一种保氮菌株、复合菌剂及复合菌剂制备方法和应用与流程

1.本发明属于微生物制备技术领域，具体涉及一种保氮菌株、复合菌剂及复合菌剂制备方法和应用。


背景技术：

2.沼渣是沼气发酵后残留在沼气池底部的半固体物质，含有丰富的有机质、腐殖酸、粗蛋白、氮、磷、钾和多种微量元素和植物生长素。
3.在沼渣堆肥过程中，有机氮首先被微生物分解转化为铵态氮，在随后的硝化作用中，继续被氧化为亚硝态氮和硝态氮，在此过程中，由于温度和通气量等条件的改变，易发生nh3挥发，造成大量的氮素损失，不仅降低了肥料质量，而且会引发恶臭、酸雨和水体富营养化等环境问题。因此，如何减少nh3排放是堆肥过程中必须解决的一个问题。
4.氨氧化是硝化作用的第一步，也是其限速步骤，高效的氨氧化过程有助于减少堆肥高温期的氨气排放、提高氮素存留，对堆肥中的氮素转化至关重要。氨氧化细菌是硝化过程中必不可少的菌群，也是目前生物脱氮的主要菌群，氨氧化细菌将氨氧化成亚硝酸，硝化菌将亚硝酸氧化成硝酸。自养型氨氧化细菌的生长速率受到有机物极大的限制，往往在缓慢的生长过程中，大量的氨已经挥发，无法起到氨氧化及减少氮素流失的作用，在实际应用中意义不大；异养型氨氧化细菌其生长速率不受氨氧化过程的限制，可以大量将氨氧化为亚硝酸盐和硝酸盐，提高堆肥中硝态氮的含量，减少nh3的挥发。因此，本发明提供了一种保氮菌株、复合菌剂及复合菌剂制备方法和应用。


技术实现要素：

5.因此，本发明要解决的技术问题在于克服现有技术中的氨氧化过程中氮素流失严重、氮氧化细菌生长速率受限等缺陷，从而提供一种保氮菌株、复合菌剂及复合菌剂制备方法和应用。
6.为此，本发明提供了以下技术方案。
7.本发明提供了一种保氮菌株，它为嗜热异养型氨氧化细菌，保藏机构为广东省微生物菌种保藏中心，分类命名为aneurinibacillus thermoaerophilus j3，保藏编号为gdmcc no:61602，保藏日期为2021年4月12日。
8.本发明还提供了一种复合菌剂，包括上述保氮菌株。
9.所述复合菌剂包括含保氮菌株菌粉和腐熟菌菌粉；
10.所述含保氮菌株菌粉与所述腐熟菌菌粉的质量比为1：(2.5-3.5)；
11.所述腐熟菌菌粉为枯草芽孢杆菌和/或地衣芽孢杆菌。
12.所述腐熟菌菌粉的含菌量为2.6
×
10
9-5.0
×
109cfu/g；
13.所述含保氮菌株菌粉的含菌量为4.5
×
10
8-7.5
×
108cfu/g。
14.所述含保氮菌株菌粉的原料包括所述保氮菌株生长发酵的培养基基质和生长因子；
15.所述培养基基质为淀粉、豆饼粉、麸皮、木薯渣、豆粕中的至少一种；
16.所述生长因子包括碳源、氮源、无机盐中的至少一种；
17.所述培养基基质和所述生长因子的质量比为(20-35)：(3-5)。
18.所述复合菌剂的含菌量为1.9
×
10
9-3.8
×
109cfu/g。
19.此外，本发明提供了一种上述复合菌剂的制备方法，包括，利用上述保氮菌株进行发酵制得。
20.所述复合菌剂的制备方法中，培养基基质、生长因子和所述保氮菌株混合后，经发酵、干燥后得到所述含保氮菌株菌粉；
21.含保氮菌株菌粉与腐熟菌菌粉混合后，得到所述复合菌剂；
22.可选的，所述发酵条件为发酵温度为50-55℃，压力为0.03-0.05mpa，低溶氧为1-5％。
23.本发明还提供了一种上述保氮菌株、上述复合菌剂或上述方法制备得到的复合菌剂具有如下的应用：
24.(1)在制备堆肥中的应用；
25.(2)在氨氮氧化领域中的应用；
26.(3)在氨氮污水净化的应用。
27.进一步地，本发明还提供了一种堆肥方法，利用上述保氮菌株、上述复合菌剂或上述方法制备得到的复合菌剂对堆肥原料进行堆肥；
28.可选的，所述复合菌剂的用量为原料和调理剂总质量的0.05-0.15％；
29.可选的，所述堆肥时间为40-50天，每隔2-3天翻堆一次；
