一种抑制畜禽球虫的绿色添加剂、制备方法及应用与流程

1.本技术属于球虫防治技术领域，具体涉及一种抑制畜禽球虫的绿色添加剂。


背景技术：

2.球虫病是一种寄生虫病，会损害畜禽肠道，是由一种或多种球虫寄生于畜禽的肠粘膜上皮细胞引起的急性流行性寄生虫病。目前在家禽饲养中用于抑制球虫的药物主要包括聚醚类离子载体抗生素和化学合成类药物。由于球虫非常容易产生耐药性，因此需持续进行轮换用药、穿梭用药，目前养殖过程中普遍存在超量用药、过度用药、治重于防等问题。在家畜饲养中主要是通过在哺乳期灌服百球清等化学合成药物进行球虫抑制。这些药物都存在毒性残留等问题，严重威胁食品安全。
3.环境中球虫卵囊不易完全清除，导致球虫病反复发作，尤其是对于地面平养的肉鸡，球虫病尤其严重。中药可以用来抗球虫，但中药散剂添加量大，可能影响适口性。中药散剂和提取物抗球虫效果都不够理想，很难完全替代抗球虫药。在猪上哺乳期等孢球虫威胁严重，其他阶段球虫感染率也非常高，降低猪的生产性能。目前法规对抗球虫药的应用要求越来越严格，迫切需要开发绿色安全、抗球虫效果显著的替代品，通过在饲料和饮水中长期添加起到有效抑制的作用，从而减少抗球虫药的使用，保障畜禽产品的安全。
4.中国专利文献cn 106578375 a公开了一种能预防鹅球虫病的饲料添加剂，该添加剂的原料组成为：雷丸、苦楝皮、侧柏叶、蛇床子、臭椿树皮、万寿菊、孔雀草、鱼藤、砂仁、白术、陈皮、炙甘草、柚子皮、大蒜、南瓜、黄豆，该添加剂的制备方法需要先将原料进行蒸汽处理，紫外线杀菌，然后进行熬煮；熬煮获得的液体先浓缩，再加入乙醇回流，减压回收乙醇后再加入丙酮浸提25-28h，再减压回收丙酮，得到残余液；熬煮获得的固体烘干后粉碎得到原料微粉；最后将残余液在3-5℃下静置10-13h，再与原料微粉混合搅拌，得到饲料添加剂。所获得的添加剂具有抗菌、杀虫、提高机体免疫力和保护粘膜的作用，减少了抗生素的使用，但该添加剂是直接采用天然原料制备，不仅工艺复杂，而且原料的差异性很容易造成添加剂效果的不可控性，而且由于是采用天然原料直接制备，添加量非常大，需要与饲料按照0.2-0.3:1的比例添加，可能会影响饲料的适口性。
5.鉴于此，有必要开发一种绿色安全、可长期使用、不影响饲料或饮水适口性且制备方法简单的抗球虫添加剂。


技术实现要素：

6.为了解决上述问题，本技术公开了一种抑制畜禽球虫的绿色添加剂，该绿色添加剂中采用的植物精油复合物、鞣质类、皂苷、印楝提取物、类黄酮、山楂酸能够直接杀灭球虫，降低球虫数量；鞣质类、皂苷、止泻木提取物可以起到良好的保护肠道粘膜的作用，减少血便；植物精油复合物、紫锥菊提取物有助于提高机体免疫水平，激活对球虫的体液免疫和细胞免疫；而且植物精油复合物、鞣质类、类黄酮、山楂酸还能够降低球虫病带来的氧化应激；有效成分均为天然物质，绿色安全，可长期使用，而且添加剂中采用的均为有效成分，用
量少，不会影响饲料或饮水的适口性。
7.一方面，本技术提供一种抑制畜禽球虫的绿色添加剂，采用如下的技术方案：
8.一种抑制畜禽球虫的绿色添加剂，包括如下重量份的各组分：植物精油复合物3-10份、鞣质类10-30份、皂苷7-20份、类黄酮5-15份、印楝提取物5-15份、紫锥菊提取物5-15份、山楂酸5-15份、止泻木提取物5-15份、载体20-50份、吐温-20 0.5-2份。
