具有N-1支链基团的苯乙基取代的咪唑并[4,5-c]喹啉化合物的制作方法

具有n-1支链基团的苯乙基取代的咪唑并[4,5-c]喹啉化合物


背景技术：

[0001]
一些药物化合物通过刺激免疫系统的某些关键方面以及通过抑制某些其它方面起作用(例如美国专利号6,039,969(tomai等人)和6,200,592(tomai等人))。这些化合物有时被称为免疫应答调节剂(irm)。一些irm化合物可用于治疗病毒性疾病、肿瘤和th2-介导的疾病。一些irm化合物可用作疫苗佐剂。
[0002]
已经报道了基于以下双环和三环环系的irm化合物：1h-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(例如，美国专利号4,689,338(gerster))；1h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺(例如，美国专利号5,446,153(lindstrom等人))；1h-咪唑并[4,5-c][1,5]萘啶-4-胺(例如，美国专利号6,194,425(gerster等人))；噻唑并[4,5-c]喹诺酮-4-胺和噁唑并[4,5-c]喹诺酮-4-胺(例如，美国专利号6,110,929(gerster等人))；6,7,8,9-1h-四氢-1h-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(例如，美国专利号5,352,784(nikolaides等人))；2h-吡唑并[3,4-c]喹诺酮-4-胺(例如，美国专利号7,544,697(hays等人))；以及n-1和2-取代的1h-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(例如，美国专利号6,331,539(crooks等人)、6,451,810(coleman等人)、6,664,264(dellaria等人)、8,691,837(krepski等人)、8,088,790(kshirsagar等人)、8,673,932(kshirsagar等人)、8,697,873(krepski等人)和7,915,281(krepski等人))。


技术实现要素：

[0003]
公开了可以用于诱导人和动物中的细胞因子生物合成的新化合物。此类化合物(或其盐)具有下式(i)：
[0004][0005]
其中：
[0006]
m为0或1的整数；
[0007]
n为0或1的整数；
[0008]
r选自卤素、羟基、烷基、烷氧基和-c(o)-o-烷基；
[0009]
r1为烷基或-ch
2-o-c
1-4
烷基；
[0010]
r2选自氢、甲基、乙基、正丙基、正丁基、-ch2och3、-ch2och2ch3和-ch2ch2och3；并且
[0011]
r3选自卤素、羟基、烷基和烷氧基；前提条件是当r3为烷氧基时，r1为烷基。
[0012]
式(i)的化合物在n-1支链基团上具有手性中心。因此，式(i)的化合物可拆分成式(ii)和(iii)的化合物(或其盐)(或者此类化合物可使用熟知的技术使用手性起始物质来合成)：
[0013][0014]
以及
[0015][0016]
其中n、r、r1、r2和r3如上所定义。
[0017]
这些化合物的各化合物和盐(诸如药学上可接受的盐)由于在施用于人或动物时能够诱导细胞因子生物合成(例如，诱导至少一种细胞因子合成)并另外调节免疫应答而可以用作免疫应答调节剂。因此，所述化合物可以用于治疗多种病症，诸如对免疫应答的此类变化有响应的病毒性疾病和肿瘤。所述化合物在与疫苗组合施用时也可以用作疫苗佐剂。
[0018]
在本文中，当描述式(i)、(ii)和(iii)的实施方案时，一般认为此类陈述涉及所述化合物以及其盐。
[0019]
本发明公开了药物组合物，该药物组合物包含有效量的式(i)的化合物(或其盐，包括其药学上可接受的盐)，诸如式(ii)、式(iii)、或它们的组合的化合物。
[0020]
还公开了通过向人或动物施用式(i)的化合物(诸如式(ii)、式(iii)、或它们的组合的化合物)和/或其药学上可接受的盐来诱导人或动物中的细胞因子生物合成、治疗人或动物的病毒性疾病以及治疗人或动物的肿瘤性疾病的方法。
[0021]
术语“烷基”是指为烷烃基团的一价基团，并且包括直链、支链、环状和二环烷基基团、以及它们的组合物。除非另外指明，否则烷基基团通常包含1至20个碳原子。在一些实施方案中，烷基基团包含1至10个碳原子、1至6个碳原子、1至4个碳原子、或1至3个碳原子。“烷基”基团的示例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、异丁基、叔丁基、异丙基、正辛基、正庚基、乙基己基、环戊基、环己基、环庚基、金刚烷基、降冰片基等等。
[0022]
术语“烷氧基”是指具有直接键合到烷基基团的氧基基团的一价基团。
[0023]
术语“c
x-y
烷基”和“c
x-y
烷氧基”包括具有x至y个碳原子的直链基团、支链基团、环状基团以及它们的组合物。例如，“c
1-5
烷基”包括1个碳、2个碳、3个碳、4个碳和5个碳的烷基基团。“c
1-5
烷基”的一些示例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、同分异构戊基、环丙基、环戊基和-ch
2-环丙基。
[0024]
化合物的“盐”包括药学上可接受的盐，诸如在berge stephen m.，“药学盐”，《药物科学杂志》，1977年，第66卷，第1-19页(berge,stephen m.,“pharmaceutical salts”,journal of pharmaceutical sciences,1977,66,pages 1-19)中所述的那些。例如，盐可以通过使游离碱化合物(即非盐形式的化合物)与无机酸或有机酸(例如，盐酸、硫酸、氢溴酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、苹果酸、马来酸、乙酸、三氟乙酸、对甲苯磺酸、水杨酸、琥珀酸、酒石酸、柠檬酸、帕莫酸、羟萘甲酸、草酸等)反应来制备。
[0025]
如本文所用，“药学上可接受的载体”包括可以通过选择的施用途径将治疗或预防有效量的一种或多种本公开的化合物或盐递送给受试者、通常被受试者耐受并且具有可接受的毒性特征(优选地在施用剂量下毒性最小甚至没有毒性)的那些载体。一些合适的药学上可接受的载体描述在雷明顿药物科学，第18版，1990年，麦克出版公司(remington’s pharmaceutical sciences,18
th edition(1990),mack publishing co.)中并且可由本领域普通技术人员容易地选择。典型的药学上可接受的盐包括盐酸盐和二盐酸盐。
[0026]“有效量”(包括“治疗有效量”和“预防有效量”)被定义为足以诱导治疗性或预防性效果(诸如细胞因子诱导、免疫调节、抗肿瘤活性和/或抗病毒活性)的化合物或盐的量。根据疾病或病症、期望的细胞因子特征和/或可接受的副作用水平，该有效量可变化。例如，可使用少量极具活性的化合物或盐，或大量低活性的化合物或盐，以避免不良副作用。
[0027]“治疗(treat和treatment)”以及其变型形式是指在任何程度上减轻、限制进展、改善、预防或解决与病症有关的症状或病征。
[0028]“改善(ameliorate和ameliorating)”是指特定疾病或病症的症状或临床特征在程度、严重性、频率和/或可能性上的任何减轻。
[0029]“抗原”是指可以以某种程度的免疫特异性方式与抗体结合的任何物质。
[0030]
在本文中，术语“包括”及其变型形式在说明书和权利要求中出现这些术语的地方不具有限制的含义。此类术语将理解为暗示包括所陈述的步骤或要素或者步骤或要素的组，但不排除任何其它步骤或要素或者步骤或要素的组。所谓“由
……
组成”是指包括并且限于短语“由
……
组成”随后的内容。因此，短语“由
……
组成”指示列出的要素为所需的或强制性的，并且不可存在其它要素。所谓“基本上由
……
组成”是指包括在该短语之后所列
出的任何要素，并且限于不妨碍或有助于本公开中对所列要素规定的活性或作用的其它要素。因此，短语“基本上由
……
组成”指示所列要素为所需的或强制性的，但其它要素为任选的并且可存在或可不存在，取决于它们是否实质上影响所列要素的活性或作用。以开放式语言(例如，包括及其派生词)引用到本说明书中的任何要素或要素的组合被认为是以封闭式语言(例如，由
……
组成及其派生词)并且以部分封闭式语言(例如，基本上由
……
组成及其派生词)另外地引用。
[0031]
词语“优选的”和“优选地”是指在某些情况下可提供某些有益效果的本公开的实施方案。然而，在相同的情况或其它情况下，其它权利要求也可能为优选的。此外，对一个或多个优选的权利要求的表述并不意味着其它权利要求为不可用的，并且并非旨在将其它权利要求排除在本公开的范围之外。
[0032]
在本技术中，术语诸如“一个”、“一种”、“该”和“所述”并非仅旨在指单一实体，而是包括一般类别，其具体示例可用于举例说明。术语“一个”、“一种”、“该”和“所述”可与术语“至少一个(种)”互换使用。后接列表的短语
“……
中的至少一个(种)”和“包含
……
中的至少一个(种)”是指列表中项目中的任一项以及列表中两项或更多项的任何组合。
[0033]
如本文所用，术语“或”一般按其通常的意义使用，包括“和/或”，除非该上下文另外清楚地指出。
[0034]
术语“和/或”意指所列要素中的一个或全部，或者所列要素中的任何两个或更多个的组合。
[0035]
另外在本文中，所有数值假定通过术语“约”修饰，并且在某些实施方案中优选地通过术语“精确地”修饰。如本文所用，关于所测量的量，术语“约”是指所测量的量方面的偏差，这个偏差为如一定程度地小心进行测量的技术人员应当能预期的那种与测量的目标和所用测量设备的精确度相称的偏差。在本文中，“至多”某数字(例如，至多50)包括该数字(例如，50)。
[0036]
另外在本文中，通过端点表述的数值范围包括该范围内包含的所有数字以及端值(例如，1至5包括1、1.5、2、2.75、3、3.80、4、5等)。
[0037]
如本文所用，术语“环境温度”或“室温”是指20℃至25℃、或22℃至25℃的温度。
[0038]
术语“在范围中”或“在范围内”(以及类似的表述)包括所述范围的端点。
[0039]
本文所公开的替代要素或实施方案的分组不应理解为限制性的。每个组成员可以单独引用和受权利要求书保护或者与组中的其它成员或其中发现的其它要素以任何组合方式引用和受权利要求书保护。预期组的一个或多个成员可能因便利性和/或专利性的原因而包含在组中或从组中删除。发生任何此类包含或删除时，说明书在本文中被视为含有修改的组，从而满足对所附权利要求书中使用的所有马库什组的书面说明。
[0040]
当基团多于一次出现在本文所述的式中时，无论是否明确陈述，每个基团都是“独立地”选择的。例如，当式中存在多于一个r基团时，每个r基团均是独立选择的。
[0041]
贯穿本说明书的对“一个实施方案”、“实施方案”、“某些实施方案”或“一些实施方案”等的引用，意指结合实施方案描述的具体特征、构型、组成或特性包括在本发明的至少一个实施方案中。因此，贯穿本说明书在各处出现的此类短语不一定是指本发明中的相同实施方案。此外，具体特征、构型、组合物或特性可在一个或多个实施方案中以任何合适的方式进行组合。
[0042]
本公开的以上发明内容并不旨在描述本发明的每个公开实施方案或每种实施方式。以下描述更具体地举例说明了例示性实施方案。在本技术通篇的若干处，通过示例列表提供了指导，这些示例可以各种组合使用。在每种情况下，所引用的列表都只用作代表性的组，并且不应被理解为排他性列表。因此，本公开的范围不应限于本文所述的特定说明性结构，而应至少扩展至由权利要求书的语言所描述的结构以及这些结构的等同形式。本说明书中正面引用的作为替代方案的任何要素可根据需要以任何组合明确地包括于权利要求书中或从权利要求书排除。虽然本文可能已经讨论了各种理论和可能的机理，但在任何情况下都不应将此类讨论用于限制可受权利要求书保护的主题。
具体实施方式
[0043]
本公开提供了下式(i)的化合物(或其盐)：
[0044][0045]
式(i)的化合物在n-1支链基团上具有手性中心。因此，式(i)的化合物可拆分成式(ii)和(iii)的化合物(或其盐)(或者此类化合物可使用熟知的技术使用手性起始物质来合成)：
[0046][0047]
以及
[0048][0049]
其中：
[0050]
m为0或1的整数；
[0051]
n为0或1的整数；
[0052]
r选自卤素、羟基、烷基、烷氧基和-c(o)-o-烷基；
[0053]
r1为烷基或-ch
2-o-c
1-4
烷基；
[0054]
r2选自氢、甲基、乙基、正丙基、正丁基、-ch2och3、-ch2och2ch3和-ch2ch2och3；并且
[0055]
r3选自卤素、羟基、烷基和烷氧基；前提条件是当r3为烷氧基时，r1为烷基。
[0056]
根据疾病或病症、期望的细胞因子特征和/或可接受的副作用水平，式(ii)的化合物或盐比式(iii)的化合物或盐可更为期望。通常，相对于诱导细胞因子生物合成，式(ii)的化合物或盐比式(iii)的化合物或盐更具活性。然而，一般来讲，活性较高的式(ii)的化合物或盐是使用所期望的，活性较低的式(iii)的化合物或盐可用于某些情况下，例如，以避免不良副作用。
[0057]
在式(i)、(ii)和(iii)中，r1为烷基或-ch
2-o-c
1-4
烷基。在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，r1为-c
1-6
烷基或者-ch
2-o-c
1-4
烷基。在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，r1为-c
1-6
烷基或-c
1-4
烷基。在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，r1为-ch
2-o-c
1-4
烷基，诸如-ch
2-o-ch3或-ch
2-o-ch2ch3。
[0058]
在式(i)、(ii)和(iii)中，r2选自氢、甲基、乙基、正丙基、正丁基、-ch2och3、-ch2och2ch3和-ch2ch2och3。在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，r2选自氢、甲基和乙基。在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，r2为氢或甲基。在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，r2为氢。
