1.本发明涉及微生物技术领域，具体为一种用于水果保鲜的枯草芽孢杆菌及其应用。
背景技术：
2.目前，常见的水果保鲜剂主要分为化学和生物保鲜两种方式，化学保鲜尽管存在很多优势，但仍面临很多问题，存在环境污染、农药残留等问题。随着经济迅猛发展，人类对安全、环保和健康的要求越来越高，采用生物保鲜的方式越来越受到大众的关注，因此，近年来采用生物保鲜的方式越来越为广泛。目前采用生物技术减少水果腐烂以及延长水果的保藏货期，这将是最有效也是最具潜力的保鲜方式。
3.枯草芽孢杆菌作为水果保鲜中的主要生产菌株，应用比较广泛，具有广谱抗菌活性、极强的拮抗能力、对人体无害、安全环保等优势，能够分泌大量的γ～聚谷氨酸，能够产生耐热，抗逆性强的芽孢，在芽孢形成初期能够分泌各种抗菌物质。对病原真菌具有特异性的防治作用。利用枯草芽孢杆菌发酵液中富含γ～聚谷氨酸的特性对采摘后的果蔬进行涂膜保鲜，有效避免了化学保鲜剂的污染，不可食用等问题，在果蔬保鲜领域备受关注。
4.国家每年会产生大量的甘蔗渣，每年甘蔗类食品制品生产加工量较大，但其生产过程中的甘蔗渣的利用率却极低，大部分被当做废弃物直接处理、扔掉，造成环境污染和资源浪费。目前的报道中甘蔗渣和米粉废水尚未出现将其一起用枯草芽孢杆菌制备水果保鲜菌剂的先例。将其采用喷雾干燥的处理方式，能长期保藏，改善处理效果，降低成本，进一步实现资源化利用的需求，具有广阔的市场前景，为此我们提出了新型的水果保鲜剂生产方法。
技术实现要素：
5.(一)解决的技术问题
6.针对现有技术的不足，本发明提供了一种用于水果保鲜的枯草芽孢杆菌及其应用，解决了每年甘蔗类食品制品生产加工量较大，但其生产过程中的甘蔗渣的利用率却极低，大部分被当做废弃物直接处理、扔掉，造成环境污染和资源浪费的问题。
7.(二)技术方案
8.本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种用于水果保鲜的枯草芽孢杆菌及其应用，所述枯草芽孢杆菌，保藏号cgmcc no.22879，保藏于北京微生物菌种保藏中心。
9.优选的，所述菌株在发酵过程中种子液的接种量1％～10％(v/v)接入发酵培养基中，温度25℃～45℃，发酵10h～60h。
10.优选的，所述液体发酵的菌落数达到4.9*109cfu/ml以上，去除沉淀，将上清制备成喷干粉。
11.优选的，包括如下步骤，
12.(1)菌株平板、液体培养
13.枯草芽孢杆菌lb固体培养基：蛋白胨10g、酵母粉5g、氯化钠10g、琼脂20g，加蒸馏水至1000ml，121℃灭菌20min；
14.枯草芽孢杆菌lb液体培养基：蛋白胨10g、酵母粉5g、氯化钠10g，加蒸馏水至1000ml，121℃灭菌20min；
15.所述枯草芽孢杆菌，首先用固体培养基进行平板培养，接着用液体培养基进行摇瓶培养，接着按照5％(v/v)接种量接入液体培养基作为一级种子液，然后按照5％(v/v)接种量接入液体培养基作为二级种子液。
16.(2)发酵培养基：酵母粉15～30g/l，蛋白胨5～10g/l，甘蔗渣20～40g/l，硫酸镁0.1～1g/l，氯化钙0.1～1g/l，磷酸氢二钠1～5g/l，磷酸二氢钠1～2g/l，氯化钠1～5g/l，尿素5～10g/l，米粉废水替代水作为液体补充，混合搅拌，110℃灭菌20分钟。
17.(3)枯草芽孢杆菌发酵工艺
18.将步骤(1)种子液培养后的枯草芽孢杆菌采用比浊法调整浓度，然后按照接种量1％～10％(v/v)接入步骤(2)中制备的发酵培养基中，温度25℃～45℃，发酵10h～60h，通气比0.5～1.2vvm。
19.(4)对发酵液体进行离心、去除菌体沉淀，在上清中添加20％～30％的麦芽糊精和淀粉作为保护剂，采用喷雾干燥的方式制备水果保鲜剂。
20.优选的，所述步骤(3)中发酵培养基中有甘蔗渣和米粉废水成分，实现废弃资源的再利用，减少废弃材料对环境的污染，大大降低生产成本。
21.本发明提供了一种用于水果保鲜的枯草芽孢杆菌及其应用，具备以下有益效果：
22.1、该用于水果保鲜的枯草芽孢杆菌及其应用，发酵培养基的创新，利用甘蔗渣和米粉废水进行发酵培养，大大降低生产成本，变废为宝，提高生产的综合效益。
23.2、该用于水果保鲜的枯草芽孢杆菌及其应用，枯草芽孢杆菌保鲜效果好、高效节能；无需增加生产成本，克服了化学保鲜剂带来的污染及毒害作用，实现了无公害处理，解决了每年甘蔗类食品制品生产加工量较大，但其生产过程中的甘蔗渣的利用率却极低，大部分被当做废弃物直接处理、扔掉，造成环境污染和资源浪费的问题。
具体实施方式
24.实施例1：