9.作为优选，上述精油复合物包括如下重量份的各组分：茴香油0.5-2份、柑橘精油0.5-2份、姜黄油树脂0.2-1份、辣椒油树脂0.2-1份、鼠尾草油0.2-1份、香兰素0.2-1份。
10.作为优选，上述鞣质类为五倍子提取物、诃子提取物、余甘子提取物、塔拉粉提取物、栗木提取物、橡木提取物、白坚木提取物、松树皮提取物中的一种或几种。
11.作为优选，上述皂苷为丝兰皂苷、葫芦巴皂苷、皂树皂苷、薯蓣皂苷、无患子皂苷、绞股蓝皂苷、龙舌兰皂苷中的一种或几种。
12.作为优选，上述类黄酮为芹菜素、黄腐酚、槲皮素、原花青素中的一种或几种。
13.作为优选，上述载体为阳离子型环糊精和三聚磷酸钠，所述阳离子型环糊精和三聚磷酸钠的质量比为0.5-0.8:1。
14.第二方面，本技术提供一种抑制畜禽球虫的绿色添加剂的制备方法，采用如下的技术方案：
15.一种抑制畜禽球虫的绿色添加剂的制备方法，包括如下步骤：
16.(1)将阳离子型环糊精溶于一定量的水中，滤除不溶物，得到阳离子型环糊精水溶液，将植物精油复合物、皂苷、类黄酮、印楝提取物和吐温-20加入一定量的水中，搅拌10-20min形成乳化液，将乳化液滴入阳离子型环糊精水溶液中，滴加完毕后继续搅拌3-4h，得到初级溶液；
17.(2)将鞣质类、紫锥菊提取物、山楂酸和止泻木提取物加入初级溶液中，搅拌30-40min得到二级溶液，将二级溶液进行喷雾干燥得到混合物粉末；
18.(3)将三聚磷酸钠溶于水中，滤除不溶物，得到三聚磷酸钠水溶液，将混合物粉末加入三聚磷酸钠水溶液中，搅拌2-3h，喷雾干燥得到绿色添加剂。
19.第三方面，本技术提供一种抑制畜禽球虫的绿色添加剂的应用，采用如下的技术方案：
20.一种抑制畜禽球虫的绿色添加剂的应用，应用方法为：将所述绿色添加剂添加于饲料中或饮水中。
21.作为优选，上述添加于饲料中的添加比例为100-2000g/t；所述添加于饮水中的稀释比例为1:500-1:8000。
22.作为优选，上述的抑制畜禽球虫的绿色添加剂的应用对象包括家禽、猪、兔、牛、羊、犬、水貂。
23.本技术具有如下的有益效果：
24.(1)本技术的绿色添加剂中采用的植物精油复合物、鞣质类、皂苷、印楝提取物、类黄酮、山楂酸能够直接杀灭球虫，降低球虫数量；鞣质类、皂苷、止泻木提取物可以起到良好的保护肠道粘膜的作用，减少血便；植物精油复合物、紫锥菊提取物有助于提高机体免疫水平，激活对球虫的体液免疫和细胞免疫；而且植物精油复合物、鞣质类、类黄酮、山楂酸还能够降低球虫病带来的氧化应激；有效成分均为天然物质，绿色安全，可长期使用，而且添加
剂中采用的均为有效成分，用量少，不会影响饲料或饮水的适口性。
25.(2)本技术将植物精油复合物与多种天然成分结合使用，发挥它们的协同作用，抗球虫效果显著增强，该绿色添加剂对各种艾美尔球虫和等孢球虫的孢子、裂殖体(子孢子、第一代和第二代裂殖体)产生抑制作用，通过阻碍卵囊孢子形成、子孢子入侵和裂殖体成熟来干扰球虫的生命周期，降低病发率；保护和修复胃肠道黏膜，改善肠绒毛，促进营养物质的消化吸收；减少坏死性肠炎和球虫性下痢、血便；有效控制大肠杆菌、沙门氏菌和梭菌等细菌性疾病，调节肠道菌群；提高机体免疫功能，改善家禽健康水平，促进动物生长；改善肠道健康，减少氨气等有害臭气排放，提升养殖成绩；
26.(4)本技术的绿色添加剂对于家禽、母猪、仔猪、反刍动物等各种畜禽安全性高，添加量少，抗球虫效果显著，可长期使用，可以部分或全部替代抗球虫药。该绿色添加剂既能直接添加到水线中又能加到饲料中，使用非常方便，饲料厂和养殖户都可以拌料使用。在目前饲喂自动化程度越来越高的情况下，有些养殖户使用料线进行拌料不方便，本添加剂可以直接用于饮水，解决了现场使用困难的问题，无耐药性，能够减少抗球虫药的使用，为生产绿色安全的畜禽产品提供保障。
