一种硫酸氢氯吡格雷杂质A及制备方法与流程

一种硫酸氢氯吡格雷杂质a及制备方法
技术领域
1.本发明涉及药物化学中杂质及制备的技术领域，具体而言，涉及一种硫酸氢氯吡格雷杂质a及制备方法。


背景技术：

2.氯吡格雷是一种常见的抗血小板聚集药物，可抑制二磷酸腺苷与血小板受体的结合，并抑制血小板聚集。血小板聚集是动脉粥样硬化的重要部分，抑制血小板聚集可有效预防血栓形成。因此氯吡格雷具有广阔的市场前景，吸引了医药界的广泛重视。
3.氯吡格雷在中国药典中报道了三种杂质，杂质ⅰ：
[0004][0005]
c
15
h
15
cl2no2s 344.26
[0006]
( )2
‑
[s
‑
(2
‑
氯苯基)]
‑2‑
(4，5，6，7
‑
四氢噻吩并[3，2
‑
c]吡啶
‑5‑
基)乙酸盐酸盐
[0007]
杂质ⅱ：
[0008][0009][0010]
c
16
h
17
cl2no2s 358.28
[0011]
(
±
)2
‑
[(2
‑
氯苯基)]
‑2‑
(4，5，6，7
‑
四氢噻吩并[2，3
‑
c]吡啶
‑6‑
基)乙酸甲酯盐酸盐
[0012]
杂质ⅲ：
[0013][0014]
c
16
h
18
clno6s
2 419.9
[0015]
(
‑
)
‑
r
‑2‑
[(2
‑
氯苯基)]
‑2‑
(4，5，6，7
‑
四氢噻吩并[3，2
‑
c]吡啶
‑5‑
基)乙酸甲酯硫酸盐
[0016]
药物中含有的杂质是影响药物纯度的主要因素，如药物中含有超过限量的杂质，就有可能使理化常数变动，外观性状产生变异，并影响药物的稳定性和疗效，甚至影响人体健康，杂质增多也必然使药物的含量偏低或活性降低，毒副作用显著增加。因此，药物的杂质检查是控制药物纯度，提高药品质量的一个非常重要的环节，同时也是保证用药的安全、有效，为生产、流通过程的质量保证和企业管理的考核属提供依据，因此在生产过程中明确药物杂质危害，确定杂质是否具有毒性，是药物研发的一个重要过程。
[0017]
药物杂质是反映药物质量的重要指标，其研究也贯穿着药物研发、生产以及销售的整个过程。对杂质进行研究，弄清杂质的结构及产生毒副反应的最小量，可对单个杂质制定限量提供理论依据，随着分析仪器技术的不断发展，药物中杂质的研究技术以及杂质研究方法也在不断地更新。为了符合原料药申报技术要求，提高产率，杂质研究必不可少。
[0018]
有鉴于此，特提出本技术。


技术实现要素：

[0019]
本发明的目的在于提供一种新的硫酸氢氯吡格雷杂质a，该杂质的发现有利于对硫酸氢氯吡格雷杂质化合物进行含量控制，从而解决了氯吡格雷小极性区域杂质的结构问题，可为原料药杂质研究和原料药制定质量标准提供充足的理论支持及研究的物质基础。
[0020]
本发明通过下述技术方案实现：
[0021]
一种硫酸氢氯吡格雷杂质a，该杂质a的结构式为
[0022][0023]
杂质a的1hnmr(meod
‑
d6)图谱参数为：2.32ppm(m，3h)(s，3h)，2.72
‑
2.79ppm(m，4h)，2.81
‑
2.89ppm(m，2h)，2.91
‑
2.96pm(m，2h)，3.45
‑
3.60ppm(m，2h)，3.69ppm(s，3h)，4.59ppm(s，2h)，4.80ppm(s，1h)，5.12
‑
5.18ppm(m，2h)，6.59ppm(s，1h)，6.67
‑
6.68ppm(d，1h)，6.83
‑
6.85ppm(m，1h)，7.10
‑
7.12ppm(m，1h)，7.21
‑
7.28ppm(m，2h)，7.30
‑
7.39ppm(m，3h)，7.43
‑
7.47ppm(m，2h)，7.62
‑
7.64ppm(m，1h)。
[0024]
一种硫酸氢氯吡格雷杂质a的制备方法，包括下述步骤：1)缩合物盐酸盐(sm1)和多聚甲醛、甲酸在dcm溶剂中反应，生成的产物氯吡格雷在酸性条件下发生反应会继续形成
