一种治疗风湿的中药组合物及其制备方法与流程

1.本发明属于中药技术领域，具体涉及一种治疗风湿的中药组合物及其制备方法。


背景技术：

2.风湿病是一组侵犯关节、骨骼、肌肉、血管及有关软组织或结缔组织为主的疾病，其中多数为自身免疫性疾病。发病多较隐蔽而缓慢，病程较长，且大多具有遗传倾向。
3.现有的治疗风湿性疾病的药物主要分为以下几类：
4.1.非甾类抗炎药(nsaids)：此类药物的作用，主要为解热，消炎和镇痛，而达到减轻炎症反应和目的。
5.2.肾上腺皮质激素：主要是指糖皮质激素，因为这类药物有抗炎和免疫抑制作用，有较强和快速的消除炎症及炎症反应带来的各种症状，但由于其并非根治药物，长期大量使用可诱发感染，骨质疏松，股骨头坏死，糖尿病，消化性溃疡，高血压，精神异常等。
6.3.改善病情的抗风湿药物(dmards)又称为慢作用抗风湿药物。dmards类的药物包括有抗疟药-氯喹、羟氯喹，柳氮磺胺吡啶，甲氨蝶呤，硫唑嘌呤，环磷酰氨，青霉胺，金制剂，环孢素a及来氟米特。此类药物包括许多种类结构不同，作用各异的药物。它们的共性是起效比较慢，有一定蓄积作用，故停药后，作用消失也较慢，仍可维持一段时间。它们并无直接消炎止痛作用，但通过不同的机制可以起到抗炎及免疫或免疫抑制作用。因而，也可以改善关节肿胀，疼痛，僵直和减轻系统性症状，降低急性期反应蛋白，血沉。如使用时间较长，也可改善其他免疫指标，如rf，ana等。有的尚可使放射影像得到改善。
7.现有的治疗风湿的药物多为西药制剂，长时间服用副作用较大，且治疗效果不明显。


技术实现要素：

8.本发明的目的是为了提供一种治疗风湿的中药组合物及其制备方法，该中药组合物祛风除湿，通络止痛，对于治疗骨节疼痛及风湿性关节炎效果显著。
9.本发明首先提供一种治疗风湿的中药组合物，按照重量份数计，由下列原料药制成：
10.豨莶草150-250份，防已80-120份，桑寄生100-200份，桑枝100-200份，槐枝80-120份，威灵仙100-200份。
11.优选的是，所述的治疗风湿的中药组合物，按照重量份数计，由下列原料药制成：
12.豨莶草180-220份，防已90-110份，桑寄生120-180份，桑枝120-180份，槐枝90-110份，威灵仙120-180份。
13.优选的是，所述的治疗风湿的中药组合物，按照重量份数计，由下列原料药制成：
14.豨莶草200份，防已100份，桑寄生150份，桑枝150份，槐枝100份，威灵仙150份。
15.本发明还提供一种治疗风湿的中药组合物的制备方法，包括：
16.步骤一：防己处理
17.将防己先粉碎成粗粉，然后超微粉碎20-30min，得到防己细粉，备用；
18.步骤二：豨莶草、威灵仙、桑寄生的处理
19.1)按重量份分别称取豨莶草、威灵仙、桑寄生在60-70℃下干燥3-5h，然后粉粹成粗粉；
20.2)将步骤1)得到的豨莶草、威灵仙、桑寄生粗粉过筛，然后置于混合机中混合均匀，得到混合物，所述的混合速度为20-25转/分，混合时间为8-20min；
21.3)将步骤2)的混合物加入2-3倍量50-70％乙醇均匀润湿后，放置4-6h，然后加入12-14倍量50-70％乙醇进行浸渍，所述的浸渍温度为25-40℃，浸渍时间为45-50h；
22.4)将步骤3)浸渍后的混合物进行渗漉，得到漉液并回收溶剂，所述的渗漉速度为4-5ml/分钟/kg药材，渗漉时间为45-50小时；
23.步骤三：桑枝和槐枝的处理
24.1)按重量份分别将桑枝和槐枝在65-75℃下干燥2-4h，然后粉粹成粗粉；
25.2)将步骤1)得到的桑枝和槐枝粗粉过筛，然后置于混合机中混合均匀，得到混合物，所述的混合速度为25-35转/分，混合时间为5-15min；
26.3)将步骤2)的混合物加水浸泡20-50min，然后煎煮两次，第一次用药材总体积8-15倍量的水煎煮1-3h，第二次用药材总体积6-10倍量的水煎煮1-3h，合并两次煎液，过滤，得到滤液；