27.(5)本技术的制备方法先采用环糊精对油溶性物进行包覆，提高其水溶性的同时起到缓释作用，另外，水溶性物质可聚集于环糊精表面，并通过三聚磷酸钠的层层自组装进行包覆，起到良好缓释作用，最终使所获得的添加剂整体上具有良好的水溶性，可通过饮水添加，并具有良好的缓释效果。
具体实施方式
28.现在结合实施例对本技术作进一步详细的说明。
29.实施例1
30.原料准备：6份植物精油复合物、10份五倍子提取物、10份栗木提取物、7份丝兰皂苷、7份皂树皂苷、5份芹菜素、5份黄腐酚、10份印楝提取物、10份紫锥菊提取物、10份山楂酸、10份止泻木提取物、35份阳离子型环糊精、1份吐温-20。
31.其中，植物精油复合物为以下各组分的混合物：1.2份茴香油、1.2份柑橘精油、0.6份姜黄油树脂、0.6份辣椒油树脂、0.6份鼠尾草油和0.6份香兰素(在实际情况中，可根据需求对植物精油复合物进行放大倍数的配制，以满足“原料准备”中植物精油复合物的需求量，以下各实施例和对比例也是如此)。
32.制备绿色添加剂：
33.(1)将载体阳离子型环糊精溶于水中，滤除不溶物，得到阳离子型环糊精水溶液，将植物精油复合物、丝兰皂苷、皂树皂苷、芹菜素、黄腐酚、印楝提取物和吐温-20加入水中，搅拌15min形成乳化液，将乳化液滴入阳离子型环糊精水溶液中，滴加完毕后继续搅拌3.5h，得到初级溶液；
34.(2)将五倍子提取物、栗木提取物、紫锥菊提取物、山楂酸和止泻木提取物加入初级溶液中，搅拌35min得到二级溶液，将二级溶液进行喷雾干燥得到混合物粉末即为绿色添加剂。
35.实施例2
36.原料准备：6份植物精油复合物、10份五倍子提取物、10份栗木提取物、7份丝兰皂
苷、7份皂树皂苷、5份芹菜素、5份黄腐酚、10份印楝提取物、10份紫锥菊提取物、10份山楂酸、10份止泻木提取物、14份阳离子型环糊精、21份三聚磷酸钠、1份吐温-20。
37.其中，植物精油复合物为以下各组分的混合物：1.2份茴香油、1.2份柑橘精油、0.6份姜黄油树脂、0.6份辣椒油树脂、0.6份鼠尾草油和0.6份香兰素。
38.制备绿色添加剂：
39.(1)将阳离子型环糊精溶于水中，滤除不溶物，得到阳离子型环糊精水溶液，将植物精油复合物、丝兰皂苷、皂树皂苷、芹菜素、黄腐酚、印楝提取物和吐温-20加入水中，搅拌15min形成乳化液，将乳化液滴入阳离子型环糊精水溶液中，滴加完毕后继续搅拌3.5h，得到初级溶液；
40.(2)将五倍子提取物、栗木提取物、紫锥菊提取物、山楂酸和止泻木提取物加入初级溶液中，搅拌35min得到二级溶液，将二级溶液进行喷雾干燥得到混合物粉末；
41.(3)将三聚磷酸钠溶于水中，滤除不溶物，得到三聚磷酸钠水溶液，将混合物粉末加入三聚磷酸钠水溶液中，搅拌2.5h，喷雾干燥得到绿色添加剂。
42.实施例3
43.原料准备：3份植物精油复合物、5份诃子提取物、2份橡木提取物、3份白坚木提取物、2份葫芦巴皂苷、2份薯蓣皂苷、3份无患子皂苷、2份槲皮素、3份原花青素、5份印楝提取物、5份紫锥菊提取物、5份山楂酸、5份止泻木提取物、7份阳离子型环糊精、13份三聚磷酸钠、0.5份吐温-20。
