化合物P57或其类似物用于体温降低和神经保护的用途的制作方法

化合物p57或其类似物用于体温降低和神经保护的用途
技术领域
1.本发明属于生物医药技术领域，具体涉及p57及其类似物在降低体温、治疗缺氧缺血性疾病的神经保护作用及在发烧中的应用。


背景技术：

2.天然产物是来自于动物、植物、微生物等个体或来自于这些生物的化学成分，主要包括黄酮类、蒽醌类、皂苷类、生物碱、萜类、多肽、多糖和蛋白质等多种类型。天然产物，尤其是药用植物，仍然是新化学实体(new chemical entities，nces)药物的重要来源。
3.物理降温已经作为许多急性出血症的急救措施，但快速、特异地通过小分子诱导降温目前仍未应用于临床。冬眠是生命体应对极端寒冷的应激保护措施，冬眠动物降低体温具有保护作用。busto和同事于1987年发现仅仅降低几度大脑的温度就可以减少神经元死亡，这个发现引发了人们对低温脑保护作用的兴趣，后续实验进一步表明了低温对神经元保护的巨大作用。治疗性低温已经成为治疗一些脑部疾病和脑损伤最可靠的神经保护方法之一(阻止细胞凋亡和坏死)，如治疗中风，创伤性脑损伤，心脏骤停后全脑缺血和缺氧缺血性脑病。中风是导致死亡和残疾的主要原因之一，其中约有87％的中风是缺血性脑中风。尽管患病率很高，但是由于时间窗口有限，可以接受干预的患者是有限的。治疗性低温可以提供强大的神经保护作用，这种疗法有潜力成为缺血性中风最吸引人的疗法之一。
4.因此，本领域尚需要开发新的低温神经元保护剂，用于治疗缺氧缺血性疾病的神经保护作用。


技术实现要素：

5.本发明的目的是提供一种化合物p57及其类似物用于制备降低体温或保护神经元的药物组合物。
6.本发明的第一方面，提供了一类化合物p57或其类似物的用途，其特征在于，用于制备降低治疗对象体温的药物组合物，且所述的化合物p57或其类似物具有如下式i所示的结构：
[0007][0008]
其中，r1选自下组：氢、c
2-c6烷酰基、未取代或对位取代的苯甲酰基、三(c
3-c9烷基)硅基、三(c
9-c
16
芳基)硅基、烯丙基，或取代或未取代的苄基；
[0009]
r2选自氢、羟基、卤素；其中，所述的羟基可以具有保护基，且所述的保护基选自下组：c
2-c6烷酰基、未取代或对位取代的苯甲酰基、三(c
3-c9烷基)硅基、三(c
9-c
16
芳基)硅基、
烯丙基，或取代或未取代的苄基；
[0010]
其中，所述的苯甲酰基的取代基选自下组：甲氧基、硝基、叠氮基、卤素；所述的苄基上的取代基选自下组：萘亚甲基、对甲氧基苯基、对甲基苯基、对硝基苄基、对位卤素取代苄基。
[0011]
在另一优选例中，所述的r1选自下组：乙酰基、未取代的苯甲酰基，或对位甲氧基取代的苯甲酰基。
[0012]
在另一优选例中，所述的化合物选自下组：
[0013]
[0014]
[0015][0016]
在另一优选例中，所述的化合物为p57：
[0017][0018]
在另一优选例中，所述的化合物为6-70或2,74-157-α：
[0019][0020]
在另一优选例中，所述的药物组合物还用于治疗或预防缺氧缺血性疾病。
[0021]
在另一优选例中，所述的药物组合物用于缺氧缺血性疾病治疗中的神经元保护。
[0022]
在另一优选例中，所述缺氧缺血性疾病选自下组：中风、创伤性脑损伤、心脏骤停后全脑缺血、和缺氧缺血性脑病。
[0023]
在另一优选例中，所述的药物组合物还用于治疗或改善治疗对象的发烧症状。
[0024]
在另一优选例中，所述的药物组合物为注射剂。
[0025]
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
[0026]
图1腹腔注射p57小鼠和大鼠体温随着时间的变化曲线。(a)6-8周雄性c57bl/6j小鼠腹腔注射不同剂量的p57：12.5mg/kg,25mg/kg,以溶剂组为空白对照，n＝5；(b)6-8周雄性wistar大鼠腹腔注射不同剂量的p57：8.75mg/kg，17.5mg/kg，以溶剂组为空白对照，n＝4。
[0027]
图2下丘脑注射p57对c57bl/6j小鼠体温的影响。(a)c57bl/6j小鼠下丘脑注射示意图。(b)下丘脑注射p57后c57bl/6j小鼠体温随着时间的变化曲线。选用c57bl/6j雄性小鼠，下丘脑区域埋入双管微量给药系统。2周后，直接向下丘脑注射不同剂量的p57(15μg，30μg)，每30分钟测量其肛门体温，以溶剂组为空白对照，n＝3。
