一种低类过敏反应的中药注射液的制作方法

1.本发明属于药物制剂领域，涉及一种低类过敏反应的中药注射液。


背景技术：

2.中药注射液的生产工艺可基本概况为“水提醇沉”“醇提水沉”“蒸馏法”，这些工艺仅对中药材进行简单的提取，其生产工艺过于粗放，会导致植物蛋白、核酸、鞣质等杂质残留，进而对人体产生刺激性。有研究表明，残留在中药注射液中的大分子过敏性杂质是引发中药注射液临床上发生过敏反应的主要原因。


技术实现要素：

3.本发明提供了一种低类过敏反应的中药注射液，包含穿心莲内酯磺化物，该方法简单易行、科学、合理，使成品安全性得到明显提升，可有效控制类过敏反应。本发明通过以下方式实现的：
4.一种低类过敏反应的中药注射液，包含穿心莲内酯磺化物，所述中药注射液的制备方法包括以下步骤：
5.(1)纳滤富集：取穿心莲内酯磺化物的滤液或合并液，采用纳滤富集浓缩，得浓缩液；
6.(2)水沉：将步骤(1)浓缩液中加入注射用水进行水沉，得水沉液；
7.(3)超滤：将步骤(2)的水沉液进行超滤，得超滤液；
8.(4)浓缩：将步骤(3)的超滤液进行真空浓缩，得穿心莲内酯磺化物浓缩液；
9.(5)干燥：将步骤(4)穿心莲内酯磺化物浓缩液干燥即得穿心莲内酯磺化物；
10.(6)制剂配液：用溶剂将穿心莲内酯磺化物溶解，加入其他辅料，调节溶液ph值，再添加溶剂定容，充分搅拌，经微孔滤膜过滤除菌，灌封于安瓿瓶中，灭菌，包装即得穿心莲内酯磺化物注射液。
11.其中，步骤(1)的滤液是通过对穿心莲内酯粉进行磺化、中和、过滤等步骤处理所得；其中，合并液为滤液和洗液合并的液体。
12.优选的，步骤(1)所述的纳滤，纳滤膜截留分子量在200～1000da。
13.优选的，步骤(2)所述的注射用水的量为穿心莲内酯量的10倍-30倍，优选20倍。
14.优选的，步骤(3)所用超滤膜选自二醋酸纤维素膜、三醋酸纤维素膜、氢乙基醋酸纤维膜、聚砜膜、磺化聚砜膜、聚醚砜膜、磺化聚醚砜膜、聚砜酰胺膜、酚酞侧基聚芳砜膜、聚偏氟乙烯膜、聚丙烯腈膜、聚酰亚胺膜、纤维素膜、甲基丙烯酸甲酯-丙烯腈共聚物膜、聚丙烯腈-二醋酸纤维素共混膜以及上述膜的改性膜；更优选的，步骤(3)所用超滤膜聚醚砜膜或聚偏氟乙烯膜。
15.优选的，超滤膜截留分子量为1000～100000；更优选为8000～10000。
16.优选的，超滤膜进口压力为0.1～2.5bar；更优选为0.7～1.0bar。
17.优选的，超滤膜出口压力为0.1～1.5bar；更优选为0.5～0.7bar。
18.优选的，超滤料液温度为10～60℃；更优选为40～50℃。
19.优选的，超滤料液ph控制在4.0～9.0；更优选为5.0～6.0。
20.优选的，超滤前水沉液被浓缩至1/15～1/12；再加水超滤2次。
21.优选的，步骤(4)浓缩温度控制70℃以下，优选为50～60℃，和/或，真空为0.06～0.1mpa，优选0.1mpa。
22.优选的，步骤(5)所述的干燥，干燥方法选自真空干燥、真空带式干燥、冷冻真空干燥、微波干燥中任一种，优选真空干燥；和/或，干燥温度控制在70℃以下，优选55℃～65℃；和/或，微孔滤膜为0.22μm。
23.优选的，步骤(6)所述的溶剂是水、乙醇、丙二醇中的一种或几种混合物，优选溶剂为水。
24.优选的，步骤(6)所述的辅料选自活性炭、苯甲酸钠、枸橼酸、吐温-80、泊洛沙姆、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯(hs15)中的一种或几种，优选辅料为吐温-80或hs15。
25.优选的，步骤(6)所述的ph为4.5-6.5，优选ph为6.0，和/或，所述定容至10mg/ml～100mg/ml，优选定容至25mg/ml。