44.其中，植物精油复合物为以下各组分的混合物：0.5份茴香油、0.5份柑橘精油、0.2份姜黄油树脂、0.2份辣椒油树脂、0.2份鼠尾草油和0.2份香兰素。
45.制备绿色添加剂：
46.(1)将阳离子型环糊精溶于水中，滤除不溶物，得到阳离子型环糊精水溶液，将植物精油复合物、葫芦巴皂苷、薯蓣皂苷、无患子皂苷、槲皮素、原花青素、印楝提取物和吐温-20加入水中，搅拌10min形成乳化液，将乳化液滴入阳离子型环糊精水溶液中，滴加完毕后继续搅拌3h，得到初级溶液；
47.(2)将诃子提取物、橡木提取物、白坚木提取物、紫锥菊提取物、山楂酸和止泻木提取物加入初级溶液中，搅拌30min得到二级溶液，将二级溶液进行喷雾干燥得到混合物粉末；
48.(3)将三聚磷酸钠溶于水中，滤除不溶物，得到三聚磷酸钠水溶液，将混合物粉末加入三聚磷酸钠水溶液中，搅拌2h，喷雾干燥得到绿色添加剂。
49.实施例4
50.原料准备：10份植物精油复合物、10份余甘子提取物、10份塔拉粉提取物、10份松树皮提取物、10份绞股蓝皂苷、10份龙舌兰皂苷、7份黄腐酚、8份槲皮素、15份印楝提取物、15份紫锥菊提取物、15份山楂酸、15份止泻木提取物、22份阳离子型环糊精、28份三聚磷酸钠、2份吐温-20。
51.其中，植物精油复合物为以下各组分的混合物：2份茴香油、2份柑橘精油、1份姜黄油树脂、1份辣椒油树脂、1份鼠尾草油和1份香兰素。
52.制备绿色添加剂：
53.(1)将阳离子型环糊精溶于水中，滤除不溶物，得到阳离子型环糊精水溶液，将植
物精油复合物、绞股蓝皂苷、龙舌兰皂苷、黄腐酚、槲皮素、印楝提取物和吐温-20加入水中，搅拌20min形成乳化液，将乳化液滴入阳离子型环糊精水溶液中，滴加完毕后继续搅拌4h，得到初级溶液；
54.(2)将余甘子提取物、塔拉粉提取物、松树皮提取物、紫锥菊提取物、山楂酸和止泻木提取物加入初级溶液中，搅拌40min得到二级溶液，将二级溶液进行喷雾干燥得到混合物粉末；
55.(3)将三聚磷酸钠溶于水中，滤除不溶物，得到三聚磷酸钠水溶液，将混合物粉末加入三聚磷酸钠水溶液中，搅拌3h，喷雾干燥得到绿色添加剂。
56.实施例5
57.原料准备：6份植物精油复合物、10份五倍子提取物、10份栗木提取物、7份丝兰皂苷、7份皂树皂苷、5份芹菜素、5份黄腐酚、10份印楝提取物、10份紫锥菊提取物、10份山楂酸、10份止泻木提取物、14份阳离子型环糊精、21份三聚磷酸钠、1份吐温-20。
58.其中，植物精油复合物为以下各组分的混合物：1.2份茴香油、1.2份柑橘精油、0.6份姜黄油树脂、0.6份辣椒油树脂、0.6份鼠尾草油和0.6份香兰素。
59.制备绿色添加剂：
60.(1)将阳离子型环糊精溶于水中，滤除不溶物，得到阳离子型环糊精水溶液，将植物精油复合物、丝兰皂苷、皂树皂苷、芹菜素、黄腐酚、印楝提取物和吐温-20加入水中，搅拌15min形成乳化液，将乳化液滴入阳离子型环糊精水溶液中，滴加完毕后继续搅拌3.5h，得到初级溶液；
61.(2)将三聚磷酸钠溶于水中，滤除不溶物，得到三聚磷酸钠水溶液，将五倍子提取物、栗木提取物、紫锥菊提取物、山楂酸和止泻木提取物加入三聚磷酸钠水溶液中，搅拌35min得到二级溶液；
62.(3)将二级溶液加入初级溶液中，搅拌2.5h，喷雾干燥得到绿色添加剂。
63.对比例1与实施例2基本相同，区别在于：对比例1所用的植物精油复合物中不含有茴香油。
64.对比例2与实施例2基本相同，区别在于：对比例2所用的植物精油复合物中不含有柑橘精油。