[0028]
图3p57在mcao模型中具有神经元保护作用。(a)mcao模型腹腔注射p57后的体温变化。(b)mcao模型腹腔注射p57，24h取样ttc染色，统计脑组织梗死体积。
[0029]
图4p57在心肌缺血模型中的作用。(a)vevo 2100微型超声系统评估p57处理对小鼠心脏功能的影响。ef射血分数。es缩短分数。(b)马松染色评估p57对心肌缺血的保护作用。
[0030]
图5p57在pge2诱导的发烧模型中降低动物体温作用。
[0031]
图6腹腔注射p57类似物小鼠体温随着时间的变化曲线。(a)6-8周雄性c57bl/6j小鼠腹腔注射25mg/kg 6-70，n＝4；(b)6-8周雄性c57bl/6j小鼠腹腔注射25mg/kg 2,74-157-α，n＝5。
具体实施方式
[0032]
本发明人经过长期而深入的研究，意外地发现，本领域已知可以用于减肥的药物化合物p57在施用于动物后，可以显著降低动物体温，进而可以被用作为低温神经元保护剂，用于在缺氧缺血性疾病的治疗中起到神经保护作用。基于上述发现，发明人完成了本发明。
[0033]
p57化合物及其神经保护作用
[0034]
如本文所用，“p57”指具有如下式结构所示的化合物：
[0035]
[0036]
p57是从非洲蝴蝶仙人掌中分离出来的甾体糖苷类化合物。近年来p57作为具有减肥效应的保健品备受关注，但是由于其作用机制尚不清楚，迄今为止它还没有应用到医药卫生行业。申请人在对p57的下丘脑调节功能的研究中，发现这类化合物可以迅速的诱导啮齿类动物体温下降。这种现象提示我们这类化合物很可能在体内可以作用于特异的分子靶标，发挥中枢调节活性。
[0037]
药物组合物和施用方法
[0038]
由于化合物p57具有优异的降低治疗对象体温的活性，因此本发明化合物及其各种晶型，药学上可接受的无机或有机盐，水合物或溶剂合物，以及含有本发明化合物为主要活性成分的药物组合物可用于治疗体温过高而引起的疾病，例如用于治疗发热，或者用于缺氧缺血性疾病中的神经保护作用等。
[0039]
本发明的药物组合物包含安全有效量范围内的本发明化合物及药学上可以接受的赋形剂或载体。其中“安全有效量”指的是：化合物的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。通常，药物组合物含有1-2000mg本发明化合物/剂，更佳地，含有10-200mg本发明化合物/剂。较佳地，所述的“一剂”为一个胶囊或药片。
[0040]“药学上可接受的载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明化合物以及它们之间相互掺和，而不明显降低化合物的药效。药学上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂(如)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、无热原水等。
[0041]
本发明化合物或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括(但并不限于)：口服、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)。
[0042]
用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在这些固体剂型中，活性化合物与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合：(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(c)保湿剂，例如，甘油；(d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；(e)缓溶剂，例如石蜡；(f)吸收加速剂，例如，季胺化合物；(g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸附剂，例如，高岭土；和(i)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。
[0043]
