一种培养肺肿瘤类器官的方法与流程

技术特征：
1.一种肺肿瘤类器官培养容器，其特征在于：它是内部底表面带有肺细胞外基质印迹块阵列的细胞培养容器；所述底表面未覆盖肺细胞外基质的区域被封闭剂封闭；所述肺细胞外基质印迹块阵列由直径为50～200μm的圆形阵点组成，每个圆形阵点间的间距为25～300μm。2.根据权利要求1所述的肺肿瘤类器官培养容器，其特征在于：所述肺脏细胞外基质印迹块阵列由直径为100μm的圆形阵点组成，每个圆形阵点间的间距为50μm。3.根据权利要求1或2所述的肺肿瘤类器官培养容器，其特征在于：所述肺细胞外基质印迹块阵列的面积为1～10cm2；优选地，所述肺脏细胞外基质印迹块阵列的面积为4cm2。4.根据权利要求1或2所述的肺肿瘤类器官培养容器，其特征在于：所述容器为培养皿、培养盒、培养板或培养瓶；和/或，所述封闭剂为pluronic f-127；优选地，所述pluronic f-127质量分数为1～5％。5.根据权利要求1或2所述的肺肿瘤类器官培养容器，其特征在于：所述肺细胞外基质是猪的肺细胞外基质；优选地，所述猪的肺细胞外基质的制备方法包括如下步骤：(1)采用triton-sles-triton灌注法制备猪全肺脱细胞化支架；(2)得到的脱细胞化肺支架冻干、粉碎后，采用胃蛋白酶酶解而得。6.根据权利要求1或2所述的肺肿瘤类器官培养容器，其特征在于：所述肺细胞外基质的浓度为0.05～0.5mg/ml；优选地，所述肺细胞外基质的浓度为0.1～0.5mg/ml。7.一种肺肿瘤类器官培养方法，其特征在于：包括如下步骤：将肺癌细胞接种于权利要求1～6任一项所述的培养容器中，培养4～6h后洗去未贴附细胞，再培养3～5天即得肺肿瘤类器官。8.根据权利要求7所述的培养方法，其特征在于：所述肺癌细胞的接种密度为10
4～
106个/培养容器；和/或，所述肺癌细胞来源于人；优选地，所述肺癌细胞的接种密度为105个/培养容器。9.一种肺肿瘤类器官，其特征在于：它是权利要求7或8所述方法制备得到的肺肿瘤类器官。10.权利要求9所述的肺肿瘤类器官在构建肺癌模型或药物筛选中的应用。

技术总结
本发明提供了一种培养肺肿瘤类器官的方法，属于类器官培养领域。本发明首先提供了一种肺肿瘤类器官培养容器，它是内部底表面带有肺细胞外基质印迹块阵列的细胞培养容器；所述底表面未覆盖肺细胞外基质的区域被封闭剂封闭；所述肺细胞外基质印迹块阵列由直径为50～200μm的圆形阵点组成，每个圆形阵点间的间距为25～300μm。本发明还提供了一种肺肿瘤类器官的培养方法，该培养方法缩短了培养时间，简化了培养方式，有效控制了肺肿瘤类器官的粒径大小与排列，提高了药物筛选的重复性与稳定性。使用培养的肺肿瘤类器官进行药物筛选，具有更高效与安全性，同时可进行个性化治疗，指导临床用药。导临床用药。导临床用药。


技术研发人员：包骥 步宏 朱星龙 李奕
受保护的技术使用者：成都华西精准医学产业技术研究院有限公司
技术研发日：2021.12.31
技术公布日：2022/3/22