双环杂环基化合物及其用途的制作方法

2021-11-30 12:31:00 来源：中国专利 TAG：

本申请要求2019年3月1日提交的美国临时申请系列号62/812,839的优先权权益，所述美国临时申请的公开内容以引用的方式如同阐述般整体并入在此。本申请要求2019年12月18日提交的美国临时申请系列号62/949,785的优先权权益，所述美国临时申请的公开内容以引用的方式如同阐述般整体并入在此。

技术领域

本发明涉及可用于治疗疾病或病症的SOS1抑制剂。具体来说，本发明有关于抑制SOS1的化合物和组合物、治疗与SOS1相关的疾病的方法以及合成这些化合物的方法。

发明背景

RAS家族蛋白，包括KRAS(V-Ki-ras2柯尔斯顿(Kirsten)大鼠肉瘤病毒致癌基因同源物)、NRAS(成神经细胞瘤RAS病毒致癌基因同源物)和HRAS(哈维(Harvey)鼠类肉瘤病毒致癌基因)及其任何突变体，是细胞中存在的呈GTP结合状态或GDP结合状态的小GTP酶(McCormick等,J.Mol.Med.(Berl),2016,94(3):253-8；Nimnual等,Sci.STKE.,2002,2002(145):pl36)。RAS家族蛋白具有弱固有GTP酶活性和缓慢核苷酸交换率(Hunter等,Mol.Cancer Res.,2015,13(9)：1325-35)。结合GTP酶激活蛋白(GAP)如NF1使RAS家族蛋白的GTP酶活性增高。结合鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)如SOS1(Son of Sevenless 1)促进GDP从RAS家族蛋白释放，从而能够发生GTP结合(Chardin等,Science,1993,260(5112):1338-43)。当处于GTP结合状态时，RAS家族蛋白具有活性并且啮合诸多效应蛋白，包括RAF和磷酸肌醇3激酶(PI3K)，从而促进RAF/促分裂原或细胞外信号调控激酶(MEK/ERK)。公开数据表明SOS1在癌症中关键性地参与突变KRAS激活和致癌信号传导(Jeng等,Nat.Commun.,2012,3:1168)。耗竭SOS1水平使携带KRAS突变的肿瘤细胞的增殖率和存活率降低，而在KRAS野生型细胞系中未观测到效应。SOS1丧失的效应无法通过引入催化位点突变SOS1来挽救，从而证明SOS1 GEF活性在KRAS突变癌细胞中的重要作用。

SOS1在癌症中通过除RAS家族蛋白突变以外的机制关键性地参与RAS家族蛋白信号传导激活。SOS1与衔接蛋白Grb2相互作用，并且产生的SOS1/Grb2复合物结合激活/磷酸化受体酪氨酸激酶(例如EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、PDGFR-A/B、FGFR1/2/3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1/2/3、AXL)(Pierre等,Biochem.Pharmacol.,2011,82(9)：1049-56)。SOS1还被募集到其他磷酸化细胞表面受体，如T细胞受体(TCR)、B细胞受体(BCR)和单核细胞集落刺激因子受体(Salojin等,J.Biol.Chem.2000,275(8):5966-75)。SOS1对RAS家族蛋白近端的质膜的这种定位使得SOS1能够促进RAS家族蛋白激活。RAS家族蛋白的SOS1激活还可以通过SOS1/Grb2与慢性骨髓性白血病中常见的BCR-ABL致癌蛋白的相互作用来介导(Kardinal等,2001,Blood,98:1773-81；Sini等,Nat.Cell Biol.,2004,6(3):268-74)。此外，SOS1中的变化牵涉到癌症。SOS1突变见于胚胎性横纹肌肉瘤、支持细胞性睪丸肿瘤、皮肤颗粒细胞肿瘤(Denayer等,Genes Chromosomes Cancer,2010,49(3):242-52)和肺腺癌(Cancer Genome Atlas Research Network.,Nature,2014,511(751 1):543-50)中。同时，膀胱癌(Watanabe等,IUBMB Life,2000,49(4):317-20)和前列腺癌(Timofeeva等,Int.J.Oncol.,2009；35(4):751-60)中已经描述了SOS1过度表达。除癌症以外，遗传性SOS1突变还牵涉RAS蛋白病变，例如努南氏综合征(Noonan syndrome，NS)、心脏-面部-皮肤综合征(CFC)和1型遗传性齿龈纤维瘤病的发病机制(Pierre等,Biochem.Pharmacol.,2011,82(9):1049-56)。

SOS1还是用于激活GTP酶RAC1(Ras相关C3肉毒毒素底物1)的GEF(Innocenti等,J.Cell Biol.,2002,156(1):125-36)。RAC1同RAS家族蛋白一样牵涉多种人类癌症和其他疾病的发病机制(Bid等,Mol.Cancer Ther.2013,12(10):1925-34)。

哺乳动物细胞中的SOS1同源物SOS2(Son of Sevenless 2)还充当激活RAS家族蛋白的GEF(Pierre等,Biochem.Pharmacol.,2011,82(9)：1049-56；Buday等,Biochim.Biophys.Acta.,2008,1786(2):178-87)。来自小鼠基因敲除模型的公开数据表明SOS1和SOS2在成年小鼠体内平衡中的冗余作用。尽管SOS1生殖系敲除在小鼠中导致胚胎中期妊娠过程中的致死性(Qian等,EMBO J.,2000,19(4):642-54)，但系统性条件性SOS1敲除成年小鼠是活的(Baltanas等,Mol.Cell.Biol.,2013,33(22):4562-78)。SOS2基因靶向在小鼠中未产生任何外显表型(Esteban等,Mol.Cell.Biol.,2000,20(17):6410-3)。相比之下，SOS1和SOS2双重敲除导致成年小鼠快速致死(Baltanas等,Mol.Cell.Biol.,2013,33(22):4562-78)。这些公开数据表明，可以充分耐受对个别SOS同种型的选择性靶向(例如选择性SOS1靶向)，以在SOS1/RAS家族蛋白驱动的癌症(或其他SOS1/RAS家族蛋白病变)与正常的细胞和组织之间实现治疗指数。

预计选择性药理学抑制SOS1催化位点与RAS家族蛋白结合能防止SOS1介导的RAS家族蛋白激活成GTP结合形式。预计此类SOS1抑制剂化合物因此抑制RAS家族蛋白下游细胞中的信号传导(例如ERK磷酸化)。在与对RAS家族蛋白的依赖性相关的癌细胞(例如KRAS突变癌细胞系)中，预计SOS1抑制剂化合物递送抗癌功效(例如抑制增殖、存活、转移等)。对抑制细胞中SOS1:RAS家族蛋白结合(纳摩尔水平IC50值)和ERK磷酸化(纳摩尔水平IC50值)的高效能是SOS1抑制剂化合物的理想特征。此外，SOS1抑制剂化合物的理想特征应是相对于SOS2选择性抑制SOS1。这一结论是基于如上文所述的SOS1敲除小鼠的活表型和SOS1/SOS2双重敲除小鼠的致死性。

先前描述的SOS1抑制剂化合物中尚未实现这些特征。在最近数十年中，RAS家族蛋白-SOS1蛋白相互作用已经获得了日益增加的认识。已经进行了若干努力以鉴定并优化靶向RAS的效应因子结合位点或SOS1的催化结合位点的结合剂(关于所选综述，参见：Lu等,ChemMedChem.2016,11(8):814-21)，但仅取得了有限的成功。

最近，已经鉴定出结合到紧邻RAS结合位点的SOS1亲脂性口袋的小激活分子(Burns等,Proc.Natl.Acad.Sci.2014,111(9):3401-6)。然而，这些分子的结合似乎导致核苷酸交换增加，从而导致RAS激活而非灭活。

在努力稳定RAS家族蛋白与SOS1的蛋白质-蛋白质相互作用并防止RAS家族蛋白再负载GTP时，然后鉴定了若干个不同的片段(Winter等,J.Med.Chem.2015,58(5):2265-74)。然而，片段与SOS1的可逆结合没有转化成对核苷酸交换的可测量作用，而且对与RAS共价结合的片段仅观测到弱作用。

同样最近，已经进行了研究以组合合理的设计和筛检平台来鉴定SOS1的小分子抑制剂(Evelyn等,Chem.Biol.2014,21(12):1618-28；Evelyn等,J.Biol.Chem.2015,290(20):12879-98；Zheng等,WO 2016/077793)，即，结合SOS1并抑制与RAS家族蛋白的蛋白质-蛋白质相互作用的化合物。尽管已经鉴定了对SOS1具有轻微抑制作用的化合物，但对鸟嘌呤核苷酸交换和细胞信号转导调节(例如ERK磷酸化)的作用较弱。

发明概要

本发明涉及能够抑制SOS1活性的化合物。本发明还提供了制备化合物的方法、包含此类化合物的药物制剂以及使用此类化合物和组合物控制与异常SOS1活性相关的疾病或病症的方法。

本发明一方面涉及式(I)化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，其中：

Q¹是CH或N；

Q⁴是CH、C或N；

各个Q²独立地为C-R¹或N，其中一个Q²是N并且另一个Q²是C-R¹；

各个Q³和Q⁵独立地为C(R^QC)2、NR^QN、CO、O、S或SO2，其中各个R^QC独立地为H、F、Cl、Br或6-10元芳基，并且其中各个R^QN独立地为H、C1-6烷基或6-10元芳基；

其中Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵中至少一个是N、NR^QN、O或SO2；

m是0、1、2或3；

n是0、1、2或3；

其中当m是0时，则n不是0；

R¹选自由H、C1-6烷基、卤素、-CONHR^1a、-NHR^1a、–OR^1a、环丙基、氮杂环丁基和–CN组成的组；其中各个C1-6烷基和氮杂环丁基任选地被卤素、R^1a、-NHR^1a或–OR^1a取代；其中R^1a是H、C1-6烷基、环丙基、3-6元杂环基或C1-6卤代烷基；

L²选自由以下组成的组：一个键、–C(O)–、–C(O)O–、–C(O)NH(CH2)o–、–S(O)2–、–C(O)(CH2)p–、–(CH2)p–和–O–；其中o是0、1或2；并且其中p是1至6的数；

R²选自由以下组成的组：H、C1-6烷基、-NR^2bR^2c、-OR^2a、3-14元环烷基、3-14元环烯基、3-14元杂环基、6-10元芳基和5-10元杂芳基；其中各个C1-6烷基、3-14元环烷基、3-14元环烯基、3-14元杂环基、6-10元芳基和5-10元杂芳基独立地任选地被以下基团取代：C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、C1-6甲氧基烷基、-OH、-OR^2a、氧代、＝N、卤素、-C(O)R^2a、-C(O)OR^2a、-C(O)NR^2bR^2c、-SO2R^2a、-CN、-NR^2bR^2c、3-6元环烷基、3-7元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基；

其中R^2a是H、C1-6烷基、C1-6卤烷基、3-7元杂环基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；

其中R^2b是H或C1-6烷基；

其中R^2c是H或C1-6烷基；

R³和R⁴独立地为H或任选地被卤代或-OH取代的C1-6烷基；其中R³和R⁴中至少一个是H，或其中R³和R⁴与它们连接的原子一起组合形成3-6元环烷基；并且

A是任选地取代的6元芳基或任选地取代的5-6元杂芳基；

限制条件为当是时；

则R¹不是H。

本发明一方面涉及式(I-a)化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，其中：

Q¹、Q³、Q⁴、Q⁵、m、n和A如式(I)中所定义；

Q²是CH或N；

其中Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵中至少一个是N、NR^QN、O或SO2；

R¹选自由H、卤素、C1-6烷基、环丙基、–CN和–OR^1a组成的组；其中R^1a是H或C1-6烷基；

L²选自由以下组成的组：一个键、–C(O)–、–C(O)O–、–C(O)NH(CH2)o–、–S(O)2–、–C(O)(CH2)p–、–(CH2)p–或–O–；其中o是0、1或2；并且其中p是1至6的数；

R²选自由以下组成的组：H、–(CH2)qCH3、3-14元环烷基、3-14元环烯基、3-14元杂环基、6-10元芳基和5-10元杂芳基；其中q是1至5的数；其中各个3-14元环烷基、3-14元环烯基、3-14元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基任选地被C1-6烷基、–OH、卤素、–C(O)R^2a或–C(O)NR^2bR^2c取代；其中R^2a是C1-6烷基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；其中R^2b是H或C1-6烷基；并且其中R^2c是H或C1-6烷基；并且

R³和R⁴独立地为H或C1-6烷基；其中R³和R⁴中至少一个不是H；或R³和R⁴与它们连接的原子一起组合形成3-6元环烷基；并且

其中式(I)的限制条件也适用于式(I-a)。

本发明另一方面涉及式(V)化合物，

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，其中：

L²、Q¹、Q²、Q³、Q⁴、Q⁵、m、n、R¹、R²、R³和R⁴如式(I)中所定义；

R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹独立地选自由以下组成的组：H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基、3-14元杂环基、-OH、卤素、–NO2、–CN、–NR¹¹R¹²、–SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、–C(O)R¹⁰和–CO2R¹⁰，其中各个C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基和3-14元杂环基独立地任选地被以下基团取代：–OH、卤素、–NO2、氧代、–CN、-R¹⁰、–OR¹⁰、–NR¹¹R¹²、-SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、3-8元环烷基、3-14元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基，或任两个相邻的R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹形成3-14元稠合环；

R¹⁰、R¹¹和R¹²在每次出现时独立地选自H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基、3-14元杂环基、–OR¹³、–SR¹³、卤素、–NR¹³R¹⁴、–NO2和–CN；并且

R¹³和R¹⁴在每次出现时独立地选自H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基和3-14元杂环基，其中各个C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基和3-14元杂环基独立地任选地被–OH、–SH、–NH2、–NO2或–CN取代；并且

其中式(I)的限制条件也适用于式(V)。

本发明另一方面涉及式(V-a)化合物，

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，其中：

Q¹、Q³、Q⁴、Q⁵、m、n、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹、R¹²、R¹³和R¹⁴如式(V)中所定义；

Q²是CH或N；

其中Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵中至少一个是N、NR^QN、O或SO2；

R¹选自由H、卤素、C1-6烷基、环丙基、–CN和–OR^1a组成的组；其中R^1a是H或C1-6烷基；并且

L²选自由以下组成的组：一个键、–C(O)–、–C(O)O–、–C(O)NH(CH2)o–、–S(O)2–、–C(O)(CH2)p–、–(CH2)p–或–O–；其中o是0、1或2；并且其中p是1至6的数；并且

其中式(I)的限制条件也适用于式(V-a)。

本发明另一方面涉及式(VI)化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，其中：

L²、Q¹、Q²、Q³、Q⁴、Q⁵、m、n、R¹、R²、R³和R⁴如式(I)中所定义；

Q⁷和Q⁸各自独立地为CH、N、NH、O或S，限制条件为Q⁷和Q⁸中至少一个是N、NH、O或S；

R⁶和R⁷独立地选自由以下组成的组：H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基、3-14元杂环基、-OH、卤素、–NO2、–CN、–NR¹¹R¹²、–SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、–C(O)R¹⁰和–CO2R¹⁰，其中各个C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基和3-14元杂环基独立地任选地被以下基团取代：–OH、卤素、–NO2、氧代、–CN、-R¹⁰、–OR¹⁰、–NR¹¹R¹²、-SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、3-8元环烷基、3-14元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基，

其中式(I)的限制条件也适用于式(VI)。

本发明另一方面涉及式(VI-a)化合物：

其中L²、Q¹、Q²、Q³、Q⁴、Q⁵、Q⁷、Q⁸、R¹、R²、R³、R⁴、R⁶和R⁷如式(VI)中所定义，并且其中式(I)的限制条件也适用于式(VI-a)。

本发明另一方面涉及一种药物组合物，其包含如上文所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体以及药学上可接受的载体。

本发明另一方面涉及一种在受试者中抑制SOS1的方法，所述方法包括向该受试者施用如上文所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体，或者药物组合物。

本发明另一方面涉及一种抑制细胞中SOS1与RAS家族蛋白的相互作用或抑制细胞中SOS1与RAC1的相互作用的方法，所述方法包括向该细胞施用如以上所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体，或者药物组合物。

本发明另一方面涉及一种治疗或预防疾病的方法，其中治疗或预防该疾病是以抑制SOS1与RAS家族蛋白的相互作用或以抑制SOS1与RAC1的相互作用为特征，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的如以上所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体，或者药物组合物。

本发明另一方面涉及一种在有需要的受试者中治疗或预防癌症的方法，包括向所述受试者施用有效量的如上文所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体或者药物组合物。

本发明另一方面涉及一种如上文所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体或者药物组合物，其用作药物。

本发明另一方面涉及一种如上文所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体或者药物组合物在制造供用于抑制hSOS1与H-RAS或N-RAS或K-RAS(包括其临床已知突变)结合并抑制由hSOS1在以20μM或更低浓度存在时催化(但其在20μM或更低浓度下对EGFR激酶基本上无活性)的核苷酸交换反应的药物中的用途。

本发明另一方面涉及一种如上文所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体或者药物组合物在制造供用于抑制hSOS1与K-RAS G12C蛋白特异性结合并抑制由hSOS1在以20μM或更低浓度存在时催化(但其在20μM或更低浓度下对EGFR激酶基本上无活性)的核苷酸交换反应的药物中的用途。

本发明还提供了一种如上文所述可用于抑制SOS1的化合物或其药学上可接受的盐、前药、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体或者药物组合物。

附图简述

图1A是示出了在使用雌性balb/c无胸腺裸鼠的NSCLC NCI-H358异种移植模型中每天重复给与50和250mg/kg化合物A(口服)以及10mg/kg MRTX1257对体内肿瘤细胞生长的功效的图。

图1B是示出了与图1A的功效研究相关的小鼠体重变化的图。

图1C描绘了MRTX1257的结构。

具体实施方式

本发明的细节阐述于以下所附发明描述中。尽管与本文描述的那些类似或等效的方法和材料可以用于本发明的实践或测试中，但现在描述说明性方法和材料。本发明的其他特征、目标和优点将从发明描述和权利要求书中显而易知。除非上下文另外清楚指明，否则在本说明书和所附权利要求书中，单数形式也包括复数形式。除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语都具有与本领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。本说明书中引用的所有专利和出版物都以全文引用的方式并入本文。

术语

冠词“一(a和an)”在本发明中用于指该冠词的一个或多于一个(即，至少一个)语法受词。举例来说，“一要素”意指一个要素或多于一个要素。

除非另外指明，否则术语“和/或”在本发明中用于意指“和”或“或”。除非明确指出仅指替代物或替代物互相排斥，否则使用术语“或”用于意指“和/或”，但本发明支持仅指替代物以及“和/或”的定义。

如本文所使用，术语“约”用于指出值包括用于测定该值的装置或方法的误差的标准偏差。在某些实施方案中，除非另外阐明或以其他方式从上下文显而易见(例如，在该数值将超过可能值的100％时)，否则术语“约”是指在任一方向上(大于或小于)落在所述值的25％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％或更小范围内的值范围。

“任选”或“任选地”意指随后描述的事件或情形可能发生或可能不发生，且该描述包括该事件或情形发生的情况以及其不发生的情况。举例来说，“任选地取代的芳基”涵盖如本文所定义的“芳基”和“取代的芳基”二者。本领域普通技术人员应理解，关于含有一个或多个取代基的任何基团，此类基团不希望引入空间上不切实际、合成上不可行和/或固有地不稳定的任何取代或取代模式。

除非另外规定，否则术语“任选地取代”意指基团可能未被取代或者被针对该基团列出的一个或多个(例如，0、1、2、3、4或5个以上，或其中可衍生的任何范围)取代基取代，其中所述取代基可能相同或不同。在一个实施方案中，任选地取代的基团具有1个取代基。在另一个实施方案中，任选地取代的基团具有2个取代基。在另一个实施方案中，任选地取代的基团具有3个取代基。在另一个实施方案中，任选地取代的基团具有4个取代基。在另一个实施方案中，任选地取代的基团具有5个取代基。举例来说，任选地取代的烷基可以是完全饱和烷基链(即，纯烃)。替代地，相同任选地取代的烷基可以具有与氢不同的取代基。举例来说，它可以沿着链在任一点与卤素原子、羟基或本文描述的任何其他取代基键合。因此，术语“任选地取代”意指指定化学部分有可能含有其他官能团，但未必具有任何其他官能团。

如本文所使用，“烷基”可能意指具有1至10个碳原子的饱和直链或支链。代表性饱和烷基包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、2-甲基-1-丙基、2-甲基-2-丙基、2-甲基-1-丁基、3-甲基-1-丁基、2-甲基-3-丁基、2,2-二甲基-1-丙基、2-甲基-1-戊基、3-甲基-1-戊基、4-甲基-1-戊基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、2,2-二甲基-1-丁基、3,3-二甲基-1-丁基、2-乙基-1-丁基、丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基等等，以及更长烷基，如庚基和辛基等等。烷基可能未被取代或被取代。含有三个以上碳原子的烷基可以是直链或支链的。如本文所使用，“低级烷基”意指具有1至6个碳原子的烷基。

如本文所使用，术语“杂烷基”是指“烷基”(如本文所定义)，其中至少一个碳原子已被置换为杂原子(例如O、N或S原子)。杂原子可能出现在基团的中间或末端。

术语“烯基”意指含有碳-碳双键并且可以是链中具有约2至约6个碳原子的直链或支链的脂肪族烃基。某些烯基在链中具有2至约4个碳原子。支链意指一个或多个如甲基、乙基或丙基等低级烷基连接至直链烯基链。示例性烯基包括乙烯基、丙烯基、正丁烯基和异丁烯基。C2-C6烯基是含有2个至6个碳原子的烯基。

术语“炔基”意指含有碳-碳三键并且可以是链中具有约2至约6个碳原子的直链或支链的脂肪族烃基。某些炔基在链中具有2至约4个碳原子。支链意指一个或多个如甲基、乙基或丙基等低级烷基连接至直链炔基链。示例性炔基包括乙炔基、丙炔基、正丁炔基、2-丁炔基、3-甲基丁炔基和正戊炔基。C2-C6炔基是含有2至6个碳原子的炔基。

如本文所使用，术语“卤代”或“卤素”意指氟代、氯代、溴代或碘代。

如本文所使用，术语“氧代”是指“＝O”基团。当氧代基团键合至碳原子时，它在本文中还可以缩写为C(O)或C＝O。氧代还可以键合至硫原子(例如S＝O和S(O)2)或磷原子(例如P＝O、PO2、PO3、PO4等)。

如本文所使用，术语“亚胺”是指“＝N”基团。当亚胺键合至碳原子时，它在本文中还可以缩写为C＝N。氮还可以双键合至硫，例如S＝N，称为硫代亚胺。

结合与本文描述的环系统有关的术语(例如，环烷基、环烯基、芳基、杂环基和杂芳基)使用的术语“环原子”是指该系统中存在的环原子的总数。“环原子”因此不包括连接至该环的取代基中存在的原子。因此，“环原子”的数目包括稠合环中存在的所有原子。举例来说，2-吲哚基环被视为5元杂芳基，但也是含有9个环原子的杂芳基。在另一个实例中，吡啶被视为6元杂芳基，而且是含有6个环原子的杂芳基。

“环烷基”是指具有3至20个环碳原子(例如C3-C20环烷基)，例如3至15个环原子，例如3至12个环原子的饱和全碳单环。在某些实施方案中，环烷基是单环的(“单环环烷基”)或含有稠合、桥合或螺环系统，如双环系统(“双环环烷基”)，而且可以是饱和的。“环烷基”包括其中如以上定义的环烷基环与一个或多个环烷基、环烯基、杂环基、芳基或杂芳基稠合的环系统，其中连接点在环烷基环上，而且在此类情况下，所述碳原子数继续表示含有连接点的环烷基环中的碳数目。环烷基的实例包括环己基、环庚基、2-金刚烷基2-(2,3-二氢-1H-茚和9-茀基如以上所指出，环烷基环还可以以环原子数为特征。举例来说，环己基环是具有6个环原子的C6环烷基环，而2-(2,3-二氢-1H-茚)是具有9个环原子的C5环烷基。而且，举例来说，9-茀基是具有13个环原子的C5环烷基环，而2-金刚烷基是具有10个环原子的C6环烷基。

如本文所使用，术语“环烯基”可能是指部分饱和的单环稠合或螺多环全碳环，每个环具有3至18个碳原子且含有至少一个双键。“环烯基”包括其中如以上定义的环烯基环与一个或多个环烷基、环烯基、杂环基、芳基或杂芳基稠合的环系统，其中连接点在环烯基环上，而且在此类情况下，所述碳原子数继续表示含有连接点的环烯基环中的碳数目。环烯基环还可以以环原子数为特征。环烯基的实例包括1-环己-1-烯基和环戊-1-烯基。

如本文所使用，术语“芳基”是指全碳芳香族单环或缩合全碳多环系统，其中所述环中至少一个是芳香族的。举例来说，在某些实施方案中，芳基具有5至20个环碳原子、5至14个环碳原子或5至12个环碳原子。芳基还包括具有约9至20个碳原子的缩合多环系统(例如，包含2、3或4个环的环系统)，其中至少一个环是芳香族，并且其中其他环可以是芳香族或非芳香族(即，环烷基)。“芳基”包括其中如以上定义的芳基环与一个或多个环烷基、环烯基、杂环基、芳基或杂芳基稠合的环系统，并且其中连接点在芳基环上，且在此类情况下，所述碳原子数继续表示含有连接点的芳基环中的碳原子数。芳基的实例包括苯基和5-(2,3-二氢-1H-茚)：如以上所指出，芳基环还可以以环原子数为特征。举例来说，苯基是具有6个环原子的C6芳基，而5-(2,3-二氢-1H-茚)是具有9个环原子的C6芳基。

如本文所使用，“杂环基”是指环中具有至少一个杂原子(选自氧、氮、磷和硫的至少一个环杂原子)的饱和或部分不饱和非芳香族单环或非芳香族多环系统(包括稠合和螺多环)。除非另外规定，否则杂环基具有5至约20个环原子，例如5至15个环原子，例如5至10个环原子。因此，所述术语包括环中具有约1至6个环碳原子以及约1至3个选自由氧、氮、磷和硫组成的组的环杂原子的饱和或部分不饱和单环(例如3、4、5、6或7元环)。该术语还包括环中具有约4至9个环碳原子以及约1至3个选自由氧、氮、磷和硫组成的组的环杂原子的饱和或部分不饱和单环(例如5、6、7、8、9或10元环)。“杂环基”包括其中如以上定义的杂环基环与一个或多个环烷基、环烯基、杂环基、芳基或杂芳基稠合的环系统，其中连接点在杂环上，而且在此类情况下，所述环成员数继续表示含有连接点的杂环中的环原子数。杂环还可以以环原子数为特征。杂环基团的实例包括哌啶基(具有6个环原子的6元杂环)、氮杂环庚基(具有7个环原子的7元杂环)和3-色烷基(具有10个环原子的6元杂环)

如本文所使用，术语“杂芳基”是指环中具有至少一个非碳原子的芳香族单环，其中该原子选自由以下组成的组：氧、氮和硫；该术语还包括具有至少一个此类芳香族环的缩合多环系统。因此，所述术语包括环中具有约1至10个环碳原子以及约1至5个选自由氧、氮和硫组成的组的环杂原子的杂芳基单环。硫和氮原子还可以以氧化形式存在，限制条件为该环是芳香族的。“杂芳基”包括其中如以上定义的杂芳基环与一个或多个环烷基、环烯基、杂环基、芳基或杂芳基稠合的环系统，其中连接点在杂芳基环上，且在此类情况下，环成员数继续表示含有连接点的杂芳基环中的环成员数。杂芳基环还可以以环原子数为特征。举例来说，吡啶是具有6个环原子的6元杂芳基。

本发明还包括包含有效量的所公开化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。代表性“药学上可接受的盐”包括但不限于例如水溶性和水不溶性盐，如乙酸盐、安索酸盐(amsonate)(4,4-二氨基芪-2,2-二磺酸盐)、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、丁酸盐、钙盐、依地酸钙、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、柠檬酸盐、克拉维酸盐(clavulariate)、二盐酸盐、依地酸盐(edetate)、乙二磺酸盐、依托酸盐(estolate)、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、对羟乙酰氨基苯胂酸盐(glycollylarsanilate)、六氟磷酸盐、己基间苯二酸盐(hexylresorcinate)、海巴盐(hydrabamine)、氢溴酸盐、盐酸盐、羟基萘甲酸盐、碘化物、羟乙磺酸盐(sethionate)、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂酸盐、镁盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴化物、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、N-葡甲胺铵盐、3-羟基-2-萘甲酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐(1,1-亚甲基-双-2-羟基-3-萘甲酸盐，依伯酸盐(einbonate))、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、苦味酸盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、对甲苯磺酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、次乙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、磺基水杨酸盐、苏拉明酸盐(suramate)、单宁酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐(teoclate)、甲苯磺酸盐、三乙基碘盐和戊酸盐。

术语“互变异构体”是指具有相同的原子数和类型但在键连接性方面不同且彼此平衡的一组化合物。“互变异构体”是这组化合物的单个成员。通常绘出单个互变异构体，但应当理解，这单个结构意在表示可能存在的所有可能互变异构体。实例包括烯醇-酮互变异构现象。当绘出酮时，应当理解，烯醇和酮形式都是本发明的一部分。

本发明化合物还可以包括中间物或最终化合物中存在的原子的所有同位素。同位素包括具有相同的原子序数但不同的质量数的那些原子。举例来说，氢的同位素包括氚和氘。本发明化合物的一个或多个组成原子可以被呈天然或非天然丰度的原子同位素置换或取代。在一些实施方案中，化合物包含至少一个氘原子。举例来说，本发明化合物中的一个或多个氢原子可以被氘原子置换或取代。在一些实施方案中，化合物包含两个以上氘原子。在一些实施方案中，化合物包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个氘原子。用于将同位素包括到有机化合物中的合成方法在本领域中是已知的。

如本发明中所使用，术语“前药”意指可以通过代谢手段(例如通过水解)而在体内转化成所公开的化合物的化合物。此外，如本文所使用，前药是在体内无活性但通常在从胃肠道吸收过程中或在吸收之后在体内转化成活性化合物的药物。前药在体内转化成活性化合物可以以化学方式或生物学方式(即，使用酶)来进行。

术语“溶剂合物”是指由溶质和溶剂形成的具有可变化学计量的复合物。出于本发明的目的，此类溶剂不能干扰溶质的生物活性。合适的溶剂的实例包括但不限于水、MeOH、EtOH和AcOH。其中水是溶剂分子的溶剂合物通常称为水合物。水合物包括含有化学计量的水的组合物以及含有可变量的水的组合物。

术语“异构体”是指具有相同的组成和分子量但在物理和/或化学性质方面不同的化合物。结构差异可能在构造方面(几何异构体)或在使偏振光平面旋转的能力方面(立体异构体)。关于立体异构体，本文的化合物可能具有一个或多个不对称碳原子而且可以作为外消旋物、外消旋混合物以及作为个别镜像异构体或非镜像异构体存在。

术语“立体异构体”是指一组具有相同的原子数目和类型而且在那些原子之间共用相同键连接但在三维结构方面不同的化合物。术语“立体异构体”是指这组化合物的任何成员。举例来说，立体异构体可以是镜像异构体或非镜像异构体。

术语“镜像异构体”是指互为不可重叠镜像的一对立体异构体。术语“镜像异构体”是指这对立体异构体的单个成员。术语“外消旋”是指镜像异构体配对的1:1混合物。

术语“非镜像异构体”是指一组无法通过围绕单键旋转而使其重叠的立体异构体。举例来说，顺式和反式双键、双环状环系统上的内向和外向取代以及含有多个具有不同相对构象的立体异构中心的化合物被视为非镜像异构体。术语“非镜像异构体”是指这组化合物的任何成员。在呈现的一些实例中，合成途径可以产生单个非镜像异构体或非镜像异构体混合物。

“有效量”当结合化合物使用时为就在受试者中治疗或预防如本文所描述的疾病而言有效的量。

如本发明所使用，术语“载体”涵盖赋形剂和稀释剂，而且意指参与将药剂从受试者的一个器官或身体部分运载或输送至另一个器官或身体部分的材料、组合物或媒介物，如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或囊封材料。

术语“治疗”在与受试者有关时是指改善受试者的病症的至少一种症状。治疗包括治愈、改善或至少部分改善病症。

术语“预防”在与受试者有关时是指使疾病或病症不再折磨受试者。预防包括预防性治疗。举例来说，预防可以包括在受试者罹患疾病之前向受试者施用本文公开的化合物，而且该施用将使该受试者免受该疾病折磨。

术语“抑制”和“减轻”或这些术语的任何变化形式包括为了实现所期望的结果的任何可测量或完全抑制。举例来说，活性(例如SOS1:Ras家族蛋白结合活性)降低可能为与正常相比降低约、至多约或至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、99％或更多，或者其中可衍生的任何范围。

除非另外指明，否则术语“病症”在本发明中用于意指术语疾病、疾患或不适且可与其互换使用。

本发明所使用的术语“施用(administer、administering或administration)”是指向受试者直接施用所公开的化合物或所公开的化合物的药学上可接受的盐或组合物，或者向受试者施用化合物的前药衍生物或类似物或化合物的药学上可接受的盐或组合物，它们可以在受试者体内形成等效量的活性化合物。

“患者”或“受试者”是哺乳动物，例如人、小鼠、大鼠、豚鼠、狗、猫、马、母牛、猪或非人灵长类动物，如猴子、黑猩猩、狒狒或恒河猴。

具有所公开的化学式的化合物

在一些实施方案中，本发明涉及具有下式的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，其中：

Q¹和Q²独立地为CH或N；

各个Q³和Q⁵独立地为C(R^QC)2、NR^QN、CO、O或SO2，其中各个R^QC独立地为H、F、Cl、Br或芳基，并且其中各个R^QN独立地为H、C1-6烷基或芳基；

Q⁴是CH或N；

其中Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵中至少一个是N、NR^QN、O或SO2；

m是0、1、2或3；

n是0、1、2或3；

其中当m是0时，则n不是0；

R¹是H、卤素、C1-6烷基、3元环烷基、–CN或–OR^1a；其中R^1a是H或C1-6烷基；

L²是一个键、–C(O)–、–C(O)O–、–C(O)NH(CH2)o–、–S(O)2–、–C(O)(CH2)p–、–(CH2)p–或–O–；其中o是0、1或2；并且其中p是1至6的数；

R²是H、-(CH2)qCH3、环烷基、环烯基、杂环基、芳基、杂芳基；其中q是1至5的数；其中各个环烷基、环烯基、杂环基、芳基或杂芳基任选地被一个或多个C1-6烷基、–OH、卤素、–C(O)R^2a或–C(O)NR^2bR^2c取代；其中R^2a是C1-6烷基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；其中R^2b是H或C1-6烷基；并且其中R^2c是H或C1-6烷基；

R³和R⁴独立地选自由H和C1-6烷基组成的组；其中R³和R⁴中至少一个不是H；或者R³和R⁴与它们连接的原子一起组合形成3-6元环烷基；并且

A是任选地取代的6元芳基或任选地取代的5-6元杂芳基；

限制条件为当是时；则R¹不是H。

在其他实施方案中，本发明涉及具有下式的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，其中：

Q¹和Q²独立地为CH或N；

各个Q³和Q⁵独立地为C(R^QC)2、NR^QN、CO、O或SO2，其中各个R^QC独立地为H、F、Cl、Br或芳基，并且其中各个R^QN独立地为H、C1-6烷基或芳基；

Q⁴是CH或N；

其中Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵中至少一个是N、NR^QN、O或SO2；

m是0、1、2或3；

n是0、1、2或3；

其中当m是0时，则n不是0；

R¹是H、卤素、C1-6烷基、3元环烷基、–CN或–OR^1a；其中R^1a是H或C1-6烷基；

L²是一个键、–C(O)–、–C(O)O–、–C(O)NH(CH2)o–、–S(O)2–、–C(O)(CH2)p–、–(CH2)p–或–O–；其中o是0、1或2；并且其中p是1至6的数；

R³和R⁴独立地选自由H和C1-6烷基组成的组；其中R³和R⁴中至少一个不是H；或者R³和R⁴与它们连接的原子一起组合形成3-6元环烷基；并且

R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹独立地选自由H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、C4-8环烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、-OH、卤素、–NO2、–CN、–NR¹¹R¹²、–SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、–C(O)R¹⁰或–CO2R¹⁰组成的组，其中各个烷基、烯基、环烯基、炔基或环烷基任选地被一个或多个–OH、卤素、–NO2、氧代、–CN、-R¹⁰、–OR¹⁰、–NR¹¹R¹²、-SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、杂环、芳基或杂芳基取代；

R¹⁰、R¹¹和R¹²在每次出现时独立地为H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、C4-8环烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、单环3-12元杂环、多环3-12元杂环、–OR¹³、–SR¹³、卤素、–NR¹³R¹⁴、–NO2或–CN；

R¹³和R¹⁴在每次出现时独立地为H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、C4-8环烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、单环3-12元杂环或多环3-12元杂环，其中各个烷基、烯基、环烯基、炔基、环烷基或杂环任选地被一个或多个–OH、–SH、–NH2、–NO2或–CN取代；

限制条件为当是时；则R¹不是H。

具有所公开的化学式的其他化合物

本发明提供了式(I)化合物，

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，其中：

Q¹是CH或N；

Q⁴是CH、C或N；

各个Q²独立地为C-R¹或N，其中一个Q²是N并且另一个Q²是C-R¹；

各个Q³和Q⁵独立地为C(R^QC)2、NR^QN、CO、O、S或SO2，其中各个R^QC独立地为H、F、Cl、Br或6-10元芳基，并且其中各个R^QN独立地为H、C1-6烷基或6-10元芳基；

其中Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵中至少一个是N、NR^QN、O或SO2；

m是0、1、2或3；

n是0、1、2或3；

其中当m是0时，则n不是0；

R²选自由H、C1-6烷基、-NR^2bR^2c、-OR^2a、3-14元环烷基、3-14元环烯基、3-14元杂环基、6-10元芳基和5-10元杂芳基组成的组；其中各个C1-6烷基、3-14元环烷基、3-14元环烯基、3-14元杂环基、6-10元芳基和5-10元杂芳基独立地任选地被C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、C1-6甲氧基烷基、-OH、-OR^2a、氧代、＝N、卤素、-C(O)R^2a、-C(O)OR^2a、-C(O)NR^2bR^2c、-SO2R^2a、-CN、-NR^2bR^2c、3-6元环烷基、3-7元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基取代；

其中R^2a是H、C1-6烷基、C1-6卤烷基、3-7元杂环基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；