[0059]
在式(i)、(ii)和(iii)中，n为0或1(即，r以芳基环上的取代基存在)。在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，n为0(即，r不存在)。
[0060]
在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，n为1，并且r选自卤素、羟基、烷基、烷氧基和-c(o)-o-烷基。在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，r选自卤素、羟基、-c
1-7
烷基、-c
1-7
烷氧基和-c(o)-o-c
1-5
烷基。在一些实施方案中，r选自羟基、f和cl。在一些实施方案中，r选自f和cl。
[0061]
在式(i)、(ii)和(iii)中，m为0或1(即，r3以芳基环上的取代基存在)。在式(i)、
(ii)和(iii)的一些实施方案中，m为0(即，r3不存在)。
[0062]
在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，m为1，并且-r3基团存在并且处于邻位、间位或对位，而在一些实施方案中，-r3基团处于对位。当存在时，r3选自卤素、羟基、烷基和烷氧基；前提条件是当r3为烷氧基时，r1为烷基。
[0063]
在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，r3选自卤素、羟基、-c
1-8
烷基和-c
1-8
烷氧基；前提条件是当r3为-c
1-8
烷氧基(即，-o-c
1-8
烷基)，r1为烷基(例如，-c
1-6
烷基)。在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，r3为-o-c
1-8
烷基、-o-c
1-6
烷基或者-o-c
1-4
烷基；前提条件是当r3为这些烷氧基中的一个时，r1为烷基(例如，-c
1-6
烷基或-c
1-4
烷基)。在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，r3选自卤素、羟基和-c
1-8
烷基。在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，r3为-c
1-8
烷基、-c
1-6
烷基或-c
1-4
烷基。
[0064]
在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，m为0；n为0；r1为-c
1-6
烷基；并且r2选自氢、甲基和乙基。在这些实施方案中的一些中，r1为-c
1-4
烷基并且r2为氢。此类化合物的示例包括：
[0065]
1-[(1r)-1-甲基-2-苯基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(实施例1)；以及
[0066]
1-[(1r)-1-苄基戊基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(实施例2)。
[0067]
在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，m为0；n为0；r1为-ch
2-o-c
1-4
烷基；并且r2选自氢、甲基和乙基。在这些实施方案中的一些中，r2为氢。此类化合物的示例包括：
[0068]
1-[(1r)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(实施例3)；
[0069]
1-[(1s)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(实施例5)；
[0070]
1-[(1r)-1-苄基-2-乙氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(实施例4)；以及
[0071]
1-[(1s)-1-苄基-2-乙氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(实施例6)。
[0072]
在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，m为1；n为0；r1为-c
1-6
烷基；r2选自氢、甲基和乙基；并且r3为-o-c
1-8
烷基。在这些实施方案中的一些中，r1为-c
1-6
烷基；r2为氢；并且r3为-o-c
1-6
烷基。此类化合物的示例包括：
[0073]
1-[(1r)-1-[(4-丁氧基苯基)甲基]戊基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(实施例7)。
[0074]
在式(i)、(ii)和(iii)的一些实施方案中，化合物以盐的形式存在。盐通常是药学上可接受的盐。最常见的盐为盐酸盐。
[0075]
在一些实施方案中，存在式(ii)和(iii)的化合物的混合物。在一些实施方案中，式(ii)的化合物的对映体纯度为至少80％对映体过量(80％ee)。式(ii)的化合物的对映体纯度是相对于式(iii)的化合物而言的。在一些实施方案中，式(ii)的化合物的对映体纯度为至少90％对映体过量(90％ee)。在一些实施方案中，式(ii)的化合物的对映体纯度为至少95％对映体过量(95％ee)。在一些实施方案中，式(ii)的化合物的对映体纯度为至少97％对映体过量(97％ee)。在一些实施方案中，式(ii)的化合物的对映体纯度为至少98％对映体过量(98％ee)。在一些实施方案中，式(ii)的化合物的对映体纯度为至少99％对映体过量(99％ee)。在一些实施方案中，式(ii)的化合物的对映体纯度为至少99.5％对映体过量(99.5％ee)。在一些实施方案中，式(ii)的化合物的对映体纯度为至少99.8％对映体过量(99.8％ee)。
[0076]
式(i)、(ii)和(iii)的示例性化合物呈现于表1-10中。在表1-10中，每一行代表具有所定义的n、m、r1、r2和r3的特定化合物。
[0091]
表8
[0092]
nmr1r2r301-ch
3-h-och2ch2ch2ch301-ch2ch
3-h-och2ch2ch2ch301-ch2ch2ch
3-h-och2ch2ch2ch301-ch2ch2ch2ch
3-h-och2ch2ch2ch301-ch2ch2ch2ch2ch
3-h-och2ch2ch2ch301-ch2ch2ch2ch2ch2ch
3-h-och2ch2ch2ch3[0093]
表9
[0094]
nmr1r2r301-ch
3-h-oc6h
13
01-ch2ch
3-h-oc6h
13
01-ch2ch2ch
3-h-oc6h
13
01-ch2ch2ch2ch
3-h-oc6h
13
01-ch2ch2ch2ch2ch
3-h-oc6h
13
01-ch2ch2ch2ch2ch2ch
3-h-oc6h
13
[0095]
表10
[0096]
nmr1r2r301-ch
3-h-oc8h
17
01-ch2ch
3-h-oc8h
17
01-ch2ch2ch
3-h-oc8h
17
01-ch2ch2ch2ch
3-h-oc8h
17
01-ch2ch2ch2ch2ch
3-h-oc8h
17
01-ch2ch2ch2ch2ch2ch
3-h-oc8h
17
[0097]
本公开提供了一种通过向人或动物施用有效量的化合物或盐来诱导人或动物中的细胞因子生物合成的方法，该化合物或盐选自以上实施方案中的任一个的式(i)(其可为式(ii)和/或式(iii)(优选地，式(ii))的化合物或其盐)。
[0098]
本公开提供了一种通过向人或动物施用有效量的化合物或盐来诱导人或动物中的ifn-α生物合成的方法，该化合物或盐选自以上实施方案中的任一个的式(i)(其可为式(ii)和/或式(iii)(优选地，式(ii)的化合物或其盐)。
[0099]
本公开提供了一种通过向人或动物施用有效量的化合物或盐来诱导人或动物中的ifn-γ生物合成的方法，该化合物或盐选自以上实施方案中的任一个的式(i)(其可为式(ii)和/或式(iii)(优选地，式(ii)的化合物或其盐)。
[0100]
本公开提供了一种通过向人或动物施用有效量的化合物或盐来诱导人或动物中的tnf-α生物合成的方法，该化合物或盐选自以上实施方案中的任一个的式(i)(其可为式(ii)和/或式(iii)(优选地，式(ii)的化合物或其盐)。
[0101]
本公开提供了一种通过向人或动物施用有效量的化合物或盐来诱导人或动物中的ip-10生物合成的方法，该化合物或盐选自以上实施方案中的任一个的式(i)(其可为式
(ii)和/或式(iii)(优选地，式(ii)的化合物或其盐)。
[0102]
本公开提供了一种通过向人或动物施用有效量的化合物或盐来治疗人或动物中的病毒性疾病的方法，该化合物或盐选自以上实施方案中的任一个的式(i)(其可为式(ii)和/或式(iii)(优选地，式(ii)的化合物或其盐)。
[0103]
本公开提供了一种通过向人或动物施用有效量的化合物或盐来治疗人或动物中的肿瘤性疾病的方法，该化合物或盐选自以上实施方案中的任一个的式(i)(其可为式(ii)和/或式(iii)(优选地，式(ii)的化合物或其盐)。
[0104]
本公开的化合物可通过合成途径合成，该合成途径包括与化学领域中熟知的那些类似的工艺，特别是按照本文包含的说明书。起始物质通常可得自商业来源，诸如美国密苏里州圣路易斯的西格玛奥德里奇公司(sigma-aldrich company(st.louis,mo))，或者易于使用本领域普通技术人员熟知的方法制备(例如通过通常描述于以下文献中的方法制备：louis f.fieser和mary fieser，有机合成试剂，第1-26卷，纽约威利出版社(louis f.fieser and mary fieser,reagents for organic synthesis,v.1-26,wiley,new york)；alan r.katritsky、otto meth-cohn、charles w.rees，综合有机官能团转化，第1-6卷，英国牛津的培格曼出版社(1995年)(alan r.katritsky,otto meth-cohn,charles w.rees,comprehensive organic functional group transformations,v 1-6,pergamon press,oxford,england,(1995))；barry m.trost和ian fleming，综合有机合成，第1-8卷，英国牛津的培格曼出版社(1991年)(barry m.trost and ian fleming,comprehensive organic synthesis,v.1-8,pergamon press,oxford,england,(1991))；或德国柏林斯普林格出版社出版的第4版的拜耳斯坦有机化学手册(beilsteins handbuch der organischen chemie,4,aufl.ed.springer-verlag,berlin,germany)，包括增刊(也可经由拜耳斯坦在线数据库获得))。
[0105]
本公开的化合物可例如根据反应方案i、ii、iii、iv和v来制备，其中r、r1、r2、r3、m和n如上所述。在反应方案i中，在步骤(1)中使式v的4-氯-3-硝基喹啉与式iv的胺化合物反应，以提供式vi的3-硝基喹啉-4-胺。该反应可通过在存在叔胺诸如三乙胺的情况下将式iv的胺添加到式v在合适的溶剂诸如二氯甲烷中的溶液中来进行。式v的4-氯-3-硝基喹啉化合物和取代的类似物是已知的化合物(参见例如美国专利号3,700,674(diehl等人)、5,389,640(gerster等人)、6,110,929(gerster等人)、7,923,560(wightman等人)以及其中所引用的参考文献)。在许多情况下，式v的取代的类似物(例如n＝1，并且r为卤素、烷氧基或苄氧基基团)可以从可商购获得的取代的苯胺开始制备。
[0106]
在反应方案i的步骤(2)中，可以将式vi的硝基基团还原成氨基基团。还原可以在压力瓶中使用氢气、催化量的碳载钯或碳载铂、以及溶剂(诸如甲醇、乙腈、甲苯、或它们的组合物)进行。该反应可以用parr装置进行。另选地，可在两相二氯甲烷-水溶剂体系中使用连二亚硫酸钠和催化性二辛基紫精来实现所需的还原。在反应方案i的步骤(3)中，可以使所得的3,4-二胺化合物与羧酸(r2co2h)反应，以提供式vii的1h-咪唑并[4,5-c]喹啉。可使用羧酸的合适等同物，诸如酰氯、硫酯和1,1-二烷氧基烷基链烷酸酯。羧酸或等同物被选择为使得其将在式vii的化合物中提供期望的r2取代基。例如，原甲酸三乙酯将提供其中r2为氢的化合物，并且原戊酸三甲酯将提供其中r2为正丁基的化合物。该反应可在不具有溶剂或具有惰性溶剂(例如乙酸乙酯、乙酸正丙酯或甲苯)的情况下进行。任选地，可以包括催化
剂，诸如盐酸吡啶。
[0107]
在反应方案i的步骤(4)中，可以使用能够形成n-氧化物的常规氧化剂将式vii的1h-咪唑并[4,5-c]喹啉氧化，以提供1h-咪唑并[4,5-c]喹啉-5n-氧化物。优选地，使式vii的化合物在合适溶剂诸如氯仿或二氯甲烷中的溶液在环境温度处与3-氯过苯甲酸(mcpba)反应。
[0108]
在反应方案i的步骤(5)中，可将n-氧化物化合物胺化以提供式i的1h-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺。步骤(5)涉及使n-氧化物化合物与酰化剂和胺化剂在惰性溶剂诸如二氯甲烷或氯仿中反应。合适的酰化剂包括烷基或芳基磺酰氯，诸如苯磺酰氯、甲磺酰氯或对甲苯磺酰氯。氢氧化铵是合适的胺化剂。式i的化合物可任选地作为有机或无机盐(例如作为hcl盐)分离。
[0109]
反应方案i
[0110][0111]
