富勒烯芳基多羧酸衍生物及其在抗冠状病毒感染中的应用的制作方法

1.本发明涉及药物化学领域，具体地，涉及富勒烯芳基多羧酸衍生物及其在抗冠状病毒感染中的应用。


背景技术：

2.冠状病毒在系统分类上属套式病毒目(nidovirales)冠状病毒科(coronaviridae)冠状病毒属(coronavirus)。冠状病毒属病毒是自然界广泛存在的一大类病毒，能感染脊椎动物，如人、鼠、猪、猫、犬、狼、鸡、牛、禽类，能够引起多种急慢性疾病。2019年发现了一种新型冠状病毒，国际病毒分类委员会将这种新型冠病毒正式命名为sars-cov-2，属于β属冠状病毒，属于rna病毒，有包膜，颗粒呈圆形或椭圆形，常为多形性，直径60-140nm。其结构与sars冠状病毒(sars-cov)和中东呼吸综合征冠状病毒(mers-cov)相似，但其基因特征有明显区别，是感染人类的冠状病毒科中的第七个成员。2020年2月11日，世界卫生组织将2019新型冠状病毒肺炎命名为“covid-19”。sars-cov-2的传染性比sars-cov更高，2020年3月11日世界卫生组织宣布，此次covid-19疫情可被确定为全球大流行(pandemic)。
3.针对sars-cov-2引起的covid-19，全世界的科学家都在积极寻找特效药物。根据国家2020年3月4日发布的《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第七版修订版)》，推荐尝试的治疗方法包括化学药洛匹那韦/利托那韦复方并可加用利巴韦林、生物药α-干扰素雾化剂、磷酸氯喹和阿比朵尔，并推荐多个中药成方和组方用于对症治疗。另据国内外报道，临床个案实践中，使用抗流感药物奥司他韦、抗埃博拉病毒候选药物瑞德西韦具有治疗效果。此外，抗艾滋病药物达芦那韦、抗流感药法匹拉韦在体外研究当中显示有效。
4.然而，值得特别关注的是，covid-19迄今还缺乏有效的抗病毒药物。因此，针对covid-19的抗病毒药物还需进一步研究。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物及其在制备预防或治疗抗冠状病毒的药物中的应用。发明人应用rvsv-sars2假病毒以及sars-cov-2真病毒的感染模型评价了富勒烯芳基多羧酸衍生物的抗病毒活性，发现富勒烯芳基多羧酸衍生物可以有效抑制rvsv-sars2假病毒以及sars-cov-2真病毒对细胞的感染。进而，发明人发现，该富勒烯芳基多羧酸衍生物具有可有效抑制冠状病毒的作用。
6.为此，在本发明的第一方面，本发明提供了以下通式化合物：
7.富勒烯-rr1r2r3r4r58.式a
9.或所述化合物的立体异构体、其前药、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，
10.其中：
11.所述富勒烯为由五元碳环和六元碳环组成的笼状全碳结构，
12.r选自：
13.(1)h，f，cl，br，i，c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，
14.(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
15.1)h，
16.2)其中，
17.x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h，
18.(3)其中，
19.z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h；
20.r1、r2、r3、r4、r5各自独立地选自：
21.(1)其中，
22.z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h，
23.(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
24.1)h，
25.2)其中，
26.x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h，
27.其中，式a所示化合物不包括以下化合物：
28.29.30.[0031][0032]
需要说明的是，式a所示的结构式“富勒烯-rr1r2r3r4r
5”表示所述富勒烯上连接的6个原子或基团分别被r、r1、r2、r3、r4和r5所取代。
[0033]
在一些实施方案中，所述富勒烯还含有七元碳环和/或四元碳环。
[0034]
在一些实施方案中，所述富勒烯选自c
60
、c
70
、c
84
、c
90
或c
100
。
[0035]
在一些实施方案中，所述富勒烯为空心笼状结构或内包金属、团簇的内嵌结构。
[0036]
在一些实施方案中，所述富勒烯为c
60
，且所述富勒烯为空心笼状结构。
[0037]
在一些实施方案中，所述化合物为以下通式的化合物：
[0038][0039]
其中：
[0040]
r选自：
[0041]
(1)h，f，cl，br，i，c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，优选选自f，cl，br，i，c1-c4烷基，更优选选自cl，甲基，最优选为cl，
[0042]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0043]
1)h，
[0044]
2)其中，
[0045]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h，
[0046]
(3)其中，
[0047]
z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h；
[0048]
r1、r2、r3、r4、r5各自独立地选自：
[0049]
(1)其中，
[0050]
z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h，
[0051]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0052]
1)h，
[0053]
2)其中，
[0054]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h，
[0055]
其中，式i所示化合物不包括以下化合物：
[0056]
[0057]
[0058]
[0059][0060][0061]
需要说明的是，式i所示化合物中，r、r1、r2、r3、r4、r5只存在于半个富勒烯c
60
框架中，另一半中不存在。
[0062]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0063]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c2-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0064]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0065]
在一些具体实施方案中，r的定义中，z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h。
[0066]
在一些实施方案中，r选自：
[0067]
(1)h，f，cl，br，i，c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，优选选自f，cl，br，i，c1-c4烷基，更优选选自cl，甲基，最优选为cl，
[0068]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0069]
1)h，
[0070]
2)其中，
[0071]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0072]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0073]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c2-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0074]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0075]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h。
[0076]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h、被1个羧基取代的异丙基、被1个羧基取代的正丁基、被1个羧基取代的异丁基、被1个羧基取代的叔丁基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h。
[0077]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h。
[0078]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0079]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c2-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0080]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0081]
在一些实施方案中，r选自：
[0082]
(1)h，f，cl，br，i，c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，优选选自f，cl，br，i，c1-c4烷基，更优选选自cl，甲基，最优选为cl，
[0083]
(2)其中，
[0084]
y3为其中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0085]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0086]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c2-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0087]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0088]
在一些具体实施方案中，y3为其中，x3为被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，x3为被1个羧基取代的c1-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，x3为被1个羧基取代的c2-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，x3为
[0089]
在一些实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5各自独立地选自：
[0090]
(1)其中，各z3独立地选自被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，
[0091]
(2)其中，
[0092]
y3为其中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0093]
在一些具体实施方案中，各z3独立地选自被1个羧基取代的c1-c6烷基。
[0094]
在一些具体实施方案中，各z3独立地选自被1个羧基取代的异丙基，被1个羧基取代的正丁基，被1个羧基取代的异丁基，被1个羧基取代的叔丁基。
[0095]