其中R^2b是H或C1-6烷基；

其中R^2c是H或C1-6烷基；

R³和R⁴独立地为H或任选地被卤代或-OH取代的C1-6烷基；其中R³和R⁴中至少一个是H，或其中R³和R⁴与它们连接的原子一起组合形成3-6元环烷基；并且

A是任选地取代的6元芳基或任选地取代的5-6元杂芳基；

限制条件为当是时；

则R¹不是H。

本发明提供了式(I-a)化合物，

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，其中：

Q¹、Q³、Q⁴、Q⁵、m、n和A如式(I)中所定义；

Q²是CH或N；

其中Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵中至少一个是N、NR^QN、O或SO2；

R¹选自由H、卤素、C1-6烷基、环丙基、–CN和–OR^1a组成的组；其中R^1a是H或C1-6烷基；

R²选自由H、–(CH2)qCH3、3-14元环烷基、3-14元环烯基、3-14元杂环基、6-10元芳基和5-10元杂芳基组成的组；其中q是1至5的数；其中各个3-14元环烷基、3-14元环烯基、3-14元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基任选地被C1-6烷基、–OH、卤素、–C(O)R^2a或–C(O)NR^2bR^2c取代；其中R^2a是C1-6烷基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；其中R^2b是H或C1-6烷基；并且其中R^2c是H或C1-6烷基；并且

R³和R⁴独立地为H或C1-6烷基；其中R³和R⁴中至少一个不是H；或者R³和R⁴与它们连接的原子一起组合形成3-6元环烷基。

本发明提供了式(II-a)、式(II-b)或式(II-c)化合物，

及其药学上可接受的盐、前药、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体，其中：

Q¹和Q²独立地为CH或N；

各个Q³和Q⁵独立地为C(R^QC)2、NR^QN、CO、O或SO2，其中各个R^QC独立地为H、F、Cl、Br或芳基，并且其中各个R^QN独立地为H、C1-6烷基或芳基(例如6-10元芳基)；

Q⁴是CH或N；

其中Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵中至少一个是N、NR^QN、O或SO2；

R¹是H、卤素、C1-6烷基、环丙基、–CN或–OR^1a；其中R^1a是H或C1-6烷基；

L²是一个键、–C(O)–、–C(O)O–、–C(O)NH(CH2)o–、–S(O)2–、–C(O)(CH2)p–、–(CH2)p–或–O–；其中o是0、1或2；并且其中p是1至6的数；

R²是H、-(CH2)qCH3、环烷基(例如3-14元环烷基)、环烯基(例如3-14元环烯基)、杂环基(例如3-14元杂环基)、芳基(例如6-10元芳基)、杂芳基(例如5-10元杂芳基)；其中q是1至5的数；其中各个环烷基、环烯基、杂环基、芳基或杂芳基任选地被一个或多个C1-6烷基、–OH、卤素、–C(O)R^2a或–C(O)NR^2bR^2c取代；其中R^2a是C1-6烷基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；其中R^2b是H或C1-6烷基；并且其中R^2c是H或C1-6烷基；

R³和R⁴独立地选自由H和C1-6烷基组成的组；其中R³和R⁴中至少一个不是H；或者R³和R⁴与它们连接的原子一起组合形成3-6元环烷基；并且

A是任选地取代的6元芳基或任选地取代的5-6元杂芳基；

限制条件为当是则R¹不是H。

本发明提供了式(III-a)、式(III-b)、式(III-c)或式(III-d)化合物，

及其药学上可接受的盐、前药、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体，其中：

Q¹和Q²独立地为CH或N；

各个Q³和Q⁵独立地为C(R^QC)2、NR^QN、CO、O或SO2，其中各个R^QC独立地为H、F、Cl、Br或芳基，并且其中各个R^QN独立地为H、C1-6烷基或芳基(例如6-10元芳基)；

Q⁴是CH或N；

其中Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵中至少一个是N、NR^QN、O或SO2；

R¹是H、卤素、C1-6烷基、环丙基、–CN或–OR^1a；其中R^1a是H或C1-6烷基；

L²是一个键、–C(O)–、–C(O)O–、–C(O)NH(CH2)o–、–S(O)2–、–C(O)(CH2)p–、–(CH2)p–或–O–；其中o是0、1或2；并且其中p是1至6的数；

R³和R⁴独立地选自由H和C1-6烷基组成的组；其中R³和R⁴中至少一个不是H；或者R³和R⁴与它们连接的原子一起组合形成3-6元环烷基；并且

A是任选地取代的6元芳基或任选地取代的5-6元杂芳基；

限制条件为当是则R¹不是H。

本发明提供了式(IV-a)、式(IV-b)、式(IV-c)、式(IV-d)或式(IV-e)化合物，

及其药学上可接受的盐、前药、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体，其中：

Q¹和Q²独立地为CH或N；

各个Q³和Q⁵独立地为C(R^QC)2、NR^QN、CO、O或SO2，其中各个R^QC独立地为H、F、Cl、Br或芳基，并且其中各个R^QN独立地为H、C1-6烷基或芳基(例如6-10元芳基)；

Q⁴是CH或N；

其中Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵中至少一个是N、NR^QN、O或SO2；

R¹是H、卤素、C1-6烷基、环丙基、–CN或–OR^1a；其中R^1a是H或C1-6烷基；

L²是一个键、–C(O)–、–C(O)O–、–C(O)NH(CH2)o–、–S(O)2–、–C(O)(CH2)p–、–(CH2)p–或–O–；其中o是0、1或2；并且其中p是1至6的数；

R³和R⁴独立地选自由H和C1-6烷基组成的组；其中R³和R⁴中至少一个不是H；或者R³和R⁴与它们连接的原子一起组合形成3-6元环烷基；并且

A是任选地取代的6元芳基或任选地取代的5-6元杂芳基；

限制条件为当是时；则R¹不是H。

如本文针对式(I)至式(IV)所描述，A是任选地取代的6元芳基或任选地取代的5-6元杂芳基。

在式(I)至式(IV)的某些实施方案中，A是任选地取代的6元芳基。在某些实施方案中，A是任选地取代的5-6元杂芳基。在某些实施方案中，A是任选地取代的5元杂芳基。在某些实施方案中，A是任选地取代的6元杂芳基。

在式(I)至式(IV)的某些实施方案中，A是任选地取代的6元芳基，其中所述取代基形成稠合环，即，所述A基团是双环基团。在某些实施方案中，所述A基团是含有18个以下环原子、14个以下环原子或10个以下环原子的稠合双环基团。所述稠合环可以是3-8元环烷基、4-8元环烯基、3-14元杂环基或3-8元杂芳基。在一些实施方案中，所述双环任选地被一至三个取代基取代。

在式(I)至式(IV)的某些实施方案中，A是6元芳基。在式I的某些实施方案中，A是6元芳基，其被R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、和R⁹取代，如本文所描述且如下文所示：

在一些实施方案中，R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹独立地选自由以下组成的组：H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基、3-14元杂环基、-OH、卤素、–NO2、–CN、–NR¹¹R¹²、–SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、–C(O)R¹⁰和–CO2R¹⁰，其中各个C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基和3-14元杂环基独立地任选地被以下基团取代：–OH、卤素、–NO2、氧代、–CN、-R¹⁰、–OR¹⁰、–NR¹¹R¹²、-SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、3-8元环烷基、3-14元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基，或任两个相邻的R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹形成3-14元稠合环。

在一些实施方案中，R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹独立地选自由以下组成的组：H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基、-OH、卤素、–NO2、–CN、–NR¹¹R¹²、–SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、–C(O)R¹⁰和–CO2R¹⁰，其中各个C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基和3-8元环烷基独立地任选地被以下基团取代：–OH、卤素、–NO2、氧代、–CN、-R¹⁰、–OR¹⁰、–NR¹¹R¹²、-SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、3-14元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基。

在上文中，R¹⁰、R¹¹和R¹²在每次出现时独立地选自H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基、3-14元杂环基、–OR¹³、–SR¹³、卤素、–NR¹³R¹⁴、–NO2和–CN。

在上文中，R¹³和R¹⁴在每次出现时独立地选自H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基和3-14元杂环基，其中各个C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基和3-14元杂环基独立地任选地被–OH、–SH、–NH2、–NO2或–CN取代。

在式(I)至式(IV)的某些实施方案中，A是5-6元杂芳基。

在式I的某些实施方案中，A是5元杂芳基，其被R⁶和R⁷取代，如本文所描述且如以下所示：

在一些实施方案中，Q⁷和Q⁸独立地为CH、N、NH、O或S，限制条件为Q⁷和Q⁸中至少一个是N、NH、O或S。

在一些实施方案中，R⁶和R⁷独立地选自由以下组成的组：H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基、3-14元杂环基、-OH、卤素、–NO2、–CN、–NR¹¹R¹²、–SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、–C(O)R¹⁰和–CO2R¹⁰，其中各个C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基和3-14元杂环基独立地任选地被以下基团取代：–OH、卤素、–NO2、氧代、–CN、-R¹⁰、–OR¹⁰、–NR¹¹R¹²、-SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、3-8元环烷基、3-14元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基。

在一些实施方案中，R⁶和R⁷独立地选自由以下组成的组：H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基、-OH、卤素、–NO2、–CN、–NR¹¹R¹²、–SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、–C(O)R¹⁰和–CO2R¹⁰，其中各个C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基和3-8元环烷基独立地任选地被以下基团取代：–OH、卤素、–NO2、氧代、–CN、-R¹⁰、–OR¹⁰、–NR¹¹R¹²、-SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、3-14元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基。

在上文中，R¹⁰、R¹¹和R¹²在每次出现时独立地选自H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基、3-14元杂环基、–OR¹³、–SR¹³、卤素、–NR¹³R¹⁴、–NO2或–CN。

在上文中，R¹³和R¹⁴在每次出现时独立地选自H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基或3-14元杂环基，其中各个C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基和3-14元杂环基独立地任选地被–OH、–SH、–NH2、–NO2或–CN取代。

在式(I)至式(IV)的某些实施方案中，A是6元杂芳基。在式I的某些实施方案中，A是6元杂芳基，其被R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹取代，如本文所描述且如以下所示：

在一些实施方案中，R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹独立地选自由以下组成的组：H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基、-OH、卤素、–NO2、–CN、–NR¹¹R¹²、–SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、–C(O)R¹⁰和–CO2R¹⁰，其中各个C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基和3-8元环烷基独立地任选地被以下基团取代–OH、卤素、–NO2、氧代、–CN、-R¹⁰、–OR¹⁰、–NR¹¹R¹²、-SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、3-14元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基。

本发明提供了式(V)化合物，

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，其中：

L²、Q¹、Q²、Q³、Q⁴、Q⁵、m、n、R¹、R²、R³和R⁴如式(I)中所定义；

R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹独立地选自由H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基、3-14元杂环基、-OH、卤素、–NO2、–CN、–NR¹¹R¹²、–SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、–C(O)R¹⁰和–CO2R¹⁰组成的组，其中各个C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基和3-14元杂环基独立地任选地被–OH、卤素、–NO2、氧代、–CN、-R¹⁰、–OR¹⁰、–NR¹¹R¹²、-SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、3-8元环烷基、3-14元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基取代，或任两个相邻的R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹形成3-14元稠合环；

R¹³和R¹⁴在每次出现时独立地选自H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基和3-14元杂环基，其中各个C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基和3-14元杂环基独立地任选地被–OH、–SH、–NH2、–NO2或–CN取代。

本发明提供了式(V-a)化合物，

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，其中：

Q¹、Q³、Q⁴、Q⁵、m、n、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹、R¹²、R¹³和R¹⁴如式(V)中所定义；

Q²是CH或N；

其中Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵中至少一个是N、NR^QN、O或SO2；

R¹选自由H、卤素、C1-6烷基、环丙基、–CN和–OR^1a组成的组；其中R^1a是H或C1-6烷基；并且

L²选自由以下组成的组：一个键、–C(O)–、–C(O)O–、–C(O)NH(CH2)o–、–S(O)2–、–C(O)(CH2)p–、–(CH2)p–或–O–；其中o是0、1或2；并且其中p是1至6的数。

本发明提供了式(V-b)化合物，

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，其中：

Q⁴是CH、C或N；

各个Q⁵独立地为CH2、N-CH3或CO，并且n是1或2；

L²选自由以下组成的组：一个键、–C(O)–、–S(O)2–、–C(O)NH(CH2)o–、–C(O)(CH2)p–、–(CH2)p–；其中o是0、1或2；并且其中p是1至6的数；

R¹选自由组成的组H、C1-6烷基、卤素、-CONHR^1a、-NHR^1a、–OR^1a和氮杂环丁基；其中各个C1-6烷基和氮杂环丁基任选地被卤素、R^1a、-NHR^1a或–OR^1a取代；其中R^1a是H、C1-6烷基、环丙基、3-6元杂环基或C1-6卤代烷基；

其中R^2a是H、C1-6烷基、C1-6卤烷基、3-7元杂环基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；

其中R^2b是H或C1-6烷基；

其中R^2c是H或C1-6烷基；

R³和R⁴各自独立地选自由–H、–CH3和–CH2CH3组成的组；

R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹独立地选自由H、C1-6烷基、4-8元环烯基、3-8元环烷基、3-14元杂环基、卤素和–NR¹¹R¹²组成的组，其中各个C1-6烷基、4-8元环烯基、3-8元环烷基和3-14元杂环基独立地任选地被–OH、卤素、–CN、-R¹⁰、–OR¹⁰、–NR¹¹R¹²、3-8元环烷基或3-14元杂环基取代；或任两个相邻的R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹形成4-8元环烯基稠合环、3-8元环烷基稠合环或3-14元杂环基稠合环，其中所述4-8元环烯基稠合环、所述3-8元环烷基稠合环或所述3-14元杂环基稠合环任选地被–F或–CH2OH取代；并且

R¹⁰、R¹¹和R¹²在每次出现时独立地选自H、C1-6烷基、3-8元环烷基或3-14元杂环基。

在结构(V-b)的一些实施方案中，R¹选自由–H、–CH3、–Cl、–OH、–CH2F、–CF2CH2NH2、–CF2CH2OH、–CONH2、组成的组。

在结构(V-b)的一些实施方案中，R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹独立地选自由–H、–CF3、–NH2、–F、–Br、–CHF2、–CH2F、–CH3、–CF2CH2OH、–CF2CH2NH2、–CF2CH2OCH3、–CHFCH2OH、–CF2C(CH3)2OH、–CH2CH2OH、–CH(CH2)CH2OH、–C(CH3)2CN、组成的组；或任两个相邻的R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹形成4-8元环烯基稠合环、3-8元环烷基稠合环或3-14元杂环基稠合环，其中所述4-8元环烯基稠合环、所述3-8元环烷基稠合环或所述3-14元杂环基稠合环任选地被–F或–CH2OH取代。

本发明提供了式(VI)化合物，

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，其中：

L²、Q¹、Q²、Q³、Q⁴、Q⁵、m、n、R¹、R²、R³和R⁴如式(I)中所定义；

Q⁷和Q⁸各自独立地为CH、N、NH、O或S，限制条件为Q⁷和Q⁸中至少一个是N、NH、O或S；

R⁶和R⁷独立地选自由H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基、3-14元杂环基、-OH、卤素、–NO2、–CN、–NR¹¹R¹²、–SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、–C(O)R¹⁰和–CO2R¹⁰组成的组，其中各个C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基和3-14元杂环基独立地任选地被–OH、卤素、–NO2、氧代、–CN、-R¹⁰、–OR¹⁰、–NR¹¹R¹²、-SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、3-8元环烷基、3-14元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基取代，

本发明提供了式(VI-a)化合物，

及其药学上可接受的盐、前药、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体，其中Q¹、Q²、Q³、Q⁵、Q⁷、Q⁸、R¹、R²、R³、R⁴、R⁶、R⁷、L²、m和n如上文所述。

本发明提供了式(VII-a)和式(VII-b)化合物，

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，其中：

L²、Q¹、Q²、Q³、Q⁴、Q⁵、m、n、R¹、R²、R³和R⁴如式(I)中所定义；

Q⁷和Q⁸各自独立地为CH、N、NH、O或S，条件为Q⁷和Q⁸中至少一个是N、NH、O或S；

本发明提供了式(VII-c)和式(VII-d)化合物，

本发明提供了式(VIII-a)和式(VIII-b)化合物，

或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，其中：

L²、Q¹、Q²、Q³、Q⁴、Q⁵、m、n、R¹、R²、R³和R⁴如式(I)中所定义；

本发明提供了式(VIII-c)和式(VIII-d)化合物，

及其药学上可接受的盐、前药、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体，其中Q¹、Q²、Q³、Q⁵、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、L²、m和n如上文所述。

如上文所述，m是0、1、2或3；n是0、1、2或3；其中当m是0时，则n不是0。在某些实施方案中，m是0。在某些实施方案中，m是1。在某些实施方案中，m是2。在某些实施方案中，m是3。在某些实施方案中，n是0。在某些实施方案中，n是1。在某些实施方案中，n是2。在某些实施方案中，n是3。

在某些实施方案中，m是1而且n是1。在某些实施方案中，m是1而且n是2。在某些实施方案中，m是2而且n是1。在某些实施方案中，m是1而且n是3。在某些实施方案中，m是2而且n是2。

如上文所述，Q¹和Q²独立地为CH或N。在某些实施方案中，Q¹是CH。在某些实施方案中，Q¹是N。在某些实施方案中，Q²是CH。在某些实施方案中，Q²是N。

如上文所述，Q⁴是C或N。在某些实施方案中，Q⁴是C。在某些实施方案中，Q⁴是N。

如上文所述，各个Q³和Q⁵独立地为C(R^QC)2、NR^QN、CO、O或SO2，其中各个R^QC独立地为H、F、Cl、Br或芳基(例如6-10元芳基)，并且其中各个R^QN独立地为H、C1-6烷基或芳基(例如6-10元芳基)。在某些实施方案中，各个Q³和Q⁵独立地为C(R^QC)2、NR^QN、O或SO2，其中各个R^QC独立地为H、F、Cl、Br或芳基(例如6-10元芳基)，并且其中各个R^QN独立地为H、C1-6烷基或芳基(例如6-10元芳基)。在某些实施方案中，各个Q³和Q⁵独立地为C(R^QC)2或NR^QN，其中各个R^QC独立地为H、F、Cl、Br或芳基(例如6-10元芳基)，并且其中各个R^QN独立地为H、C1-6烷基或芳基(例如6-10元芳基)。在某些实施方案中，各个Q³和Q⁵独立地为CH2或NH。在某些实施方案中，各个Q³和Q⁵独立地为CH2。

在一些实施方案中，选自由组成的组。

在一些实施方案中，是

在某些实施方案中，选自由组成的组。

在一些实施方案中，R¹选自由H、C1-6烷基、卤素、-CONHR^1a、-NHR^1a、–OR^1a、环丙基、氮杂环丁基和–CN组成的组；其中各个C1-6烷基和氮杂环丁基任选地被卤素、R^1a、-NHR^1a或–OR^1a取代；其中R^1a是H、C1-6烷基、环丙基、3-6元杂环基或C1-6卤代烷基

在一些实施方案中，R¹选自由H、C1-6烷基、卤素、-NHR^1a、–OR^1a、氮杂环丁基、环丙基和–CN组成的组；其中各个C1-6烷基和氮杂环丁基任选地被卤素、–R^1a、–NHR^1a或–OR^1a；其中R^1a是H、C1-6烷基、3-6元杂环基或C1-6卤代烷基取代。

在一些实施方案中，R¹是H、卤素、C1-6烷基、环丙基、–CN或–OR^1a；其中R^1a是H或C1-6烷基。在某些实施方案中，R¹是卤素、C1-6烷基、环丙基、–CN或–OR^1a；其中R^1a是H或C1-6烷基。

在某些实施方案中，R¹是H。在某些实施方案中，R¹是卤素。在某些实施方案中，R¹是C1-6烷基。在某些实施方案中，R¹是C1烷基、C2烷基、C3烷基、C4烷基、C5烷基或C6烷基。在一些实施方案中，所述C1-6烷基被取代。在某些实施方案中，R¹是环丙基。在某些实施方案中，R¹是–CN。在某些实施方案中，R¹是–OR^1a；其中R^1a是H或C1-6烷基。在某些实施方案中，R¹是–OH。在某些实施方案中，R¹是–OR^1a；其中R^1a是C1-6烷基。

在某些实施方案中，R¹选自由以下组成的组：H、–CH3、–CH2OH、–CH2NH2、–CH2CH3、–CF2CH2OH、–CONH2、–Cl、–Br、–I、环丙基、–OH、–CN、–OCH3、–OCH2CH3、–NHCH3、–CHF2、–CF3、–OCF3、

在某些实施方案中，R¹选自由以下组成的组：H、–CH3、–CH2OH、–CH2NH2、–CH2CH3、–Cl、–Br、–I、环丙基、–OH、–CN、–OCH3、–OCH2CH3、–NHCH3、–CHF2、–CF3、–OCF3和

在一些实施方案中，L²选自由以下组成的组：一个键、–C(O)–、–C(O)O–、–C(O)NH(CH2)o–、–S(O)2–、–C(O)(CH2)p–、–(CH2)p–和–O–；其中o是0、1或2；并且其中p是1至6的数。在一些实施方案中，其中L²包含羰基，所述羰基的碳与Q⁴键合。

在一些实施方案中，L²选自由组成的组。

在某些实施方案中，L²是一个键。在某些实施方案中，L²是–C(O)–。在某些实施方案中，L²是–C(O)O–，其中羰基碳与Q⁷键合。在某些实施方案中，L²是–C(O)NH(CH2)o–，其中羰基碳与Q⁷键合。在某些实施方案中，L²是–S(O)2–。在某些实施方案中，L²是–C(O)(CH2)p–。在某些实施方案中，L²是–(CH2)p–。在某些实施方案中，L²是–O–。

如本文所述，o是0、1或2。在某些实施方案中，o是0。在某些实施方案中，o是1。在某些实施方案中，o是2。

如上文所述，p是1到6的数。在某些实施方案中，p是1。在某些实施方案中，p是2。在某些实施方案中，p是3。在某些实施方案中，p是4。在某些实施方案中，p是5。在某些实施方案中，p是6。

在一些实施方案中，R²选自由以下组成的组：H、C1-6烷基、-NR^2bR^2c、-OR^2a、3-14元环烷基、3-14元环烯基、3-14元杂环基、6-10元芳基和5-10元杂芳基；其中各个C1-6烷基、3-14元环烷基、3-14元环烯基、3-14元杂环基、6-10元芳基和5-10元杂芳基独立地任选地被以下基团取代：C1-6烷基、–OH、–OR^2a、氧代、＝N、卤素、–C(O)R^2a、–C(OO)R^2a、–C(O)NR^2bR^2c、–CN、-NR^2bR^2c、3-6元环烷基、3-7元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基；

其中R^2a是H、C1-6烷基、C1-6卤烷基、3-7元杂环基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；

其中R^2b是H或C1-6烷基；

其中R^2c是H或C1-6烷基。

在一些实施方案中，R²选自由以下组成的组：H、–(CH2)qCH3、3-14元环烷基、3-14元环烯基、3-14元杂环基、6-10元芳基和5-10元杂芳基；其中q是1至5的数；其中各个3-14元环烷基、3-14元环烯基、3-14元杂环基、6-10元芳基和5-10元杂芳基独立地任选地被C1-6烷基、–OH、卤素、–C(O)R^2a或–C(O)NR^2bR^2c取代；其中R^2a是C1-6烷基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；其中R^2b是H或C1-6烷基；并且其中R^2c是H或C1-6烷基。

在某些实施方案中，R²是H。在一些实施方案中，R²是–CH3。在一些实施方案中，R²是–CH(CH3)2。在某些实施方案中，R²是任选地被卤素或–OR^2a取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R²是–(CH2)qCH3。在一些实施方案中，R²是–CH2CH2OH。在一些实施方案中，R²是–CH2CH2OCH2CH3。在一些实施方案中，R²是–OCH3。在某些实施方案中，R²是–(CH2)qCH3，其中q是1到5的数。在某些实施方案中，q是1。在某些实施方案中，q是2。在某些实施方案中，q是3。在某些实施方案中，q是4。在某些实施方案中，q是5。在某些实施方案中，R²是任选地被-NR^2bR^2c取代的C1-6烷基。在一些实施方案中，R²是被-NR^2bR^2c取代的C1烷基，并且R^2b和R^2c是H或–CH3。在一些实施方案中，R²是被-NR^2bR^2c取代的C1烷基，并且R^2b和R^2c都是–CH3。

在某些实施方案中，R²是-NR^2bR^2c，其中R^2b是H或C1-6烷基；并且其中R^2c是H或C1-6烷基。在一些实施方案中，R²是–NHCH3。在一些实施方案中，R²是–(CH3)2。

在一些实施方案中，R²选自由以下组成的组：3-14元环烷基、3-14元环烯基、3-14元杂环基、6-10元芳基和5-10元杂芳基。在一些实施方案中，其中R²包含环状结构，L²是一个键，而且选自3-14元环烷基、3-14元环烯基、3-14元杂环基、6-10元芳基和5-10元杂芳基的环状结构与Q⁴螺键合。举例来说，包含具有结构的基团，其中R²²是H、C1-6烷基、3-6元环烷基、3-7元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基。

在某些实施方案中，R²是3-14元杂环基，其中所述3-14元杂环基任选地被以下基团取代：任选地被卤素或–OR^2a取代的C1-6烷基、–OH、–OR^2a、氧代、＝N、卤素、–C(O)R^2a、–C(OO)R^2a、–C(O)NR^2bR^2c、–CN、-NR^2bR^2c、3-6元环烷基、3-7元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基；其中R^2a是H、C1-6烷基、C1-6卤烷基、3-7元杂环基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；其中R^2b是H或C1-6烷基；并且其中R^2c是H或C1-6烷基。

在某些实施方案中，R²是3-14元杂环基，其中所述3-14元杂环基任选地被C1-6烷基、–OH、卤素、–C(O)R^2a或–C(O)NR^2bR^2c取代；其中R^2a是C1-6烷基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；其中R^2b是H或C1-6烷基；并且其中R^2c是H或C1-6烷基。

在一些实施方案中，R²选自其各自可以任选地在例如任何碳、氮或硫原子处被取代。

在一些实施方案中，R²选自其中R²²是H、C1-6烷基、3-6元环烷基、3-7元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基。

在一些实施方案中，R²选自

在某些实施方案中，R²是5-10元杂芳基，其中所述5-10元杂芳基任选地被以下基团取代：任选地被卤素或–OR^2a取代的C1-6烷基、–OH、–OR^2a、氧代、卤素、–C(O)R^2a、–C(OO)R^2a、–C(O)NR^2bR^2c、–CN、-NR^2bR^2c、3-6元环烷基、3-7元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基；其中R^2a是H、C1-6烷基、C1-6卤烷基、3-7元杂环基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；其中R^2b是H或C1-6烷基；并且其中R^2c是H或C1-6烷基。

在某些实施方案中，R²是5-10元杂芳基，其中所述5-10元杂芳基任选地被C1-6烷基、–OH、卤素、–C(O)R^2a或–C(O)NR^2bR^2c取代；其中R^2a是C1-6烷基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；其中R^2b是H或C1-6烷基；并且其中R^2c是H或C1-6烷基。

在一些实施方案中，R²选自其各自可以在例如碳原子、氮原子或硫原子处被取代。所述5-10元杂芳基可以是单环或多环的，包括与芳基、杂芳基、环烷基或杂环基环的稠合环。

在一些实施方案中，R²选自

在某些实施方案中，R²是6-10元芳基，其中所述6-10元芳基任选地被以下基团取代：任选地被卤素或–OR^2a取代的C1-6烷基、–OH、–OR^2a、氧代、卤素、–C(O)R^2a、–C(OO)R^2a、–C(O)NR^2bR^2c、–CN、-NR^2bR^2c、3-6元环烷基、3-7元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基；其中R^2a是H、C1-6烷基、C1-6卤烷基、3-7元杂环基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；其中R^2b是H或C1-6烷基；并且其中R^2c是H或C1-6烷基。

在某些实施方案中，R²是6-10元芳基，其中所述6-10元芳基任选地被C1-6烷基、–OH、卤素、–C(O)R^2a或–C(O)NR^2bR^2c取代；其中R^2a是C1-6烷基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；其中R^2b是H或C1-6烷基；并且其中R^2c是H或C1-6烷基。

在一些实施方案中，R²是任选地被取代的苯基环。所述苯基环可以包含稠合环，包括与杂芳基、杂环基、和环烷基环的。在一些实施方案中，R²选自

在某些实施方案中，R²是3-14元环烷基，其中所述3-14元环烷基任选地被以下基团取代：任选地被卤素或–OR^2a取代的C1-6烷基、–OH、–OR^2a、氧代、卤素、–C(O)R^2a、–C(OO)R^2a、–C(O)NR^2bR^2c、–CN、-NR^2bR^2c、3-6元环烷基、3-7元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基；其中R^2a是H、C1-6烷基、C1-6卤烷基、3-7元杂环基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；其中R^2b是H或C1-6烷基；并且其中R^2c是H或C1-6烷基。

在某些实施方案中，R²是3-14元环烷基，其中所述3-14元环烷基任选地被C1-6烷基、–OH、卤素、–C(O)R^2a或–C(O)NR^2bR^2c取代；其中R^2a是C1-6烷基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；其中R^2b是H或C1-6烷基；并且其中R^2c是H或C1-6烷基。

在一些实施方案中，R²选自环丙基、环丁基、环戊基和环己基，其各自任选地被取代。所述环烷基可以包含稠合环，包括与芳基(例如6-10元芳基)、杂芳基(例如5-10元杂芳基)、杂芳基(例如3-14元杂环基)和环烷基(例如3-8元环烷基)环的。

在一些实施方案中，R²选自

在某些实施方案中，R²是3-14元环烯基，其中所述3-14元环烯基任选地被以下基团取代：任选地被卤素或–OR^2a取代的C1-6烷基、–OH、–OR^2a、氧代、卤素、–C(O)R^2a、–C(OO)R^2a、–C(O)NR^2bR^2c、–CN、-NR^2bR^2c、3-6元环烷基、3-7元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基；其中R^2a是H、C1-6烷基、C1-6卤烷基、3-7元杂环基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；其中R^2b是H或C1-6烷基；并且其中R^2c是H或C1-6烷基。

在某些实施方案中，R²是3-14元环烯基，其中所述3-14元环烯基任选地被C1-6烷基、–OH、卤素、–C(O)R^2a或–C(O)NR^2bR^2c取代；其中R^2a是C1-6烷基或–(CH2)rOCH3，其中r是1、2或3；其中R^2b是H或C1-6烷基；并且其中R^2c是H或C1-6烷基。

在某些实施方案中，L²是一个键并且R²是H。

在一些实施方案中，R³和R⁴独立地为H或任选地被卤代或-OH取代的C1-6烷基；其中R³和R⁴中至少一个是H，或其中R³和R⁴与它们连接的原子一起组合形成3-6元环烷基。

在一些实施方案中，R³和R⁴独立地选自由H和C1-6烷基组成的组；其中R³和R⁴中至少一个不是H；或R³和R⁴与它们连接的原子一起组合形成3-6元环烷基。

在某些实施方案中，R³是H。在某些实施方案中，R³是C1-6烷基，如C1烷基、C2烷基、C3烷基、C4烷基、C5烷基或C6烷基。

在某些实施方案中，R⁴是H。在某些实施方案中，R⁴是C1-6烷基，如C1烷基、C2烷基、C3烷基、C4烷基、C5烷基或C6烷基。

在某些实施方案中，R³是H并且R⁴是C1-6烷基，如C1烷基、C2烷基、C3烷基、C4烷基、C5烷基或C6烷基。

在某些实施方案中，R³和R⁴与它们连接的原子一起组合形成3-6元环烷基，如3、4、5或6元环烷基。

在一些实施方案中，任两个相邻的R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹形成3-14元稠合环或3-10元稠合环或3-6元稠合环。换言之，在一些实施方案中，A是含有18个以下环原子、14个以下环原子或10个以下环原子的稠合双环基团。所述稠合环可以是3-8元环烷基、4-8元环烯基、3-14元杂环基或3-8元杂芳基。在一些实施方案中，所述双环任选地被选组以下的一至三个取代基取代：任选地被–OH取代的C1-6烷基、–OH、卤素、–NO2、氧代、–CN、-R¹⁰、–OR¹⁰、–NR¹¹R¹²、-SR¹⁰、–S(O)2NR¹¹R¹²、–S(O)2R¹⁰、–NR¹⁰S(O)2NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)2R¹¹、–S(O)NR¹¹R¹²、–S(O)R¹⁰、–NR¹⁰S(O)NR¹¹R¹²、–NR¹⁰S(O)R¹¹、3-14元杂环基、6-10元芳基或5-10元杂芳基。

在一些实施方案中，R¹⁰、R¹¹和R¹²在每次出现时独立地选自H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基、3-14元杂环基、–OR¹³、–SR¹³、卤素、–NR¹³R¹⁴、–NO2和–CN。

在一些实施方案中，R¹³和R¹⁴在每次出现时独立地选自H、D、C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基和3-14元杂环基，其中各个C1-6烷基、C2-6烯基、4-8元环烯基、C2-6炔基、3-8元环烷基和3-14元杂环基独立地任选地被–OH、–SH、–NH2、–NO2或–CN取代。

在某些实施方案中，R5、R6、R7、R8和R9中一至三个是任选地被卤素取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹中一至三个是CF3。在某些实施方案中，R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹中一至三个是CHF2。

在某些实施方案中，R5、R6、R7、R8和R9中一至三个是任选地被卤素或–OH取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R5、R6、R7、R8和R9中一至三个是任选地被氟和–OH取代的C1-6烷基。

在某些实施方案中，R5、R6、R7、R8和R9中一至三个是卤素，并且R5、R6、R7、R8和R9中一至三个是任选地被卤素取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R5、R6、R7、R8和R9中一至三个是氟，并且R5、R6、R7、R8和R9中一至三个是任选地被氟取代的C1-6烷基。

在某些实施方案中，R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹中一至三个是–NH2。

在某些实施方案中，R5、R6、R7、R8和R9之一是–NH2；并且R5、R6、R7、R8和R9之一是任选地被卤素取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹之一是–NH2；并且R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹之一是CF3。

在一些实施方案中，A选自：

在一些实施方案中，式(I-a)或式(V-a)化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、立体异构体或互变异构体具有以下特征中的一个、两个、三个或更多个：

a)选自由以下组成的组：其中1是A环与氮原子的连接点；

b)R³是H并且R⁴是C1-6烷基；

c)L²是一个键或–C(O)–；

d)R²是任选地取代的(例如3-8元环烷基)、任选地取代的环烯基(例如4-8元环烯基)或任选地取代的杂环基(例如3-14元杂环基)。

在一些实施方案中，式(V-a)化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、立体异构体或互变异构体具有以下特征中的一个、两个、三个或更多个：

a)选自由以下组成的组：其中1是A环与氮原子的连接点；

b)R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹中一至三个是C1-6烷基，其中所述烷基任选地被一个或多个卤素原子取代；

c)R³是H并且R⁴是C1-6烷基；

d)L²是一个键或–C(O)–；

e)R²是任选地取代的环烷基(例如3-8元环烷基)、任选地取代的环烯基(例如4-8元环烯基)或任选地取代的杂环基(例如3-14元杂环基)。

本发明提供了式(I-a)化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，即

其中A、L²、Q¹、Q²、Q³、Q⁴、Q⁵、R¹、R²、m和n如上文所定义。

本发明提供了式(V-a)化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体，即

其中L²、Q¹、Q²、Q³、Q⁴、Q⁵、R¹、R²、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、m和n如上文所定义。

本发明提供了一种化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物、立体异构体和互变异构体，其选自由表A的化合物组成的组：

表A.

