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外泌体microRNA和mRNA的应用及其试剂盒的制作方法

2022-03-23 10:06:42 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.外泌体mir-1307-3p和/或kif5c mrna作为分子标志物在制备筛查和/或诊断帕金森氏病的产品中的应用。2.检测外泌体mir-1307-3p和/或kif5c的试剂在制备筛查和/或诊断帕金森氏病的产品中的应用。3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于,所述mir-1307-3p的序列如seq id no.1所示。4.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于,所述kif5c为全长序列。5.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于,所述外泌体为尿液外泌体。6.根据权利要求1或2任一项所述的应用,其特征在于,所述产品为试剂盒。7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述试剂盒为实时荧光定量pcr检测试剂盒。8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述实时荧光定量pcr检测试剂盒包括扩增mir-1307-3p和/或kif5c mrna的引物。9.一种筛查和/或诊断帕金森氏病的实时荧光定量pcr检测试剂盒,其特征在于,包括扩增外泌体mir-1307-3p和/或kif5c的系统及其相对定量内参标准化系统、尿液外泌体提取系统、外泌体rna提取系统和反转录系统。10.根据权利要求9所述的实时荧光定量pcr检测试剂盒,其特征在于,所述mir-1307-3p的序列的相对定量内参标准化系统由u6组成;所述kif5c的相对定量内参标准化系统由gapdh组成;所述尿液外泌体提取系统包括金属有机骨架材料uio-66;所述外泌体总rna提取系统包括rnaiso plus裂解液、三氯甲烷、异丙醇、rnase-free ddh2o;所述反转录扩增系统包括rna模板、random/oligo(dt)引物、mir-1307-3p引物、u6引物、dntpmix、反转录酶、5
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反转录缓冲液、rna酶抑制剂、无rna酶的去离子水;所述荧光定量pcr扩增系统包括反转录扩增得到的cdna模板、sybr green混合液、mir-1307-3p引物、kif5c引物、超纯水。

技术总结
本发明涉及生物技术领域,尤其涉及外泌体microRNA和mRNA的应用及其试剂盒。本发明通过试验证明了尿液外泌体miR-1307-3p和KIF5C在正常人和帕金森氏病患者中表达存在显著差异,说明其可以成为筛查和/或诊断帕金森氏病的分子标志物,两种分子标志物组合可以准确地区分帕金森氏病患者和健康人,实现帕金森氏病的早期筛查和诊断。期筛查和诊断。


技术研发人员:汪维鹏 邱天 熊康平 杨曼 王猛猛
受保护的技术使用者:苏州大学
技术研发日:2022.01.14
技术公布日:2022/3/22
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