一种含有植物螯合肽的组合物及其制备方法与流程

1.本发明属于保健品技术领域，具体涉及一种含有植物螯合肽的组合物及其制备方法。


背景技术：

2.免疫概念及其功能免疫(immune)来源于拉丁语，中国明朝的《免疫类方》，也表示为“免除疫疠”。免疫是人体的一种重要的生理功能，通过免疫系统识别和清除外来侵入的任何异物(如病原体，化学物等)，以维持机体生理平衡的功能。免疫反应(immune response)指的是机体借助理化屏障及神经体液的调节控制，通过免疫细胞及有关的体液因子(如抗体、淋巴因子等)发挥识别自己、排除异己，以维持机体内外环境统一的功能。主要过程为免疫系统接触和识别异己成分或者变异的自体成分，免疫细胞活化、增殖、分化为效应细胞，最终做出防御反应。免疫反应可分为非特异性免疫反应和特异性免疫反应，而特异性免疫反应又可分为t淋巴细胞介导的细胞免疫应答与b淋巴细胞介导的体液免疫应答。多种人体疾病如感冒、肠炎、关节炎症等均与免疫能力低下相关。因此，增强人体免疫力是儿童、青少年、成年人与老年人多年龄群体及各个社会阶层共同的需求。
3.肠道微生态系统是人体最大、最复杂的微生态系统，也是人体微生态系统中最主要和最活跃的部分。肠道菌群是肠道防御屏障的重要组成部分，平衡的肠道菌群对人的健康十分重要。但是，由于机体衰老、环境污染、饮食改变、滥用抗生素等原因，往往使人体肠道微生态系统受到破坏，引起肠道菌群失调，严重影响身体的免疫系统机能，造成免疫功能低下，导致菌群易位，诱发内源感染，造成机体病变，从而引发多种疾病，如肝硬化、胆结石、动脉硬化、冠心病、心肌梗塞、脑动脉硬化、脑中风等。
4.而目前，市面上大部分调节肠道菌群的产品，都只是采用简单的益生菌与益生元的组合搭配，并且产品均为胃溶型，不能够抵抗胃肠道恶劣的环境，导致到达后肠的益生菌活菌数大量下降，对肠道调节及免疫力调节的效果大幅下降。
5.因此，如何制得一种能够避免胃酸的分解，保证有效成分在小肠部位完全释放，充分吸收，有效调节人体肠道菌体，增强人体免疫力的复合型免疫增强产品，成为亟待解决的技术问题。


技术实现要素：

6.为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种含有植物螯合肽的组合物及其制备方法。本发明提供的含有植物螯合肽的组合物采用益生菌粉与植物螯合肽，复合天然提取物，复合氨基酸结合，能有效调节人体肠道菌群，促进营养物质的吸收，可以补充人体自身不能生成的氨基酸等营养物质，增强人体免疫力，缓解体力疲劳，同时螯合人体通过食物链吸收的重金属，起到补充营养和排毒的作用。
7.本发明的技术方案是：
8.一种含有植物螯合肽的组合物，包括如下组分及其重量份数：
9.天然复合提取物280～520份，植物螯合肽10～30份，益生菌粉70～150份，复合氨基酸350～400份；
10.进一步地，所述复合提取物由黄芪苷、云芝糖肽、决明子提取物按重量比7～16：11～13:1～6组成。
11.更进一步地，所述的含有植物螯合肽的组合物，包括如下组分及其重量份数：天然复合提取物450份，植物螯合肽20份，益生菌粉120份，复合氨基酸380份；
12.更进一步地，所述复合提取物由黄芪苷、云芝糖肽、决明子提取物按重量比14:12:5组成；
13.进一步地，所述益生菌粉含有嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、发酵乳杆菌、动物双歧杆菌、乳双歧杆菌或短双岐杆菌中的两种或两种以上的混合菌种；
14.进一步地，所述复合氨基酸为赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸中的两种或两种以上。
15.进一步地，所述含有植物螯合肽的组合物还包括营养学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。
16.另外，本发明还提供了所述的含有植物螯合肽的组合物的制备方法，包括如下步骤：