羟甲基氯吡格雷杂质；2)反应完成后分别水洗、碳酸氢钠溶液调节，分液保留有机相，真空浓缩分离纯化得到羟甲基氯吡格雷杂质z1；3)将步骤2)将制得的羟甲基氯吡格雷杂质z1与(s)
‑2‑
(2
‑
氯苯基)
‑2‑
(甲基(2
‑
(噻吩
‑2‑
基)乙基)氨基)乙酸(z1
‑
sm1)、hatu、三乙胺在dmf溶剂中反应，然后加入水和ea萃取，旋蒸有机相经分离纯化制得杂质a；反应路线为：
[0025][0026]
所述dcm溶剂为吸收氯化氢气体至饱和的二氯甲烷溶液。
[0027]
缩合物盐酸盐、多聚甲醛和甲酸含量摩尔量比例为1：1～10：0.2～1.0，优选1：6：0.31。
[0028]
(s)
‑2‑
(2
‑
氯苯基)
‑2‑
(甲基(2
‑
(噻吩
‑2‑
基)乙基)氨基)乙酸(z1
‑
sm1)、羟甲基氯吡格雷杂质、hatu、三乙胺摩尔量比例为1：0.8～2.0：1.1～3.0：1.1～3.0，优选1：1.2：1.5：1.5。
[0029]
步骤1)的反应条件为，冷凝管上加液封，密封反应，外浴设置40～45℃，回流温度内温35～40℃，回流反应48h。
[0030]
步骤3)的反应条件为，室温12℃搅拌20h。
[0031]
本技术对杂质a的产生机理分析如下：氯吡格雷制备工艺为以缩合物盐酸盐sm1和多聚甲醛为原料，经关环反应得到关环产物氯吡格雷盐酸盐sm2，而在关环反应的过程中，由于存在过量的甲酸，因此氯吡格雷盐酸盐sm2在和多聚甲醛在含甲酸存在的酸性条件下中发生反应会产生羟甲基氯吡格雷杂质z1，同时由于体系在多聚甲醛和酸性条件会发生反应生成(s)
‑2‑
(2
‑
氯苯基)
‑2‑
(甲基(2
‑
(噻吩
‑2‑
基)乙基)氨基)乙酸(z1
‑
sm1)，新生成的杂质z1、z1
‑
sm1在酸性条件下继续会脱水缩合成酯得到目标杂质a。
[0032]
本发明与现有技术相比，具有如下的优点和有益效果：
[0033]
本发明实施例提供的一种硫酸氢氯吡格雷杂质a，为一种全新的化合物，该杂质的结构确证和合成解决了氯吡格雷小极性区域杂质的结构问题，可为原料药杂质研究和原料药制定质量标准提供充足的理论支持及研究的物质基础。
附图说明
[0034]
为了更清楚地说明本发明示例性实施方式的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0035]
图1为本发明实施例提供的羟甲基氯吡格雷杂质z1的hplc图；
[0036]
图2为本发明实施例提供的杂质a的lc
‑
ms图；
[0037]
图3为洗脱分离tlc图
[0038]
图4为本发明实施例提供的杂质a的1hnmr。
[0039]
图5为本发明实施例提供的杂质a的1hnmr放大图1。
[0040]
图6为本发明实施例提供的杂质a的1hnmr放大图2。
具体实施方式
[0041]
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例和附图，对本发明作进一步的详细说明，本发明的示意性实施方式及其说明仅用于解释本发明，并不作为对本发明的限定。
[0042]
在以下描述中，为了提供对本发明的透彻理解阐述了大量特定细节。然而，对于本领域普通技术人员显而易见的是：不必采用这些特定细节来实行本本发明。在其他实施例中，为了避免混淆本本发明，未具体描述公知的结构、电路、材料或方法。
[0043]
在整个说明书中，对“一个实施例”、“实施例”、“一个示例”或“示例”的提及意味着：结合该实施例或示例描述的特定特征、结构或特性被包含在本本发明至少一个实施例中。因此，在整个说明书的各个地方出现的短语“一个实施例”、“实施例”、“一个示例”或“示例”不一定都指同一实施例或示例。此外，可以以任何适当的组合和、或子组合将特定的特征、结构或特性组合在一个或多个实施例或示例中。此外，本领域普通技术人员应当理解，在此提供的示图都是为了说明的目的，并且示图不一定是按比例绘制的。这里使用的术语“和/或”包括一个或多个相关列出的项目的任何和所有组合。
