一种套膜海葵多肽毒素Ap-GR及其制备方法和应用与流程

技术特征：
1.一种套膜海葵多肽毒素ap-gr，其特征在于，其氨基酸序列为gipcrcdknsdelngqrsnvggncgagwkkcrsvnaifnccqkav。2.一种套膜海葵多肽毒素ap-gr的应用，其特征在于，所述套膜海葵多肽毒素ap-gr在制备杀虫剂方面的应用。3.根据权利要求1所述的套膜海葵多肽毒素ap-gr的应用，其特征在于，所述杀虫剂为防治黑刺粉虱的杀虫剂。4.根据权利要求1或2所述的套膜海葵多肽毒素ap-gr的制备方法，采用fmoc固相多肽合成法，根据权利要求1所述的氨基酸序列，从c端到n端依次缩合，经切割、纯化、氧化折叠处理，得所述套膜海葵多肽毒素ap-gr，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)称取树脂，用dcm浸泡5～10min，依次用dmf、dcm洗涤，加入fmoc-gly(tbu)-oh，再加入dcm和diea反应80～100min，再加入甲醇和dcm，封闭反应30～40min后，用dmf洗涤，加入哌啶溶液反应20～30min，再用dmf洗涤，得树脂a；(2)向树脂a中加入下一个氨基酸fmoc-ile-oh和缩合剂，再加入dmf和dic反应0.8～1.2h后，用dmf洗涤，得树脂b；(3)向树脂b中加入哌啶溶液反应20～30min，用dmf洗涤；(4)根据权利要求1所述的氨基酸序列，重复步骤(2)和步骤(3)直到肽链结束，得线性肽树脂；(5)向线性肽树脂中加入甲醇进行抽干处理后，加入切割液，摇晃切割，过滤，向滤液中加入冰乙醚，摇晃均匀后离心，除去上层的冰乙醚，得粗品多肽，用hplc分离粗品多肽，干燥，得线性肽；(6)取步骤(5)的线性肽进行氧化折叠，采用制备型hplc进行纯化，得纯品套膜海葵多肽毒素ap-gr。5.根据权利要求4所述的套膜海葵多肽毒素ap-gr，其特征在于，所述树脂为取代度sd＝0.2～1.4mmol/g的2-cl树脂。6.根据权利要求4所述的套膜海葵多肽毒素ap-gr，其特征在于，所述哌啶溶液为用dmf将哌啶配制成体积浓度20％的哌啶溶液。7.根据权利要求4所述的套膜海葵多肽毒素ap-gr，其特征在于，所述切割液，按体积百分比计，包括：95％tfa、1％水、2％edt和2％tis。8.根据权利要求4所述的套膜海葵多肽毒素ap-gr，其特征在于，所述离心为在3000r/min，离心2min。9.根据权利要求4所述的套膜海葵多肽毒素ap-gr，其特征在于，所述缩合剂为hobt。

技术总结
本发明提供一种套膜海葵多肽毒素Ap-GR及其制备方法和应用，其氨基酸序列为GIPCRCDKNSDELNGQRSNVGGNCGAGWKKCRSVNAIFNCCQKAV，对黑刺粉虱具有良好的杀虫效果，在高剂量20nM下，氧化肽Ap-GR对昆虫的死亡率达到90％，半数致死剂量为10.2nM；本发明采用多肽固相合成法合成线性肽，得到纯度为99.15％的线性肽Ap-GR，再将线性肽进行氧化折叠，得到形成了3个二硫键，纯度为98.95％的氧化肽Ap-GR。GR。GR。


技术研发人员：高炳淼 廖燕玲 符金星 杨涛
受保护的技术使用者：海南医学院
技术研发日：2021.11.12
技术公布日：2022/1/6