在反应方案ii中，式viii的化合物是boc保护的α-氨基酸。许多boc保护的α-氨基酸是可商购的(例如n-boc苯丙氨酸、n-boc-2-氟苯丙氨酸、n-boc-3-氟苯丙氨酸、n-boc-4-氟苯丙氨酸、n-boc-4-氯苯丙氨酸、n-boc-4-溴苯丙氨酸、n-boc-4-碘苯丙氨酸、n-boc酪氨酸和n-boc-o-叔丁基-l-酪氨酸)。boc保护的α-氨基酸也可通过许多常规方法由α-氨基酸制备(例如参见p.g.m.wuts，有机合成中的格林保护基团，约翰威立国际出版公司，美国纽约，2014年(p.g.m.wuts,greene’s protective groups in organic synthesis,john wiley&sons,new york,usa,2014)。在反应方案ii的步骤(6)中，式viii的boc保护的α-氨基酸可溶解在惰性溶剂中，诸如四氢呋喃，并且与氯甲酸烷基酯(例如氯甲酸甲酯、氯甲酸乙酯或氯甲酸异丁酯)在碱(例如三乙胺或n-甲基吗啉)存在下反应以形成混合酸酐。然后可用硼氢化钠还原中间混合酸酐以提供式ix的醇。式ix的许多boc保护的氨基醇是可商购的(例如，n-[(1r)-1-苄基-2-羟基-乙基]氨基甲酸叔丁酯和n-[(1s)-1-苄基-2-羟基-乙基]氨基甲酸叔丁酯)，消除了对步骤(6)的需要。
[0112]
在反应方案ii的步骤(7)中，式ix的醇可使用常规方法转化为碘化物，诸如将醇添加到三苯基膦、咪唑和碘在惰性溶剂(例如二氯甲烷)中的混合物中，以提供式x的烷基碘化物。在反应方案ii的步骤(8)中，可还原碘化物以提供式xi的化合物。还原可在压力瓶中使用氢气、催化量的碳载钯或碳载铂以及诸如甲醇的溶剂进行。还原可在碱诸如碳酸氢钠的存在下进行。该反应可以用parr装置进行。在步骤(9)中，boc氨基保护基团可通过与盐酸在醇溶剂(例如甲醇或乙醇)中反应而去除，以提供式xii的伯胺化合物。通常方便的是，将式xii的化合物作为盐酸盐分离。式xii的化合物可根据反应方案i中所述的步骤(1-5)而进一步反应，以提供式i的化合物，其中r1为-ch3。
[0113]
反应方案ii
[0114][0115]
在反应方案iii的步骤(10)中，可通过本领域技术人员已知的多种方法将式ix的α-氨基醇氧化为醛。具体地，d.a.six等人(《药物化学杂志》，2007年，第50卷，第4222-4235页(j.med.chem.,2007,50,pages 4222-4235))描述的使用(2,2,6,6-四甲基哌啶-1-基)氧基(tempo)和次氯酸钠的方法可用于将式ix的boc保护的氨基醇氧化为式xiii的醛。
[0116]
在反应方案iii的步骤(11)中，可使式xiii的醛经受wittig反应条件，以提供式xiv的烯烃化合物(其中r4为-h或c
1-4
烷基)。在wittig反应中，烷基三苯基鏻盐可与碱反应以形成磷-碳内鎓盐。合适的烷基三苯基鏻盐的示例包括甲基三苯基溴化鏻、乙基三苯基溴化鏻、正丙基三苯基溴化鏻等。合适的碱的示例包括氢化钠、丁基锂和六甲基二硅基氨基钾。然后可使式xiii的醛与三苯基鏻内鎓盐在合适的溶剂诸如甲苯中反应，以提供式xiv的烯烃化合物。所获得的烯烃通常以z构型形成(如图所示)，但在一些情况下也可为e构型。
[0117]
在反应方案iii的步骤(12)中，可还原式xiv的烯烃以形成式xv的饱和烷基基团。还原可以在压力瓶中使用氢气、催化量的碳载钯或碳载铂、以及溶剂(诸如甲醇、乙腈、甲苯、或它们的组合物)进行。该反应可以用parr装置进行。在步骤(13)中，boc氨基保护基团可通过与盐酸在醇溶剂(例如甲醇或乙醇)中反应而去除，以提供式xvi的伯胺化合物。通常方便的是，将式xvi的化合物作为盐酸盐分离。式xvi的化合物可根据反应方案i中所述的步骤(1-5)而进一步反应，以提供式i的化合物，其中r1为具有至少两个碳原子的烷基基团。
[0118]
反应方案iii
[0119][0120]
在反应方案iv的步骤(14)，式ix的化合物可被烷基化以得到式xvii的烷基醚。溶解在惰性溶剂(诸如庚烷或甲苯)中的式ix化合物可在氢氧化钠和相转移催化剂(诸如四丁基溴化铵)存在下与二烷基硫酸盐(例如，硫酸二甲酯或硫酸二乙酯)反应，以提供式xvii的烷基醚。boc氨基保护基团可在步骤(15)中通过使式xvii的化合物与盐酸在醇溶剂(例如甲醇或乙醇)中反应而去除，以提供式xvii的伯胺化合物。通常便利的是，将式xviii的化合物作为盐酸盐分离。式xviii的化合物可根据反应方案i中所述的步骤(1-5)而进一步反应，以提供式i的化合物，其中r1为-ch
2-o-c
1-4
烷基。
[0121]
反应方案iv
[0122][0123]
在反应方案v中，式xix的化合物是保护酚，其中r6是酚醇的合适保护基团(诸如叔丁基或苄基保护基)。式xix的化合物可使用反应方案ii中所述的方法制备，以提供其中r1为-ch3的化合物或使用反应方案iii中所述的方法制备，以提供其中r1是具有至少两个碳原子的烷基基团的化合物。在步骤(16)中，boc氨基保护基团和酚醇保护基团可通过与盐酸在醇溶剂(例如甲醇或乙醇)中反应而去除，以提供式xx的伯胺化合物。通常方便的是，将式xx的化合物作为盐酸盐分离。
[0124]
在反应方案v的步骤(17)中，式xx的化合物可与式v的4-氯-3-硝基喹啉反应，以提供式xxi的3-硝基喹啉-4-胺。该反应可通过在存在叔胺(诸如三乙胺)的情况下将式xx的胺添加到式v在合适的溶剂(诸如二氯甲烷)中的溶液中来进行。
[0125]
在反应方案v的步骤(18)中，可将式xxi的硝基基团还原成氨基基团。还原可以在压力瓶中使用氢气、催化量的碳载钯或碳载铂、以及溶剂(诸如甲醇、乙腈、甲苯、或它们的
组合物)进行。该反应可以用parr装置进行。另选地，可在两相二氯甲烷-水溶剂体系中使用连二亚硫酸钠和催化性二辛基紫精来实现所需的还原。在反应方案v的步骤(19)中，可使所得的3,4-二胺化合物与羧酸(r2co2h)反应，以提供式xxii的1h-咪唑并[4,5-c]喹啉。可使用羧酸的合适等同物，诸如酰氯、硫酯和1,1-二烷氧基烷基链烷酸酯。选择羧酸或等同物，使得其将在式xxii的化合物中提供所需的r2取代基。例如，原甲酸三乙酯将提供其中r2为氢的化合物，并且原戊酸三甲酯将提供其中r2为正丁基的化合物。该反应可在不具有溶剂或具有惰性溶剂(例如乙酸乙酯、乙酸正丙酯或甲苯)的情况下进行。任选地，可以包括催化剂，诸如盐酸吡啶。
[0126]
在反应方案v的步骤(20)中，使用常规合成方法将式xxii的1h-咪唑并[4,5-c]喹啉转化为式xxiii的醚。例如，式xxii的化合物可与合适的烷基卤化物(烷基溴化物或烷基碘化物)和碱(诸如碳酸铯)在惰性溶剂(诸如n,n-二甲基甲酰胺)中反应。选择烷基卤化物，使得其将在式xxii的化合物中提供所需的r7取代基。
[0127]
在反应方案v的步骤(21)中，可使用能够形成n-氧化物的常规氧化剂将式xxiii的1h-咪唑并[4,5-c]喹啉氧化，以提供1h-咪唑并[4,5-c]喹啉-5n-氧化物。优选地，使式xxii的化合物在合适溶剂(诸如氯仿或二氯甲烷)中的溶液在环境温度下与3-氯过苯甲酸(mcpba)反应。
[0128]
在反应方案v的步骤(22)中，可将n-氧化物化合物胺化，以提供式xxiv的1h-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺。步骤(22)涉及使n-氧化物化合物与酰化剂和胺化剂在惰性溶剂(诸如二氯甲烷或氯仿)中反应。合适的酰化剂包括烷基或芳基磺酰氯，诸如苯磺酰氯、甲磺酰氯或对甲苯磺酰氯。氢氧化铵是合适的胺化剂。式xxiv的化合物可任选作为有机或无机盐(例如作为hcl盐)分离。式xxiv是式i的实施方案，其中r1是烷基并且r3是烷氧基。
[0129]
反应方案v
[0130][0131]
对于反应方案i-v，化合物被绘制为外消旋的。应当理解，这些反应方案也可以按照从高对映体纯度的化合物(例如d或l氨基酸)开始，以制备高对映体纯度的本公开的最终化合物。
[0132]
式(i)的化合物(其可为式(ii)和/或式(iii)的化合物)可通过用具有高对映体纯度的反应物开始反应方案来制备。另选地，可使用反应物的外消旋混合物或低对映体纯度(例如，10-70％对映体过量)的反应物，其中使用用于拆分对映体混合物的任何合适的程序将最终产物分离为所需的式(ii)对映体。用于拆分对映体混合物的熟知方法是使用具有手性固定相(csp)的柱的hplc色谱法。用于拆分对映体混合物的另一种标准方法涉及使混合物与光学纯的羧酸反应形成非对映体盐，可以通过例如重结晶或色谱方法容易地分离所述非对映体盐。游离碱的再生完成了拆分过程。可用于高对映体纯度的拆分剂的示例包括但不限于( )-酒石酸、(-)-扁桃酸、(-)-苹果酸、(( )-樟脑-10-磺酸和( )-2,3-二苯甲酰酒石酸。如果需要，可以组合不同类型的拆分步骤，并且可以利用多个拆分步骤来获得所需的对映体纯度。将对映体纯度表示为对映体过量百分比(％ee)。用于拆分异构体的方法在以下参考文献中描述：y.okamoto，《化学学会评论》，2008年，第37卷，第2593-2608页(y.okamoto,chemical society reviews,2008,37,pages 2593-2608)；g.gubitz，《生物药
剂学和药物处置》，2001年，第22卷，第291-336页(g.gubitz,biopharmaceutics and drug disposition,2001,22,pages291-336)；以及s.mane，《分析方法》，2016年，第8卷，第7567-7586页(s.mane,analytical methods,2016,8,pages 7567-7586)。
[0133]
在本公开的化合物的制备中，本领域普通技术人员应当理解，在中间体化合物的其它官能团反应的同时保护特定官能团可能是必要的。这种保护的需要将取决于特定官能团的性质和特定反应步骤的条件而变化。关于保护和脱保护官能团的反应的综述可以在以下文献中找到：p.g.m.wuts，《有机合成中的格林保护基团》，约翰威立国际出版公司，美国纽约，2014年(p.g.m.wuts,greene’s protective groups in organic synthesis,john wiley&sons,new york,usa,2014)。
[0134]
可以使用分离和纯化的常规方法和技术来分离在本公开的组合物中使用的irm化合物。此类技术可包括，例如，所有类型的色谱法(高效液相色谱法(hplc)、使用诸如硅胶的常见吸收剂的柱色谱法，和薄层色谱法)、重结晶和微分(即液-液)萃取技术。
[0135]
可以使用标准分析测定法(诸如气相色谱法或具有手性固定相(csp)的柱的hplc)来确定本公开的化合物的对映体过量。合适的具有csp的柱可从宾夕法尼亚州韦斯特切斯特的手性技术公司(chiral technologies,inc.,westchester,pa)获得。
[0136]
根据公式1计算对映体过量(％ee)。
[0137]
公式1.
[0138][0139]
可以由手性hplc色谱图计算对映体过量(％ee)，具体方式是通过根据公式2比较主要对映体信号和次要对映体信号的峰面积。
[0140]
公式2.
[0141][0142]
所公开的化合物的前药还可通过将可在生理条件下裂解的官能团连接至化合物来制备。通常，可裂解的官能团将通过多种机制(诸如通过化学(例如水解)或酶转化)在体内裂解以生成本公开的化合物。在t.higuchi和w.stella，“作为新型药物输送系统的前药”，acs研讨会系列的第14期(t.higuchi and w.stella.“prodrugs as novel delivery systems”,vol.14of the acs symposium series)和1987年美国制药协会和佩加蒙出版社的edward b.roche编著的药物设计中的生物可逆载体(bioreversible carriers in drug design,ed.edward b.roche,american pharmaceutical association and pergamon press,1987)中提供了关于前药使用的讨论。
[0143]
药物组合物和生物活性
[0144]
还设想了本公开的药物组合物。本公开的药物组合物包含治疗有效量的(本文所述的)本公开的化合物或盐与药学上可接受的载体的组合物。
[0145]
式(i)的化合物(其可为式(ii)和/或式(iii)的化合物)可以适合施用于受试者(人或动物)的任何药物组合物提供，并且可以任何合适的形式(例如，溶液、悬浮液、乳液或任何形式的混合物)存在于药物组合物中。药物组合物可用任何药学上可接受的赋形剂、载
体或媒介物配制。在一些实施方案中，药学上可接受的载体包括水(例如，磷酸盐缓冲盐水或柠檬酸盐缓冲盐水)。在一些实施方案中，药学上可接受的载体包括油(例如，玉米油、芝麻油、棉籽油、大豆油或红花油)。药物组合物还可包含一种或多种添加剂，包括悬浮剂、表面活性剂、分散剂和防腐剂(诸如抗氧化剂)。
[0146]
在药物组合物的一些实施方案中，可以将式(i)的化合物(其可为式(ii)和/或式(iii)的化合物)掺入均匀分散的制剂中。在药物组合物的一些实施方案中，可以将式(i)的化合物(其可为式(ii)和/或式(iii)的化合物)掺入乳化制剂中。在药物组合物的一些实施方案中，可以将式(i)的化合物(其可为式(ii)和/或式(iii)的化合物)掺入水包油制剂中。水包油制剂可以包含油组分、水性组分和一种或多种表面活性剂(例如，包含大豆油、tween 80、span 85和磷酸盐缓冲盐水的制剂)。在药物组合物的一些实施方案中，可以将式(i)的化合物(其可为式(ii)和/或式(iii)的化合物)掺入脂质体制剂中。
[0147]
在一些实施方案中，药物组合物还可以包含有效产生针对抗原的免疫应答的量的抗原。在一些实施方案中，抗原为疫苗。
[0148]
药物组合物可以以任何合适的方式(肠胃外或非肠胃外)施用。在一些实施方案中，药物组合物可以通过皮内、皮下、肌内或静脉内注射施用。
[0149]
在包含式(ii)的化合物的药物组合物的任何实施方案中，式(ii)的化合物以相对于式(iii)的化合物至少80％对映体过量、至少90％对映体过量、至少95％对映体过量、至少96％对映体过量、至少96％对映体过量、至少97％对映体过量、至少98％对映体过量、至少99％对映体过量、至少99.5％对映体、或至少99.8％对映体存在于组合物中。
[0150]
在包含式(ii)的化合物的药物组合物的任何实施方案中，与式(ii)的化合物(即式(iii)的化合物)相反的对映体以小于10％、小于5％、小于2.5％、小于2％、小于1.5％、小于1％、小于0.5％、小于0.25％、或小于0.1％存在于组合物中。
[0151]
用于本公开的药物组合物中的化合物或盐的精确量将根据本领域技术人员已知的因素(诸如化合物或盐的物理和化学性质、载体的性质以及预期的给药方案)而变化。
[0152]