本发明提供了一种化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物、立体异构体和互变异构体，其选自由合集1的化合物组成的组：

合集1：本发明的某些化合物

本发明提供了一种化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物、立体异构体和互变异构体，其选自由合集2的化合物组成的组：

合集2：本发明的某些化合物

本发明提供了一种化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物、立体异构体和互变异构体，其选自由合集3的化合物组成的组：

合集3：本发明的某些化合物

合成所公开的化合物的方法

本发明化合物可以通过多种方法，包括标准化学反应来制造。以下提供的方案中描绘了合适的合成途径。

可以通过部分如以下合成方案和实施例所阐述的有机合成技术中已知的方法来制备具有本文描述的任何化学式的化合物。在以下描述的方案中，应当充分理解，在必要时根据一般原理或化学性质采用敏感性或反应性基团的保护基。根据标准有机合成方法(T.W.Greene和P.G.M.Wuts,“Protective Groups in Organic Synthesis”,第三版,Wiley,New York 1999)来操纵保护基。在化合物合成的适宜阶段使用对本领域技术人员显而易知的方法来去除这些基团。选择方法以及它们的执行反应条件和顺序应当符合具有本文公开的任何化学式的化合物的制备。

本领域技术人员应当认识到任何本发明化合物中是否存在立体中心。因此，本发明包括两种可能的立体异构体(除非在合成中规定)，并且不仅包括外消旋化合物而且还包括个别镜像异构体和/或非镜像异构体。当需要呈单个镜像异构体或非镜像异构体形式的化合物时，可以通过立体特异性合成或通过拆分最终产物或任何适宜中间物来获得。可以通过本领域中已知的任何合适的方法来实现最终产物、中间物或起始物质的拆分。参见例如“Stereochemistry of Organic Compounds”,E.L.Eliel,S.H.Wilen和L.N.Mander(Wiley-lnterscience,1994)。

化合物的制备

本文描述的化合物可以由市售起始物质制造或者使用已知的有机、无机和/或酶催工艺合成。

可以用有机合成领域的技术人员众所周知的许多方式来制备本发明化合物。举例来说，可以使用以下描述的方法连同合成有机化学领域已知的合成方法或如本领域技术人员所了解的其变化方案来合成本发明化合物。这些方法包括但不限于以下所描述的那些方法。

流程1.4-(苯甲基氨基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺的一般合成

4-(苯甲基氨基)-2-氯-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺的一般合成概述于流程1中。可以在有机碱(例如DIEA)存在下使2,4-二氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶或类似的被适当取代的卤化杂环与取代的氨基甲酰氯偶合。然后可以使所得脲中间物与取代的苯甲胺偶合，得到5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺。可能需要额外的脱保护和/或官能化步骤来产生最终化合物。

替代地，可以在碱存在下由与苯甲胺偶合的2-氯-4-烷基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶或类似的被适当取代的卤化杂环合成适当保护的4-(苯甲基氨基)-2-烷基-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺，然后脱保护。然后在有机碱(例如DIEA)存在下与适当取代的氨基甲酰氯偶合，从而形成脲。可能需要额外的脱保护和/或官能化步骤以产生最终化合物。

流程2.1-(4-(苯甲基氨基)-2-氯-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-酰胺的一般合成

1-(4-(苯甲基氨基)-2-氯-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-酰胺的一般合成概述于流程2中。可以在偶合剂(例如T3P)存在下使2,4-二氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶或类似的被适当取代的卤化杂环与取代的羧酸偶合。然后可以使所得酰胺中间物与取代的苯甲胺偶联，得到5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基-酰胺。可能需要额外的脱保护和/或官能化步骤以产生最终化合物。

替代地，可以在有机碱(例如DIEA)存在下由与取代的羧酰氯偶合的2,4-二氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶或类似的被适当取代的卤化杂环合成1-(4-(苯甲基氨基)-2-氯-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-酰胺。然后可以使所得酰胺中间物与取代的苯甲胺偶合，得到5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基-酰胺。可能需要额外的脱保护和/或官能化步骤以产生最终化合物。

流程3.N-苯甲基-2-氯-6-烷基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的一般合成。

N-苯甲基-2-氯-6-烷基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的一般合成概述于流程3中。可以在还原剂(例如NaBH(OAc)3)存在下使2,4-二氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶或类似的被适当取代的卤化杂环与取代的酮偶合。然后可以使所得烷基中间物与取代的苯甲胺偶合，得到N-苯甲基-6-烷基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺。可能需要额外的脱保护和/或官能化步骤以产生最终化合物。

本发明提供了一种式Int-I化合物：

及其盐、前药、溶剂合物、水合物、互变异构体和异构体，其中：

X¹是F、Cl、Br或I；

X²是F、Cl、Br或I。

Q¹和Q²独立地为CH或N；

各个Q³和Q⁵独立地为C(R^QC)2、NR^QN、CO、O或SO2，其中各个R^QC独立地为H、F、Cl、Br或芳基，并且其中各个R^QN独立地为H、C1-6烷基或芳基；

Q⁴是CH或N；

其中Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵中至少一个是N、NR^QN、O或SO2；

m是0、1、2或3；

n是0、1、2或3；

其中当m是0时，则n不是0；

L²是一个键、–C(O)–、–C(O)O–、–C(O)NH(CH2)o–、–S(O)2–、–C(O)(CH2)p–、–(CH2)p–或–O–；其中o是0、1或2；并且其中p是1至6的数；

本发明提供了一种式Int-Ia化合物：

及其盐、前药、溶剂合物、水合物、互变异构体和异构体，其中：

Q¹和Q²独立地为CH或N；

各个Q³和Q⁵独立地为C(R^QC)2、NR^QN、CO、O或SO2，其中各个R^QC独立地为H、F、Cl、Br或芳基，并且其中各个R^QN独立地为H、C1-6烷基或芳基；

Q⁴是CH或N；

其中Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵中至少一个是N、NR^QN、O或SO2；

m是0、1、2或3；

n是0、1、2或3；

其中当m是0时，则n不是0；

L²是一个键、–C(O)–、–C(O)O–、–C(O)NH(CH2)o–、–S(O)2–、–C(O)(CH2)p–、–(CH2)p–或–O–；其中o是0、1或2；并且其中p是1至6的数；

R²是H、-(CH2)qCH3、环烷基、环烯基、杂环基、芳基、杂芳基；其中q是1至5的数；其中各个环烷基、环烯基、杂环基、芳基或杂芳基任选地被一个或多个C1-6烷基、–OH、卤素、–C(O)R^2a或–C(O)NR^2bR^2c取代；其中R^2a是C1-6烷基或–(CH2)rOCH3。

本发明提供了一种化合物及其盐、溶剂合物、立体异构体和互变异构体，其选自由以下组成的组：

本发明提供了一种化合物及其盐、溶剂合物、立体异构体和互变异构体，其具有下式：

治疗用途

由于本发明化合物的生物性质，本发明化合物、其互变异构体、外消旋物、镜像异构体、非镜像异构体、其混合物以及所有上述形式的盐都可能适用于治疗以过度或异常细胞增殖为特征的疾病，如癌症。

举例来说，可以用本发明化合物治疗以下癌症、肿瘤和其他增殖性疾病，但不限于此：

头颈部癌症/肿瘤/癌瘤：例如鼻腔、鼻旁窦、鼻咽、口腔(包括唇、齿龈、牙槽脊、磨牙后三角、口底、舌、硬腭、颊粘膜)、口咽(包括舌根、扁桃腺、扁桃体、软腭、扁桃窦、咽壁)、中耳、喉(包括声门上、声门、声门下、声带)、下咽、唾液腺(包括小唾液腺)的癌症/肿瘤/癌瘤；眼内癌(例如葡萄膜黑素瘤)以及眼眶和附件癌；

肺癌症/肿瘤/癌瘤：例如非小细胞肺癌(NSCLC)(鳞状细胞癌、梭形细胞癌、腺癌、大细胞癌、透明细胞癌、细支气管癌)、小细胞肺癌(SCLC)(燕麦细胞癌、中间细胞癌、混合型燕麦细胞癌)；

纵隔赘瘤：例如神经性肿瘤(包括神经纤维瘤、神经鞘瘤、恶性许旺氏细胞瘤(malignant schwannoma)、神经肉瘤、节细胞成神经细胞瘤、节细胞神经瘤、成神经细胞瘤、嗜铬细胞瘤、副神经节瘤)、生殖细胞肿瘤(包括精原细胞瘤、畸胎瘤、非精原细胞瘤)、胸腺肿瘤(包括胸腺瘤、胸腺脂肪瘤、胸腺癌瘤、胸腺类癌)、间质肿瘤(包括纤维瘤、纤维肉瘤、脂肪瘤、脂肪肉瘤、粘液瘤、间皮瘤、平滑肌瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、黄色肉芽肿、间叶瘤、血管瘤、血管内皮瘤、血管外皮瘤、淋巴管瘤、淋巴管平滑肌瘤、淋巴管肌瘤)、星形细胞瘤(大脑、小脑、弥漫性、纤维性、退行性、毛细胞型、原浆性、肥胖细胞型(gemistocytary))、成神经胶质细胞瘤、神经胶质瘤、少突神经胶质瘤、少突星形细胞瘤、室管膜瘤、成室管膜细胞瘤、脉络丛瘤、成髓细胞瘤、脑膜瘤、许旺氏细胞瘤、成血管细胞瘤、血管瘤、血管外皮瘤、神经瘤、神经节细胞瘤、成神经细胞瘤、成视网膜细胞瘤、神经鞘瘤(例如听神经鞘瘤)、脊轴肿瘤；

胃肠(GI)道癌症/肿瘤/癌瘤：例如食道、胃(胃癌)、胰腺、肝脏和胆道系统(包括肝细胞癌(HCC)，例如儿童期HCC、纤维板层型HCC、混合型HCC、梭状细胞型HCC、透明细胞型HCC、巨细胞型HCC、癌肉瘤型HCC、硬化性HCC；成肝细胞瘤；胆管癌；胆管细胞癌；肝囊腺癌；血管肉瘤、血管内皮瘤、平滑肌肉瘤、恶性许旺氏细胞瘤、纤维肉瘤、克拉茨金瘤(Klatskin tumor))、胆囊、肝外胆管、小肠(包括十二指肠、空肠、回肠)、大肠(包括盲肠、结肠、直肠、肛门；结肠直肠癌、胃肠基质肿瘤(GIST))、生殖泌尿系统(包括肾脏，例如肾盂、肾细胞癌(RCC)、肾母细胞瘤(威尔姆斯氏瘤(Wilms'tumor))、肾上腺样瘤、格拉维茨瘤(Grawitz tumor)；输尿管；膀胱，例如脐尿管癌、尿路上皮癌；尿道，例如远端、球部膜部、前列腺；前列腺(雄激素依赖性、非雄激素依赖性、去势抗性、非激素依赖性、激素难治性)、阴茎)的肿瘤/癌瘤/癌症；

睪丸癌症/肿瘤/癌瘤：例如精原细胞瘤、非精原细胞瘤；

妇科癌症/肿瘤/癌瘤：例如卵巢、输卵管、腹膜、宫颈、外阴、阴道、子宫体(包括子宫内膜、基底)的肿瘤/癌瘤/癌症；

乳房癌症/肿瘤/癌瘤：例如乳腺癌(浸润性乳腺管、胶状、乳小叶侵袭性、管状、腺样囊性、乳头状、髓样、粘液性)、激素受体阳性乳腺癌(雌激素受体阳性乳腺癌、孕酮受体阳性乳腺癌)、HER2阳性乳腺癌、三阴性乳腺癌、乳腺佩吉特氏病(Paget's disease)；

内分泌系统癌症/肿瘤/癌瘤：例如内分泌腺、甲状腺(甲状腺癌/肿瘤；乳头状、滤泡性、退行性、髓样)、副甲状腺(副甲状腺癌/肿瘤)、肾上腺皮质(肾上腺皮层癌/肿瘤)、垂体腺(包括泌乳素瘤、颅咽管瘤)、胸腺、肾上腺、松果腺、颈动脉体、胰岛细胞瘤、副神经节、胰腺内分泌肿瘤(PET；非功能性PET、PPoma、胃泌素瘤、胰岛瘤、VIP瘤、升糖素瘤、体制素瘤、GRF瘤、ACTH瘤)、类癌瘤肿瘤的肿瘤/癌瘤/癌症；

软组织肉瘤：例如纤维肉瘤、纤维组织细胞瘤、脂肪肉瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、血管肉瘤、淋巴管肉瘤、卡波西氏肉瘤(Kaposi's sarcoma)、血管球瘤、血管外皮瘤、滑膜肉瘤、腱鞘巨细胞瘤、胸膜和腹膜孤立性纤维瘤、弥漫性间皮瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、颗粒细胞瘤、透明细胞肉瘤、黑素细胞许旺氏细胞瘤、神经丛肉瘤、成神经细胞瘤、节细胞成神经细胞瘤、神经上皮瘤、骨外尤因氏肉瘤(Ewing's sarcoma)、副神经节瘤、骨外软骨肉瘤、骨外骨肉瘤、间叶瘤、肺泡软部肉瘤、上皮样肉瘤、肾外横纹肌样瘤、促结缔组织增生性小细胞瘤；

骨肉瘤：例如骨髓瘤、网状细胞肉瘤、软骨肉瘤(包括中央型、外周型、透明细胞性、间叶性软骨肉瘤)、骨肉瘤(包括骨旁型、骨膜型、高级表面型、小细胞型、放射诱导型骨肉瘤、佩吉特氏肉瘤)、尤因氏瘤、恶性巨细胞瘤、釉质瘤、(纤维)组织细胞瘤、纤维肉瘤、脊索瘤、小圆细胞肉瘤、血管内皮瘤、血管外皮瘤、骨软骨瘤、骨样骨瘤、成骨细胞瘤、嗜酸性肉芽肿、成软骨细胞瘤；

间皮瘤：例如胸膜间皮瘤、腹膜间皮瘤；

皮肤癌：例如基底细胞癌、鳞状细胞癌、莫克尔氏细胞(Merkel's cell)癌、黑素瘤(包括皮肤、浅表扩散性、恶性雀斑样、肢端痣样型、结节性、眼内黑素瘤)、光化性角化病、眼睑癌；

外周和中枢神经系统以及脑赘瘤：例如，星形细胞瘤(大脑、小脑、弥漫性、纤维性、退行性、毛细胞型、原浆性、肥胖细胞型)、成神经胶质细胞瘤、神经胶质瘤、少突神经胶质瘤、少突星形细胞瘤、室管膜瘤、成室管膜细胞瘤、脉络丛瘤、成髓细胞瘤、脑膜瘤、许旺氏细胞瘤、成血管细胞瘤、血管瘤、血管外皮瘤、神经瘤、神经节细胞瘤、成神经细胞瘤、成视网膜细胞瘤、神经鞘瘤(例如听神经鞘瘤)、脊轴肿瘤、神经性肿瘤(包括神经纤维瘤、神经鞘瘤、恶性许旺氏细胞瘤、神经肉瘤、节细胞成神经细胞瘤、节细胞神经瘤、成神经细胞瘤、嗜铬细胞瘤、副神经节瘤)、生殖细胞肿瘤(包括精原细胞瘤、畸胎瘤、非精原细胞瘤)、胸腺肿瘤(包括胸腺瘤、胸腺脂肪瘤、胸腺癌瘤、胸腺类癌)、间质肿瘤(包括纤维瘤、纤维肉瘤、脂肪瘤、脂肪肉瘤、粘液瘤、间皮瘤、平滑肌瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、黄色肉芽肿、间叶瘤、血管瘤、血管内皮瘤、血管外皮瘤、淋巴管瘤、淋巴管平滑肌瘤、淋巴管肌瘤)；

淋巴瘤和白血病：例如B细胞非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(包括小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、淋巴浆细胞性淋巴瘤(LPL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、滤泡性淋巴瘤(FL)、弥漫性大细胞淋巴瘤(DLCL)、伯基特氏淋巴瘤(Burkitt's lymphoma)(BL))、伯基特氏白血病、T细胞非霍奇金氏淋巴瘤(包括退行性大细胞淋巴瘤(ALCL)、成人T细胞白血病/淋巴瘤(ATLL)、皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)、外周T细胞淋巴瘤(PTCL))、成淋巴细胞性T细胞淋巴瘤(T-LBL)、成人T细胞淋巴瘤、成淋巴细胞性B细胞淋巴瘤(B-LBL)、免疫细胞瘤、慢性B细胞淋巴细胞性白血病(B-CLL)、慢性T细胞淋巴细胞性白血病(T-CLL)、B细胞小淋巴细胞性淋巴瘤(B-SLL)、皮肤T细胞淋巴瘤(CTLC)、原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)、免疫母细胞瘤、霍奇金氏病(HD)(包括结节性淋巴细胞优势型HD(NLPHD)、结节性硬化HD(NSHD)、混合细胞型HD(MCHD)、富淋巴细胞型典型HD、淋巴细胞耗竭型HD(LDHD))、大颗粒淋巴细胞性白血病(LGL)、慢性骨髓性白血病(CML)、急性骨髓性/骨髓性白血病(AML)、急性淋巴/成淋巴细胞性白血病(ALL)、急性前骨髓细胞性白血病(APL)、慢性淋巴细胞/淋巴性白血病(CLL)、前淋巴细胞性白血病(PLL)、毛细胞白血病、慢性骨髓性/骨髓性白血病(CML)、骨髓瘤、浆细胞瘤、多发性骨髓瘤(MM)、浆细胞瘤、骨髓发育不良综合征(MDS)、慢性骨髓单核细胞性白血病(CMML)、青少年骨髓单核细胞性白血病(JMML)、不明谱系急性白血病、骨髓增殖性赘瘤、母细胞性浆细胞样树突状细胞赘瘤、早期前体T细胞白血病、自然杀伤细胞白血病/淋巴瘤、骨髓性/淋巴性赘瘤伴嗜酸性粒细胞增多症、骨髓肉瘤、瞬时异常骨髓细胞生成；以及

原发部位不明型癌症(CUP)。

以上提到的以其在体内的具体位置/起点为特征的所有癌症/肿瘤/癌瘤都意在包括原发性肿瘤和由其衍生的转移性肿瘤。

以上提到的所有癌症/肿瘤/癌瘤都可以通过其组织病理学分类进行进一步区分：

上皮癌，例如鳞状细胞癌(SCC)(原位癌、浅表侵袭性、疣状癌、假性肉瘤、退行性、移行细胞、淋巴上皮)、腺癌(AC)(分化良好型、粘液性、乳头状、多形性巨细胞、导管、小细胞、戒环细胞、梭状细胞、透明细胞、燕麦细胞、胶状、腺鳞状细胞、粘液表皮样、腺样囊性)、粘液性囊腺癌、腺泡细胞癌、大细胞癌、小细胞癌、神经内分泌肿瘤(小细胞癌、副神经节瘤、类癌)；嗜酸性癌瘤；以及

非上皮和间质癌，例如肉瘤(纤维肉瘤、软骨肉瘤、横纹肌肉瘤、平滑肌肉瘤、血管肉瘤、巨细胞肉瘤、淋巴肉瘤、纤维组织细胞瘤、脂肪肉瘤、血管肉瘤、淋巴管肉瘤、神经纤维肉瘤)、淋巴瘤、黑素瘤、生殖细胞肿瘤、血液赘瘤、混合型和未分化癌。

本发明化合物可用于一线、二线或任何其他线治疗情形下的治疗方案中。

本发明化合物可用于预防、短期或长期治疗上述疾病，任选地还与放射疗法和/或手术和/或其他化合物组合使用。

当然，上文还包括本发明化合物在通过向有需要的患者施用治疗有效剂量来治疗上述疾病的各种方法中的用途，以及这些化合物用于制造供治疗此类疾病用的药物的用途，以及包括此类本发明化合物的药物组合物，以及包括此类本发明化合物的药物的制备和/或制造等等。

使用所公开的化合物的其他方法

本发明一方面涉及一种在有需要的受试者中抑制SOS1的方法，所述方法包括向所述受试者施用本发明的SOS1抑制剂或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体。

本发明另一方面涉及一种治疗或预防疾病的方法，所述治疗或预防是通过调节SOS1与RAS家族蛋白和/或RAC1的相互作用来实现或为特征。所述方法包括向需要治疗与SOS1调节相关的疾病或病症的患者施用有效量的具有本文公开的任何化学式的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体。

在某些实施方案中，提供了抑制细胞中SOS1与RAS家族蛋白的相互作用或抑制细胞中SOS1与RAC1的相互作用的方法，所述方法包括向所述细胞施用具有本文公开的任何化学式的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体，以及药学上可接受的载体。

在某些实施方案中，提供了一种在有需要的受试者中治疗或预防癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的具有本文公开的任何化学式的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、互变异构体或异构体。

在某些实施方案中，所述疾病可以是但不限于癌症。在某些实施方案中，所述疾病或癌症选自由以下组成的组：胰腺癌、肺癌、结肠直肠癌、胆管癌、多发性骨髓瘤、黑素瘤、子宫癌、子宫内膜癌、甲状腺癌、急性骨髓性白血病、青少年骨髓单核细胞性白血病(JMML)、急性成淋巴细胞性白血病/淋巴瘤、淋巴瘤、中枢和外周神经系统肿瘤、上皮和非上皮肿瘤和间质肿瘤、膀胱癌、尿路上皮癌、胃癌、宫颈癌、头颈部鳞状细胞癌、弥漫性大B细胞淋巴瘤、食道癌、慢性淋巴细胞性白血病、肝细胞癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、成神经胶质细胞瘤、肾癌和肉瘤。

在某些实施方案中，所述疾病可以是但不限于癌症。在某些实施方案中，所述疾病或癌症选自由以下组成的组：胰腺癌、肺癌、结肠直肠癌、胆管癌、多发性骨髓瘤、黑素瘤、子宫癌、子宫内膜癌、甲状腺癌、急性骨髓性白血病、膀胱癌、尿路上皮癌、胃癌、宫颈癌、头颈部鳞状细胞癌、弥漫性大B细胞淋巴瘤、食道癌、慢性淋巴细胞性白血病、肝细胞癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、成神经胶质细胞瘤、肾癌和肉瘤。

在某些实施方案中，所述疾病可以是但不限于RAS蛋白家族病变。在某些实施方案中，所述RAS蛋白家族病变选自由以下组成的组：1型神经纤维瘤病(NF1)、努南氏综合征(NS)、努南氏综合征伴随多发性雀斑(NSML)、毛细管畸形-动静脉畸形综合征(CM-AVM)、科斯特罗综合征(Costello Syndrome，CS)、心脏-面部-皮肤综合征(CFC)、雷吉士综合征(Legius Syndrome)和遗传性齿龈纤维瘤病。

本发明另一方面涉及一种抑制SOS1的方法。所述方法包括向有需要的患者施用有效量的具有本文公开的任何化学式的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、前药或互变异构体。

本发明涉及能够调节(例如抑制)SOS1的活性的组合物。本发明还涉及此类化合物的治疗用途。

所公开的化合物可以以有效量施用以治疗或预防病症和/或预防其在受试者中发展。

本发明另一方面涉及一种具有本文公开的任何化学式的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物、前药、立体异构体或互变异构体，用于治疗或预防受调节SOS1与RAS家族蛋白和/或RAC1的相互作用影响的疾病。本发明另一方面涉及一种具有本文公开的任何化学式的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物、前药、立体异构体或互变异构体，用于治疗或预防疾病，所述治疗或预防是以抑制SOS1与RAS家族蛋白的相互作用和/或SOS1与RAC1的相互作用为特征。

本发明另一方面涉及一种具有本文公开的任何化学式的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物、前药、立体异构体或互变异构体，用于治疗或预防疾病，其中所述治疗或预防是通过抑制SOS1与RAS家族蛋白的相互作用或通过抑制SOS1与RA的相互作用来实现或为特征。

本发明另一方面涉及一种具有本文公开的任何化学式的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物、前药、立体异构体或互变异构体，用于抑制hSOS1与H-RAS或N-RAS或K-RAS(包括其临床已知突变)结合，并且抑制由hSOS1在以20μM或更低浓度存在时催化(但其在20μM或更低浓度下对EGFR激酶基本上无活性)的核苷酸交换反应，从而用于制备供治疗或预防过度增殖性病症用的药物。

本发明另一方面涉及一种具有本文公开的任何化学式的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物、前药、立体异构体或互变异构体，用于制造供抑制hSOS1特异性结合至K-RAS G12C蛋白或如本文描述的另一种Ras突变体用的药物，并且抑制由hSOS1在以20μM或更低浓度存在时催化(但其在20μM或更低浓度下对EGFR激酶基本上无活性)的核苷酸交换反应，从而用于制备供治疗或预防过度增殖性病症用的药物。

在另一方面，本发明涉及具有本文公开的任何化学式的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物、前药、立体异构体或互变异构体的用途，用于制造供治疗或预防疾病用的药物。

所公开的化合物的施用可以通过治疗剂的任何施用模式来实现。这些模式包括全身或局部施用，如口服、经鼻、经肠胃外、经静脉内、经皮、皮下、阴道、口腔、直肠或局部施用模式。同样，它们还可以呈静脉内(药团和输注)、腹膜内、皮下或肌肉内形式施用，并且全都使用医药领域技术人员众所周知的形式。

取决于预定施用模式，所公开的化合物或药物组合物可以呈固体、半固体或液体剂型，举例来说，如可注射剂、片剂、栓剂、丸剂、限时释放胶囊、酏剂、酊剂、乳液、糖浆、粉剂、液体、悬浮液等等，有时呈单位剂量形式并且符合常规医药实践。

说明性药物组合物是片剂和明胶胶囊，其包含本发明化合物和药学上可接受的载体，如：a)稀释剂，例如纯化水、三酸甘油酯油(如氢化或部分氢化植物油或其混合物)、玉米油、橄榄油、葵花油、红花油、鱼油(如EPA或DHA)或其酯或三酸甘油酯或其混合物、ω-3脂肪酸或其衍生物、乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素、钠、糖精、葡萄糖和/或甘氨酸；b)润滑剂，例如硅石、滑石、硬脂酸、其镁或钙盐、油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠和/或聚乙二醇；对于片剂，还有：c)粘合剂，例如硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、黄芪胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、碳酸镁、天然糖(如葡萄糖或β-乳糖)、玉米甜味剂、天然和合成树胶(如阿拉伯胶、黄芪胶或海藻酸钠)、蜡和/或聚乙烯吡咯烷酮(若需要)；d)崩解剂，例如淀粉、琼脂、甲基纤维素、膨润土、黄原胶、海藻酸或其钠盐或泡腾混合物；e)吸附剂、着色剂、调味剂和甜味剂；f)乳化剂或分散剂，如Tween 80、Labrasol、HPMC、DOSS、caproyl 909、labrafac、labrafil、peceol、transcutol、capmul MCM、capmul PG-12、captex 355、gelucire、维生素E TGPS或其他可接受的乳化剂；和/或g)化合物吸收增强剂，如环糊精、羟丙基-环糊精、PEG400、PEG200。

举例来说，可以通过溶解、分散等来制备液体(特别是可注射的)组合物。举例来说，将所公开的化合物溶解在药学上可接受的溶剂中或与之混合，如水、生理盐水、葡萄糖水溶液、甘油、乙醇等等，从而形成可注射等渗溶液或悬浮液。可以使用如白蛋白、乳糜微粒或血清蛋白等白质来溶解所公开的化合物。

所公开的化合物还可以使用如丙二醇等聚二醇作为载体配制为可以由脂肪乳液或悬浮液制备的栓剂。

所公开的化合物还可以呈如小单层囊泡、大单层囊泡和多层囊泡等脂质体递送系统形式施用。脂质体可以由多种含有胆固醇、硬脂胺或磷脂酰胆碱的磷脂形成。在一些实施方案中，使脂质组分的膜与药物的水溶液发生水合以形成囊封药物的脂质层，如例如美国专利号5,262,564中所描述，该专利的内容以引用的方式并入本文。

所公开的化合物还可以通过使用所公开的化合物与其偶合的单克隆抗体作为个别载体进行递送。所公开的化合物还可以与作为可靶向药物载体的可溶性聚合物偶合。此类聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟丙基甲基丙烯酰胺-苯酚、聚羟乙基天冬酰胺苯酚或棕榈酰残基取代的聚氧化乙烯聚赖氨酸。此外，所公开的化合物可以与一类可用于实现药物控制释放的生物可降解聚合物(例如，聚乳酸、聚ε己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶交联或两性嵌段共聚物)偶合。在一个实施方案中，所公开的化合物未与聚合物(例如聚羧酸聚合物或聚丙烯酸酯)共价结合。

肠胃外可注射施用一般用于皮下、肌肉内或静脉内注射和输注。可注射剂可以制备为常规形式，呈液体溶液或悬浮液或者适合在注射前溶解在液体中的固体形式。

本发明另一方面涉及一种药物组合物，包含本发明化合物和药学上可接受的载体。药学上可接受的载体还可以包括赋形剂、稀释剂或表面活性剂。

可以分别根据常规混合、粒化或涂覆方法来制备组合物，而且以重量或体积计，本发明药物组合物可以含有约0.1％至约99％、约5％至约90％或约1％至约20％所公开的化合物。

根据多种因素来选择利用所公开的化合物的给药方案，包括患者的类型、物种、年龄、体重、性别和医学疾患；欲治疗的疾患的严重程度；施用途径；患者的肾或肝功能；以及所采用的特定公开化合物。本领域的普通医师或兽医可以容易地确定并指定预防、对抗或延滞疾患进展所需的药物有效量。

在治疗疾患有需要时，所公开的化合物用于所指出的效果时的有效剂量的量在约0.5mg至约5000mg所公开的化合物的范围内。供体内或体外使用的组合物可以含有约0.5、5、20、50、75、100、150、250、500、750、1000、1250、2500、3500或5000mg所公开的化合物，或者在剂量清单中的一个量至另一个量的范围内。在一个实施方案中，所述组合物呈可能刻痕的片剂形式。

组合疗法

本发明方法可以包括单独或者与一种或多种其他疗法(例如非药物治疗或治疗剂)组合使用的本发明化合物。组合疗法可以例如组合两种疗法或可以组合三种疗法(例如三种治疗剂的三联疗法)或更多种疗法。一种或多种其他疗法(例如非药物治疗或治疗剂)的剂量相对于单独施用时的标准剂量可以降低。举例来说，剂量可以根据药物组合和排列凭经验确定，或可以通过等辐射分析推断(例如Black等,Neurology 65:S3-S6(2005))。

本发明化合物可以在一种或多种此类其他疗法之前、之后或同时施用。当组合时，本发明化合物的剂量和一种或多种其他疗法(例如非药物治疗或治疗剂)的剂量提供了治疗效果(例如协同或累加治疗效果)。本发明化合物和其他疗法(如抗癌剂)可以共同(如在单一药物组合物中)或分开施用，而且当分开施用时，这可能同时或顺序发生。此类顺序施用可以在时间上相隔较近或较远。

在一些实施方案中，所述其他疗法是施用副作用限制剂(例如，希望减轻治疗副作用的发生率或严重程度的剂)。举例来说，在一些实施方案中，本发明化合物还可以与治疗恶心的治疗剂组合使用。可用于治疗恶心的剂的实例包括：屈大麻酚(dronabinol)、格拉司琼(granisetron)、甲氧氯普胺(metoclopramide)、昂丹司琼(ondansetron)和丙氯哌嗪(prochlorperazine)或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，所述一种或多种其他疗法包括非药物治疗(例如手术或放射疗法)。在一些实施方案中，所述一种或多种其他疗法包括治疗剂(例如作为抗血管生成剂、信号转导抑制剂、抗增殖剂、糖解抑制剂或自噬抑制剂的化合物或生物剂)。在一些实施方案中，所述一种或多种其他疗法包括非药物治疗(例如手术或放射疗法)和治疗剂(例如作为抗血管生成剂、信号转导抑制剂、抗增殖剂、糖解抑制剂或自噬抑制剂的化合物或生物剂)。在其他实施方案中，所述一种或多种其他疗法包括两种治疗剂。在其他实施方案中，所述一种或多种其他疗法包括三种治疗剂。在一些实施方案中，所述一种或多种其他疗法包括四种或更多种治疗剂。

非药物疗法

非药物治疗的实例包括但不限于放射疗法、冷冻疗法、高温、手术(例如手术切除肿瘤组织)和T细胞过继性转移(ACT)疗法。

在一些实施方案中，本发明化合物可以用作手术后辅助疗法。在一些实施方案中，本发明化合物可以用作手术前新辅助疗法。

放射疗法可以用于在受试者(例如哺乳动物(例如人))中抑制异常细胞生长或治疗过度增殖性病症，如癌症。用于施用放射疗法的技术在此项技术中是已知的。放射疗法可以通过若干方法之一或诸多方法的组合施用，包括但不限于外射束疗法、内放射疗法、植入物放射、立体定位放射手术、全身放射疗法、放射疗法以及永久性或暂时性间质近接疗法。如本文所使用，术语“近接疗法”是指通过在肿瘤或其他增殖性组织疾病部位处或附近插入体内的空间受限放射性物质递送的放射疗法。该术语希望包括但不限于暴露于放射性同位素(例如At-211、I-131、I-125、Y-90、Re-186、Re-188、Sm-153、Bi-212、P-32和Lu放射性同位素)。用作本发明的细胞调节剂的合适的辐射源包括固体与液体二者。作为非限制性实例，辐射源可以是放射性核素，如I-125、I-131、Yb-169、呈固体源形式的Ir-192、呈固体源形式的I-125或者发出光子、β粒子、γ射线或其他治疗性射线的其他放射性核素。放射性物质还可以是由任何放射性核素溶液(例如I-125或I-131溶液)制成的流体，或者可以使用含有固体放射性核素(如Au-198或Y-90)小颗粒的合适的流体的浆液产生放射性流体。此外，放射性核素可以体现在凝胶或放射性微球体中。

在一些实施方案中，出于杀伤或抑制此类细胞生长的目的，本发明化合物可以致使异常细胞对放射治疗更敏感。因此，本发明还涉及一种使哺乳动物中的异常细胞对放射治疗敏感的方法，所述方法包括向哺乳动物施用一定量的本发明化合物，所述量对使异常细胞对放射治疗敏感有效。这种方法中化合物的量可以根据确定本文所描述的此类化合物的有效量的手段来确定。在一些实施方案中，本发明化合物可以用作放射疗法后的辅助疗法或用作放射疗法前的新辅助疗法。

在一些实施方案中，非药物治疗是T细胞过继性转移(ACT)疗法。在一些实施方案中，T细胞是活性T细胞。T细胞可以经过修饰以表达嵌合抗原受体(CAR)。CAR修饰的T(CAR-T)细胞可以通过本领域中已知的任何方法产生。举例来说，可以通过向T细胞引入编码CAR的合适的表达载体来产生CAR-T细胞。在对T细胞进行扩增和基因修饰前，从受试者获得T细胞源。T细胞可以获自许多来源，包括外周血单核细胞、骨髓、淋巴结组织、脐带血、胸腺组织、来自感染部位的组织、腹水、肋膜积液、脾脏组织和肿瘤。在本发明的某些实施方案中，可以使用本领域中可利用的许多T细胞系。在一些实施方案中，T细胞是自体T细胞。无论在对T细胞进行基因修饰以表达所需蛋白质(例如CAR)之前抑或之后，一般可以使用如例如以下美国专利中描述的方法对T细胞进行激活和扩增：6,352,694；6,534,055；6,905,680；6,692,964；5,858,358；6,887,466；6,905,681；7,144,575；7,067,318；7,172,869；7,232,566；7,175,843；7,572,631；5,883,223；6,905,874；6,797,514；和6,867,041。

治疗剂

治疗剂可以是用于治疗癌症或其相关症状的化合物。

举例来说，治疗剂可以是类固醇。因此，在一些实施方案中，一种或多种其他疗法包括类固醇。合适的类固醇可以包括但不限于21-乙酰氧基孕烯醇酮、阿氯米松(alclometasone)、阿尔孕酮(algestone)、安西奈德(amcinonide)、倍氯米松(beclomethasone)、倍他米松(betamethasone)、布地奈德(budesonide)、氯泼尼松(chloroprednisone)、氯倍他索(clobetasol)、氯可托龙(clocortolone)、氯泼尼醇(cloprednol)、皮质固酮(corticosterone)、可的松(cortisone)、可的伐唑(cortivazol)、地夫可特(deflazacort)、地奈德(desonide)、去羟米松(desoximetasone)、地塞米松(dexamethasone)、双氟拉松(diflorasone)、双氟可龙(diflucortolone)、双氟泼尼酯(difuprednate)、甘草次酸(enoxolone)、氟扎可松(fluazacort)、氟氯奈德(fiucloronide)、氟美他松(flumethasone)、氟尼缩松(flunisolide)、氟西奈德(fluocinolone acetonide)、氟欣诺能(fluocinonide)、氟考丁酯(fluocortin butyl)、氟考龙(fluocortolone)、氟甲松龙(fluorometholone)、醋酸氟培龙(fluperolone acetate)、醋酸氟泼尼定(fluprednidene acetate)、氟泼尼松龙(fluprednisolone)、氟氢缩松(flurandrenolide)、丙酸氟替卡松(fluticasone propionate)、福莫可他(formocortal)、哈西缩松(halcinonide)、丙酸卤倍他索(halobetasol propionate)、卤美他松(halometasone)、氢化可的松(hydrocortisone)、依碳酸氯替泼诺(loteprednol etabonate)、马泼尼酮(mazipredone)、甲羟孕酮(medrysone)、甲泼尼松(meprednisone)、甲基泼尼松龙(methylprednisolone)、糠酸莫美他松(mometasone furoate)、对氟米松(paramethasone)、泼尼卡酯(prednicarbate)、泼尼松龙(prednisolone)、25-二乙基氨基醋酸泼尼松龙、泼尼松龙磷酸钠、泼尼松(prednisone)、戊酸泼尼松龙(prednival)、泼尼立定(prednylidene)、双甲丙酰龙(rimexolone)、替可的松(tixocortol)、曲安西龙(triamcinolone)、曲安奈德(triamcinolone acetonide)、苯曲安奈德(triamcinolone benetonide)、己曲安奈德(triamcinolone hexacetonide)及其盐或衍生物。

可与本发明化合物一起用于组合疗法中的治疗剂的其他实例包括以下专利中描述的化合物：美国专利号6,258,812、6,630,500、6,515,004、6,713,485、5,521,184、5,770,599、5,747,498、5,990,141、6,235,764和8,623,885；以及国际专利申请WO01/37820、WO01/32651、WO02/68406、WO02/66470、WO02/55501、WO04/05279、WO04/07481、WO04/07458、WO04/09784、WO02/59110、WO99/45009、WO00/59509、WO99/61422、WO00/12089和WO00/02871。

治疗剂可以是用于治疗癌症或其相关症状的生物剂(例如细胞介素(例如干扰素或白介素，如IL-2))。在一些实施方案中，生物剂是基于免疫球蛋白的生物剂，例如单克隆抗体(例如人源化抗体、完全人源抗体、Fc融合蛋白或其功能片段)，其使靶标激动以刺激抗癌反应或拮抗对癌症重要的抗原。还包括抗体-药物结合物。

治疗剂可以是检查点抑制剂。在一个实施方案中，检查点抑制剂是抑制抗体(例如单特异性抗体，如单克隆抗体)。抗体可以是例如人源化或完全人源的。在一些实施方案中，检查点抑制剂是融合蛋白，例如Fc受体融合蛋白。在一些实施方案中，检查点抑制剂是与检查点蛋白相互作用的剂，如抗体。在一些实施方案中，检查点抑制剂是与检查点蛋白的配体相互作用的剂，如抗体。在一些实施方案中，检查点抑制剂是CTLA-4抑制剂(例如抑制抗体或小分子抑制剂)(例如抗CTLA-4抗体或融合蛋白)。在一些实施方案中，检查点抑制剂是PD-1抑制剂或拮抗剂(例如抑制抗体或小分子抑制剂)。在一些实施方案中，检查点抑制剂是PDL-1抑制剂或拮抗剂(例如抑制抗体或小分子抑制剂)。在一些实施方案中，检查点抑制剂是PDL-2抑制剂或拮抗剂(例如抑制抗体或Fc融合蛋白或小分子抑制剂)(例如PDL-2/Ig融合蛋白)。在一些实施方案中，检查点抑制剂是B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK 1、CHK2、A2aR、B-7家族配体或其组合的抑制剂或拮抗剂(例如抑制抗体或小分子抑制剂)。在一些实施方案中，检查点抑制剂是派姆单抗(pembrolizumab)、纳武单抗(nivolumab)、PDR001(NVS)、REGN2810(Sanofi/Regeneron)；PD-L1抗体，如阿维鲁单抗(avelumab)、德瓦鲁单抗(durvalumab)、阿特珠单抗(atezolizumab)、匹地珠单抗(pidilizumab)、JNJ-63723283(JNJ)、BGB-A317(BeiGene&Celgene)；或Preusser,M.等,(2015)Nat.Rev.Neurol.中所公开的检查点抑制剂，包括但不限于伊匹单抗(ipilimumab)、曲美木单抗(tremelimumab)、纳武单抗、派姆单抗、AMP224、AMP514/MEDI0680、BMS936559、MEDl4736、MPDL3280A、MSB0010718C、BMS986016、IMP321、利瑞鲁单抗(lirilumab)、IPH2101、1-7F9和KW-6002。

治疗剂可以是治疗癌症或其相关症状的剂(例如，细胞毒性剂、非肽小分子或可用于治疗癌症或其相关症状的其他化合物，统称为“抗癌剂”)。抗癌剂可以是例如化疗剂或靶向治疗剂。

抗癌剂包括有丝分裂抑制剂、插入抗生素、生长因子抑制剂、细胞周期抑制剂、酶、拓扑异构酶抑制剂、生物反应调节剂、烷基化剂、抗代谢物、叶酸类似物、嘧啶类似物、嘌呤类似物和相关抑制剂、长春花生物碱、表鬼臼毒素、抗生素、L-天冬酰胺酶、拓扑异构酶抑制剂、干扰素、铂配位错合物、蒽二酮取代的脲、甲基肼衍生物、肾上腺皮质抑制剂、肾上腺类固醇、孕酮、雌激素、抗雌激素、雄激素、抗雄激素和促性腺激素释放激素类似物。其他抗癌剂包括甲酰四氢叶酸(LV)、伊立替康(irenotecan)、奥沙利铂(oxaliplatin)、卡培他滨(capecitabine)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)和多西他塞(doxetaxel)。在一些实施方案中，所述一种或多种其他疗法包括两种或更多种抗癌剂。两种或更多种抗癌剂可以呈混合剂形式使用以便组合施用或分开施用。组合抗癌剂的合适的给药方案在本领域中是已知的，并且描述于例如Saltz等,Proc.Am.Soc.Clin.Oncol.18:233a(1999)和Douillard等,Lancet 355(9209):1041-1047(2000)中。