27.步骤四：合并
28.1)将步骤二得到的漉液和步骤三得到的滤液混合，然后上大孔树脂进行吸附；
29.2)将吸附后的大孔树脂用纯化水进行冲洗处理，所述纯化水的体积为树脂体积的1-3倍，流速为3-4bv/h；
30.3)将冲洗后的大孔树脂用35-60％的乙醇进行洗脱，收集洗脱液，流速为0.2-1bv/h；
31.4)将步骤3)的洗脱液在60-80℃下进行减压浓缩，浓缩至在50℃下相对密度为1.28～1.31的稠膏；
32.5)在步骤4)得到的稠膏中加入步骤一的防已细粉，置于混合机中混合均匀，所述的混合速度为25-40转/分，混合时间为10-20min，得到治疗风湿的中药组合物。
33.优选的是，所述的步骤一过200-240目筛网。
34.优选的是，所述的步骤二2)中过20-30目筛网。
35.优选的是，所述的步骤二3)中溶剂乙醇的浓度为60％。
36.优选的是，所述的步骤三1)中干燥温度为70℃，干燥时间为3h。
37.优选的是，所述的大孔树脂的型号为d101型。
38.优选的是，所述的步骤四3)的洗脱液在70℃下进行减压浓缩。
39.本发明的药理作用如下：
40.豨莶草：辛、苦，寒。归肝、肾经。功效：祛风湿，通经络，清热解毒，降血压。主治：用于风湿痹痛，肢体麻木；中风，手足不遂；痈肿疮毒，湿疹瘙痒；高血压。
41.防已：味辛、苦，性寒。归膀胱、肺经。功效祛风止痛，利水消肿。主治：用于风湿痹痛，水肿脚气，小便不利，湿疹疮毒。
42.桑寄生：性味：苦甘，平。入肝、肾经。功能主治：补肝肾，强筋骨，除风湿，通经络，益
血，安胎。治腰膝酸痛，筋骨痿弱，偏枯，脚气，风寒湿痹，胎漏血崩，产后乳汁不下。
43.桑枝：桑枝含鞣质，游离的蔗糖、果糖、水苏糖、葡萄糖、麦芽糖、棉子糖、阿拉伯糖、木糖，茎含黄酮成分桑素、桑色烯、环桑索、环桑色烯。木树含桑色素、杨树宁、桑酮、四羟基芪、二氢桑色素、二氢山柰酚。该品含桑辛素c、d心材含桑木素、二氢桑木素、二氢山柰素、2,4,4
′
6-四羟基二苯甲酮及2,3
′
4,4
′
6-五羟基二苯甲酮。还含芪三酚、氧化芪三酚、二氢氧化芪三酚。又谓茎和茎皮含桑木素、桑辛素a、b、e、f、g、h、桑皮素、桑皮色烯素，环桑皮素、环桑皮色烯素及桦皮酸。桑枝性味苦平，入肝经，具有祛风通络之效，常用于风湿关节疼痛、四肢拘挛，尤以上肢麻痹者多用。桑枝还有抗菌作用，能提高淋巴细胞转化率，治疗慢性布氏杆菌病有效，并有显著的降血压作用。
44.槐枝：功能主治为：治崩漏带下，心痛，目赤，痔疮，疥疮。
45.威灵仙：味辛、咸，性温。归膀胱经。功能有祛风湿，通经络的作用。主治用于风湿痹痛，肢体麻木，筋脉拘挛，屈伸不利。
46.本发明的有益效果
47.本发明提供一种治疗风湿的中药组合物及其制备方法，该药物组合物是以豨莶草、防已、桑寄生、桑枝、槐枝和威灵仙为组分，遵循着中药“君臣佐使”的用药原则，得到的中药组合物可以是颗粒剂、丸剂、胶囊剂和片剂，对于治疗风湿疾病效果显著，与现有技术相比，本发明药物组合物中有效成分含量高，生产工艺可行，药物质量标准可控，治疗效果显著，该中药组合物祛风除湿，通络止痛，对于治疗骨节疼痛及风湿性关节炎效果显著。
48.同时，本发明的制备方法简单、工艺参数稳定，通过合理控制制备方法中每个步骤的参数，使各组分达到协同增效的技术效果，提高了该组合物的功效。
附图说明
49.图1为本发明治疗风湿的中药组合物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响；
50.图2为本发明治疗风湿的中药组合物对大鼠足肿胀的影响；
51.图3为本发明治疗风湿的中药组合物对大鼠足肿胀的抑制率(％)。
52.图4为本发明治疗风湿的中药组合物对冰醋酸所致小鼠15min内扭体次数的影响。
53.图5为本发明治疗风湿的中药组合物对雄性小鼠体重的影响。
