一种海洋来源的内切型硫酸软骨素硫酸酯酶及其编码基因与应用的制作方法

技术特征：
1.一种海洋来源的内切型硫酸软骨素硫酸酯酶pb_3262，其特征在于，氨基酸序列如seq id no.2所示。2.权利要求1所述的内切型硫酸软骨素硫酸酯酶pb_3262的编码基因，其特征在于，核苷酸序列如seq id no.1所示。3.一种重组表达载体，其特征在于，在表达载体中插入了权利要求2所述的内切型硫酸软骨素硫酸酯酶pb_3262的编码基因。4.如权利要求3所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体为大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、枯草杆菌表达载体、乳酸菌表达载体、链霉菌表达载体、噬菌体载体、丝状真菌表达载体、植物表达载体、昆虫表达载体或哺乳动物细胞表达载体。5.一种重组细胞，其特征在于，在宿主细胞中插入了权利要求2所述的内切型硫酸软骨素硫酸酯酶pb_3262的编码基因。6.如权利要求5所述的重组细胞，其特征在于，所述宿主细胞为大肠杆菌宿主细胞、酵母菌宿主细胞、枯草杆菌宿主细胞、乳酸菌宿主细胞、放线菌宿主细胞、丝状真菌宿主细胞、昆虫细胞或哺乳动物细胞。7.权利要求5所述的重组细胞在重组表达内切型硫酸软骨素硫酸酯酶pb_3262中的应用。8.权利要求1所述的内切型硫酸软骨素硫酸酯酶pb_3262在制备cs二糖、寡糖及多糖中的应用。9.权利要求1所述的内切型硫酸软骨素硫酸酯酶pb_3262在研究特殊硫酸化结构的糖胺聚糖结构功能关系中应用。

技术总结
本发明涉及一种海洋来源的内切型硫酸软骨素硫酸酯酶及其编码基因与应用。所述内切型硫酸软骨素硫酸酯酶PB_3262分离自发光杆菌(Photobacterium sp.)QA16，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明中的硫酸软骨素硫酸酯酶PB_3262降解富含A unit的CS-A底物时表现为内切酶降解模式，其独特的酶学特性可应用于特殊硫酸化程度的硫酸软骨素的定向修饰，亦可制备不同的硫酸化程度的硫酸软骨素寡糖，尤其是对A unit二糖降解活力极高，酶活力达到了165.75U/mg。mg。


技术研发人员：李福川 魏琳 张庆冬 王文爽 路丹荣
受保护的技术使用者：山东大学
技术研发日：2021.11.25
技术公布日：2022/3/1