在一些具体实施方案中，各z3独立地选自
[0096]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0097]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c2-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0098]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0099]
在一些具体实施方案中，y3为其中，各x3独立地选自被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，各x3独立地选自被1个羧基取代的c1-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，各x3独立地选自被1个羧基取代的c2-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，各x3均为
[0100]
在一些实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5均为：
[0101]
其中，
[0102]
各z3均为被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，
[0103]
y3为其中，各x3均为被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基。
[0104]
在一些具体实施方案中，各z3均为被1个羧基取代的c1-c6烷基。
[0105]
在一些具体实施方案中，各z3均为被1个羧基取代的异丙基，被1个羧基取代的正丁基，被1个羧基取代的异丁基或被1个羧基取代的叔丁基。
[0106]
在一些具体实施方案中，各z3均为
[0107]
在一些具体实施方案中，各x3均为被1个羧基取代的c1-c6烷基。
[0108]
在一些具体实施方案中，各x3均为被1个羧基取代的c2-c6烷基。
[0109]
在一些具体实施方案中，各x3均为
[0110]
在一些实施方案中，化合物选自以下：
[0111]
[0112][0113]
或上述化合物的立体异构体、其前药、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物。
[0114]
在本发明的第二方面，本发明提供了制备前述化合物的方法，其包括：
[0115]
(1)使c
60
cl6与α-甲基氢肉桂酸、5-苯基戊酸或3-(4-联苯基)丙酸发生亲核取代反应，获得所述化合物；
[0116]
或者，使c
60
cl6与3-(4-联苯基)丙酸甲酯发生亲核取代反应，反应结束后，将反应体系冷却到室温，之后使亲核取代反应产物发生水解反应，获得所述化合物。
[0117]
在一些实施方案中，所述α-甲基氢肉桂酸、5-苯基戊酸、3-(4-联苯基)丙酸甲酯或3-(4-联苯基)丙酸与所述c
60
cl6的物质的量的比为20-30：1(如25：1)。
[0118]
在一些实施方案中，所述亲核取代反应是在sncl4存在的条件下进行的。
[0119]
在一些实施方案中，所述亲核取代反应是在无水无氧的条件下进行的。
[0120]
在一些实施方案中，所述亲核取代反应的溶剂为硝基苯。
[0121]
在一些实施方案中，所述亲核取代反应是在温度为60-100℃(如80℃、90℃)的条件下进行1-3小时(如2小时)。
[0122]
在一些实施方案中，所述水解反应的溶剂为甲苯。
[0123]
在一些实施方案中，所述水解反应是在乙酸和盐酸存在的条件下进行的。
[0124]
在一些实施方案中，所述水解反应是在温度为60-100℃(如80℃)的条件下进行60-80小时(如70小时、72小时)。
[0125]
在一些实施方案中，所述水解反应前，进一步包括：将亲核取代反应产物进行纯化。
[0126]
在一些实施方案中，所述纯化为柱层析分离。
[0127]
在一些实施方案中，所述柱层析分离的流动相为甲苯/甲醇＝85/15(体积比)。
[0128]
在一些实施方案中，所述制备方法进一步包括：
[0129]
(2)步骤(1)中c
60
cl6与α-甲基氢肉桂酸、5-苯基戊酸或3-(4-联苯基)丙酸的亲核取代反应结束后，将反应体系冷却到室温，向反应体系中加入乙腈进行沉淀和过滤(如抽滤)，获得第一滤饼，
[0130]
或者，步骤(1)的水解反应结束后，用甲苯进行萃取并旋干，之后向旋干的反应产物中加入乙腈进行沉淀和过滤(如抽滤)，获得第一滤饼，
[0131]
(3)用氢氧化钾溶液溶解所述第一滤饼，过滤(如抽滤)去除不溶物，收集滤液，
[0132]
(4)向所述滤液中滴加盐酸进行中和反应，直至ph成中性，析出沉淀，
[0133]
(5)过滤(如抽滤)步骤(4)的反应产物，获得第二滤饼，所述第二滤饼即所述化合物。
[0134]
在一些实施方案中，步骤(2)之后，步骤(3)之前，进一步包括：将所述第一滤饼进行洗涤(如用正己烷洗涤，如洗涤三次)和干燥。
[0135]
在一些实施方案中，步骤(5)之后，进一步包括：将所述第二滤饼进行干燥，获得所述化合物。
[0136]
在本发明的第三方面，本发明提供了药物组合物，其包含前述化合物或其立体异构体、其前药、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，或者前述方法制备的化合物，以及任选的药学上可以接受的载体或赋形剂。
[0137]
在一些实施方案中，所述药物组合物为用于口服的丸剂、片剂、胶囊、水溶液或水悬浮液，用于眼部局部用药的微粉化悬浮液或溶液的制剂形式，用于皮肤或粘膜局部用药的膏剂、软膏、洗剂、喷剂或霜剂制剂形式，或用于注射的无菌注射水或油悬浮液或无菌注射溶液。
[0138]
某些两亲性分子，如许多天然的合成的表面活性剂及不能简单缔合成胶团的磷脂，分散于水中时会自发形成一类具有封闭双层结构的分子有序组合体，称为囊泡(vesicles)。囊泡的一个重要的应用是作为药物的载体。与其它微结构相比，囊泡具有奇特的结构，即存在亲水微区和疏水微区，这使得囊泡具有同时运载水溶药物和水不溶药物的能力。同时，囊泡具有双层膜结构，与生物膜有很好的兼容性，是理想的体内药物的载体。另外，由于分子进出囊泡需要较长的时间，利用这一特性，近年来，人们研究用囊泡作为缓释剂，以更好地发挥药效。
[0139]
发明人发现，式a或式i所示化合物或其药学上可接受的盐在溶液中多以囊泡的形
式存在(如图1所示)。另外，发明人发现，本发明囊泡的直径与冠状病毒的直径相当，因此，发明人推测，所述囊泡可以通过将冠状病毒包埋，从而在一定程度上发挥抗病毒作用。
[0140]
为此，在本发明的第四方面，本发明提供了囊泡，所述囊泡的直径为40-140nm(如50、60、70、80、90、100、110、120或130nm)，所述囊泡由前述化合物或其药学上可接受的盐形成。需要说明的是，所述囊泡的直径指的是外径，另外，所述囊泡的直径是可控的。
[0141]
在一些实施方案中，所述囊泡是通过如下方法形成的：
[0142]
将前述化合物或其药学上可接受的盐溶解于dmf或乙腈中，获得溶液，将所述溶液在温度为30-40℃的条件下超声处理1-2小时，获得所述囊泡。在一些实施方案中，前述化合物或其药学上可接受的盐的质量与所述dmf或乙腈的体积的比为1mg：1ml。
[0143]
在本发明的第五方面，本发明提供了式a所示化合物或其立体异构体、其前药、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物在制备药物中的用途，
[0144]
所述药物用于预防和/或治疗冠状病毒，如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒感染所致疾病，优选地，所述药物用于预防和/或治疗冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)感染所致肺炎，例如新型冠状病毒sars-cov-2感染所致肺炎covid-2019(例如呼吸系统疾病，包括但不限于单纯性感染如发热、咳嗽和咽痛等、肺炎、急性或严重急性呼吸道感染、低氧性呼吸衰竭及急性呼吸窘迫综合征、脓毒症和脓毒性休克等)；
[0145]
或者，所述药物作为冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)抑制剂；
[0146]
或者，所述药物用于抑制冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)在细胞(例如哺乳动物细胞)中的复制或繁殖，
[0147]
富勒烯-rr1r2r3r4r5[0148]
式a
[0149]
其中：
[0150]
所述富勒烯为由五元碳环和六元碳环组成的笼状全碳结构，
[0151]
r选自：
[0152]
(1)h，f，cl，br，i，c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，
[0153]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0154]
1)h，
[0155]
2)其中，
[0156]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h，
[0157]
(3)其中，
[0158]
z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h；
[0159]
r1、r2、r3、r4、r5各自独立地选自：
[0160]
(1)其中，
[0161]
z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h，
[0162]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0163]
1)h，
[0164]
2)其中，
[0165]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0166]
在一些实施方案中，所述富勒烯还含有七元碳环和/或四元碳环。
[0167]
在一些实施方案中，所述富勒烯选自c
60
、c
70
、c
84
、c
90
或c
100
。
[0168]
在一些实施方案中，所述富勒烯为空心笼状结构或内包金属、团簇的内嵌结构。
[0169]
在一些实施方案中，所述富勒烯为c
60
，且所述富勒烯为空心笼状结构。
[0170]
在一些实施方案中，所述化合物为以下通式的化合物：
[0171][0172]
其中：
[0173]
r选自：
[0174]
(1)h，f，cl，br，i，c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，优选选自f，cl，br，i，c1-c4烷基，更优选选自cl，甲基，
[0175]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0176]
1)h，
[0177]
2)其中，
[0178]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h，
[0179]
(3)其中，
[0180]
z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h；
[0181]
r1、r2、r3、r4、r5各自独立地选自：
[0182]
(1)其中，
[0183]
z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h，
[0184]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0185]
1)h，
[0186]
2)其中，