54.图6为本发明治疗风湿的中药组合物对雌性小鼠体重的影响。
具体实施方式
55.本发明首先提供一种治疗风湿的中药组合物，按照重量份数计，由下列原料药制成：
56.豨莶草150-250份，防已80-120份，桑寄生100-200份，桑枝100-200份，槐枝80-120份，威灵仙100-200份；优选为：豨莶草180-220份，防已90-110份，桑寄生120-180份，桑枝120-180份，槐枝90-110份，威灵仙120-180份；更优选为：豨莶草200份，防已100份，桑寄生150份，桑枝150份，槐枝100份，威灵仙150份。
57.本发明还提供一种治疗风湿的中药组合物的制备方法，包括：
58.步骤一：防己处理
59.将防己先粉碎成粗粉，然后超微粉碎20-30min，优选过200-240目筛网，更优选为
200目，得到防己细粉，备用；
60.步骤二：豨莶草、威灵仙、桑寄生的处理
61.1)按重量份分别称取豨莶草、威灵仙、桑寄生在60-70℃下干燥3-5h，优选为65℃下干燥4h，然后粉粹成粗粉；
62.2)将步骤1)得到的豨莶草、威灵仙、桑寄生粗粉过筛，优选过20-30目筛网，更优选为过24目筛网，然后置于混合机中混合均匀，得到混合物，所述的混合速度为20-25转/分，优选为23转/分，混合时间为8-20min；优选为15min；
63.3)将步骤2)的混合物加入2-3倍量50-70％乙醇均匀润湿后，优选为60％乙醇，放置4-6h，优选为5h，然后加入12-14倍量50-70％乙醇进行浸渍，优选为60％乙醇，所述的浸渍温度为25-40℃，优选为30℃，浸渍时间为45-50h，优选为48h；
64.4)将步骤3)浸渍后的混合物进行渗漉，得到漉液并回收溶剂，所述的渗漉速度为4-5ml/分钟/kg药材，渗漉时间为45-50小时，优选为48h；
65.步骤三：桑枝和槐枝的处理
66.1)按重量份分别将桑枝和槐枝在65-75℃下干燥2-4h，优选为70℃下干燥3h，然后粉粹成粗粉；
67.2)将步骤1)得到的桑枝和槐枝粗粉过筛，然后置于混合机中混合均匀，得到混合物，所述的混合速度为25-35转/分，优选为30转/分，混合时间为5-15min，优选为10min；
68.3)将步骤2)的混合物加水浸泡20-50min，优选为30min，然后煎煮两次，第一次用药材总体积8-15倍量的水煎煮1-3h，优选为10倍量的水煎煮2h，第二次用药材总体积6-10倍量的水煎煮1-3h，优选为8倍量的水煎煮2h，合并两次煎液，过滤，得到滤液；
69.步骤四：合并
70.1)将步骤二得到的漉液和步骤三得到的滤液混合，然后上大孔树脂进行吸附；所述的大孔树脂的型号优选为d101型；
71.2)将吸附后的大孔树脂用纯化水进行冲洗处理，所述纯化水的体积为树脂体积的1-3倍，更优选为2倍，流速为3-4bv/h，优选为3.5bv/h；
72.3)将冲洗后的大孔树脂用35-60％的乙醇进行洗脱，优选为50％的乙醇，收集洗脱液，流速为0.2-1bv/h，优选为0.5bv/h；
73.4)将步骤3)的洗脱液在60-80℃下进行减压浓缩，优选为70℃，浓缩至在50℃下相对密度为1.28～1.31的稠膏；
74.5)在步骤4)得到的稠膏中加入步骤一的防已细粉，置于混合机中混合均匀，所述的混合速度为25-40转/分，优选为30转/分，混合时间为10-20min，优选为15min，得到治疗风湿的中药组合物。
75.本发明的中药组合物可以是颗粒剂、丸剂、胶囊剂和片剂，优选的剂型为胶囊，所有剂型的制备按照本领域常规方法制备即可，没有特殊限制。
76.下面结合具体实施例对本发明做进一步详细的描述，实施例中涉及到的原料均为商购获得。
77.实施例1
78.一种治疗风湿的中药组合物，由下列原料药制成：
79.豨莶草250kg，防已120kg，桑寄生200kg，桑枝200kg，槐枝120kg，威灵仙200kg；