固体剂型如片剂、糖丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性化合物或化合物的释放可以延迟的方式在消化道内的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。必要时，活性化合物也可与上述赋形剂中的一种或多种形成微胶囊形式。
[0044]
用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂。除了活性化合物外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例知，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰
胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物等。
[0045]
除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料。
[0046]
除了活性化合物外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。
[0047]
用于肠胃外注射的组合物可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。
[0048]
本发明化合物可以单独给药，或者与其他药学上可接受的化合物(例如其他神经元保护药物)联合给药。
[0049]
联合给药时，所述药物组合物还包括与一种或多种(2种，3种，4种，或更多种)其他药学上可接受的化合物。该其他药学上可接受的化合物中的一种或多种(2种，3种，4种，或更多种)可与本发明的化合物同时、分开或顺序地施用。
[0050]
使用药物组合物时，是将安全有效量的本发明化合物适用于需要治疗的哺乳动物(如人)，其中施用时剂量为药学上认为的有效给药剂量，对于60kg体重的人而言，日给药剂量通常为1～2000mg，优选20～500mg。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。
[0051]
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。
[0052]
实施例1、p57诱导小鼠和大鼠体温降低
[0053]
1.1材料
[0054]
1.1.1 c57bl/6j 6-8周龄雄性小鼠
[0055]
1.1.2 wistar 6-8周龄雄性大鼠
[0056]
1.1.3二甲基亚砜(dmso)
[0057]
1.1.4蓖麻油
[0058]
1.1.5磷酸缓冲液(pbs)
[0059]
1.1.6 75％乙醇溶液
[0060]
1.1.7林可霉素利多卡因凝胶
[0061]
1.1.8聚维酮碘溶液
[0062]
1.1.9小鼠双管微量给药系统
[0063]
1.1.10 1ml一次性无菌注射器
[0064]
1.1.11 5μl微量注射器
[0065]
1.1.12 1.5ml ep管
[0066]
1.1.13 15ml离心管
[0067]
1.2设备
[0068]
1.2.1小鼠直肠温度检测仪
[0069]
1.2.2桌面数显型脑立体定位仪
[0070]
1.2.3小鼠适配器
[0071]
1.2.4迷你圆头电钻
[0072]
1.3溶液
[0073]
1.3.1 p57溶解在1％dmso 9％蓖麻油 90％pbs溶液中。
[0074]
1.3.2 5％的水和氯醛溶液配制：2.5g水和氯醛溶解于50ml 1
×
pbs溶液中。
[0075]
1.4方法
[0076]
1.4.1下丘脑植入微量双管给药系统
[0077]
将6-8周的c57bl/6j小鼠剪脚趾编号，称重，腹腔注射5％的水和氯醛(0.1ml/10g)麻醉小鼠。待小鼠处于麻醉状态后，用宠物剃毛刀将小鼠头部手术区域的毛剃除，并用聚维酮碘溶液将头皮清理干净。将小鼠固定于立体定位仪上，用手术刀沿头部正中线切开皮肤，切口大小应适宜，用棉签蘸取pbs将头骨表面擦干净，用洗耳球吹干，使骨缝清晰可见。调节脑立体定位仪使颅骨水平。在目标脑区周围用微型电动打磨机的细钻头在颅骨上打孔，植入不锈钢小螺丝钉。依照参考文献和小鼠脑图谱中下丘脑的区域(m/l＝
±
0.40，a/p＝-0.16，d/v＝-5.15)，在颅骨的相应位置上用微型电动打磨机的细钻头打一小孔，注意不要伤到脑膜以及脑组织。然后缓慢植入微量双管注射系统。用硫酸锌水门汀把不锈钢的小螺丝与微量双管注射系统一起固定于颅骨上以强化固定效果。将小鼠放在空间较为宽敞的鼠笼，2周后，用于药物干预实验。