26.发明有益效果：
27.本发明采用纳滤、水层、超滤、浓缩、干燥组合工艺，可有效去除中药注射液中的大分子及小分子量的鞣质、树脂等杂质，再通过制剂工艺得到穿心莲内酯磺化物注射液，通过对产品类过敏反应检测，表明对产品类过敏反应可明显减小，可以应用于中药注射液的生产，并有效降低中药注射液的安全风险。
具体实施方式
28.以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
29.实施例1滤液或合并液制备
30.a磺化：取无水乙醇置于反应容器内，在冷水浴上加入化学纯比重为1.84的浓硫酸，加入穿心莲内酯粉，充分搅匀，在室温下放置。
31.b中和：放置24小时后，加入乙醇搅匀，在冷水浴上控温50℃，用氢氧化钠溶液中和至ph值为7.0。
32.c过滤：再加入乙醇，搅匀，静置2小时后过滤，滤渣用乙醇洗涤到洗液几乎无色，合并滤液与洗液，即得合并液。
33.实施例2穿心莲内酯磺化物制备
34.取实施例1的合并液，倒入纳滤膜分离设备中，采用截留分子量为300da纳滤膜进行浓缩，得浓缩液。浓缩液中加入穿心莲内酯量20倍量的注射用水进行水沉，得水沉液；水沉液采用聚偏氟乙烯超滤膜截留相对分子量为10000，控制超滤膜进口压力为1.0bar，膜出口压力为0.7bar，料液温度控制为40℃，料液ph控制为6.0，进行超滤，超滤浓缩至料液1/15时，分2次加入料液1/10水超滤，即得超滤液；超滤液控制浓缩温度60℃进行浓缩，浓缩液放入真空干燥箱，控制干燥温度60～65℃，干燥即得穿心莲内酯磺化物。
35.实施例3穿心莲内酯磺化物制备
36.取实施例1的合并液，倒入纳滤膜分离设备中，采用截留分子量为300da纳滤膜进行浓缩，得浓缩液。浓缩液中加入穿心莲内酯量20倍量的注射用水进行水沉，得水沉液；水
沉液采用聚偏氟乙烯超滤膜截留相对分子量为8000，控制超滤膜进口压力为0.7bar，膜出口压力为0.5bar，料液温度控制为50℃，料液ph控制为5.0，进行超滤，超滤浓缩至料液1/12时，分2次加入料液1/10水超滤，即得超滤液；超滤液控制浓缩温度50℃进行浓缩，浓缩液放入真空干燥箱，控制干燥温度55～60℃，干燥即得穿心莲内酯磺化物。
37.实施例4
[0038][0039]
配制方法：称取处方量的实施例2的穿心莲内酯磺化物原料，加入处方量50％的注射用水，搅拌溶解；加入处方下的活性炭，搅拌10min，过滤脱炭，定容至处方量90％；使用盐酸和氢氧化钠溶液调节ph至5.9，定容至处方量；经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，灌装至安瓿瓶中，灭菌，包装即得穿心莲内酯磺化物注射液。
[0040]
实施例5
[0041][0042]
配制方法：称取处方量的实施例3的穿心莲内酯磺化物原料，加入处方量50％的注射用水，搅拌溶解；加入处方下的活性炭，搅拌10min，过滤脱炭，定容至处方量90％；使用盐酸和氢氧化钠溶液调节ph至6.0，定容至处方量；经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，灌装至安瓿瓶中，灭菌，包装即得穿心莲内酯磺化物注射液。
[0043]
实施例6
[0044][0045]
配制方法：称取处方量的实施例3的穿心莲内酯磺化物原料，加入处方下的乙醇、苯甲酸钠及处方量50％的注射用水，搅拌溶解；加入处方下的活性炭，搅拌10min，过滤脱炭，定容至处方量90％；使用盐酸和氢氧化钠溶液调节ph至4.0，定容至处方量；经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，灌装至安瓿瓶中，灭菌，包装即得穿心莲内酯磺化物注射液。