80.一种治疗风湿的中药组合物的制备方法，包括：
81.本发明还提供一种治疗风湿的中药组合物的制备方法，包括：
82.步骤一：防己处理
83.将防己先粉碎成粗粉，然后超微粉碎25min，过200目筛网，得到防己细粉，备用；
84.步骤二：豨莶草、威灵仙、桑寄生的处理
85.1)按重量份分别称取豨莶草、威灵仙、桑寄生在65℃下干燥4h，然后粉粹成粗粉；
86.2)将步骤1)得到的豨莶草、威灵仙、桑寄生粗粉过筛，过24目筛网，然后置于混合机中混合均匀，得到混合物，所述的混合速度为23转/分，混合时间为15min；
87.3)将步骤2)的混合物加入2倍量60％乙醇均匀润湿后，放置5h，然后加入12倍量60％乙醇进行浸渍，所述的浸渍温度为30℃，浸渍时间为48h；
88.4)将步骤3)浸渍后的混合物进行渗漉，得到漉液并回收溶剂，所述的渗漉速度为4ml/分钟/kg药材，渗漉时间为48h；
89.步骤三：桑枝和槐枝的处理
90.1)按重量份分别将桑枝和槐枝在70℃下干燥3h，然后粉粹成粗粉；
91.2)将步骤1)得到的桑枝和槐枝粗粉过筛，然后置于混合机中混合均匀，得到混合物，所述的混合速度为为30转/分，混合时间为10min；
92.3)将步骤2)的混合物加水浸泡30min，然后煎煮两次，第一次用药材总体积10倍量的水煎煮2h，第二次用药材总体积8倍量的水煎煮2h，合并两次煎液，过滤，得到滤液；
93.步骤四：合并
94.1)将步骤二得到的漉液和步骤三得到的滤液混合，然后上大孔树脂进行吸附；所述的大孔树脂的型号优选为d101型；
95.2)将吸附后的大孔树脂用纯化水进行冲洗处理，所述纯化水的体积为树脂体积的2倍，流速为3.5bv/h；
96.3)将冲洗后的大孔树脂用50％的乙醇进行洗脱，收集洗脱液，流速为0.5bv/h；
97.4)将步骤3)的洗脱液在70℃下进行减压浓缩，浓缩至在50℃下相对密度为1.28～1.31的稠膏；
98.5)在步骤4)得到的稠膏中加入步骤一的防已细粉，置于混合机中混合均匀，所述的混合速度为30转/分，混合时间为15min，得到治疗风湿的中药组合物。
99.将上述中药组合物加入适量淀粉，混匀，制粒，装入胶囊，即得胶囊剂。
100.实施例2
101.一种治疗风湿的中药组合物，由下列原料药制成：
102.豨莶草150kg，防已80kg，桑寄生100kg，桑枝100kg，槐枝80kg，威灵仙100kg；
103.实施例2的一种治疗风湿的中药组合物的制备方法同实施例1。
104.实施例3
105.一种治疗风湿的中药组合物，由下列原料药制成：
106.豨莶草200kg，防已100kg，桑寄生150kg，桑枝150kg，槐枝100kg，威灵仙150kg；
107.实施例3的一种治疗风湿的中药组合物的制备方法同实施例1。
108.实施例4
109.一种治疗风湿的中药组合物，由下列原料药制成：
110.豨莶草180kg，防已90kg，桑寄生120kg，桑枝120kg，槐枝90kg，威灵仙120kg；
111.实施例4的一种治疗风湿的中药组合物的制备方法同实施例1。
112.实施例5
113.一种治疗风湿的中药组合物，由下列原料药制成：
114.豨莶草220kg，防已110kg，桑寄生180kg，桑枝180kg，槐枝110kg，威灵仙180kg；
115.实施例5的一种治疗风湿的中药组合物的制备方法同实施例1。
116.实施例6
117.一种治疗风湿的中药组合物，由下列原料药制成：
118.豨莶草200kg，防已100kg，桑寄生150kg，桑枝150kg，槐枝100kg，威灵仙150kg；
119.实施例6的一种治疗风湿的中药组合物的制备方法同实施例1，不同之处在于，步骤二3)中，浸渍温度为25℃，浸渍时间为50h。
120.实施例7
121.一种治疗风湿的中药组合物，由下列原料药制成：