[0187]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0188]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0189]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0190]
在一些具体实施方案中，r的定义中，z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h。
[0191]
在一些实施方案中，r选自：
[0192]
(1)h，f，cl，br，i，c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，优选选自f，cl，br，i，c1-c4烷基，更优选选自cl，甲基，
[0193]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0194]
1)h，
[0195]
2)其中，
[0196]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0197]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0198]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0199]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h。
[0200]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h。
[0201]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0202]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0203]
在一些实施方案中，r选自：
[0204]
(1)h，f，cl，br，i，c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，优选选自f，cl，br，i，c1-c4烷基，更优选选自cl，甲基，
[0205]
(2)其中，
[0206]
y3为其中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0207]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0208]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0209]
在一些具体实施方案中，y3为其中，x3为被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，x3为被1个羧基取代的c1-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，x3为
[0210]
在一些实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5各自独立地选自：
[0211]
(1)其中，各z3独立地选自被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，
[0212]
(2)其中，
[0213]
y3为其中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0214]
在一些具体实施方案中，各z3独立地选自被1个羧基取代的c1-c6烷基。
[0215]
在一些具体实施方案中，各z3独立地选自
[0216]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0217]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0218]
在一些具体实施方案中，y3为其中，各x3独立地选自被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，各x3独立地选自被1个羧基取代的c1-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，各x3均为
[0219]
在一些实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5均为：
[0220]
其中，
[0221]
各z3均为被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，
[0222]
y3为其中，各x3均为被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基。
[0223]
在一些具体实施方案中，各z3均为被1个羧基取代的c1-c6烷基。
[0224]
在一些具体实施方案中，各z3均为
[0225]
在一些具体实施方案中，各x3均为被1个羧基取代的c1-c6烷基。
[0226]
在一些具体实施方案中，各x3均为
[0227]
在一些实施方案中，式i所示化合物选自以下：
[0228]
[0229]
[0230]
[0231][0232]
在本发明的第六方面，本发明提供了药物组合物或囊泡在制备药物中的用途，所述药物组合物包含前述式a或式i所示化合物或其立体异构体、其前药、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，或者前述方法制备的化合物，以及任选的药学上可以接受的载体或赋形剂；所述囊泡的直径为40-140nm(如50、60或70nm)，所述囊泡由前述式a或式i所示化合物或其药学上可接受的盐形成；
[0233]
所述药物用于预防和/或治疗冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)感染所致疾病，优选地，所述药物用于预防和/或治疗冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)感染所致肺炎，例如新型冠状病毒sars-cov-2感染所致肺炎covid-2019(例如呼吸系统疾病，包括但不限于单纯性感染如发热、咳嗽和咽痛等、肺炎、急性或严重急性呼吸道感染、低氧性呼吸衰竭及急性呼吸窘迫综合征、脓毒症和脓毒性休克等)；
[0234]
或者，所述药物作为冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)抑制剂；
[0235]
或者，所述药物用于抑制冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)在细胞(例如哺乳动物细胞)中的复制或繁殖。
[0236]
在一些实施方案中，所述药物组合物为用于口服的丸剂、片剂、胶囊、水溶液或水悬浮液，用于眼部局部用药的微粉化悬浮液或溶液的制剂形式，用于皮肤或粘膜局部用药的膏剂、软膏、洗剂、喷剂或霜剂制剂形式，或用于注射的无菌注射水或油悬浮液或无菌注射溶液。
[0237]
在一些实施方案中，所述囊泡是通过如下方法形成的：将前述式a或式i所示化合物或其药学上可接受的盐溶解于dmf或乙腈中，获得溶液，将所述溶液在温度为30-40℃的条件下超声处理1-2小时，获得所述囊泡。
[0238]
在一些实施方案中，前述式a或式i所示化合物或其药学上可接受的盐的质量与所述dmf或乙腈的体积的比为1mg：1ml。
[0239]
在本发明的第七方面，本发明提供了式a所示化合物或其立体异构体、其前药、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，其用于：
[0240]
预防和/或治疗冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)感染所致疾病，优选地，所述药物用于预防和/或治疗冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)感染所致肺炎，例如新型冠状病毒sars-cov-2感染所致肺炎covid-2019(例如呼吸系统疾病，包括但不限于单纯性感染如发热、咳嗽和咽痛等、肺炎、急性或严重急性呼吸道感染、低氧性呼吸衰竭及急性呼吸窘迫综合征、脓毒症和脓毒性休克等)；
[0241]
或者，作为冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)抑制剂；
[0242]
或者，抑制冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)在细胞(例如哺乳动物细胞)中的复制或繁殖；
[0243]
富勒烯-rr1r2r3r4r5[0244]
式a
[0245]
其中：
[0246]
所述富勒烯为由五元碳环和六元碳环组成的笼状全碳结构，
[0247]
r选自：
[0248]
(1)h，f，cl，br，i，c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，
[0249]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0250]
1)h，
[0251]
2)其中，
[0252]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h，
[0253]
(3)其中，
[0254]
z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h；
[0255]
r1、r2、r3、r4、r5各自独立地选自：
[0256]
(1)其中，
[0257]
z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h，
[0258]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0259]
1)h，
[0260]
2)其中，
[0261]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0262]
在一些实施方案中，所述富勒烯还含有七元碳环和/或四元碳环。
[0263]
在一些实施方案中，所述富勒烯选自c
60
、c
70
、c
84
、c
90
或c
100
。
[0264]
在一些实施方案中，所述富勒烯为空心笼状结构或内包金属、团簇的内嵌结构。
[0265]
在一些实施方案中，所述富勒烯为c
60
，且所述富勒烯为空心笼状结构。
[0266]
在一些实施方案中，所述化合物为以下通式的化合物：
[0267][0268]
其中：
[0269]
r选自：
[0270]
(1)h，f，cl，br，i，c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，优选选自f，cl，br，i，c1-c4烷基，更优选选自cl，甲基，
[0271]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0272]
1)h，
[0273]
2)其中，
[0274]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h，
[0275]
(3)其中，
[0276]
z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，
[0277]
且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h；
[0278]
r1、r2、r3、r4、r5各自独立地选自：
[0279]
(1)其中，
[0280]
z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h，
[0281]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0282]
1)h，
[0283]