[0078]
1.4.2p57处理
[0079]
腹腔注射：根据实验设计，将需要进行药物处理的小鼠/大鼠随机分组：对照组(89％pbs 10％蓖麻油 1％dmso)，不同浓度的p57处理组。
[0080]
下丘脑注射：根据实验设计，将2周前植入微量给药系统且健康状况良好的小鼠随机分组。下丘脑注射剂量控制在2μl。
[0081]
1.4.3体温测量
[0082]
在测量体温的前3-4天，每天同一时间段多次抓取小鼠，减少小鼠对人抓取的应激。在药物干预前，每30min测一次小鼠的体温，测2-3h的基础体温；药物干预后，每30min测一次小鼠的体温，监测8h内小鼠体温的变化。
[0083]
1.5结果：p57诱导小鼠和大鼠体温降低
[0084]
c57bl/6j 6-8周龄雄性成年小鼠在腹腔注射不同浓度的p57(12.5mg/kg，25mg/kg)和溶剂对照，每隔30分钟对小鼠肛门体温的变化进行监测。结果显示，化合物处理组小鼠体温较对照组显著下降，在注射p57约1小时后，体温降低至最低点(25mg/kg组体温降低至32.0℃左右)，并且降温的程度和维持时间与化合物剂量呈正相关，而对照组小鼠体温基本恒定在37℃左右(如图1a所示)。考虑到小鼠的比表面积较大，体温更容易受到外界因素的干扰，我们又选用了wistar雄性成年大鼠进行了同样的验证。对wistar大鼠腹腔注射不同剂量的p57(8.75mg/kg,17.5mg/kg)后，也可以诱导其体温的显著降低(如图1b所示)。
[0085]
在c57bl/6j雄性成年小鼠下丘脑区域(x＝
±
0.4，y＝-0.16,z＝-5.15)埋入双管微量给药系统，埋管2周后，分别向下丘脑直接注射低剂量的p57(15μg，30μg)(图2a)。结果显示低剂量的p57更为快速地诱导小鼠体温降低(30μg组，注射30分钟体温可降低至29℃左右)，维持低温时间长达4-5h(图2b)。这些数据进一步说明p57能够诱导体温降低，并且提示p57通过作用于下丘脑诱导低温。
[0086]
实施例2 p57在治疗缺氧缺血性疾病中的神经保护作用
[0087]
2.1材料
[0088]
2.1.1 2,3,5-三苯基氯化四氮唑
[0089]
2.1.2尼龙单丝缝合线
[0090]
2.2设备
[0091]
2.2.1呼吸机
[0092]
2.2.2 vevo 2100微型超声系统
[0093]
2.3溶液
[0094]
2.3.1 1％2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride，ttc)溶液配制：称取1g ttc溶解于100ml 1
×
pbs溶液。
[0095]
2.3.2 4％多聚甲醛溶液配制：4g多聚甲醛溶解于1
×
pbs溶液，调节ph至7.4，定容至100ml，过滤。避光，4℃保存备用。
[0096]
2.4方法
[0097]
2.4.1大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion，mcao)动物模型的建立
[0098]
wistar品系大鼠随机分为假手术空白对照组，假手术药物干预组，mcao空白对照组和mcao药物干预组。称量并记录大鼠体重，腹腔注射10％的水和氯醛麻醉。消毒颈部皮肤，分离左颈总动脉，注意避免触碰颈动脉鞘内的迷走神经。假手术组仅分离血管，不插入尼龙线，mcao组在颈总动脉腹壁上做一个25g针头的点状切口，尼龙单丝缝合线(长5cm，直径0.43mm)，尖端涂有硅橡胶，进入20mm达到大脑中动脉，缝合皮肤，阻塞120min后，取出缝线，大脑中动脉灌注通畅。同时，腹腔注射药物干预。
[0099]
2.4.2大鼠脑梗死区域的ttc染色
[0100]
p57干预24小时后，假手术组和mcao组的大鼠用水和氯醛麻醉，断头取脑，-20℃速冻20min，切成一系列2mm厚的冠状切片，立即置于1％的ttc溶液中室温避光染色45min。pbs缓冲液清洗后，用4％的多聚甲醛固定，4℃放置24小时，红色区域表示正常脑组织，白色区域表示梗死病变的脑组织，用image j图像处理软件计算各样本脑梗死面积。
[0101]
2.4.3小鼠心肌缺血模型
[0102]