抗癌剂的其他非限制性实例包括(甲磺酸伊马替尼(Imatinib Mesylate))；(卡非佐米(carfilzomib))；(硼替佐米(bortezomib))；Casodex(比卡米特(bicalutamide))；(吉非替尼(gefitinib))；烷基化剂，如噻替派(thiotepa)和环磷酰胺；烷基磺酸酯，如白消安(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan)；氮杂环丙烷，如苯佐替派(benzodopa)、卡巴醌(carboquone)、美妥替哌(meturedopa)和乌瑞替派(uredopa)；乙烯亚胺和甲基密胺，包括六甲密胺、三乙烯密胺、三乙烯磷酰胺、三乙烯硫代磷酰胺和三羟甲基密胺；番荔枝内酯(尤其布拉他辛(bullatacin)和布拉他辛酮(bullatacinone))；喜树碱(包括合成类似物拓泊替康(topotecan))；苔藓抑素(bryostatin)；海绵抑素(callystatin)；CC-1065(包括其阿多来新(adozelesin)、卡折来新(carzelesin)和比折来新(bizelesin)合成类似物)；念珠藻素(尤其念珠藻素1和念珠藻素8)；多拉司他汀(dolastatin)；倍癌霉素(duocarmycin)(包括合成类似物KW-2189和CB1-TM1)；艾榴塞洛素(eleutherobin)；水鬼蕉碱(pancratistatin)；匍枝珊瑚醇A(sarcodictyin A)；海绵抑素(spongistatin)；氮芥类，如苯丁酸氮芥、萘氮芥、氯磷酰胺、雌莫司汀(estramustine)、异环磷酰胺、甲氮芥、盐酸甲氧氮芥、美法仑(melphalan)、新氮芥、苯芥胆甾醇、泼尼莫司汀(prednimustine)、曲磷胺(trofosfamide)、尿嘧啶氮芥；亚硝基脲，如卡莫司汀(carmustine)、氯脲菌素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫司汀(nimustine)和雷莫司汀(ranimustine)；抗生素，如烯二炔抗生素(例如卡奇霉素(calicheamicin)，如卡奇霉素γll和卡奇霉素ωll(参见例如Agnew,Chem.Intl.Ed Engl.33:183-186(1994))；达内霉素(dynemicin)，如达内霉素A；双膦酸盐，如氯膦酸盐；埃斯培拉霉素(esperamicin)；以及新制癌菌素发色团和相关色蛋白烯二炔抗生素发色团、阿克拉霉素(aclacinomysin)、放线菌素(actinomycin)、安曲霉素(authramycin)、重氮丝氨酸、博莱霉素(bleomycins)、放线菌素C、卡奇霉素、卡柔比星(carabicin)、洋红霉素(caminomycin)、嗜癌菌素(carzinophilin)、色霉素(chromomycinis)、更生霉素(dactinomycin)、道诺霉素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸、阿德力霉素(adriamycin)(阿霉素(doxorubicin))、吗啉基阿霉素、氰基吗啉基阿霉素、2-吡咯啉基阿霉素、脱氧阿霉素、表阿霉素(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、艾达鲁比辛(idarubicin)、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素(mitomycin)(如丝裂霉素C)、霉酚酸、诺拉霉素(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycin)、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素(porfiromycin)、嘌呤霉素、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑霉素(streptonigrin)、链脲霉素(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他丁(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代谢物，如氨甲喋呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，如德诺喋呤(denopterin)、蝶罗呤(pteropterin)、三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤类似物，如氟达拉滨(fludarabine)、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)；嘧啶类似物，如安西他滨(ancitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、6-氮杂尿苷、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、双脱氧尿苷(dideoxyuridine)、脱氧氟尿苷(doxifluridine)、依诺他滨(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)；雄激素，如卡鲁睪酮(calusterone)、丙酸屈他雄酮(dromostanolone propionate)、环硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)、睪内酯(testolactone)；抗肾上腺剂，如氨鲁米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane)；叶酸补充剂，如亚叶酸；醋葡醛内酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；贝斯尿嘧啶(bestrabucil)；比生群(bisantrene)；依达曲沙(edatraxate)；地磷酰胺(defofamine)；秋水仙胺(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；依氟鸟氨酸(elfomithine)；依利醋铵(elliptinium acetate)；埃博霉素(epothilone)，如埃博霉素B；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓；羟基脲；蘑菇多糖(lentinan)；洛尼达宁(lonidamine)；类美登素(maytansinoids)，如美登素(maytansine)和安丝菌素(ansamitocins)；丙脒腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；莫哌达醇(mopidamnol)；硝吖啶(nitraerine)；喷司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；足叶草酸；2-乙基酰肼；丙卡巴肼(procarbazine)；聚糖复合物(JHS Natural Products，Eugene，OR)；雷佐生(razoxane)；根霉素(rhizoxin)；西佐喃(sizofiran)；螺旋锗(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonic acid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2',2”-三氯三乙胺；单端孢霉烯(trichothecenes)，如T-2毒素、疣孢霉素A(verracurin A)、杆孢菌素A(roridin A)和蛇形菌素(anguidine)；乌拉坦(urethane)；长春地辛(vindesine)；达卡巴嗪(dacarbazine)；甘露醇氮芥(mannomustine)；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷(pipobroman)；加西托辛(gacytosine)；阿拉伯糖苷(“Ara-C”)；环磷酰胺；噻替派；类紫杉醇，例如(太平洋紫杉醇、(无Cremophor白蛋白工程改造太平洋紫杉醇纳米粒子制剂和(多西他塞)；氯尿嘧啶(chloranbucil)；它莫西芬(tamoxifen)(Nolvadex^TM)；雷洛昔芬(raloxifene)；芳香酶抑制4(5)-咪唑；4-羟基它莫昔芬(4-hydroxytamoxifen)；曲沃昔芬(trioxifene)；酮替芬(keoxifene)；LY 117018；奥那司酮(onapristone)；托瑞米芬(toremifene)氟他胺(flutamide)、尼鲁米特(nilutamide)、比卡米特(bicalutamide)、亮丙瑞林(leuprolide)、戈舍瑞林(goserelin)；氮芥苯丁酸；吉西他滨(gemcitabine)；6-硫鸟嘌呤；巯基嘌呤；铂配位错合物，如顺铂(cisplatin)、奥沙利铂和卡铂(carboplatin)；长春花碱(vinblastine)；铂；伊托泊苷(etoposide)(VP-16)；异环磷酰胺(ifosfamide)；米托蒽醌；长春新碱(vincristine)；(长春瑞滨(vinorelbine))；能灭瘤(novantrone)；替尼泊苷(teniposide)；依达曲沙(edatrexate)；道诺霉素(daunomycin)；氨基喋呤(aminopterin)；伊班膦酸盐(ibandronate)；伊立替康(irinotecan)(例如CPT-11)；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类视黄醇，如视黄酸；埃斯培拉霉素(esperamicins)；卡培他滨(例如)；以及以上任一者的药学上可接受的盐。

抗癌剂的其他非限制性实例包括曲妥珠单抗(trastuzumab)贝伐珠单抗(bevacizumab)西妥昔单抗(cetuximab)利妥昔单抗(rituximab)、ABVD、勒欓碱(avicine)、阿巴伏单抗(abagovomab)、吖啶甲酰胺、阿德木单抗(adecatumumab)、17-N-烯丙基氨基-17-脱甲氧基格尔德霉素、α镭(alpharadin)、阿伏西地(alvocidib)、3-氨基吡啶-2-甲醛硫半卡腙、氨萘非特(amonafide)、蒽二酮、抗CD22免疫毒素、抗肿瘤药(例如细胞周期非特异性抗肿瘤剂和本文描述的其他抗肿瘤药)、抗肿瘤发生草药、阿帕兹醌(apaziquone)、阿替莫德(atiprimod)、硫唑嘌呤、贝洛替康(belotecan)、苯达莫司汀(bendamustine)、BIBW 2992、比立考达(biricodar)、溴他立星(brostallicin)、苔藓抑素、丁胱磺酰亚胺、CBV(化学疗法)、花萼海绵诱癌素(calyculin)、二氯乙酸、迪莫利德(discodermolide)、依沙芦星(elsamitrucin)、依诺他滨(enocitabine)、艾日布林(eribulin)、依沙替康(exatecan)、依昔舒林(exisulind)、铁锈醇、呋咯地辛(forodesine)、磷雌酚(fosfestrol)、ICE化疗方案、IT-101、伊美克(imexon)、咪喹莫特(imiquimod)、氮茚并氮茀、伊洛福芬(irofulven)、拉尼喹达(laniquidar)、拉洛他赛(larotaxel)、来那度胺(lenalidomide)、鲁坎松(lucanthone)、勒托替康(lurtotecan)、马磷酰胺(mafosfamide)、米托唑胺(mitozolomide)、萘福昔定(nafoxidine)、奈达铂(nedaplatin)、奥拉帕尼(olaparib)、奥他赛(ortataxel)、PAC-1、木瓜、匹杉琼(pixantrone)、蛋白酶体抑制剂、瑞贝卡霉素(rebeccamycin)、瑞喹莫德(resiquimod)、鲁比替康(rubitecan)、SN-38、盐孢菌酰胺A、沙帕他滨(sapacitabine)、Stanford V、斯旺松宁(swainsonine)、他拉泊芬(talaporfin)、他立喹达(tariquidar)、替加氟(tegafur)-尿嘧啶、特莫达(temodar)、替塞他赛(tesetaxel)、四硝酸三铂、参(2-氯乙基)胺、曲沙他滨(troxacitabine)、尿嘧啶氮芥(uramustine)、伐地美生(vadimezan)、长春氟宁(vinflunine)、ZD6126和佐舒奎达(zosuquidar)。

抗癌剂的其他非限制性实例包括天然产物，如长春花生物碱(例如长春花碱、长春新碱和长春瑞滨(vinorelbine))、表鬼臼毒素(例如伊托泊苷和替尼泊苷)、抗生素(例如更生霉素(放线菌素D(actinomycin D))、道诺霉素和艾达鲁比辛)、蒽环类、米托蒽醌、博来霉素、普卡霉素(plicamycin)(光辉霉素(mithramycin))、丝裂霉素、酶(例如L-天冬酰胺酶，其可在全身代谢L-天冬酰胺并剥夺不能合成其自身天冬酰胺的细胞)、抗血小板剂、抗增殖/抗有丝分裂烷基化剂，如氮芥类(例如甲氮芥、环磷酰胺及类似物、美法仑和氮芥苯丁酸)、乙烯亚胺和甲基密胺(例如六甲基密胺和噻替派)、CDK抑制剂(例如CDK 4/6抑制剂，如瑞博西尼(ribociclib)、阿贝西尼(abemaciclib)或帕博西尼(palbociclib))、塞利西尼(seliciclib)、UCN-01、P1446A-05、PD-0332991、地那西尼(dinaciclib)、P27-00、AT-7519、RGB286638和SCH727965)、烷基磺酸酯(例如白消安)、亚硝基脲(例如卡莫司汀(BCNU)和类似物以及链脲霉素)；三氮烯-达卡巴嗪(DTIC)、抗增殖/抗有丝分裂抗代谢物，如叶酸类似物、嘧啶类似物(例如，氟尿嘧啶、氟尿苷和阿糖胞苷)、嘌呤类似物和相关抑制剂(例如巯基嘌呤、硫鸟嘌呤、喷司他丁和2-氯脱氧腺苷)、芳香酶抑制剂(例如，阿那曲唑(anastrozole)、依西美坦(exemestane)和来曲唑(letrozole))和铂配位错合物(例如顺铂和卡铂)、丙卡巴肼、羟基脲、米托坦、氨鲁米特、组蛋白去乙酰酶(HDAC)抑制剂(例如曲古菌素(trichostatin)、丁酸钠、阿匹西坦(apicidan)、辛二酰苯胺异羟肟酸、伏立诺他(vorinostat)、LBH 589、罗米地辛(romidepsin)、ACY-1215和帕比司他(panobinostat))、mTOR抑制剂(例如维妥舍替(vistusertib)、坦西莫斯(temsirolimus)、依维莫司(everolimus)、利达福莫司(ridaforolimus)和西罗莫司(sirolimus))、KSP(Eg5)抑制剂(例如Array 520)、DNA结合剂(例如)、PI3K抑制剂，如PI3Kδ抑制剂(例如GS-1101和TGR-1202)、PI3Kδ和γ抑制剂(例如CAL-130)、考泮利司(copanlisib)、阿培利司(alpelisib)和艾代拉利司(idelalisib)；多激酶抑制剂(例如TG02和索拉非尼(sorafenib))、激素(例如雌激素)和激素激动剂，如黄体生成激素释放激素(LHRH)激动剂(例如戈舍瑞林、亮丙瑞林和曲普瑞林(triptorelin))、BAFF中和抗体(例如LY2127399)、IKK抑制剂、p38MAPK抑制剂、抗IL-6(例如CNT0328)、端粒酶抑制剂(例如GRN 163L)、极光激酶抑制剂(例如MLN8237)、细胞表面单克隆抗体(例如抗CD38(HUMAX-CD38)、抗CSl(例如埃罗妥珠单抗(elotuzumab))、HSP90抑制剂(例如17AAG和KOS 953)、P13K/Akt抑制剂(例如哌立福新(perifosine))、Akt抑制剂(例如GSK-2141795)、PKC抑制剂(例如恩扎他林(enzastaurin))、FTI(例如Zarnestra^TM)、抗CD138(例如BT062)、Torcl/2特异性激酶抑制剂(例如INK128)、ER/UPR靶向剂(例如MKC-3946)、cFMS抑制剂(例如ARRY-382)、JAK1/2抑制剂(例如CYT387)、PARP抑制剂(例如奥拉帕尼(olaparib)和维利帕尼(veliparib)(ABT-888))和BCL-2拮抗剂。

在一些实施方案中，抗癌剂选自甲氮芥、喜树碱、异环磷酰胺、它莫西芬、雷洛昔芬、吉西他滨、索拉非尼或上述的任何类似物或衍生物变异体。

在一些实施方案中，抗癌剂是ALK抑制剂。ALK抑制剂的非限制性实例包括色瑞替尼(ceritinib)、TAE-684(NVP-TAE694)、PF02341066(克唑替尼或1066)、阿来替尼；布加替尼；恩曲替尼(entrectinib)；恩沙替尼(ensartinib)(X-396)；劳拉替尼(lorlatinib)；ASP3026；CEP-37440；4SC-203；TL-398；PLB1003；TSR-011；CT-707；TPX-0005；和AP26113。ALK激酶抑制剂的其他实例描述于WO05016894的实施例3至实施例39中。

在一些实施方案中，抗癌剂是受体酪氨酸激酶(RTK)/生长因子受体下游成员的抑制剂(例如SHP2抑制剂(例如SHP099、TNO155、RMC-4550、RMC-4630、JAB-3068)、另一种SOS1抑制剂(例如BI-1701963)、Raf抑制剂、MEK抑制剂、ERK抑制剂、PI3K抑制剂、PTEN抑制剂、AKT抑制剂或mTOR抑制剂(例如mTORC1抑制剂或mTORC2抑制剂)。在一些实施方案中，抗癌剂是JAB-3312。在一些实施方案中，抗癌剂是Ras抑制剂(例如AMG 510、MRTX1257、LY349946、MRTX849、ARS-3248(JNJ-74699157)或ARS-1620)或Ras疫苗，或设计用于直接或间接降低Ras的致癌活性的另一种治疗方法。

在一些实施方案中，Ras蛋白是野生型。在一些实施方案中，癌症包含Ras突变。在一些实施方案中，突变选自：

(a)以下K-Ras突变体：G12D、G12V、G12C、G13D、G12R、G12A、Q61H、G12S、A146T、G13C、Q61L、Q61R、K117N、A146V、G12F、Q61K、L19F、Q22K、V14I、A59T、A146P、G13R、G12L或G13V及其组合；

(b)以下H-Ras突变体：Q61R、G13R、Q61K、G12S、Q61L、G12D、G13V、G13D、G12C、K117N、A59T、G12V、G13C、Q61H、G13S、A18V、D119N、G13N、A146T、A66T、G12A、A146V、G12N或G12R及其组合；以及

(c)以下N-Ras突变体：Q61R、Q61K、G12D、Q61L、Q61H、G13R、G13D、G12S、G12C、G12V、G12A、G13V、G12R、P185S、G13C、A146T、G60E、Q61P、A59D、E132K、E49K、T50I、A146V或A59T及其组合；

或前述任一者的组合(例如K-Ras G12C与K-Ras G13C)。在一些实施方案中，所述癌症包含选自由以下组成的组的Ras突变：G12C、G13C、G12A、G12D、G13D、G12S、G13S、G12V和G13V。

在一些实施方案中，可以与本发明化合物组合的治疗剂是MAP激酶(MAPK)途径抑制剂(或“MAPK抑制剂”)。MAPK抑制剂包括但不限于Cancers(Basel)2015年9月；7(3)：1758-1784中描述的一种或多种MAPK抑制剂。举例来说，MAPK抑制剂可以选自以下中的一种或多种：曲美替尼、比美替尼(binimetinib)、司美替尼(selumetinib)、考比替尼(cobimetinib)、LErafAON(NeoPharm)、ISIS 5132；维罗非尼(vemurafenib)、匹马替尼(pimasertib)、TAK733、RO4987655(CH4987655)；CI-1040；PD-0325901；CH5126766；MAP855；AZD6244；瑞法替尼(refametinib)(RDEA 119/BAY 86-9766)；GDC-0973/XL581；AZD8330(ARRY-424704/ARRY-704)；RO5126766(Roche，描述于PLoS One.2014年11月25日；9(11)中)；以及GSK1120212(或JTP-74057，描述于Clin Cancer Res.2011年3月1日；17(5):989-1000中)。

在一些实施方案中，抗癌剂是RAS-RAF-ERK或PI3K-AKT-TOR或PI3K-AKT信号传导途径破坏剂或抑制剂。PI3K/AKT抑制剂可以包括但不限于Cancers(Basel)2015年9月；7(3):1758-1784中描述的一种或多种PI3K/AKT抑制剂。举例来说，PI3K/AKT抑制剂可以选自以下中的一种或多种：NVP-BEZ235；BGT226；XL765/SAR245409；SF1126；GDC-0980；PI-103；PF-04691502；PKI-587；GSK2126458。

在一些实施方案中，抗癌剂是PD-1或PD-L1拮抗剂。

在一些实施方案中，其他治疗剂包括EGFR抑制剂、IGF-1R抑制剂、MEK抑制剂、PI3K抑制剂、AKT抑制剂、TOR抑制剂、MCL-1抑制剂、BCL-2抑制剂、SHP2抑制剂、蛋白酶体抑制剂和免疫疗法。

IGF-1R抑制剂包括林斯替尼(linsitinib)或其药学上可接受的盐。

EGFR抑制剂包括但不限于小分子拮抗剂、抗体抑制剂或特异性反义核苷酸或siRNA。可用EGFR抗体抑制剂包括西妥昔单抗帕尼单抗扎妥木单抗(zalutumumab)、尼妥珠单抗(nimotuzumab)和马妥珠单抗(matuzumab)。其他基于抗体的EGFR抑制剂包括可以部分或完全阻断EGFR被其天然配体激活的任何抗EGFR抗体或抗体片段。基于抗体的EGFR抑制剂的非限制性实例包括以下文献中所描述的那些：Modjtahedi等,Br.J.Cancer 1993,67:247-253；Teramoto等,Cancer 1996,77:639-645；Goldstein等,Clin.Cancer Res.1995,1:1311-1318；Huang等,1999,Cancer Res.15:59(8):1935-40；以及Yang等,Cancer Res.1999,59:1236-1243。EGFR抑制剂可以是单克隆抗体Mab E7.6.3(Yang,1999同上)或Mab C225(ATCC登录号HB-8508)或具有其结合特异性的抗体或抗体片段。

EGFR的小分子拮抗剂包括吉非替尼埃罗替尼(erlotinib)和拉帕替尼(lapatinib)参见例如Yan等,Pharmacogenetics and Pharmacogenomics In Oncology Therapeutic Antibody Development,BioTechniques 2005,39(4):565-8；以及Paez等,EGFR Mutations In Lung Cancer Correlation With Clinical Response To Gefitinib Therapy,Science 2004,304(5676):1497-500。小分子EGFR抑制剂的其他非限制性实例包括以下专利公开中描述的任何EGFR抑制剂和此类EGFR抑制剂的所有药学上可接受的盐：EP 0520722；EP 0566226；WO96/33980；美国专利号5,747,498；WO96/30347；EP 0787772；WO97/30034；WO97/30044；WO97/38994；WO97/49688；EP 837063；WO98/02434；WO97/38983；WO95/19774；WO95/19970；WO97/13771；WO98/02437；WO98/02438；WO97/32881；DE 19629652；WO98/33798；WO97/32880；WO97/32880；EP 682027；WO97/02266；WO97/27199；WO98/07726；WO97/34895；WO96/31510；WO98/14449；WO98/14450；WO98/14451；WO95/09847；WO97/19065；WO98/17662；美国专利号5,789,427；美国专利号5,650,415；美国专利号5,656,643；WO99/35146；WO99/35132；WO99/07701；和WO92/20642。小分子EGFR抑制剂的其他非限制性实例包括Traxler等,Exp.Opin.Ther.Patents 1998,8(12):1599-1625中描述的EGFR抑制剂中的任一种。在一些实施方案中，EGFR抑制剂是奥希替尼(osimertinib)。

MEK抑制剂包括但不限于匹马替尼、司美替尼、考比替尼曲美替尼和比美替尼在一些实施方案中，MEK抑制剂靶向作为选自D67N、P124L、P124S和L177V的I类MEK1突变的MEK突变。在一些实施方案中，MEK突变选自ΔE51-Q58、ΔF53-Q58、E203K、L177M、C121S、F53L、K57E、Q56P和K57N的II类MEK1突变。

PI3K抑制剂包括但不限于渥曼青霉素(wortmannin)；WO06/044453中描述的17-羟基渥曼青霉素类似物；4-[2-(1H-吲唑-4-基)-6-[[4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基]甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基]吗啉(也称为皮替西布(pictilisib)或GDC-0941，并且描述于WO09/036082和WO09/055730中)；2-甲基-2-[4-[3-甲基-2-氧代-8-(喹啉-3-基)-2,3-二氢咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]苯基]丙腈(也称为BEZ 235或NVP-BEZ 235，并且描述于WO06/122806中)；(S)-1-(4-((2-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-甲基-4-吗啉基噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲基)哌嗪-1-基)-2-羟基丙-1-酮(描述于WO08/070740中)；LY294002(2-(4-吗啉基)-8-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(可得自Axon Medchem)；PI 103盐酸盐(3-[4-(4-吗啉基吡啶并-[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基]苯酚盐酸盐(可得自Axon Medchem)；PIK 75(2-甲基-5-硝基-2-[(6-溴咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)亚甲基]-1-甲基酰肼-苯磺酸单盐酸盐)(可得自Axon Medchem)；PIK 90(N-(7,8-二甲氧基-2,3-二氢-咪唑并[1,2-c]喹唑啉-5-基)-烟碱酰胺(可得自Axon Medchem)；AS-252424(5-[1-[5-(4-氟-2-羟基-苯基)-呋喃-2-基]-甲-(Z)-亚基]-噻唑啶-2,4-二酮(可得自Axon Medchem)；TGX-221(7-甲基-2-(4-吗啉基)-9-[1-(苯基氨基)乙基]-4H-吡啶并-[1,2-a]嘧啶-4-酮(可得自Axon Medchem)；XL-765；以及XL-147。其他PI3K抑制剂包括脱甲氧绿胶霉素(demethoxyviridin)、哌立福新、CAL101、PX-866、BEZ235、SF1126、INK1117、IPI-145、BKM120、XL147、XL765、Palomid 529、GSK1059615、ZSTK474、PWT33597、IC87114、TGI 00-115、CAL263、PI-103、GNE-477、CUDC-907和AEZS-136。

AKT抑制剂包括但不限于Akt-1-1(抑制Aktl)(Barnett等,Biochem.J.2005,385(Pt.2):399-408)；Akt-1-1,2(抑制Akl和Ak2)(Barnett等,Biochem.J.2005,385(Pt.2):399-408)；API-59CJ-Ome(例如Jin等,Br.J.Cancer 2004,91:1808-12)；1-H-咪唑并[4,5-c]吡啶基化合物(例如WO 05/011700)；吲哚-3-甲醇及其衍生物(例如美国专利号6,656,963；Sarkar和Li J Nutr.2004,134(12增刊):3493S-3498S)；哌立福新(例如干扰Akt膜定位；Dasmahapatra等,Clin.Cancer Res.2004,10(15):5242-52)；磷脂酰肌醇醚脂质类似物(例如Gills和Dennis Expert.Opin.Investig.Drugs 2004,13:787-97)；以及曲西立滨(triciribine)(TCN或API-2或NCI标识符：NSC 154020；Yang等,Cancer Res.2004,64:4394-9)。

mTOR抑制剂包括但不限于ATP竞争性mTORC1/mTORC2抑制剂，例如PI-103、PP242、PP30；Torin 1；FKBP12增强剂；4H-1-苯并吡喃-4-酮衍生物；以及雷帕霉素(rapamycin)(也称为西罗莫司)及其衍生物，包括：坦西莫斯依维莫司(WO94/09010)；利达福莫司(也称为地福莫司(deforolimus)或AP23573)；雷帕霉素类似物，例如，如WO98/02441和WO01/14387中所公开，例如AP23464和AP23841；40-(2-羟基乙基)雷帕霉素；40-[3-羟基(羟基甲基)甲基丙酸]-雷帕霉素(也称为CC1779)；40-表-(四唑基)-雷帕霉素(也称为ABT578)；32-脱氧雷帕霉素；16-戊炔基氧基-32(S)-二氢雷帕霉素；WO05/005434中公开的衍生物；美国专利号5,258,389、5,118,677、5,118,678、5,100,883、5,151,413、5,120,842和5,256,790以及WO94/090101、WO92/05179、WO93/111130、WO94/02136、WO94/02485、WO95/14023、WO94/02136、WO95/16691、WO96/41807、WO96/41807和WO2018204416中公开的衍生物；以及含磷雷帕霉素衍生物(例如WO05/016252)。在一些实施方案中，mTOR抑制剂是双齿抑制剂(参见例如WO2018204416、WO2019212990和WO2019212991)，如RMC-5552。

可以与本发明化合物组合使用的BRAF抑制剂包括例如维罗非尼(vemurafenib)、达拉非尼(dabrafenib)和恩考非尼(encorafenib)。BRAF可以包含3类BRAF突变。在一些实施方案中，3类BRAF突变选自以下人BRAF中氨基酸取代中的一个或多个：D287H；P367R；V459L；G466V；G466E；G466A；S467L；G469E；N581S；N581I；D594N；D594G；D594A；D594H；F595L；G596D；G596R；和A762E。

MCL-1抑制剂包括但不限于AMG-176、MIK665和S63845。骨髓细胞白血病-1(MCL-1)蛋白是B细胞淋巴瘤2(BCL-2)蛋白家族的关键抗凋亡成员之一。MCL-1过度表达与肿瘤进展以及不仅对传统化疗而且对包括BCL-2抑制剂(如ABT-263)的靶向性治疗剂的耐药性密切相关。

在一些实施方案中，所述其他治疗剂是SHP2抑制剂。SHP2是由PTPN11基因编码的非受体蛋白酪氨酸磷酸酶，其有助于多种细胞功能，包括增殖、分化、细胞周期维持和迁移。SHP2具有两个N末端Src同源性2结构域(N-SH2和C-SH2)、催化结构域(PTP)和C末端尾部。该两个SH2结构域控制SHP2的亚细胞定位和功能调控。该分子以由包括来自N-SH2和PTP结构域的残基的结合网状结构加以稳定的无活性自抑制构象存在。举例来说，通过受体酪氨酸激酶(RTK)起作用的受细胞介素或生长因子刺激导致催化位点暴露，从而引起SHP2的酶促激活。

SHP2参与通过RAS-促分裂原激活蛋白激酶(MAPK)、JAK-STAT或磷酸肌醇3激酶-AKT途径进行信号传导。已经在若干种人类罹患疾病中鉴定了PTPN11基因中和随后SHP2中的突变，所述疾病如努南氏综合征、豹皮综合征以及人类癌症，如青少年骨髓单核细胞性白血病、成神经细胞瘤、黑素瘤、急性骨髓性白血病和乳腺癌、肺癌和结肠癌。这些突变中的一些使SHP2的自抑制构象不稳定，并促进SHP2自动激活或增强生长因子驱动型激活。因此，SHP2代表了开发用于治疗多种疾病(包括癌症)的新颖疗法的极具吸引力的靶标。已经证明了SHP2抑制剂(例如RMC-4550或SHP099)与RAS途径抑制剂(例如MEK抑制剂)组合可以在体外抑制多种癌细胞系(例如胰腺、肺、卵巢和乳腺癌)增殖。因此，包括SHP2抑制剂与RAS途径抑制剂的组合疗法可以是在多种恶性肿瘤中预防肿瘤耐药性的一般策略，并且可以形成含SOS1抑制剂的三联组合抑制剂的基础。

本领域中已知的此类SHP2抑制剂的非限制性实例包括：Chen等,Mol Pharmacol.2006,70,562；Sarver等,J.Med.Chem.2017,62,1793；Xie等,J.Med.Chem.2017,60,113734；以及Igbe等,Oncotarget,2017,8,113734；以及PCT申请：WO2015107493；WO2015107494；WO201507495；WO2016203404；WO2016203405；WO2016203406；WO2011022440；WO2017156397；WO2017079723；WO2017211303；WO2012041524；WO2017211303；WO2019051084；WO2017211303；US20160030594；US20110281942；WO2010011666；WO2014113584；WO2014176488；WO2017100279；WO2019051469；US8637684；WO2007117699；WO2015003094；WO2005094314；WO2008124815；WO2009049098；WO2009135000；WO2016191328；WO2016196591；WO2017078499；WO2017210134；WO2018013597；WO2018129402；WO2018130928；WO20181309928；WO2018136264；WO2018136265；WO2018160731；WO2018172984；和WO2010121212，各案以引用的方式并入本文。

在一些实施方案中，SHP2抑制剂结合活性位点。在一些实施方案中，SHP2抑制剂是混合型不可逆抑制剂。在一些实施方案中，SHP2抑制剂结合别构位点，例如非共价别构抑制剂。在一些实施方案中，SHP2抑制剂是共价SHP2抑制剂，如靶向位于磷酸酶活性位点外的半胱氨酸残基(C333)的抑制剂。在一些实施方案中，SHP2抑制剂是可逆抑制剂。在一些实施方案中，SHP2抑制剂是不可逆抑制剂。在一些实施方案中，SHP2抑制剂是SHP099。在一些实施方案中，SHP2抑制剂是TNO155。在一些实施方案中，SHP2抑制剂是RMC-4550。在一些实施方案中，SHP2抑制剂是RCM-4630。在一些实施方案中，SHP2抑制剂是JAB-3068。

蛋白酶体抑制剂包括但不限于卡非佐米硼替佐米和奥普罗佐米(oprozomib)。

免疫疗法包括但不限于单克隆抗体、免疫调节酰亚胺(IMiD)、GITR激动剂、基因工程改造T细胞(例如CAR-T细胞)、双特异性抗体(例如BiTE)以及抗PD-1、抗PDL-1、抗CTLA4、抗LAGl和抗OX40剂)。

免疫调节剂(IMiD)是一类含有酰亚胺基团的免疫调节药物(调节免疫反应的药物)。IMiD类别包括沙利度胺(thalidomide)及其类似物(来那度胺、泊马度胺(pomalidomide)和阿普司特(apremilast))。

示例性抗PD-1抗体及其使用方法由以下文献描述：Goldberg等,Blood 2007,110(1):186-192；Thompson等,Clin.Cancer Res.2007,13(6):1757-1761；和WO06/121168A1)，以及描述于本文其他部分。

GITR激动剂包括但不限于GITR融合蛋白和抗GITR抗体(例如二价抗GITR抗体)，如美国专利号6,111,090、美国专利号8,586,023、WO2010/003118和WO2011/090754中描述的GITR融合蛋白；美国专利号7,025,962、EP 1947183、美国专利号7,812,135、美国专利号8,388,967、美国专利号8,591,886、美国专利号7,618,632、EP 1866339以及WO2011/028683、WO2013/039954、WO05/007190、WO07/133822、WO05/055808、WO99/40196、WO01/03720、WO99/20758、WO06/083289、WO05/115451和WO2011/051726中描述的抗GITR抗体。

可以与本发明化合物组合使用的治疗剂的另一个实例是抗血管生成剂。抗血管生成剂包括但不限于体外合成制备的化学组合物、抗体、抗原结合区、放射性核素及其组合和结合物。抗血管生成剂可以是激动剂、拮抗剂、别构调节剂、毒素或更一般来说，可以起抑制或刺激其靶标的作用(例如受体或酶激活或抑制)，从而促进细胞死亡或使细胞生长停滞。在一些实施方案中，所述一种或多种其他疗法包括抗血管生成剂。

抗血管生成剂可以是MMP-2(基质金属蛋白酶2)抑制剂、MMP-9(基质金属金属蛋白酶9)抑制剂和COX-II(环加氧酶11)抑制剂。抗血管生成剂的非限制性实例包括雷帕霉素、坦西莫斯(CCI-779)、依维莫司(RAD001)、索拉非尼、舒尼替尼(sunitinib)和贝伐珠单抗。可用COX-II抑制剂的实例包括阿来昔布(alecoxib)、伐地昔布(valdecoxib)和罗非昔布(rofecoxib)。可用基质金属蛋白酶抑制剂的实例描述于WO96/33172、WO96/27583、WO98/07697、WO98/03516、WO98/34918、WO98/34915、WO98/33768、WO98/30566、WO90/05719、WO99/52910、WO99/52889、WO99/29667、WO99007675、EP0606046、EP0780386、EP1786785、EP1181017、EP0818442、EP1004578和US20090012085，以及美国专利号5,863,949和5,861,510中。优选的MMP-2和MMP-9抑制剂是具有极低或不具有MMP-1抑制活性的那些。更优选的是相对于其他基质金属蛋白酶(即，MAP-1、MMP-3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、MMP-8、MMP-10、MMP-11、MMP-12和MMP-13)选择性抑制MMP-2或AMP-9的那些抑制剂。MMP抑制剂的一些特定实例是AG-3340、RO 32-3555和RS 13-0830。