25.本实施例对枯草芽孢杆菌的接种比例、温度进行了考察，分别将枯草芽孢杆菌的种子液不同的接种量比例的接入发酵培养基，进行发酵实验，接种比例分别为1％、3％、5％、7％、9％，测定液体发酵液的菌落数，结果见表1和表2。
26.表1不同菌种比例对发酵液中活菌数的影响
[0027][0028]
表2不同发酵温度对发酵产物各理化指标的影响
[0029][0030][0031]
实施例2：
[0032]
本发明对水果保鲜剂制备过程中的喷干过程中的不同辅料对比进行了考察，考察抗菌肽和聚谷氨酸的含量，结果如下
[0033]
表2不同辅料对比对喷干结果的影响
[0034][0035]
实施例3：
[0036]
本实施例主要考察生物保鲜剂对百香果与火龙果保鲜效果的影响。将喷干后的保鲜剂，按照10g溶于200ml水中，将其装入喷壶，实验组用喷壶喷洒在到百香果及火龙果，对照组正常保藏，定期观察保鲜度，结果见表3和表4。新鲜度分级标准(以个人主观判断为评判标准)：0级:严重腐烂；1级:开始腐熟(果皮病变面积》50％)，，果皮皱缩；2级:局部转黑(果皮黑色面积《50％)，颜色不均匀；3级：局部有黑点(果皮黑色面积《5％)，4级色泽完好，亮丽。
[0037]
表3百香果的保鲜程度对比
[0038][0039]
表4火龙果的保鲜程度对比
[0040][0041][0042]
以上述依据本发明的理想实施例为启示，通过上述的说明内容，相关工作人员完全可以在不偏离本项发明技术思想的范围内，进行多样的变更以及修改。本项发明的技术性范围并不局限于说明书上的内容，必须要根据权利要求范围来确定其技术性范围。
技术特征：
1.一种用于水果保鲜的枯草芽孢杆菌及其应用，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌，保藏号cgmcc no.22879，保藏于北京微生物菌种保藏中心。2.根据权利要求1所述的一种用于水果保鲜的枯草芽孢杆菌及其应用，其特征在于：所述菌株在发酵过程中种子液的接种量1％～10％(v/v)接入发酵培养基中，温度25℃～45℃，发酵10h～60h。3.根据权利要求1所述的一种用于水果保鲜的枯草芽孢杆菌及其应用，其特征在于：所述液体发酵的菌落数达到4.9*109cfu/ml以上，去除沉淀，将上清制备成喷干粉。4.根据权利要求1所述的一种用于水果保鲜的枯草芽孢杆菌及其应用，其特征在于：包括如下步骤，(1)菌株平板、液体培养枯草芽孢杆菌lb固体培养基：蛋白胨10g、酵母粉5g、氯化钠10g、琼脂20g，加蒸馏水至1000ml，121℃灭菌20min；枯草芽孢杆菌lb液体培养基：蛋白胨10g、酵母粉5g、氯化钠10g，加蒸馏水至1000ml，121℃灭菌20min；所述枯草芽孢杆菌，首先用固体培养基进行平板培养，接着用液体培养基进行摇瓶培养，接着按照5％(v/v)接种量接入液体培养基作为一级种子液，然后按照5％(v/v)接种量接入液体培养基作为二级种子液。(2)发酵培养基：酵母粉15～30g/l，蛋白胨5～10g/l，甘蔗渣20～40g/l，硫酸镁0.1～1g/l，氯化钙0.1～1g/l，磷酸氢二钠1～5g/l，磷酸二氢钠1～2g/l，氯化钠1～5g/l，尿素5～10g/l，米粉废水替代水作为液体补充，混合搅拌，110℃灭菌20分钟。(3)枯草芽孢杆菌发酵工艺将步骤(1)种子液培养后的枯草芽孢杆菌采用比浊法调整浓度，然后按照接种量1％～10％(v/v)接入步骤(2)中制备的发酵培养基中，温度25℃～45℃，发酵10h～60h，通气比0.5～1.2vvm。(4)对发酵液体进行离心、去除菌体沉淀，在上清中添加20％～30％的麦芽糊精和淀粉作为保护剂，采用喷雾干燥的方式制备水果保鲜剂。
技术总结
本发明涉及微生物技术领域，且公开了一种用于水果保鲜的枯草芽孢杆菌及其应用，所述枯草芽孢杆菌，保藏号CGMCC No.22879，保藏于北京微生物菌种保藏中心，菌株在发酵过程中种子液的接种量1％～10％(V/V)接入发酵培养基中，温度25℃～45℃。该用于水果保鲜的枯草芽孢杆菌及其应用，发酵培养基的创新，利用甘蔗渣和米粉废水进行发酵培养，大大降低生产成本，变废为宝，提高生产的综合效益，枯草芽孢杆菌保鲜效果好、高效节能；无需增加生产成本，克服了化学保鲜剂带来的污染及毒害作用，实现了无公害处理，解决了每年甘蔗类食品制品生产加工量较大，但其生产过程中的甘蔗渣的利用率却极低，大部分被当做废弃物直接处理、扔掉，造成环境污染和资源浪费的问题。境污染和资源浪费的问题。
技术研发人员：卢运琨 罗石林 李晓明 李从 苏智兴 陆迪 周志强
受保护的技术使用者：南宁市拜欧生物工程有限责任公司
技术研发日：2021.10.13
技术公布日：2022/3/25
再多了解一些
本文用于企业家、创业者技术爱好者查询，结果仅供参考。