在一些实施方案中，式(i)的化合物(其可为式(ii)和/或式(iii)的化合物)在药物组合物中的浓度可为至少0.0005mg/ml、至少0.001mg/ml、或至少0.05mg/ml。在一些实施方案中，式(i)的化合物(其可为式(ii)和/或式(iii)的化合物)在药物组合物中的浓度可为至多2.4mg/ml、至多0.06mg/ml、至多0.01mg/ml、或至多0.005mg/ml。
[0153]
在一些实施方案中，本公开的组合物将包含足够的活性成分或前药以向受试者提供至少100纳克/千克(ng/kg)或至少10微克/千克(μg/kg)的化合物或盐的剂量。在一些实施方案中，本公开的组合物将包含足够的活性成分或前药以向受试者提供至多50毫克/千克(mg/kg)或至多5mg/kg的化合物或盐的剂量。
[0154]
在一些实施方案中，本公开的组合物将包含足够的活性成分或前药以提供例如0.01mg/m2至5.0mg/m2的剂量(根据dubois方法计算，其中受试者的体表面积(m2)使用受试者的体重来计算：m2＝(wt kg
0.425
×
高度cm
0.725
)
×
0.007184，虽然在一些实施方案中该方法可以通过施用剂量超出此范围的化合物或盐或组合物来执行)。在这些实施方案的一些中，该方法包括施用足够的化合物以向受试者提供0.1mg/m2至2.0mg/m2的剂量，例如，0.4mg/m2至1.2mg/m2的剂量。
[0155]
可使用多种剂型将本公开的化合物或盐施用于人或动物。可以使用的剂型包括例
如片剂、锭剂、胶囊剂、肠胃外制剂、乳膏剂、软膏剂、局部凝胶剂、气雾剂制剂、液体制剂(例如，水性制剂)、透皮贴剂等。这些剂型可使用常规方法用常规药学上可接受的载体和添加剂制备，常规方法通常包括使活性成分与载体结合的步骤。优选的剂型具有溶解在水性制剂中的一种或多种本公开的化合物或盐。
[0156]
本文公开的化合物或盐在根据实施例的描述进行的实验中诱导某些细胞因子的产生。这些结果表明，该化合物或盐可用于以多种不同的方式增强免疫应答，从而使它们可用于治疗各种疾病。
[0157]
本文所述的化合物或盐可以作为治疗方案中的单一治疗剂施用，或者本文所述的化合物或盐可与其它活性剂(包括抗病毒剂、抗生素、蛋白质、肽、寡核苷酸、抗体等)组合施用。
[0158]
本文所述的化合物或盐在根据下述测试进行的实验中诱导细胞因子(例如，ifn-α、ifn-γ、tnf-α、ip-10)的产生。这些结果表明，本公开的化合物或盐可用于以多种不同的方式激活免疫应答，从而使它们可用于治疗各种疾病。因此，本公开的化合物或盐(具体地，式ii的化合物或盐)是细胞因子生物合成和产生的激动剂，具体地，ifn-α、ifn-γ、tnf-α和ip-10细胞因子生物合成和产生的激动剂。
[0159]
据信，本公开的化合物或盐(具体地，式ii的化合物或盐)诱导细胞因子产生的一种方式是通过激活免疫系统中的toll样受体(tlr，具体地，tlr-7和/或tlr-8)，但是可能涉及其它机制。据信，在用于细胞因子诱导的免疫系统途径(即机制)中，本公开的化合物或盐(具体地，式ii的化合物或盐)主要用作tlr-7和/或tlr-8的激动剂，但是可能涉及其它途径或活动。
[0160]
本文所述的化合物(特别是式(ii)的化合物)或盐的施用可诱导细胞中干扰素-α(ifn-α)、干扰素-γ(ifn-γ)、肿瘤坏死因子-α(tnf-α)和ip-10的产生。其生物合成可由本公开的化合物或盐诱导的细胞因子包括ifn-α、ifn-γ、tnf-α、ip-10和多种其它细胞因子。除了其它效应，这些细胞因子可以抑制病毒产生和肿瘤细胞生长，使得所述化合物或盐可用于治疗病毒性疾病和肿瘤性疾病。因此，本公开提供了一种通过向人或动物施用有效量的本公开的化合物或盐来诱导人或动物中的细胞因子生物合成的方法。施用化合物或盐以诱导细胞因子产生的人或动物可患有下述一种或多种疾病、障碍或病症：例如病毒性疾病或肿瘤性疾病，并且化合物或盐的施用可提供治疗性治疗。另选地，可在人或动物获得疾病之前向人或动物施用化合物或盐，使得化合物或盐的施用可提供预防性治疗。
[0161]
除了诱导细胞因子产生的能力外，本文所述的化合物(特别是式(ii)的化合物)或其盐还可影响固有免疫应答的其它方面。例如，可刺激自然杀伤细胞的活性，可能是由于细胞因子的诱导而产生的效应。本文所述的化合物(特别是式(ii)的化合物)或其盐还可激活巨噬细胞，这继而刺激一氧化氮的分泌和另外的细胞因子的产生。此外，本文所述的化合物(特别是式(ii)的化合物)或其盐可引起b-淋巴细胞的增殖和分化。
[0162]
本文确定的化合物(特别是式(ii)的化合物)或其盐或组合物可用作治疗剂的病症包括但不限于：
[0163]
病毒性疾病，诸如由于腺病毒、疱疹病毒(例如，hsv-i、hsv-ii、cmv或vzv)、痘病毒(例如，正痘病毒，诸如天花或牛痘或传染性软疣)、小核糖核酸病毒(例如，鼻病毒或肠病毒)、正粘病毒(例如，流感病毒、禽流感病毒)、副粘病毒(例如，副流感病毒、腮腺炎病毒、麻
疹病毒和呼吸道合胞病毒(rsv))、冠状病毒(例如，sars)、乳多泡病毒(例如，乳头瘤病毒，诸如引起生殖器疣、寻常疣或脚底疣的那些病毒)、肝dna病毒(例如，乙型肝炎病毒)、黄病毒(例如，丙型肝炎病毒或登革热病毒)或逆转录病毒(例如，慢病毒属，诸如hiv)、埃博拉病毒感染而引起的疾病；
[0164]
肿瘤性疾病，诸如膀胱癌、宫颈异常、宫颈癌、光化性角化病、基底细胞癌、皮肤t细胞淋巴瘤、蕈样肉芽肿、塞扎里综合征、hpv相关的头颈部肿瘤(例如，hpv阳性口咽鳞状上皮细胞癌)、卡波西肉瘤、黑素瘤、鳞状上皮细胞癌、肾细胞癌、急性髓性白血病、慢性髓性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、多发性骨髓瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、b细胞淋巴瘤、毛细胞白血病、食管癌和其它癌症；
[0165]
th2-介导的特应性疾病，诸如特应性皮炎或湿疹、嗜曙红细胞过多、哮喘、过敏症、过敏性鼻炎和ommen综合征；
[0166]
与创伤修复相关的疾病，诸如抑制瘢痕疙瘩形成和其它类型的瘢痕化(例如，增强创伤愈合，包括长期创伤)；以及
[0167]
寄生虫疾病，包括但不限于疟疾、利什曼病、隐孢子虫病、弓形体病和锥体虫感染。
[0168]
此外，本文所述的化合物(特别是式(ii)的化合物)、盐或药物组合物可用作疫苗佐剂，用于与增加体液和/或细胞介导的免疫应答的任何材料结合使用，这些材料为诸如肿瘤抗原(例如，mage-3、ny-eso-1)；活病毒、细菌或寄生虫免疫原；灭活的病毒、原生动物、真菌或细菌免疫原；类毒素；毒素；多糖；蛋白质；糖蛋白；肽；细胞疫苗；dna疫苗；自体疫苗；重组蛋白；等等。
[0169]
可从使用本文确定的化合物(特别是式(ii)的化合物)、盐或组合物作为疫苗佐剂中受益的疫苗的示例包括bcg疫苗、霍乱疫苗、鼠疫疫苗、伤寒疫苗、甲型肝炎疫苗、乙型肝炎疫苗、丙型肝炎疫苗、甲型流感疫苗、乙型流感疫苗、疟疾疫苗、副流感疫苗、脊髓灰质炎疫苗、狂犬病疫苗、麻疹疫苗、腮腺炎疫苗、风疹疫苗、黄热病疫苗、破伤风疫苗、白喉疫苗、乙型流感嗜血杆菌疫苗、结核病疫苗、脑膜炎球菌和肺炎球菌疫苗、腺病毒疫苗、hiv疫苗、水痘疫苗、巨细胞病毒疫苗、登革热疫苗、猫白血病疫苗、禽瘟疫苗、hsv-1疫苗和hsv-2疫苗、猪霍乱疫苗、日本脑炎疫苗、呼吸道合胞病毒疫苗、轮状病毒疫苗、乳头状瘤病毒疫苗、黄热病疫苗、埃博拉病毒疫苗。
[0170]
当与结肠直肠癌、头颈癌、乳腺癌、肺癌和黑素瘤相关的肿瘤抗原结合使用时，本文确定的化合物(特别是式(ii)的化合物)、盐或药物组合物尤其可用作疫苗佐剂。
[0171]
本文确定的化合物(特别是式(ii)的化合物)、盐或药物组合物尤其可用于免疫功能受损的个体。例如，化合物、盐或组合物可用于治疗在例如移植患者、癌症患者和hiv患者中的细胞介导的免疫抑制之后出现的机会性感染和肿瘤。
[0172]
可通过向有需要(患有疾病)的人或动物施用治疗有效量的本文所述的化合物(特别是式(ii)的化合物)、盐或组合物来治疗人或动物中的上述疾病或疾病类型(例如，传染病(例如，病毒、细菌、真菌或寄生虫感染)或肿瘤性疾病中的一种或多种。
[0173]
还可通过施用有效量的本文所述的化合物(特别是式(ii)的化合物)、盐或组合物作为疫苗佐剂来给人或动物接种疫苗。在一个实施方案中，给人或动物接种疫苗的方法包括将有效量的本文所述的化合物(特别是式(ii)的化合物)、盐或本文所述的组合物作为疫苗佐剂施用于人或动物。可以通过分别将疫苗佐剂和增加一种或多种体液和细胞介导的免
疫应答的物质包含在同一组合物中来将疫苗佐剂与所述物质共同施用。另选地，疫苗佐剂和增加体液和/或细胞介导的免疫应答的物质可在单独的组合物中。
[0174]
本文确定的化合物(特别是式(ii)的化合物)、盐或组合物可作为兽医应用中的预防性或治疗性疫苗佐剂。可向例如猪、马、牛、绵羊、狗、猫、家禽(诸如鸡或火鸡)等施用本文确定的化合物、盐或组合物。
[0175]
当向人或动物施用有效量以治疗膀胱癌、宫颈异常、光化性角化病、基底细胞癌、生殖器疣、疱疹病毒感染或皮肤t细胞淋巴瘤时，本文确定的化合物(特别是式(ii)的化合物)、盐或组合物可能特别有用。对于这些病症，本公开的化合物、盐或组合物的施用优选地是局部的(即，直接施加到肿瘤、病变、疣或感染组织等的表面)。
[0176]
在一个实施方案中，通过膀胱内灌注(例如，使用导管进行施用)将有效量的本文所述的化合物、盐或组合物(诸如水性组合物)施用到患有至少一种膀胱肿瘤的人或动物的膀胱中。
[0177]
能够有效的诱导细胞因子生物合成的化合物(特别是式(ii)的化合物)或盐的量通常引起一种或多种细胞类型(诸如单核细胞、巨噬细胞、树枝状细胞和b细胞)产生一定量的一种或多种细胞因子(诸如例如，ifn-α、ifn-γ、tnf-α和ip-10)，该量增加(诱导)超过此类细胞因子的背景水平。该精确剂量将根据本领域中已知的因素而变化，但通常为100ng/kg至50mg/kg或10μg/kg至5mg/kg的剂量。在其它实施方案中，该量可为例如0.01mg/m2至5.0mg/m2(根据如上所述的dubois方法计算)，但是在其它实施方案中，细胞因子生物合成的诱导可通过施用剂量超出此范围的化合物或盐来执行。在这些实施方案的一些实施方案中，该方法包括施用足够的化合物或盐或组合物以向受试者提供0.1mg/m2至2.0mg/m2的剂量，例如0.4mg/m2至1.2mg/m2的剂量。
[0178]
治疗人或动物中的病毒性感染的方法以及治疗人或动物中的肿瘤性疾病的方法可包括向人或动物施用有效量的本文所述的化合物(特别是式(ii)的化合物)或盐。
[0179]
治疗或抑制病毒性感染的有效量可以为与未经治疗的人或动物相比将引起一种或多种病毒性感染的临床表现(诸如病毒病变、病毒载量、病毒产生速率和死亡率)减少的量。对于这种治疗有效的精确量将根据本领域中已知的因素而变化，但其通常为100ng/kg至50mg/kg或10μg/kg至5mg/kg的剂量。
[0180]
能够有效治疗肿瘤性疾病的化合物(特别是式(ii)的化合物)或盐的量可为引起肿瘤大小或肿瘤病灶数量减小的量。该精确量将根据本领域中已知的因素而变化，但通常为100ng/kg至50mg/kg或10μg/kg至5mg/kg。在其他实施方案中，该量通常为例如0.01mg/m2至5.0mg/m2(根据如上所述的dubois方法计算)，但在一些实施方案中，细胞因子生物合成的诱导可通过施用剂量超出此范围的化合物或盐来执行。在这些实施方案的一些实施方案中，该方法包括施用足够的化合物或盐或组合物以向受试者提供0.1mg/m2至2.0mg/m2的剂量，例如0.4mg/m2至1.2mg/m2的剂量。
[0181]
实施方案
[0182]
实施方案1为一种式(i)的化合物或其盐：
[0183][0184]
其中：
[0185]
m为0或1的整数；
[0186]
n为0或1的整数；
[0187]
r选自卤素、羟基、烷基、烷氧基和-c(o)-o-烷基；
[0188]
r1为烷基或-ch
2-o-c
1-4
烷基；
[0189]
r2选自氢、甲基、乙基、正丙基、正丁基、-ch2och3、-ch2och2ch3和-ch2ch2och3；并且
[0190]
r3选自卤素、羟基、烷基和烷氧基；前提条件是当r3为烷氧基时，r1为烷基。
[0191]
实施方案2为根据实施方案1所述的化合物或盐，所述化合物或盐为式(ii)的化合物或其盐：
[0192][0193]
实施方案3为根据实施方案1所述的化合物或盐，所述化合物或盐为式(iii)的化合物或其盐：
[0194][0195]
实施方案4为根据实施方案1至3中任一个所述的化合物或盐，其中m＝0。
[0196]
实施方案5为根据实施方案1至3中任一个所述的化合物或盐，其中m＝1。
[0197]
实施方案6为根据实施方案5所述的化合物或盐，其中-r3基团处于邻位、间位或对位。
[0198]
实施方案7为根据实施方案6所述的化合物或盐，其中-r3基团处于对位。
[0199]
实施方案8为根据实施方案5至7中任一个所述的化合物或盐，其中r3选自卤素、羟基、-c
1-8
烷基和-c
1-8
烷氧基。
[0200]
实施方案9为根据实施方案8所述的化合物或盐，其中r3为-o-c
1-8
烷基。
[0201]
实施方案10为根据实施方案9所述的化合物或盐，其中r3为-o-c
1-6
烷基。
[0202]
实施方案11为根据实施方案10所述的化合物或盐，其中r3为-o-c
1-4
烷基。
[0203]
实施方案12为根据实施方案8所述的化合物或盐，其中r3选自卤素、羟基、-c
1-8
烷基。
[0204]
实施方案13为根据实施方案1至12中任一个所述的化合物或盐，其中n为0。
[0205]
实施方案14为根据实施方案1至12中任一个所述的化合物或盐，其中n为1。
[0206]
实施方案15为根据实施方案14所述的化合物或盐，其中r选自卤素、羟基、-c
1-7
烷基、-c
1-7
烷氧基和-c(o)-o-c
1-5
烷基。
[0207]
实施方案16为根据实施方案15所述的化合物或盐，其中r选自羟基、f和cl。
[0208]
实施方案17为根据实施方案16所述的化合物或盐，其中r选自f和cl。
[0209]
实施方案18为根据实施方案1至17中的任一个所述的化合物或盐，其中r1为-c
1-6
烷基或-ch
2-o-c
1-4
烷基；前提条件是当r3为烷氧基时，r1为-c
1-6
烷基。
[0210]
实施方案19为根据实施方案18所述的化合物或盐，其中r1为-c
1-6
烷基。
[0211]
实施方案20为根据实施方案19所述的化合物或盐，其中r1为-c
1-4
烷基。
[0212]