[0046]
实施例7
80及处方量50％的注射用水，搅拌溶解；加入处方下的活性炭，搅拌10min，过滤脱炭，定容至处方量90％；使用盐酸和氢氧化钠溶液调节ph至5.5，定容至处方量；经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，灌装至安瓿瓶中，灭菌，包装即得穿心莲内酯磺化物注射液。
[0058]
实施例11
[0059][0060]
配制方法：称取处方量的实施例2的穿心莲内酯磺化物原料，加入处方下的泊洛沙姆及处方量50％的注射用水，搅拌溶解；加入处方下的活性炭，搅拌10min，过滤脱炭，定容至处方量90％；使用盐酸和氢氧化钠溶液调节ph至5.0，定容至处方量；经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，灌装至安瓿瓶中，灭菌，包装即得穿心莲内酯磺化物注射液。
[0061]
实施例12
[0062][0063]
配制方法：称取处方量的实施例3的穿心莲内酯磺化物原料，加入处方下的丙二醇、hs15及处方量50％的注射用水，搅拌溶解；加入处方下的活性炭，搅拌10min，过滤脱炭，定容至处方量90％；使用盐酸和氢氧化钠溶液调节ph至4.5，定容至处方量；经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，灌装至安瓿瓶中，灭菌，包装即得穿心莲内酯磺化物注射液。
[0064]
实施例13
[0065][0066]
配制方法：称取处方量的实施例2的穿心莲内酯磺化物原料，加入处方下的乙醇、吐温-80及处方量50％的注射用水，搅拌溶解；加入处方下的活性炭，搅拌10min，过滤脱炭，定容至处方量90％；使用盐酸和氢氧化钠溶液调节ph至5.0，定容至处方量；经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，灌装至安瓿瓶中，灭菌，包装即得穿心莲内酯磺化物注射液。
[0067]
实施例14
[0068][0069]
配制方法：称取处方量的实施例3的穿心莲内酯磺化物原料，加入处方量50％的注射用水，搅拌溶解；加入处方下的活性炭，搅拌10min，过滤脱炭，定容至处方量90％；使用盐酸和氢氧化钠溶液调节ph至6.0，定容至处方量；经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，灌装至安瓿瓶中，灭菌，包装即得穿心莲内酯磺化物注射液。
[0070]
实施例15
[0071][0072][0073]
配制方法：称取处方量的实施例2的穿心莲内酯磺化物原料，加入处方下的乙醇及处方量50％的注射用水，搅拌溶解；加入处方下的活性炭，搅拌10min，过滤脱炭，定容至处方量90％；使用盐酸和氢氧化钠溶液调节ph至6.0，定容至处方量；经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，灌装至安瓿瓶中，灭菌，包装即得穿心莲内酯磺化物注射液。
[0074]
实施例16
[0075][0076]
配制方法：称取处方量的实施例3的穿心莲内酯磺化物原料，加入处方下的吐温-80及处方量50％的注射用水，搅拌溶解；加入处方下的活性炭，搅拌10min，过滤脱炭，定容至处方量90％；使用盐酸和氢氧化钠溶液调节ph至5.0，定容至处方量；经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，灌装至安瓿瓶中，灭菌，包装即得穿心莲内酯磺化物注射液。
[0077]
实施例17
[0078][0079]
