一种环色胺类生物碱、其合成方法及其应用与流程

1.本发明属于农药合成技术领域，具体涉及一种环色胺类生物碱的合成方法及其抗菌用途。


背景技术：

2.目前，针对粮食受病虫害侵扰的问题，传统的化学防治以其防治效果高、速度快、使用简便等优点得到了迅速发展，同时也导致了一系列严重的生态、环境等问题。因此，高效、低毒、低残留的新型绿色农药的开发成为当今世界农药研究的主题。
3.创制新农药的途径固然很多，但天然产物模型仍然是最主要的途径之一。天然产物分子不仅可以作为先导结构，经多次先导优化、衍生合成，最终开发出新农药，而且还为发现新的农药作用靶标提供了基础，拟除虫菊酯类杀虫剂的开发是一个最典型和最有意义的以天然产物为先导开发新农药的成功实例。近20年来，国外各大农业公司在以天然产物为先导结构创制新农药方面取得了突出成就。氰胺公司的研究人员以天然产物二噁吡咯霉素(dioxapyrrolomycin)为先导化合物开发出著名的杀虫剂吡咯胺。先正达和巴斯夫公司等以天然产物抗生素嗜球伞果素(strobilurins)为先导开发出一系列甲氧基丙烯酸酯类高效杀菌剂，如嘧菌酯、醚菌酯、肟菌酯、烯肟菌酯等。
4.环色胺类生物碱是从蜡梅、毒扁豆碱等植物中提取分离出来的一种生物碱，具有多种生物活性，如抗植物病原真菌活性、抗病毒活性、抑制黑色素合成活性、抑制乙酰胆脂酶、抗癌活性等。发明人在“synthesis and antimicrobial activity of calycanthacceous alkaloid analolues”一文中公开了一系列的抗菌剂，本发明是对该研究的扩展，对接枝的基团进行了改进和筛选。