其他示例性抗血管生成剂包括KDR(激酶结构域受体)抑制剂(例如，特异性结合至激酶结构域受体的抗体和抗原结合区)；抗VEGF剂(例如特异性结合VEGF或可溶性VEGF受体或其配体结合区的抗体或抗原结合区)，如VEGF-TRAP^TM；以及抗VEGF受体剂(例如与其特异性结合的抗体或抗原结合区)；EGFR抑制剂(例如与其特异性结合的抗体或抗原结合区)，如(帕尼单抗)、埃罗替尼抗Angl和抗Ang2剂(例如与其或与其受体，例如Tie2/Tek特异性结合的抗体或抗原结合区)；以及抗Tie2激酶抑制剂(例如与其特异性结合的抗体或抗原结合区)。其他抗血管生成剂包括Campath、IL-8、B-FGF、Tek拮抗剂(US2003/0162712；US6,413,932)、抗TWEAK剂(例如，特异性结合抗体或抗原结合区或可溶性TWEAK受体拮抗剂；参见US6,727,225)、用以拮抗整合素与其配体结合的ADAM解整合素结构域(US 2002/0042368)、特异性结合抗eph受体或抗蝶素(anti-ephrin)抗体或抗原结合区(美国专利号5,981,245、5,728,813、5,969,110、6,596,852、6,232,447、6,057,124及其专利家族成员)和抗PDGF-BB拮抗剂(例如，特异性结合抗体或抗原结合区)以及特异性结合PDGF-BB配体的抗体或抗原结合区，以及PDGFR激酶抑制剂(例如与其特异性结合的抗体或抗原结合区)。其他抗血管生成剂包括：SD-7784(Pfizer,USA)；西仑吉肽(cilengitide)(Merck KGaA，Germany，EPO 0770622)；哌加他尼八钠(pegaptanib octasodium)(Gilead Sciences，USA)；α-他汀(Alphastatin)(BioActa，UK)；M-PGA(Celgene，USA，US 5712291)；伊洛马司他(ilomastat)(Arriva，USA，US5892112)；恩马尼布(emaxanib)(Pfizer，USA，US 5792783)；伐拉尼布(vatalanib)(Novartis，Switzerland)；2-甲氧基雌二醇(EntreMed，USA)；TLC ELL-12(Elan，Ireland)；醋酸阿奈可他(anecortave acetate)(Alcon，USA)；α-D148 Mab(Amgen，USA)；CEP-7055(Cephalon，USA)；抗Vn Mab(Crucell，Netherlands)、DAC血管生成抑制剂(ConjuChem，Canada)；安吉西定(Angiocidin)(InKine Pharmaceutical，USA)；KM-2550(Kyowa Hakko，Japan)；SU-0879(Pfizer，USA)；CGP-79787(Novartis，Switzerland，EP 0970070)；ARGENT技术(Ariad，USA)；YIGSR-Stealth(Johnson&Johnson，USA)；纤维素原E片段(BioActa，UK)；血管生成抑制剂(Trigen，UK)；TBC-1635(Encysive Pharmaceuticals，USA)；SC-236(Pfizer，USA)；ABT-567(Abbott，USA)；美司他汀(Metastatin)(EntreMed，USA)；乳房丝抑蛋白(maspin)(Sosei，Japan)；2-甲氧基雌二醇(Oncology Sciences Corporation，USA)；ER-68203-00(IV AX，USA)；BeneFin(Lane Labs，USA)；Tz-93(Tsumura，Japan)；TAN-1120(Takeda，Japan)；FR-111142(Fujisawa，Japan，JP 02233610)；血小板因子4(RepliGen，USA，EP 407122)；血管内皮生长因子拮抗剂(Borean，Denmark)；贝伐珠单抗(pINN)(Genentech，USA)；血管生成抑制剂(SUGEN，USA)；XL 784(Exelixis，USA)；XL 647(Exelixis，USA)；MAbα5β3整合素，第二代(Applied Molecular Evolution，USA and Medlmmune，USA)；恩扎他林盐酸盐(Lilly，USA)；CEP 7055(Cephalon，USA and Sanofi-Synthelabo，France)；BC 1(Genoa Institute of Cancer Research，Italy)；rBPI 21和BPI衍生抗血管生成剂(XOMA，USA)；PI 88(Progen，Australia)；西仑吉肽(Merck KGaA，German；Munich Technical University，Germany；Scripps Clinic and Research Foundation，USA)；AVE 8062(Ajinomoto，Japan)；AS 1404(Cancer Research Laboratory，New Zealand)；SG 292(Telios，USA)；内皮抑素(Boston Childrens Hospital，USA)；ATN 161(Attenuon，USA)；2-甲氧基雌二醇(Boston Childrens Hospital，USA)；ZD 6474(AstraZeneca，UK)；ZD 6126(Angiogene Pharmaceuticals，UK)；PPI 2458(Praecis，USA)；AZD 9935(AstraZeneca，UK)；AZD 2171(AstraZeneca，UK)；伐拉尼布(pINN)(Novartis，Switzerland and Schering AG，Germany)；组织因子途径抑制剂(EntreMed，USA)；哌加他尼(Pinn)(Gilead Sciences，USA)；束骨姜黄醇(xanthorrhizol)(Yonsei University，South Korea)；基于基因的疫苗VEGF-2(Scripps Clinic and Research Foundation，USA)；SPV5.2(Supratek，Canada)；SDX 103(University of California at San Diego，USA)；PX 478(ProlX，USA)；METASTATIN(EntreMed，USA)；肌钙蛋白I(Harvard University，USA)；SU 6668(SUGEN，USA)；OXI 4503(OXiGENE，USA)；o-胍(Dimensional Pharmaceuticals，USA)；莫土泊胺(motuporamine)C(British Columbia University，Canada)；CDP 791(Celltech Group，UK)；阿替莫德(pINN)(GlaxoSmithKline，UK)；E 7820(Eisai，Japan)；CYC 381(Harvard University，USA)；AE 941(Aeterna，Canada)；抗血管生成疫苗(EntreMed，USA)；尿激酶血纤维蛋白溶酶原激活因子抑制剂(Dendreon,USA)；奥谷法奈(oglufanide)(pINN)(Melmotte，USA)；HIF-lα抑制剂(Xenova，UK)；CEP 5214(Cephalon，USA)；BAY RES 2622(Bayer，Germany)；安吉西定(InKine，USA)；A6(Angstrom，USA)；KR 31372(Korea Research Institute of Chemical Technology，South Korea)；GW 2286(GlaxoSmithKline，UK)；EHT 0101(ExonHit，France)；CP 868596(Pfizer，USA)；CP 564959(OSI，USA)；CP 547632(Pfizer，USA)；786034(GlaxoSmithKline，UK)；KRN 633(Kirin Brewery，Japan)；眼内2-甲氧基雌二醇药物递送系统；抗血管生成肽(anginex)(Maastricht University，Netherlands；和Minnesota University，USA)；ABT 510(Abbott，USA)；AAL 993(Novartis，Switzerland)；VEGI(ProteomTech，USA)；肿瘤坏死因子α抑制剂；SU 11248(Pfizer，USA；和SUGEN USA)；ABT 518(Abbott，USA)；YH16(Yantai Rongchang,China)；S-3APG(Boston Childrens Hospital，USA；和EntreMed，USA)；MAb KDR(ImClone Systems，USA)；MAbα5β(Protein Design，USA)；KDR激酶抑制剂(Celltech Group，UK；和Johnson&Johnson，USA)；GFB 116(South Florida University，USA；和Yale University，USA)；CS 706(Sankyo，Japan)；康普瑞汀(combretastatin)A4前药(Arizona State University，USA)；软骨素酶AC(IBEX，Canada)；BAY RES 2690(Bayer，Germany)；AGM 1470(Harvard University，USA；Takeda，Japan；和TAP，USA)；AG 13925(Agouron，USA)；四硫钼酸盐(University of Michigan，USA)；GCS 100(Wayne State University，USA)；CV 247(Ivy Medical，UK)；CKD 732(Chong Kun Dang，South Korea)；伊索拉定(irsogladine)(Nippon Shinyaku，Japan)；RG 13577(Aventis，France)；WX 360(Wilex，Germany)；角鲨胺(Genaera，USA)；RPI 4610(Sirna，USA)；肝素酶抑制剂(InSight，Israel)；KL 3106(Kolon，South Korea)；Honokiol(Emory University，USA)；ZK CDK(Schering AG，Germany)；ZK Angio(Schering AG，Germany)；ZK 229561(Novartis，Switzerland；和Schering AG，Germany)；XMP 300(XOMA，USA)；VGA 1102(Taisho，Japan)；VE-钙粘素-2拮抗剂(ImClone Systems，USA)；血管形成抑素(Vasostatin)(National Institutes of Health，USA)；Flk-1(ImClone Systems，USA)；TZ 93(Tsumura，Japan)；TumStatin(Beth Israel Hospital，USA)；截短可溶性FLT 1(血管内皮生长因子受体1)(Merck&Co，USA)；Tie-2配体(Regeneron，USA)；以及血小板反应蛋白1抑制剂(Allegheny Health,Education and Research Foundation，USA)。

可以与本发明化合物组合使用的治疗剂的其他实例包括特异性结合并抑制生长因子的活性的剂(例如抗体、抗原结合区或可溶性受体)，如肝细胞生长因子(HGF，也称为分散因子)拮抗剂和特异性结合其受体c-Met的抗体或抗原结合区。

可以与本发明化合物组合使用的治疗剂的另一个实例是自噬抑制剂。自噬抑制剂包括但不限于氯喹、3-甲基腺嘌呤、羟氯喹(Plaquenil^TM)、巴氟霉素(bafilomycin)A1、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核糖核苷(AICAR)、冈田酸(okadaic acid)、抑制2A型或1型蛋白磷酸酶的自噬抑制藻毒素、cAMP类似物，以及提高cAMP水平的药物，如腺苷、LY204002、N6-巯基嘌呤核糖核苷和长春花碱。另外，还可以使用抑制蛋白质表达的反义或siRNA，包括但不限于ATG5(其牵涉自噬)。在一些实施方案中，所述一种或多种其他疗法包括自噬抑制剂。

可以与本发明化合物组合使用的治疗剂的另一个实例是抗肿瘤剂。在一些实施方案中，所述一种或多种其他疗法包括抗肿瘤剂。抗肿瘤剂的非限制性实例包括阿西孟南(acemannan)、阿柔比星(aclarubicin)、阿地白介素(aldesleukin)、阿仑单抗(alemtuzumab)、阿利维甲酸(alitretinoin)、六甲密胺(altretamine)、阿米福汀(amifostine)、氨基乙酰丙酸、氨柔比星(amrubicin)、安吖啶(amsacrine)、阿那格雷(anagrelide)、阿那曲唑(anastrozole)、安瑟(ancer)、安西司亭(ancestim)、阿格拉宾(arglabin)、三氧化二砷、BAM-002(Novelos)、贝沙罗汀(bexarotene)、比卡米特(bicalutamide)、溴尿苷、卡培他滨、西莫白介素(celmoleukin)、西曲瑞克(cetrorelix)、克拉屈滨(cladribine)、克霉唑(clotrimazole)、阿糖胞苷十八烷基磷酸盐、DA 3030(Dong-A)、达利珠单抗(daclizumab)、地尼白介素(denileukin diftitox)、德舍瑞林(deslorelin)、右雷佐生(dexrazoxane)、地拉齐普(dilazep)、多西他赛(docetaxel)、二十二醇、度骨化醇(doxercalciferol)、脱氧氟尿苷、阿霉素、溴麦角环肽(bromocriptine)、卡莫司汀、阿糖胞苷、氟尿嘧啶、HIT双氯芬酸、干扰素α、道诺霉素、阿霉素、维甲酸(tretinoin)、依地福新(edelfosine)、依决洛单抗(edrecolomab)、依氟鸟氨酸(eflornithine)、乙嘧替氟(emitefur)、表阿霉素(epirubicin)、依泊汀(epoetin)β、磷酸伊托泊苷、依西美坦、磺舒林酸(exisulind)、法倔唑(fadrozole)、非格司亭(filgrastim)、非那雄胺(finasteride)、磷酸氟达拉滨、福美坦(formestane)、福莫司汀、硝酸镓、吉西他滨、吉妥珠单抗奥佐米星(gemtuzumab zogamicin)、吉美拉西(gimeracil)/奥替拉西(oteracil)/替加氟组合、格列考平(glycopine)、戈舍瑞林、庚铂(heptaplatin)、人绒毛膜促性腺素、人胎儿甲胎蛋白、伊班膦酸(ibandronic acid)、艾达鲁比辛(咪喹莫特、干扰素α、干扰素α、天然、干扰素α-2、干扰素α-2a、干扰素α-2b、干扰素α-Nl、干扰素α-n3、干扰素α-1、干扰素α、天然、干扰素β、干扰素β-1a、干扰素β-1b、干扰素γ、天然干扰素γ-1a、干扰素γ-1b、白介素1β、碘苯胍、伊立替康、伊索拉定、兰瑞肽(lanreotide)、LC 9018(Yakult)、来氟米特(leflunomide)、来诺格司亭(lenograstim)、硫酸蘑菇多糖、来曲唑、白细胞α干扰素、亮丙瑞林、左旋咪唑氟尿嘧啶、利阿唑(liarozole)、洛铂(lobaplatin)、洛尼达宁(lonidamine)、洛伐他汀(lovastatin)、马索罗酚(masoprocol)、米拉索普(melarsoprol)、甲氧氯普胺、米非司酮(mifepristone)、米替福新(miltefosine)、米立司亭(mirimostim)、错配双链RNA、丙脒腙、二溴卫矛醇、米托蒽醌、莫拉司亭(molgramostim)、那法瑞林(nafarelin)、纳洛酮(naloxone) 镇痛新(pentazocine)、那托司亭(nartograstim)、奈达铂(nedaplatin)、尼鲁米特(nilutamide)、那可汀(noscapine)、新颖红血球生成刺激蛋白、NSC 631570奥曲肽(octreotide)、奥普瑞白介素(oprelvekin)、奥沙特隆(osaterone)、奥沙利铂(oxaliplatin)、太平洋紫杉醇、帕米磷酸(pamidronic acid)、培门冬酶(pegaspargase)、聚乙二醇化干扰素α-2b、戊聚糖聚硫酸钠、喷司他丁、皮西巴尼(picibanil)、吡柔比星、兔抗胸腺细胞多株抗体、聚乙二醇干扰素α-2a、卜吩姆钠(porfimer sodium)、雷洛昔芬、雷替曲塞(raltitrexed)、雷布迪孟特(rasburiembodiment)、艾提膦酸(etidronate)铼Re 186、艾提膦酸RII、利妥昔单抗、罗莫肽(romurtide)、来昔屈南(lexidronam)钐(153Sm)、沙格司亭(sargramostim)、西佐喃、索布佐生(sobuzoxane)、索纳明(sonermin)、氯化锶-89、苏拉明(suramin)、他索尔明(tasonermin)、他扎罗汀(tazarotene)、替加氟、替莫泊芬(temoporfin)、替莫唑胺(temozolomide)、替尼泊苷、四氯十氧化物(tetrachlorodecaoxide)、沙利度胺、胸腺法新(thymalfasin)、促甲状腺素α、拓泊替康、托瑞米芬、托西莫单抗(tositumomab)-碘131、曲妥珠单抗、曲奥舒凡(treosulfan)、维甲酸、曲洛司坦、三甲曲沙、曲普瑞林、肿瘤坏死因子α、天然、乌苯美司、膀胱癌疫苗、丸山疫苗(Maruyama vaccine)、黑素瘤溶解疫苗、戊柔比星(valrubicin)、维替泊芬(verteporfin)、长春瑞滨、维如利金(virulizin)、净司他丁斯酯(zinostatin stimalamer)或唑来膦酸(zoledronic acid)；阿巴瑞克(abarelix)；AE 941(Aeterna)、胺莫司汀、反义寡核苷酸、bcl-2(Genta)、APC 8015(Dendreon)、地西他滨(decitabine)、右旋氨格鲁米特(dexaminoglutethimide)、地吖醌、EL 532(Elan)、EM 800(Endorecherche)、恩尿嘧啶、依他硝唑(etanidazole)、芬维甲胺(fenretinide)、非格司亭SD01(Amgen)、氟维司群(fulvestrant)、加洛他滨(galocitabine)、胃泌素17免疫原、HLA-B7基因疗法(Vical)、颗粒球巨噬细胞群落刺激因子、二盐酸组胺、替伊莫单抗(ibritumomab tiuxetan)、伊洛马司他(ilomastat)、IM 862(Cytran)、白介素-2、艾泼昔芬(iproxifene)、LDI 200(Milkhaus)、来立司亭(leridistim)、林妥珠单抗(lintuzumab)、CA 125MAb(Biomira)、癌症MAb(Japan Pharmaceutical Development)、HER-2和Fc MAb(Medarex)、特应105AD7 MAb(CRC Technology)、特应CEA MAb(Trilex)、LYM-1-碘131MAb(Techni clone)、多态性上皮粘蛋白-钇90MAb(Antisoma)、马立马司他(marimastat)、美诺立尔(menogaril)、米土莫单抗(mitumomab)、莫特沙芬钆(motexafin gadolinium)、MX 6(Galderma)、奈拉滨(nelarabine)、诺拉曲塞(nolatrexed)、P 30蛋白、培维索孟(pegvisomant)、培美曲塞(pemetrexed)、卟啉霉素(porfiromycin)、普马司他(prinomastat)、RL 0903(Shire)、鲁比替康(rubitecan)、赛特铂(satraplatin)、苯乙酸钠、司巴膦酸(sparfosic acid)、SRL 172(SR Pharma)、SU 5416(SUGEN)、TA 077(Tanabe)、四硫钼酸盐、噻立拉斯汀(thaliblastine)、促血小板生成素、乙基初卟啉锡(tin ethyl etiopurpurin)、替拉扎明(tirapazamine)、癌症疫苗(Biomira)、黑素瘤疫苗(New York University)、黑素瘤疫苗(Sloan Kettering Institute)、黑素瘤溶瘤疫苗(New York Medical College)、病毒性黑素瘤细胞溶解疫苗(Royal Newcastle Hospital)或伐司扑达(valspodar)。

可以与本发明化合物组合使用的治疗剂的其他实例包括伊匹单抗曲美木单抗；加利昔单抗(galiximab)；纳武单抗，也称为BMS-936558派姆单抗阿维鲁单抗AMP224；BMS-936559；MPDL3280A，也称为RG7446；MEDI-570；AMG557；MGA271；IMP321；BMS-663513；PF-05082566；CDX-1127；抗OX40(Providence Health Services)；huMAbOX40L；阿塞西普(atacicept)；CP-870893；卢卡木单抗(lucatumumab)；达西珠单抗(dacetuzumab)；莫罗单抗(muromonab)-CD3；伊匹木单抗(ipilumumab)；MEDI4736；MSB0010718C；AMP 224；阿达木单抗ado-曲妥珠单抗-美坦新(emtansine)阿柏西普(aflibercept)阿仑单抗巴利昔单抗(basiliximab)贝利木单抗(belimumab)巴利昔单抗贝利木单抗贝伦妥单抗维多汀(brentuximab vedotin)；卡那单抗(canakinumab)培塞利珠单抗(certolizumab pegol)达利珠单抗达雷木单抗(daratumumab)地诺舒单抗(denosumab)依库珠单抗(eculizumab)依法利珠单抗(efalizumab)吉妥珠单抗奥佐米星(gemtuzumab ozogamicin)戈利木单抗(golimumab)替伊莫单抗英夫利昔单抗(infliximab)莫他珠单抗(motavizumab)那他珠单抗(natalizumab)奥滨妥珠单抗(obinutuzumab)奥法木单抗(ofatumumab)奥马珠单抗(omalizumab)帕利珠单抗(palivizumab)帕妥珠单抗(pertuzumab)帕妥珠单抗雷尼珠单抗(ranibizumab)雷西巴库单抗(raxibacumab)托西珠单抗(tocilizumab)；托西莫单抗；托西莫单抗-i-131；托西莫单抗与托西莫单抗-i-131优特克单抗(ustekinumab)AMG 102；AMG 386；AMG 479；AMG 655；AMG 706；AMG 745；以及AMG 951。

在一些实施方案中，与本发明化合物一起用于组合疗法中的其他化合物选自由以下组成的组：CDK4/6抑制剂(例如阿贝西尼、帕博西尼或瑞博西尼)、KRAS:GDP G12C抑制剂(例如AMG 510、MRTX 1257)或其他突变Ras:GDP抑制剂、KRAS:GTP G12C抑制剂或其他突变Ras:GTP抑制剂、MEK抑制剂(例如瑞法替尼、司美替尼、曲美替尼或考比替尼)、SHP2抑制剂(例如TNO155、RMC-4630)、ERK抑制剂和RTK抑制剂(例如EGFR抑制剂)。

在一些实施方案中，与本发明化合物一起用于组合治疗的其他化合物选自由以下组成的组：ABT-737、AT-7519、卡非佐米、考比替尼、达努舍替(danusertib)、达沙替尼(dasatinib)、阿霉素、GSK-343、JQ1、MLN-7243、NVP-ADW742、太平洋紫杉醇、帕博西尼和伏拉塞替(volasertib)。在一些实施方案中，与本发明化合物一起用于组合治疗的其他化合物选自由以下组成的组：来那替尼(neratinib)、阿昔替尼(acetinib)和逆转素(reversine)。

取决于所治疗的疾患，本文描述的化合物可以与本文公开的剂或其他合适的剂组合使用。因此，在一些实施方案中，一种或多种本发明化合物将与如本文所描述的其他疗法共同施用。当用于组合疗法中时，本文所描述的化合物可以与第二剂同时或分开施用。这种组合施用可以包括以相同剂型同时施用两种剂、以单独剂型同时施用以及分开施用。即，本文描述的化合物和本文描述的任何剂都可以共同配制在相同剂型中并同时施用。替代地，可以同时施用本发明化合物和本文描述的任何疗法，其中两种剂都存在于单独的制剂中。在另一个替代方案中，可以依次施用本发明化合物和本文描述的任何疗法，或顺序相反。在分开施用方案的一些实施方案中，本发明化合物和本文描述的任何疗法相隔数分钟、相隔数小时或相隔数天施用。

在一些实施方案中，组合治疗方案采用两种治疗剂，一种是本发明化合物，并且第二种选自本文描述的治疗剂。在一些实施方案中，组合治疗方案采用三种治疗剂，一种是本发明化合物，并且两种选自本文描述的治疗剂。在一些实施方案中，组合治疗方案采用四种或更多种治疗剂，一种是本发明化合物并且三种选自本文描述的治疗剂。

在本文描述的任何方法的一些实施方案中，第一疗法(例如本发明化合物)和一种或多种其他疗法同时或以任一顺序相继施用。第一治疗剂可以在一种或多种其他疗法前后多达1小时、多达2小时、多达3小时、多达4小时、多达5小时、多达6小时、多达7小时、多达8小时、多达9小时、多达10小时、多达11小时、多达12小时、多达13小时、14小时、多达16小时、多达17小时、多达18小时、多达19小时、多达20小时、多达21小时、多达22小时、多达23小时、多达24小时、或多达1-7天、1-14天、1-21天或1-30天立即施用。

本发明还提供了药盒，其包括(a)包括本文描述的剂(例如本发明化合物)的药物组合物，和(b)具有执行本文描述的任何方法的说明书的包装插页。在一些实施方案中，所述药盒包括(a)包括本文描述的剂(例如本发明化合物)的药物组合物，(b)一种或多种其他疗法(例如非药物治疗或治疗剂)，以及(c)具有执行本文描述的任何方法的说明书的包装插页。

由于本发明一方面考虑用可以分开施用的药用活性化合物的组合来治疗疾病或其相关症状，故本发明还涉及将单独的药物组合物组合为药盒形式。所述药盒可以包含两种单独的药物组合物：本发明化合物，和一种或多种其他疗法。所述药盒可以包括含有单独组合物的容器，如分配瓶或分配箔包。容器的其他实例包括注射器、盒子和袋子。在一些实施方案中，所述药盒可以包括关于使用单独组分的指导。当单独的组分优选地以不同的剂型(例如口服和肠胃外)施用时、以不同的剂量间隔施用时或当开处方的健康护理专业人士需要滴定组合的个别组分时，药盒形式特别有利。

在这个组合疗法部分中，关于所描述的剂，所有参考文献都以引用的方式并入，无论明确阐述如此与否。

实施例

通过以下实施例和合成实施例进一步说明本发明，所述实施例和合成实施例不应当被视为将本发明的范围或精神限制在本文描述的具体程序。应当理解，提供所述实施例以说明某些实施方案并且不希望借此限制本发明的范围。还应当理解，在不脱离本发明的精神和/或所附权利要求书的范围的情况下，可诉诸于本领域技术人员可能想到的各个其他实施方案、其修改形式和等效形式。

以下实施例和本文其他部分使用的定义为：

CH2Cl2、DCM 亚甲基氯、二氯甲烷

ACN、CH3CN、MeCN 乙腈

DAST 二乙氨基三氟化硫

DCE 二氯乙烷

DIEA N,N-二异丙基乙胺

DIPEA 二异丙基乙胺

DMA 二甲基乙酰胺

DMF N,N-二甲基甲酰胺

EtOAc 乙酸乙酯

h 小时

H2O 水

HCl 盐酸

K3PO4 磷酸(三)钾

MeOH 甲醇

Na2SO4 硫酸钠

NCS N-氯代琥珀酰亚胺

NMP N-甲基吡咯烷酮

rt 室温

T3P 丙烷膦酸酐

TBAF 四丁基氟化铵

TEA 三乙胺

TFA 三氟乙酸

THF 四氢呋喃

TMSBr 三甲基溴硅烷

TMSCF3 三氟甲基三甲基硅烷

实施例1.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向2,4-二氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶(105mg，551μmol)和TEA(230μL，1.65mmol)在DCM(1mL)中的混合物加入吗啉-4-羰基氯(64μL，551.44μmol)，在25℃下将混合物搅拌1小时，然后在减压下浓缩。通过制备型TLC纯化粗残余物，得到(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(20mg，12％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H13Cl2N4O2计算值:303.0；实验值303.1。

步骤2.

向(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(20mg，66μmol)和3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺盐酸盐(21mg，86μmol)在n-BuOH(1mL)中的混合物加入DIEA(114.92μL，660μmol)。在100℃下将混合物搅拌2小时，冷却至室温并过滤。在减压下去除溶剂并通过制备型HPLC纯化粗产物，得到[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(6mg，19％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H23ClF3N6O2计算值:471.1；实验值471.0；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.91(d,J＝9.54Hz,2H)6.81(s,1H)5.29-5.38(m,1H)4.54-4.65(m,4H)3.68-3.76(m,4H)3.33-3.36(m,4H)1.54(d,J＝7.09Hz 3H,)。

实施例2.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H,8H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在20℃下向2,4-二氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(0.2g，660μmol)在DCM(3mL)中的混合物加入TFA(1mL)。在20℃下将混合物搅拌12小时，然后浓缩，得到2,4-二氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶(0.21g)，呈黄色固体状，未进行进一步纯化就用于下一步。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 4.41(s,2H)3.62(t,J＝6.28Hz,2H)3.21(t,J＝6.28Hz,2H)。

步骤2.

向2,4-二氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶三氟乙酸盐(0.21g，660μmol)在THF(5mL)中的混合物加入吗啉-4-羰基氯(77μL，660μmol)和TEA(460μL，3.3mmol)。在20℃下将混合物搅拌1小时，然后在减压下浓缩。通过硅胶色谱纯化粗残余物，得到(2,4-二氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(0.2g，95％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 4.42(s,2H)3.66-3.74(m,4H)3.60(t,J＝5.84Hz,2H)3.33-3.38(m,4H)3.01(t,J＝5.84Hz,2H)。

步骤3.

向(2,4-二氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(0.2g，630μmol)在丁-1-醇(4mL)中的混合物加入3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺盐酸盐(182mg，757μmol)和DIEA(1.1mL，6.31mmol)。在90℃下将混合物搅拌3小时，然后在减压下浓缩。通过硅胶色谱纯化粗残余物，得到[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(0.28g，71％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.94(s,1H)6.91(s,1H)6.81(s,1H)5.39(q,J＝7.06Hz,1H)4.16(s,2H)3.68-3.71(m,4H)3.53(t,J＝5.84Hz,2H)3.32-3.37(m,4H)2.75(s,2H)1.56(d,J＝7.06Hz,3H)。

步骤4.

向[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(0.28g，577μmol)在DME(3mL)中的溶液加入甲基硼酸(242mg，4.0mmol)、H2O(0.6mL)、Na2CO3(367mg，3.5mmol)和Pd(PPh3)4([1,1′-双(二苯基膦)二茂铁]二氯钯(II)，133mg，115μmol)。在100℃下将反应物搅拌16小时，冷却至室温并在减压下浓缩。通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(6mg，2％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.93(s,2H)6.78(s,1H)5.43-5.50(m,1H)4.16(s,2H)3.65-3.76(m,4H)3.54(t,J＝5.95Hz,2H)3.33(br s,4H)3.31-3.35(m,1H)2.74(t,J＝5.62Hz,2H)2.33(s,3H)1.54(d,J＝7.06Hz,3H)；LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H28F3N6O2计算值:465.2；实验值465.2。

实施例3.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H,8H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向2,4-二氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶(200mg，980μmol)和吗啉-4-羰基氯(137μL，1.18mmol)在THF(5mL)中的溶液加入TEA(409μL，2.94mmol)。在0℃下将混合物搅拌0.5小时，然后升温至25℃后维持2小时。加入水(20mL)，并且用EtOAc萃取混合物。用盐水洗涤合并的有机相，并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过制备型TLC纯化粗残余物，得到(2,4-二氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(150mg，48％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 4.30(s,2H)3.61-3.55(m,4H)3.49(t,J＝5.75Hz,2H)3.25-3.19(m,4H)2.96(t,J＝5.69Hz,2H)。

步骤2.

向(2,4-二氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(50mg，157μmol)和3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(41mg，205μmol)在EtOH(2mL)中的溶液加入DIEA(82μL，473μmol)。在100℃下将混合物搅拌3小时，冷却至室温，并且在减压下去除溶剂。通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(15mg，19％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H25ClF3N6O2计算值:485.2；实验值485.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.94(s,1H)6.91(s,1H)6.81(s,1H)5.39(q,J＝7.05Hz,1H)4.16(s,2H)3.71-3.66(m,4H)3.53(t,J＝5.81Hz,2H)3.35-3.32(m,4H)2.75(t,J＝5.62Hz,2H)1.56(d,J＝6.97Hz,3H)。

实施例4.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向4-氧代吡咯烷-1,3-二甲酸O1-叔丁酯O3-乙酯(4g，15.6mmol)和盐酸乙脒(1.47g，15.6mmol)在t-BuOH(40mL)中的混合物加入TEA(5.6mL，40.4mmol)。在90℃下将混合物搅拌1小时，冷却至室温，并且在减压下去除溶剂。通过反相柱纯化粗产物，得到4-羟基-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(1g，25％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H18N3O3计算值:252.1；实验值:252.3。

步骤2.

向4-羟基-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(440mg，1.75mmol)和PPh3(918mg，3.5mmol)在DCE(4mL)中的混合物加入CCl4(505μL，5.25mmol)。在70℃下将混合物搅拌3小时。将反应物冷却至室温，并且在减压下去除溶剂，得到粗残余物，将其与另一批(80mmol起始物质)合并以便通过柱色谱进行纯化，得到4-氯-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(460mg，67％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ＝4.73-4.59(m,4H),2.71-2.61(m,3H),1.58-1.48(m,9H)。

步骤3.

向4-氯-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(200mg，741μmol)和3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(196mg，964μmol)在n-BuOH(2mL)中的混合物加入DIEA(387μL，2.2mmol)。在110℃下将混合物搅拌12小时，冷却至室温，并且在减压下去除溶剂。通过柱色谱纯化粗残余物，得到4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(250mg，77％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ＝6.96-6.87(m,2H),6.81-6.76(m,1H),5.46-5.34(m,1H),4.54-4.40(m,4H),2.42-2.35(m,3H),2.01(s,2H),1.52(d,J＝2.0Hz,10H)。

步骤4.

将4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(140mg，320μmol)溶解在HCl/MeOH(3mL)中。在室温下搅拌1小时之后，在减压下去除溶剂，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(119mg，99％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ＝7.91-7.81(m,2H),7.62-7.58(m,1H),5.72-5.64(m,1H),4.76-4.62(m,4H),2.59-2.54(m,3H),1.73-1.64(m,3H)。

步骤5.

在0℃下向N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(110mg，294.27μmol)在THF(2mL)中的混合物加入TEA(163μL，1.18mmol)和吗啉-4-羰基氯(34μL，294μmol)。在25℃下将混合物搅拌30分钟，在减压下去除溶剂，并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮甲酸盐(41mg，27％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H26F3N6O2计算值:450.3；实验值:450.3；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ＝8.21(s,1H),6.96-6.87(m,2H),6.84-6.78(m,1H),5.46-5.36(m,1H),4.60(d,J＝17.0Hz,4H),3.75-3.71(m,4H),3.38-3.35(m,4H),2.40(s,3H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例5.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(氧戊环-3-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向四氢呋喃-3-甲酸(20μL，205μmol)、2,4-二氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶三氟乙酸盐(52mg，171μmol)在THF(1mL)中的溶液加入DIPEA(89μL，513μmol)和T3P(76μL，257μmol)。在20℃下将混合物搅拌0.5小时。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到(4,6-二氯-1,3-二氢吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基)-四氢呋喃-3-基-甲酮(20mg，70μmol)，呈白色固体状。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 4.89-4.98(m,2H)4.85(d,J＝13.94Hz,2H)4.06-4.15(m,1H)3.96-4.03(m,4H)3.87-3.95(m,4H)3.78-3.87(m,2H)3.18-3.29(m,1H)3.07-3.17(m,2H)2.10-2.32(m,6H)。

步骤2.

向(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-四氢呋喃-3-基-甲酮(20mg，70μmol)和3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(18mg，90μmol)在n-BuOH(1mL)中的溶液加入DIEA(121μL，694μmol)。在100℃下将混合物搅拌2小时，冷却至室温，并且在减压下去除溶剂。通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-四氢呋喃-3-基-甲酮(6mg，19％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H21ClF3N5O2计算值:455.9；实验值456.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.97-8.02(m,1H)7.84-7.88(m,1H)6.80-6.88(m,2H)6.72-6.78(m,1H)5.31-5.40(m,2H)5.16-5.28(m,1H)4.69(dd,J＝4.41,1.54Hz,2H)4.40-4.53(m,2H)3.91-4.00(m,1H)3.69-3.82(m,3H)3.19-3.31(m,1H)2.16(d,J＝7.28Hz,2H)1.44-1.52(m,3H)。

实施例6.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-(氧戊环-3-羰基)-5H,6H,7H,8H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向四氢呋喃-3-甲酸(76μL，792μmol)和2,4-二氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶三氟乙酸盐(0.21g，660μmol)在THF(5mL)中的混合物加入DIEA(345μL，1.98mmol)、T3P(295μL，990μmol)。在25℃下将混合物搅拌0.5小时，然后在减压下浓缩。通过硅胶色谱纯化粗残余物，得到(2,4-二氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)-四氢呋喃-3-基-甲酮(0.1g，50％产率)，呈白色固体状。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 4.69-4.79(m,2H)3.78-4.03(m,6H)3.48-3.63(m,1H)3.04(t,J＝5.87Hz,1H)2.94(t,J＝5.75Hz,1H)2.06-2.30(m,2H)。

步骤2.

向(2,4-二氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)-四氢呋喃-3-基-甲酮(0.1g，331μmol)在丁-1-醇(1mL)中的溶液加入3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺盐酸盐(88mg，364μmol)和DIEA(576μL，3.31mmol)。在90℃下将混合物搅拌4小时，然后在减压下浓缩。通过制备型TLC纯化粗残余物，得到[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-四氢呋喃-3-基-甲酮(0.13g，84％产率)。

步骤3.

向[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-四氢呋喃-3-基-甲酮(130mg，277μmol)在二恶烷(2mL)中的溶液加入甲基硼酸(99mg，1.7mmol)、H2O(0.4mL)、K3PO4(352mg，1.7mmol)和Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(45mg，55μmol)。在80℃下，在N2下将混合物搅拌2小时。冷却至室温之后，在减压下去除溶剂，并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到呈甲酸盐形式的[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-四氢呋喃-3-基-甲酮(10mg，8％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H27F3N5O2计算值:450.2；实验值450.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.93(br d,J＝9.66Hz,2H)6.79(br s,1H)5.40-5.57(m,1H)4.49(d,J＝5.01Hz,2H)3.77-4.04(m,7H)3.52-3.60(m,1H)2.64-2.84(m,2H)2.37(s,3H)2.00-2.27(m,2H)1.53-1.62(m,3H)。

实施例7.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-羰基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的合成

步骤1.

在0℃下，在氩气氛下将四氢呋喃-3-羰基氯(106mg，0.79mmol)在无水DCM(0.4mL)中的溶液加入2,4-二氯-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因盐酸盐(0.2g，0.79mmol)在DCM(6mL)和TEA(0.49mL，3.54mmol)中的溶液。搅拌12小时之后，用DCM稀释反应物并且用水和盐水依次洗涤。使所合并的有机相经Na2SO4干燥，在减压下去除溶剂并且通过快速色谱纯化粗产物，得到2,4-二氯-7-(氧戊环-3-羰基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因(122mg，49％产率)。UPLC(ESI):m/z:[M H]C13H15Cl2N3O2计算值:316.2；实验值316.5。

步骤2.

在150℃下，在微波反应器中将2,4-二氯-7-(氧戊环-3-羰基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因(122mg，0.39mmol)、DIPEA(269μL，1.54mmol)和(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙-1-胺盐酸盐(115mg，0.42mmol)在无水DMSO(3.5mL)中的脱气混合物搅拌1小时。冷却至室温之后，用水稀释反应物并且用Et2O萃取。用水洗涤所合并的有机相，并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过快速柱色谱纯化粗产物，得到2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟-甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-羰基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并-[4,5-d]吖庚因-4-胺(130mg，66％产率)。¹H NMR(300MHz,三氯甲烷-d)δ8.44(s,1H),8.39(s,1H),8.03(d,J＝13.1Hz,1H),5.51(bs,1H),5.46–5.34(m,1H),4.07–3.92(m,2H),3.84(dd,J＝27.2,10.9Hz,6H),3.29–3.13(m,3H),2.74(s,2H),2.10(dd,J＝13.3,6.0Hz,2H),1.69(d,J＝6.9Hz,3H)。

步骤3.

向2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-羰基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并-[4,5-d]吖庚因-4-胺(130mg，0.25mmol)在EtOH(2.5mL)中的溶液加入铁粉(78mg，1.39mmol)和HCl水溶液(1M，1.0mL，1.0mmol)。在70℃下将混合物搅拌12小时。将反应混合物滤过Celite，用MeOH洗涤，并且在减压下去除溶剂。通过制备型HPLC纯化粗产物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟-甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-羰基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺(40mg，33％产率)。LCMS(ESI):UPLC(ESI):m/z:[M H]C22H25ClF3N5O2计算值:483.9；实验值484.1；¹H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ6.98–6.84(m,2H),6.79(s,1H),5.39–5.20(m,1H),3.93(q,J＝7.9Hz,1H),3.88–3.66(m,6H),3.44(p,J＝7.9Hz,1H),3.09–2.93(m,2H),2.84(dt,J＝11.7,6.4Hz,2H),2.23–1.98(m,2H),1.98–1.84(m,1H),1.61–1.45(m,3H)。

实施例8.顺式-4-(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)环己-1-醇的合成

步骤1.

向2,4-二氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶盐酸盐(200mg，883μmol)在DCM(1.4mL)和AcOH(0.6mL)中的混合物加入NaBH(OAc)3(468mg，2.21mmol)和4-羟基环己酮(101mg，883μmol)。在25℃下将混合物搅拌3小时，然后过滤。在减压下去除溶剂，并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到顺式-4-(2,4-二氯-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-基)环己醇(60mg，208.21μmol，23.58％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H16Cl2N3O计算值:288.1；实验值287.8。

步骤2.

向顺式-4-(2,4-二氯-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-基)环己醇(58mg，201.27μmol，1当量)在n-BuOH(1mL)中的混合物加入3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(53mg，262μmol)和DIEA(351μL，2.0mmol)。在100℃下将混合物搅拌8小时，冷却至室温并过滤。在减压下去除溶剂，并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到顺式-4-(4-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-氯-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-基)环己醇(8mg，9％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H26ClF3N5O计算值:456.2；实验值456.0；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.90(d,J＝8.31Hz,2H)6.80(s,1H)5.26-5.35(m,1H)3.84(d,J＝19.44Hz,5H)2.50-2.59(m,1H)1.68-1.84(m,6H)1.56-1.65(m,2H)1.52(d,J＝6.97Hz,3H)。

实施例9.反式-4-(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)环己-1-醇的合成

反式-4-(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)环己-1-醇是以类似于顺式-4-(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)环己-1-醇的方式合成，但顺式-4-(2,4-二氯-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-基)环己醇被替换为反式-4-(2,4-二氯-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-基)环己醇。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H26ClF3N5O计算值:456.2；实验值456.0；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.89(d,J＝6.48Hz,2H,)6.80(s,1H)5.30(d,J＝5.99Hz,1H)3.84(d,J＝18.58Hz,4H)3.51-3.58(m,1H)2.48(s,1H)1.96-2.10(m,4H)1.52(d,J＝7.09Hz,3H)1.29-1.37(m,4H)。

实施例10.顺式-4-(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-N,N-二甲基环己烷-1-甲酰胺的合成

步骤1.

向2,4-二氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶三氟乙酸盐(1.68g，5.53mmol)和N,N-二甲基-4-氧代-环己甲酰胺(935mg，5.53mmol)在DCM(11.2mL)中的混合物加入乙酸(4.8mL)和NaBH(OAc)3(4.10g，19.3mmol)。在25℃下将混合物搅拌3小时。在减压下去除溶剂，并且将残余物溶于H2O中。用EtOAc萃取混合物，用盐水洗涤所合并的有机相并且经NaSO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到顺式-4-(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-N,N-二甲基-环己甲酰胺(500mg，26％产率)和反式-4-(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-N,N-二甲基-环己甲酰胺(150mg，8％产率。LCMS(ESI):m/z:[M H]C15H21Cl2N4O计算值:343.10；实验值343.2。

步骤2.

向3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(93mg，454μmol)和顺式-4-(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-N,N-二甲基-环己甲酰胺(120mg，350μmol)在n-BuOH(1mL)中的溶液加入DIEA(609μL，3.5mmol)。在100℃下将混合物搅拌5小时，冷却至室温，并且在减压下去除溶剂。通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到顺式-4-[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-N,N-二甲基-环己甲酰胺(20mg，11％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C24H31ClF3N6O计算值:511.2；实验值511.1；¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 6.96(s,1H)6.82(br d,J＝9.66Hz,2H)5.28-5.39(m,1H)4.75(br d,J＝2.08Hz,1H)3.92(br s,2H)3.83(br s,2H)3.75(br s,2H)3.05(s,3H)2.93(s,3H)2.69(br s,1H)2.61(br s,1H)1.95(br d,J＝11.74Hz,4H)1.58(s,3H)1.45-1.55(m,4H)。

实施例22.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-四氢吡喃-4-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向2,4-二氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(150mg，493μmol)在t-BuOH(0.5mL)中的混合物加入DIPEA(859μL，4.93mmol)和3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(121mg，0.59mmol)。在80℃下将混合物搅拌3小时，在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(0.15g，25％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.94(s,1H),6.91(s,1H),6.82-6.79(m,1H),5.45-5.30(m,1H),4.39-4.31(m,2H)。

步骤2.