30.可选的，以新鲜猪粪沼渣为堆肥原料，木屑作为调理剂，调控物料c/n为 15-30。
31.更进一步地，本发明提供了一种氨氮污水净化方法，利用上述保氮菌株、上述复合菌剂或上述方法制备得到的复合菌剂接种到氨氮污水培养，对氨氮污水进行净化处理；
32.可选的，培养的温度为52-57℃。
33.本发明技术方案，具有如下优点：
34.1.本发明提供的保氮菌株，该保氮菌株为嗜热异养型氨氧化细菌，保藏机构为广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，分类命名为aneurinibacillus thermoaerophilusj3，保藏编号为gdmcc no:61602，保藏日期为2021年4月12日，该保氮菌株分离于沼渣堆肥高温期的堆体样品中，是高温期的优势菌，同时具有高效的氨氧化功能，经鉴定是一株嗜热嗜气解硫胺素芽孢杆菌(aneurinibacillusthermoaerophilus)，在45-65℃温度范围内均可生长，代谢旺盛、适应性强，氨氧化效率较高，能够在沼渣等堆肥中迅速定殖，发挥促腐保氮的作用，不受氨氧化过程的限制，可以将大量氨氧化为亚硝酸盐和硝酸盐，降低氨气的挥发，提高堆肥中硝态氮的含量，减轻了环境污染，能够形成大量能被农作物生长所利用的氮元素，从而提高堆肥的质量。
35.2.本发明提供了一种复合菌剂，该复合菌剂可以利用低成本的工农业废弃物麸皮、秸秆、木薯渣等制备得到，成本低，且该堆肥复合菌剂的保氮效果好，在堆肥过程中能够促进氨氮转化为硝态氮，减少了氨气等恶臭气体的产生，减少了环境污染，提高了堆肥的质量。
36.3.本发明提供的复合菌剂的应用，该复合菌剂可以应用在堆肥、氨氮氧化领域、氨
氮污水净化中，应用成本低、产生的氨气少、保氮效果好。
附图说明
37.为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
38.图1是本发明实施例1中室内小型发酵试验装置；
39.图2是本发明实施例1中显微镜下菌体的形态；
40.图3是本发明实施例1中菌株的生长曲线图；
41.图4是本发明实施例1中系统进化发育树图；
42.图5是本发明实施例3中堆肥过程中的温度变化图；
43.附图标记：
44.1-恒温培养箱；2-第一硼酸吸收装置；3-第二氢氧化钡吸收装置。
具体实施方式
45.提供下述实施例是为了更好地进一步理解本发明，并不局限于所述最佳实施方式，不对本发明的内容和保护范围构成限制，任何人在本发明的启示下或是将本发明与其他现有技术的特征进行组合而得出的任何与本发明相同或相近似的产品，均落在本发明的保护范围之内。
46.实施例中未注明具体实验步骤或条件者，按照本领域内的文献所描述的常规实验步骤的操作或条件即可进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规试剂产品。
47.本发明所提供的保氮菌株是从堆肥中分离筛选得到，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为gdmccno:61602。
48.实施例中用到的培养基如下：
49.氨氧化选择性液体培养基：(nh4)2so42.0g，mgso4·
7h2o0.25g，nacl0.5g，kh2po41.0g，cacl20.5g,feso4·
7h2o0.2g,h2o1000ml，ph7.0。
50.氨氧化选择性固体培养基在氨氧化选择性液体培养基的基础上添加2％的琼脂。
51.高温菌液体培养基包括大量元素和微量元素，大量元素(单位：g/l)：(nh4)2so40.50，kh2po40.28，mgso4·
7h2o0.25，cacl20.01，tryptone2.00，yeastextract2.00；微量元素(mg/l)：na2moo4·