实施方案21为根据实施方案20所述的化合物或盐，其中r1为-ch
2-o-c
1-4
烷基。
[0213]
实施方案22为根据实施方案21所述的化合物或盐，其中r1为-ch
2-o-ch3或-ch
2-o-ch2ch3。
[0214]
实施方案23为根据实施方案22所述的化合物或盐，其中r1为-ch
2-o-ch3。
[0215]
实施方案24为根据实施方案22所述的化合物或盐，其中r1为-ch
2-o-ch2ch3。
[0216]
实施方案25为根据实施方案1至24中任一个所述的化合物或盐，其中r2选自氢、甲基和乙基。
[0217]
实施方案26为根据实施方案25所述的化合物或盐，其中r2为氢。
[0218]
实施方案27为根据实施方案1至3中任一个所述的化合物或盐，其中m为0；n为0；r1为-c
1-6
烷基；并且r2选自氢、甲基和乙基。
[0219]
实施方案28为根据实施方案27所述的化合物或盐，其中r1为-c
1-4
烷基；并且r2为氢。
[0220]
实施方案29为根据实施方案28所述的化合物或盐，其中所述化合物为1-[(1r)-1-甲基-2-苯基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(实施例1)。
[0221]
实施方案30为根据实施方案28所述的化合物或盐，其中所述化合物为1-[(1r)-1-苄基苯基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(实施例2)。
[0222]
实施方案31为根据实施方案1至3中任一个所述的化合物或盐，其中m为0；n为0；r1为-ch
2-o-c
1-4
烷基；并且r2选自氢、甲基和乙基。
[0223]
实施方案32为根据实施方案31所述的化合物或盐，其中r2为氢。
[0224]
实施方案33为根据实施方案32所述的化合物或盐，其中所述化合物为1-[(1r)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(实施例3)。
[0225]
实施方案34为根据实施方案32所述的化合物或盐，其中所述化合物为1-[(1s)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(实施例5)。
[0226]
实施方案35为根据实施方案32所述的化合物或盐，其中所述化合物为1-[(1r)-1-苄基-2-乙氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(实施例4)。
[0227]
实施方案36为根据实施方案32所述的化合物或盐，其中所述化合物为1-[(1s)-1-苄基-2-乙氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(实施例6)。
[0228]
实施方案37为根据实施方案1至3中任一个所述的化合物或盐，其中m为1；n为0；r1为-c
1-6
烷基；r2选自氢、甲基和乙基；并且r3为-o-c
1-8
烷基。
[0229]
实施方案38为根据实施方案37所述的化合物或盐，其中r1为-c
1-6
烷基；r2为氢；并且r3为-o-c
1-6
烷基。
[0230]
实施方案39为根据实施方案38所述的化合物或盐，其中所述化合物为1-[(1r)-1-[(4-丁氧基苯基)甲基]戊基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(实施例7)。
[0231]
实施方案40为根据实施方案1至39中任一个所述的化合物或盐，其中所述盐为药学上可接受的盐。
[0232]
实施方案41为根据实施方案40所述的化合物或盐，其中所述药学上可接受的盐为盐酸盐。
[0233]
实施方案42为一种药物组合物，所述药物组合物包含有效量的根据实施方案1至41中任一个所述的化合物或盐与药学上可接受的载体的组合。
[0234]
实施方案43为根据实施方案42所述的药物组合物，其中式(ii)的化合物或其盐以至少80％对映体过量存在。
[0235]
实施方案44为根据实施方案43所述的药物组合物，其中式(ii)的化合物或其盐以至少90％对映体过量存在。
[0236]
实施方案45为根据实施方案44所述的药物组合物，其中式(ii)的化合物或其盐以
至少95％对映体过量存在。
[0237]
实施方案46为根据实施方案45所述的药物组合物，其中式(ii)的化合物或其盐以至少97％对映体过量存在。
[0238]
实施方案47为根据实施方案46所述的药物组合物，其中式(ii)的化合物或其盐以至少98％对映体过量存在。
[0239]
实施方案48为根据实施方案47所述的药物组合物，其中式(iii)的化合物或其盐以至少99％对映体过量存在。
[0240]
实施方案49为根据实施方案48所述的药物组合物，其中式(ii)的化合物或其盐以至少99.5％对映体过量存在。
[0241]
实施方案50为根据实施方案49所述的药物组合物，其中式(ii)的化合物或其盐以至少99.8％对映体过量存在。
[0242]
实施方案51为根据实施方案42至50中任一个所述的药物组合物，所述药物组合物还包含抗原。
[0243]
实施方案52为根据实施方案42至51中任一个所述的药物组合物，所述药物组合物用于治疗人或动物中的感染性疾病。
[0244]
实施方案53为根据实施方案52所述的药物组合物，所述药物组合物用于治疗人或动物中的病毒、细菌、真菌或寄生虫感染。
[0245]
实施方案54为一种诱导人或动物中的细胞因子生物合成的方法，所述方法包括向所述人或动物施用有效量的根据实施方案1至41中任一个所述的化合物或盐。
[0246]
实施方案55为根据实施方案54所述的诱导细胞因子生物合成的方法，其中施用包括向所述人或动物施用有效量的根据实施方案1、2以及从属于实施方案1或2的实施方案4至41中任一个所述的化合物或盐。
[0247]
实施方案56为根据实施方案54至55所述的诱导细胞因子生物合成的方法，其中所述细胞因子为ifn-α。
[0248]
实施方案57为根据实施方案54至55所述的诱导细胞因子生物合成的方法，其中所述细胞因子为ifn-γ。
[0249]
实施方案58为根据实施方案54至55所述的诱导细胞因子生物合成的方法，其中所述细胞因子为tnf-α。
[0250]
实施方案59为根据实施方案54至55所述的诱导细胞因子生物合成的方法，其中所述细胞因子为ip-10。
[0251]
实施方案60为一种通过施用有效量的根据实施方案1至41中任一个所述的化合物或盐来治疗人或动物中的肿瘤性疾病的方法。
[0252]
实施方案61为根据实施方案60所述的治疗肿瘤性疾病的方法，其中施用包括向所述人或动物施用有效量的根据实施方案1、2以及从属于实施方案1或2的实施方案4至41中任一个所述的化合物或盐。
[0253]
实施方案62为根据实施方案60或61所述的方法，其中所述肿瘤性疾病选自膀胱癌、宫颈异常、宫颈癌、光化性角化病、基底细胞癌、皮肤t细胞淋巴瘤、蕈样肉芽肿、塞扎里综合征、hpv相关的头颈部肿瘤(例如，hpv阳性口咽鳞状上皮细胞癌)、卡波西肉瘤、黑素瘤、鳞状上皮细胞癌、肾细胞癌、急性髓性白血病、慢性髓性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、多
发性骨髓瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、b细胞淋巴瘤、毛细胞白血病、食管癌以及它们的组合。
[0254]
实施方案63为根据实施方案1至41中任一个所述的化合物或盐，所述化合物或盐用作治疗人或动物中的感染性疾病的疫苗佐剂。
[0255]
实施方案64为根据实施方案1、2以及从属于实施方案1或2的实施方案4至41中任一个所述的化合物或盐，所述化合物或盐用作治疗人或动物中的感染性疾病的疫苗佐剂。
[0256]
实施方案65为实施方案63或64所述的化合物或盐，其中所述感染性疾病是病毒、细菌、真菌或寄生虫感染。
[0257]
实施方案66为根据实施方案63至65中任一个所述的化合物或盐，其中所述治疗为治疗性或预防性治疗。
[0258]
实施例
[0259]
本公开的目标和优点通过本文提供的实施例进一步说明。这些实施例中所述的具体材料及其量以及其它条件和细节仅是示例性的并且不旨在受到限制。本领域的普通技术人员在仔细阅读本公开的全部内容后，将能够使用除了实施例中具体描述的材料和条件之外的材料和条件。
[0260]
使用isolara hpfc系统(可从弗吉尼亚州夏洛茨维尔的拜泰齐公司(biotage,inc,charlottesville,va)获得的自动化高效快速色谱纯化产品)进行自动化快速色谱(afc)。每次纯化所用的洗脱液在实施例中给出。在一些色谱分离中，将溶剂混合物80/18/2v/v/v(按体积计)氯仿/甲醇/浓氢氧化铵(cma)用作洗脱液的极性组分。在这些分离中，将cma与氯仿按所示比例混合。
[0261]
使用bruker a500 nmr光谱仪(美国马萨诸塞州比勒利卡的布鲁克公司(bruker corporation,bilerica,ma))进行质子核磁共振(1h nmr)分析。
[0262]
10％碳载钯、3-氯过苯甲酸(57-86％、mcpba)、(2,2,6,6-四甲基哌啶-1-基)氧基(tempo)、咪唑和碳酸铯获自密苏里州圣路易斯的西格玛奥德里奇公司(sigma-aldrich company,st.louis,mo)。
[0263]
原甲酸三乙酯、3％碳载铂、乙酸正丙酯、对甲苯磺酰氯、三苯基膦、硫酸二甲酯、硫酸二乙酯、n-甲基吗啉、1-溴丁烷、吡啶盐酸盐和n-[(1s)-1-[(4-叔丁氧基苯基)甲基]-2-羟基-乙基]氨基甲酸叔丁酯(cas号66605-57-0)获自马萨诸塞州黑弗里尔的阿法埃莎公司(alfa aesar company,haverhill,ma)。
[0264]
氯甲酸异丁酯、n-boc-o-叔丁基-l-酪氨酸(cas号47375-34-8)、二碳酸二叔丁酯、丙基三苯基溴化鏻、11％的双(三甲基甲硅烷基)酰胺钾的甲苯溶液和3-氯过苯甲酸(80％，mcpba)获自南卡来罗纳州埃斯蒂尔的奥克伍德产品公司(oakwood products incorporated,estill,sc)。
[0265]
n-[(1r)-1-[(4-叔丁氧基苯基)甲基]-2-羟基-乙基]氨基甲酸叔丁酯(cas号106454-69-7)获自加利福尼亚州圣地亚哥的combi-blocks公司(combi-blocks,san diego ca)。
[0266]
碘得自美国密苏里州圣路易斯的万灵科公司(mallinckrodt,inc.,st.louis mo)。
[0267]
溴化钠、碘化钾和硫代硫酸钠0.1n标定溶液获自美国新泽西州菲利普斯堡的杰帝
贝柯化工公司(j.t.baker chemical co.phillipsburg,nj)。
[0268]
三乙胺得自德国达姆施塔特的默克密理博公司(emd millipore corporation,darmstadt germany)。
[0269]
clorox漂白剂是次氯酸钠溶液的来源，并且得自美国加利福尼亚州奥克兰的高乐氏公司(the clorox company,oakland,ca)。使用碘和硫代硫酸钠0.1n标定溶液通过滴定测定次氯酸钠浓度。
[0270]
实施例1
[0271]
1-[(1r)-1-甲基-2-苯基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺
[0272][0273]
部分a
[0274]
向500ml圆底烧瓶中装入三苯基膦(5.24克(g)，20.0毫摩尔(mmol))、咪唑(1.36g，20.0mmol)和80毫升(ml)二氯甲烷。搅拌混合物直到所有固体溶解，并且然后以小部分添加碘(5.08g，20.0mmol)，并将混合物搅拌30分钟。然后在30分钟内逐滴添加溶于80ml二氯甲烷中的n-[(1s)-1-[(4-叔丁氧基苯基)甲基]-2-羟基-乙基]氨基甲酸叔丁酯(5.02g，20.0mmol)的溶液。搅拌3小时后，添加5％的na2s2o3水溶液(100ml)，并且将混合物转移到分液漏斗中，并且分离各层。依次用5％的na2s2o3水溶液、水和盐水洗涤有机部分，并且将有机部分经na2so4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到浅橙色浆状物。使浆状物与25％乙酸乙酯/己烷合并，以沉淀出三苯基氧化膦，并将混合物通过用25％乙酸乙酯/己烷洗脱的硅胶塞过滤去除。浓缩滤液，得到5.00g n-[(1s)-1-苄基-2-碘-乙基]氨基甲酸叔丁酯，为白色固体。
[0275]
部分b
[0276]
将溶于50ml甲醇中的n-[(1s)-1-苄基-2-碘-乙基]氨基甲酸叔丁酯(4.32g，12.0mmol)溶液置于压力瓶中，随后添加200毫克(mg)的10％碳载钯和2.5g碳酸氢钠。然后将该瓶在氢气气氛(50磅每平方英寸(psi))下摇动过夜。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，并将滤液在减压下浓缩，得到油性浆状物。将浆状物溶解于乙酸乙酯中，并且依次用5％的na2s2o3水溶液、水和盐水洗涤。将有机部分经na2so4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到固体。从己烷中浓缩固体，得到2.72g n-[(1r)-1-甲基-2-苯基-乙基]氨基甲酸叔丁酯，为白色粉末。
[0277]
部分c
[0278]
将溶于20ml乙醇中的n-[(1r)-1-甲基-2-苯基-乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.72g，11.6mmol)溶液与2ml浓盐酸合并。将经搅拌的反应混合物加热至回流3.5小时，然后在减压下浓缩，得到油状物。从乙腈中结晶，得到1.62(2r)-1-苯基丙-2-胺盐酸盐，为白色晶体。
[0279]
部分d
[0280]
将溶于50ml二氯甲烷中的4-氯-3-硝基喹啉(1.75g，8.41mmol)溶液与(2r)-1-苯基丙-2-胺盐酸盐(1.52g，8.85mmol)和三乙胺(3.51ml，25.2mmol)合并，并将反应混合物在氮气气氛下搅拌过夜。将该反应混合物浓缩，以得到黄色固体。将固体溶解于50ml乙酸乙酯和50ml水中，并且分离各层。将有机部分依次用水(2x)和盐水洗涤。将有机部分经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到黄色浆状物。从乙酸乙酯/己烷中结晶，得到1.90g n-[(1r)-1-甲基-2-苯基-乙基]-3-硝基-喹啉-4-胺，为黄色浆状物。