2)其中，
[0284]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、
x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0285]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0286]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0287]
在一些具体实施方案中，r的定义中，z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h。
[0288]
在一些实施方案中，r选自：
[0289]
(1)h，f，cl，br，i，c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，优选选自f，cl，br，i，c1-c4烷基，更优选选自cl，甲基，
[0290]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0291]
1)h，
[0292]
2)其中，
[0293]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0294]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0295]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0296]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h。
[0297]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h。
[0298]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0299]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0300]
在一些实施方案中，r选自：
[0301]
(1)h，f，cl，br，i，c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，优选选自f，cl，br，i，c1-c4烷基，更优选选自cl，甲基，
[0302]
(2)其中，
[0303]
y3为其中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0304]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0305]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0306]
在一些具体实施方案中，y3为其中，x3为被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，x3为被1个羧基取代的c1-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，x3为
[0307]
在一些实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5各自独立地选自：
[0308]
(1)其中，各z3独立地选自被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，
[0309]
(2)其中，
[0310]
y3为其中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0311]
在一些具体实施方案中，各z3独立地选自被1个羧基取代的c1-c6烷基。
[0312]
在一些具体实施方案中，各z3独立地选自
[0313]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0314]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0315]
在一些具体实施方案中，y3为其中，各x3独立地选自被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，各x3独立地选自被1个羧基取代的c1-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，各x3均为
[0316]
在一些实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5均为：
[0317]
其中，
[0318]
各z3均为被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，
[0319]
y3为其中，各x3均为被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基。
[0320]
在一些具体实施方案中，各z3均为被1个羧基取代的c1-c6烷基。
[0321]
在一些具体实施方案中，各z3均为
[0322]
在一些具体实施方案中，各x3均为被1个羧基取代的c1-c6烷基。
[0323]
在一些具体实施方案中，各x3均为
[0324]
在一些实施方案中，式i所示化合物选自以下：
[0325]
[0326]
[0327][0328]
在本发明的第八方面，本发明提供了药物组合物或囊泡，所述药物组合物包含前述式a或式i所示化合物或其立体异构体、其前药、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，或者前述方法制备的化合物，以及任选的药学上可以接受的载体或赋形剂；所述囊泡的直径为40-140nm(如50、60或70nm)，所述囊泡由前述式a或式i所示化合物或其药学上可接受的盐形成；所述药物组合物或所述囊泡用于：
[0329]
预防和/或治疗冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)感染所致疾病，优选地，所述药物用于预防和/或治疗冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)感染所致肺炎，例如新型冠状病毒sars-cov-2感染所致肺炎covid-2019(例如呼吸系统疾病，包括但不限于单纯性感染如发热、咳嗽和咽痛等、肺炎、急性或严重急性呼吸道感染、低氧性呼吸衰竭及急性呼吸窘迫综合征、脓毒症和脓毒性休克等)；
[0330]
或者，作为冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)抑制剂；
[0331]
或者，抑制冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)在细胞(例如哺乳动物细胞)中的复制或繁殖；
[0332]
在一些实施方案中，所述药物组合物为用于口服的丸剂、片剂、胶囊、水溶液或水悬浮液，用于眼部局部用药的微粉化悬浮液或溶液的制剂形式，用于皮肤或粘膜局部用药的膏剂、软膏、洗剂、喷剂或霜剂制剂形式，或用于注射的无菌注射水或油悬浮液或无菌注射溶液。
[0333]
在一些实施方案中，所述囊泡是通过如下方法形成的：将前述式a或式i所示化合物或其药学上可接受的盐溶解于dmf或乙腈中，获得溶液，将所述溶液在温度为30-40℃的条件下超声处理1-2小时，获得所述囊泡。在一些实施方案中，前述式a或式i所示化合物或其药学上可接受的盐的质量与所述dmf或乙腈的体积的比为1mg：1ml。
[0334]
在本发明的第九方面，本发明提供了预防和/或治疗疾病的方法，或者抑制病毒的方法，其包括给予有需要的受试者预防和/或治疗有效量的式a所示化合物或其立体异构体、其前药、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，
[0335]
所述疾病为冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)感染所致疾病，优选地，所述疾病为冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)感染所致肺炎，例如新型冠状病毒sars-cov-2感染所致肺炎covid-2019(例如呼吸系统疾病，包括但不限于单纯性感染如发热、咳嗽和咽痛等、肺炎、急性或严重急性呼吸道感染、低氧性呼吸衰竭及急性呼吸窘迫综合征、脓毒症和脓毒性休克等)；
[0336]
所述抑制病毒为抑制冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)，优选地，所述抑制病毒为抑制病毒的复制或繁殖；
[0337]
富勒烯-rr1r2r3r4r5[0338]
式a
[0339]
其中：
[0340]
所述富勒烯为由五元碳环和六元碳环组成的笼状全碳结构，
[0341]
r选自：
[0342]
(1)h，f，cl，br，i，c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，
[0343]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0344]
1)h，
[0345]
2)其中，
[0346]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、
x2、x3、x4、x5不同时为h，
[0347]
(3)其中，
[0348]
z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h；
[0349]
r1、r2、r3、r4、r5各自独立地选自：
[0350]
(1)其中，
[0351]
z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h，
[0352]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0353]
1)h，
[0354]
2)其中，
[0355]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0356]
在一些实施方案中，所述富勒烯还含有七元碳环和/或四元碳环。
[0357]
在一些实施方案中，所述富勒烯选自c
60
、c
70
、c
84
、c
90
或c
100
。
[0358]
在一些实施方案中，所述富勒烯为空心笼状结构或内包金属、团簇的内嵌结构。
[0359]
在一些实施方案中，所述富勒烯为c
60
，且所述富勒烯为空心笼状结构。
[0360]
在一些实施方案中，所述化合物为以下通式的化合物：
[0361][0362]
其中：
[0363]
r选自：
[0364]
(1)h，f，cl，br，i，c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，优选选自f，cl，br，i，c1-c4烷基，更优选选自cl，甲基，
[0365]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0366]
1)h，
[0367]
2)其中，
[0368]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h，
[0369]
(3)其中，
[0370]
z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h；
[0371]
r1、r2、r3、r4、r5各自独立地选自：
[0372]
(1)其中，
[0373]
z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h，
[0374]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0375]