65.对比例3与实施例2基本相同，区别在于：对比例3所用的植物精油复合物中不含有姜黄油树脂。
66.对比例4与实施例2基本相同，区别在于：对比例4所用的植物精油复合物中不含有辣椒油树脂。
67.对比例5与实施例2基本相同，区别在于：对比例5所用的植物精油复合物中不含有鼠尾草油。
68.对比例6与实施例2基本相同，区别在于：对比例6所用的植物精油复合物中不含有香兰素。
69.对比例7
70.原料准备：8份植物精油复合物、12份五倍子提取物、10份栗木提取物、7份丝兰皂苷、7份皂树皂苷、7份芹菜素、5份黄腐酚、12份紫锥菊提取物、12份山楂酸、10份止泻木提取物、14份阳离子型环糊精、21份三聚磷酸钠、1份吐温-20。
71.其中，植物精油复合物为以下各组分的混合物：1.2份茴香油、1.2份柑橘精油、0.6份姜黄油树脂、0.6份辣椒油树脂、0.6份鼠尾草油和0.6份香兰素。
72.制备绿色添加剂：
73.(1)将阳离子型环糊精溶于水中，滤除不溶物，得到阳离子型环糊精水溶液，将植物精油复合物、丝兰皂苷、皂树皂苷、芹菜素、黄腐酚和吐温-20加入水中，搅拌15min形成乳化液，将乳化液滴入阳离子型环糊精水溶液中，滴加完毕后继续搅拌3.5h，得到初级溶液；
74.(2)将五倍子提取物、栗木提取物、紫锥菊提取物、山楂酸和止泻木提取物加入初级溶液中，搅拌35min得到二级溶液，将二级溶液进行喷雾干燥得到混合物粉末；
75.(3)将三聚磷酸钠溶于水中，滤除不溶物，得到三聚磷酸钠水溶液，将混合物粉末加入三聚磷酸钠水溶液中，搅拌2.5h，喷雾干燥得到绿色添加剂。
76.对比例8
77.原料准备：16份植物精油复合物、10份五倍子提取物、10份栗木提取物、7份丝兰皂苷、7份皂树皂苷、5份芹菜素、5份黄腐酚、10份印楝提取物、10份山楂酸、10份止泻木提取物、14份阳离子型环糊精、21份三聚磷酸钠、1份吐温-20。
78.其中，植物精油复合物为以下各组分的混合物：1.2份茴香油、1.2份柑橘精油、0.6份姜黄油树脂、0.6份辣椒油树脂、0.6份鼠尾草油和0.6份香兰素。
79.制备绿色添加剂：
80.(1)将阳离子型环糊精溶于水中，滤除不溶物，得到阳离子型环糊精水溶液，将植物精油复合物、丝兰皂苷、皂树皂苷、芹菜素、黄腐酚、印楝提取物和吐温-20加入水中，搅拌15min形成乳化液，将乳化液滴入阳离子型环糊精水溶液中，滴加完毕后继续搅拌3.5h，得到初级溶液；
81.(2)将五倍子提取物、栗木提取物、山楂酸和止泻木提取物加入初级溶液中，搅拌35min得到二级溶液，将二级溶液进行喷雾干燥得到混合物粉末；
82.(3)将三聚磷酸钠溶于水中，滤除不溶物，得到三聚磷酸钠水溶液，将混合物粉末加入三聚磷酸钠水溶液中，搅拌2.5h，喷雾干燥得到绿色添加剂。
83.对比例9
84.原料准备：6份植物精油复合物、12份五倍子提取物、10份栗木提取物、9份丝兰皂苷、7份皂树皂苷、5份芹菜素、7份黄腐酚、12份印楝提取物、12份紫锥菊提取物、10份止泻木提取物、14份阳离子型环糊精、21份三聚磷酸钠、1份吐温-20。
85.其中，植物精油复合物为以下各组分的混合物：1.2份茴香油、1.2份柑橘精油、0.6份姜黄油树脂、0.6份辣椒油树脂、0.6份鼠尾草油和0.6份香兰素。
86.制备绿色添加剂：