[0281]
部分e
[0282]
将溶于50ml乙腈中的n-[(1r)-1-甲基-2-苯基-乙基]-3-硝基-喹啉-4-胺(1.90g，6.18mmol)溶液置于压力瓶中，随后添加100mg的3％碳载铂。然后将该瓶在氢气气氛(38psi)下摇动3小时。使反应混合物通过硅藻土垫过滤，用乙醇冲洗，并将滤液在减压下浓缩，得到1.70g n4-[(1r)-1-甲基-2苯基-乙基]喹啉-3,4-二胺，为白色固体。
[0283]
部分f
[0284]
将溶于50ml乙酸正丙酯中的n4-[(1r)-1-甲基-2-苯基-乙基]喹啉-3,4-二胺(1.70g，6.13mmol)溶液与原甲酸三乙酯(3.06ml，18.4mmol)和100mg盐酸吡啶合并，并将该混合物加热至100℃过夜。将温热的反应混合物依次用饱和nahco3溶液、水和盐水洗涤。将有机部分经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到黄色浆状物。通过柱色谱(sio2，1％甲醇/氯仿至5％甲醇/氯仿)纯化，得到1.71g 1-[(1r)-1-甲基-2-苯基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉，为琥珀色浆状物。
[0285]
部分g
[0286]
将溶于40ml二氯甲烷中的1-[(1r)-1-甲基-2-苯基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉(1.71g，5.96mmol)溶液与1.35g mcpba(80％)合并，并搅拌60分钟。将反应混合物与10％na2co3溶液和10ml二氯甲烷合并，并分离各层。用另一份10ml二氯甲烷进一步萃取含水部分。将合并的有机层用盐水洗涤并浓缩，得到锈色泡沫。将溶于30ml二氯甲烷中的锈色泡沫的经搅拌溶液与8ml浓nh4oh溶液和对甲苯磺酰氯(1.25g，6.56mmol)合并。搅拌55分钟后，将反应混合物用水稀释，并且分离各层。将有机部分依次用水(2x)和盐水洗涤。将有机部分经na2so4干燥，过滤并减压浓缩。从乙腈中结晶，得到1.02g 1-[(1r)-1-甲基-2-苯基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺，为铜色晶体。
[0287]1h nmr(500mhz，甲醇-d4)δ8.21-8.25(m,2h),7.72(d,j＝8.1hz,1h),7.52(t,j＝7.6hz,1h),7.36(t,j＝7.6hz,1h),7.10-7.21(m,3h),7.03(m,2h),5.57(m,1h),3.35(m,2h),1.75(d,j＝6.6hz,3h)。
[0288]
实施例2
[0289]
1-[(1r)-1-苄基苯基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺
[0290][0291]
部分a
[0292]
将溶于60ml乙酸乙酯/甲苯的1:1混合物中的n-[(1s)-1-[(4-叔丁氧基苯基)甲基]-2-羟基-乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.51g，10.0mmol)溶液置于圆底烧瓶中。然后将溶于5ml去离子水中的溴化钠(1.08g，10.5mmol)溶液添加到烧瓶中，并将该混合物在-2℃浴中搅拌。然后将tempo(22mg)添加到搅拌的混合物中，之后滴加溶于20ml去离子水中的包含次氯酸钠水溶液(4.4重量％，18.6g，11.0mmol)和nahco3(2.56g，30mmol)的溶液。添加完成后，将该混合物再搅拌30分钟。然后将该混合物用乙酸乙酯(20ml)稀释并转移至分液漏斗，并且分离各层。用另一份20ml乙酸乙酯萃取水层。将合并的有机部分依次用30ml包含360mg碘化钾的10％柠檬酸水溶液、10％na2s2o3水溶液、水洗涤，最后用盐水洗涤。将有机部分经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到2.22g n-[(1s)-1-苄基-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯，为灰白色固体。
[0293]
部分b
[0294]
向干燥的250ml圆底烧瓶中装入丙基三苯基溴化鏻(3.43g，8.92mmol)和30ml无水甲苯。将反应混合物在0℃浴中冷却并在氮气气氛下搅拌。然后向烧瓶中添加双(三甲基甲硅烷基)氨基钾的11％甲苯溶液(16.1g，8.92mmol)。搅拌15分钟后，将反应混合物转移至-78℃浴中，并添加溶于15ml无水甲苯中的n-[(1s)-1-苄基-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.22g，8.92mmol)溶液。使经搅拌的混合物升温至环境温度过夜。通过添加饱和nh4cl溶液，随后添加30ml乙醚来淬灭反应。分离各层，并用另外20ml乙醚萃取水性部分。将合并的有机层用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤并减压浓缩。使所得材料与25％乙酸乙酯/己烷合并，以沉淀出三苯基氧化膦，该三苯基氧化膦通过用25％乙酸乙酯/己烷洗脱的硅胶塞过滤去除。浓缩洗脱液，得到无色半固体。通过柱色谱法(sio2，10％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到1.64g n-[(z,1s)-1-苄基戊-2-烯基]氨基甲酸叔丁酯，为无色油状物，静置固化。
[0295]
部分c
[0296]
将溶于25ml甲醇中的n-[(z,1s)-1-苄基戊-2-烯基]氨基甲酸叔丁酯(1.64g)溶液置于压力瓶中，随后添加200mg的10％碳载钯。然后将瓶在氢气氛(40psi)下摇动过夜。通过硅藻土垫过滤反应混合物，用甲醇冲洗，并将滤液在减压下浓缩，得到1.63g n-[(1r)-1-苄基戊基]氨基甲酸叔丁酯，为无色固体。
[0297]
部分d
[0298]
将溶于20ml乙醇中的n-[(1r)-1-苄基戊基]氨基甲酸叔丁酯(1.63g，5.87mmol)溶液与2ml浓盐酸合并。将经搅拌的反应混合物加热至回流2小时，然后减压浓缩，得到油状物。从乙腈中结晶，得到806mg(2r)-1-苯基己-2-胺盐酸盐，为蓬松的白色固体。
[0299]
部分e
[0300]
将溶于25ml二氯甲烷中的(2r)-1-苯基己-2-胺盐酸盐(806mg，3.78mmol)溶液与4-氯-3-硝基喹啉(715mg，3.44mmol)和三乙胺(1.44ml，10.3mmol)合并，并将反应混合物在氮气气氛下搅拌过夜。将该反应混合物浓缩，以得到黄色固体。将该固体溶于50ml乙酸乙酯中，并依次用水(3x)和盐水洗涤。将有机部分经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到黄色浆状物。通过柱色谱法(sio2，25％甲醇/氯仿)纯化，得到1.18g n-[(1r)-1-苄基戊基]-3-硝基-喹啉-4-胺，为黄色浆状物。
[0301]
部分f
[0302]
将溶于20ml乙腈中的n-[(1r)-1-苄基戊基]-3-硝基-喹啉-4-胺(1.18g，3.38mmol)溶液置于压力瓶中，随后添加100mg的3％碳载铂。然后将该瓶在氢气气氛(35psi)下摇动4小时。使反应混合物通过硅藻土垫过滤，并将滤液在减压下浓缩，得到1.07g n4-[(1r)-1-苄基戊基]喹啉-3,4-二胺，为黄色浆状物。
[0303]
部分g
[0304]
将溶于30ml乙酸正丙酯中的n4-[(1r)-1-苄基戊基]喹啉-3,4-二胺(1.08g，3.38mmol)溶液与原甲酸三乙酯(1.69ml，10.2mmol)和50mg盐酸吡啶合并，并将该混合物加热至100℃过夜。将温热的反应混合物依次用饱和nahco3溶液、水和盐水洗涤。将有机部分经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到棕色浆状物。通过柱色谱法(sio2，3％甲醇/氯仿)纯化，得到1.05g 1-[(1r)-1-苄基戊基]咪唑并[4,5-c]喹啉，为黄色浆状物。
[0305]
部分h
[0306]
将溶于20ml二氯甲烷中的1-[(1r)-1-苄基戊基]咪唑并[4,5-c]喹啉(1.05g，3.19mmol)溶液与720mg mcpba(80％)合并，并搅拌60分钟。将反应混合物与10％na2co3溶液和10ml二氯甲烷合并，并分离各层。用另外两份10ml的二氯甲烷进一步萃取含水部分。将合并的有机层用盐水洗涤并浓缩，得到琥珀色泡沫。将溶于20ml二氯甲烷中的琥珀色泡沫的经搅拌溶液与5ml浓nh4oh溶液和对甲苯磺酰氯(670mg，3.51mmol)合并。搅拌3小时后，将反应混合物用30ml二氯甲烷稀释，并依次用水(3x)和盐水洗涤。将有机部分经na2so4干燥，过滤并减压浓缩。通过柱色谱法(sio2，用nh4oh饱和的5％甲醇/氯仿)纯化，得到浅棕色泡沫。将浅棕色泡沫溶于20ml乙醇和1ml浓盐酸中。将该混合物蒸发至干。从乙腈中结晶，得到353mg 1-[(1r)-1-苄基戊基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺盐酸盐，为淡黄色晶体。
[0307]1h nmr(500mhz，甲醇-d4)δ8.61(s,1h),8.33(d,j＝8.2hz,1h),7.71-7.76(m,1h),7.65-7.71(m,1h),7.54(dt,j＝1.3,7.7hz,1h),6.92-7.07(m,5h),5.47-5.59(m,1h),3.48(dd,j＝4.6,14.1hz,1h),3.29(dd,j＝9.5,14.1hz,1h),2.25(q,j＝7.4hz,2h),1.33-1.47(m,3h),1.20-1.32(m,1h),0.88(t,j＝7.2hz,3h)。
[0308]
实施例3
[0309]
1-[(1r)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺
[0310][0311]
部分a
[0312]
将n-[(1r)-1-[(4-叔丁氧基苯基)甲基]-2-羟基-乙基]氨基甲酸叔丁基酯(2.50g，9.95mmol)和0.05g溶于15ml甲苯中的溴化四丁基铵的搅拌溶液加热至60℃。然后将50％氢氧化钠水溶液(2.5g)添加到反应混合物中，随后添加硫酸二甲酯(1.90g，15.1mmol)并继续搅拌过夜。将反应混合物用1ml饱和nh4oh溶液淬灭。搅拌1小时后，向反应混合物添加水，并且分离各层。将有机部分经mgso4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到2.20g n-[(1r)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]氨基甲酸叔丁酯，为黄色油状物。
[0313]
部分b
[0314]
将n-[(1r)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.20g，8.30mmol)在10ml浓盐酸中的混合物搅拌过夜。然后将该反应与100ml甲醇合并并在减压下浓缩，得到白色固体。从乙腈中结晶，得到1.53g(2r)-1-甲氧基-3-苯基-丙-2-胺盐酸盐，为白色结晶固体。
[0315]
部分c
[0316]
将(2r)-1-甲氧基-3-苯基-丙-2-胺盐酸盐(1.10g，5.47mmol)和4-氯-3-硝基喹啉(1.20g，5.77mmol)在20ml二氯甲烷中的悬浮液与三乙胺(2.5ml，18mmol)合并并将反应混合物搅拌过夜。用10％的k2co3水溶液洗涤反应混合物并将有机部分经na2so4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到黄色浆状物。将黄色浆状物用甲苯研磨并过滤，得到2.54g含有n-[(1r)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]-3-硝基-喹啉-4-胺的材料，为橙色粉末，其无需进一步纯化即可用于下一反应。
[0317]
部分d
[0318]
将悬浮于100ml甲苯中的来自先前反应的材料(2.54g)溶液置于压力瓶中，随后添加0.20g的5％碳载铂。然后将瓶在氢气气氛(50psi)下摇动过夜。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，用二氯甲烷冲洗，并将滤液在减压下浓缩，得到2.27g含有n4-[(1r)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]喹啉-3,4-二胺的材料为橙色油状物，其无需进一步纯化即可用于下一反应。
[0319]
部分e
[0320]
将溶于100ml甲苯中的来自先前反应的材料(2.27g)溶液与原甲酸三乙酯(1.65g，11.1mmol)和100mg吡啶盐酸盐合并，并将混合物加热至110℃过夜。将冷却的反应混合物与10ml浓nh4oh溶液合并，并且分离各层。将有机部分经mgso4干燥，过滤并浓缩，得到2.40g含有1-[(1r)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉的材料，为橙色浆状物，其无需进一步纯化即可用于下一反应。
[0321]
部分f
[0322]
将溶于50ml二氯甲烷中的来自先前反应的材料(2.40g)溶液与2.40g mcpba
1-苄基-2-乙氧基-乙基]-3-硝基-喹啉-4-胺的材料，为黄色粉末，其无需进一步纯化即可用于下一反应。
[0333]
部分d
[0334]
将悬浮于100ml甲苯中的来自先前反应的材料溶液(2.70g)置于压力瓶中，随后添加0.2g的5％碳载铂。然后将瓶在氢气气氛(50psi)下摇动过夜。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，用二氯甲烷冲洗，并将滤液在减压下浓缩，得到2.47g含有n4-[(1r)-1-苄基-2-乙氧基-乙基]喹啉-3,4-二胺的材料，为橙色浆状物，其无需进一步纯化即可用于下一反应。
[0335]
部分e
[0336]