1)h，
[0376]
2)其中，
[0377]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0378]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0379]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0380]
在一些具体实施方案中，r的定义中，z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h。
[0381]
在一些实施方案中，r选自：
[0382]
(1)h，f，cl，br，i，c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，优选选自f，cl，br，i，c1-c4烷基，更优选选自cl，甲基，
[0383]
(2)其中，y1、y2、y3、y4、y5各自独立地选自以下，且y1、y2、y3、y4、y5不同时为h：
[0384]
1)h，
[0385]
2)其中，
[0386]
x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0387]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0388]
在一些具体实施方案中，r的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0389]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h。
[0390]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，且z1、z2、z3、z4、z5不同时为h。
[0391]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0392]
在一些具体实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5的定义中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0393]
在一些实施方案中，r选自：
[0394]
(1)h，f，cl，br，i，c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，优选选自f，cl，br，i，c1-c4烷基，更优选选自cl，甲基，
[0395]
(2)其中，
[0396]
y3为其中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0397]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0398]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0399]
在一些具体实施方案中，y3为其中，x3为被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，x3为被1个羧基取代的c1-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，x3为
[0400]
在一些实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5各自独立地选自：
[0401]
(1)其中，各z3独立地选自被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，
[0402]
(2)其中，
[0403]
y3为其中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0404]
在一些具体实施方案中，各z3独立地选自被1个羧基取代的c1-c6烷基。
[0405]
在一些具体实施方案中，各z3独立地选自
[0406]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，被1个羧基取代的c1-c6烷基，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0407]
在一些具体实施方案中，x1、x2、x3、x4、x5各自独立地选自h，且x1、x2、x3、x4、x5不同时为h。
[0408]
在一些具体实施方案中，y3为其中，各x3独立地选自被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，各x3独立地选自被1个羧基取代的c1-c6烷基。在一些优选的具体实施方案中，各x3均为
[0409]
在一些实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5均为：
[0410]
其中，
[0411]
各z3均为被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，
[0412]
y3为其中，各x3均为被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基。
[0413]
在一些具体实施方案中，各z3均为被1个羧基取代的c1-c6烷基。
[0414]
在一些具体实施方案中，各z3均为
[0415]
在一些具体实施方案中，各x3均为被1个羧基取代的c1-c6烷基。
[0416]
在一些具体实施方案中，各x3均为
[0417]
在一些实施方案中，式i所示化合物选自以下：
[0418]
[0419]
[0420][0421]
在本发明的第十方面，本发明提供了预防和/或治疗疾病的方法，或者抑制病毒的方法，其包括给予有需要的受试者预防和/或治疗有效量的药物组合物或囊泡，所述药物组合物包含前述式a或式i所示化合物或其立体异构体、其前药、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，或者前述方法制备的化合物，以及任选的药学上可以接受的载体或赋形剂；所述囊泡的直径为40-140nm(如50、60或70nm)，所述囊泡由前述式a或式i所示化合物或其药学上可接受的盐形成；
[0422]
所述疾病为冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)感染所致疾病，优选地，所述疾病为冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)感染所致肺炎，例如新型冠状病毒sars-cov-2感染所致肺炎covid-2019(例如呼吸系统疾病，包括但不限于单纯性感染如发热、咳嗽和咽痛等、肺炎、急性或严重急性呼吸道感染、低氧性呼吸衰竭及急性呼吸窘迫综合征、脓毒症和脓毒性休克等)；
[0423]
所述抑制病毒为抑制冠状病毒(如新型冠状病毒(sars-cov-2)，rvsv-sars2假冠状病毒)，优选地，所述抑制病毒为抑制病毒的复制或繁殖。
[0424]
在一些实施方案中，所述药物组合物为用于口服的丸剂、片剂、胶囊、水溶液或水悬浮液，用于眼部局部用药的微粉化悬浮液或溶液的制剂形式，用于皮肤或粘膜局部用药的膏剂、软膏、洗剂、喷剂或霜剂制剂形式，或用于注射的无菌注射水或油悬浮液或无菌注射溶液。
[0425]
在一些实施方案中，所述囊泡是通过如下方法形成的：将前述式a或式i所示化合物或其药学上可接受的盐溶解于dmf或乙腈中，获得溶液，将所述溶液在温度为30-40℃的条件下超声处理1-2小时，获得所述囊泡。在一些实施方案中，前述式a或式i所示化合物或其药学上可接受的盐的质量与所述dmf或乙腈的体积的比为1mg：1ml。
[0426]
除非特殊说明，上述基团和取代基具有药物化学领域的普通含义。
[0427]
在本说明书的各部分，本发明公开化合物的取代基按照基团种类或范围公开。特别指出，本发明包括这些基团种类和范围的各个成员的每一个独立的次级组合。例如，术语“c1-c6烷基”特别指独立公开的甲基、乙基、c3烷基、c4烷基、c5烷基和c6烷基。
[0428]
另外，需要说明的是，除非以其他方式明确指出，在本文中通篇采用的描述方式“各
…
独立地为/选自”和
“…
各自独立地为/选自”可以互换，均应做广义理解，其既可以是指在不同基团中，相同或不同的符号之间所表达的具体选项之间互相不影响，也可以表示在相同的基团中，相同或不同的符号之间所表达的具体选项之间互相不影响。
[0429]
例如，r1、r2、r3、r4、r5各自独立地为其中，z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基。其中，“r1、r2、r3、r4、r5各自独立地为”，其表示，不同基团r1、r2、r3、r4、r5之间所表达的具体选项之间互相不影响，可以相同，也可以不同。“z1、z2、z3、z4、z5各自独立地选自h，被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基”，其表示，相同基团(如r1)中，不同符号z1、z2、z3、z4、z5之间所表达的具体选项之间互相不影响，可以相同，也可以不同；且不同基团r1、r2、r3、r4、r5之间，相同符号(如z1)所表达的具体选项之间互相不影响，可以相同，也可以不同。
[0430]
另外，还需要说明的是，
“…
均为”或“各
…
均为”是指在不同基团中，相同或不同符号所表达的具体选项相同，或者，在相同的基团中，相同或不同符号所表达的具体选项相同。
[0431]
例如，r1、r2、r3、r4、r5均为其中，各z3均为被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基。其中，“r1、r2、r3、r4、r5均为”，其表示，不同基团r1、r2、r3、r4、r5之间所表达的具体选项相同。“各z3均为被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基”，其表示，不同基团r1、r2、r3、r4、r5之间，相同符号z3所表达的具体选项相同，均为被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基，例如，均为
[0432]
术语“c
1-c6烷基”指的是任意的含有1-6个碳原子的直链或支链基团，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、叔戊基、正己基等。
[0433]
术语“c
2-c6烷基”指的是任意的含有2-6个碳原子的直链或支链基团，例如乙基、正
丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、叔戊基、正己基等。
[0434]
术语“c
1-c4烷基”指的是任意的含有1-4个碳原子的直链或支链基团，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基等。
[0435]
术语“被1个、2个或3个羧基取代的c1-c6烷基”是指c1-c6烷基骨架中的氢原子被1个、2个或3个羧基取代所成的基团，例如，其中，c1-c6烷基的定义如前所述。羧基为-cooh。
[0436]
术语“烷氧基”指的是任意上述烷基(例如c
1-c6烷基、c
1-c4烷基等)，其通过氧原子(-o-)连接到分子的其余部分。
[0437]
如本文所使用，除非另外说明，术语“前药”是指可以在生物学条件(体外或体内)下水解、氧化或进行其他反应以提供本发明的化合物的衍生物。前药仅在生物学条件下经过该反应成为活性化合物，或者它们在它们不反应的形式中具有活性。通常可以使用公知的方法制备前药，例如burger's medicinal chemistry and drug discovery(1995)172-178,949-982(manfred e.wolff编,第5版)中描述的那些方法。