向4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(150mg，0.32mmol)在DCM(0.9mL)中的混合物加入TFA(0.3mL)。在室温下将混合物搅拌30分钟，并且在减压下去除溶剂，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺TFA盐(0.15g，97％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.46(s,1H),7.39(s,1H),7.26(s,1H),5.48-5.33(m,1H),4.18(s,2H),3.56-3.53(m,2H),2.96-2.93(m,2H),1.61(d,J＝4.0Hz,3H)。

步骤3.

向N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺TFA盐(150mg，0.31mmol)在DMF(1mL)中的混合物加入Cs2CO3(805mg，2.47mmol)和4-碘四氢吡喃(327mg，1.54mmol)。在100℃下将混合物搅拌2小时，在减压下去除溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物(2次)，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-四氢吡喃-4-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(5mg，3.5％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H26ClF3N5O计算值:456.2；实验值456.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.91(s,1H)6.89(s,1H)6.80(s,1H)5.42-5.33(m,1H)4.08-4.00(m,2H)3.54-3.40(m,4H)2.92-2.87(m,2H)2.75-2.71(m,3H)1.93(d,J＝12.0Hz,2H)1.74-1.64(m,2H)1.55(d,J＝4.0Hz,3H)。

实施例177.(R)-6-(氮杂环丁-3-基)-2-氯-N-(1-(3-(三氟甲基)苯基)乙基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺的合成

(R)-6-(氮杂环丁-3-基)-2-氯-N-(1-(3-(三氟甲基)苯基)乙基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺是以类似于实施例22的方式合成。

实施例23.[2-氯-4-[1-[5-[2-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]-2-噻吩基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

对1-甲基-4-[[2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)苯基]甲基]哌嗪(1.7g，5.4mmol)、1-(5-溴-2-噻吩基)乙酮(1.21g，5.91mmol)、K2CO3(2.23g，16.13mmol)、Pd(PPh3)4(621mg，538μmol)在1,4-二恶烷(5mL)和H2O(1mL)中的混合物进行脱气，并且用N2吹扫(3次)。在N2气氛下将混合物加热至110℃并搅拌4小时，然后用H2O(10mL)稀释并且用EtOAc(5mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并通过柱色谱纯化粗残余物，得到1-[5-[2-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]-2-噻吩基]乙烯酮(1g，59％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C18H23N2OS计算值:315.15；实验值315.1。

步骤2.

向1-[5-[2-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]-2-噻吩基]乙酮(800mg，2.54mmol)在THF(5mL)中的混合物中加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(617mg，5.09mmol)和Ti(OEt)4(2.1mL，10.2mmol)。将混合物加热至80℃并搅拌16小时。将混合物冷却至0℃，然后加入LiBH4(222mg，10.2mmol)和MeOH(103μL，2.54mmol)，并且使混合物升温至室温并搅拌1小时。加入H2O(25mL)，过滤混合物，在减压下浓缩，并且通过柱色谱纯化残余物，得到2-甲基-N-[1-[5-[2-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]-2-噻吩基]乙基]丙烷-2-亚磺酰胺(620mg，58％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.49-7.30(m,5H),7.09-7.06(m,2H),4.78(q,J＝6.8Hz,1H),3.33(s,2H),3.04-2.97(m,2H),2.77(dd,J＝8.8,4.4Hz,5H),2.55-2.50(m,2H),1.68(d,J＝6.4Hz,3H),1.23(s,9H)。

步骤3.

在室温下将2-甲基-N-[1-[5-[2-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]-2-噻吩基]乙基]丙烷-2-亚磺酰胺(620mg，1.48mmol)在4M HCl/MeOH(1mL，4mmol)中的混合物搅拌1小时。在减压下浓缩混合物，得到1-[5-[2-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]-2-噻吩基]乙胺(300mg，64％产率)。

步骤4.

向1-[5-[2-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]-2-噻吩基]乙胺(100mg，0.32mmol)在t-BuOH(1mL)中的混合物加入DIPEA(221μL，1.27mmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(96mg，0.32mmol)。将混合物加热至80℃并搅拌4小时，在减压下浓缩溶剂，并通过制备型HPLC纯化残余物，得到[2-氯-4-[1-[5-[2-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]-2-噻吩基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(50mg，24％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C29H37ClN7O2S计算值:582.23；实验值582.3；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.43-7.37(m,2H),7.34-7.28(m,2H),7.10-7.04(m,2H),5.75(d,J＝6.8Hz,1H),4.61(s,4H),3.75-3.70(m,4H),3.52(s,2H),3.39-3.35(m,4H),2.41(s,8H),2.25(s,3H),1.72(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例24.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-吗啉基磺酰基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(200mg，0.69mmol)和3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(169mg，0.83mmol)在n-BuOH(4mL)中的混合物加入DIPEA(1.2mL，6.9mmol)。将混合物加热至100℃并搅拌2小时，在减压下浓缩溶剂并且通过柱色谱纯化残余物，得到4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(300mg，95％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H24ClF3N5O2计算值:458.15；实验值458.2。

步骤2.

在室温下将4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(150mg，0.33mmol)在TFA(1mL)和DCM(3mL)中的混合物搅拌30分钟。在减压下浓缩混合物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺TFA盐(154mg，100％产率)。

步骤3.

在0℃下向N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(154mg，0.33mmol)和吗啉-4-磺酰氯(61mg，0.33mmol)在DCM(3mL)中的混合物滴加TEA(454μL，3.3mmol)。使混合物升温至室温，搅拌1小时并过滤。在减压下浓缩溶剂，并通过制备型HPLC纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-吗啉基磺酰基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(46mg，27％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C19H23ClF3N6O3S计算值:507.11；实验值507.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.12(d,J＝8.2Hz,1H),6.82(s,1H),6.76(s,1H),6.71(s,1H),5.57(s,2H),5.18(t,J＝7.2Hz,1H),4.52-4.40(m,4H),3.67-3.59(m,4H),3.20-3.13(m,4H),1.43(d,J＝7.0Hz,3H)。

以下表1中的实施例是以类似于实施例24的方式合成。

表1.实施例25-28和178

实施例29.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-吗啉基磺酰基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在0℃下向2,4-二氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶TFA盐(209mg，0.66mmol)和吗啉-4-磺酰氯(610mg，3.3mmol)在DCM(6mL)中的混合物滴加TEA(1.83mL，13.1mmol)。在0℃下将混合物搅拌30分钟，然后在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到4-[(2,4-二氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)磺酰基]吗啉(160mg，69％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H15Cl2N4O3S计算值:353.02；实验值353.0；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 4.40(s,2H),3.63(dd,J＝5.4,2.5Hz,6H),3.20-3.14(m,4H),3.01(s,2H)。

步骤2.

向4-[(2,4-二氯-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)磺酰基]吗啉(160mg，0.45mmol)和3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(111mg，0.54mmol)在n-BuOH(4mL)中的混合物加入DIPEA(789μL,4.53mmol)。将混合物加热至100℃并搅拌10小时。过滤混合物，在减压下浓缩溶剂，并通过制备型HPLC纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-吗啉基磺酰基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(96mg，41％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H25ClF3N6O3S计算值:521.13；实验值521.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.68(d,J＝7.8Hz,1H),6.83(s,1H),6.77(s,1H),6.71(s,1H),5.57(s,2H),5.25(t,J＝7.3Hz,1H),4.18(s,2H),3.64-3.60(m,4H),3.52(t,J＝5.7Hz,2H),3.17-3.13(m,4H),2.70(t,J＝5.0Hz,2H),1.47(d,J＝7.0Hz,3H)。

以下表2中的实施例是以类似于实施例29的方式合成。

表2.实施例179-185

实施例30. 4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-6-四氢吡喃-4-基-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-7-酮的合成

步骤1.

向2,6-二氢嘧啶-4-甲酸(200mg，1.28mmol)和四氢吡喃-4-胺(194mg，1.92mmol)在EtOH(4mL)中的混合物加入37％HCHO水溶液(0.95mL，12.8mmol)。在卷曲小瓶中将混合物加热至90℃并搅拌10小时。冷却之后，加入H2O(1mL)，过滤混合物，并干燥滤饼，得到2,6-二羟基-5-[(四氢吡喃-4-基氨基)甲基]嘧啶-4-甲酸(120mg，35％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M-H]C11H14N3O5计算值:268.1；实验值268.0；¹H NMR(400MHz,D2O)δppm 3.91(dd,J＝12.0,2.4Hz,2H),3.49(s,2H),3.40(dt,J＝12.0,1.6Hz,2H),2.65(tt,J＝10.8,4.0Hz,1H),1.78(dd,J＝12.8,2.0Hz,2H),1.38-1.23(m,2H)。

步骤2.

向2,6-二羟基-5-[(四氢吡喃-4-基氨基)甲基]嘧啶-4-甲酸(120mg，0.45mmol)在2-甲氧基乙醇(0.7mL)中的混合物加入12M HCl(0.37mL，4.5mmol)。将混合物加热至130℃并搅拌18小时。将混合物冷却至室温，过滤并干燥滤饼，得到2,4-二羟基-6-四氢吡喃-4-基-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-7-酮(100mg，89％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 11.83(br s,1H),11.27(br s,1H),4.18(s,2H),4.16-4.07(m,1H),3.91(dd,J＝11.2,3.6Hz,2H),3.41(t,J＝11.2Hz,2H),1.78(dq,J＝12.0,4.0Hz,2H),1.68-1.60(m,2H)。

步骤3.

向2,4-二羟基-6-四氢吡喃-4-基-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-7-酮(100mg，0.4mmol)在DCE(3mL)中的混合物加入PPh3(418mg，1.59mmol)和CCl4(0.19mL，2.0mmol)。将混合物加热至60℃并搅拌12小时，然后过滤。在减压下浓缩溶剂，得到2,4-二氯-6-四氢吡喃-4-基-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-7-酮(75mg，65％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H12Cl2N3O2计算值:288.02；实验值288.0。

步骤4.

向2,4-二氯-6-四氢吡喃-4-基-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-7-酮(75mg，0.26mmol)在t-BuOH(0.5mL)中的混合物加入3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(64mg，0.31mmol)和DIPEA(91μL，0.52mmol)。在卷曲小瓶中将混合物加热至90℃并搅拌30分钟，然后过滤。在减压下浓缩溶剂，并通过制备型HPLC纯化残余物，得到4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-6-四氢吡喃-4-基-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-7-酮(55mg，45％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H22ClF3N5O2计算值:456.13；实验值456.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.60(br d,J＝7.8Hz,1H),6.85(s,1H),6.80(s,1H),6.72(s,1H),5.56(br s,2H),5.24(t,J＝7.2Hz,1H),4.32(s,2H),4.28-4.16(m,1H),3.96(m,2H),3.48-3.32(m,2H),1.73(m,4H),1.48(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例31. 2-氯-4-[1-[5-[2-(甲基氨基甲基)苯基]噻唑-2-基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

在N2气氛下向1-(5-溴噻唑-2-基)乙酮(0.8g，3.9mmol)在1,4-二恶烷(8mL)和H2O(1.6mL)中的混合物加入K2CO3(2.15g，15.5mmol)、N-甲基-N-[[2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(2.02g，5.8mmol)和Pd(PPh3)4(449mg，0.4mmol)。将混合物加热至85℃并搅拌16小时，然后冷却并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到N-[[2-(2-乙酰基噻唑-5-基)苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(0.8g，60％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H-^tBu]C14H15N2O3S计算值:291.0；实验值291.0。

步骤2.

向N-[[2-(2-乙酰基噻唑-5-基)苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(1.2g，3.46mmol)在THF(20mL)中的混合物加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(630mg，5.2mmol)和Ti(OEt)4(2.51mL，12.1mmol)。将混合物加热至80℃并搅拌2小时。将混合物冷却至0℃，缓慢加入MeOH(140μL，3.5mmol)和NaBH4(262mg，6.93mmol)，然后升温至室温并搅拌30分钟。过滤混合物，在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到N-[[2-[2-[1-(叔丁基亚磺酰基氨基)乙基]噻唑-5-基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(1g，64％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H34N3O3S2计算值:452.2；实验值452.2。

步骤3.

向N-[[2-[2-[1-(叔丁基亚磺酰基氨基)乙基]噻唑-5-基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(0.6g，1.33mmol)在MeOH(20mL)中的混合物加入4M HCl/MeOH(664μL，2.66mmol)。在室温下将混合物搅拌1小时，并在减压下浓缩溶剂，得到N-[[2-[2-(1-氨基乙基)噻唑-5-基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(462mg)，未进行进一步纯化就直接用于下一步。LCMS(ESI):m/z:[M H]C18H26N3O2S计算值:348.2；实验值348.2；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.70-7.62(m,1H),7.50-7.29(m,4H),4.98-4.89(m,1H),4.62-4.41(m,3H),2.86-2.67(m,4H),2.01-1.90(m,3H),1.52-1.49(m,3H)。

步骤4.

向N-[[2-[2-(1-氨基乙基)噻唑-5-基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(462mg，1.33mmol)在n-BuOH(5mL)中的混合物加入(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(403mg，1.33mmol)和DIPEA(695μL，4.0mmol)。将混合物加热至100℃并搅拌3小时，在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到N-[[2-[2-[1-[[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]噻唑-5-基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(0.3g，37％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C29H37ClN7O4S计算值:614.2；实验值614.2。

步骤5.

在室温下将N-[[2-[2-[1-[[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]噻唑-5-基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(200mg，0.33mmol)在4M HCl/MeOH(5mL)中的混合物搅拌1小时。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到2-氯-4-[1-[5-[2-(甲基氨基甲基)苯基]噻唑-2-基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(40mg，23％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C24H29ClN7O2S计算值:514.2；实验值514.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.54-8.42(m,1H),7.71(s,1H),7.63-7.44(m,4H),5.78-5.66(m,1H),4.69-4.58(m,4H),4.25-4.17(m,2H),3.77-3.68(m,4H),3.39-3.33(m,4H),2.61(s,3H),1.77(d,J＝7.1Hz,2H)。

实施例32.和实施例33.[2-氯-4-[1-[3-[2-(甲基氨基甲基)苯基]苯基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮和[2-甲氧基-4-[1-[3-[2-(甲基氨基甲基)苯基]苯基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

向N-甲基-N-[[2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(2.62g，7.54mmol)在1,4-二恶烷(16mL)和H2O(3.5mL)中的混合物加入1-(3-溴苯基)乙酮(1g，5.0mmol)、Pd(PPh3)4(581mg，0.5mmol)和K2CO3(2.78g，20.1mmol)。将混合物加热至85℃并搅拌16小时。冷却混合物，过滤，在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到N-[[2-(3-乙酰基苯基)苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(1.5g，4.42mmol，88％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.00(d,J＝6.2Hz,1H),7.89(s,1H),7.61-7.50(m,2H),7.43-7.33(m,2H),7.29(d,J＝7.6Hz,1H),7.23(d,J＝7.2Hz,1H),4.40(s,2H),2.63(s,5H),1.47-1.29(m,9H)。

步骤2.

在室温下经5分钟向N-[[2-(3-乙酰基苯基)苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(1g，2.95mmol)在THF(10mL)中的混合物加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(714mg，5.89mmol)和Ti(OEt)4(2.44mL，11.78mmol)。加入之后，将混合物加热至80℃并搅拌12小时。将混合物冷却至0℃，加入LiBH4(257mg，11.78mmol)，并且在0℃下将混合物搅拌2小时。在0℃下加入H2O(5mL)并过滤混合物。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到N-[[2-[3-[1-(叔丁基亚磺酰基氨基)乙基]苯基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(500mg，38％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.44-7.38(m,2H),7.37-7.30(m,3H),7.24(m,2H),7.20-7.16(m,1H),4.56-4.49(m,1H),4.41(d,J＝3.5Hz,1H),2.78-2.50(m,3H),1.54(d,J＝6.8Hz,3H),1.45-1.34(m,9H),1.24(s,9H)。

步骤3.

向N-[[2-[3-[1-(叔丁基亚磺酰基氨基)乙基]苯基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.12mmol)在MeOH(20mL)中的混合物加入4M HCl/MeOH(562μL，2.24mmol)。在室温下将混合物搅拌1小时，然后滴加NaOH/MeOH(5mL)，直到pH～8。在减压下浓缩溶剂，并且使残余物悬浮在DCM/MeOH(20mL)中，搅拌30分钟，过滤并在减压下浓缩溶剂，得到N-[[2-[3-(1-氨基乙基)苯基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(400mg)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.55-7.49(m,1H),7.45(d,J＝6.5Hz,1H),7.42-7.30(m,4H),7.28(d,J＝7.5Hz,1H),7.25-7.21(m,1H),4.49-4.38(m,3H),2.66(s,3H),1.63(d,J＝6.8Hz,3H),1.49-1.33(m,9H)。

步骤4.

向(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(178mg，0.58mmol)在n-BuOH(3mL)中的混合物加入N-[[2-[3-(1-氨基乙基)苯基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(200mg，0.58mmol)和DIPEA(307μL，1.76mmol)。将混合物加热至100℃并搅拌3小时，然后在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到N-[[2-[4-[1-[[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]噻唑-2-基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(250mg，69％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C32H40ClN6O4计算值:607.3；实验值607.3；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.44-7.37(m,2H),7.36-7.27(m,3H),7.23(t,J＝6.3Hz,2H),7.16(s,1H),5.37(d,J＝6.5Hz,1H),4.83(s,1H),4.67-4.51(m,4H),4.42-4.26(m,2H),3.75-3.68(m,4H),3.39-3.33(m,4H),2.59(d,J＝17.1Hz,3H),1.61(d,J＝7.1Hz,3H),1.47-1.29(m,9H)。

步骤5.

在室温下将N-[[2-[3-[1-[[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]苯基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.16mmol)在4M HCl/MeOH(2mL)中的混合物搅拌1小时。在减压下浓缩溶剂，然后用MeOH(10mL)稀释，并且通过滴加NaOH/MeOH将pH调节至～8。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到[2-氯-4-[1-[3-[2-(甲基氨基甲基)苯基]苯基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(5.6mg，6％产率)和[2-甲氧基-4-[1-[3-[2-(甲基氨基甲基)苯基]苯基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(3.6mg，4％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C27H32ClN6O2计算值:507.2；实验值507.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.49-7.39(m,4H),7.38-7.31(m,3H),7.27-7.18(m,2H),5.41(d,J＝6.6Hz,1H),4.65-4.54(m,4H),3.75-3.67(m,7H),3.38-3.33(m,5H),2.20(s,3H),1.61(d,J＝7.1Hz,3H)；LCMS(ESI):m/z:[M H]C28H35N6O3计算值:503.2；实验值503.3；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.47-7.37(m,3H),7.37-7.29(m,3H),7.24-7.16(m,2H),5.46-5.31(m,1H),4.59(s,2H),4.50(d,J＝1.8Hz,2H),3.77(s,3H),3.74-3.70(m,4H),3.62(s,2H),3.40-3.35(m,4H),2.14(s,3H),1.60(d,J＝7.1Hz,3H)。

实施例34.[2-氯-4-[1-[5-[2-(吗啉基甲基)苯基]-2-噻吩基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

1-[5-[2-(吗啉基甲基)苯基]-2-噻吩基]乙酮是以类似于1-[5-[2-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]-2-噻吩基]乙烯酮的方式合成，但1-甲基-4-[[2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)苯基]甲基]哌嗪被替换为4-[[2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)苯基]甲基]吗啉。LCMS(ESI):m/z:[M H]C17H20NO2S计算值:302.11；实验值302.1。

步骤2.

2-甲基-N-[(1R)-1-[5-[2-(吗啉基甲基)苯基]-2-噻吩基]乙基]丙烷-2-磺酰胺是以类似于2-甲基-N-[1-[5-[2-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]-2-噻吩基]乙基]丙烷-2-亚磺酰胺的方式合成，但1-[5-[2-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]-2-噻吩基]乙烯酮被替换为1-[5-[2-(吗啉基甲基)苯基]-2-噻吩基]乙烯酮。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H31N2O2S2计算值:407.17；实验值407.2；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.48-7.40(m,2H),7.34-7.28(m,2H),7.14(d,J＝3.2Hz,1H),7.02(d,J＝3.6Hz,1H),4.85(m,J＝6.2Hz,1H),3.70(s,4H),3.50(s,2H),2.46(s,4H),1.64(d,J＝6.4Hz,3H),1.25(s,9H)。

步骤3.

1-[5-[2-(吗啉基甲基)苯基]-2-噻吩基]乙胺是以类似于1-[5-[2-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]-2-噻吩基]乙胺的方式合成，但2-甲基-N-[1-[5-[2-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]-2-噻吩基]乙基]-丙烷-2-亚磺酰胺被替换为2-甲基-N-[(1R)-1-[5-[2-(吗啉基甲基)苯基]-2-噻吩基]乙基]-丙烷-2-磺酰胺。LCMS(ESI):m/z:[M H]C17H23N2OS计算值:303.15；实验值303.1。

步骤4.

[2-氯-4-[1-[5-[2-(吗啉基甲基)苯基]-2-噻吩基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮是以类似于[2-氯-4-[1-[5-[2-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]-2-噻吩基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的方式合成，但1-[5-[2-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]-2-噻吩基]乙胺被替换为1-[5-[2-(吗啉基甲基)苯基]-2-噻吩基]乙胺。LCMS(ESI):m/z:[M H]C28H34ClN6O3S计算值:569.20；实验值569.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.45-7.41(m,1H),7.41-7.36(m,1H),7.33-7.25(m,2H),7.07(d,J＝3.6Hz,1H),7.03(d,J＝3.6Hz,1H),5.76-5.68(m,1H),4.59(s,4H),3.74-3.67(m,4H),3.62-3.55(m,4H),3.49(s,2H),3.37-3.33(m,4H),2.37(s,4H),1.70(d,J＝6.6Hz,3H)。

实施例35.[1-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-4-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]哒嗪-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

在0℃下向1,4-二氯-6-三苯甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]哒嗪(1.5g，3.47mmol)在DCM(15mL)中的混合物加入TFA(2.57mL，34.7mmol)。在室温下将混合物搅拌4小时，然后在减压下浓缩溶剂，得到1,4-二氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]哒嗪TFA盐(1g)。

步骤2.

在0℃下向吗啉-4-羰基氯(1.15mL，9.87mmol)在DCM(10mL)中的混合物加入TEA(2.06mL，14.8mmol)和1,4-二氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]哒嗪(1g，3.3mmol)。在室温下将混合物搅拌5小时，在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到(1,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]哒嗪-6-基)-吗啉基-甲酮(100mg，10％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H13Cl2N4O2计算值:303.0；实验值303.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 4.95(s,4H),3.75-3.70(m,4H),3.42-3.37(m,4H)。

步骤3.

在室温下，在N2气氛下向(1,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]哒嗪-6-基)-吗啉基-甲酮(100mg，0.33mmol)在t-BuOH(1mL)中的混合物加入3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(142mg，0.69mmol)和DIPEA(289μL，1.65mmol)。在卷曲小瓶中将混合物加热至85℃并搅拌12小时。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到[1-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-4-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]哒嗪-6-基]-吗啉基-甲酮(6mg，4％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H23ClF3N6O2计算值:471.1；实验值471.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.93(d,J＝5.6Hz,2H),6.77(s,1H),5.31-5.24(m,1H),4.80-4.76(m,4H),3.76-3.71(m,4H),3.41-3.36(m,4H),1.56(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例36.(R)-N-(1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)-6-((6-氨基吡啶-3-基)磺酰基)-2-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向5-((4-甲氧基苯甲基)硫代)吡啶-2-胺(3.5g，14.2mmol)、DMAP(1.74g，14.2mmol)、DIPEA(7.4mL，42.6mmol)在DCM(120mL)中的混合物加入二碳酸二叔丁酯(18.6g，85.3mmol)。用N2吹扫混合物(3次)，在室温下搅拌16小时，然后用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机层用H2O(30mL×2)和盐水(30mL×2)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到N-叔丁氧羰基-N-[5-[(4-甲氧基苯基)甲基硫烷基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(2.5g，34％产率；注意：85％纯度)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H31N2O5S计算值:447.19；实验值:447.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.32(d,J＝2.4Hz,1H),7.82(dd,J＝8.4Hz,1H),7.26(m,3H),6.83(d,J＝8.8Hz,2H),4.24(s,2H),3.70(s,3H),1.37(s,18H)。

步骤2.

在0℃下向N-叔丁氧羰基-N-[5-[(4-甲氧基苯基)甲基硫烷基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(2.0g，4.5mmol)在AcOH(60mL)和H2O(15mL)中的混合物加入N-氯代琥珀酰亚胺(4.19g，31.4mmol)。使混合物升温至室温并搅拌5小时，然后用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机层用H2O(30mL×2)和盐水(30mL×2)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到N-叔丁氧羰基-N-(5-氯代磺酰基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(1.1g，38％产率；注意：60％纯度)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C15H22ClN2O6S计算值:393.08；实验值:393.0。

步骤3.

在-30℃下向4-氯-2-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶(80mg，0.47mmol)在DCM(6mL)中的混合物滴加TEA(197μL，1.42mmol)，然后在-30℃下滴加60％纯度的N-叔丁氧羰基-N-(5-氯代磺酰基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(309mg，0.47mmol)。使混合物升温至室温并搅拌1小时，然后用DCM(30mL×3)萃取。合并的有机层用H2O(30mL×2)和盐水(30mL×2)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型TLC纯化残余物，得到N-叔丁氧羰基-N-[5-[(4-氯-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)磺酰基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(190mg，33％产率；注意：75％纯度)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H29ClN5O6S计算值:526.14；实验值:526.2。

步骤4.

将N-叔丁氧羰基-N-[5-[(4-氯-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)磺酰基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(170mg，0.24mmol；注意：75％纯度)、(R)-3-(1-氨基乙基)-5-(三氟甲基)苯胺(74mg，0.36mmol)和DIPEA(127μL，0.73mmol)在n-BuOH(16mL)中的混合物用N2吹扫(3次)，然后加热至110℃并搅拌3.5小时。用EtOAc(20mL×3)萃取混合物，合并的有机层用H2O(20mL×2)和盐水(20mL×2)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型TLC纯化残余物，得到N-[5-[[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]磺酰基]-2-吡啶基]-N-叔丁氧羰基-氨基甲酸叔丁酯(100mg，49％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C31H39F3N7O6S计算值:694.26；实验值:694.2。

步骤5.

将N-[5-[[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]磺酰基]-2-吡啶基]-N-叔丁氧羰基-氨基甲酸叔丁酯(90mg，87μmol)在4M HCl/MeOH(5mL)中的混合物用N2脱气(3次)，然后在室温下搅拌1小时。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到(R)-N-(1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)-6-((6-氨基吡啶-3-基)磺酰基)-2-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(21mg，81％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H23F3N7O2S计算值:494.15；实验值:494.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.32(s,1H),7.20(d,J＝8.4Hz,1H),7.48(d,J＝8.0Hz,1H),6.98(s,2H),6.80(s,1H),6.75(s,1H),6.67(s,1H),6.50(d,J＝9.2Hz,1H)5.52(br s,2H),5.23(m,1H),4.29-4.34(m,4H),2.29(s,3H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例37.(R)-N-(1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基-6-(吗啉基磺酰基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向吗啉-4-磺酰氯(901mg，4.85mmol)在DCM(6mL)中的混合物加入含DIPEA(507μL，2.91mmol)和4-氯-2-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶HCl盐(0.1g，0.5mmol)的DCM(3mL)。在室温下将混合物搅拌13小时，然后加入MeOH(15mL)并且在减压下去除溶剂。将残余物与MeOH(2.5mL)一起湿磨并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到4-((4-氯-2-甲基-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-基)磺酰基)吗啉(0.07g)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H16ClN3O3S计算值:319.06；实验值319.0；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 4.68-4.75(m,4H),3.74-3.81(m,4H),3.28-3.35(m,4H),2.74(s,3H)。

步骤2.

向4-((4-氯-2-甲基-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-基)磺酰基)吗啉(0.05g，0.16mmol)和(R)-3-(1-氨基乙基)-5-(三氟甲基)苯胺(32mg，0.16mmol)在t-BuOH(5mL)中的混合物加入DIPEA(137μL，0.78mmol)。在卷曲小瓶中将混合物加热至85℃并搅拌21小时。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到(R)-N-(1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基-6-(吗啉基磺酰基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(16mg，15％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H26F3N6O3S计算值:487.17；实验值487.1；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 6.99(s,1H),6.81(br s,2H),5.36(br t,J＝6.8Hz,1H),4.66(br d,J＝6.2Hz,1H),4.44-4.57(m,4H),3.90(br s,2H),3.68-3.79(m,4H),3.20-3.30(m,4H),2.51(s,3H),1.58(s,3H)。

实施例38.(R)-N-(1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基-6-((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

将(R)-4-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-甲基-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-甲酸叔丁酯(150mg，0.34mmol)在4M HCl/MeOH(2mL)中的混合物脱气，并且用N2吹扫(3次)。在室温下将混合物搅拌3小时，然后在减压下浓缩溶剂，得到(R)-N-(1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(110mg，88％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C16H19F3N5计算值:338.15；实验值:338.1。

步骤2.

向(R)-N-(1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(110mg，0.33mmol)在i-PrOH(2mL)中的混合物加入DIPEA(284μL，1.63mmol)和4-甲基哌嗪-1-磺酰氯(65mg，0.33mmol)。在卷曲小瓶中将混合物加热至100℃并搅拌16小时。在减压下浓缩混合物，用H2O(2mL)稀释残余物并且用EtOAc(2mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(1mL)洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到(R)-N-(1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基-6-((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(75mg，46％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H29F3N7O2S计算值:500.2；实验值:500.2；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.00(s,1H),6.82(s,2H),5.36(s,1H),4.75(s,1H),4.41-4.61(m,4H),3.70(s,2H),3.34-3.39(m,4H),2.49-2.60(m,7H),2.37(s,3H),1.59(s,2H)。

实施例39.[2-氯-4-[1-[5-[2-(甲基氨基甲基)苯基]-2-噻吩基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

N-[[2-[5-[1-[[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]-2-噻吩基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯是以类似于N-[[2-[4-[1-[[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]噻唑-2-基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯的方式合成，但N-[[2-[3-(1-氨基乙基)苯基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯被替换为N-[[2-[5-(1-氨基乙基)-2-噻吩基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.35-7.38(m,2H),7.24-7.30(m,2H),7.00(s,1H),6.84(d,J＝2.8Hz,1H),5.72(s,1H),5.02(s,1H),4.53-4.67(m,6H),3.71(m,4H),3.33-3.40(m,4H),2.74(d,3H),1.73(d,J＝6.8,3H),1.46(m,9H)。

步骤2.

在室温下将N-[[2-[5-[1-[[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]-2-噻吩基]苯基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(0.06g，0.1mmol)在4M HCl/EtOAc(1mL)中的混合物搅拌1小时。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到[2-氯-4-[1-[5-[2-(甲基氨基甲基)苯基]-2-噻吩基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮HCl盐(15.2mg，28％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C25H29ClN6O2S计算值:513.18；实验值513.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.56-7.60(m,1H),7.48-7.53(m,3H),7.14(d,J＝3.6Hz,1H),7.00(d,J＝3.6Hz,1H),5.75-5.8(m,1H),4.65(d,J＝7.2Hz,4H),4.34(s,2H),3.72(t,J＝4.8Hz,4H),3.37(t,J＝4.8Hz,4H),2.65(s,3H),3.68(s,3H),1.74(m,3H)。

实施例40.[2-氯-4-[1-[3-羟基-5-(三氟甲基)苯基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

向(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(100mg，0.33mmol)和3-(1-氨基乙基)-5-(三氟甲基)苯酚(68mg，0.33mmol)在n-BuOH(1mL)中的混合物加入DIPEA(115μL，0.66mmol)。将混合物加热至80℃并搅拌3小时。过滤混合物，在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到[2-氯-4-[1-[3-羟基-5-(三氟甲基)苯基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(20mg，13％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M-H]C20H22ClF3N5O3计算值:472.13；实验值472.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.18-10.04(br m,1H),8.14(br d,J＝7.6Hz,1H),7.16(s,1H),7.03(s,1H),6.90(s,1H),5.32-5.18(m,1H),4.64-4.45(m,4H),3.61(d,J＝4.4Hz,4H),3.24(d,J＝4.0Hz,4H),1.47(d,J＝7.2Hz,3H)。

实施例41.[4-[1-(3-氨基-5-乙基-苯基)乙基氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

在N2气氛下向1-(3-溴-5-硝基-苯基)乙酮(1.3g，5.33mmol)在1,4-二恶烷(12mL)和H2O(3mL)中的混合物加入三氟(乙烯基)硼酸钾(785mg，5.86mmol)、Pd(PPh3)4(616mg，0.53mmol)和Na2CO3(1.13g，10.7mmol)。将混合物加热至90℃并搅拌10小时。加入H2O(10mL)并且用EtOAc(10mL×3)萃取混合物。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到1-(3-硝基-5-乙烯基-苯基)乙酮(500mg，49％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.64(s,1H),8.45(s,1H),8.28(s,1H),6.83(dd,J＝17.6,11.2Hz,1H),6.00(d,J＝17.6Hz,1H),5.56(d,J＝10.8Hz,1H),2.71(d,J＝2.0Hz,3H)。

步骤2.

向1-(3-硝基-5-乙烯基-苯基)乙酮(250mg，1.31mmol)在MeOH(2mL)中的混合物加入10wt.％Pd/C(1.54g，1.31mmol)。在H2气氛(15psi)下将混合物搅拌3小时。过滤混合物，在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型TLC纯化残余物，得到1-(3-氨基-5-乙基-苯基)乙酮(110mg，52％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.19(s,1H),7.10(s,1H),6.74(s,1H),3.75(br s,2H),2.63(q,J＝7.6Hz,2H),2.58-2.54(m,3H),1.56(s,1H),1.24(t,J＝7.6Hz,3H)。

步骤3.

向NH2OH·HCl(64mg，0.92mmol)在EtOH(1mL)和H2O(0.5mL)中的混合物加入NaOAc(126mg，1.53mmol)和1-(3-氨基-5-乙基-苯基)乙酮(100mg，0.61mmol)。将混合物加热至80℃并搅拌5小时。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型TLC纯化残余物，得到1-(3-氨基-5-乙基-苯基)乙酮肟(100mg，92％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 6.84(s,1H),6.76(s,1H),6.58(s,1H),4.91-4.27(m,2H),2.64-2.54(m,2H),2.34-2.21(m,3H),1.23(t,J＝7.6Hz,3H)。

步骤4.

向1-(3-氨基-5-乙基-苯基)乙酮肟(100mg，0.56mmol)在MeOH(0.5mL)中的混合物加入30％NH3水溶液(72μL，0.56mmol)和雷尼镍(48mg，0.56mmol)。在室温下，在H2气氛(15psi)下将混合物搅拌4小时。过滤混合物并在减压下浓缩滤液，得到3-(1-氨基乙基)-5-乙基-苯胺(150mg)，未进行进一步纯化就用于下一步。LCMS(ESI):m/z:[M H]C10H17N2计算值:165.13；实验值165.3。

步骤5.

向(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(83mg，0.27mmol)在t-BuOH(1mL)中的混合物加入DIPEA(447μL，2.74mmol)和3-(1-氨基乙基)-5-乙基-苯胺(90mg，0.55mmol)。将混合物加热至50℃并搅拌1小时，然后在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到[4-[1-(3-氨基-5-乙基-苯基)乙基氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(7mg，3％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H28ClN6O2计算值:431.19；实验值431.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.61(s,1H),6.58(s,1H),6.49(s,1H),5.30(m,1H),4.58(d,J＝14.0Hz,4H),3.78-3.67(m,4H),3.38-3.33(m,4H),2.53(q,J＝7.6Hz,2H),1.52(d,J＝7.2Hz,3H),1.19(t,J＝7.6Hz,3H)。

实施例42.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(5-溴-2-吡啶基)-2-甲基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(0.25g，0.55mmol)加入HCl/MeOH(10mL)，并且在室温下将混合物搅拌1小时。在减压下浓缩溶剂，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺HCl盐(0.22g)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.89(d,J＝10.8Hz,2H),7.60(s,1H),5.81-5.67(m,1H),4.40(d,J＝16.0Hz,1H),4.29(d,J＝16.0Hz,1H),3.64(t,J＝6.2Hz,2H),3.19-3.10(m,2H),2.55(s,3H),1.73(d,J＝7.1Hz,3H)。

步骤2.

向N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺HCl盐(0.22g，0.57mmol)在DMF(3mL)中的混合物加入5-溴-2-氟-吡啶(200mg，1.13mmol)和Cs2CO3(1.11g，3.40mmol)。将混合物加热至80℃并搅拌13小时。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(5-溴-2-吡啶基)-2-甲基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺HCO2H盐(43mg，14％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H23BrF3N6计算值:507.1；实验值507.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.38(s,1H),8.20(d,J＝2.5Hz,1H),7.70(dd,J＝9.1,2.5Hz,1H),6.95(dd,J＝9.5,3.2Hz,3H),6.80(s,1H),5.52(d,J＝7.0Hz,1H),4.46-4.31(m,2H),4.00-3.83(m,2H),2.82(t,J＝5.3Hz,2H),2.41(s,3H),1.60(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例186.(R)-N-(1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-氯-6-(3-吗啉基吡啶-2-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺的合成

(R)-N-(1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-氯-6-(3-吗啉基吡啶-2-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺是以类似于实施例42的方式合成。

实施例43.[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基]-(3-羟基氮杂环丁-1-基)甲酮的合成

步骤1.