122.豨莶草200kg，防已100kg，桑寄生150kg，桑枝150kg，槐枝100kg，威灵仙150kg；
123.实施例7的一种治疗风湿的中药组合物的制备方法同实施例1，不同之处在于，步骤二4)中，渗漉速度为5ml/分钟/kg药材，渗漉时间为50小时。
124.药理实验
125.一、实施例3制备得到的胶囊剂(命名为豨莶风湿胶囊)对小鼠的抗炎作用研究，具体为：
126.1实验材料
127.spf级icr小鼠，50只，18～22g，雄性。由辽宁长生生物技术股份有限公司提供，许可证号scxk(辽)2020-0001，合格证号211002300068944。
128.动物均在沈阳药科大学实验动物中心饲养，保持环境温度20℃～24℃，湿度50％左右，自由摄食饮水，12小时循环光照。
129.万通筋骨片来源为通化万通药业股份有限公司。
130.2实验方法
131.2.1实验动物分组及给药方案
132.豨莶风湿胶囊实验动物分组及给药剂量见表1。
133.表1豨莶风湿胶囊动物分组及给药剂量
134.组别动物数量(只)剂量(g/kg)模型组10
‑‑‑‑‑
万通筋骨片组100.40豨莶风湿胶囊低剂量组100.06豨莶风湿胶囊中剂量组100.12豨莶风湿胶囊高剂量组100.24
135.注：豨莶风湿胶囊低剂量为人临床等效量，万通筋骨片剂量为2倍人临床等效量。
136.2.2药物配制
137.取豨莶风湿胶囊，取其内容物，于研钵中研磨后，加入娃哈哈饮用纯净水中，分别配成浓度为11.88mg/ml，23.76mg/ml，47.52mg/ml的混悬溶液。
138.取万通筋骨片，于研钵中研碎，加入娃哈哈饮用纯净水中，配成浓度为39.92mg/ml的混悬溶液。
139.2.3实验步骤
140.万通筋骨片组、中药复方低、中、高剂量组以10ml/kg灌胃给药，给药剂量如表1所示，每天1次，连续15天；模型组小鼠灌胃同容积娃哈哈饮用纯净水，每天1次，连续15天。末次给药1h后各组于右耳廓正反两面均匀涂二甲苯20μl以建立耳肿胀模型，左耳不做处理作为自身对照，30min后用直径为8mm的打孔器取下两边耳廓相同部位的耳片。万分之一天平精确称重，按照以下公式计算并记录小鼠耳肿胀度和小鼠耳肿胀抑制率：
141.耳肿胀度＝右耳片重量-左耳片重量；
142.耳肿胀抑制率(％)＝(模型组耳肿胀度-给药组耳肿胀度)/模型组耳肿胀度
×
100％
143.2.4统计学方法
144.实验结果采用ibm spss 22.0软件进行统计分析。对于符合方差齐性的数据，选择方差分析；方差不齐时，先进行数据转换，若转换后满足方差齐性，采用graphpad prism 9.0软件进行统计分析。实验数据用“mean
±
sem”表示，p＜0.05表示有显著差异。
145.3实验结果
146.实验结果表明，与模型组相比，豨莶风湿胶囊低、中、高剂量组对二甲苯致小鼠耳廓肿胀均具有显著的抑制作用(p《0.05)。结果见表2、图1。图1豨莶风湿胶囊对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响，与模型组相比，
*
p《0.05，
***
p《0.001。
147.表2豨莶风湿胶囊对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(mean
±
sem)
[0148][0149]
二、豨莶风湿胶囊对大鼠的抗炎作用研究
[0150]
spf级sd大鼠，50只，180～220g，雄性。由辽宁长生生物技术股份有限公司提供，许可证号scxk(辽)2020-0001，合格证号211002300069939。
[0151]
动物均在沈阳药科大学实验动物中心饲养，保持环境温度20℃～24℃，湿度50％左右，自由摄食饮水，12小时循环光照。
[0152]
万通筋骨片来源为通化万通药业股份有限公司。
[0153]
2实验方法
[0154]
2.1实验动物分组及给药方案