87.(1)将阳离子型环糊精溶于水中，滤除不溶物，得到阳离子型环糊精水溶液，将植物精油复合物、丝兰皂苷、皂树皂苷、芹菜素、黄腐酚、印楝提取物和吐温-20加入水中，搅拌15min形成乳化液，将乳化液滴入阳离子型环糊精水溶液中，滴加完毕后继续搅拌3.5h，得到初级溶液；
88.(2)将五倍子提取物、栗木提取物、紫锥菊提取物和止泻木提取物加入初级溶液中，搅拌35min得到二级溶液，将二级溶液进行喷雾干燥得到混合物粉末；
89.(3)将三聚磷酸钠溶于水中，滤除不溶物，得到三聚磷酸钠水溶液，将混合物粉末
加入三聚磷酸钠水溶液中，搅拌2.5h，喷雾干燥得到绿色添加剂。
90.对比例10
91.原料准备：6份植物精油复合物、13份五倍子提取物、12份栗木提取物、9份丝兰皂苷、10份皂树皂苷、5份芹菜素、5份黄腐酚、10份印楝提取物、10份紫锥菊提取物、10份山楂酸、14份阳离子型环糊精、21份三聚磷酸钠、1份吐温-20。
92.其中，植物精油复合物为以下各组分的混合物：1.2份茴香油、1.2份柑橘精油、0.6份姜黄油树脂、0.6份辣椒油树脂、0.6份鼠尾草油和0.6份香兰素。
93.制备绿色添加剂：
94.(1)将阳离子型环糊精溶于水中，滤除不溶物，得到阳离子型环糊精水溶液，将植物精油复合物、丝兰皂苷、皂树皂苷、芹菜素、黄腐酚、印楝提取物和吐温-20加入水中，搅拌15min形成乳化液，将乳化液滴入阳离子型环糊精水溶液中，滴加完毕后继续搅拌3.5h，得到初级溶液；
95.(2)将五倍子提取物、栗木提取物、紫锥菊提取物和山楂酸加入初级溶液中，搅拌35min得到二级溶液，将二级溶液进行喷雾干燥得到混合物粉末；
96.(3)将三聚磷酸钠溶于水中，滤除不溶物，得到三聚磷酸钠水溶液，将混合物粉末加入三聚磷酸钠水溶液中，搅拌2.5h，喷雾干燥得到绿色添加剂。
97.一、体外球虫孢子化试验：
98.柔嫩艾美耳球虫分离自安佑上海试验鸡场，试验开始前，柔嫩艾美耳球虫经鸡体繁殖、复壮，获得新鲜未孢子化球虫卵囊备用。在培养皿中分别加入5ml实施例1-5和对比例1-10制备的抗球虫绿色添加剂的溶液，相关浓度分别为0.125mg/ml、0.25mg/ml、0.5mg/ml。在每个培养皿中均加入5ml含5
×
106个未孢子化的柔嫩艾美尓球虫卵囊悬液，每组设3个重复，在28℃条件下培养2天后，计数卵囊孢子化率。计算公式：卵囊孢子化率＝成熟卵囊数/(未成熟卵囊数 成熟卵囊数)
×
100％。另设2.5％重铬酸钾，0.05％地克珠利溶液为对照。
99.表1绿色添加剂体外对球虫孢子化率的影响％
[0100][0101]
由表1可知，球虫体外试验来看，实施例1-5的添加剂浓度为0.5mg/ml的试验组的效果略优于地克珠利对照组，实施例2的效果最好。对比例1-10的效果要低于实施例，尤其对比例7-10的效果最差。
[0102]
对比例1-6与实施例2相比，所用的植物精油复合物中分别不含有茴香油、柑橘精油、姜黄油树脂、辣椒油树脂、鼠尾草油和香兰素，导致0.5mg/ml添加剂浓度的球虫孢子化率从实施例2的(18.22
±
0.28)％上升到(21.22
±
0.49)％-(23.01
±
0.28)％，说明本技术所用的植物精油复合物中的六种组分同时添加具有较好的协同效果，可以对球虫起到有效的抑制作用。
[0103]
对比例7-10分别将印楝提取物、紫锥菊提取物、山楂酸、止泻木提取物去掉，用其他组分代替，它们的效果低于实施例2。以上表明本技术选择添加的各种组分均在添加剂中起到一定的作用，各组分复配有助于获得效果更好的抗球虫绿色添加剂，任何一种物质的去除都会影响最终的抗球虫效果。