配制方法：称取处方量的实施例2的穿心莲内酯磺化物原料，加入处方下的丙二醇、泊洛沙姆及处方量50％的注射用水，搅拌溶解；加入处方下的活性炭，搅拌10min，过滤脱炭，定容至处方量90％；使用盐酸和氢氧化钠溶液调节ph至6.2，定容至处方量；经0.22μm
微孔滤膜过滤除菌，灌装至安瓿瓶中，灭菌，包装即得穿心莲内酯磺化物注射液。
[0080]
实施例18
[0081][0082]
配制方法：称取处方量的实施例3的穿心莲内酯磺化物原料，加入处方量50％的注射用水，搅拌溶解；加入处方下的活性炭，搅拌10min，过滤脱炭，定容至处方量90％；使用盐酸和氢氧化钠溶液调节ph至6.0，定容至处方量；经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，灌装至安瓿瓶中，灭菌，包装即得穿心莲内酯磺化物注射液。
[0083]
实施例19
[0084][0085]
配制方法：称取处方量的实施例2的穿心莲内酯磺化物原料，加入处方下的吐温-80及处方量50％的注射用水，搅拌溶解；加入处方下的活性炭，搅拌10min，过滤脱炭，定容至处方量90％；使用盐酸和氢氧化钠溶液调节ph至5.5，定容至处方量；经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，灌装至安瓿瓶中，灭菌，包装即得穿心莲内酯磺化物注射液。
[0086]
实施例20
[0087][0088]
配制方法：称取处方量的实施例3的穿心莲内酯磺化物原料，加入处方下的吐温-80及处方量50％的注射用水，搅拌溶解；加入处方下的活性炭，搅拌10min，过滤脱炭，定容至处方量90％；使用盐酸和氢氧化钠溶液调节ph至5.5，定容至处方量；经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，灌装至安瓿瓶中，灭菌，包装即得穿心莲内酯磺化物注射液。
[0089]
实施例21
[0090][0091]
配制方法：称取处方量的实施例2的穿心莲内酯磺化物原料，加入处方下的乙醇、
hs15及处方量50％的注射用水，搅拌溶解；加入处方下的活性炭，搅拌10min，过滤脱炭，定容至处方量90％；使用盐酸和氢氧化钠溶液调节ph至6.0，定容至处方量；经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，灌装至安瓿瓶中，灭菌，包装即得穿心莲内酯磺化物注射液。
[0092]
实施例22类过敏反应检测
[0093]
供试品制备：耳廓蓝染取本品适量，用0.8％伊文思蓝溶液(以注射用生理盐水或5％葡萄糖注射液为溶剂)溶解至12.5mg/ml，即得供试品溶液。
[0094]
测定法：在温度22～24℃、相对湿度在40％～70％条件下，取雄性icr小鼠或雄性昆明小鼠，重量23～26g，spf级，适应性饲养1～2天，随机分为供试品组、对照组，每组10只。用电热加热器距离小鼠笼约30cm加热2分钟后，将动物轻柔地固定在小鼠静脉注射固定器上，露出尾巴，用75％酒精棉球轻轻擦拭尾部，使血管扩张可见；用灭菌注射器(1ml，带有5号针头)吸取供试品溶液，注射体积为20ml/kg，针头以一定角度准确刺入尾静脉，以30～40秒的速度注入，注射完毕后，立即用棉球按住注射部位30～60秒；观察30分钟内动物的耳廓蓝染情况，记录每组出现耳廓蓝染的动物数和耳廓蓝染面积比例，按下表进行评分。对照组耳廓蓝染出现可疑阳性及以上反应程度级别的动物数不得大于2只，供试品组出现弱阳性及以上反应程度级别的动物数不得大于3只。
[0095][0096]
取上述实施例4～实施例21所得的穿心莲内酯磺化物注射液，按以上方法进行检测，检测结果如下：
[0097][0098]
结果表明：通过上述工艺所得穿心莲内酯磺化物注射液，类过敏明显降低。