技术实现要素：

5.为了系统地评价环色胺类生物碱的抗菌活性，发明人以农用杀菌活性为活性筛选，以环色胺类生物碱作为杀菌活性先导化合物，合成一系列的环色胺类生物碱的类似物，并测试抑制植物病原真菌方面的活性。并从中筛选出一些具备结构简单、活性卓越，并保留天然产物腊梅碱环境友好特性的候选化合物，为杀菌剂提供新的活性结构，基于此，发明人提供环色胺类生物碱、其合成方法及其应用，该环色胺类生物碱类化合物对油菜菌核病菌、番茄早疫病菌、棉花黄萎病菌、黄瓜枯萎病菌、核桃腐霉和玉米弯孢具有良好的抑制活性。
6.为了实现上述发明目的，本发明采用了以下的技术方案：
7.具有通式(i)的环色胺类生物碱类化合物：
8.9.所述的r为以下基团之任意一种：
[0010][0011]
上述具有式(i)的环色胺类生物碱类化合物的合成路线如下：
[0012][0013]
其中，所述手性磷酸r结构式如下：
[0014][0015]
具体而言，具有式(i)的环色胺类生物碱的合成工艺，步骤如下：
[0016]
(1)以l
‑
色氨酸为原料，在乙醇和氯化亚砜存在的条件下对羧基进行酯化反应，得到了中间体1(l
‑
色氨酸甲酯)；
[0017]
(2)以thf为溶剂，三乙胺作为碱，利用氯甲酸异丙酯与氨基发生亲核取代反应，得到了中间体2；
[0018]
(3)中间体2在手性磷酸r的作用下进行关环反应，得到了环色胺类生物碱关键骨架中间体3；
[0019]
(4)以杂环酸为反应试剂制酰氯，与中间体3反应，用不同的酰氯对中间体的8
‑
n位进行酰基化反应合成了19个环色胺类生物碱衍生物(化合物1
‑
19)。
[0020]
所采用的反应试剂选自3
‑
氯异烟酸,5
‑
氯吡嗪
‑2‑
羧酸,2
‑
氯
‑6‑
羧酸吡啶,2
‑
甲酸吡嗪,对甲氧基苯甲酸,1
‑
萘甲酸,2
‑
氟烟酸,2
‑
甲基烟酸,2
‑
吡啶甲酸,2
‑
氯异烟酸,5
‑
甲基吡嗪
‑2‑
羧酸,异烟酸,2
‑
氯烟酸,6
‑
氯烟酸,5,6
‑
二氯烟酸,5
‑
甲基烟酸,2
‑
羟基烟酸,烟酸
和2
‑
氨基烟酸之任一种。
[0021]
上述环色胺类生物碱用于抗菌的用途。所述的菌类是油菜菌核病菌、番茄早疫病菌、棉花黄萎病菌、黄瓜枯萎病菌、核桃腐霉和玉米弯孢。其中：
[0022]
化合物4对核桃腐霉的抑菌活性更佳，最小抑菌浓度为3.9μg/ml。
[0023]
化合物7对番茄早疫病菌和核桃腐霉的最小抑制活性到达3.9μg/ml。
[0024]
化合物13抑菌活性最好，它对6种植物病原真菌的抑制作用均强于两组对照组，且对油菜菌核病菌和棉花黄萎病菌的最小抑制浓度到达1.95μg/ml。
[0025]
化合物17对油菜菌核病菌的抑制作用也很显著，与阳性对照两性霉素的效果相当，为3.9μg/ml，具有潜在的应用前景。
[0026]
与现有技术相比，本发明具有下述优点和有益效果：
[0027]
(1)本发明提供的环色胺类生物碱合成方法，采用的廉价易得的原料，催化剂均为常规试剂，如乙醇为低毒化学品，三乙胺替代了恶臭的吡啶，常规手性磷酸r试剂替代了难处理的磷酸试剂，符合环保的要求。而本发明所采用的手性磷酸r催化剂，是实现本路线的关键因素。
[0028]
(2)本发明提供的环色胺类生物碱具有结构简单，原料易得，反应条件温和，工艺简单。
[0029]
(3)本发明所得环色胺类生物碱具有良好的杀菌活性，所述的菌类是油菜菌核病菌、番茄早疫病菌、棉花黄萎病菌、黄瓜枯萎病菌、核桃腐霉和玉米弯孢活性，适合作为商品化抗菌剂。其中，化合物4，化合物7，化合物13和化合物17比商业化的多菌灵具有更高的抗菌活性。
具体实施方式
[0030]
以下将结合具体实施例对本发明的内容进行具体说明：
[0031]
实施例1化合物1
‑
19的合成
[0032]
1、化合物1的合成：
[0033]
步骤(1)中间体1的合成
[0034][0035]
用50ml乙醇将2.04g(10mmol,1equiv)的l
‑
色氨酸溶于干燥的圆底烧瓶(150ml)中，在冰浴的条件下用5ml的恒压漏斗向反应体系中缓慢滴加0.87ml(12mmol,1.2equiv)socl2，滴加完毕后移至室温下大力搅拌反应5h，反应体系由乳白色变成亮黄色，用旋转蒸发仪将多余的乙醇和socl2除去，抽真空干燥，得到中间体1，为白色固体(2.28g,98％)。
[0036]
步骤(2)中间体2的合成
[0037][0038]
取2.18g(10mmol,1equiv)l
‑
色氨酸甲酯1于干燥得圆底烧瓶中，加入15ml的三乙胺溶解，在0℃冰浴下用恒压漏斗向其中缓慢滴加1.35g(11mmol,1.2equiv)氯甲酸异丙酯，滴加完毕后撤出冰浴，在室温下大力搅拌1h，点板监测反应结束后向体系中滴加1ml甲醇淬灭反应，继续搅拌10min。后处理：用100ml乙酸乙酯萃取，先用饱和硫酸铜溶液洗涤有机相多次，直至无机相由深蓝色变为浅蓝色，并且颜色不改变为止，再用饱和nacl溶液洗涤、无水naso4干燥、过滤、浓缩、层析柱纯化(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)，可得淡黄色的中间体2(2.61g,86％)。
[0039]
步骤(3)中间体3的合成
[0040][0041]
称取3.04g(10mmol)的化合物2于250ml圆底烧瓶中，加入100ml的二氯甲烷和1
‰
mmol的手性磷酸，在超声波清洗仪中超声，然后再室温下反应24h，tlc监测反应结束后，将反应液缓慢滴加进饱和na2co3水溶液中，调节ph至7～8，用ph试纸监测，na2co3固体可辅助调节ph。用二氯甲烷(50ml
×
3)萃取，饱和nacl溶液洗涤，干燥、浓缩、抽真空干燥，得到中间体3，其为褐色的油状粗产品(2.70g,89％)。
[0042]
步骤(4)化合物1～19的合成
[0043][0044]
以3
‑
氯异烟酸为例(此时)。
[0045]
第一步：制酰氯。制备方法如下：首先准确称量3
‑
氯异烟酸0.31g(2mmol)于50ml的圆底烧瓶中，加入10ml无水二氯甲烷，随后用1ml注射器取0.31ml(4mmol)的氯化亚砜注入反应体系中，在设定为55℃的油浴锅中回流2h，用旋转蒸发仪除去氯化亚砜和二氯甲烷。
[0046]
第二步：称取0.23g(0.77mmol,1equiv)中间体3，并用20ml无水二氯甲烷溶解，加入0.12ml(1.16mmol,1.5equiv)et3n，将反应体系置于冰浴中。用10ml无水二氯甲烷与制好的酰氯混合均匀，缓慢的滴加至反应体系中，此时伴随白烟产生，随后在室温下反应2h，用
tlc监测原料点是否消失。
[0047]
加入3ml饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，搅拌10min，用二氯甲烷(50ml
×
3)萃取，饱和nacl溶液洗涤，干燥、浓缩、层析柱纯化(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得到化合物1，白色固体(0.32g,93％)。
[0048]
采用类似的合成方法，用其他18种不同的酰氯对8
‑
n位进行酰基化反应合成了化合物2～19，化合物1～19理化性质如表1所示。
[0049]
表1化合物1～19理化性质
[0050][0051][0052]
实施例2化学物1
‑
19的鉴定
[0053]
1、的鉴定
[0054]
白色固体，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ8.64(s,2h),8.05(s,1h),7.72(d,j＝3.5hz,1h),7.31(t,j＝10.6hz,2h),7.14(t,j＝7.2hz,1h),5.97(s,1h),4.71(s,1h),4.56(d,j＝8.3hz,1h),4.27(t,j＝6.4hz,1h),3.16(s,3h),2.77
–
2.58(m,2h),1.10(d,j＝4.7hz,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,(cd3)2co),δ171.25(c),164.65(c),153.68(c),148.98(ch),147.79(ch),143.29(c),132.89(c),128.22(ch),124.88(ch),124.44(ch),117.59(ch),79.06(ch),68.85(ch),59.26(ch),51.30(ch3),45.43(ch),33.49(ch2),21.44(ch3),21.27(ch3).ms(esi( ))calcd for c
22
h
22
cln3o5[m h]

