光诱导型基因启动子、重组载体及其构建方法、重组细菌与流程

技术特征：
1.一种光诱导型基因启动子，其特征在于，所述光诱导型基因启动子的核苷酸序列如seq id no.1所示。2.根据权利要求1所述的光诱导型基因启动子，其特征在于，所述光诱导型基因启动子来源于拟南芥。3.一种制备权利要求1所述光诱导型基因启动子的上、下游扩增引物，其特征在于，所述上游引物的核苷酸序列如seq id no.2所示，所述下游扩增引物的核苷酸序列如seq id no.3所示。4.一种重组载体，其特征在于，包含权利要求1所述的光诱导型基因启动子。5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于，所述重组载体为融合光诱导型基因启动子ntp2和gus报告基因的质粒pntp2
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gus。6.一种如权利要求4
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5任一所述重组载体的构建方法，其特征在于，包括步骤：以野生型拟南芥col的基因组dna为模板，采用核苷酸序列如seq id no.2所示的上游引物和核苷酸序列如seq id no.3所示的下游引物进行pcr扩增，得到光诱导型基因启动子ntp2；对融合有gus报告基因的pmdc162质粒载体和所述光诱导型基因启动子ntp2进行kpn1和sac1双酶切，并通过凝胶电泳对酶切产物进行胶回收纯化，得到酶切后ntp2片段和酶切后pmdc162质粒载体；采用t4连接酶将所述酶切后ntp2片段连接入所述酶切后pmdc162质粒载体中，构建成重组载体pntp2
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gus。7.一种重组细菌，其特征在于，采用权利要求4
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5任一所述的重组载体转化农杆菌gv3101得到。8.一种如权利要求7所述重组细菌的应用，其特征在于，基于花苞浸泡法采用含有所述重组细菌的培养基培养拟南芥，筛选得到稳定遗传的拟南芥纯合突变体。

技术总结
本发明公开了光诱导型基因启动子、重组载体及其构建方法、重组细菌，其中，所述重组载体包括所述光诱导型基因启动子，所述光诱导型基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用光诱导型基因启动子代替组成型基因启动子，提供一种含特异性光诱导型启动子的重组载体，使用融合GUS报告基因的pMDC162质粒作为基础载体，使用光诱导型基因启动子NTP2作为靶序列，组成重组载体。本发明构建的重组载体具有具有特异性好、高效稳定表达、易于筛选等优点，完全可以在保证光照的基础上，快速地获得光诱导表达目的基因的转基因材料，有望在调控目的基因的表达中发挥重要作用。控目的基因的表达中发挥重要作用。控目的基因的表达中发挥重要作用。


技术研发人员：任永兵 王菲 王晓彦 于宇 莫蓓莘
受保护的技术使用者：深圳大学龙华生物产业创新研究院
技术研发日：2021.09.13
技术公布日：2022/1/3