一种实时监控的人免疫球蛋白的生产方法与流程

技术特征：
1.一种实时监控的人免疫球蛋白的生产方法，其特征在于，包括组分分离和实时监控；组分分离：将原料血浆破袋后输送到融浆罐，待血浆融化后把血浆温度控制在0～4℃之间，离心分离沉淀，去除沉淀后的血浆输送至第一反应罐进行提取分离；血浆进入第一反应罐后，启动搅拌，滴加缓冲液调节ph值，添加低温乙醇，完全添加乙醇后进行离心，离心得组分i沉淀和组分i上清液，组分i沉淀用于制备人纤维蛋白原，组分i上清液进入第二反应罐，滴加缓冲液调节组分i上清液的ph值，添加低温乙醇，然后搅拌和静置，进行压滤，压滤后得组分ⅱ ⅲ沉淀和组分ⅱ ⅲ上清液，记录组分ⅱ ⅲ沉淀的重量；将组分ⅱ ⅲ沉淀用水低温溶解，然后加入低温的乙酸钠溶液，滴加缓冲液调整ph值，再次加入低温乙醇，在加入低温乙醇的过程中搅拌，完全加入低温乙醇后继续搅拌然后静置，然后加入硅藻土进行超滤，得到人免疫球蛋白上清液；实时监控：在组分ⅱ ⅲ沉淀用水溶解后，在添加低温乙醇的过程中取样，记录取样时低温乙醇的添加量，对样品进行过滤，对样品的上清液进行低温烘干及称重，根据低温乙醇添加量与上清液蛋白质重量的关系曲线得到在该低温乙醇添加量的情况下样品上清液蛋白质的理论重量，实时判断取样时蛋白质的重量与理论重量的大小；当样品上清液的蛋白质重量大于理论重量时，说明在组分ⅱ ⅲ上清液的杂蛋白含量过少；当样品上清液的蛋白质重量等于理论重量时，说明生产正常；当样品上清液的蛋白质重量小于理论重量，说明组分ⅱ ⅲ上清液的人免疫球蛋白剩余较多。2.如权利要求1所述的实时监控的人免疫球蛋白的生产方法，其特征在于，低温乙醇添加量与上清液蛋白质重量的关系曲线通过下述方式制作：将一定质量的人免疫球蛋白用水低温溶解，然后加入低温的乙酸钠溶液，滴加缓冲液调整ph值，再次加入低温乙醇，在加入低温乙醇的过程中搅拌，每添加一升低温乙醇，取一次标准样品，对标准样品进行过滤，对标准样品的上清液进行低温烘干及称重，记录标准样品蛋白质的重量，完全加入低温乙醇后继续搅拌然后静置，然后加入硅藻土进行超滤，得到标准上清液，将标准上清液过滤后，对标准上清液进行低温烘干及称重得到最终的蛋白质重量，根据低温乙醇的添加量与对应的标准样品蛋白质的重量绘制关系曲线。3.如权利要求2所述的实时监控的人免疫球蛋白的生产方法，其特征在于，人免疫球蛋白的质量范围是50g～500g，在50g～500g的范围内每增加特定重量的人免疫球蛋白绘制一条关系曲线，得到一组低温乙醇添加量与上清液蛋白质重量的关系曲线图；在正常生产流程中，根据组分ⅱ ⅲ沉淀的重量确定相邻的两条关系曲线，当样品上清液蛋白质重量处于两条关系曲线之间时，说明生产正常；当样品上清液蛋白质重量处于两条关系曲线上方时，说明在组分ⅱ ⅲ上清液的杂蛋白含量过少；当样品上清液蛋白质重量处于两条关系曲线下方时，说明组分ⅱ ⅲ上清液的人免疫球蛋白剩余较多。4.如权利要求1
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3任一项所述的实时监控的人免疫球蛋白的生产方法，其特征在于，在组分分离步骤中，组分ⅱ ⅲ沉淀用水低温溶解过程中，维持温度为0～4℃，搅拌时间为2
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4小时，加入乙酸钠溶液温度控制在0～4℃；自开始加入乙酸钠溶液开始计时，时间控制在4～5小时内，加入后搅拌时间控制在1～2小时，滴加缓冲液时维持温度为0～4℃，滴加时间控制在2
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3小时内，缓冲液完全滴加后液体的ph值控制在5.15～5.25。5.如权利要求4所述的实时监控的人免疫球蛋白的生产方法，其特征在于，组分ⅱ ⅲ沉淀用水低温溶解后，加入