[0438]
如本文所使用，术语“式a或式(i)化合物的药学上可以接受的盐”是由式a或式(i)化合物与有机碱或无机碱(如氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾、氢氧化钙、氢氧化镁、氢氧化锌、氨水)发生反应形成的盐。在一些实施方案中，“式a或式(i)化合物的药学上可以接受的盐”为式a或式(i)化合物的钾、钠、镁、钙、锌盐。在一些具体实施方案中，“式a或式(i)化合物的药学上可以接受的盐”为式a或式(i)化合物的钾盐。
[0439]
药学上可以接受的盐可使用本领域熟知的标准程序获得，例如，通过将足量的碱性化合物和提供药学上可以接受的阴离子的合适的酸反应。
[0440]
本文使用的术语“治疗”一般是指获得需要的药理和/或生理效应。该效应根据完全或部分地预防疾病或其症状，可以是预防性的；和/或根据部分或完全稳定或治愈疾病和/或由于疾病产生的副作用，可以是治疗性的。本文使用的“治疗”涵盖了对患者疾病的任何治疗，包括：(a)预防易感染疾病或症状但还没诊断出患病的患者所发生的疾病或症状；(b)抑制疾病的症状，即阻止其发展；或(c)缓解疾病的症状，即，导致疾病或症状退化。
[0441]
按照本发明的一种具体技术方案，所述化合物、其立体异构体、其前药、或者其药学上可接受的盐或药学上可接受的溶剂合物，其中所述化合物为下面实施例中所述化合物之一。
[0442]
另一方面，本发明提供了药物组合物，其包含上述任一技术方案所述的化合物、其立体异构体、其前药、或者其药学上可接受的盐或药学上可接受的溶剂合物，和药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
[0443]
制备各种含有一定量的活性成分的药物组合物的方法是已知的，或根据本发明的公开内容对于本领域技术人员是显而易见的。如remington’s pharmaceutical sciences,martin,e.w.,ed.,mack publishing company,19th ed.(1995)所述，制备所述药物组合物的方法包括掺入适当的药学赋形剂、载体、稀释剂等。
[0444]
以已知的方法制造本发明的药物制剂，包括常规的混合、溶解或冻干方法。本发明的化合物可以制成药物组合物，并向患者以适于选定的施用方式的各种途径施用，例如，口服或肠胃外(通过静脉内、肌内、局部或皮下途径)或喷涂于皮肤、粘膜等部位。
[0445]
因此，本发明的化合物结合药学上可以接受的载体(如惰性稀释剂或可同化的可食用的载体)可以全身施用，例如，口服。它们可以封闭在硬或软壳的明胶胶囊中，可以压为片剂。对于口服治疗施用，活性化合物可以结合一种或多种赋形剂，并以可吞咽的片剂、颊含片剂、含片、胶囊剂、酏剂、悬浮剂、糖浆、圆片等的形式使用。这种组合物和制剂应该包含至少0.1％的活性化合物。这种组合物和制剂的比例当然可以变化，可以占给定的单位剂型重量的大约1％至大约99％。在这种治疗有用的组合物中，活性化合物的量使得能够获得有效剂量水平。
[0446]
片剂、含片、丸剂、胶囊剂等也可以包含：粘合剂，如黄蓍胶、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶；赋形剂，如磷酸氢二钙；崩解剂，如玉米淀粉、马铃薯淀粉、藻酸等；润滑剂，如硬脂酸镁；和甜味剂，如蔗糖、果糖、乳糖或阿司帕坦；或调味剂，如薄荷、冬青油或樱桃香味。当单位剂型是胶囊时，除了上面类型的材料，它还可以包含液体载体，如植物油或聚乙二醇。各种其他材料可以存在，作为包衣，或以其他方式改变固体单位剂型的物理形式。例如，片剂、丸剂或胶囊剂可以用明胶、蜡、虫胶或糖等包衣。糖浆或酏剂可以包含活性化合物，蔗糖或果糖作为甜味剂，对羟苯甲酸甲酯或对羟苯甲酸丙酯作为防腐剂，染料和调味剂(如樱桃香料或桔子香料)。当然，用于制备任何单位剂型的任何材料应该是药学上可以接受的且以应用的量基本上无毒。此外，活性化合物可以掺入缓释制剂和缓释装置中。
[0447]
活性化合物也可以通过输注或注射来静脉内或腹膜内施用。可以制备活性化合物或其盐的水溶液，任选地混和无毒的表面活性剂。也可以制备在甘油、液体聚乙二醇、甘油三乙酸酯及其混合物以及油中的分散剂。在普通的储存和使用条件下，这些制剂包含防腐剂以防止微生物生长。
[0448]
适于注射或输注的药物剂型可以包括包含适于无菌的可注射或可输注的溶液或分散剂的即时制剂的活性成分(任选封装在脂质体中)的无菌水溶液或分散剂或无菌粉末。在所有情况下，最终的剂型在生产和储存条件下必须是无菌的、液体的和稳定的。液体载体可以是溶剂或液体分散介质，包括，例如水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇、液体聚乙二醇等)、植物油、无毒的甘油酯及其合适的混合物。可以维持合适的流动性，例如，通过脂质体的形成，通过在分散剂的情况下维持所需的粒子大小，或通过表面活性剂的使用。可以通过各种抗细菌剂和抗真菌剂(如对羟苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等)产生预防微生物的作用。在许多情况下，优选包括等渗剂，如糖、缓冲剂或氯化钠。通过使用延缓吸收剂的组合物(例如，单硬脂酸铝和明胶)可以产生可注射的组合物的延长吸收。
[0449]
通过将合适的溶剂中的需要量的活性化合物与需要的上面列举的各种其他成分结合，然后进行过滤灭菌，制备无菌可注射溶液。在用于制备无菌注射溶液的无菌粉末的情况下，优选的制备方法是真空干燥和冷冻干燥技术，这会产生活性成分加上任何另外需要的以前无菌过滤溶液中存在的成分的粉末。
[0450]
有用的固体载体包括粉碎的固体(如滑石、粘土、微晶纤维素、二氧化硅、氧化铝等)。有用的液体载体包括水、乙醇或乙二醇或水-乙醇/乙二醇混合物，本发明的化合物可以任选在无毒的表面活性剂的帮助下以有效含量溶解或分散在其中。可以加入佐剂(如香味)和另外的抗微生物剂来优化对于给定用途的性质。
[0451]
增稠剂(如合成的聚合物、脂肪酸、脂肪酸盐和酯、脂肪醇、改性纤维素或改性无机材料)也可和液体载体用于形成可涂覆的糊剂、凝胶、软膏、肥皂等，直接用于使用者的皮肤
上。
[0452]
上述制剂可以以单位剂型存在，该单位剂型是含有单位剂量的物理分散单元，适于向人体和其它哺乳动物体给药。单位剂型可以是胶囊或片剂，或是很多胶囊或片剂。根据所涉及的具体治疗，活性成分的单位剂量的量可以在大约0.1到大约1000毫克或更多之间进行变化或调整。
[0453]
此外，还包括各种药物新剂型如乳脂质体、微球和纳米球的应用，如使用微粒分散体系包括聚合物胶束(polymeric micelles)、纳米乳(nanoemulsion)、亚微乳(submicroemuls微囊(microcapsule)、微球(microsphere)、脂质体(liposomes)和类脂囊泡(niosomes)(又称非离子表面活性剂囊泡)等制备的药剂。
[0454]
在本发明中，“受试者”指脊椎动物。在某些实施方案中，脊椎动物指哺乳动物。哺乳动物包括，但不限于，牲畜(诸如牛)、宠物(诸如猫、犬、和马)、灵长类动物、小鼠和大鼠。在某些实施方案中，哺乳动物指人。
[0455]
在本发明中，“有效量”指在必需的剂量和时间上有效实现期望的治疗或预防效果的量。本发明的物质/分子的“治疗有效量”可根据诸如个体的疾病状态、年龄、性别和体重及该物质/分子在个体中引发期望应答的能力等因素而变化。治疗有效量还涵盖该物质/分子的治疗有益效果胜过任何有毒或有害后果的量。“预防有效量”指在必需的剂量和时间上有效实现期望的预防效果的量。通常而非必然，由于预防剂量是在疾病发作之前或在疾病的早期用于受试者的，因此预防有效量会低于治疗有效量。
附图说明
[0456]
图1是本发明囊泡结构示意图；
[0457]
图2表示本发明实施例的富勒烯芳基羧酸衍生物4(化合物4)的钾盐的浓度为109.2μm时绿猴肾细胞存活结果；
[0458]
图3表示本发明实施例的富勒烯芳基羧酸衍生物4(化合物4)的钾盐的浓度为54.6μm时对新型冠状病毒(sars-cov-2)的抑制结果(平行3次)；
[0459]
图4表示本发明实施例的绿猴肾细胞在无病毒感染和无富勒烯芳基羧酸衍生物4(化合物4)的钾盐的对照结果；
[0460]
图5表示本发明实施例的绿猴肾细胞在无富勒烯芳基羧酸衍生物4(化合物4)的钾盐下感染新型冠状病毒(sars-cov-2)的对照结果；
[0461]
图6是本发明实施例的囊泡sem电镜图；
[0462]
图7是本发明另一实施例的囊泡sem电镜图；
[0463]
图8是本发明另一实施例的囊泡sem电镜图。
具体实施方式
[0464]
下面通过具体实施例详细描述本发明的实施方式，但是无论如何它们不能解释为对本发明的限制。
[0465]
本发明的目的在于提供水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物及其在制备预防或治疗抗冠状病毒的药物中的应用。
[0466]
具体而言，为解决本发明的技术问题，采用如下技术方案：
[0467][0468]
其中，n为1-6中的任意整数。
[0469]
在一些实施方案中，所述的冠状病毒不限于新型冠状病毒(sars-cov-2)。
[0470]
在一些实施方案中，所述的药物是以结构式(o)所示的水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物作为有效成分的药物。
[0471]
在一些实施方案中，所述的药物是以结构式(o)所示的水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物作为有效成分的单体化合物。
[0472]
在一些实施方案中，所述药物为结构式(o)所示的水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物和药学上可接受的载体或赋形剂。
[0473]
在一些实施方案中，所述的药物剂型是丸剂、片剂、胶囊或口服液。
[0474]
下面结合具体实施例对本发明进行进一步的解释说明。
[0475]
发明人合成了6种水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物(化合物1-6)及其钾盐，并且评估了其钾盐在体外抑制冠状病毒的作用。利用bhk21-hace2细胞和rvsv-sars2假冠状病毒做体外实验，另外还利用非洲绿猴肾细胞(vero e6)和新型冠状病毒(sars-cov-2)做体外实验，以筛选候选化合物。
[0476]
实施例1化合物的制备
[0477]
发明人合成的6种水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物(化合物1-6)的具体分子结构如下表1所示。
[0478]
表1：化合物结构
[0479]
[0480]
[0481][0482]
1、化合物1和化合物2的制备方法参见文献org.biomol.chem.,2019,17,7155
–
7160。
[0483]
2、化合物3的制备方法如下所示。
[0484]
无水无氧条件下，c
60
cl6(200mg,0.214mmol，1equiv)和α-甲基氢肉桂酸(878mg，5.36mmol,25equiv)溶解于50ml硝基苯中。然后加入0.1ml sncl4，在80℃温度下反应2小时。反应结束后，待体系冷却到室温，加入300ml乙腈沉淀，抽滤，将沉淀用正己烷洗涤三次，干燥，然后用氢氧化钾溶液溶解沉淀，过滤去除不溶物，收集滤液。往滤液滴加盐酸，直至ph成中性，会有红色沉淀析出。抽滤，干燥即可得到产物3(化合物3)。
[0485]
化合物3的鉴定：
[0486]1h nmr(500mhz,dmso-d6,δ,ppm)12.14(br.s,5h),7.80(m,4h),7.53(m,4h)，7.36-7.14(m,6h)，7.11-6.97(m,4h)，6.85-6.61(m,2h)，2.96(m,4h)，2.64(m,1h)，2.42-1.89(m,5h)，1.24(m,5h)，1.02(m,12h).