17.s1、将植物螯合肽，天然复合提取物，益生菌粉，复合氨基酸混合，然后加入其重量1～1.5倍的复合稳定剂，在搅拌转速80～160r/min下搅拌10～30min，混合均匀后投入制粒机内，调节粒度为16～30目，冷冻干燥，得到微丸半成品；
18.s2、将步骤s1所得的微丸半成品投入至旋流流化床制粒包衣机中进行包膜处理，启动包衣装置，将肠溶包衣液以20～40ml/min的速度喷向旋流状态的微丸半成品，在微粒物料表面形成包衣膜层，包衣结束后，冷冻干燥，即得。
19.进一步地，所述步骤s1中的复合稳定剂由甘草酸、羟乙基纤维素和水按重量比12～15:0.3～1.3:100混合而成。
20.更进一步地，所述步骤s1中的复合稳定剂由甘草酸、羟乙基纤维素和水按重量比13:0.9:100混合而成。
21.进一步地，所述步骤s2中的设置包衣装置的进风温度控制在30～35℃，雾化压力为0.1～0.3mpa。
22.进一步地，所述步骤s2中的肠溶包衣液的制备方法如下：
23.将20～40份羟丙基甲基纤维素，20～50份魔芋葡甘露聚糖，8～15份成膜助剂，2～6份聚乙二醇400混合后加入300～600份ph为6的磷酸盐缓冲液中，充分搅拌溶解制成均匀的混合溶液，即得。
24.更进一步地，所述成膜助剂为邻苯二甲酸乙酸纤维素和聚乙烯吡咯烷酮按重量比5～11:3组成；所述聚乙烯吡咯烷酮的相对分子质量为40000。
25.进一步地，所述步骤2中控制最终产品中肠溶包衣层质量占产品颗粒总质量的3～15％。
26.本发明组合物中添加的由黄芪苷、云芝糖肽、决明子提取物按一定比例组分的天然复合提取物，科学合理配伍，协同增效，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、沙门氏
菌等多种肠道致病菌具有较强的抑制作用，能显著增强机体清除细胞内自由基和脂质过氧化物的能力，能促使免疫细胞发生特异性结合，刺激体内淋巴细胞、巨噬细胞等产生免疫活性，有效提高机体免疫能力，缓解体力疲劳；同时还能够与添加的益生菌粉配合使用，能有效降低肠道粘膜渗透性，从而保护肠道粘膜屏障完整性，促进肠道益生菌的增殖，维持肠道微生态的平衡，增进肠道健康。
27.同时，本发明中还添加了植物螯合肽，由植物螯合肽合成酶(phytochelatinsynthase，pcs)以谷胱甘肽(glutathione，gsh)为底物催化合成的小分子多肽，能通过cys的-sh络合重金属，对重金属的解毒，防御重金属引起的氧化胁迫和必需重金属的代谢方面具有重要作用。现有技术中，对于重金属中毒，一般习惯用二巯基现醇、依地酸钙钠、青霉胺等化学药物，但是这些化学合成螯合剂会对人体产生一定的副作用，而植物螯合肽是植物提纯剂，可以在安全，对人体没有副作用的情况下，有效缓解重金属的毒害作用，尤其是对重金属镉cd
2
有特别的吸收作用，对人体更加更安全，可以有效减轻现代环境污染造成食物链重金属危害。
28.同时，本技术发明人意外的发现，在本发明的组分中添加一定量的植物螯合肽，能够与本发明中添加的天然复合提取物及益生菌粉产生协同作用，不仅能够作为减缓重金属中毒的植物螯合剂，还能够有效促进益生菌对于肠道菌群的调节作用，从而提高人体免疫力。从试验例二的小鼠游泳负重实验中也可以看出，当组分中未添加植物螯合肽时，小鼠的运动耐力及负重游泳时间较实施例中有了明显的下降。
29.另外，由于本发明中的添加的植物螯合肽，天然复合提取物及益生菌粉不能够抵抗胃肠道恶劣的环境，所以本发明通过特定的制备工艺，制粒时添加了复合稳定剂，并且以羟丙基甲基纤维素，魔芋葡甘露聚糖和成膜助剂为肠溶包衣液的主要原料，整个加工环节不需要乙醇或其他有机溶剂，并且包衣温度维持在30～35℃即可，大大的避免了制备过程对菌体及生物活性物质的影响，得到的包衣后的组合物耐酸能力强，可避免在胃液环境中被胃酸侵蚀。
30.与现有技术相比，本发明提供的含有植物螯合肽的组合物具有以下优势：