:444.1；found:444.1。
[0055]
2、的鉴定
[0056]
无色晶体，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ8.90(s,1h),8.66(s,1h),8.21(d,j＝8.0hz,1h),7.37
–
7.26(m,2h),7.14(td,j＝7.5,1.0hz,1h),7.01(d,j＝5.7hz,1h),4.63(s,1h),4.49(d,j＝8.5hz,1h),4.28(t,j＝6.2hz,1h),3.11(s,3h),2.80
–
2.66(m,1h),1.03(d,j＝6.2hz,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,(cd3)2co),δ171.20(c),164.86(c),153.92(c),149.32(ch),148.91(ch),146.59(c),143.62(c),140.74(c),132.31(c),128.39(ch),124.69(ch),124.41(ch),117.29(ch),77.99(ch),68.65(ch),58.98(ch),51.23(ch3),44.87(ch),33.09(ch2),21.39(ch3),21.14(ch3).ms(esi( ))calcd for c
21
h
21
cln4o5[m h]

:445.1；found:445.1。
[0057]
3、的鉴定
[0058]
白色固体，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ8.18(d,j＝5.5hz,1h),8.04(s,1h),7.93(s,1h),7.59(d,j＝7.4hz,1h),7.32(d,j＝7.5hz,1h),7.26(t,j＝7.8hz,2h),7.11(td,j＝7.5,0.8hz,1h),4.63(s,1h),4.50(d,j＝8.8hz,1h),4.28(t,j＝6.3hz,1h),3.11(s,3h),2.84
–
2.74(m,1h),2.69(d,j＝13.1hz,1h),1.02(d,j＝5.9hz,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,(cd3)2co),δ171.33(c),155.75(ch),153.70(ch),144.07(c),140.17(c),132.29(c),128.26(ch),125.47(ch),124.54(ch),124.32(ch),117.18(ch),78.04(ch),68.35(ch),58.98(ch),51.17(ch3),44.78(ch),33.06(ch2),21.42(ch3),21.17(ch3).ms(esi( ))calcd for c
22
h
22
cln3o5[m h]

