包含位于纳米原纤纤维素水凝胶中的真核细胞的可移植细胞组合物、其制备方法和纳米原纤纤维素的用途与流程

技术特征：
1.一种制备可移植细胞制备物的方法，所述方法包括：-在允许细胞形成细胞聚集体的条件下培养真核细胞，所述细胞聚集体优选是细胞球体，-在纳米原纤纤维素水凝胶中提供细胞聚集体和/或将细胞聚集体与纳米原纤纤维素水凝胶组合以获得可移植的细胞组合物，其包含位于纳米原纤纤维素水凝胶基质中的真核细胞。2.如权利要求1所述的方法，其包括：-在纳米原纤纤维素水凝胶中提供细胞聚集体之前和/或将细胞聚集体与纳米原纤纤维素水凝胶组合之前去除细胞培养基，例如通过以下方式进行：过滤，离心和/或洗涤细胞聚集体，所述洗涤用不含其他类型细胞衍生物质和/或无动物源、无异源和/或无饲养的培养基进行。3.如权利要求1或2所述的方法，包括在不含其他类型的细胞衍生物质和/或无动物源、无异源和/或无饲养的细胞培养基中培养真核细胞。4.如前述权利要求中任一项所述的方法，包括在纳米原纤纤维素水凝胶中培养真核细胞，所述纳米原纤纤维素水凝胶的浓度优选在0.8
–
3％(w/w)或0.8
–
2％的范围内，例如0.8
–
1.5％(w/w)，或约1％(w/w)。5.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述纳米原纤纤维素的原纤平均直径在1-200nm的范围内。6.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，纳米原纤纤维素当分散在水中时提供在1000
–
100000pa
·
s范围内、例如在5000-50000pa
·
s范围内的零剪切粘度，和在1
–
50pa范围内、例如在3
–
15pa范围内的屈服应力，这些测量结果是通过使用旋转流变仪在22℃
±1°
下，稠度为0.5重量％(w/w)的条件下在水性介质中测定的。7.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，纳米原纤纤维素当分散在水中时，提供350pa或更高的储能模量，优选在350-5000pa的范围内，或更优选350-1000pa的范围内，屈服应力为25pa或更高，例如在25-300pa的范围内，或更优选在25-75pa的范围内，其由应力控制旋转流变仪在2％应变和25℃下测定，其中剪切应力在0.001
–
100pa的范围内以10弧度/秒的频率逐渐增加。8.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述细胞是干细胞。9.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，细胞聚集体，优选细胞球体的平均直径在80
–
700μm的范围内，例如在80
–
300μm的范围内，例如在80
–
250μm的范围内。10.一种可移植细胞组合物，其包含位于纳米原纤纤维素水凝胶基质中的真核细胞，优选该组合物不包含其他类型的细胞衍生物质或仅包含痕量的其他类型的细胞衍生物质。11.如权利要求10所述的可移植细胞组合物，其中，所述细胞是干细胞。12.如权利要求11所述的可移植细胞组合物，其中，所述干细胞是干细胞聚集体，优选是干细胞球体。13.如权利要求12所述的可移植细胞组合物，其中，细胞聚集体的平均直径在80
–
700μm的范围内，例如在80
–
300μm的范围内，例如在80
–
250μm的范围内。14.如权利要求11-13中任一项所述的可移植细胞组合物，其中，所述干细胞是全能、多能、多潜能、寡能或单能干细胞。
15.如权利要求11-14中任一项所述的可移植细胞组合物，其中，干细胞选自间充质干细胞(msc)，多潜能成体祖细胞诱导多能干细胞(ips)和造血干细胞。16.如权利要求11-15中任一项所述的可移植细胞组合物，其中，干细胞是人干细胞，例如非胚胎细胞或胚胎细胞，其是在不破坏胚胎的情况下得到的。17.如权利要求10所述的可移植细胞组合物，其中，细胞是分化细胞。18.如权利要求10-17中任一项所述的可移植细胞组合物，其中，所述水凝胶中纳米原纤纤维素的浓度在1
–
3％的范围内，例如1
–
2.5％(w/w)或1.3
–
2.2％(w/w)。19.如权利要求10-18中任一项所述的可移植细胞组合物，其中，所述纳米原纤纤维素包含未化学改性的纳米原纤纤维素。20.如权利要求10-19中任一项所述的可移植细胞组合物，其中，所述纳米原纤纤维素包括化学改性的纳米原纤纤维素，其选自阴离子改性的纳米原纤纤维素和/或氧化的纳米原纤纤维素，例如tempo氧化的纳米原纤纤维素。21.如权利要求10-20中任一项所述的可移植细胞组合物，其中，所述纳米原纤纤维素的原纤平均直径在1-200nm的范围内。22.如权利要求10-21中任一项所述的可移植细胞组合物，其中，纳米原纤纤维素当分散在水中时提供在1000
–
100000pa
·
s范围内、例如在5000-50000pa
·
s范围内的零剪切粘度，和在1
–
50pa范围内、例如在3
–
15pa范围内的屈服应力，这些测量结果是通过使用旋转流变仪在22℃
±1°
下，稠度为0.5重量％(w/w)的条件下在水性介质中测定的。23.如权利要求10-22中任一项所述的可移植细胞组合物，其中，纳米原纤纤维素当分散在水中时，提供350pa或更高的储能模量，优选在350-5000pa的范围内，或更优选350-1000pa的范围内，屈服应力为25pa或更高，优选在25-300pa的范围内，或更优选在25-75pa的范围内，其由应力控制旋转流变仪在2％应变和25℃下测定，其中剪切应力在0.001
–
100pa的范围内以10弧度/秒的频率逐渐增加。24.如权利要求10-23中任一项所述的可移植细胞组合物，其包装在注射器或微量移液管中，所述注射器优选包括用于将所述组合物移植到对象体内的注射针。25.如权利要求10-24中任一项所述的可移植细胞组合物，其为植入物形式，任选地包含一种或多种增强部分。26.如权利要求10-25中任一项所述的可移植细胞组合物，其中，所述组合物是可注射组合物或可植入组合物。27.一种包含可移植细胞组合物的植入物，所述可移植细胞组合物包含如权利要求10-26中任一项所述的位于纳米原纤纤维素水凝胶基质中的真核细胞。28.如权利要求10-26中任一项所述的可移植细胞组合物或如权利要求27所述的植入物，其用于包括向对象施用细胞的治疗方法，优选用于细胞移植。29.纳米原纤纤维素在制备如权利要求10-26中任一项所述的可移植细胞组合物或如权利要求27所述的植入物中的用途。

技术总结
本申请提供一种制备可移植细胞制备物的方法，该方法包括：在允许细胞聚结并形成细胞聚集体的条件下培养真核细胞，在纳米原纤纤维素水凝胶中提供细胞聚集体以获得可移植的细胞组合物，该组合物包含位于纳米原纤纤维素水凝胶基质中的真核细胞，还提供一种可移植细胞制备物。本申请还提供用于治疗方法的可移植细胞组合物，以及纳米原纤纤维素用于制备可移植细胞组合物的用途。细胞组合物的用途。


技术研发人员：M
受保护的技术使用者：芬欧汇川集团
技术研发日：2019.06.24
技术公布日：2022/2/7