2h2o0.025，fecl30.28，cuso40.016，mnso4·
h2o2.2，h3bo30.5，znso4·
7h2o0.5，cocl2·
6h2o0.046；121℃灭菌20min。
52.高温菌固体培养基在高温液体培养基的基础上添加2％的琼脂。
53.实施例1
54.本实施例提供了一种保氮菌株及其筛选方法，包括如下步骤，
55.称取5g高温期的猪粪堆肥样品，加到含45ml无菌水的三角瓶中，在28℃、150r/min水浴摇床中震荡30min，得到堆肥样品的悬浮液；
56.取5ml悬浊液接种至100ml氨氧化选择性液体培养基中，在60℃、150r/min培养箱
中摇瓶培养7天，待培养基明显浑浊后，得到富集液。
57.以1％的接种量将富集液接种于新鲜的氨氧化选择性液体培养基中，培养7 天，按上述方法连续富集培养3次，得到目标菌群。
58.取1ml最后一次氨氧化选择性培养基菌液，加入到含9ml的无菌生理盐水试管中，震荡混匀，然后倍比稀释到10-8
，分别取0.1ml 10-6
、10-7
、10-8
稀释液用平板涂布法均匀涂布到氨氧化选择性固体培养基上，然后均在60℃恒温培养箱中培养24h，挑取形态特征相异的单个菌落反复划线培养，得到纯化菌株。将纯化好的菌株接入含高温菌液体培养基的试管中，于60℃、120r/min培养24h，在每个试管中滴加格里斯试剂，颜色显示为红色为具有保氮的菌株；
59.将具有氨氧化能力的保氮菌株与堆肥常用的腐熟菌(枯草芽孢杆菌)进行菌株间拮抗实验，筛选得到与腐熟菌(枯草芽孢杆菌)能够发挥协同作用的菌株，得到目标保氮菌株；该目标保单菌株经发酵后，通过检测菌株的保氮性能，经再次筛选后得到保氮菌株。
60.菌株的保氮性能测试方法：
61.在500ml三角瓶中添加100g新鲜猪粪沼渣和40g木屑，分别吸取上述保存的初筛菌株发酵液各20ml加入沼渣和木屑混合物中，每种菌液做三个平行，以无菌蒸馏水作为空白对照。将各处理放置于60℃恒温培养箱中，按图1所示的室内小型发酵试验装置进行模拟高温堆肥，利用空气泵(空气泵流量：6 l/min)向箱体内通气，采用第一硼酸吸收装置和第二氢氧化钡吸收装置用于吸收产生的氨气和二氧化碳气体。根据模拟堆肥试验所释放的氨气和二氧化碳量，判断菌株促腐保氮的效果。
62.1.测nh3的量
63.在吸收了nh3的硼酸溶液中滴加2滴0.1％甲基红乙醇溶液和1滴0.1％次甲基蓝乙醇指示剂，此时溶液显示绿色，用0.01mol/l盐酸滴定至溶液变为蓝紫色，且半分钟内不褪色，则达到滴定终点，记录所用盐酸的体积，按nh3～hcl 则可换算出产生氨气的摩尔量n。
64.2.测co2的量
65.(1)取吸收了co2的氢氧化钡溶液的上清液，加入1滴酚酞指示剂，此时溶液显红色，用0.05mol/l的盐酸滴定至溶液呈粉红色，且半分钟内不褪色，则为滴定终点，记录所用盐酸体积，按ba(oh)2～2hcl则可换算出氢氧化钡摩尔量n1。(2)原氢氧化钡量为n，未消耗的氢氧化钡量为n1，则与co2反应的氢氧化钡的量为n-n1，按co2～ba(oh)2可换算出产生二氧化碳的量为n-n1。
66.保氮菌株的鉴定方法：
67.1.生理生化特征鉴定
68.将复筛获得的保氮菌株j3划线接种于高温菌固体培养基中，放入55℃下培养36h，然后肉眼观察菌落形态，用显微镜观察菌体形态，具体见表1和图2。
69.表1菌落和菌体形态特征
[0070][0071][0072]
对该菌继续进行生理生化指标鉴定，具体结果见表2。
[0073]
表2菌株生理生化特征
[0074]