:444.1；found:444.1。
[0059]
4、的鉴定
[0060]
白色固体，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ9.09(s,1h),8.70(s,1h),8.56(s,1h),8.21(d,j＝7.6hz,1h),7.37
–
7.24(m,2h),7.12(td,j＝7.4,0.7hz,2h),4.63(s,1h),4.48(d,j＝8.6hz,1h),4.27(t,j＝6.2hz,1h),3.11(s,3h),2.75(ddd,j＝26.6,16.4,6.8hz,2h),1.01(d,j＝6.1hz,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,(cd3)2co),δ171.27(c),165.98(c),153.81(c),150.89(c),147.11(c),145.10(ch),143.86(ch),141.08(ch),132.33(c),128.32(ch),124.49(ch),124.34(ch),117.28(ch),77.95(ch),68.48(ch),58.95(ch),51.18(ch3),44.85(ch),32.99(ch2),21.38(ch3),21.14(ch3).ms(esi( ))calcd for c
21
h
22
n4o5[m h]

:411.1；found:411.1。
[0061]
5、的鉴定
[0062]
无色油状，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ7.67(d,j＝8.2hz,2h),7.25
–
7.14(m,2h),7.06
–
6.94(m,3h),6.81(ddd,j＝13.2,7.7,4.1hz,2h),4.80
–
4.69(m,1h),4.51(s,1h),4.23(t,j＝6.4hz,1h),3.87(s,3h),3.14(s,3h),2.77
–
2.56(m,2h),1.05(dd,j＝6.2,3.6hz,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,(cd3)2co),δ171.56(c),169.94(c),157.46(c),153.58(c),144.40(c),132.21(ch),130.77(ch),129.40(ch),127.99(c),124.39(ch),123.11(ch),119.31(ch),115.26(ch),115.17(ch),113.30(ch),68.32(ch),59.13(ch),54.95(ch3),51.15(ch3),44.77(ch),32.98(ch),30.89(ch2),21.40(ch3),21.27(ch3).ms(esi( ))calcd for c
24
h
26
n2o6[m h]

:439.1；found:439.1。
[0063]
6、的鉴定
[0064]
黄色油状，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ8.57
–
7.40(m,8h),7.33
–
6.43(m,4h),4.97
–
4.39(m,2h),4.21(s,1h),3.11(s,3h),2.62(d,j＝12.0hz,2h),1.21
–
0.94(m,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,(cd3)2co),δ171.47(c),135.26(c),129.74(c),128.35(ch),127.88(ch),126.23(ch),125.17(ch),124.58(ch),123.85(ch),68.58(ch),59.28(ch),51.20(ch3),44.84(ch),34.03(ch),33.35(ch2),21.45(ch3),21.33(ch3).ms(esi( ))calcd for c
24
h
26
n2o6[m h]

:459.1；found:459.2。
[0065]
7、的鉴定
[0066]
淡黄色固体，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ8.32(d,j＝4.0hz,1h),8.20(dd,j＝12.0,4.4hz,1h),8.07(s,1h),7.44(t,j＝5.3hz,1h),7.29(t,j＝12.6hz,2h),7.11(t,j＝7.4hz,1h),6.12(s,1h),4.77
–
4.65(m,1h),4.53(d,j＝8.7hz,1h),4.25(t,j＝6.5hz,1h),3.14(s,3h),2.69(dt,j＝25.3,10.0hz,2h),1.07(d,j＝6.2hz,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,(cd3)2co),δ171.29(c),163.83(c),160.35(c),153.71(c),148.73(ch),143.08(ch),
141.66(c),132.65(c),128.22(ch),124.58(ch),124.39(ch),121.47(ch),120.45(ch),117.23(c),79.06(ch),68.68(ch),59.18(ch),51.25(ch3),45.04(ch),33.25(ch2),21.43(ch3),21.22(ch3).ms(esi( ))calcd for c
22
h
22
fn3o5[m h]

