盐来获得纳米级的透明质酸颗粒。
[0113]
《试验例3：透明质酸的浓度为0.4～0.5质量％时离子强度的影响》
[0114]
在试验例3中，关于制备组合物时的透明质酸的浓度为0.4～0.5质量％时离子强度对透明质酸颗粒所产生的影响进行了研究。其结果示于表3及附图3中。
[0115]
(组合物的制备方法)
[0116]
将透明质酸的浓度设定为0.4质量％、0.5质量％，以离子强度成为表3中所记载的比率的方式配入氯化钠，除此以外，用与试验例1相同的方式而分别制备了含有透明质酸颗粒的组合物。
[0117]
表3
[0118][0119]
(结果)
[0120]
如表3及附图3的结果所表明的那样，可以确认在透明质酸的浓度为0.4质量％及0.5质量％的任一种情况下，只要离子强度为0.05以上，就可以获得200nm以下的透明质酸颗粒。可以确认尤其在透明质酸的浓度为0.4质量％的情况下，在离子强度为0.20～1.0的范围内，可以获得100nm以下的透明质酸颗粒。
[0121]
《试验例4：透明质酸颗粒的粒径对保湿性所产生的影响》
[0122]
在试验例4中，关于透明质酸颗粒的粒径对保湿性所产生的影响进行了研究。其结果示于表4及附图4中。这里，可以说含水量比越是大于1，相较于应用组合物前的状态保湿性能越能得到提高。含水量比优选为1.25以上，更优选为1.30以上，特别优选为1.35以上。
[0123]
(组合物的制备方法)
[0124]
将透明质酸的浓度设定为0.4质量％，以使离子强度达到表4中所记载的比例的方式配入氯化钠，除此以外，按照与试验例1相同的方式分别制备各含有透明质酸颗粒的组合物。这里，可以认为未添加氯化钠的离子强度为0的组合物中的透明质酸分子呈丝状扩散，未形成颗粒的形态，因此在表及附图中标记为“非颗粒”。
[0125]
表4
[0126][0127]
(结果)
[0128]
如表4及附图4的结果所表明的那样，在含有未颗粒化的透明质酸的组合物及含有平均粒径为294nm以上的透明质酸颗粒的组合物的情况下，在刚将组合物应用于皮肤时，虽然保湿性能暂时上升了，但该保湿性能仅持续了30分钟左右便降低了，只表现出与未应用组合物的状态大致相同程度的保湿性能。可以认为其原因在于这些组合物中的透明质酸未侵入到皮肤内部。
[0129]
另一方面，可以确认在含有平均粒径为84nm的透明质酸颗粒的组合物的情况下，如果将组合物应用于皮肤，便立即发挥出优异的保湿性能，且可长期维持该保湿性能。可以认为与该保湿性能的速效性及持久性相关的作用效果的原因在于，透明质酸颗粒是容易侵入到皮肤内部的200nm以下的超微细颗粒形态，以及颗粒中的透明质酸的含有比例较高。
[0130]
《试验例5：柠檬酸钠对透明质酸颗粒的粒径的影响》
[0131]
在试验例5中，关于柠檬酸钠对透明质酸颗粒的粒径的影响进行了研究。其结果示于表5及附图5中。
[0132]
(组合物的制备方法)
[0133]
将透明质酸(株式会社资生堂制，
バイ
才
ヒァ
口12：重均分子量120万)以形成0.1质量％的含量的方式添加到柠檬酸缓冲液(富士
フイル
厶和光纯药株式会社制：ph值6.5，离子强度0.006)中，利用旋涡混合器进行搅拌混合来制备组合物b。使透明质酸溶解后，以使盐的离子强度达到0.03、0.06及0.30的方式，向分别取用的各组合物b中添加柠檬酸钠，利用旋涡混合器进行搅拌混合来分别制备各含有透明质酸颗粒的组合物。此处，离子强度为0.03时柠檬酸钠的浓度为0.005m，离子强度为0.06时柠檬酸钠的浓度为0.010m，离子强度为0.30时柠檬酸钠的浓度为0.050m。
[0134]
表5
[0135][0136]
(结果)
[0137]
如表5及附图5的结果所表明的那样，可以确认即使是氯化钠以外的盐，也可获得200nm以下的透明质酸颗粒。
[0138]
《试验例6：使用阻碍氢键的添加剂所带来的对透明质酸颗粒的粒径的影响》
[0139]
在试验例6中，关于使用抑制氢键的添加剂尿素所带来的对透明质酸颗粒的粒径的影响进行了研究。其结果示于表6及附图6中。
[0140]
(实施例1)
[0141]
将透明质酸(资生堂株式会社制，
バイ
才
ヒア
口12：重均分子量120万)以成为0.1质量％的含量的方式添加到离子交换水中，利用旋涡混合器进行搅拌混合来制备组合物c。使透明质酸溶解后，以使盐的离子强度达到0.10的方式，将氯化钠以0.10m的浓度添加至组合物c中，利用旋涡混合器进行搅拌混合来制备含有透明质酸颗粒的组合物。
[0142]
(实施例2)
[0143]
将透明质酸(资生堂株式会社制，
バイ
才
ヒア
口12：重均分子量120万)以成为0.1质量％的含量的方式添加到等渗的磷酸缓冲液(
タ
力
ラバイ
才株式会社制：ph值7.4，离子强度0.154)中，利用旋涡混合器进行搅拌混合来制备含有透明质酸颗粒的组合物。
[0144]
(比较例1)
[0145]
相对于实施例1的含有透明质酸颗粒的组合物的总量，配入10质量％的尿素来制备比较例1的组合物。
[0146]
(比较例2)
[0147]
相对于实施例2的含有透明质酸颗粒的组合物的总量，配入10质量％的尿素来制备比较例2的组合物。
[0148]
表6
[0149] 实施例1实施例2比较例1比较例2平均粒径(nm)8380320314
[0150]
(结果)
[0151]
从表6及附图6的结果可以确认，当将发挥使氢键断裂作用的尿素添加到组合物中时，透明质酸颗粒的粒径大幅度上升。如该结果所表明的那样，可以确认，通过本公开的方法制备的透明质酸颗粒，由于其粒径会因配入使氢键断裂的尿素而改变，因此可以认为其并非是通过不受尿素的影响的交联键所获得的颗粒，而是通过氢键而进行颗粒化的颗粒。
[0152]
《化妆品的配方例》
[0153]
以下，列举使用通过本公开的方法制备的透明质酸颗粒作为化妆品时的配方例，但并不受该示例的限制。另外，如将以下配方例中所记载的化妆品应用于皮肤，可长期呈现优异的保湿性能。
[0154]
〈配方例1化妆品〉
[0155][0156]
(化妆品的制造方法)
[0157]
在离子交换水中加入透明质酸，利用旋涡混合器进行搅拌混合而使透明质酸溶解。接着，在所制备的透明质酸水溶液中加入氯化钠，利用旋涡混合器进行搅拌混合来制备透明质酸颗粒，然后添加香料制成化妆品。