向4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(100mg，0.23mmol)在THF(1mL)中的混合物加入LiAlH4(13mg，0.34mmol)。将混合物加热至80℃并搅拌1小时。将混合物冷却至15℃，然后加入H2O(3mL)，并且用EtOAc(5mL×3)萃取混合物。合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基]-(3-羟基氮杂环丁-1-基)甲酮(36mg，43％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C17H20F3N5计算值:352.2；实验值352.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.41-8.22(m,1H),6.90(d,J＝5.4Hz,2H),6.79(s,1H),5.39(d,J＝7.3Hz,1H),4.11-4.01(m,4H),2.78(s,3H),2.40(s,3H),1.52(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例44.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(5-溴-2-吡啶基)-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺HCl盐(128mg，0.38mmol)和5-溴-2-氟-吡啶(200mg，1.14mmol)在DMF(3mL)中的混合物加入Cs2CO3(618mg，1.90mmol)。将混合物加热至85℃并搅拌5小时，然后过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(5-溴-2-吡啶基)-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(44mg，23％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H21BrF3N6计算值:493.09；实验值493.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.17(s,1H),7.71(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H),6.96-6.90(m,2H),6.81-6.77(m,1H),6.61-6.57(m,1H),5.49-5.41(m,1H),4.65-4.61(m,1H),4.56(d,J＝4.4Hz,4H),2.43-2.41(m,3H),1.57-1.54(m,3H)。

实施例45.[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-6,7-二氢-5H-环戊烯并[d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

向4-羟基-2-甲基-6,7-二氢-5H-环戊烯并[d]嘧啶-6-甲酸乙酯(500mg，2.25mmol)在DCE(5mL)中的混合物加入CCl4(649μL，6.75mmol)和Ph3P(1.18g，4.50mmol)。将混合物加热至70℃并搅拌2小时，然后倒入H2O(3mL)中，并且用EtOAc(2mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(1mL)洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到4-氯-2-甲基-6,7-二氢-5H-环戊烯并[d]嘧啶-6-甲酸乙酯(400mg，74％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H14ClN2O2计算值:241.1；实验值241.0。

步骤2.

在N2气氛下向4-氯-2-甲基-6,7-二氢-5H-环戊烯并[d]嘧啶-6-甲酸乙酯(200mg，0.83mmol)在t-BuOH(0.2mL)中的混合物加入3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(170mg，0.83mmol)和DIPEA(434μL，2.49mmol)。将混合物加热至80℃并搅拌20小时，然后倒入H2O(1mL)中，并且用EtOAc(1mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(1mL)洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型TLC纯化残余物，得到4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-6,7-二氢-5H-环戊烯并[d]嘧啶-6-甲酸乙酯(170mg，50％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H24F3N4O2计算值:409.2；实验值409.2；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 6.93(s,1H),6.75(d,J＝15.2Hz,1H),6.74-6.67(m,1H),5.43-5.20(m,1H),4.57-4.26(m,1H),4.18-4.07(m,2H),3.35-3.21(m,1H),3.18-3.01(m,2H),2.98-2.77(m,2H),2.41(s,3H),1.48(t,J＝6.8Hz,3H)。

步骤3.

向4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-6,7-二氢-5H-环戊烯并[d]嘧啶-6-甲酸乙酯(170mg，0.42mmol)在THF(0.8mL)中的混合物加入LiOH·H2O(18mg，0.42mmol)、H2O(0.6mL)和EtOH(0.4mL)。在室温下将混合物搅拌1小时，然后在减压下浓缩，得到4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-6,7-二氢-5H-环戊烯并[d]嘧啶-6-甲酸(150mg，95％产率)，直接用于下一步。LCMS(ESI):m/z:[M H]C18H20F3N4O2计算值:381.1；实验值381.2；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 6.93-6.91(m,1H),6.70(m,1H),6.67(m,1H),5.34-5.29(m,1H),2.93(m,2H),2.91-2.89(m,1H),2.86-2.85(m,2H),2.34-2.33(m,3H),1.48-1.44(m,3H)。

步骤4.

[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-6,7-二氢-5H-环戊烯并[d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮是以类似于[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的方式合成，但4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲酸被替换为4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-6,7-二氢-5H-环戊烯并[d]嘧啶-6-甲酸。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H27F3N5O2计算值:450.2；实验值450.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.92(m,1H),6.89(m,1H),6.77(s,1H),5.41-5.37(s,1H),3.71-3.67(s,2H),3.67-3.66(m,4H),3.63-3.61(m,2H),3.12-3.11(m,2H),3.05-3.03(m,2H),3.01-2.92(m,1H),2.35(s,3H),1.52-1.50(m,3H)。

实施例46.(R)-N-(1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基-6-(甲基磺酰基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在0℃下向4-氯-2-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶(100mg，0.59mmol)和DIPEA(308μL，1.77mmol)在DCM(3mL)中的混合物加入甲磺酰氯(55μL，0.71mmol)。允许混合物升温至室温并搅拌3小时。用DCM(6mL)稀释混合物，用盐水(1mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到4-氯-2-甲基-6-(甲基磺酰基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶(135mg，92％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C8H11ClN3O2S计算值:248.0；实验值:248.1。

步骤2.

(R)-N-(1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基-6-(甲基磺酰基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于(R)-N-(1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基-6-(吗啉基磺酰基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但4-((4-氯-2-甲基-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-基)磺酰基)吗啉被替换为4-氯-2-甲基-6-(甲基磺酰基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶。LCMS(ESI):m/z:[M H]C17H21F3N5O2S计算值:416.13；实验值:416.1；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 6.99(s,1H),6.82(m,2H),5.38(m,1H),4.66-4.77(br s,1H),4.52(s,4H),3.91(br s,2H),2.89(s,3H),2.47-2.55(m,3H),1.58(s,3H)。

实施例47.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-四氢吡喃-4-基磺酰基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺HCl盐(135mg，0.36mmol)和四氢吡喃-4-磺酰氯(67mg，0.36mmol)在MeCN(0.9mL)和1,4-二恶烷(0.6mL)中的混合物加入TEA(151μL，1.08mmol)。在室温下将混合物搅拌30分钟，然后在减压下浓缩。用H2O(20mL)稀释残余物并且用EtOAc(10mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-四氢吡喃-4-基磺酰基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(90mg，51％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H27F3N5O3S计算值:486.2；实验值486.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.90(d,J＝10.8Hz,2H),6.78(s,1H),5.44-5.34(m,1H),4.61(s,2H),4.53(d,J＝2.0Hz,2H),4.05-3.97(m,2H),3.59-3.49(m,1H),3.46-3.37(m,2H),2.39(s,3H),2.01-1.80(m,4H),1.51(d,J＝7.2Hz,3H)。

以下表3中的实施例是以类似于实施例47的方式合成。

表3.实施例48-52和187

实施例53.[2-氯-4-[1-[5-[2-(羟基甲基)苯基]-2-噻吩基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

在N2气氛下，向(2-溴苯基)甲氧基-叔丁基-二甲基硅烷(1.0g，3.3mmol)和双(频哪醇合)二硼(1.0g，4.0mmol)在1,4-二恶烷(15mL)中的混合物加入KOAc(652mg，6.64mmol)和Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(271mg，0.33mmol)。将混合物加热至100℃并搅拌10小时。加入H2O(20mL)并且用EtOAc(20mL×2)萃取混合物。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到叔丁基-二甲基-[[2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)苯基]甲氧基]硅烷(1g，87％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.79-7.75(m,1H),7.61(d,J＝7.6Hz,1H),7.45(dt,J＝7.6 1.6Hz,1H),7.26-7.21(m,1H),5.03(s,2H),1.34(s,12H),0.96(s,9H),0.10(s,6H)。

步骤2.

向叔丁基-二甲基-[[2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)苯基]甲氧基]硅烷(1.0g，2.9mmol)和1-(5-溴-2-噻吩基)乙酮(589mg，2.9mmol)在1,4-二恶烷(10mL)和H2O(2mL)中的混合物加入Pd(PPh3)4(332mg，0.29mmol)和K2CO3(1.59g，11.48mmol)。将混合物加热至100℃并搅拌10小时。加入H2O(20mL)并且用EtOAc(20mL×2)萃取混合物。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到1-[5-[2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧甲基]苯基]-2-噻吩基]乙酮(0.85g，85％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.68(d,J＝4.0Hz,1H),7.62(d,J＝7.6Hz,1H),7.42(d,J＝7.6Hz,2H),7.34(s,1H),7.18(d,J＝4.0Hz,1H),4.76(s,2H),2.60(s,3H),0.93(s,9H),0.08(s,6H)。

步骤3.

向1-[5-[2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧甲基]苯基]-2-噻吩基]乙酮(0.8g，2.3mmol)在MeOH(10mL)中的混合物加入NH3(118mg，6.93mmol)和Ti(i-PrO)4(1.36mL，4.62mmol)。在室温下将混合物搅拌10小时，然后加入NaBH4(131mg，3.46mmol)，并且在室温下将混合物搅拌1小时。将混合物倒入冰-H2O(10mL)中，并且用EtOAc(10mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到1-[5-[2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧甲基]苯基]-2-噻吩基]乙胺(400mg，50％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.53(d,J＝7.2Hz,1H),7.29-7.40(m,3H),7.04(d,J＝3.6Hz,1H),6.93(d,J＝3.6Hz,1H),4.74(s,2H),4.23(q,J＝6.4Hz,1H),2.12(br s,2H),1.37(d,J＝6.4Hz,3H),0.88(s,9H),0.05(s,6H)。

步骤4.

向1-[5-[2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧甲基]苯基]-2-噻吩基]乙胺(100mg，0.29mmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(87mg，0.29mmol)在t-BuOH(3mL)中的混合物加入DIPEA(100μL，0.58mmol)。在卷曲小瓶中将混合物加热至100℃并搅拌10小时，然后用H2O(10mL)稀释并且用EtOAc(5mL×2)萃取。合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到[4-[1-[5-[2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧甲基]苯基]-2-噻吩基]乙基氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(150mg，85％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C30H41ClN5O3SSi计算值:614.2；实验值614.2。

步骤5.

向[4-[1-[5-[2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧甲基]苯基]-2-噻吩基]乙基氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(100mg，0.16mmol)在THF(5mL)中的混合物加入1M TBAF/THF(326μL，0.33mmol)。在室温下将混合物搅拌1小时，然后倒入冰-H2O(5mL)中并且用EtOAc(5mL×4)萃取。合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到[2-氯-4-[1-[5-[2-(羟基甲基)苯基]-2-噻吩基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(45mg，55％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C24H27ClN5O3S计算值:500.14；实验值500.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.28(d,J＝8.0Hz,1H),7.57(d,J＝7.2Hz,1H),7.39-7.33(m,2H),7.32-7.27(m,1H),7.12(d,J＝3.6Hz,1H),7.06(d,J＝2.8Hz,1H),5.59(br t,J＝7.2Hz,1H),5.24(t,J＝5.6Hz,1H),4.58-4.48(m,6H),3.66-3.58(m,4H),3.26-3.21(m,4H),1.62(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例54.(还参见实施例110.)N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向4-氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶TFA盐(450mg，1.67mmol)和四氢呋喃-3-甲醛(151μL，1.67mmol)在DCM(3.5mL)和AcOH(1.5mL)中的混合物加入NaBH(OAc)3(884mg，4.17mmol)。在室温下将混合物搅拌1小时，然后在减压下浓缩。用H2O(20mL)稀释残余物并且用EtOAc(10mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到4-氯-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶(120mg)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H15ClN3O计算值:240.1；实验值240.1。

步骤2.

向3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(205mg，1.0mmol)和4-氯-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶(120mg，0.50mmol)在EtOH(2.5mL)中的混合物加入DIPEA(872μL，5.0mmol)。将混合物加热至100℃并搅拌2小时，然后在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(10mg，5％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H25F3N5O计算值:408.2；实验值408.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.27(s,1H),6.89(s,2H),6.78(s,1H),5.32(q,J＝6.8Hz,1H),3.97-3.83(m,6H),3.77(q,J＝7.8Hz,1H),3.55(dd,J＝8.6,6.4Hz,1H),2.84-2.73(m,2H),2.53(td,J＝14.4,7.2Hz,1H),2.18-2.07(m,1H),1.75-1.56(m,1H),1.52(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例55.[4-[[(1R)-1-[3-氨基-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲氧基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮和[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-羟基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

向2,4-二氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶HCl盐(340mg，1.5mmol)和吗啉-4-羰基氯(175μL，1.5mmol)在DCM(5mL)中的混合物加入DIPEA(1.3mL，7.5mmol)。在室温下将混合物搅拌3小时，然后在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(400mg，88％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H13Cl2N4O2计算值:303.03；实验值:302.8；¹H NMR(400MHz,CD3CN)δppm 4.76(s,4H),3.63-3.69(m,4H),3.25-3.31(m,4H)。

步骤2.

向(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(400mg，1.32mmol)和3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(269mg，1.32mmol)在MeCN(10mL)中的混合物加入DIPEA(1.15mL，6.60mmol)。将混合物加热至80℃并搅拌2小时，然后在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(350mg，56％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H23ClF3N6O2计算值:471.14；实验值:470.9；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 6.96(s,1H),6.82(s,2H),5.35(br s,1H),4.85(d,J＝14.8Hz,1H),4.55-4.62(m,4H),3.92(s,2H),3.70-3.75(m,4H),3.32-3.37(m,4H),1.59(d,J＝6.8Hz,3H)。

步骤3.

向[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(110mg，0.23mmol)在MeOH(1mL)中的混合物加入30％纯度甲醇钠(84mg，0.47mmol)。在卷曲小瓶中将混合物加热至80℃并搅拌2小时，然后加入饱和NH4Cl(2mL)并且用EtOAc(2mL×3)萃取混合物。合并的有机层用盐水(2mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到[4-[[(1R)-1-[3-氨基-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲氧基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(42mg，39％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H26F3N6O3计算值:467.20；实验值:467.0；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.91(d,J＝8.8Hz,2H),6.79(s,1H),5.25(br d,J＝6.4Hz,1H),4.59(s,2H),4.47-4.55(m,2H),3.78(s,3H),3.69-3.75(m,4H),3.35(d,J＝4.0Hz,4H),1.54(d,J＝7.1Hz,3H)。

步骤4.

向[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲氧基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(200mg，0.43mmol)和NaI(122mg，0.82mmol)在MeCN(5mL)中的混合物加入TMSCl(109μL，0.86mmol)。在卷曲小瓶中将混合物加热至90℃并搅拌12小时。过滤混合物，在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-羟基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(83mg，43％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H24F3N6O3计算值:453.18；实验值:453.1；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 6.95(m,2H),6.79(s,1H),5.43(m,1H)4.56(s,2H),4.50(s,2H),3.71(m,4H),3.46(m,4H),1.51(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例56.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向4-氯-2-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶TFA盐(0.53g，1.78mmol)和四氢呋喃-3-甲醛(482μL，5.34mmol)在DCM(7mL)中的混合物加入AcOH(3mL)和NaBH(OAc)3(1.89g，8.9mmol)。在室温下将混合物搅拌12小时并在减压下浓缩溶剂，然后用H2O(20mL)稀释并且用EtOAc(10mL×5)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到4-氯-2-甲基-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶(0.23g，48％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 3.94-3.85(m,2H),3.84-3.70(m,4H),3.60-3.53(m,1H),3.11-2.96(m,4H),2.78(d,J＝8.0Hz,2H),2.61(s,3H),2.19-2.08(m,1H),1.74-1.68(m,1H)。

步骤2.

向4-氯-2-甲基-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶(0.13g，0.49mmol)在n-BuOH(2mL)中的混合物加入3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(198mg，0.97mmol)和DIPEA(846μL，4.86mmol)。在卷曲小瓶中将混合物加热至135℃并搅拌12小时，然后在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物(2次)，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(35mg，17％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H29F3N5O计算值:436.2；实验值436.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.92(s,1H),6.90(s,1H),6.78(s,1H),5.52-5.38(m,1H),3.94-3.84(m,2H),3.79-3.74(m,1H),3.58-3.52(m,1H),3.40(d,J＝8.0Hz,2H),2.86-2.76(m,2H),2.75-2.65(m,3H),2.63-2.58(m,2H),2.34(s,3H),2.14-2.07(m,1H),1.74-1.62(m,1H),1.53(d,J＝4.0Hz,3H)。

实施例57. 4-[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-N,N-二甲基-环己甲酰胺的合成

步骤1.

向2,4-二氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶TFA盐(1.68g，5.53mmol)、N,N-二甲基-4-氧代-环己甲酰胺(935mg，5.53mmol)在DCM(11.2mL)和AcOH(4.8mL)中的混合物加入NaBH(OAc)3(4.10g，19.3mmol)。在室温下将混合物搅拌3小时，然后在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到4-(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-N,N-二甲基-环己甲酰胺(150mg，8％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C15H21Cl2N4O计算值:343.10；实验值343.2。

步骤2.

向3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(93mg，0.46mmol)和4-(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-N,N-二甲基-环己甲酰胺(120mg，0.35mmol)在n-BuOH(1mL)中的混合物加入DIPEA(609μL，3.5mmol)。将混合物加热至100℃并搅拌5小时，然后在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到4-[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-N,N-二甲基-环己甲酰胺(20mg，11％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C24H31ClF3N6O计算值:511.21；实验值511.4；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 6.95(s,1H),6.81(s,2H),5.31(m,1H),4.73-4.85(m,1H),3.73-3.95(m,5H),3.06(s,3H),2.95(s,3H),2.42-2.56(m,2H),2.09(br d,J＝10.8Hz,2H),1.84(m,2H),1.60-1.71(m,2H),1.56(d,J＝6.8Hz,3H),1.27-1.30(m,2H)。

实施例58.[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-(1-甲基-4-哌啶基)甲酮的合成

步骤1.

向3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(265mg，1.3mmol)在n-BuOH(15mL)中的混合物加入2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(301mg，1.0mmol)和DIPEA(678μL，3.9mmol)。将混合物加热至80℃并搅拌10小时，然后在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(385mg，65％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.91(m,2H),6.81(s,1H),5.33-5.30(m,1H),4.51-4.43(m,4H),1.54-1.48(m,12H)。

步骤2.

在15℃下将4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(380mg，0.83mmol)在4M HCl/MeOH(15mL，60mmol)中的混合物搅拌1.5小时。在减压下浓缩溶剂，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺HCl盐(350mg)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.88(s,1H),7.82(s,1H),7.61(s,1H),5.44(q,J＝7.2Hz,1H),4.67-4.53(m,2H),4.42(s,2H),1.64(d,J＝7.2Hz,3H)。

步骤3.

在15℃下向N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺HCl盐(350mg，0.89mmol)在THF(5mL)中的混合物加入1-甲基哌啶-4-甲酸(127mg，0.89mmol)、DIPEA(619μL，3.55mmol)和T3P(396μL，1.33mmol)。在15℃下将混合物搅拌1.5小时，然后在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-(1-甲基-4-哌啶基)甲酮(85mg，20％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H27ClF3N6O计算值:483.18；实验值483.3；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.93-6.90(m,2H),6.81(d,J＝1.6Hz,1H),5.34(d,J＝7.2Hz,1H),4.76-4.34(m,2H),4.52(d,J＝7.2Hz,2H),3.00-2.94(m,2H),2.59-2.55(m,1H),2.29(s,3H),2.12-2.10(m,2H),1.85-1.83(m,4H),1.54(dd,J＝7.2,5.2Hz,3H)。

以下表4中的实施例是以类似于实施例58的方式合成。

表4：实施例59-108和188-347

实施例109.[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-(1-甲基-4-哌啶基)甲酮的合成

步骤1.

向4-羟基-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(500mg，2.0mmol)和Ph3P(1.04g，3.98mmol)在DCE(5mL)中的混合物加入CCl4(574μL，5.97mmol)。将混合物加热至70℃并搅拌3小时，然后在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到4-氯-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(240mg，45％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H17ClN3O2计算值:270.09；实验值270.0；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 4.66(d,J＝4.0Hz,4H),2.72-2.62(m,3H),1.55-1.50(m,9H)。

步骤2.

4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯是以类似于4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯的方式合成，但2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯被替换为4-氯-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H27F3N5O2计算值:438.20；实验值438.3；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ6.91(d,J＝12.6Hz,2H),6.81-6.75(m,1H),5.46-5.31(m,1H),4.54-4.39(m,4H),2.39(s,3H),2.01(s,3H),1.52(s,9H)。

步骤3.

N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺HCl盐是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺HCl盐的方式合成，但4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯被替换为4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯。LCMS(ESI):m/z:[M H]C16H19F3N5计算值:338.15；实验值338.2。

步骤4.

[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-(1-甲基-4-哌啶基)甲酮是以类似于[4-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-(1-甲基-4-哌啶基)甲酮的方式合成，但N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺HCl盐被替换为N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺HCl盐。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H30F3N6O计算值:463.24；实验值463.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.95-6.89(m,2H),6.82-6.76(m,1H),5.46-5.36(m,1H),4.79-4.70(m,2H),4.52(d,J＝7.0Hz,2H),2.97(t,J＝10.0Hz,2H),2.64-2.53(m,1H),2.44-2.38(m,3H),2.29(s,3H),2.18-2.05(m,2H),1.90-1.80(m,4H),1.53(t,J＝6.0Hz,3H)。

实施例110.(还参见实施例54.)N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

2,4-二氯-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶是以类似于4-氯-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶的方式合成，但4-氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶TFA盐被替换为2,4-二氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶TFA盐。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H14Cl2N3O计算值:274.04；实验值274.2。

步骤2.

N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但4-氯-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶被替换为2,4-二氯-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H24ClF3N5O计算值:442.15；实验值442.2；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 6.95(s,1H),6.82(s,2H),5.32(m,1H),4.67-4.79(m,1H),3.72-3.91(m,8H),3.56(dd,J＝8.0,6.4Hz,1H),2.72(br d,J＝7.6Hz,2H),2.42-2.45(m,1H),2.06-2.07(m,1H),1.60-1.67(m,1H),1.57(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例111.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向4-氯-2-甲基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(600mg，2.2mmol)在DCM(3mL)中的混合物加入TFA(3mL)。在室温下将混合物搅拌1小时，然后在减压下浓缩溶剂，得到4-氯-2-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶TFA盐(630mg，100％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C7H9ClN3计算值:170.04；实验值170.2。

步骤2.

4-氯-2-甲基-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶是以类似于4-氯-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶的方式合成，但4-氯-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶TFA盐被替换为4-氯-2-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶TFA盐。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H17ClN3O计算值:254.10；实验值254.2。

步骤3.

N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但4-氯-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶被替换为4-氯-2-甲基-6-(四氢呋喃-3-基甲基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H27F3N5O计算值:422.21；实验值422.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.90(d,J＝8.0Hz,2H),6.79(s,1H),5.42-5.32(m,1H),3.96-3.73(m,8H),3.57-3.51(m,1H),2.82-2.75(m,2H),2.58-2.46(m,1H),2.40-2.35(m,3H),2.17-2.08(m,1H),1.74-1.63(m,1H),1.51(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例112.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-7-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]-吖庚因-4-胺的合成

步骤1.

将微波容器中装入N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-8H,9H-嘧啶并[4,5-d]-吖庚因-4-胺(35mg，0.07mmol)、三甲基硼氧六环在THF中的50％溶液(118μL，0.42mmol)以及在1,4-二恶烷(1.3mL)和H2O(0.4mL)中的K2CO3(20mg，0.14mmol)。将混合物脱气并加入Pd(dppf)Cl2(5mg，0.01mmol)，然后将混合物加热至120℃并在微波照射下搅拌40分钟。通过制备型HPLC纯化混合物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-7-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]-吖庚因-4-胺(15mg，43％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H29F3N6O2计算值:478.52；实验值479.22；¹H NMR(300MHz,甲醇-d4)δppm 6.92(s,1H),6.90(s,1H),6.77(s,1H),5.38(q,J＝7.2Hz,1H),3.65(t,J＝4.7Hz,4H),3.53(dd,J＝6.5,4.4Hz,4H),3.21(t,J＝4.7Hz,4H),3.03-2.93(m,2H),2.92-2.78(m,2H),2.32(s,3H),1.52(d,J＝7.1Hz,3H)。

实施例113.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的合成

步骤1.

在密封管中将2,4-二氯-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因(300mg，1.38mmol)、含50wt.％四氢呋喃-3-甲醛的H2O(747μL，4.13mmol)和含AcOH(826mg，787μL，13.76mmol)的DCM(15.3mL)中的混合物加热至60℃并搅拌1小时。将混合物冷却至0℃，并逐份加入NaBH(OAc)3(583mg，2.75mmol)。在2.5小时内将混合物缓慢加热至室温，然后用1M NaOH淬灭，并且用EtOAc萃取。合并的有机层用NaHCO3洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到2,4-二氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因(258mg，62％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C13H17Cl2N3O计算值:302.2；实验值302.55；¹H NMR(300MHz,CDCl3)δppm 3.92-3.81(m,1H),3.75(q,J＝7.7Hz,1H),3.56(dd,J＝9.4,3.7Hz,1H),3.19-3.03(m,4H),2.77-2.58(m,3H),2.44(d,J＝12.4Hz,3H),2.08-1.93(m,1H),1.69-1.56(m,1H),1.56(s,2H)。

步骤2.

将2,4-二氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因(255mg，0.85mmol)和(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙-1-胺HCl盐(252mg，0.92mmol)在无水DMSO(7.7mL)中的混合物用Ar吹扫。加入DIPEA(488μL，3.37mmol)，并且在微波照射下将混合物加热至120℃，持续2小时。加入H2O和Et2O，并且用Et2O(2次)萃取水层。合并的有机层用H2O洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺(152mg，36％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H25ClF3N5O3计算值:499.92；实验值501.10；¹H NMR(300MHz,CDCl3)δppm 8.43(s,1H),8.38(s,1H),8.03(s,1H),5.39(p,J＝6.8Hz,1H),5.08(s,1H),3.96-3.82(m,2H),3.75(q,J＝7.7Hz,1H),3.57(dd,J＝8.2,4.4Hz,1H),2.96(s,2H),2.70(s,4H),2.62(s,2H),2.49(s,3H),2.11-1.98(m,1H),1.67(d,J＝7.0Hz,3H)。

步骤3.

将Fe粉(93mg，1.67mmol)和1M HCl(1.22mL，1.22mmol)加入2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺(152mg，0.3mmol)在EtOH(3mL)中的混合物。将混合物加热至70℃并搅拌过夜。将混合物滤过用MeOH洗涤滤饼，并在减压下浓缩溶剂。将残余物溶解在EtOAc中，用NaHCO3洗涤并且用EtOAc萃取水层(3次)。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺(74mg，52％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H27ClF3N5O计算值:469.94；实验值470.17；¹H NMR(300MHz,甲醇-d4)δppm 6.90(d,J＝8.4Hz,2H),6.80(s,1H),5.29(q,J＝7.0Hz,1H),3.93-3.78(m,2H),3.74(q,J＝7.7Hz,1H),3.57-3.48(m,1H),2.88(t,J＝5.1Hz,2H),2.85-2.75(m,2H),2.74-2.59(m,4H),2.57-2.43(m,3H),2.13-1.98(m,1H),1.64(dq,J＝13.7,7.7Hz,1H),1.52(d,J＝7.1Hz,3H)。

实施例114.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-羰基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的合成

步骤1.

在0℃下，在Ar气氛下将含四氢呋喃-3-羰基氯(106mg，0.79mmol)的DCM(0.4mL)逐滴加入2,4-二氯-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因HCl盐(0.2g，0.79mmol)在DCM(6mL)和TEA(0.49mL，3.54mmol)中的混合物。在室温下将混合物搅拌过夜，然后用DCM稀释并且用H2O和盐水洗涤。所合并的水层用DCM萃取(2次)，合并的有机层经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到2,4-二氯-7-(氧戊环-3-羰基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因(122mg，49％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C13H15Cl2N3O2计算值:316.18；实验值316.55；¹H NMR(300MHz,CDCl3)δppm 3.89(td,J＝8.1,5.3Hz,1H),3.80-3.70(m,2H),3.73-3.62(m,4H),3.40(m,1H),3.22-3.15(m,1H),3.11(q,J＝5.3Hz,2H),3.06-2.99(m,1H),2.52(d,J＝2.1Hz,1H),2.10-1.99(m,1H),1.98-1.90(m,1H)。

步骤2.

2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-羰基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并-[4,5-d]吖庚因-4-胺是以类似于2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2,4-二氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因被替换为2,4-二氯-7-(氧戊环-3-羰基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H23ClF3N5O4计算值:513.90；实验值515.05；¹H NMR(300MHz,CDCl3)δppm 8.44(s,1H),8.39(s,1H),8.03(d,J＝13.1Hz,1H),5.51(br s,1H),5.46-5.34(m,1H),4.07-3.92(m,2H),3.84(dd,J＝27.2,10.9Hz,6H),3.29-3.13(m,3H),2.74(s,2H),2.10(dd,J＝13.3,6.0Hz,2H),1.69(d,J＝6.9Hz,3H)。

步骤3.

N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-羰基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺被替换为2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-羰基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并-[4,5-d]吖庚因-4-胺。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H25ClF3N5O2计算值:483.92；实验值484.13；¹H NMR(300MHz,甲醇-d4)δppm 6.98-6.84(m,2H),6.79(s,1H),5.39-5.20(m,1H),3.93(q,J＝7.9Hz,1H),3.88-3.66(m,6H),3.44(p,J＝7.9Hz,1H),3.09-2.93(m,2H),2.84(dt,J＝11.7,6.4Hz,2H),2.23-1.98(m,2H),1.98-1.84(m,1H),1.61-1.45(m,3H)。

实施例115. 4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸环氧乙-4-基酯的合成

步骤1.

在0℃下，在Ar气氛下向N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺HCl盐(239mg，0.51mmol)和TEA(355μL，2.55mmol)在DMF(6mL)中的混合物加入含氯甲酸环氧乙-4-基酯(84mg，0.51mmol)的DMF(2.4mL)。在0℃下将混合物搅拌1小时，然后加入饱和NH4Cl并且用Et2O/EtOAc萃取混合物(2次)。合并的有机层用NaHCO3、H2O和盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸环氧乙-4-基酯(130mg，52％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H23ClF3N5O3计算值:485.14；实验值486.15；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.22-8.11(m,1H),6.82(s,1H),6.76(s,1H),6.70(s,1H),5.57(s,2H),5.25-5.11(m,1H),4.90-4.75(m,1H),4.58-4.35(m,4H),3.88-3.75(m,2H),3.56-3.41(m,2H),1.96-1.81(m,2H),1.65-1.51(m,2H),1.47-1.39(m,3H)。

实施例116.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在0℃下，在Ar气氛下向2,4-二氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶HCl盐(400mg，1.78mmol)和TEA(990μL，7.13mmol)在DCM(12mL)中的混合物加入四氢-2H-吡喃-4-羰基氯(230μL，1.87mmol)在DCM(1.0mL)中的溶液。在0℃下将混合物搅拌30分钟，然后加入H2O并且用DCM(5次)萃取混合物。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，然后在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到2,4-二氯-6-(环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶(463mg，86％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H13Cl2N3O2计算值:301.04；实验值302.5；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ5.31-4.91(m,2H),4.77-4.43(m,2H),4.07-3.72(m,2H),3.67-3.35(m,2H),3.01-2.71(m,1H),1.94-1.52(m,4H)。

步骤2.

向2,4-二氯-6-(环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶(200mg，0.66mmol)和3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺HCl盐(142mg，0.69mmol)在DMSO(6.0mL)中的经过Ar吹扫的混合物加入DIPEA(460μL，2.6mmol)。在微波照射下将混合物加热至120℃并搅拌30分钟，然后用Et2O稀释并且用H2O洗涤。用Et2O萃取水层，并且合并的有机层用水洗涤(2次)，经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(180mg)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H23ClF3N5O2计算值:469.15；实验值470.0；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.71(s,1H),6.87(d,J＝4.7Hz,2H),6.79(s,1H),5.31-5.21(m,1H),5.19-5.13(m,2H),4.60(s,4H),3.93(d,J＝11.4Hz,2H),3.51-3.35(m,2H),2.80-2.72(m,1H),1.73-1.65(m,4H),1.52(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例117. 4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-甲基-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸甲酯的合成

步骤1.

2-氯-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯是以类似于2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2,4-二氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因被替换为2,4-二氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H21ClF3N5O4计算值:487.12；实验值487.95；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.55(s,1H),8.37(s,1H),8.31(d,J＝7.7Hz,1H),8.27(s,1H),5.51-5.40(m,1H),4.50-4.29(m,4H),1.54(d,J＝7.0Hz,3H),1.50-1.40(m,9H)。

步骤2.

向2-氯-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(795mg，1.63mmol)和三甲基硼氧六环在THF中的50％溶液(1.23g，9.8mmol)在1,4-二恶烷(12.7mL)中的经过Ar吹扫的混合物加入含K2CO3(450mg，3.26mmol)的H2O(8mL)。将混合物用Ar再吹扫15分钟，然后加入Pd(dppf)Cl2(119mg，0.16mmol)。在微波照射下将混合物加热至120℃并搅拌1小时。接下来，再加入三甲基硼氧六环在THF中的50％溶液(409mg，3.26mmol)和Pd(dppf)Cl2(60mg，81μmol)，然后在微波照射下将混合物加热至120℃并搅拌45分钟。将混合物滤过垫，并且用EtOAc洗涤滤饼。滤液用H2O洗涤，然后经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到2-甲基-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(258mg，34％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H24F3N5O4计算值:467.18；实验值468.30；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.56(s,1H),8.33(s,1H),8.27(s,1H),7.74(d,J＝7.6Hz,1H),5.60-5.43(m,1H),4.55-4.24(m,4H),2.27(s,3H),1.53(d,J＝7.0Hz,3H),1.50-1.40(m,9H)。

步骤3.

在室温下将2-甲基-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(233mg，0.50mmol)在DCM(3.5mL)和4M HCl/1,4-二恶烷(1.6mL，6.5mmol)中的混合物搅拌过夜。在减压下浓缩溶剂，得到2-甲基-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺HCl盐(198mg，90％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C16H18Cl2F3N5O2计算值:367.13；实验值367.90；¹H NMR(300MHz,甲醇-d4)δppm 8.58(s,1H),8.46(s,1H),8.21(s,1H),5.77-5.68(m,1H),4.69-4.61(m,4H),2.57(s,3H),1.73(d,J＝7.1Hz,3H)。

步骤4.

在0℃下，在Ar气氛下向2-甲基-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺HCl盐(163mg，0.37mmol)在DCM(4.9mL)和TEA(258μL，1.85mmol)中的混合物加入氯甲酸甲酯(66mg，0.37mmol)在DCM(0.8mL)中的溶液。在0℃下将混合物搅拌1小时，然后用饱和NH4Cl(2次)和饱和NaHCO3(1次)洗涤。用DCM(3次)萃取NH4Cl水层，并且用DCM(2次)萃取NaHCO3水层。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩溶剂，得到2-甲基-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸甲酯(146mg，93％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C18H18F3N5O4计算值:425.13；实验值426.00；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.57(s,1H),8.34(s,1H),8.28(s,1H),7.79-7.67(m,1H),5.58-5.46(m,1H),4.56-4.31(m,4H),3.68(d,J＝2.9Hz,3H),2.29(s,3H),1.53(d,J＝7.0Hz,3H)。

步骤5.

4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-甲基-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸甲酯是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺被替换为2-甲基-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸甲酯。LCMS(ESI):m/z:[M H]C18H20F3N5O2计算值:395.16；实验值396.18；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.68-7.38(m,1H),6.84(s,1H),6.78(s,1H),6.68(s,1H),5.53(s,2H),5.39-5.22(m,1H),4.46(d,J＝9.2Hz,2H),4.37(d,J＝9.1Hz,2H),3.67(s,3H),2.31(s,3H),1.42(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例118. 4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-甲基-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸环氧乙-4-基酯的合成

步骤1.

在0℃下，在Ar气氛下向N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺HCl盐(228mg，0.51mmol)在DMF(6.8mL)和TEA(355μL，2.55mmol)中的混合物加入氯甲酸环氧乙-4-基酯(84mg，0.51mmol)在DMF(2.3mL)中的溶液。在0℃下将混合物搅拌1小时，然后加入NH4Cl饱和溶液。用Et2O/EtOAc萃取混合物，并且用Et2O萃取水层。合并的有机层用H2O和盐水洗涤，然后经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-甲基-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸环氧乙-4-基酯(88mg，37％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H26F3N5O3计算值:465.20；实验值466.13；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.17(d,J＝8.0Hz,1H),6.88(s,1H),6.86(s,1H),6.74(s,1H),5.38-5.30(m,1H),5.20(s,2H),4.90-4.82(m,1H),4.50(s,2H),4.39(s,2H),3.89-3.81(m,2H),3.56-3.47(m,2H),2.34(s,3H),1.98-1.89(m,2H),1.68-1.57(m,2H),1.48(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例119.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-(环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(336mg，0.72mmol)和三甲基硼氧六环在THF中的50％溶液(539mg，4.29mmol)中的经过Ar吹扫的混合物加入含K2CO3(198mg，1.43mmol)的H2O(3.4mL)。将混合物用Ar再吹扫15分钟，然后加入Pd(dppf)Cl2(52mg，72μmol)。在微波照射下将混合物加热至120℃并搅拌1小时。将混合物滤过垫，并且用EtOAc洗涤滤饼。滤液用H2O和盐水洗涤，然后经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-(环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(49mg)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H26F3N5O2计算值:449.20；实验值450.00；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.20(s,1H),6.90-6.83(m,2H),6.74(s,1H),5.39-5.30(m,1H),5.19(s,2H),4.75-4.34(m,4H),3.91(s,2H),3.51-3.32(m,2H),2.84-2.72(m,1H),2.35(s,3H),1.74-1.61(m,4H),1.48(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例120. 1-(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-甲基-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)乙-1-酮的合成

步骤1.

1-(2-氯-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)乙-1-酮是以类似于2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2,4-二氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因被替换为1-{2,4-二氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基}乙-1-酮。LCMS(ESI):m/z:[M H]C17H15ClF3N5O3计算值:429.08；实验值429.95。

步骤2.

向1-(2-氯-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)乙-1-酮(583mg，1.36mmol)在EtOH(12mL)和1M HCl(5.4mL)中的混合物加入Fe粉(417mg，7.46mmol)。将混合物加热至70℃并搅拌5小时。加入EtOAc并且用饱和NaHCO3洗涤混合物，然后经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩溶剂，得到1-(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)乙-1-酮(443mg)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C17H17ClF3N5O计算值:399.11；实验值399.90；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.18(d,J＝8.0Hz,1H),6.83(s,1H),6.77(d,J＝5.8Hz,1H),6.75-6.62(m,1H),5.57(s,2H),5.20(q,J＝7.0Hz,1H),4.71-4.58(m,2H),4.51-4.31(m,2H),2.05(d,J＝9.7Hz,3H),1.45(dd,J＝7.0,5.4Hz,3H)。

步骤3.

1-(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-甲基-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)乙-1-酮是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-(环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺被替换为1-(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)乙-1-酮。LCMS(ESI):m/z:[M H]C18H20F3N5O计算值:379.16；实验值380.27；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6,100℃)δppm 7.17(s,1H),6.88(d,J＝7.1Hz,2H),6.74(s,1H),5.42-5.30(m,1H),5.20(s,2H),4.60(d,J＝20.9Hz,2H),4.42(d,J＝42.1Hz,2H),2.35(s,3H),2.06(s,3H),1.48(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例121.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(吡啶-3-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

3-{2,4-二氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-羰基}吡啶是以类似于2,4-二氯-6-(环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶的方式合成，但四氢-2H-吡喃-4-羰基氯被替换为吡啶-3-羰基氯。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H8Cl2N4O计算值:294.01；实验值294.90；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.84(d,J＝2.2Hz,1H),8.75(dt,J＝4.8,2.3Hz,1H),8.10(dt,J＝7.9,2.0Hz,1H),7.58(dt,J＝8.5,4.6Hz,1H),4.99(d,J＝6.9Hz,2H),4.92(d,J＝3.7Hz,2H)。

步骤2.