:428.1；found:428.1。
[0067]
8、的鉴定
[0068]
褐色油状，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ8.73(s,1h),7.93(d,j＝7.9hz,2h),7.35
–
7.13(m,3h),7.06(t,j＝7.4hz,1h),6.28(s,1h),4.79
–
4.63(m,1h),4.49(s,1h),4.29(t,j＝6.2hz,1h),3.13(s,3h),2.78
–
2.63(m,2h),2.55(s,3h),1.05(dd,j＝11.7,6.2hz,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,(cd3)2co),δ171.40(c),168.34(c),153.65(c),148.62(ch),143.96(c),136.41(c),132.44(ch),128.13(ch),124.33(ch),123.85(ch),122.12(ch),116.41(ch),79.34(ch),68.40(ch),59.14(ch),51.18(ch3),44.85(ch),32.82(ch2),23.74(ch3),21.47(ch3),21.20(ch3).ms(esi( ))calcd for c
23
h
25
n3o5[m h]

:424.1；found:424.1。
[0069]
9、的鉴定
[0070]
淡黄色固体，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ8.54(s,1h),8.32
–
8.12(m,1h),7.95(s,2h),7.48(s,1h),7.37
–
7.19(m,3h),7.10
–
7.04(m,1h),4.63(s,1h),4.48(t,j＝12.2hz,1h,4.24(s,1h),3.10(s,3h),2.72(dt,j＝17.6,9.8hz,2h),1.01(d,j＝4.2hz,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,(cd3)2co),δ171.43(c),146.60(ch),144.46(c),136.80(ch),132.33(c),128.18(ch),125.72(ch),124.84(ch),124.22(ch),124.03(ch),117.16(ch),78.09(ch),68.12(ch),58.91(ch),51.13(ch3),44.75(ch),32.81(ch2),21.44(ch3),21.17(ch3).ms(esi( ))calcd for c
22
h
23
n3o5[m h]

:410.1；found:410.1。
[0071]
10、的鉴定
[0072]
白色固体，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ8.50(d,j＝5.0hz,1h),8.11
–
7.99(m,1h),7.72(s,1h),7.65(dd,j＝5.0,1.4hz,1h),7.30(dt,j＝24.0,9.1hz,2h),7.11(td,j＝7.5,0.8hz,1h),6.29(s,1h),4.77
–
4.67(m,1h),4.51(d,j＝8.3hz,1h),4.31(t,j＝6.2hz,1h),3.14(s,3h),2.78
–
2.61(m,2h),1.07(dd,j＝9.0,6.3hz,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,(cd3)2co),δ171.26(c),166.53(c),153.74(c),150.69(c),149.69(c),148.18(ch),143.34(c),132.66(c),128.21(ch),124.49(ch),124.37(ch),123.15(ch),122.10(ch),116.95(ch),79.16(ch),68.69(ch),59.16(ch),51.25(ch3),44.95(ch),33.04(ch2),21.43(ch3),21.20(ch3).ms(esi( ))calcd for c
22
h
22
cln3o5[m h]

:444.1；found:444.1。
[0073]
11、的鉴定
[0074]
黄色固体，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ8.94(s,1h),8.41(s,1h),8.18(d,j＝7.5hz,1h),7.32
–
7.21(m,2h),7.08(t,j＝7.4hz,2h),4.66
–
4.55(m,1h),4.44(d,j＝8.4hz,1h),4.23(t,j＝6.1hz,1h),3.08(s,3h),2.70(dt,j＝17.6,6.9hz,2h),2.57(s,3h),0.99(d,j＝5.3hz,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,(cd3)2co),δ171.31(c),166.18(c),154.51(c),153.74(c),148.12(ch),146.04(ch),144.02(c),140.40(c),132.28(c),128.30(ch),124.35(ch),124.31(ch),117.19(ch),77.95(ch),68.38(ch),58.94(ch),51.18(ch3),44.80(ch),32.96(ch2),21.43(ch3),21.16(ch3),20.88(ch3).ms(esi( ))calcd for c
22
h
24
n4o5[m h]