31.(1)本发明的组合物采用益生菌粉与植物螯合肽，复合天然提取物，复合氨基酸结合，能有效调节人体肠道菌群，促进营养物质的吸收，可以补充人体自身不能生成的氨基酸等营养物质，增强人体免疫力，缓解体力疲劳，同时螯合人体通过食物链吸收的重金属，起到补充营养和排毒的作用。
32.(2)本发明的组合物通过的包衣工艺，操作更简单，能有效提高在胃液、胆汁和胰酶的耐受能力，制得的组合物在人体内具有较低的胃部释放损失，进而提高进入肠道的活菌数，保证尽可能多的菌体到达肠道，进入肠道的益生菌与天然活性成分协同作用，还能有效保护菌体活力，真正起到保健和治疗的功效。
具体实施方式
33.以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的保护范围之内。
34.云芝糖肽、决明子提取物购自扶风斯诺特生物科技有限公司；植物螯合肽，购自上
海沐晋生物科技有限公司，货号mj211026-5。
35.另外，本发明所用的其他试剂均为常用试剂，均可在常规试剂生产销售公司购买。
36.实施例1一种含有植物螯合肽的组合物及其制备方法
37.所述的含有植物螯合肽的组合物，包括如下组分及其重量份数：
38.天然复合提取物280份，植物螯合肽10份，益生菌粉70份，复合氨基酸350份；
39.所述复合提取物由黄芪苷、云芝糖肽、决明子提取物按重量比7:13:6组成。
40.所述益生菌粉由嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、瑞士乳杆菌按重量比1：1：1：1：1组成。
41.所述复合氨基酸由赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸按重量比1：1：1组成。
42.所述的含有植物螯合肽的组合物的制备方法，包括如下步骤：
43.s1、将植物螯合肽，天然复合提取物，益生菌粉，复合氨基酸混合，然后加入其重量1倍的复合稳定剂，在搅拌转速80r/min下搅拌10min，混合均匀后投入制粒机内，调节粒度为16目，冷冻干燥，得到微丸半成品；
44.s2、将步骤s1所得的微丸半成品投入至旋流流化床制粒包衣机中进行包膜处理，启动包衣装置，设置包衣装置的进风温度控制在30℃，雾化压力为0.1mpa，将肠溶包衣液以20ml/min的速度喷向旋流状态的微丸半成品，在微粒物料表面形成包衣膜层，控制最终产品中肠溶包衣层质量占产品颗粒总质量的3～15％，包衣结束后，冷冻干燥，即得。
45.所述步骤s1中的复合稳定剂由甘草酸、羟乙基纤维素和水按重量比12:0.3:100混合而成。
46.所述步骤s2中的肠溶包衣液的制备方法如下：
47.将20份羟丙基甲基纤维素，20份魔芋葡甘露聚糖，8份成膜助剂，2份聚乙二醇400混合后加入300份ph为6的磷酸盐缓冲液中，充分搅拌溶解制成均匀的混合溶液，即得。
48.所述成膜助剂为邻苯二甲酸乙酸纤维素，聚乙烯吡咯烷酮按重量比5:3组成；所述聚乙烯吡咯烷酮的相对分子质量为40000。
49.实施例2一种含有植物螯合肽的组合物及其制备方法
50.所述的含有植物螯合肽的组合物，包括如下组分及其重量份数：
51.天然复合提取物450份，植物螯合肽20份，益生菌粉120份，复合氨基酸380份；
52.所述天然复合提取物由黄芪苷、云芝糖肽、决明子提取物按重量比14:12:5组成；
53.所述益生菌粉由植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、瑞士乳杆菌、短双岐杆菌按重量比2:1:1:1组成；
54.所述复合氨基酸由赖氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸、异亮氨酸按重量比1:1:1:1:1组成。
55.所述的含有植物螯合肽的组合物的制备方法，包括如下步骤：
56.s1、将植物螯合肽，天然复合提取物，益生菌粉，复合氨基酸混合，然后加入其重量1.3倍的复合稳定剂，在搅拌转速120r/min下搅拌20min，混合均匀后投入制粒机内，调节粒度为25目，冷冻干燥，得到微丸半成品；