[0104]
二、根据体外球虫孢子化试验的结果，选择实施例2制备的绿色添加剂进行动物试验：
[0105]
(一)将90只15日龄雏鸡按体重随机分成6组，包括实施例2抗球虫绿色添加剂250g/t组、实施例2抗球虫绿色添加剂500g/t组、实施例2抗球虫绿色添加剂饮水1：4000组、地克珠利组、感染对照组和健康对照组。15日龄开始在饲料和饮水中添加一定比例的上述药物和添加剂，地克珠利的添加剂量为300mg/kg。除健康对照组外，其余各组均在15日龄时经口感染柔嫩艾美尓球虫孢子化卵囊4.0
×
104/只。然后饲养至22日龄。
[0106]
根据各组试验鸡的相对增重率、存活率、病变值和卵囊值，按照merck公司的计算公式计算抗球虫指数(aci)：aci＝(相对增重率 存活率)
×
100-(病变值 卵囊值)。
[0107]
表2抗球虫绿色添加剂在肉鸡上的应用效果
[0108][0109]
由表2可知，实施例2所制备的抗球虫添加剂添加250g/t饲料组、1:4000饮水组的效果与地克珠利组相差不大，实施例2所制备的抗球虫添加剂添加500g/t饲料组的效果显著优于地克珠利组。
[0110]
(二)在安佑上海家禽试验基地，选取体重相近的1日龄肉鸡270只，随机分为3组，正对照组、负对照组、试验组，每组6个重复，每个重复15只。试验期42天，分组情况见表3。
[0111]
表3试验日粮与分组
[0112]
分组添加量正对照组含抗球虫药(盐霉素 尼卡巴嗪)负对照组全部去掉抗球虫药试验组全部去掉抗球虫药，加500g/t实施例2制备的添加剂
[0113]
地面平养，根据肉鸡的饲养规程饲喂，自由采食，自由饮水。注意实验过程中不再添加任何抗球虫药物。另外在试验期间记录鸡的采食量，在试验开始和结束时对鸡称重，计算饲料转化率。
[0114]
记录鸡死亡和淘汰的只数，试验结束后计算死淘率。
[0115]
鸡粪便球虫卵检测计数：试验21、42天每栏随机收集粪便50g，按照mc master’s法计算每克粪便球虫卵囊数(opg值)。
[0116]
分别对十二指肠(小肠前段)、小肠中段、盲肠病变记分。评分标准同盲肠病变标准(表4)。
[0117]
表4盲肠病变评分标准
[0118][0119]
表5抗球虫绿色添加剂替代抗球虫药对肉鸡生产性能的影响
[0120][0121][0122]
表6抗球虫绿色添加剂替代抗球虫药对肉鸡粪便球虫数量的影响
[0123]
项目正对照组负对照组试验组21d1235
±
25a8325
±
149b812
±
23a42d1312
±
63a10520
±
345b930
±
49a[0124]
表7抗球虫绿色添加剂替代抗球虫药对肉鸡肠道病变评分的影响
[0125][0126]
由表5-7可知，试验全期来看，日增重、料重比、球虫发病率、21d和42d粪便球虫数量、肠道病变评分试验组优于正对照组差，且显著优于负对照组(p《0.05)。
[0127]
(三)在断奶仔猪上的抗球虫试验。在江苏一发生球虫的猪场进行试验。该猪场经常发生球虫病，仔猪腹泻严重。选取21日龄的杜长大断奶仔猪216头，按体重相近、遗传基础相似、性别各半的原则，随机区组分成3组，对照组、实施例2制备的抗球虫绿色添加剂250g/t组、实施例2制备的抗球虫绿色添加剂500g/t组，每组设6个重复，每个重复12头猪。试验期14天。注意观察仔猪采食、排粪排尿规律及健康状况，每天记录采食量、腹泻头数、腹泻指数、发病情况和死亡情况，发现异常情况及时救治，并做好记录。在正式试验开始和结束时按圈称重，准确记录。试验开始和结束时每头仔猪直肠采集粪便采用饱和糖-盐水漂浮法检测球虫数量，用麦氏计数法定量检查每克粪便卵囊数(opg)。