:425.1；found:425.1。
[0075]
12、的鉴定
[0076]
白色固体，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ8.68(d,j＝4.4hz,2h),8.03(s,1h),7.61(dd,j＝4.4,1.5hz,2h),7.28(t,j＝13.8hz,2h),7.09(t,j＝7.4hz,1h),6.27(s,1h),4.76
–
4.67(m,1h),4.47(d,j＝6.7hz,1h),4.29(t,j＝6.2hz,1h),3.12(s,3h),2.69(dt,j＝17.5,9.9hz,2h),1.06(dd,j＝10.7,6.2hz,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,(cd3)2co),δ171.34(c),168.12(c),153.62(c),149.60(2ch),144.78(c),143.63(c),132.58(c),128.17(ch),124.36(ch),124.21(ch),122.66(2ch),116.78(ch),79.13(ch),68.48(ch),59.09(ch),51.20(ch3),44.87(ch),32.82(ch2),21.45(ch3),21.21(ch3).ms(esi( ))calcd for c
22
h
23
n3o5[m h]

:410.1；found:410.1。
[0077]
13、的鉴定
[0078]
黄色油状，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ8.48(d,j＝3.4hz,1h),8.25
–
7.95(m,2h),7.53(s,1h),7.30(t,j＝11.4hz,2h),7.13(t,j＝7.2hz,1h),5.99(s,1h),4.72(dt,j＝12.2,6.0hz,1h),4.55(d,j＝8.1hz,1h),4.28(t,j＝6.6hz,1h),3.16(s,3h),2.84
–
2.59(m,2h),1.10(d,j＝4.4hz,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,(cd3)2co),δ171.29(c),165.48(c),153.69(c),150.31(ch),142.85(c),141.35(c),133.19(ch),132.88(c),128.18(ch),124.72(ch),124.39(ch),122.77(ch),117.56(ch),79.27(ch),68.76(ch),59.25(ch),51.28(ch3),45.32(ch),33.41(ch2),21.45(ch3),21.28(ch3).ms(esi( ))calcd for c
22
h
22
cln3o5[m h]

:444.1；found:444.1。
[0079]
14、的鉴定
[0080]
淡黄色油状，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ8.70(d,j＝1.9hz,1h),8.12(dt,j＝19.4,9.7hz,2h),7.56(d,j＝8.1hz,1h),7.33
–
7.20(m,2h),7.10(t,j＝7.4hz,1h),6.26(s,1h),4.70(dd,j＝12.3,6.1hz,1h),4.50(d,j＝7.8hz,1h),4.31(t,j＝6.3hz,1h),3.13(s,3h),2.77
–
2.62(m,2h),1.06(dd,j＝8.5,6.4hz,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,(cd3)2co),δ171.30(c),166.94(c),153.77(c),151.54(ch),149.24(c),143.64(c),139.46(ch),133.18(c),132.52(ch),128.21(c),124.34(ch),124.23(ch),123.54(ch),116.72(ch),79.45(ch),68.59(ch),59.15(ch),51.23(ch3),44.89(ch),32.95(ch2),21.45(ch3),21.19(ch3).ms(esi( ))calcd for c
22
h
22
cln3o5[m h]

:444.1；found:444.1。
[0081]
15、的鉴定
[0082]
淡黄色油状，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ8.66(d,j＝1.7hz,1h),8.35
–
8.29(m,1h),8.06(s,1h),7.36
–
7.22(m,2h),7.11(t,j＝7.4hz,1h),6.30(s,1h),4.71(dt,j＝12.5,6.2hz,1h),4.52(d,j＝8.4hz,1h),4.32(t,j＝6.4hz,1h),3.15(s,3h),2.70(ddd,j＝28.5,14.6,10.0hz,2h),1.07(t,j＝6.9hz,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,(cd3)2co),δ171.24(c),165.47(c),153.86(c),148.69(ch),147.17(c),143.39(c),138.71(c),134.41(ch),132.60(c),129.11(c),128.23(ch),124.47(ch),124.36(ch),116.87(ch),79.46(ch),68.78(ch),59.22(ch),51.28(ch3),44.96(ch),33.17(ch2),21.43(ch3),21.19(ch3).ms(esi( ))calcd for c
22
h
21
cl2n3o5[m h]

:478.0；found:478.0。
[0083]
16、的鉴定
[0084]
白色固体，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ8.66(d,j＝1.4hz,1h),8.49(s,1h),8.02(s,1h),7.85(s,1h),7.26(t,j＝15.7hz,2h),7.06(t,j＝7.4hz,1h),6.29(s,1h),4.80
–
4.66(m,1h),4.49(s,1h),4.30(t,j＝6.1hz,1h),3.13(s,3h),2.76
–
2.63(m,2h),2.39(s,3h),1.05(dd,j＝13.7,6.1hz,6h).
13
c
‑
nmr(101mhz,(cd3)2co),δ171.38(c),153.64(c),150.95(ch),146.65(ch),143.88(c),136.01(ch),132.48(c),128.13(ch),124.33(ch),123.95(ch),116.51(ch),79.29(ch),68.41(ch),59.15(ch),51.19(ch3),44.86(ch),32.87(ch),21.45(ch3),21.20(ch3),17.50(ch3).ms(esi( ))calcd for c
23
h
25
n3o5[m h]