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15℃且体积分数为95％的低温乙醇，自加入低温乙醇开始计
时，加液时间控制在3～5小时，完全加入低温乙醇后，低温乙醇的终浓度为17％，温度降至
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5～
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6℃；完全加入低温乙醇后溶液ph值应为5.10～5.30。6.如权利要求1所述的实时监控的人免疫球蛋白的生产方法，其特征在于，在组分分离的步骤中，将原料血浆破袋后输送到融浆罐，用30～35℃的水进行夹层循环融浆，血浆融化后，停止水循环，把血浆温度控制在0～4℃之间，离心分离沉淀，去除沉淀后的血浆输送至第一反应罐进行提取分离。7.如权利要求6所述的实时监控的人免疫球蛋白的生产方法，其特征在于，血浆进入第一反应罐后，启动搅拌并控制血浆的温度在0～1℃之间，滴加ph为4.0的缓冲液调节ph值为6.80～7.00，添加
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15℃且体积分数为50％的低温乙醇至乙醇体积比浓度为8％，添加乙醇的流速为1.0～1.2升/分钟，添加乙醇后温度控制在
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1～
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3℃，加完乙醇后进行离心，离心得组分i沉淀和组分i上清液。8.如权利要求7所述的实时监控的人免疫球蛋白的生产方法，其特征在于，取组分i上清液于第二反应罐中，滴加ph为4.0的缓冲液调节组分i上清液的ph值为6.80～6.85，添加
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15℃且体积分数为95％的低温乙醇至乙醇体积比浓度为20％，添加乙醇的流速为1.0～1.2升/分钟，添加乙醇后温度控制在
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4～
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6℃，加完乙醇后，ph为6.80～7.00，搅拌后静置，再开启搅拌，然后进行压滤，压滤后得组分ⅱ ⅲ沉淀和组分ⅱ ⅲ上清液。9.如权利要求1所述的实时监控的人免疫球蛋白的生产方法，其特征在于，对人免疫球蛋白上清液进行稀配和巴氏灭活，将灭活后的蛋白液用0.2μm的除菌滤芯进行除菌过滤，按要求灌装，将灌装后制品移至30～32℃孵放间孵育14天，孵育完后，进行成品检定。10.如权利要求1所述的实时监控的人免疫球蛋白的生产方法，其特征在于，在人免疫球蛋白上清液制作的过程中，按每升反应液加入18g硅藻土进行压滤。

技术总结
本发明涉及一种实时监控的人免疫球蛋白的生产方法，包括组分分离和实时监控；将组分Ⅱ Ⅲ沉淀用水低温溶解，调整pH值后再次加入低温乙醇搅拌然后静置，加入硅藻土进行超滤，得到人免疫球蛋白上清液；在组分Ⅱ Ⅲ沉淀用水溶解后，在添加低温乙醇的过程中取样，记录取样时低温乙醇的添加量，对样品进行过滤，对样品的上清液进行低温烘干及称重，根据低温乙醇添加量与上清液蛋白质重量的关系曲线得到在该低温乙醇添加量的情况下样品上清液蛋白质的理论重量，实时判断取样时蛋白质沉淀的重量与理论重量的大小。本发明通过在生产过程中取样与标准的关系曲线比较，判断生产是否出现异常。异常。


技术研发人员：黄燚 陆河其 黄璠 赵睿 刘宇良 范佳逑 邓志华 张丽铃
受保护的技术使用者：广东丹霞生物制药有限公司
技术研发日：2021.09.27
技术公布日：2021/12/16