小鼠在气密室中用5％异氟烷麻醉，使用100％o2容积控制的呼吸机，补充2.5％异氟烷进行气管插管。开胸切除心包后，沿着左心室前壁找到左前降肢(left anterior descending coronary，lad)冠状动脉。在靠近lad动脉起源与左主冠状动脉处，用7-0聚丙烯缝线结扎lad动脉。lad动脉闭塞即刻导致左心室前壁发白，预示心肌缺血。随后，用6-0号缝合线将胸部皮肤缝合。气管拔管，将小鼠放置37℃加热垫直至小鼠苏醒。第三天、第七天和第十四天超声心动仪检测小鼠的射血分数，然后取样切片进行马松(masson)染色。
[0103]
2.4.4小鼠超声波心动图
[0104]
在小鼠心肌缺血后第三天、第七天和第十四天使用vevo 2100微型超声系统评估小鼠心脏功能。记录并且计算左心室射血分数(lvef)、左心室壁内缩短分数(lves)、左心室舒张内径(lvidd)和左心室收缩内径(lcids)。
[0105]
2.5结果
[0106]
2.5.1p57在mcao模型中具有神经元保护作用
[0107]
首先，我们建立了大鼠的大脑中动脉栓塞模型(mcao)来模拟脑卒中，在大鼠缺血2小时再灌注时腹腔注射p57，以腹腔注射溶剂为对照组，监测大鼠体温的变化(图3a)，发现在此模型中p57仍然具有明显的低温诱导活性。再灌注24小时后异氟烷麻醉，断头取脑作2,3,5-三苯基氯化四氮唑(triphenyl tetrazolium chloride，ttc)染色，我们观察到p57给药组大鼠的大脑相较对照组，缺血性脑梗阻的体积显著降低(p《0.01,n＝7)。这个结果表明p57可以能显著减少脑神经元的死亡，在mcao模型中具有神经元保护作用(图3b)。
[0108]
2.5.2 p57在心肌缺血模型中具有保护作用
[0109]
我们通过结扎lad冠状动脉建立了小鼠心肌缺血模型，腹腔注射p57处理7天，以注射溶剂为对照组，在第三天、第七天和第十四天使用vevo 2100微型超声系统评估小鼠心脏功能。如图4a所示，在第三天和第七天左心室射血分数(lvef)和左心室壁内缩短分数(lves)p57处理组数值均大于对照组。马松染色结果(图4b)显示，p57处理组的梗死面积小于对照组。这些结果表明p57对心肌缺血模型有一定的保护作用。
[0110]
实施例3 p57在治疗发烧方面的作用
[0111]
3.1材料
[0112]
3.1.1前列腺素e2(prostaglandin e2,pge2)
[0113]
3.2溶液
[0114]
3.1.1 pge2溶液：生理盐水溶解pge2至2m。
[0115]
3.3方法：
[0116]
发烧模型
[0117]
将2周前植入微量给药系统且健康状况良好的小鼠随机分为空白对照组,p57组,pge2组,p57 pge2组。称量并记录小鼠体重。药物处理前1小时开始由代谢笼记录小鼠的体温，p57组和p57 pge2组腹腔注射p57(25mg/kg)，其余组注射溶剂；1小时后，peg2组和p57 pge2组下丘脑注射pge2(2μl)，其余组注射溶剂。
[0118]
3.4结果
[0119]
在mcao模型中，我们发现对照组的大鼠在手术后体温较假手术组有所升高，我们猜测p57在发烧模型中也具有降温作用。为此，我们在c57bl/6j雄性成年小鼠下丘脑区域埋入双管微量给药系统，2周后，向下丘脑注射p57或溶剂，1小时后再注射pge2诱导发烧，监测小鼠的核心温度变化，结果发现，注射p57后诱导的低温虽然不能抑制pge2导致的发热，但是能使动物核心温度仍处于温和持续低温的状态(图5)。因此，p57可以用于降低动物体温，进而发挥中枢调节活性，保护动物神经。
[0120]
实施例4 p57类似物在治疗发烧方面的作用
[0121]
4.1材料
[0122]
4.1.1前列腺素e2(prostaglandin e2,pge2)，化合物6-70和化合物2-74-157。
[0123]
[0124]
4.2溶液
[0125]
4.1.1 pge2溶液：生理盐水溶解pge2至2mm。
[0126]
4.3方法：
[0127]
发烧模型：将2周前植入微量给药系统且健康状况良好的小鼠随机分为pge2组和化合物治疗 pge2组。称量并记录小鼠体重。药物处理前1小时开始由代谢笼记录小鼠的体温，化合物治疗 pge2组腹腔注射化合物治疗(25mg/kg)，peg2组注射溶剂；1小时后，在两组小鼠中均进行下丘脑注射pge2(2μl)。
[0128]
4.4结果
[0129]
在c57bl/6j雄性成年小鼠下丘脑区域埋入双管微量给药系统，2周后，向下丘脑注射本技术化合物或溶剂，1小时后再注射pge2诱导发烧，监测小鼠的核心温度变化，结果发现，相较于注射载体的对照组注射本技术化合物能使动物核心温度仍处于温和持续低温的状态(图6)。
