前体三特异性抗体构建体及其使用方法与流程

技术特征：
1.一种前体三特异性抗体构建体，其包含：(a)结合第一肿瘤相关抗原(taa)的第一结合结构域；(b)结合第二taa的第二结合结构域；(c)结合人cd3ε的细胞外表位的第三结合结构域；和(d)调节结构域，所述调节结构域包含(i)第一子调节结构域和第二子调节结构域，所述第一子调节结构域包含第一蛋白酶切割结构域和半衰期延长(hlp)结构域，并且所述第二子调节结构域包含第二蛋白酶切割结构域和降低所述第三结合结构域结合人cd3ε的细胞外表位的能力的cap组件；或(ii)单个调节结构域，其包含蛋白酶切割结构域、半衰期延长(hlp)结构域和降低所述第三结合结构域结合人cd3ε细胞外表位的能力的cap组件。2.根据权利要求1所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述第一结合结构域和所述第二结合结构域结合相同的taa或结合不同的taa。3.根据权利要求1所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述第一taa、或所述第二taa、或所述第一taa和所述第二taa两者选自肿瘤细胞表面抗原的细胞外表位、肿瘤微环境抗原、肿瘤微环境(tme)中的基质抗原、tme中的血管生成抗原、tme中血管上的抗原、tme中的细胞因子抗原、以及它们的任何组合。4.根据权利要求3所述的前体三特异性抗体构建体，其中由所述第一结合结构域或所述第二结合结构域或两者结合的所述taa选自egfr、ror1、psma和5t4。5.根据权利要求4所述的前体三特异性抗体构建体，其中(a)当所述taa是egfr时，所述第一结合结构域或所述第二结合结构域或两者包含seq id no:34、37的任一或其组合中叙述的氨基酸序列；(b)当所述taa是ror1时，所述第一结合结构域或所述第二结合结构域或两者包含seq id no：156和166的任一或其组合中叙述的氨基酸序列；(c)当所述taa是psma时，所述第一结合结构域或所述第二结合结构域或两者包含seq id no：168和170的任一或其组合中叙述的氨基酸序列；和(d)当所述taa是5t4时，所述第一结合结构域或所述第二结合结构域或两者包含seq id no：172和174的任一或其组合中叙述的氨基酸序列。6.根据权利要求3所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述肿瘤微环境抗原选自kir、lilr和tigit。7.根据权利要求3所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述肿瘤微环境中的基质抗原选自成纤维细胞活化蛋白(fap)、α平滑肌肌动蛋白(αsma)、pdgfrα、整合素α11β1(itga11)vegf、腱生蛋白
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c、骨膜蛋白、成纤维细胞特异性蛋白1(s10a4、fsp1)、结蛋白、波形蛋白、帕拉丁、尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂受体相关蛋白(uparap)、半乳糖凝集素
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3、平足蛋白、血小板、ccl2和cxcl12。8.根据权利要求3所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述肿瘤微环境中的所述血管生成抗原选自bfgf、inf和vegf。9.根据权利要求3所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述肿瘤微环境中血管表面上的所述抗原选自cd31、cd105、cd146和cd144。10.根据权利要求3所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述细胞因子抗原选自tnf
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α、il
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6、tgf
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β、il
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10、il
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8、il
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17、il
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21、inf和veg。11.根据权利要求1所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述hlp结构域包含人血清白蛋白(hsa)多肽。12.根据权利要求1所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述cap组件包含人cd3ε的细胞外表位的氨基酸序列。13.根据权利要求1所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述cap组件包含如在seq id no：5中叙述的氨基酸序列或其同源物。14.根据权利要求1所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述第一结合结构域、所述第二结合结构域或两者各自包含单链可变片段(scfv)。15.根据权利要求1所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述第三结合结构域包含fab抗原结合片段。16.根据权利要求1所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述第一子调节结构域和第二子调节结构域中的所述蛋白酶切割结构域被相同的蛋白酶或不同的蛋白酶切割。17.根据权利要求1所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述第一蛋白酶切割结构域和第二蛋白酶切割结构域中的一个或两者包含可由丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、基质金属蛋白酶(mmp)切割的蛋白酶可切割氨基酸序列，或者是被mmp2/9、upa、蛋白裂解酶和天冬酰胺内肽酶中的一种或多种或其任何组合切割的组合底物。18.药物组合物，其包含权利要求1所述的前体三特异性抗体构建体和药学上可接受的载体。19.核酸构建体，其包含编码权利要求1所述的前体三特异性抗体构建体的一种或多种核酸序列。20.表达载体，其包含权利要求19所述的核酸构建体。21.分离的宿主细胞，其包含权利要求20所述的表达载体。22.在需要此类治疗的受试者中治疗、防止、抑制生长、延缓疾病进展、降低肿瘤负荷或降低癌症或肿瘤发病率、或其任何组合的方法，其包括向所述受试者施用权利要求18所述的药物组合物的步骤，其中所述方法治疗、防止、抑制生长、延缓疾病进展、降低肿瘤负荷或降低所述受试者中癌症或肿瘤的发病率。23.根据权利要求22所述的方法，其中所述癌症或肿瘤包括实体瘤或非实体瘤，或其中所述癌症或肿瘤包括癌症或肿瘤的转移。

技术总结
本文描述了包含至少一个肿瘤相关抗原结合结构域、T细胞结合结构域和具有增强的半衰期的调节结构域的前体三特异性抗体构建体。进一步地，公开了产生前体三特异性抗体构建体的方法。还公开了包含前体构建体的药物组合物及其用于治疗肿瘤的用途。其用于治疗肿瘤的用途。其用于治疗肿瘤的用途。


技术研发人员：H
受保护的技术使用者：免疫里森公司
技术研发日：2020.03.26
技术公布日：2021/12/16