底物成分48h底物成分48h甘露醇 水杨苷 赤藻糖醇 d-纤维二糖 d-阿拉伯糖 d-麦芽糖 l-阿拉伯糖 d-乳糖 d-核糖 d-密二糖 d-木糖 d-蔗糖 l-木糖 d-海藻糖 d-侧金盏花醇 菊粉 甲基-βd吡喃木糖苷 d-松三糖 d-半乳糖 d-棉子糖 d-葡萄糖 淀粉 d-果糖 糖原 d-甘露糖 木糖醇 l-山梨糖 d-龙胆二糖 l-鼠李糖 d-土伦糖 卫茅醇 d-来苏糖 肌醇 d-塔格糖 甘露醇 d-岩藻糖 山梨醇 l-岩藻糖 甲基-αd-吡喃甘露糖苷 d-阿拉伯醇 甲基-αd-吡喃葡萄糖苷 l-阿拉伯醇 n-乙酰葡萄糖胺 葡萄糖酸钾 苦杏仁苷 2酮基葡萄糖酸钾-arbulin 5酮基葡萄糖酸钾 七叶灵柠檬酸铁
ꢀꢀ
[0075]
对该菌的生长特征，以及在最适生长条件下的生长曲线进行测定，具体结果见表3和图3。
[0076]
表3菌株生长特征
[0077][0078][0079]
2.分子鉴定
[0080]
①
pcr模板dna的提取
[0081]
将保氮菌株接种于含有50ml高温菌液体培养基250ml锥形瓶中， 150r/min、55℃下培养36h，获得菌体细胞，利用细菌基因组dna提取试剂盒提取的总基因组dna。
[0082]
②
pcr扩增
[0083]
引物：
[0084]
primer a:5
’‑
agagtttgatcctggctcag-3’[0085]
primer b:5
’‑
tacggctaccttgttacgactt-3’[0086]
pcr反应体系总体积25μl，pcr扩增条件为，94℃5min；94℃45s，56℃ 45s，72℃45s，30个循环；72℃10min。
[0087]
③
序列测定
[0088]
pcr扩增产物经电泳检测和纯化后测序，其序列如seq id no:1所示。所得序列在ncbi和ezbiocloud网站进行比对分析，结果如图4所示，本发明菌株j3的16s rrna基因序列与模式菌aneurinibacillus thermoaerophilus dsm10154
t
同源性最高，相似性为99.86％。因此，本发明筛选获得的菌株j3是一株具有氨氧化能力的嗜热嗜气解硫胺素芽孢杆菌aneurinibacillusthermoaerophilus。
[0089]
实施例2
[0090]
本实施例提供了一种包括实施例1提供的保氮菌株的复合菌剂及其制备方法，如下：
[0091]
本复合菌剂包括腐熟菌和保氮菌株，腐熟菌可以在中温期将有机氮降解为无机氨态氮，保氮菌株则在高温期进一步促进铵态氮转化为硝态氮，两者协同发挥促腐保氮作用。
[0092]
腐熟菌选用常规堆肥菌枯草芽孢杆菌，购自于中国工业微生物菌种保藏管理中心(cicc)；保氮菌株为实施例1筛选获得的菌株嗜热嗜气解硫胺素芽孢杆菌(aneurinibacillus thermoaerophilus j3)。
[0093]
(1)腐熟菌菌粉制备
[0094]
腐熟菌种子液制备：取冰箱(-80℃)保存甘油管菌种，无菌操作接种到3 ml lb培养基(含10g/l的胰蛋白胨、5g/l的酵母提取物和10g/l的nacl) 中，在30℃、180r/min振荡下培养24h，制成新鲜的菌种。取活化的新鲜菌种 1ml，无菌操作接种于摇瓶lb液体培养基中，装量为100ml/500ml，30℃、 220r/min振荡培养24h后，至活菌浓度为1
×
109cfu/ml，得到种子菌液。
[0095]
腐熟菌发酵罐培养：发酵罐中培养基装量为总体积的50％，按照5％(体积百分比)的接种量向发酵培养基中接入种子液，发酵温度为30℃，溶氧量控制在10％，搅拌速度为180r/min，罐压保持在0.03-0.05mpa，接种后根据泡沫情况适当调整排气量和罐压，防止逃液。每6h取样镜检一次；发酵终点为芽孢数占总菌数的90％以上；放罐样用平板计数法测定总菌数。发酵液的含菌数为 9.5
×
109。发酵罐中的培养基：10g/l的胰蛋白胨、5g/l的酵母提取物和10g/l 的nacl，ph为7.0。
[0096]
将所得到的发酵液进行喷雾干燥：进口温度为190℃，出口温度为80℃，加入喷雾载体可溶性淀粉，加入量为5％，得到有效活菌数约为3.8
×