[0128]
表8抗球虫绿色添加剂对断奶仔猪生产性能的影响
[0129]
组别对照组实施例2添加剂250g/t实施例2添加剂500g/t初重(kg)6.77
±
0.136.78
±
0.116.78
±
0.15末重(kg)10.15
±
0.4210.26
±
0.3210.35
±
0.38日增重adg(g/d)232.84
±
33.69a249.23
±
17.09
ab
262.85
±
20.09b日采食量adfi(g/d)299.90
±
43.37309.20
±
20.06318.20
±
25.06饲料转化率fcr1.28
±
0.061.24
±
0.051.21
±
0.07
[0130]
表9抗球虫绿色添加剂对断奶仔猪腹泻、死淘和粪便球虫的影响
[0131][0132]
由表8和表9可知，与对照组相比，2个试验组日增重提高，腹泻率和粪便球虫数量显著降低(p《0.05)。抗球虫精油产品500g/t组日增重显著高于对照组(p《0.05)。
[0133]
(四)在母猪上的抗球虫试验。选取品种相同、体况良好、分娩日期相近的3-4胎母猪共36头，依据胎次、背膘、分娩日期平均分成3组，对照组、试验1组、试验2组，每组12个重复，每个重复1头母猪。试验共分为两个阶段：第一阶段为预产期前30天至分娩当天；第二阶段为分娩当天至断奶。对照组为安佑926母猪料；试验1组额外添加250g/t实施例2制备的抗球虫绿色添加剂，试验2组额外添加500g/t实施例2制备的抗球虫绿色添加剂。饱和糖-盐水漂浮法检测母猪和仔猪粪便中的球虫。评估抗球虫植物组合物在改善母猪和仔猪的球虫情况，提高繁殖性能方面的作用效果。
[0134]
表10抗球虫绿色添加剂对母猪产仔情况的影响
[0135]
项目对照组试验1组试验2组窝产仔数(头)13.27
±
1.8512.80
±
1.3213.00
±
2.04窝产活仔数(头)12.27
±
1.8513.30
±
1.4212.83
±
2.29初生窝重(kg)15.88
±
3.0716.91
±
2.4017.40
±
3.10初生个体重(kg)1.22
±
0.181.34
±
0.261.38
±
0.23弱仔率(％)13.90
±
2.544.07
±
0.113.37
±
1.46死胎率(％)3.50
±
0.591.68
±
0.160.00
±
0.00
[0136]
表11抗球虫绿色添加剂对仔猪生长性能和球虫状况的影响
[0137][0138][0139]
由表10和表11可知，与对照组相比，2个试验组断奶仔猪窝增重显著提高(p《0.05)，仔猪腹泻率、母猪和仔猪粪便球虫数量降低。
[0140]
综上所述，本发明抗球虫添加剂在促生长、降低腹泻率和球虫数量方面效果明显，作为一种新型绿色饲料添加剂在实际生产中有较好的应用前景。
[0141]
本具体实施例仅仅是对本技术的解释，其并不是对本技术的限制，通过上述的说明内容，相关工作人员完全可以在不偏离本项申请技术思想的范围内，进行多样的变更以及修改。本项申请的技术性范围并不局限于说明书上的内容，必须要根据权利要求范围来确定其技术性范围。