将溶于100ml甲苯中的来自先前反应的材料(2.47g)溶液与原甲酸三乙酯(1.85g，12.5mmol)和100mg吡啶盐酸盐合并，并将混合物加热至110℃过夜。将冷却的反应混合物与10ml浓nh4oh溶液合并，并搅拌1小时。将该混合物转移至分液漏斗并分离各层。将有机部分经mgso4干燥，过滤并浓缩，得到2.50g含有1-[(1r)-1-苄基-2-乙氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉的材料，为橙色浆状物，其无需进一步纯化即可用于下一反应。
[0337]
部分f
[0338]
将溶于50ml二氯甲烷中的来自先前反应的材料(2.50g)溶液与2.40g mcpba(77％)组合。搅拌过夜后，用1％的na2co3水溶液洗涤反应混合物，并且将有机部分经mgso4干燥和过滤。将所得溶液转移到烧瓶中，并与15ml浓nh4oh溶液合并，并将苯磺酰氯(1.35g，7.64mmol)添加到快速搅拌的反应混合物中。搅拌4天后，用5％的k2co3水溶液洗涤反应混合物，并且将有机部分经mgso4干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱法(sio2，10％cma/氯仿)纯化，得到琥珀色固体。将固体溶解在100ml甲醇和5ml浓盐酸溶液中并将混合物在减压下浓缩。从甲苯中浓缩所得浆状物，得到250mg淡黄色粉末。将一部分所得材料从乙腈中结晶，得到1-[(1r)-1-苄基-2-乙氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺盐酸盐，为白色针状物。
[0339]1h nmr(500mhz，甲醇-d4)δ8.66(s,1h),8.37(d,j＝8.3hz,1h),7.67-7.77(m,2h),7.53-7.60(m,1h),7.02-7.19(m,5h),5.73(m,1h),4.05(d,j＝5.1hz,2h),3.55(m,2h),3.51(dd,j＝5.8,14.2hz,1h)3.41(dd,j＝9.2,14.2hz,1h),1.13(t,j＝7.0hz,3h)。
[0340]
实施例5
[0341]
1-[(1s)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺
[0342][0343]
部分a
[0344]
将n-[(1s)-1-苄基-2-羟基-乙基]氨基甲酸叔丁基酯(2.50g，9.95mmol)和0.05g溶于75ml庚烷中的溴化四丁基铵的搅拌溶液加热至60℃。然后将50％氢氧化钠水溶液(3.0g)添加到反应混合物中，随后添加硫酸二甲酯(1.90g，15.1mmol)。搅拌60分钟后，将另
外一份硫酸二甲酯(0.45g)添加到反应中，并在60℃下继续搅拌过夜。将反应混合物用15ml饱和nh4oh溶液淬灭。搅拌1小时后，向反应混合物添加水，并且分离各层。将有机部分经na2so4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到2.52g n-[(1s)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]氨基甲酸叔丁酯，为无色油状物。
[0345]
部分b
[0346]
将n-[(1s)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.52g)在10ml浓盐酸中的混合物搅拌3天。然后将该反应与50ml甲醇合并并在减压下浓缩，得到白色固体。从乙腈中结晶，得到1.57g(2s)-1-甲氧基-3-苯基-丙-2-胺盐酸盐，为白色结晶固体。
[0347]
部分c
[0348]
将(2s)-1-甲氧基-3-苯基-丙-2-胺盐酸盐(1.57g，7.78mmol)和4-氯-3-硝基喹啉(1.70g，8.15mmol)在50ml二氯甲烷中的悬浮液与三乙胺(5.0ml，36mmol)合并并将反应混合物搅拌过夜。用10％的k2co3水溶液洗涤反应混合物并将有机部分经mgso4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到黄色油状物。将黄色油状物用甲苯研磨并过滤，得到2.77g含有n-[(1s)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]-3-硝基-喹啉-4-胺的材料，为橙色粉末，其无需进一步纯化即可用于下一反应。
[0349]
部分d
[0350]
将悬浮于100ml甲苯中的来自先前反应的材料溶液(2.62g)置于压力瓶中，随后添加0.25g的5％碳载铂。然后将瓶在氢气气氛(50psi)下摇动过夜。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，用二氯甲烷冲洗，并将滤液在减压下浓缩，得到2.60g含有n4-[(1s)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]喹啉-3,4-二胺的材料为橙色浆状物，其无需进一步纯化即可用于下一反应。
[0351]
部分e
[0352]
将溶于100ml甲苯中的来自先前反应的材料(2.38g)溶液与原甲酸三乙酯(1.70g，11.5mmol)和100mg吡啶盐酸盐合并，并将混合物加热至110℃过夜。用5％的k2co3水溶液洗涤经冷却的反应混合物，并且将有机部分经mgso4干燥，过滤并浓缩，得到2.35g含有1-[(1s)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]咪唑[4,5-c]喹啉的材料，为橙色浆状物，其无需进一步纯化即可用于下一反应。
[0353]
部分f
[0354]
将溶于50ml二氯甲烷中的来自先前反应的材料(2.35g)溶液与2.35g mcpba(77％)组合。搅拌过夜后，将15ml浓nh4oh溶液和苯磺酰氯(1.35g，7.64mmol)添加到快速搅拌的反应混合物中。搅拌过夜后，用5％的k2co3水溶液洗涤反应混合物，并且将有机部分经mgso4干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱法(sio2，6％cma/氯仿-16％cma/氯仿)纯化，得到琥珀色固体。将固体溶解于10ml 1.25n甲醇盐酸溶液中并在减压下浓缩。将所得固体转移至索氏套管并用回流甲苯萃取以除去有色杂质，得到1.00g白色固体。将一部分白色固体从乙腈中结晶，得到1-[(1s)-1-苄基-2-甲氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺盐酸盐，为白色针状物。
[0355]1h nmr(500mhz，甲醇-d4)δ8.65(s,1h),8.35(d,j＝8.31hz,1h),7.66-7.77(m,2h),7.52-7.60(m,1h),7.00-7.19(m,5h),5.73(m,1h),4.01(d,j＝4.5hz,2h),3.50(dd,j＝5.7,14.2hz,1h),3.40(dd,j＝9.3,14.2hz,1h),3.39(s,3h)。
[0356]
实施例6
[0357]
1-[(1s)-1-苄基-2-乙氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺
[0358][0359]
部分a
[0360]
将n-[(1s)-1-苄基-2-羟基-乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.50g，9.95mmol)和0.05g溶于15ml甲苯中的溴化四丁基铵的搅拌溶液与50％氢氧化钠水溶液(2.5g)合并，随后添加硫酸二乙酯(2.30g，14.9mmol)并且将混合物加热至60℃。搅拌8小时后，冷却反应混合物。将反应混合物转移到分液漏斗中并用水洗涤。将有机部分经mgso4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到2.44g n-[(1s)-1-苄基-2-乙氧基-乙基]氨基甲酸叔丁酯，为无色油状物。
[0361]
部分b
[0362]
将n-[(1s)-1-苄基-2-乙氧基-乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.44g)在10ml浓盐酸中的混合物搅拌过夜。然后将该反应与50ml乙醇合并并在减压下浓缩，得到白色固体。从乙腈中结晶，得到1.66g(2s)-1-乙氧基-3-苯基-丙-2-胺盐酸盐，为白色晶体。
[0363]
部分c
[0364]
将(2s)-1-乙氧基-3-苯基-丙-2-胺盐酸盐(1.66g，7.70mmol)和4-氯-3-硝基喹啉(1.70g，8.15mmol)在50ml二氯甲烷中的悬浮液与三乙胺(5.0ml，36mmol)合并并将反应混合物搅拌过夜。用10％的k2co3水溶液洗涤反应混合物并将有机部分经mgso4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到黄色油状物。将黄色油状物用甲苯研磨并过滤，得到3.06g含有n-[(1s)-1-苄基-2-乙氧基-乙基]-3-硝基-喹啉-4-胺的材料，为黄色粉末，其无需进一步纯化即可用于下一反应。
[0365]
部分d
[0366]
将悬浮于100ml甲苯中的来自先前反应的材料(3.06g)溶液置于压力瓶中，随后添加0.25g的5％碳载铂。然后将瓶在氢气气氛(50psi)下摇动过夜。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，用甲醇冲洗，并将滤液在减压下浓缩，得到2.83g含有n4-[(1s)-1-苄基-2-乙氧基-乙基]喹啉-3,4-二胺的材料，为橙色浆状物，其无需进一步纯化即可用于下一反应。
[0367]
部分e
[0368]
将溶于150ml甲苯中的来自先前反应的材料(2.83g)溶液与原甲酸三乙酯(1.80g，12.1mmol)和100mg吡啶盐酸盐合并，并将混合物加热至110℃过夜。将冷却的反应混合物与5％的k2co3水溶液合并，将混合物转移到分液漏斗中，并且分离各层。将有机部分经mgso4干燥，过滤并浓缩，得到2.58g含有1-[(1s)-1-苄基-2-乙氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉的材料，为橙色浆状物，其无需进一步纯化即可用于下一反应。
[0369]
部分f
[0370]
将溶于50ml二氯甲烷中的来自先前反应的材料(2.58g)溶液与2.45g mcpba
(77％)组合。搅拌过夜后，将反应混合物与15ml浓nh4oh溶液合并，并将苯磺酰氯(1.40g，7.93mmol)添加到快速搅拌的反应混合物中。搅拌过夜后，用10％的k2co3水溶液洗涤反应混合物，并且将有机部分经mgso4干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱法(sio2，6％cma/氯仿-16％cma/氯仿)纯化，得到琥珀色固体。将固体溶解于10ml 1.25n甲醇盐酸溶液中并在减压下浓缩。将所得固体转移至索氏套管并用回流甲苯萃取以除去有色杂质，得到0.74g灰白色固体。将一部分固体从乙腈中结晶，得到1-[(1s)-1-苄基-2-乙氧基-乙基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺盐酸盐，为白色针状物。
[0371]1h nmr(500mhz，甲醇-d4)δ8.66(s,1h),8.37(d,j＝8.1hz,1h),7.67-7.77(m,2h),7.55(m,1h),7.01-7.22(m,5h),5.65-5.79(m,1h),4.05(d,j＝5.1hz,2h),3.55(m,2h),3.51(dd,j＝5.8,14.2hz,1h)3.42(dd,j＝9.2,14.2hz,1h),1.13(t,j＝6.97hz,3h)。
[0372]
实施例7
[0373]
1-[(1r)-1-[(4-丁氧基苯基)甲基]戊基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺
[0374][0375]
部分a
[0376]
在冰/甲醇浴中将溶于15ml无水四氢呋喃中的n-boc-o-叔丁基-l-酪氨酸的搅拌溶液(5.00g，14.8mmol)冷却至-15℃。将该溶液与n-甲基吗啉(1.63ml，14.8mmol)合并，随后添加氯甲酸异丁酯(1.92ml，14.8mmol)。搅拌5分钟后，过滤反应混合物，用小份四氢呋喃冲洗，以去除n-甲基吗啉盐酸盐。将所得的滤液返回到冷浴中，并在几分钟内添加1.12g溶于7ml h2o的nabh4溶液。搅拌90分钟后，将反应混合物与75ml h2o合并，随后添加100ml乙酸乙酯。分离各层，并用另外25ml乙酸乙酯萃取水性层。将合并的有机部分用水和盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到无色浆状物。从庚烷中浓缩浆状物，得到4.72g n-[(1s)-1-[(4-叔丁氧基苯基)甲基]-2-羟基-乙基]氨基甲酸叔丁酯，为白色固体。
[0377]
部分b
[0378]
将溶于90ml乙酸乙酯/甲苯的1:1混合物中的n-[(1s)-1-[(4-叔丁氧基苯基)甲基]-2-羟基-乙基]氨基甲酸叔丁基叔丁酯(4.72g，14.6mmol)溶液置于圆底烧瓶中。然后将溶于7.5ml去离子水中的溴化钠(1.58g，15.3mmol)溶液添加到烧瓶中，并将该混合物在-10℃浴中搅拌。然后将tempo(33mg)添加到搅拌的混合物中，随后滴加溶于20ml去离子水中的含有次氯酸钠水溶液(4.4重量％，27.2g，16.1mmol)和nahco3(3.70g，43.8mmol)的溶液。添加完成后，将该混合物再搅拌30分钟。然后将该混合物用乙酸乙酯(20ml)稀释并转移至分液漏斗，并且分离各层。用另一份20ml乙酸乙酯萃取水层。将合并的有机部分依次用30ml包含540mg碘化钾的10％柠檬酸水溶液、10％na2s2o3水溶液、水洗涤，最后用盐水洗涤。将有机
部分经过na2so4干燥，过滤并浓缩，得到4.69g n-[(1s)-1-[(4-叔丁氧基苯基)甲基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯，为灰白色固体。
[0379]
部分c
[0380]