[0487]
13
cnmr(126mhz,dmso-d6,δ,ppm)176.27,148.81,148.76,148.68,148.68,148.49,148.39,148.31,148.25,148.08,148.08,147.95,147.87,147.64,147.29,144.54,144.42,144.41,144.24,144.14,144.07,144.04,143.88,143.69,143.63,139.58,139.14,139.02,138.88,138.86,138.70,138.54,138.39,138.07,135.43,135.20,130.13,129.96,129.75,129.47,129.43,129.38,129.35,129.28,129.18,129.18,128.95,128.90,128.78,128.69,128.54,128.43,128.26,128.20,128.06,128.03,127.91,127.83,127.73,127.52,125.03,77.27,77.27,77.22,77.02,76.76,51.63,41.28,39.22,32.21,29.71,29.33,26.40,23.43.
[0488]
分子式：c
110h57
clo
10
；质谱ms(maldi-tof)，m/z：1571.7。
[0489]
3、化合物4的制备方法如下所示。
[0490]
无水无氧条件下，c
60
cl6(200mg,0.214mmol，1equiv)和5-苯基戊酸(953mg，5.36mmol,25equiv)溶解于50ml硝基苯中。然后加入0.1ml sncl4，在80℃温度下反应2小时。反应结束后，待体系冷却到室温，加入300ml乙腈沉淀，抽滤，将沉淀用正己烷洗涤三次，干燥，然后用氢氧化钾溶液溶解沉淀，过滤去除不溶物，收集滤液。往滤液滴加盐酸，直至ph成中性，会有红色沉淀析出。抽滤，干燥即可得到产物4(化合物4)。
[0491]
化合物4的鉴定：
[0492]1h nmr(500mhz,dmso-d6,δ,ppm)11.96(br.s,5h),7.72(m,1h),7.54(m,3h),7.47-7.24(m,3h),7.13(m,6h),7.00(m,2h),6.85(m,3h),6.67(m,2h),2.57(m,3h),2.46(m,4h),2.21(m,8h),2.15(m,3h),1.55(m,4h),1.48(m,14h),1.23(m,4h).
[0493]
13
cnmr(126mhz,dmso-d6,δ,ppm)δ174.83,174.78,156.80,156.66,155.33,154.68,153.07,151.92,151.37,150.95,148.49,148.43,148.41,148.37,148.19,148.03,147.90,147.88,147.84,147.68,147.53,147.36,147.32,147.18,147.09,147.03,146.90,146.90,146.87,146.82,146.76,146.73,146.69,146.58,146.51,146.40,146.39,146.15,145.96,145.93,145.75,137.28,136.96,136.83,136.52,129.86,129.83,129.72,129.53,129.38,129.33,129.22,129.17,129.05,129.04,128.79,128.70,128.51,128.36,128.17,128.02,127.65,127.63,127.63,127.55,127.38,127.28,127.04,64.81,61.06,60.82,58.69,58.10,57.04,40.80,40.52,40.35,40.19,40.02,39.85,39.69,39.52,34.70,34.01,33.97,30.68,24.37,24.32.
[0494]
分子式c
115h67
clo
10
；质谱ms(maldi-tof)，m/z：1641.7。
[0495]
4、化合物5的制备方法如下所示。
[0496]
无水无氧条件下，c
60
cl6(200mg,0.214mmol，1equiv)和3-(4-联苯基)丙酸甲酯(1.286g，5.36mmol,25equiv)溶解于50ml硝基苯。然后加入0.1ml sncl4，在90℃温度下反应2小时。反应结束后，等体系冷却到室温，反应产物直接用甲苯/甲醇＝85/15(体积比)作为流动相柱层析分离，旋干溶剂后，加入30ml甲苯，30ml乙酸，5ml盐酸，在80℃温度下反应72小时，反应结束后，甲苯萃取有机相，旋干去除甲苯溶剂，加入300ml乙腈沉淀，抽滤，将沉淀用正己烷洗涤三次。干燥，用氢氧化钾溶液溶解沉淀，抽滤，取滤液。滴加盐酸到滤液，直至ph成中性，有红色沉淀析出。抽滤，干燥即可得到产物5(化合物5)。
[0497]
化合物5的鉴定：
[0498]1h nmr(500mhz,dmso)δ12.05(br.s,5h),8.04-7.37(m 20h),7.25(m,5h),7.18
(m,5h),3.37(m,10h),2.81(m,10h),2.30(m,5h),1.23(m,5h).
[0499]
13
c nmr(126mhz,dmso)δ174.13,174.11,150.68,150.23,149.75,149.59,149.03,148.81,148.67,148.34,148.07,147.81,147.53,147.35,147.21,146.69,146.23,145.70,145.55,145.15,144.74,144.59,144.15,143.85,143.52,143.16,142.84,142.61,142.52,142.08,141.55,141.15,140.92,140.79,140.70,140.63,140.53,140.45,140.28,140.13,140.06,139.68,139.46,139.30,138.96,138.57,137.89,137.80,137.50,136.48,133.43,132.63,132.17,130.58,129.48,129.35,129.26,129.11,129.03,128.94,128.79,128.65,127.21,127.07,127.01,126.85,126.75,126.70,125.95,125.76,40.52,40.35,40.18,40.02,39.85,39.68,39.52,37.82,35.50,30.42,29.49,26.33,22.70,21.51,20.90.