:424.1；found:424.2。
[0085]
17、的鉴定
[0086]
白色油状，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2so),δ11.97(s,1h),7.73(d,j＝5.7hz,2h),7.55(d,j＝5.3hz,1h),7.31
–
7.16(m,2h),7.05(td,j＝7.3,0.7hz,1h),6.36(t,j＝6.6hz,1h),6.13(s,1h),4.65(s,1h),4.48(d,j＝8.9hz,1h),4.05(t,j＝6.3hz,1h),3.08(s,3h),2.64
–
2.56(m,1h),2.46(d,j＝13.0hz,1h),1.05(dd,j＝24.5,6.2hz,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,
(cd3)2so),δ171.99(c),171.35(c),166.51(c),159.55(c),142.91(c),137.62(ch),132.56(ch),128.60(c),127.85(ch),124.17(ch),123.97(ch),116.39(ch),105.22(ch),78.26(ch),68.22(ch),58.97(ch),51.57(ch3),44.06(ch),33.19(ch2),21.90(ch3),21.65(ch3).ms(esi( ))calcd for c
22
h
23
n3o6[m h]

:426.1；found:426.1。
[0087]
18、的鉴定
[0088]
淡黄色晶体，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ8.87(d,j＝1.5hz,1h),8.66(s,1h),8.14
–
7.98(m,2h),7.46(s,1h),7.28(dt,j＝21.1,10.6hz,2h),7.08(t,j＝7.4hz,1h),6.26(s,1h),4.78
–
4.67(m,1h),4.48(d,j＝6.0hz,1h),4.31(t,j＝6.2hz,1h),3.13(s,3h),2.78
–
2.64(m,2h),1.05(dd,j＝9.7,6.3hz,6h).
13
c
‑
nmr(100mhz,(cd3)2co)δ171.38(c),168.11(c),153.66(c),150.55(ch),149.24(ch),143.83(c),135.90(ch),132.51(c),128.17(ch),124.33(ch),124.02(ch),122.82(ch),116.56(ch),79.34(ch),68.45(ch),59.13(ch),51.19(ch3),44.87(ch),32.81(ch2),21.46(ch3),21.21(ch3).ms(esi( ))calcd for c
22
h
23
n3o5[m h]

:410.1；found:410.1。
[0089]
19、的鉴定
[0090]
橙色油状，1h
‑
nmr(400mhz,(cd3)2co),δ8.12(s,1h),7.68(s,2h),7.32
–
6.91(m,4h),6.65(s,2h),5.90(s,1h),4.83
–
4.70(m,1h),4.56(s,1h),4.23(t,j＝6.6hz,1h),3.15(s,3h),2.82
–
2.73(m,1h),2.64(d,j＝13.1hz,1h),1.09(t,j＝5.9hz,7h).
13
c
‑
nmr(100mhz,cd3)2co),δ171.61(c),169.22(c),158.18(c),153.73(c),150.26(ch),143.62(c),137.29(ch),132.51(c),128.12(ch),124.58(ch),123.47(ch),115.48(ch),112.02(c),78.05(ch),68.66(ch),59.16(ch),51.27(ch3),44.66(ch),33.24(ch2),21.29(ch3).ms(esi( ))calcd for c
22
h
24
n4o5[m h]