向干燥的500ml圆底烧瓶中装入丙基三苯基溴化鏻(5.62g，14.6mmol)和60ml无水甲苯。将反应混合物在0℃浴中冷却并在氮气气氛下搅拌。然后向烧瓶中添加双(三甲基甲硅烷基)氨基钾的11％甲苯溶液(26.4g，14.6mmol)。搅拌15分钟后，将反应混合物转移至-78℃浴中，并添加溶于30ml无水甲苯中的n-[(1s)-1-[(4-叔丁氧基苯基)甲基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(4.69g，14.6mmol)溶液。使经搅拌的混合物升温至环境温度过夜。通过添加饱和nh4cl溶液，随后添加50ml乙醚来淬灭反应。分离各层，并用另外20ml乙醚萃取水性部分。将合并的有机层用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤并减压浓缩。使所得材料与25％乙酸乙酯/己烷合并，以沉淀出三苯基氧化膦，该三苯基氧化膦通过用25％乙酸乙酯/己烷洗脱的硅胶塞过滤去除。浓缩洗脱液，得到琥珀色浆状物。通过柱色谱法(sio2，3％乙酸乙酯/己烷至20％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到3.52g n-[(z,1s)-1-[(4-叔丁氧基苯基)甲基]戊-2-烯基]氨基甲酸叔丁酯，为淡琥珀色浆状物。
[0381]
部分d
[0382]
将溶于40ml甲醇中的n-[(z,1s)-1-[(4-叔丁氧基苯基)甲基]戊-2-烯基]氨基甲酸叔丁基叔丁酯(3.52g)溶液置于压力瓶中，随后添加200mg的10％碳载钯。然后将瓶在氢气氛(60psi)下摇动过夜。通过硅藻土垫过滤反应混合物，用甲醇冲洗，并将滤液在减压下浓缩，得到3.30g n-[(1r)-1-[(4-叔丁氧基苯基)甲基]戊基]氨基甲酸叔丁酯，为无色固体。
[0383]
部分e
[0384]
将n-[(1r)-1-[(4-叔丁氧基苯基)甲基]戊基]氨基甲酸叔丁酯(3.30g，9.46mmol)在30ml乙醇中的溶液与4ml浓盐酸合并，并将该混合物加热回流2.5小时。然后将反应减压浓缩以得到无色浆状物。再次由乙醇然后由乙腈浓缩浆状物，得到2.17g 4-[(2r)-2-氨基己基]苯酚盐酸盐，为白色泡沫。
[0385]
部分f
[0386]
将4-[(2r)-2-氨基己基]苯酚盐酸盐(2.17g，9.49mmol)在50ml二氯甲烷中的溶液与三乙胺(3.76ml，27.0mmol)合并，随后添加4-氯-3-硝基喹啉(1.87g，9.00mmol)，并将反应混合物在氮气气氛下搅拌过夜。将该反应混合物浓缩，以得到黄色固体。将固体用热水研磨并过滤，得到黄色固体。将黄色固体溶解在10％甲醇/氯仿中并用盐水洗涤。将有机部分经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到3.09g 4-[(2r)-2-[(3-硝基-4-喹啉基)氨基]己基]苯酚，为黄色固体。
[0387]
部分g
[0388]
将溶于120ml乙腈和甲苯的1:1混合物中的4-[(2r)-2-[(3-硝基-4-喹啉基)氨基]己基]苯酚(3.09g，8.46mmol)悬浮液置于压力瓶中，随后添加300mg的3％碳载铂。然后将瓶在氢气气氛(50psi)下摇动过夜。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，并将滤液在减压下浓缩，得到2.84g 4-[(2r)-2-[(3-氨基-4-喹啉基)氨基]己基]苯酚，为橙色泡沫。
[0389]
部分h
[0390]
将溶于50ml乙酸正丙酯中的4-[(2r)-2-[(3-氨基-4-喹啉基)氨基]己基]苯酚
(2.84g，8.48mmol)溶液与原甲酸三乙酯(4.22ml，25.4mmol)和100mg盐酸吡啶合并，并将混合物加热至100℃过夜。将温热的反应混合物依次用饱和nahco3溶液、水(3x)和盐水洗涤。将有机部分经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到棕色浆状物。通过柱色谱法(sio2，1％甲醇/氯仿至10％甲醇/氯仿)纯化，得到2.48g 4-[(2r)-2-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基己基]苯酚，为琥珀色泡沫。
[0391]
部分i
[0392]
向溶于10ml无水dmf中的4-[(2r)-2-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基己基]苯酚(1.24g，3.59mmol)的搅拌溶液中添加cs2co3(1.75g，5.39mmol)，随后添加1-溴丁烷(426微升，3.95mmol)。在氮气气氛下将反应混合物加热至65℃。5小时后，将反应混合物减压浓缩，并且将所得浆状物溶于50ml乙酸乙酯中并依次用水(4x)和盐水洗涤。将有机部分经na2so4干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱(sio2，1％甲醇/氯仿-5％甲醇/氯仿)纯化，得到1.24g 1-[(1r)-1-[(4-丁氧基苯基)甲基]戊基]咪唑并[4,5-c]喹啉，为琥珀色浆状物。
[0393]
部分j
[0394]
将溶于20ml二氯甲烷中的1-[(1r)-1-[(4-丁氧基苯基)甲基]戊基]咪唑并[4,5-c]喹啉(1.24g，3.09mmol)溶液与698mg mcpba(80％)合并，并搅拌60分钟。然后添加10％的na2co3(10ml)溶液，并且分离各层。用另一份10ml二氯甲烷萃取含水部分。用盐水洗涤合并的有机部分并在减压下浓缩。将所得物质溶解在30ml二氯甲烷中并与6ml浓氢氧化铵溶液和对甲苯磺酰氯(648mg，3.40mmol)合并。快速搅拌55分钟后，将反应混合物用10ml二氯甲烷稀释，并依次用水(3x)和盐水洗涤。将有机部分经na2so4干燥，过滤并减压浓缩。通过柱色谱法(sio2，1％甲醇/氯仿至-7.5％甲醇/氯仿)纯化，得到棕色浆状物。将该棕色浆状物溶解在15ml乙醇和0.5ml浓盐酸中，并将该混合物在减压下浓缩。从乙腈中结晶，得到固体，将其通过过滤分离，用冷乙腈冲洗并在减压下干燥，得到279mg 1-[(1r)-1-[(4-丁氧基苯基)甲基]戊基]咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺盐酸盐，为棕褐色粉末。
[0395]1h nmr(500mhz，甲醇-d4)δ8.56(s,1h),8.32(d,j＝8.2hz,1h),7.72-7.76(m,1h),7.66-7.71(m,1h),7.54(t,j＝7.5hz,1h),6.87(d,j＝8.4hz,2h),6.56(d,j＝8.6hz,2h),5.40-5.52(m,1h),3.74(t,j＝6.4hz,2h),3.39(dd,j＝4.2,14.1hz,1h),3.21(dd,j＝9.3,14.2hz,1h),2.17-2.27(m,2h),1.55-1.66(m,2h),1.33-1.46(m,5h),1.23-1.32(m,1h),0.93(t,j＝7.4hz,3h),0.88(t,j＝7.1hz,3h)
[0396]
比较例1
[0397]
1-苯乙基-1h-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺
[0398][0399]
如美国专利4,689,338(gerster和weeks)和gerster等人，《药物化学杂志》，2005
年，第48卷第10期，第3481-3491页(gerster et al.j.med.chem.2005,48(10),3481-3491)中所述制备比较例1(cas号99011-69-5)。
[0400]
人细胞中的细胞因子诱导
[0401]
从健康的人类捐赠者获得全血，并通过静脉穿刺到容纳乙二胺四乙酸(edta)的真空采血管或注射器中来收集。通过密度梯度离心法从全血纯化人外周血单核细胞(pbmc)。将histopaque 1077(15ml，美国密苏里州圣路易斯的西格玛公司(sigma,st.louis,mo))转移到6个50ml无菌聚丙烯锥形管中。用15-25ml在hank平衡盐溶液(hbss)(纽约州格兰德艾兰的gibco生命技术公司(gibco,life technologies,grand island,ny))中以1:2稀释的血液覆盖histopaque。然后将试管在20℃、1370转/分钟(rpm)下离心30分钟，无制动器(400xg，gh3.8a转子)。
[0402]
收集包含pbmc的界面(血沉棕黄层)并置于新的无菌50ml锥形聚丙烯离心管中。将pbmc与等体积的hbss(距离界面约20ml和约20ml hbss)混合，然后在1090rpm、20℃下离心10分钟，带制动器(270xg，gh 3.8a转子)。离心完成之后，将细胞重悬浮于2-3ml的ack red血液细胞裂解缓冲液(氯化钾铵溶液，gibco生命技术公司(gibco,life technologies))中并在20℃下温育2-5分钟。接下来，向细胞添加hbss(40ml)，并将样品在20℃下以270xg离心10分钟。滗出上清液，并将细胞沉淀物重悬浮于5ml aim v培养基(gibco生命技术公司(gibco,life technologies))中。通过bd falcon 70微米尼龙细胞过滤器(加利福尼亚州圣何塞生物科学事业(bd biosciences，san jose，ca))过滤细胞溶液除去细胞聚集体和碎片。
[0403]
通过用miltenyi facs仪器(加利福尼亚州圣地亚哥的美天旎生物技术公司(miltenyi biotec inc.,san diego,ca))计数或通过使用血球计来确定活细胞的数量。为了用血球计测定细胞活力，将细胞在0.4％台盼蓝和hbss中稀释1/10(具体地，将50微升台盼蓝 40微升hbss 10微升细胞溶液添加微量离心管并混合)。然后将十微升稀释的细胞施加至血球计，并且通过显微镜法确定活pbmc的数量。
[0404]
然后将pbmc样品以每孔8
×
105个细胞的浓度重悬浮于96孔板中的0.1ml aim-v培养基中。将每种化合物溶于二甲基亚砜(dmso)中以产生3mm原液。然后用aim-v培养基进一步稀释原液以制备系列稀释液。然后将稀释的化合物(100微升)转移至pbmc中以制备最终化合物浓度为30微摩尔/升、10微摩尔/升、3.3微摩尔/升、1.1微摩尔/升、0.37微摩尔/升、0.12微摩尔/升、0.04微摩尔/升、0.01微摩尔/升的测试组。板也有阳性对照和阴性对照两者。阴性对照孔只包含aim-v培养基，其中没有实施例化合物。阳性对照孔包含连续稀释至浓度为30微摩尔/升、10微摩尔/升、3.3微摩尔/升、1.1微摩尔/升、0.37微摩尔/升、0.12微摩尔/升、0.04微摩尔/升、0.01微摩尔/升的咪喹莫特的对照组。选择对照集中使用的浓度以匹配测试集中使用的浓度。然后将板在37℃/5％co2下培养21至24小时。通过将96孔板在2100rpm、23℃下离心10分钟来收集无细胞上清液。然后将约160微升的上清液保存在nunc 96孔板中，盖上压盖，并且储存于-80℃，直至进行细胞因子分析。
[0405]
通过elisa(人ifn-α，泛特异性，俄亥俄州辛辛那提的mabtech公司(mabtech,cincinnati,oh))测量ifn-α细胞因子水平(皮克/ml)。通过多重磁珠测定法(磁珠，明尼苏达州明尼阿波利斯的r&d systems公司(r&d systems minneapolis,mn))根据制造商的说明测量ifn-γ和tnf-α水平(皮克/ml)。
[0406]
分析数据以确定在测定中观察到特定细胞因子的诱导的每种化合物的最小有效浓度(mec)。具体地，将每种化合物的最小有效浓度(微摩尔)确定为该化合物以比在阴性对照孔中观察到水平高至少2倍的水平(象形图/ml)诱导所测量细胞因子应答的最低浓度。结果呈现于表11中。表示法“≤0.01”表示在测定中评估的化合物最低浓度下观察到细胞因子诱导。
[0407]
表11.细胞因子诱导
[0408][0409]
tlr激活和特异性
[0410]
hek-blue-htlr7或htlr8报告基因细胞得自加利福尼亚州圣地亚哥的invivogen公司(invivogen,san diego,ca)。根据制造商的描述，这些报告基因细胞通过hek293细胞与诱导型分泌性胚胎碱性磷酸酶(seap)报告基因以及人tlr7或tlr8基因的共转染来制备。将seap报告基因置于融合至五个nf-κb和ap-1-结合位点的ifn-β最小启动子控制下。在tlr配体的存在下，发生nf-κb和ap-1的激活，从而导致seap水平的相应增加。
[0411]
表达诱导型seap报告基因但不表达tlr7或tlr8的亲本hek293细胞(无效)获自invivogen公司并在测定中用作阴性对照。
[0412]
在该测定中，使用标准细胞培养技术使hek细胞在包含达尔伯克氏改良伊格尔培养基(马萨诸塞州沃尔瑟姆的赛默飞世尔科技公司(thermofisher scientific incorporated,waltham,ma))的生长培养基中生长和维持，所述生长培养基补充有1％青霉素/链霉素和10％热灭活的gibco胎牛血清(赛默飞世尔科技公司(thermofisher scientific))。将每种化合物溶解在dmso中以产生3毫摩尔(mm)原液。然后用该生长培养基进一步稀释原液以制备系列稀释液。使用96孔格式，按每孔5x104个细胞和200微升生长培养基，以30、10、3.3、1.1、0.37、0.12、0.04和0.01微摩尔的浓度测试每种受试化合物。
[0413]
对于每种化合物，筛选htlr7、htlr8和它们相应无效对照hek细胞。将连续稀释到生长培养基中的dmso用作溶媒对照。在细胞培养箱(37℃和5％co2)中温育16-20小时后，收集含有seap报告基因的细胞培养上清液，并立即进行分析或保存于-80℃。根据制造商的说明书，使用比色酶测定法quanti-blue(invivogen)测量seap水平。
[0414]
分析数据以确定在测定中观察到激活处每种化合物的最小有效浓度(mec)。具体地，将每种化合物的最小有效浓度(微摩尔)确定为该化合物以比在溶媒对照孔中观察到水平高至少2倍的产生seap表达响应的最低浓度。结果呈现于表12中。表示法“≤0.01”表示在测定中评价的化合物最低浓度下观察到tlr激活。
[0415]
表12.tlr激活
[0416][0417]
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