57.s2、将步骤s1所得的微丸半成品投入至旋流流化床制粒包衣机中进行包膜处理，启动包衣装置，设置包衣装置的进风温度控制在33℃，雾化压力为0.2mpa，将肠溶包衣液以30ml/min的速度喷向旋流状态的微丸半成品，在微粒物料表面形成包衣膜层，控制最终产
品中肠溶包衣层质量占产品颗粒总质量的3～15％，包衣结束后，冷冻干燥，即得。
58.所述步骤s1中的复合稳定剂由甘草酸、羟乙基纤维素和水按重量比13:0.9:100混合而成。
59.所述步骤s2中的肠溶包衣液的制备方法如下：
60.将30份羟丙基甲基纤维素，40份魔芋葡甘露聚糖，11份成膜助剂，4份聚乙二醇400混合后加入500份ph为6的磷酸盐缓冲液中，充分搅拌溶解制成均匀的混合溶液，即得。
61.所述成膜助剂为邻苯二甲酸乙酸纤维素，聚乙烯吡咯烷酮按重量比8:3组成；所述聚乙烯吡咯烷酮的相对分子质量为40000。
62.实施例3一种含有植物螯合肽的组合物及其制备方法
63.所述的含有植物螯合肽的组合物，包括如下组分及其重量份数：
64.天然复合提取物520份，植物螯合肽30份，益生菌粉150份，复合氨基酸400份；
65.所述复合提取物由黄芪苷、云芝糖肽、决明子提取物按重量比16:11:1组成。
66.所述益生菌粉由嗜酸乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、发酵乳杆菌、乳双歧杆菌按重量比1:1:1:1:1组成；
67.所述复合氨基酸由赖氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸按重量比1:1:1:1:1组成。
68.所述的含有植物螯合肽的组合物的制备方法，包括如下步骤：
69.s1、将植物螯合肽，天然复合提取物，益生菌粉，复合氨基酸混合，然后加入其重量1.5倍的复合稳定剂，在搅拌转速160r/min下搅拌30min，混合均匀后投入制粒机内，调节粒度为30目，冷冻干燥，得到微丸半成品；
70.s2、将步骤s1所得的微丸半成品投入至旋流流化床制粒包衣机中进行包膜处理，启动包衣装置，设置包衣装置的进风温度控制在35℃，雾化压力为0.3mpa，将肠溶包衣液以40ml/min的速度喷向旋流状态的微丸半成品，在微粒物料表面形成包衣膜层，控制最终产品中肠溶包衣层质量占产品颗粒总质量的3～15％，包衣结束后，冷冻干燥，即得。
71.所述步骤s1中的复合稳定剂由甘草酸、羟乙基纤维素和水按重量比15:1.3:100混合而成。
72.所述步骤s2中的肠溶包衣液的制备方法如下：
73.将40份羟丙基甲基纤维素，50份魔芋葡甘露聚糖，15份成膜助剂，6份聚乙二醇400混合后加入600份ph为6的磷酸盐缓冲液中，充分搅拌溶解制成均匀的混合溶液，即得。
74.所述成膜助剂为邻苯二甲酸乙酸纤维素，聚乙烯吡咯烷酮按重量比11:3组成；所述聚乙烯吡咯烷酮的相对分子质量为40000。
75.对比例1一种含有植物螯合肽的组合物及其制备方法
76.与实施例2的相比，对比例1的区别在于，所述天然复合提取物由黄芪苷、云芝糖肽按重量比14:12组成，其他组分和制备方法与实施例2相同。
77.对比例2一种含有植物螯合肽的组合物及其制备方法
78.与实施例2的相比，对比例2的区别在于，所述天然复合提取物由黄芪苷和决明子提取物按重量比13:5组成，其他组分和制备方法与实施例2相同。
79.对比例3一种含有植物螯合肽的组合物及其制备方法
80.与实施例2的相比，对比例3的区别在于，所述天然复合提取物由黄芪苷、云芝糖
肽、决明子提取物按重量比1:1:1组成，其他组分和制备方法与实施例2相同。
81.对比例4一种含有植物螯合肽的组合物及其制备方法
82.与实施例2的相比，对比例4的区别在于，所述的含有植物螯合肽的组合物的制备方法中，步骤s1复合稳定剂中未添加甘草酸，其他组分和制备方法与实施例2相同。