[0044]
在本发明的描述中，术语“前”、“后”、“左”、“右”、“上”、“下”、“竖直”、“水平”、“高”、“低”“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明保护范围的限制。
[0045]
实施例1
[0046]
本发明实施例提供的一种硫酸氢氯吡格雷杂质a的制备方法，包括如下步骤：
[0047]
1、羟甲基氯吡格雷杂质z1的制备：
[0048]
1.1取适量盐酸与250ml三口烧瓶中，取适量浓硫酸加入恒压滴液漏斗中，缓慢滴加至盐酸中，产生的氯化氢气体经浓硫酸与尿素混合液干燥之后，通入装有520.01g二氯甲烷的三口瓶中，吸收至饱和，密封待用；
[0049]
1.2另取500ml三口瓶，准确称量缩合物盐酸盐(38.72g，1eq)，多聚甲醛(19.95g，6.0eq)，甲酸(1.61g，0.31eq)，配置温度计，磁力搅拌装置，回流装置，加入1.1.中吸收氯化氢气体至饱和的二氯甲烷溶液，密封反应，40℃回流，回流温度37℃，回流时间48小时，停止反应，冷却至室温，使用80g水洗一次分液，保留有机相，使用8％碳酸氢钠溶液调节有机相ph＝7.5，分液保留有机相，40℃真空减压浓缩，得到杂质z1粗品，hplc检测，粗品hplc纯度为49.12％；
[0050]
1.3通过制备供试品溶液对照标准溶液，在同一薄层板上点样、展开与检视，供试品色谱图中所显斑点的位置和荧光应标准物质谱图的斑点一致，确定杂质z1的rf≈0.3；另使用40
×
40cm薄层色谱，条状点样，使用石油醚：醋酸甲酯＝2:1比例为展开剂，展开，在紫外灯光照射，刮取rf≈0.3的硅胶板，加入适量乙酸甲酯溶解，磁力搅拌5分钟，抽滤，浓缩，得到杂质z1样品10.4mg，杂质hplc如图1，hplc条件如表1(保留时间4.15min，纯度为95％。
[0051]
表1 hplc条件
[0052][0053]
2、杂质a的制备
[0054]
向25ml单口瓶中加入50mg n
‑
甲基酸，68.4mg羟甲基氯吡格雷杂质z1，98.05mghatu，24.45mg三乙胺，2.5mldmf，室温(12℃)搅拌20h反应完毕，向体系中加入1.5ml水，3mlea萃取一次，tlc显示水相全为hatu，旋蒸有机相，将有机相样品做tlc制备，刮取rf＝0.5的tlc板，加入5mlea室温搅拌5min，抽滤，室温(13℃)浓缩，得14.7mg样品，送lc
‑
ms监测，如图2所示，显示为目标杂质a分子量。
[0055]
杂质a的1hnmr如图4
‑
图6所示，测试结果如下：
[0056]
1hnmr(meod
‑
d6)：2.32ppm(m，3h)(s，3h)，2.72
‑
2.79ppm(m，4h)，2.81
‑
2.89ppm(m，2h)，2.91
‑
2.96pm(m，2h)，3.45
‑
3.60ppm(m，2h)，3.69ppm(s，3h)，4.59ppm(s，2h)，4.80ppm(s，1h)，5.12
‑
5.18ppm(m，2h)，6.59ppm(s，1h)，6.67
‑
6.68ppm(d，1h)，6.83
‑
6.85ppm(m，1h)，7.10
‑
7.12ppm(m，1h)，7.21
‑
7.28ppm(m，2h)，7.30
‑
7.39ppm(m，3h)，7.43
‑
7.47ppm(m，2h)，7.62
‑
7.64ppm(m，1h)。
[0057]
实施例2
[0058]
本发明实施例提供的一种硫酸氢氯吡格雷杂质a的制备方法，包括如下步骤：
[0059]
1、羟甲基氯吡格雷杂质z1的制备：
[0060]