109cfu/g 的枯草芽孢杆菌粉。
[0097]
(2)保氮菌菌粉制备
[0098]
保氮菌种子液制备：取冰箱(-80℃)保存甘油管菌种，无菌操作接种于 3ml新鲜高温菌液体培养基中，55℃恒温静置培养24h，制成新鲜的菌种。取活化的新鲜菌种5ml，无菌操作接种于摇瓶高温菌液体培养基中，装量为100ml/500ml，55℃恒温静置培养24h后，至活菌浓度为1.0
×
108cfu/ml，得到种子菌液。
[0099]
保氮菌发酵罐培养：发酵罐中培养基装量为总体积的50％，按照5％(体积百分比)的接种量向发酵培养基中接入种子液，发酵温度55℃，低溶氧1％～ 5％，罐压保持在0.03-0.05mpa，接种后根据泡沫情况适当调整排气量和罐压，防止逃液。每6小时取样镜检一次；发酵终点为芽孢数占总菌数的90％以上。放罐样用平板计数法测定总菌数。发酵液的含菌数为1.5
×
109cfu/ml。发酵罐中的培养基：淀粉10.0g/l，豆饼粉10.0g/l，kh2po
4 1.0g/l，na2hpo
4 0.5g/l、 (nh4)2so
4 0.50g/l，mgso4·
7h2o 0.25g/l，cacl
2 0.01g/l，ph7.0。
[0100]
将所得到的发酵液进行喷雾干燥：进口温度为190℃，出口温度为80℃，加入喷雾载体可溶性淀粉，得到有效活菌数为6.0
×
108cfu/g的嗜热嗜气解硫胺素芽孢杆菌菌粉。
[0101]
(3)复合菌剂制备
[0102]
将保氮菌株菌粉与腐熟菌菌粉按照质量比1:3的比例混合，得到的粉剂产品含菌量约为2.8
×
109cfu/g以上。该微生物菌剂产品为土黄色粉末，无臭味，阴凉干燥处保存，有效期1年。
[0103]
实施例3
[0104]
本实施例提供了实施例2制备得到的复合菌剂在猪粪沼渣堆肥中的应用效果，具体如下，
[0105]
(1)物料的重量比例组成：沼渣，木屑(调理剂)，微生物菌剂用量为沼渣和木屑总质量的0.1％(实施例2复合菌剂)，物料的基本性质如下表4。
[0106]
表4堆肥物料的基本性质
[0107]
试验材料含水率(％)ph有机c(g/kg)全n(g/kg)c/n木屑59.94％
‑‑
478.791.91250.67沼渣70.73％7.92211.1023.349.04 (2)菌剂的活化过程：取混合好的堆肥物料50kg，将菌剂溶解在5l水中，加入1g葡萄糖，将溶液与混合好的堆肥物料混合，静置24h，此时，堆体中的菌株数量将扩增。
[0109]
(3)沼渣堆肥过程：以江西省正合生态工程公司提供的猪粪沼气发酵产生的沼渣为堆肥原料，以木屑为调理剂，调控物料c/n至21，将活化好的菌剂混入堆体中，同时设置不加菌剂的堆肥处理作为对照组。堆肥季节是夏季的7月份，总堆肥时间45天，每2天翻堆一次，取样时间为4天一次，每次先取样再翻堆。堆肥场地构建两个大小相同的长方形堆肥池，长300cm、宽180cm、高 150cm。固体样品每四天取一次，从堆体上中下三个部位取得后混匀作为样品，用来测溶解性总氮(dtn)、氨氮(nh
4
)、硝酸根(no
3-)。
[0110]
(4)试验结果如下：
[0111]
①
菌剂对堆体温度的影响
[0112]
在好氧堆肥过程中，温度是影响微生物活动和堆肥工艺过程的关键因素。高温可杀死病原菌，在适当的温度范围内有机质降解最快，堆体温度的高低决定堆肥速度的快慢和堆肥的质量。各处理组的高温期特征及温度变化趋势如表 5和图5所示。不同处理组的温度变化大致分为3个阶段即升温阶段、高温阶段、降温阶段。各试验组的温度变化趋势基本相同，但在50℃以上维持时间不同，接菌处理组能持续升温至最高温度67.1℃，高温持续时间为37天，远高于对照组。并且，接菌处理组高温起始时间为1天，对照组ck高温起始期为2 天，说明接种堆肥保氮菌剂能使堆肥快速升温并缩短到达高温期时间。以上可以说明，添加本发明微生物菌剂可加快堆肥升温，提高堆肥反应温度，延长高温持续时间，能有效促进堆
