一种鉴别长吻鮠遗传性别的分子标记及应用的制作方法

技术特征：
1.一种鉴别长吻鮠遗传性别的分子标记，其特征在于：所述分子标记为长吻鮠第7号染色体第1130404位碱基处一段长32bp的插入/缺失的核苷酸序列，为seq id no.1所示，雌性个体具有seq id no.1序列，雄性个体缺失seq id no.1序列。2.用于检测权利要求1所述分子标记的特异性引物，其特征在于：前引物f1，核苷酸序列为seq id no.2所示，后引物r1，核苷酸序列为seq id no.3所示。3.采用如权利要求1所述分子标记鉴别长吻鮠遗传性别的检测方法，其特征在于：（1）提取待测基因组dna；（2）以待测基因组dna为模板，采用权利要求2所述特异性引物进行pcr扩增，pcr反应体系为：10 x buffer (mg
free) 1 μl，25 mm mgcl
2 1μl，dntp mix (10 mm each) 1.6μl，正向、反向引物 (10 mm) 各1μl，模板 dna 1μl, taqdna聚合酶 (5u/μl) 0.2 μl，ddh2o 13.2μl；pcr反应程序为：94℃预变性5 min；94℃变性30 s, 50 ℃退火30 s, 72 ℃ 延伸45 s左右，循环30次; 72 ℃延伸10 min；（3）根据电泳图对长吻鮠的遗传性别进行判断，仅存在410bp特异性片段的个体为雌性长吻鮠，有410 bp 和378 bp两条片段的个体为雄性长吻鮠。4.一种用于鉴别长吻鮠遗传性别的试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括如下引物，前引物为f1，核苷酸序列为seq id no.2所示，后引物为r1，核苷酸序列为seq id no.3所示。

技术总结
本发明公开了一种鉴别长吻鮠遗传性别的Indel分子标记，为第7号染色体第1130404位碱基处上一段长32bp的插入/缺失序列，利用特异性引物PCR扩增后获得长吻鮠在雌雄间的差异性产物，从而达到准确鉴定长吻鮠性别目的。本发明可以在长吻鮠胚胎、仔稚鱼、幼鱼及成鱼时期简便、快速、稳定地鉴别遗传性别，有助于长吻鮠单性育种技术的开发，实现长吻鮠的全雄养殖，能在不增加养殖量的前提下大幅度提高产量，从而增加长吻鮠养殖的经济收益。而增加长吻鮠养殖的经济收益。而增加长吻鮠养殖的经济收益。


技术研发人员：罗辉 叶华 周剑 李雨
受保护的技术使用者：四川省农业科学院水产研究所
技术研发日：2022.01.12
技术公布日：2022/3/22