1.1取适量盐酸与250ml三口烧瓶中，取适量浓硫酸加入恒压滴液漏斗中，缓慢滴加至盐酸中，产生的氯化氢气体经浓硫酸与尿素混合液干燥之后，通入装有520.01g二氯甲烷的三口瓶中，吸收至饱和，密封待用；
[0061]
1.2另取500ml三口瓶，准确称量缩合物盐酸盐(38.72g，1eq)，多聚甲醛(19.95g，6.0eq)，甲酸(1.61g，0.31eq)，配置温度计，磁力搅拌装置，回流装置，加入1.1.中吸收氯化氢气体至饱和的二氯甲烷溶液，密封反应，40℃回流，回流温度37℃，回流时间48小时，停止反应，冷却至室温，使用80g水洗一次分液，保留有机相，使用8％碳酸氢钠溶液调节有机相ph＝7.5，分液保留有机相，40℃真空减压浓缩，得到杂质z1粗品，hplc检测，粗品hplc纯度为49.12％；
[0062]
1.3称量200g 200
‑
300目硅胶；装入直径为4cm的层析柱中，真空抽紧，用橡皮管边装边敲打，使用500ml石油醚冲柱，使柱子装的比较匀，吸附剂高约20cm。称取5g粗品于单口瓶中，加入适量乙酸甲酯溶解，加入5g 100
‑
200目硅胶，40℃真空减压浓缩，旋干至无明显固体颗粒为止，装好的柱子上留一段溶剂，把吸附了样品的硅胶慢慢倒进去，再加一些溶
剂，把粘在柱壁上的硅胶洗下,上层加入少量石英砂颗粒。洗脱：粗品杂质纯度仅占47％，hplc图谱显示制备杂质前后均有其他杂质，按照极性大的先洗脱出来的原理，收集tlc上rf≈0.3如图3接液，收集tlc图的单一杂质点，40℃真空减压浓缩，得到杂质z1样品432.69mg，收率8.65％，纯度90.01％。
[0063]
2、杂质a的制备
[0064]
向25ml单口瓶中加入50mg(s)
‑2‑
(2
‑
氯苯基)
‑2‑
(甲基(2
‑
(噻吩
‑2‑
基)乙基)氨基)乙酸(z1
‑
sm1)，68.4mg羟甲基氯吡格雷杂质z1，98.05mghatu，24.45mg三乙胺，2.5mldmf，室温(12℃)搅拌20h反应完毕，向体系中加入1.5ml水，3mlea萃取一次，tlc显示水相全为hatu，旋蒸有机相，将有机相样品做tlc制备，刮取rf＝0.5的tlc板，加入5mlea室温搅拌5min，抽滤，室温(13℃)浓缩，得14.7mg样品，送lc
‑
ms监测显示为目标杂质a分子量。
[0065]
实施例3
[0066]
本发明实施例提供的一种硫酸氢氯吡格雷杂质a的制备方法，包括如下步骤：
[0067]
1、羟甲基氯吡格雷杂质z1的制备：
[0068]
1.1取适量盐酸与250ml三口烧瓶中，取适量浓硫酸加入恒压滴液漏斗中，缓慢滴加至盐酸中，产生的氯化氢气体经浓硫酸与尿素混合液干燥之后，通入装有520.01g二氯甲烷的三口瓶中，吸收至饱和，密封待用；
[0069]
1.2另取500ml三口瓶，准确称量缩合物盐酸盐(38.72g，1eq)，多聚甲醛(19.95g，6.0eq)，甲酸(1.61g，0.31eq)，配置温度计，磁力搅拌装置，回流装置，加入1.1.中吸收氯化氢气体至饱和的二氯甲烷溶液，密封反应，40℃回流，回流温度37℃，回流时间48小时，停止反应，冷却至室温，使用80g水洗一次分液，保留有机相，使用8％碳酸氢钠溶液调节有机相ph＝7.5，分液保留有机相，40℃真空减压浓缩，得到杂质z1粗品，hplc检测，粗品hplc纯度为49.12％；
[0070]
1.3称量200g 200
‑
300目硅胶；装入直径为4cm的层析柱中，真空抽紧，用橡皮管边装边敲打，使用500ml石油醚冲柱，使柱子装的比较匀，吸附剂高约20cm。称取5g粗品于单口瓶中，加入适量乙酸甲酯溶解，加入5g 100
‑
200目硅胶，40℃真空减压浓缩，旋干至无明显固体颗粒为止，装好的柱子上留一段溶剂，把吸附了样品的硅胶慢慢倒进去，再加一些溶剂，把粘在柱壁上的硅胶洗下，上层加入少量石英砂颗粒。洗脱：粗品杂质纯度仅占47％，hplc图谱显示制备杂质前后均有其他杂质，按照极性大的先洗脱出来的原理，收集tlc上rf≈0.3如图3接液，收集tlc图的单一杂质点，40℃真空减压浓缩，得到杂质z1样品538.31mg，收率10.77％，纯度96.21％。