[0155]
豨莶风湿胶囊三个中药复方实验动物分组及给药剂量见表3。
[0156]
表3豨莶风湿胶囊动物分组及给药剂量
[0157]
组别动物数量(只)剂量(g/kg)模型组10
‑‑‑‑‑
万通筋骨片组80.31豨莶风湿胶囊0.05g/kg组80.05豨莶风湿胶囊0.09g/kg组80.09豨莶风湿胶囊0.18g/kg组80.18豨莶风湿胶囊0.37g/kg组80.37
[0158]
注：豨莶风湿胶囊0.09g/kg组为人临床等效量，万通筋骨片剂量为2倍人临床等效量。
[0159]
2.2药物配制
[0160]
取豨莶风湿胶囊，取其内容物，于研钵中研磨后，加入娃哈哈饮用纯净水中，分别配成4.61mg/ml，9.22mg/ml，18.44mg/ml，36.88mg/ml的混悬溶液。
[0161]
取万通筋骨片，于研钵中研碎，加入娃哈哈饮用纯净水中，配成30.98mg/ml的混悬溶液。
[0162]
2.3实验步骤
[0163]
模型组小鼠灌胃同容积娃哈哈饮用纯净水，每天1次，连续26天。万通筋骨片组、豨莶风湿胶囊各剂量组以10ml/kg灌胃给药，给药剂量如表3所示，每天1次，连续15天；模型组小鼠灌胃同容积娃哈哈饮用纯净水，每天1次，连续15天。末次给药1h后除模型组，各组于大鼠右后足踝关节，足跟以及两者中间共三处用记号笔环绕标记，细线测量三者周长，于尺上读数并求和，记为0min大鼠足周长。在大鼠右后足注射新鲜蛋清0.1ml，分别与注射后15min、30min、45min以及60min测量三处足周长并求和。
[0164][0165][0166]
2.4统计学方法
[0167]
实验结果采用ibm spss 22.0软件进行统计分析。对于符合方差齐性的数据，选择方差分析；方差不齐时，先进行数据转换，若转换后满足方差齐性，采用graphpad prism 9.0软件进行统计分析。实验数据用“mean
±
sem”表示，p＜0.05表示有显著差异。
[0168]
3实验结果
[0169]
实验结果表明，致炎后，万通筋骨片组，豨莶风湿胶囊0.09g/kg组和0.18g/kg组大鼠足肿胀程度明显低于模型组，且随着时间延长，作用效果越明显(p《0.01)。豨莶风湿胶囊0.04g/kg组在致炎后45min，表现出减轻大鼠足肿胀的作用(p《0.05)。0.37g/kg剂量组在致炎后30min表现出明显抑制大鼠足肿胀的作用,随着时间延长，肿胀程度明显低于模型组(p《0.05)。见表4和5，图2豨莶风湿胶囊对大鼠足肿胀的影响。与模型组相比，
*
p《0.05，
**
p《0.01，
***
p《0.001。图3豨莶风湿胶囊对大鼠足肿胀的抑制率(％)。
[0170]
表4豨莶风湿胶囊对新鲜蛋清致大鼠足肿胀的影响(mean
±
sem)
[0171][0172]
表5豨莶风湿胶囊对新鲜蛋清致大鼠足肿胀的抑制率(％)
[0173][0174]
三、豨莶风湿胶囊镇痛作用研究
[0175]
spf级icr小鼠，50只，18～22g，雄性。由辽宁长生生物技术股份有限公司提供，许可证号scxk(辽)2020-0001，合格证号211002300068944。
[0176]
动物均在沈阳药科大学实验动物中心饲养，保持环境温度20℃～24℃，湿度50％左右，自由摄食饮水，12小时循环光照。
[0177]
沈阳红药来源为沈阳红药集团股份有限公司。
[0178]
2实验方法
[0179]
2.1实验动物分组及给药方案
[0180]
豨莶风湿胶囊中药复方实验动物分组及给药剂量见表6。
[0181]
表6豨莶风湿胶囊动物分组及给药剂量
[0182]
[0183]
注：豨莶风湿胶囊中剂量为人临床等效量，沈阳红药剂量为1.5倍人临床等效量。
[0184]
2.2药物配制
[0185]
取豨莶风湿胶囊，取其内容物，于研钵中研磨后，加入娃哈哈饮用纯净水中，分别配成浓度为5.94mg/ml，11.88mg/ml，23.76mg/ml的混悬溶液。