83.对比例5一种含有植物螯合肽的组合物及其制备方法
84.与实施例2的相比，对比例5的区别在于，所述的含有植物螯合肽的组合物的制备方法中，步骤s2肠溶包衣液中成膜助剂中的聚乙烯吡咯烷酮的相对分子质量为160000，其他组分和制备方法与实施例2相同。
85.对比例6一种含有植物螯合肽的组合物及其制备方法
86.与实施例2的相比，对比例6的区别在于，所述含有植物螯合肽的组合物中未添加植物螯合肽，其他组分和制备方法与实施例2相同。
87.试验例一、人工胃液耐受试验
88.1、试验材料：实施例1～3，对比例1～6制得的含有植物螯合肽的组合物。
89.2、试验方法：分别取本发明制得的实施例1～3，对比例1～6的含有植物螯合肽的组合物0.2g置于10ml模拟胃液中，震荡混匀，37℃水浴孵育，每隔30min取样，置于0.06mol/l的柠檬酸钠溶液中震荡处理1h(35℃，100rpm使组合物充分溶解，进行采用平板计数法，进行活菌计数。
90.3、试验结果
91.试验结果如表1所示。
92.表1本发明的组合物的益生菌在模拟胃液中存活率(％)
[0093][0094]
由表1可知，本发明实施例1～3制得的含有植物螯合肽的组合物，表现出良好的肠胃环境耐受能力，在模拟胃液中2小时后，益生菌的存活率仍然可以达到85％以上，其中实施例2的效果最好，为本发明的最佳实施例。而对比例4～5中当改变了制备工艺时，得到的组合物中的益生菌在模拟胃液中的存活率都有了不同程度的下降。
[0095]
试验例二、小鼠游泳负重实验
[0096]
1、试验材料：实施例1～3，对比例1～6制得的含有植物螯合肽的组合物。
[0097]
2、试验方法：
[0098]
选用清洁级icr健康雄性小鼠100只，体重18-22g。购入的动物应先检疫3天无异常
后，将小鼠分为10组，分别为空白对照组，实施例1～3组，对比例1～6组，空白对照组每日灌胃0.2ml生理盐水，实施例1～3组，对比例1～6组分别灌胃0.2ml植物螯合肽的组合物(浓度4g/kg
·
d)，连续30天。整个实验过程动物必须喂饲质量合格的全价饲料，自由进食饮水。
[0099]
30天后，将每只小鼠称重，在小鼠尾部上端绑上5％体重的铅皮，放入水深30cm、水温25℃的游泳箱内，立即计时，观察并保持每只小鼠四肢划水运动状态，记录小鼠自游泳开始至死亡的时间，作为小鼠负重游泳时间。
[0100]
3、试验结果
[0101]
试验结果如表2所示。
[0102]
表2小鼠体重及负重游泳时间
[0103]
组别初体重(g)末体重(g)游泳时间(min)空白对照组18.8
±
0.232.3
±
2.513.3
±
2.4实施例1组19.2
±
1.044.4
±
2.519.9
±
2.8实施例2组18.4
±
1.045.6
±
2.622.4
±
4.1实施例3组19.2
±
0.744.3
±
3.020.9
±
4.4对比例1组18.8
±
0.836.6
±
3.115.8
±
3.1对比例2组18.8
±
0.335.6
±
2.815.6
±
3.2对比例3组18.5
±
0.938.8
±
3.116.2
±
2.3对比例4组18.9
±
0.835.7
±
2.715.4
±
3.6对比例5组19.3
±
0.434.1
±
2.914.0
±
3.4对比例6组18.3
±
0.540.1
±
2.314.7
±
3.0
[0104]
由表2可知，对小鼠连续灌胃30天本发明实施例1～3制得的含有植物螯合肽的组合物后，显著的延长了小鼠的负重游泳时间，增强了小鼠的运动耐力，实施例2组的小鼠30天后的体重达到了45.6
±
2.6g，负重游泳时间为21.2
±
4.1min，而对比例1～6的小鼠在30天的饲养中体重增长较慢，并且负重游泳的时间较实施例1～3组中有了明显的下降。
[0105]
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。