:425.1；found:425.1。
[0091]
实施例20：实施例所得化合物1～19的抗菌活性测定
[0092]
阳性对照：多菌灵、两性霉素
[0093]
96孔板法：将待测化合物溶解于1％二甲基亚砜(无菌水)中，浓度为1mg/ml，100μl加入第一孔，从第一孔开始依次稀释至第二孔。以两倍的倍数继续稀释后面的板直至第8列，第9柱预留阴性对照孔(无接种)，第10柱预留阳性生长控制孔(无抗菌剂)。抑菌浓度分别为250、125、62.5、32.3、15.63、7.8、3.9、1.95μg/ml，从每个阴性孔和阳性对照中分别加入100μl马铃薯葡萄糖琼脂。抗植物病原真菌的试验板在28℃下培养48～72h后，检测mic值。如果结果不一致，所有的测试都重复进行三次。环色胺类生物碱的生物活性如表2所示：
[0094]
表2化合物对植物病原真菌的mic
[0095][0096]
注：
“‑”
表示无活性。mic：最小抑制浓度，s.s.：油菜菌核病菌，a.s.：番茄早疫病菌，v.d.：棉花黄萎病菌，c.o.：黄瓜枯萎菌，c.j.：核桃腐霉，c.l.：玉米弯孢。
[0097]
(1)抑菌活性结果分析
[0098]
化合物17对油菜菌核病菌的抑制作用也很显著，与阳性对照两性霉素的效果相当，为3.9μg/ml；化合物7对油菜菌核病菌的抑制作用与阳性对照多菌灵的效果一致，为7.8μg/ml。
[0099]
化合物4、7、11和13对番茄早疫病菌(alternaria solani)表现出优于两组阳性对照的高度抑菌活性，它们的最小抑菌活性分别为7.8μg/ml、3.9μg/ml、7.8μg/ml、3.9μg/ml。化合物14、17、19表现出优于阳性对照多菌灵的抑菌活性，其中化合物17和19对番茄早疫病菌的抑菌活性与对照两性霉素的效果相当，它们的最小抑菌浓度为15.16μg/ml。
[0100]
化合物13和17对棉花黄萎病菌(verticillium dahliae)有显著的抑菌活性，它们的最小抑菌浓度为1.95μg/ml。化合物4、7、11、18表现出优于对照两性霉素的生物活性，它们的最小抑菌浓度分别为15.63μg/ml、15.63μg/ml、15.16μg/ml、31.25μg/ml。
[0101]
化合物11、13、17、19对黄瓜枯萎病菌(colletotrichum orbiculare)表现出优于两组阳性对照的抑菌活性，它们的最小抑菌浓度均为15.63μg/ml。化合物7、8、12、14、15也表现出优于两组阳性对照的抑菌活性，它们的最小抑菌浓度均为31.3μg/ml。
[0102]
化合物4、13、17对核桃腐霉(cytospora juglandis)有显著的生物活性，均高于两组阳性对照组，且化合物4、13、17对核桃腐霉的抑菌活性更佳，它们的最小抑菌浓度为3.9μg/ml。化合物8、11、14、15、16、19对核桃腐霉的抑菌活性比对照组的两性霉素高，最小抑菌浓度分别为62.5μg/ml、62.5μg/ml、62.5μg/ml、62.5μg/ml、31.3μg/ml、62.5μg/ml。
[0103]
化合物1、4、7、13、14、15、17、19对玉米弯孢病菌(curvularia lunata)有杰出的生物活性，优于两组阳性对照组，最小抑菌浓度分别为31.25μg/ml、31.3μg/ml、31.3μg/ml、15.63μg/ml、31.3μg/ml、31.3μg/ml、3.9μg/ml、31.25μg/ml，其中化合物17的抑菌活性最高。化合物5、12与阳性对照两性霉素的生物活性相当，最小抑菌浓度均为62.5μg/ml。
[0104]
通过比较这些化合物对不同植物病原真菌的抑菌活性发现，化合物13抑菌活性最好，它对6种植物病原真菌的抑制作用均强于两组对照组，且对油菜菌核病菌和棉花黄萎病菌的最小抑制浓度到达1.95μg/ml。化合物17的抑菌活性也很强，它对油菜菌核病菌和番茄早疫病菌的抑菌作用与两性霉素一致，且均高于对照多菌灵，对棉花黄萎病菌的抑菌作用显著，最小抑菌浓度为1.95μg/ml，对黄瓜枯萎、核桃腐霉和玉米弯孢的抑菌作用均强于两组阳性对照，最小抑菌浓度分别是15.63μg/ml、3.9μg/ml和3.9μg/ml，化合物7对番茄早疫病菌和核桃腐霉的最小抑制活性到达3.9μg/ml，且对其它2种植物病原真菌都有抑制作用并且强于或等于其中一个对照。
[0105]
上面结合实施例对本发明做了进一步的叙述，但本发明并不限于上述实施方式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下做出各种变化。