[0186]
取沈阳红药片，于研钵中研碎，加入娃哈哈饮用纯净水中，配成浓度为18.54mg/ml的混悬溶液。
[0187]
2.3实验步骤
[0188]
沈阳红药组、中药复方低、中、高剂量组以10ml/kg灌胃给药，给药剂量如表6所示，每天1次，连续15天；模型组小鼠灌胃同容积娃哈哈饮用纯净水，每天1次，连续15天。末次给药60min后，向小鼠腹腔内注射0.2ml 0.6％的冰醋酸溶液，观察记录注射后15min内小鼠出现腹部内凹，躯干与后肢伸张，臀部高起等扭体反应的次数，按下式计算药物对扭体反应的抑制率：
[0189]
抑制率(％)＝(模型组扭体均数-给药组扭体均数)/模型组扭体均数
×
100％
[0190]
2.4统计学方法
[0191]
实验结果采用ibm spss 22.0软件进行统计分析。对于符合方差齐性的数据，选择方差分析；方差不齐时，先进行数据转换，若转换后满足方差齐性，采用graphpad prism 9.0软件进行统计分析。实验数据用“mean
±
sem”表示，p＜0.05表示有显著差异。
[0192]
3实验结果
[0193]
实验结果表明，与模型组相比，豨莶风湿胶囊低、中、高剂量组均能显著降低小鼠扭体反应次数(p《0.01)。结果见表7，图4。图4豨莶风湿胶囊对冰醋酸所致小鼠15min内扭体次数的影响。与模型组相比，
***
p《0.001。
[0194]
表7豨莶风湿胶囊对冰醋酸所致小鼠15min内扭体次数的影响(mean
±
sem)
[0195][0196]
四、中药复方豨莶风湿胶囊急性毒性研究
[0197]
1实验材料
[0198]
1.1实验动物
[0199]
spf级icr小鼠，20只，18～22g，雌性。由辽宁长生生物技术股份有限公司提供，许可证号scxk(辽)2020-0001，合格证号211002300068943。
[0200]
spf级icr小鼠，20只，18～22g，雄性。由辽宁长生生物技术股份有限公司提供，许可证号scxk(辽)2020-0001，合格证号211002300068944。
[0201]
动物均在沈阳药科大学实验动物中心饲养，保持环境温度20℃～24℃，湿度50％左右，自由摄食饮水，12小时循环光照。
[0202]
2实验方法
[0203]
2.1实验动物分组及给药方案
[0204]
实验动物分为2组，分别为空白组豨莶风湿胶囊组，每组20只，雌雄各半，如表8。
[0205]
表8实验动物分组及给药剂量
[0206]
组别动物数量(只)剂量(g/kg)空白20
‑‑‑‑‑
豨莶风湿胶囊2020.86
[0207]
2.2药物配制
[0208]
取豨莶风湿胶囊，取其内容物，于研钵中研磨后，加入娃哈哈饮用纯净水中，配成的1042.50mg/ml混悬溶液。
[0209]
2.3实验步骤
[0210]
取40只icr小鼠，雌雄各半，18～22g，随机分为空白组及豨莶风湿胶囊组，每组20只。分别按表8中剂量灌胃给药，给药容积为20ml/kg，空白组灌胃同容积娃哈哈饮用纯净水。给药当天记录小鼠自主活动、进食、排泄、眼鼻等变化，持续观察15天，每天记录小鼠的体重。
[0211]
2.4统计学方法
[0212]
实验结果采用ibm spss 22.0软件进行统计分析。对于符合方差齐性的数据，选择方差分析；方差不齐时，先进行数据转换，若转换后满足方差齐性，采用graphpadprism 9.0软件进行统计分析。
[0213]
3实验结果
[0214]
急性毒性试验结果显示，分别给小鼠灌胃20.86g/kg的豨莶风湿胶囊，连续观察15天，未见动物死亡及肉眼可见的异常反应，各组动物体重逐渐增长，与空白组相比未见显著差异。动物体重变化见图5和6。
[0215]
结论：豨莶风湿胶囊具有显著的抗炎镇痛作用。豨莶风湿胶囊的最大给药量为20.46g/kg。