[0071]
2、杂质a的制备
[0072]
向25ml单口瓶中加入50mg(s)
‑2‑
(2
‑
氯苯基)
‑2‑
(甲基(2
‑
(噻吩
‑2‑
基)乙基)氨基)乙酸(z1
‑
sm1)，68.4mg羟甲基氯吡格雷杂质z1，98.05mghatu，24.45mg三乙胺，2.5mldmf，室温(12℃)搅拌20h反应完毕，向体系中加入1.5ml水，3mlea萃取一次，tlc显示水相全为hatu，旋蒸有机相，将有机相样品做tlc制备，刮取rf＝0.5的tlc板，加入5mlea室温搅拌5min，抽滤，室温(13℃)浓缩，得14.7mg样品，送lc
‑
ms监测显示为目标杂质a分子量。
[0073]
实施例4
[0074]
本发明实施例提供的一种硫酸氢氯吡格雷杂质a的制备方法，包括如下步骤：
[0075]
1、羟甲基氯吡格雷杂质z1的制备：
[0076]
1.1取适量盐酸与250ml三口烧瓶中，取适量浓硫酸加入恒压滴液漏斗中，缓慢滴加至盐酸中，产生的氯化氢气体经浓硫酸与尿素混合液干燥之后，通入装有520.01g二氯甲烷的三口瓶中，吸收至饱和，密封待用；
[0077]
1.2另取500ml三口瓶，准确称量缩合物盐酸盐(38.72g，1eq)，多聚甲醛(19.95g，6.0eq)，甲酸(1.61g，0.31eq)，配置温度计，磁力搅拌装置，回流装置，加入1.1.中吸收氯化氢气体至饱和的二氯甲烷溶液，密封反应，40℃回流，回流温度37℃，回流时间48小时，停止反应，冷却至室温，使用80g水洗一次分液，保留有机相，使用8％碳酸氢钠溶液调节有机相ph＝7.5，分液保留有机相，40℃真空减压浓缩，得到杂质z1粗品，hplc检测，粗品hplc纯度为49.12％；
[0078]
1.3称量200g 200
‑
300目硅胶；装入直径为4cm的层析柱中，真空抽紧，用橡皮管边装边敲打，使用500ml石油醚冲柱，使柱子装的比较匀，吸附剂高约20cm。称取5g粗品于单口瓶中，加入适量乙酸甲酯溶解，加入5g 100
‑
200目硅胶，40℃真空减压浓缩，旋干至无明显固体颗粒为止，装好的柱子上留一段溶剂，把吸附了样品的硅胶慢慢倒进去，再加一些溶剂，把粘在柱壁上的硅胶洗下,上层加入少量石英砂颗粒。洗脱：粗品杂质纯度仅占47％，hplc图谱显示制备杂质前后均有其他杂质，按照极性大的先洗脱出来的原理，收集tlc上rf≈0.3如图3接液，收集tlc图的单一杂质点，40℃真空减压浓缩，得到杂质z1样品2.425g，收率48.5％，纯度为98.18％。
[0079]
2、杂质a的制备
[0080]
向50ml单口瓶中加入0.396g(s)
‑2‑
(2
‑
氯苯基)
‑2‑
(甲基(2
‑
(噻吩
‑2‑
基)乙基)氨基)乙酸(z1
‑
sm1)，0.54g羟甲基氯吡格雷杂质z1，0.72ghatu，0.19g三乙胺，8.0mldmf，室温(12℃)搅拌20h反应完毕，向体系中加入8.0ml水，20mlea萃取一次,tlc显示水相全为hatu，30℃旋蒸有机相得0.829g，有机相上柱层析纯化，层析硅胶53.0g100～200目硅胶，样品0.82g加入1.6g硅胶浓缩至干，洗脱剂：pe:ea＝10:1，pe:ea＝5:1收集洗脱剂pe:ea＝5:1，为目标杂质点，共接液300ml，20℃减压浓缩，得到目标杂质a 403.8mg，hplc纯度90.1％。
[0081]
以上所述的具体实施方式，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施方式而已，并不用于限定本发明的保护范围，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。