[0130]
上述实施例中，所使用的化合物6-70和化合物2-74-157α参考现有技术pnas,october 7,2014,vol.111,no.40,14571
–
14576制备得到，其表征数据如下：
[0131]
化合物6-70
[0132][0133]
[α]
d27
＝6.1(c 2.1,chcl3)；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ6.93(q,j＝6.8hz,1h),5.41(brs,1h),4.84(d,j＝8.4hz,1h),4.76(d,j＝7.6hz,1h),4.74(d,j＝8.0hz,1h),4.64(dd,j＝12.0,4.0hz,1h),4.50(d,j＝8.4hz,1h),4.26(brs,1h),3.92-3.78(m,6h),3.58-3.48(m,1h),3.45(s,6h),3.44(s,6h),3.39(s,3h),3.32-3.10(m,7h),2.59(brs,1h),2.40-2.26(m,3h),2.20(s,3h),2.14-2.09(m,1h),1.33-1.12(m,12h),1.06(s,3h),0.98(s,3h)；
13
c nmr(100mhz,cdcl3)δ217.0,167.6,138.9,137.7,128.7,121.9,101.4,99.7,99.6,95.8,85.6,82.5,82.42,82.38,80.5,77.2,76.9,75.8,75.3,71.5,68.5,68.3,68.2,58.1,58.0,57.9,57.1,56.2,53.7,43.0,38.6,37.2,37.0,35.6,35.5,35.4,35.3,35.2,34.3,33.1,29.6,29.4,27.3,26.0,24.3,19.2,18.2,18.14,18.11,17.9,14.4,12.1,9.8；hrms(maldi)m/z calcd c
54h86o17
na[m na]

1029.5757,found 1029.5758.
[0134]
化合物2,74-157-α：
[0135]
[0136]
[α]
d25
＝ 56.0(c 0.55,chcl3)；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ6.92(br d,j＝7.6hz,1h),5.40(br,1h),4.91(d,j＝4hz,1h),4.85(dd,j＝1.6,9.6hz,1h),4.64(dd,j＝11.6,4.4hz,1h),4.33(d,j＝7.6z,1h),4.27(s,1h),4.22(dd,j＝6.8,9.2hz,1h),3.83-3.86(m,2h),3.75(d,j＝3.6hz,1h),3.64(s,3h),3.52-3.58(m,2h),3.40(s,3h),3.39(s,3h),3.40-3.52(m,3h),3.19(t,j＝9.2hz,1h),3.08-3.15(m,2h),2.53(s,1h),2.45(s,1h),2.27-2.34(m,2h),2.19-2.24(m,1h)2.19(s,1h),1.88(s,3h),1.27-1.31(m,7h),1.22-1.25(m,5h),1.05(3h)0.98(s,3h)；
13
c nmr(100mhz,cdcl3)δ217.1,167.7,138.0,137.8,128.7,122.0,104.2,95.7,91.2,85.7,85.2,77.0，76.9，75.9,75.1,74.7,74.5,74.4,72.4,71.7,68.9,63.3,60.6,57.4,57.2,56.6,53.7,43.0,38.6,37.2,37.1,35.7,34.6,34.4,33.1,31.2,29.5,27.3,26.0,24.4,19.3,18.5,17.8,17.7,14.5,12.1,9.9；lr-esims calcd for c47h74o15na(m na

)901.5,found 901.2.
[0137]
在本发明提及的所有文献都在本技术中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本技术所附权利要求书所限定的范围。