[0500]
分子式：c
135h65
clo
10
质谱(maldi-tof)，m/z：1847.3
[0501]
5、化合物6的制备方法如下所示。
[0502]
无水无氧条件下，c
60
cl6(200mg,0.214mmol，1equiv)和3-(4-联苯基)丙酸(1.211g，5.36mmol,25equiv)溶解于50ml硝基苯。然后加入0.1ml sncl4，在90℃温度下反应2小时。反应结束后，等体系冷却到室温，加入300ml乙腈沉淀，抽滤，将沉淀用正己烷洗涤三次。干燥，用氢氧化钾溶液溶解沉淀，抽滤，取滤液。滴加盐酸到滤液，直至ph成中性，有红色沉淀析出。抽滤，干燥即可得到产物6(化合物6)。
[0503]
化合物6的鉴定：
[0504]1h nmr(500mhz,dmso)δ12.08(br.s,6h),8.14-7.47(m 24h),7.35-6.78(m,24h),3.37(m,12h),2.77(m,12h),2.30-1.22(m,12h).
[0505]
13
c nmr(126mhz,dmso)δ174.14,174.14,174.12,150.01,149.36,148.77,148.51,148.24,147.58,147.34,147.24,146.80,146.13,145.52,145.05,144.35,144.03,143.94,143.61,143.50,142.84,141.07,140.99,140.90,140.77,140.50,140.48,140.35,140.23,140.13,139.98,139.48,138.46,137.47,137.35,137.21,137.02,136.89,136.79,129.34,129.25,129.22,129.14,129.09,129.06,128.92,127.98,127.31,127.17,127.12,127.07,127.01,126.94,126.89,126.83,126.78,126.73,126.64,126.49,126.33,126.16,116.13,40.48,40.31,40.14,39.98,39.81,39.64,39.48,35.59,35.49,31.74,30.38,29.54,29.48,29.43,29.32,29.29,29.04,27.02.
[0506]
分子式：c
150h78o12
质谱(maldi-tof)，m/z：2072.3
[0507]
6、化合物1-6的钾盐的制备方法如下所示。
[0508]
往富勒烯基多羧酸衍生物1-6(0.07mmol，1equiv)中加入蒸馏水(20ml)，加入无水碳酸钾(24.2mg，0.175mmol，2.5eqiv)，搅拌至完全溶解。然后，溶液用pes注射器过滤器(平均孔径0.45μm)过滤，冷冻干燥8小时，最终得到粉末状钾盐。
[0509]
实施例2毒性评价和药物活性评价
[0510]
1、水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物对vero e6细胞的毒性评价
[0511]
方法：
[0512]
富勒烯芳基羧酸衍生物4的钾盐(即化合物4的钾盐)以水溶解后，完全溶解，橙红色澄清溶液，加入养液过滤后，有少许橙红色析出，震荡均匀溶液澄清。96孔板单层vero e6细胞用磷酸缓冲盐溶液(pbs)洗1次，弃上清。加入倍比稀释的水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物钾盐(即化合物4的钾盐)。正常细胞组每孔加入等体积培养液。37℃、5％co2条件下培养
4-5日。在显微镜下观察和记录细胞病变，计算抑制率。其中培养液为含10％的胎牛血清的dmem培养液。
[0513]
结果：
[0514]
富勒烯芳基羧酸衍生物的4的钾盐(即化合物4的钾盐)的浓度高达109.2μm时，对非洲绿猴肾(vero e6)显示无毒性(见附图2)。
[0515]
2、水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物抗新型冠状病毒(sars-cov-2)药效评价
[0516]
方法：
[0517]
预防用药模式：细胞病变(cpe)减少法
[0518]
单层vero e6细胞用pbs缓冲液洗1次。每孔加入一定浓度的富勒烯芳基羧酸衍生物钾盐，设置对照，在37℃下孵育2小时。用新型冠状病毒(sars-cov-2)对vero e6细胞进行感染，接种约100个tcid50的病毒液，孵育2小时。弃去旧培养液，并用新鲜培养液对细胞继续培养。37℃培养2日后，用一定浓度富勒烯芳基羧酸衍生物钾盐处理的新鲜培养液(保持富勒烯芳基羧酸衍生物钾盐浓度)对细胞继续培养2-3天，在显微镜下观察和记录细胞病变。reed-muench法计算半数有效浓度(ic
50
)。
[0519]
结果：
[0520]
通过非洲绿猴肾细胞(vero)病变抑制法对水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物4的钾盐(即化合物4的钾盐)进行药效评价，对新型冠状病毒(sars-cov-2)的半数有效浓度(ic
50
)约为54.6μm(平行3次实验的抑制结果见附图3，以及对照实验结果见附图4-图5).
[0521]
3、水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物对bhk21-hace2细胞的毒性评价
[0522]
方法：
[0523]
所有水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物的钾盐(即化合物1-6的钾盐)被稀释到1000μm，然后使用系列双倍稀释法制备稀释分析物。将80μl稀释后的富勒烯化合物与20μl的rvsv-sars-2假病毒混合，加入到预先培育好的bhk21-hace2细胞中(每个孔80μl)，孵育12h，将上清液抽出，加入10μl cck-8溶液和100μl培养基的混合液进行细胞培养。2h后测量450nm处的吸光度。吸光度的降低率(％)被用来表示化合物的细胞毒性。
[0524]
结果：
[0525]
细胞毒性实验显示当水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物的钾盐(即化合物1-6的钾盐)的浓度高达1000μm时，对bhk21-hace2细胞显示无毒性。
[0526]
4、水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物抗rvsv-sars2假冠状病毒药效评价
[0527]
方法：
[0528]
将bhk21-hace2细胞铺板，96孔板每孔2x104个细胞，使其12小时后密度可达到70％-80％；水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物的钾盐(即化合物1-6的钾盐，2mm)进行以下稀释：10ul水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物的钾盐(2mm) 90ul dmem使其终浓度为0.2mm，取0.2mm的样品50ul 150ul dmem作为梯度1，取50ul梯度1 100ul dmem作为梯度2，依次3倍稀释，共8个梯度；取各个梯度稀释的水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物的钾盐80ul 20ul rvsv-sars-2(3x10e5pfu/ml)混匀后37
°
孵育1h；吸弃bhk21-hace2细胞上清，加入100ul第3步孵育后的样品：水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物80ul 20ul rvsv-sars-2；12h后拍照观察记录阳性细胞数；记录细胞病变(cpe)。
[0529]
结果：
[0530]
通过bhk21-hace2细胞病变抑制法对水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物的钾盐进行药效评价，对假冠状病毒(rvsv-sars-2)的半数有效浓度(ic
50
)分别为79.6μm，83.7μm，189.3μm，65.8μm，42.2μm，8.5μm(见表2)。
[0531]
表2：bhk21-hace2细胞病变抑制法对水溶性富勒烯芳基羧酸衍生物的钾盐药效评价
[0532][0533]
实施例3富勒烯芳基羧酸衍生物在溶液中以囊泡形式聚集
[0534]
方法：
[0535]
称取粉末富勒烯芳基羧酸衍生物样品1mg溶于1ml溶剂(化合物1-3溶于dmf，化合物4溶于乙腈)中，30-40℃超声1-2小时得到溶有富勒烯芳基羧酸衍生物样品的溶液。然后将样品滴加到硅片上，待溶剂挥发后，在样品表面喷一层10nm左右的铂，然后用扫描电镜观察。
[0536]
结果：
[0537]
富勒烯芳基羧酸衍生物1-6在上述各自溶剂中溶解后可以观察到丁达尔现象，扫描电镜显示化合物1形成囊泡的粒径为60-70nm(如图6所示)；化合物3形成囊泡的粒径为40-50nm(如图7所示)；化合物4形成囊泡的粒径为40nm左右(如图8所示)。表明该类化合物在特定溶液中采取囊泡的聚集方式。