肥腐熟，从而加速了堆料中有机物的分解。
[0113]
表5堆肥处理组的高温期(50℃以上)特征
[0114][0115][0116]
②
菌剂对堆体微生物数量的影响
[0117]
高温阶段是堆肥的重要主要阶段，同时也是氨气大量挥发的最主要阶段，普通的氨氧化细菌无法在高温的堆体中心存活，使得大量的氮素以氨的形式挥发。在堆体处于高温阶段的微生物数量如表6所示，接种微生物菌剂处理组的微生物数量高于对照组，其中细菌数量是对照组数量的约100倍，说明嗜热保氮微生物菌株能有效地在堆体中存活和繁殖，接种处理使高温阶段的细菌数量明显增加，促进氨氧化能力，减少氮素的损失，提高堆肥中总氮含量，有效地促进堆肥除臭保氮。
[0118]
表6堆肥处理组高温期(60℃以上)的微生物数量
[0119]
处理细菌数量(cfu/g)放线菌数量(cfu/g)真菌数量(cfu/g)沼渣 木屑 微生物菌剂7.15
×
1093.35
×
1053.26
×
103沼渣 木屑6.20
×
1072.18
×
1052.67
×
103[0120]
③
菌剂对堆体氮素变化的影响
[0121]
从表7可以看出，堆肥结束时接菌组总氮含量增加率分别为18.54％，对照组增加了4.10％；接菌组nh4
-n损失率低至22.00％；接菌组与对照组no
3-n 都有增长的趋势，其中接菌组的增长率高达52.2％，ck组为26.19％。从以上数据可看出，接种除臭微生物菌剂能有效地减少氮素的损失，提高堆肥中总氮含量，有效地促进堆肥除臭保氮。
[0122]
表7堆肥前后不同处理含氮物质变化
[0123][0124][0125]
实施例4
[0126]
本实施例提供了保氮菌株应用于氨氮污水的净化。
[0127]
采用江西某养猪厂水冲粪工艺的养猪废水特征为cod：3000mg/l，氨氮1000mg/l，tp 40mg/l，tn 1500mg/l，ph为8.0。将保氮菌株j3接种到高温菌液体培养基中，培养到对数期后，离心收集菌体，再将菌体加入少许无菌水制成菌悬液。取100ml预处理灭菌后的猪场
废水放入500ml三角瓶中，添加葡萄糖10g/l、kh2po
4 2.0g/l和k2hpo
4 2.0g/l，调节ph至7.5；加入菌悬液，使细胞密度为1.0
×
107cfu/ml，同时设置不加菌的猪场废水作为空白对照组 ck。接种后于55℃培养箱中静置培养，每隔1d检测废水中氨氮浓度(参考《国标水质氨氮的测定(gb7479-87)——纳氏试剂分光光度法》)、亚硝酸盐氮浓度(参考《国标水质亚硝酸盐氮的测定(gb7493-87)——分光光度法》)、硝酸盐氮浓度测定参考《国标水质硝酸盐氮的测定(gb7480-87)——酚二磺酸分光光度法》。
[0128]
由实验结果可知，菌体细胞生长迅速，代谢活跃，在接菌处理4天后，与不接菌对照相比，废水总铵态氮(nh
4 -n)浓度下降92.5％，亚硝酸盐氮(no
2-‑
n) 浓度增加1.36倍，硝酸盐氮(no
3-‑
n)浓度增加2.9倍，说明菌剂有明显的氨氧化效果，可以高效地将废水中的铵态氮转化为亚硝酸氮和硝酸氮。
[0129]
表8保氮菌对猪场废水中氨氮的去除率(％)
[0130]
处理1d2d3d4d菌剂处理60.7％64.2％70.4％92.5％空白对照5.5％6.1％8.6％11.2％
[0131]
表9保氮菌剂对猪场废水中亚硝酸盐氮的增加率(％)
[0132]
处理1d2d3d4d菌剂处理32.0％46.9％121.27％136.16％空白对照2.7％2.6％4.0％6.1％
[0133]
表10保氮菌剂对猪场废水中硝酸盐氮的增加率(％)
[0134][0135][0136]
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。