2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(吡啶-3-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2,4-二氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因被替换为3-{2,4-二氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-羰基}吡啶。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H16ClF3N6O3计算值:492.09；实验值492.95；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.83(d,J＝9.7Hz,1H),8.77-8.66(m,1H),8.59(s,1H),8.50(s,1H),8.45-8.33(m,1H),8.27(d,J＝22.1Hz,1H),8.16-7.92(m,1H),7.64-7.42(m,1H),5.64-5.37(m,1H),4.98-4.35(m,4H),1.74-1.43(m,3H)。

步骤3.

N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(吡啶-3-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于1-(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)乙-1-酮的方式合成，但1-(2-氯-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)乙-1-酮被替换为2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(吡啶-3-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H18ClF3N6O计算值:462.86；实验值463.0。

步骤4.

N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-(吡啶-3-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-(环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺被替换为N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(吡啶-3-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H21F3N6O计算值:442.17；实验值443.17；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6,100℃)δppm 8.82(d,J＝2.3Hz,1H),8.74-8.65(m,1H),8.01(dt,J＝7.9,2.0Hz,1H),7.57-7.42(m,1H),7.20(s,1H),6.86(s,2H),6.74(s,1H),5.40-5.29(m,1H),5.19(s,2H),4.66(s,2H),4.60(s,2H),2.35(s,3H),1.47(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例122. 4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-N,2-二甲基-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺的合成

步骤1.

2,4-二氯-N-甲基-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺是以类似于2,4-二氯-6-(环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶的方式合成，但四氢-2H-吡喃-4-羰基氯被替换为甲基氨基甲酰氯。LCMS(ESI):m/z:[M H]C8H8Cl2N4O计算值:246.01；实验值247.4；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 6.59-6.48(m,1H),4.68-4.63(m,2H),4.63-4.58(m,2H),2.64(d,J＝4.3Hz,3H)。

步骤2.

2-氯-N-甲基-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺是以类似于2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2,4-二氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因被替换为2,4-二氯-N-甲基-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺。LCMS(ESI):m/z:[M H]C17H16ClF3N6O3计算值:444.09；实验值445.0；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.57(s,1H),8.37(s,1H),8.29(s,1H),8.25(s,1H),6.32(d,J＝4.6Hz,1H),5.53-5.39(m,1H),4.45(d,J＝8.8Hz,2H),4.36(s,2H),2.64(d,J＝4.3Hz,3H),1.54(d,J＝7.0Hz,3H)。

步骤3.

4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-N-甲基-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺是以类似于1-(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)乙-1-酮的方式合成，但1-(2-氯-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)乙-1-酮被替换为2-氯-N-甲基-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺。LCMS(ESI):m/z:[M H]C17H18ClF3N6O计算值:414.12；实验值415.0。

步骤4.

4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-N,2-二甲基-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-(环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺被替换为4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-N-甲基-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺。LCMS(ESI):m/z:[M H]C18H21F3N6O计算值:394.17；实验值395.28；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.51(d,J＝8.2Hz,1H),6.85(s,1H),6.78(s,1H),6.68(s,1H),6.27(d,J＝4.7Hz,1H),5.53(s,2H),5.38-5.22(m,1H),4.40(s,2H),4.31(s,2H),2.63(d,J＝4.1Hz,3H),2.31(s,3H),1.42(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例123. 4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-甲腈的合成

步骤1.

在Ar气氛下将2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(300mg，0.6mmol)、Zn(CN)2(84mg，0.72mmol)和Pd(PPh3)4(48.5mg，42μmol)在NMP(9mL)中的混合物加热至120℃并搅拌过夜。再加入一份Zn(CN)2(84mg，0.72mmol)和Pd(PPh3)4(48.5mg，42μmol)，并且在120℃下搅拌混合物经过周末。加入2M NH3(12mL)，并且用Et2O(9×50mL)萃取混合物。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩溶剂，得到6-(吗啉-4-羰基)-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-甲腈(480mg，>100％产率；注意：粗产物)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H20F3N7O4计算值:491.15；实验值492.66。

步骤2.

4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-甲腈是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺被替换为6-(吗啉-4-羰基)-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-甲腈。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H22F3N7O2计算值:461.18；实验值462.00；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.28(d,J＝7.0Hz,1H),6.84(s,1H),6.78(s,1H),6.71(s,1H),5.72-5.51(m,2H),5.30-5.18(m,1H),4.78-4.49(m,4H),3.63(t,J＝4.7Hz,4H),3.26(t,J＝4.9Hz,4H),1.46(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例124.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-乙氧基-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

将2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]-乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(400mg，0.8mmol)和NaOEt(434mg，6.38mmol)在EtOH(13.4mL)中的混合物加热至回流，并且搅拌过夜。在减压下浓缩溶剂，加入H2O，并且用EtOAc萃取混合物(3次)。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，在减压下浓缩，并且通过柱色谱纯化残余物，得到2-乙氧基-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]-乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(81mg，20％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H25F3N6O5计算值:510.18；实验值511.30；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.41(s,1H),8.39(s,1H),7.96(s,1H),5.43(p,J＝6.9Hz,1H),4.77(d,J＝6.2Hz,1H),4.64(d,J＝2.1Hz,2H),4.53(s,2H),4.21(dd,J＝10.5,7.1Hz,1H),4.08(dq,J＝10.6,7.0Hz,1H),3.76-3.70(m,4H),3.43-3.30(m,4H),1.66(d,J＝7.0Hz,3H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H)。

步骤2.

N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-乙氧基-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺被替换为2-乙氧基-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]-乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H27F3N6O3计算值:480.21；实验值481.00；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.67(d,J＝7.4Hz,1H),6.79(s,1H),6.75(s,1H),6.67(d,J＝2.5Hz,1H),5.53(s,2H),5.13(t,J＝7.1Hz,1H),4.58-4.49(m,2H),4.42(s,2H),4.13(q,J＝7.0Hz,2H),3.62(t,J＝4.6Hz,4H),3.23(t,J＝4.6Hz,4H),1.42(d,J＝7.0Hz,3H),1.16(t,J＝7.0Hz,3H)。

实施例125.N4-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟-甲基)苯基]乙基]-N2-甲基-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2,4-二胺的合成

步骤1.

向2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]-乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(200mg，0.4mmol)在1.4-二恶烷(2.6mL)中的混合物加入MeNH2(3.19mL，6.39mmol)和DIPEA(0.28mL，1.6mmol)。将混合物加热至100℃并搅拌24小时，然后在减压下浓缩溶剂，加入H2O，并且用EtOAc萃取混合物。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到N2-甲基-6-(吗啉-4-羰基)-N4-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2,4-二胺(180mg)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H24F3N7O4计算值:495.18；实验值496.00；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.53(s,1H),8.33(s,1H),8.25(s,1H),7.41(d,J＝7.5Hz,1H),6.38(d,J＝4.9Hz,1H),5.42(q,J＝7.2Hz,1H),4.56-4.40(m,2H),4.31(s,2H),3.63(t,J＝4.7Hz,4H),3.23(t,J＝4.8Hz,4H),2.62(d,J＝4.7Hz,3H),1.52(d,J＝7.1Hz,3H)。

步骤2.

N4-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟-甲基)苯基]乙基]-N2-甲基-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2,4-二胺是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺被替换为N2-甲基-6-(吗啉-4-羰基)-N4-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2,4-二胺。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H26F3N7O2计算值:465.21；实验值465.86；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.18(d,J＝7.8Hz,1H),6.79(d,J＝9.7Hz,2H),6.67(d,J＝1.9Hz,1H),6.40-6.28(m,1H),5.51(s,2H),5.21(t,J＝6.8Hz,1H),4.44(d,J＝6.0Hz,2H),4.32(s,2H),3.63(t,J＝4.5Hz,4H),3.22(t,J＝4.6Hz,4H),2.66(d,J＝4.7Hz,3H),1.41(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例126.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟-甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-2-(三氟-甲氧基)-5H,6H,7H-吡咯并-[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在100℃下将2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并-[3,4-d]嘧啶-4-胺(500mg，1.0mmol)在甲酸(12.5mL)中的混合物搅拌过夜。加入H2O并且用DCM萃取混合物(3次)。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩溶剂。将粗残余物与DCM一起湿磨，过滤并且用DCM洗涤滤饼，得到6-(吗啉-4-羰基)-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-醇(312mg，65％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H21F3N6O5计算值:482.15；实验值483.30；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 10.86(s,1H),8.51(s,1H),8.36(s,1H),8.24(s,1H),7.90(d,J＝7.7Hz,1H),5.51(t,J＝7.2Hz,1H),4.66-4.20(m,4H),3.61(t,J＝4.6Hz,4H),3.23(t,J＝4.7Hz,4H),1.50(d,J＝7.0Hz,3H)。

步骤2.

向经过空气吹扫的6-(吗啉-4-羰基)-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并-[3,4-d]-嘧啶-2-醇(290mg，0.6mmol)在MeNO2(6mL)中的混合物加入Togni试剂(298mg，0.9mmol)。将混合物加热至100℃并搅拌过夜。再加入一份Togni试剂(99mg，0.3mmol)并且在100℃下将混合物搅拌4小时，然后再加入Togni试剂(99mg，0.3mmol)并且将混合物再搅拌4小时。加入H2O并且用DCM萃取混合物(3次)。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，在减压下浓缩，并且通过柱色谱纯化残余物，得到6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)-苯基]乙基]-2-(三氟甲氧基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(130mg，39％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H20F6N6O5计算值:550.14；实验值551.05；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.51(s,1H),8.42(d,J＝7.0Hz,1H),8.36(s,1H),8.21(s,1H),5.32(t,J＝7.0Hz,1H),4.76-4.55(m,2H),4.52(s,2H),3.62(t,J＝4.7Hz,4H),3.24(t,J＝4.6Hz,4H),1.56(d,J＝7.1Hz,3H)；¹⁹F NMR(376MHz,DMSO-d6)δppm-55.6,-61.4。

步骤3.

N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟-甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-2-(三氟-甲氧基)-5H,6H,7H-吡咯并-[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺被替换为6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)-苯基]乙基]-2-(三氟甲氧基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H22F6N6O3计算值:520.17；实验值521.17；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.25(d,J＝7.6Hz,1H),6.80(s,1H),6.75(s,1H),6.70(s,1H),5.54(s,2H),5.10(t,J＝7.0Hz,1H),4.61-4.27(m,4H),3.62(t,J＝4.6Hz,4H),3.24(t,J＝4.7Hz,4H),1.46(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例127.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-2-(三氟甲基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(300mg，0.6mmol)和NaI(359mg，2.4mmol)在1,4-二恶烷(6mL)中的混合物加入HI的57％水溶液(96μL，0.72mmol)。将混合物加热至100℃并搅拌过夜。加入饱和Na2CO3水溶液，并且用DCM(8×50mL)萃取混合物。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩溶剂，得到2-碘-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺和2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(约4:6比率，385mg)。粗产物未进行进一步纯化就用于下一步。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H20F3IN6O4计算值:592.05；实验值593.5。

步骤2.

本反应按以下说明的规模分4批平行进行。

向AgF(22.4mg，0.18mmol)和CF3SiMe3(0.12mL，0.8mmol)在Ar气氛下在DMF(1.9mL)中搅拌20分钟的混合物加入Cu(16.8mg，0.26mmol)。在室温下将混合物搅拌2小时，然后加入2-碘-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺和2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的混合物(4:6比率；95mg，0.16mmol)。将反应混合物加热至60℃并搅拌过夜。合并的反应混合物用Et2O(8×40mL)萃取，合并的有机层经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，得到6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟-甲基)苯基]乙基]-2-(三氟甲基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(210mg，61％)。粗产物未进行进一步纯化就用于下一步。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H20F6N6O4计算值:534.14；实验值535.05。

步骤3.

N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-2-(三氟甲基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺被替换为6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟-甲基)苯基]乙基]-2-(三氟甲基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H22F6N6O2计算值:504.17；实验值505.18。¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.24(d,J＝7.8Hz,1H),6.86(s,1H),6.78(s,1H),6.70(s,1H),5.56(s,2H),5.34-5.13(m,1H),4.62(s,4H),3.63(t,J＝5.2Hz,4H),3.26(t,J＝4.9Hz,4H),1.48(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例128.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-乙基-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在Ar气氛下向N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(250mg，0.53mmol)、Cs2CO3(519mg，1.59mmol)和Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(26mg，0.03mmol)在THF(1mL)中的混合物加入三乙基硼烷的1M己烷溶液(1.06mL，1.06mmol)。将混合物加热至回流并搅拌过夜，然后加入1M HCl并且在室温下将混合物搅拌1小时。加入NaHCO3，用DCM萃取混合物，并且合并的有机层经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-乙基-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(66mg，27％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H27F3N6O2计算值:464.21；实验值465.15；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.51(d,J＝7.7Hz,1H),6.84(s,1H),6.79(s,1H),6.67(s,1H),5.52(s,2H),5.29(q,J＝7.6Hz,1H),4.59-4.50(m,2H),4.47(s,2H),3.73-3.54(m,4H),3.24(t,J＝4.7Hz,4H),2.63-2.54(m,2H),1.44(d,J＝7.0Hz,3H),1.11(t,J＝7.6Hz,3H)。

实施例129.(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)-苯基]乙基]氨基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)甲醇的合成

步骤1.

向2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(1.0g，2.0mmol)、Cs2CO3(976mg，3.0mmol)和乙烯基三氟硼酸钾(348mg，2.60mmol)在EtOH(40mL)中的经过Ar吹扫的混合物加入Pd(PPh3)4(231mg，0.2mmol)。在微波照射下将混合物加热至140℃并搅拌30分钟，然后滤过垫并且用EtOAc洗涤滤饼。用H2O洗涤滤液并且用EtOAc萃取水层(3次)。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到2-乙烯基-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(682mg，69％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H23F3N6O4计算值:492.17；实验值593.1；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.58(s,1H),8.33(d,J＝1.8Hz,2H),7.83(d,J＝7.2Hz,1H),7.69-7.51(m,1H),6.49(dd,J＝17.3,10.3Hz,1H),6.29(dd,J＝17.3,2.5Hz,1H),5.59-5.45(m,1H),4.73-4.32(m,4H),3.64(t,J＝4.6Hz,4H),3.25(t,J＝4.7Hz,4H),1.56(d,J＝7.0Hz,3H)。

步骤2.

向2-乙烯基-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)-苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(682mg，1.39mmol)在THF(5.7mL)、丙酮(5.7mL)和H2O(5.7mL)中的混合物加入4-甲基吗啉N-氧化物(649mg，5.54mmol)和含2.5wt％OsO4的t-BuOH(0.59mL，0.058mmol)。在室温下将混合物搅拌12小时，然后加入亚硫酸氢钠溶液并且用EtOAc萃取混合物(2次)。合并的有机层经MgSO4干燥，过滤，在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到1-[6-(吗啉-4-羰基)-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基]乙烷-1,2-二醇(417mg，61％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H25F3N6O6计算值:526.18；实验值527.15；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.64-8.57(m,1H),8.34(s,1H),8.32(s,1H),7.86(t,J＝6.6Hz,1H),5.60(q,J＝6.8Hz,1H),4.71(dd,J＝28.0,6.4Hz,1H),4.64-4.55(m,2H),4.52(s,2H),4.46-4.37(m,1H),4.35-4.19(m,1H),3.63(t,J＝4.6Hz,4H),3.25(t,J＝4.7Hz,4H),1.55(d,J＝7.1Hz,3H)。

步骤3.

向1-[6-(吗啉-4-羰基)-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基]乙烷-1,2-二醇(417mg，0.79mmol)在MeOH(6.5mL)和H2O(6.5mL)中的混合物加入NaIO4(508mg，2.38mmol)。在室温下将混合物搅拌12小时，然后加入H2O并且用EtOAc萃取混合物。合并的有机层经MgSO4干燥，过滤，在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到6-(吗啉-4-羰基)-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-甲醛(287mg，73％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H21F3N6O5计算值:494.15；实验值495.00；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 9.68(s,1H),8.60(s,1H),8.34(s,2H),8.19(d,J＝7.5Hz,1H),5.69-5.48(m,1H),4.83-4.48(m,4H),3.64(t,J＝4.6Hz,4H),3.27(t,J＝4.6Hz,4H),1.60(d,J＝7.1Hz,3H)。

步骤4.

在0℃下向6-(吗啉-4-羰基)-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]-乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-甲醛(90mg，0.18mmol)在MeOH(0.6mL)中的混合物加入NaBH4(69mg，0.18mmol)。在0℃下将混合物搅拌30分钟，然后加入冰-H2O(10mL)并在减压下浓缩溶剂。用DCM萃取残余物，合并的有机层经MgSO4干燥，过滤并且在减压下浓缩溶剂，得到[6-(吗啉-4-羰基)-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基]-甲基(82mg，91％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H23F3N6O5计算值:496.17；实验值497.6。

步骤5.

(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)-苯基]乙基]氨基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)甲醇是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺被替换为[6-(吗啉-4-羰基)-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基]-甲醇。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H25F3N6O3计算值:466.19；实验值467.18；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.64(d,J＝8.1Hz,1H),6.84(s,1H),6.79(s,1H),6.68(s,1H),5.57-5.49(m,2H),5.46-5.30(m,1H),4.70(t,J＝5.7Hz,1H),4.61-4.47(m,4H),4.30(d,J＝5.7Hz,2H),3.70-3.57(m,4H),3.29-3.19(m,4H),1.44(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例348.(R)-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-(羟基甲基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(吗啉基)甲酮

(R)-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-(羟基甲基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(吗啉基)甲酮是以类似于实施例129的方式合成。

实施例130.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-(氨基甲基)-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(329mg，0.66mmol)和N-Boc-氨基甲基硼酸频哪醇酯(507mg，1.97mmol)在1,4-二恶烷(6.6mL)中的经过Ar吹扫的混合物加入含K2CO3(182mg，1.31mmol)的H2O(3.9mL)。将混合物用Ar再吹扫15分钟，然后加入Pd(dppf)Cl2(48mg，66μmol)。在微波照射下将混合物加热至120℃并搅拌2小时。再加入N-Boc-氨基甲基硼酸频哪醇酯(169mg，0.66mmol)和Pd(dppf)Cl2(24mg，33μmol)，在微波照射下将混合物加热至120℃并搅拌5小时。将混合物滤过垫，并且用MeOH洗涤滤饼。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到N-{[6-(吗啉-4-羰基)-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基]甲基}氨基甲酸叔丁酯(440mg)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C26H32F3N7O6计算值:595.24；实验值596.05。

步骤2.

N-[(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺被替换为N-{[6-(吗啉-4-羰基)-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基]甲基}氨基甲酸叔丁酯。LCMS(ESI):m/z:[M H]C26H34F3N7O4计算值:565.60；实验值566.20。

步骤3.

在0℃下向N-[(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(325mg，0.57mmol)在DCM(4.9mL)中的混合物加入4M HCl/1,4-二恶烷(1.9mL，7.5mmol)。允许混合物升温至室温并搅拌过夜，然后分配在DCM与饱和NaHCO3之间。水相用DCM萃取(2次)，合并的有机层经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-(氨基甲基)-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(50mg，19％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H26F3N7O2计算值:465.21；实验值465.93；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm7.59(d,J＝7.7Hz,1H),6.84(s,1H),6.79(s,1H),6.67(s,1H),5.52(s,2H),5.37-5.26(m,1H),4.59-4.45(m,4H),3.63(t,J＝4.6Hz,4H),3.55(s,2H),3.24(t,J＝4.7Hz,4H),2.02(br s,2H),1.44(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例349.(R)-(2-(氨基甲基)-4-((1-(3-(二氟甲基)苯基)乙基)氨基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(吗啉基)甲酮

(R)-(2-(氨基甲基)-4-((1-(3-(二氟甲基)苯基)乙基)氨基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(吗啉基)甲酮是以类似于实施例130的方式合成。

实施例350.(R)-(2-(氨基甲基)-4-((1-(3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(4-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)甲酮

(R)-(2-(氨基甲基)-4-((1-(3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(4-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)甲酮是以类似于实施例130的方式合成。

实施例131.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟-甲基)苯基]乙基]-2-溴-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]-乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(200mg，0.4mmol)在MeCN(5mL)中的混合物加入TMSBr(122mg，0.8mmol)。将混合物加热至60℃并搅拌过夜。在减压下浓缩溶剂，用NaHCO3水溶液稀释残余物并且用EtOAc萃取(3次)。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩溶剂，得到2-溴-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(248mg)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H20BrF3N6O4计算值:544.07；实验值546.80；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.55(t,J＝1.9Hz,1H),8.37(d,J＝2.0Hz,1H),8.27(s,2H),5.53-5.34(m,1H),4.52(q,J＝14.5,13.3Hz,4H),3.62(t,J＝4.6Hz,4H),3.24(t,J＝4.6Hz,4H),1.55(d,J＝6.8Hz,3H)。

步骤2.

N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟-甲基)苯基]乙基]-2-溴-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺被替换为2-溴-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H22BrF3N6O2计算值:514.09；实验值515.04；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.09(d,J＝7.6Hz,1H),6.81(s,1H),6.76(s,1H),6.71(d,J＝1.9Hz,1H),5.57(s,2H),5.18(t,J＝7.1Hz,1H),4.64-4.38(m,4H),3.62(t,J＝4.6Hz,4H),3.23(t,J＝4.7Hz,4H),1.44(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例132.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-(二氟甲基)-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向6-(吗啉-4-羰基)-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-甲醛(257mg，0.52mmol)在DCM(5.1mL)中的混合物加入DAST(42mg，0.26mmol)。在室温下将混合物搅拌过夜，然后加入饱和NaHCO3并且用DCM萃取混合物。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩溶剂，得到2-(二氟甲基)-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(219mg，82％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H21F5N6O4计算值:516.15；实验值517.0。

步骤2.

N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-(二氟甲基)-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺被替换为2-(二氟甲基)-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H23F5N6O2计算值:486.18；实验值487.19；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.00(d,J＝8.0Hz,1H),6.85(s,1H),6.80(s,1H),6.70(s,1H),6.59(t,J＝54.6Hz,1H),5.55(s,2H),5.38-5.25(m,1H),4.65-4.53(m,4H),3.64(t,J＝4.6Hz,4H),3.26(t,J＝4.6Hz,4H),1.48(d,J＝7.0Hz,3H)；¹⁹F NMR(376MHz,DMSO-d6)δppm-61.3,-118.2(dd,J＝54.6,6.1Hz)。

实施例133.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟-甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-2-(氧杂环丁-3-基-氧)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向3-氧杂环丁醇(222mg，2.99mmol)在THF(8.6mL)中的混合物加入叔丁醇钾(363mg，2.99mmol)。将混合物加热至50℃并搅拌15分钟，然后冷却至室温并且含(R)-(4-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-氯-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(吗啉基)甲酮(300mg，0.6mmol)的THF(5mL)。将混合物加热至80℃并搅拌过夜，然后加入H2O并且用EtOAc萃取混合物。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下去除溶剂。将粗产物与i-PrOH一起湿磨，过滤，在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟-甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-2-(氧杂环丁-3-基-氧)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(11.7mg，4％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H27F3N6O4计算值:508.20；实验值509.22；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.77(d,J＝7.5Hz,1H),6.80(s,1H),6.74(s,1H),6.68(s,1H),5.56(s,2H),5.28(t,J＝5.6Hz,1H),5.15-5.04(m,1H),4.81(t,J＝6.9Hz,1H),4.60(t,J＝7.0Hz,1H),4.55-4.45(m,3H),4.43(s,2H),4.34-4.23(m,1H),3.62(t,J＝4.7Hz,4H),3.23(t,J＝4.7Hz,4H),1.42(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例134.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-碘-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-碘-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺的方式合成，但2-氯-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-7-(氧戊环-3-基甲基)-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[4,5-d]吖庚因-4-胺被替换为2-碘-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺和2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的1:1混合物。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H22F6N6O2计算值:562.33；实验值563.11；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.98(d,J＝7.8Hz,1H),6.82(s,1H),6.75(s,1H),6.71(s,1H),5.57(s,2H),5.16(t,J＝7.4Hz,1H),4.49(d,J＝15.4Hz,4H),3.61(t,J＝4.6Hz,4H),3.23(t,J＝4.8Hz,4H),1.44(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例135.N-{[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]-甲基}-2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并-[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

将4-{2,4-二氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-羰基}吗啉(250mg，0.82mmol)和[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]甲胺HCl盐(222mg，0.87mmol)在无水DMSO(7.5mL)中的混合物用Ar吹扫。加入DIPEA(575μL，3.3mmol)，并且在微波照射下将混合物加热至150℃，持续1小时。加入H2O和Et2O，并且用Et2O萃取水层(3次)。合并的有机层用H2O洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并且在减压下浓缩溶剂，得到2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-{[3-硝基-5-(三氟甲基)-苯基]甲基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(200mg，50％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C19H18ClF3N6O4计算值:486.10；实验值487.10。

步骤2.

将Fe粉(126mg，2.26mmol)和1M HCl(1.64mL，1.64mmol)加入2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-{[3-硝基-5-(三氟甲基)-苯基]甲基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(200mg，0.41mmol)在EtOH(4.1mL)中的混合物。将混合物加热至70℃并搅拌过夜。将混合物滤过用MeOH洗涤滤饼，并在减压下浓缩溶剂。将残余物溶解在DCM中，用NaHCO3洗涤并且用DCM萃取水层(3次)。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到N-{[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]甲基}-2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(32mg，17％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C19H20ClF3N6O2计算值:456.13；实验值457.14；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.31(t,J＝5.7Hz,1H),6.81-6.41(m,3H),5.60(s,2H),4.59-4.43(m,6H),3.61(t,J＝4.6Hz,4H),3.23(t,J＝4.2Hz,4H)。

实施例136.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,-7H,8H,9H-嘧啶并[5,4-c]吖庚因-4-胺的合成

步骤1.

在Ar气氛下将4-氧代氮杂环庚烷-1,3-二甲酸1-叔丁酯3-乙酯(3.0g，10.5mmol)、乙脒HCl盐(1.19g，12.61mmol)和K2CO3(2.18g，15.77mmol)在MeOH(42mL)和H2O(12mL)中的混合物加热至50℃并搅拌过夜。将混合物用1M HCl酸化并且用DCM(9×100mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到2-甲基-4-氧代-3H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[5,4-c]吖庚因-6-甲酸叔丁酯(1.89g，64％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C14H21N3O3计算值:279.16；实验值280.15；¹H NMR(300MHz,CDCl3)δppm 13.09(s,1H),4.54-4.38(m,2H),3.69-3.62(m,2H),2.96-2.85(m,2H),2.47(s,3H),1.99-1.88(m,2H),1.43(s,9H)。

步骤2.

在室温下，在Ar气氛下将Ph3P(1.83g，6.98mmol)和N-氯代琥珀酰亚胺(0.93g，6.98mmol)在1,4-二恶烷(39mL)中的混合物搅拌30分钟。加入2-甲基-4-氧代-3H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[5,4-c]吖庚因-6-甲酸叔丁酯(1.3g，4.65mmol)，将混合物加热至70℃并搅拌4小时。加入Et3N(130μL)并在减压下浓缩溶剂。使残余物分配在H2O与DCM之间，并且用DCM(3×40mL)萃取水层。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到4-氯-2-甲基-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[5,4-c]吖庚因-6-甲酸叔丁酯(1.14g，82％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C14H20ClN3O2计算值:297.12；实验值298.05；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 4.70-4.59(m,2H),3.62(t,J＝5.6Hz,2H),3.11-2.98(m,2H),2.53(s,3H),1.83-1.72(m,2H),1.32(s,9H)。

步骤3.

将4-氯-2-甲基-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[5,4-c]吖庚因-6-甲酸叔丁酯(850mg，2.86mmol)和3-(1-氨基乙基)-5-(三氟甲基)苯胺HCl盐(723mg，3.0mmol)的混合物溶解在DMSO(17mL)中。用Ar吹扫混合物，并加入一份DIPEA(2mL，11.4mmol)。在微波照射下将混合物加热至150℃并搅拌5小时，然后用Et2O和H2O稀释并且用Et2O(16×50mL)萃取水层。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-甲基-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[5,4-c]吖庚因-6-甲酸叔丁酯(140mg，11％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H30F3N5O2计算值:465.23；实验值466.4。

步骤4.

在Ar气氛下向4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-甲基-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[5,4-c]吖庚因-6-甲酸叔丁酯(130mg，0.28mmol)在DCM(2.3mL)中的混合物加入4M HCl/1,4-二恶烷(0.9mL，3.63mmol)。在室温下将混合物搅拌过夜并在减压下浓缩溶剂，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[5,4-c]吖庚因-4-胺HCl盐(86mg，84％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C18H22F3N5计算值:365.18；实验值366.25；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 9.50(m,1H),7.13(s,1H),7.08(s,1H),6.94(d,J＝10.9Hz,1H),6.89(s,1H),5.52-5.44(m,1H),4.53-4.48(m,2H),3.40-3.33(m,2H),3.19-3.14(m,2H),1.98-1.91(m,2H),1.57(d,J＝7.0Hz,3H),1.35(s,3H)。

步骤5.

在0℃下，在Ar气氛下向N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-5H,6H,7H,8H,9H-嘧啶并[5,4-c]吖庚因-4-胺HCl盐(0.12g，0.33mmol)在DCM(3.6mL)和Et3N(0.23mL，1.64mmol)中的混合物加入吗啉-4-羰基氯(52mg，0.34mmol)在DCM(0.2mL)中的溶液。使混合物升温至室温并搅拌过夜，然后在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,-7H,8H,9H-嘧啶并[5,4-c]吖庚因-4-胺(27mg，17％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H29F3N6O2计算值:478.23；实验值479.2；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.05(d,J＝7.9Hz,1H),6.92(s,1H),6.85(s,1H),6.67(s,1H),5.46(s,2H),5.28(t,J＝7.2Hz,1H),4.22(s,2H),3.57-3.46(m,6H),3.04-2.97(m,5H),2.77(d,J＝8.7Hz,3H),2.22(s,3H),1.83-1.71(m,2H),1.44(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例137. 2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向(1R)-1-[3-(三氟甲基)苯基]乙-1-胺HCl盐(388mg，1.71mmol)和2,4-二氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(500mg，1.72mmol)在DMA(1.72mL)中的混合物加入DIPEA(598μL，3.44mmol)。在室温下将混合物搅拌1小时，然后用H2O稀释并且用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下去除溶剂，得到2-氯-4-{[(1R)-1-[3-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(673mg)，未进行进一步纯化就用于下一步。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H23ClF3N4O2计算值:443.2；实验值443.4。

步骤2.

将2-氯-4-{[(1R)-1-[3-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(673mg，1.51mmol)溶解在4M HCl/1,4-二恶烷/MeOH(3mL)中。将混合物加热至40℃并搅拌1小时，然后在减压下去除溶剂，并通过柱色谱法纯化粗残余物，得到2-氯-N-[(1R)-1-[3-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(181mg，35％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C15H15ClF3N4计算值:343.1；实验值343.2。

步骤3.

在0℃下向2-氯-N-[(1R)-1-[3-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(90mg，0.26mmol)在DCM(0.7mL)中的混合物加入吗啉-4-羰基氯(1mL；0.79mmol)和Et3N(180μL，1.30mmol)的溶液。允许混合物升温至室温并搅拌1小时，然后在减压下去除溶剂，并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(29mg，24％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H22ClF3N5O2计算值:456.1；实验值456.5；¹H NMR(500MHz,甲醇-d4)δppm 7.71(d,J＝2.1Hz,1H),7.68-7.64(m,1H),7.56-7.49(m,2H),5.43(q,J＝7.1Hz,1H),4.62(d,J＝2.5Hz,2H),4.56(dt,J＝5.0,2.2Hz,2H),3.74-3.69(m,4H),3.37-3.33(m,4H),1.59(d,J＝7.0Hz,3H)。

以下表5中的实施例是以类似于实施例137的方式合成。

表5：实施例138-164、351-430、490-499和537

实施例165.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,6,7,8-四氢喹唑啉-4-胺的合成

步骤1.

向3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(82mg，0.40mmol)和2,4-二氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉-6-甲酸(100mg，0.40mmol)在DMA(1mL)中的混合物加入DIPEA(140μL，0.81mmol)。将混合物加热至40℃并搅拌过夜，并且在减压下去除溶剂，得到4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉-6-甲酸(167mg),未进行进一步纯化就用于下一步。LCMS(ESI):m/z:[M H]C18H19ClF3N4O2计算值:415.1；实验值415.4。

步骤2.

向4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉-6-甲酸(167mg，0.40mmol)和吗啉(35μL，0.40mmol)在DMF(2mL)中的混合物加入DIPEA(210μL，1.21mmol)和含50wt.％T3P的DMF(384μL，0.61mmol)。在室温下将混合物搅拌1小时，然后用H2O(以体积计至少25％)稀释混合物并通过制备型HPLC加以纯化，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,6,7,8-四氢喹唑啉-4-胺(42mg，21％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H26ClF3N5O2计算值:484.2；实验值484.4；¹H NMR(500MHz,甲醇-d4)δppm 6.94(s,1H),6.90(dt,J＝7.4,1.9Hz,1H),6.80(t,J＝1.9Hz,1H),5.35(dt,J＝12.2,6.9Hz,1H),3.67(dddd,J＝23.6,19.2,7.8,5.0Hz,8H),3.15(m,1H),2.82-2.62(m,2H),2.58(dd,J＝8.9,6.8Hz,2H),2.06-1.94(m,1H),1.84(dtd,J＝13.4,11.2,5.5Hz,1H),1.54(dd,J＝7.1,1.1Hz,3H)。

实施例166(还有实施例48).N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(氮杂环丁烷-3-磺酰基)-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺HCl盐(200mg,0.51mmol)和TEA(352μL，2.53mmol)在DCM(5mL)中的混合物加入3-(氯代磺酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(129mg，0.51mmol)。在室温下将混合物搅拌1小时，并且在减压下去除溶剂，得到3-[(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)磺酰基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(292mg)，未进行进一步纯化就用于下一步。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H29ClF3N6O4S计算值:577.2；实验值577.5。

步骤2.

将3-[(4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)磺酰基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(292mg，0.51mmol)溶解在4M HCl/1,4-二恶烷/MeOH(1mL)中。将混合物加热至40℃并搅拌1小时，在减压下去除溶剂并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(氮杂环丁烷-3-磺酰基)-2-氯-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(29mg，12％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C18H21ClF3N6O2S计算值:477.1；实验值477.4；¹H NMR(500MHz,甲醇-d4)δppm 6.93-6.87(m,2H),6.83-6.79(m,1H),5.32(d,J＝7.4Hz,1H),4.63-4.54(m,3H),4.53-4.49(m,2H),4.27(d,J＝7.7Hz,4H),1.53(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例167.[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-羟基-乙基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-(4-甲氧基四氢吡喃-4-基)甲酮的合成

步骤1.

将2-[3-[(1R)-1-氨基乙基]苯基]-2,2-二氟-乙醇(100mg，0.5mmol)、(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-(4-甲氧基四氢吡喃-4-基)甲酮(165mg，0.5mmol)和DIPEA(260μL，1.49mmol)在n-BuOH(3mL)中的混合物加热至80℃并搅拌5小时。过滤混合物并通过制备型HPLC纯化滤液，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-羟基-乙基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-(4-甲氧基四氢吡喃-4-基)甲酮(35mg，14％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H28ClF2N4O4计算值:497.18；实验值497.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.33(br dd,J＝11.5,8.1,1H),7.59(s,1H),7.55-7.51(m,1H),7.46(dt,J＝7.5,3.8Hz,1H),7.43-7.38(m,1H),5.64(t,J＝6.3Hz,1H),5.35(q,J＝6.9Hz,1H),4.89-4.76(m,2H),4.60-4.46(m,2H),3.85(dt,J＝14.4,6.4Hz,2H),3.19(s,3H),3.21-3.12(m,3H),1.97-1.84(m,4H),1.51(t,J＝6.8Hz,3H)。

实施例168.[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-羟基-乙基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

将2-[3-[(1R)-1-氨基乙基]苯基]-2,2-二氟-乙醇(100mg，0.5mmol)、(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(151mg，0.5mmol)和DIPEA(260μL，1.49mmol)在n-BuOH(3mL)中的混合物加热至80℃并搅拌5小时。过滤混合物，并通过制备型HPLC纯化滤液，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-羟基-乙基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(35mg，15％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H25ClF2N5O3计算值:468.16；实验值468.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.17(br d,J＝8.0Hz,1H),7.55(s,1H),7.50(d,J＝7.6Hz,1H),7.44(t,J＝7.6Hz,1H),7.38(d,J＝7.6Hz,1H),5.62(t,J＝6.4Hz,1H),5.33(m,1H),4.61-4.43(m,4H),3.83(dt,J＝14.2,6.4Hz,2H),3.67-3.59(m,4H),3.28-3.20(m,4H),1.50(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例169.和实施例170.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-吗啉基-5,6,7,8-四氢喹唑啉-4-胺的合成

步骤1.

向4-吗啉基环己酮(4.0g，21.8mmol)和碳酸二甲酯(40mL，475mmol)的混合物加入NaH在油中的60％分散液(1.75g，43.7mmol)。将混合物加热至回流并搅拌2小时，然后加入H2O(50mL)并且用HCl水溶液将混合物酸化至pH～5。用EtOAc(50mL×5)萃取混合物，经Na2SO4干燥，过滤并且在减压下浓缩溶剂，得到5-吗啉基-2-氧代-环己烷甲酸甲酯(4g，76％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H20NO4计算值:242.13；实验值242.1。

步骤2.

向5-吗啉基-2-氧代-环己烷甲酸甲酯(4.0g，16.6mmol)和尿素(4.44mL，82.9mmol)在EtOH(100mL)中的混合物加入NaOMe(4.48g，82.9mmol)。将混合物加热至80℃并搅拌16小时，然后加入H2O(50mL)并且用HCl水溶液将混合物酸化至pH～5。在减压下浓缩溶剂，并且在50℃下将残余物与EtOAc(40mL)一起湿磨30分钟。过滤混合物并且在真空下干燥残余物，得到6-吗啉基-5,6,7,8-四氢喹唑啉-2,4-二醇(4g)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H18N3O3计算值:252.13；实验值252.1。

步骤3.

将6-吗啉基-5,6,7,8-四氢喹唑啉-2,4-二醇(1.0g，4mmol)和POCl3(10mL)的混合物加热至100℃并且搅拌1小时。在减压下浓缩溶剂，加入H2O(20mL)，并且用NaHCO3水溶液将pH调节至约8。用EtOAc(30mL×4)萃取混合物，合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩溶剂，得到4-(2,4-二氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉-6-基)吗啉(230mg，17％产率；注意：85％纯度)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H16Cl2N3O计算值:288.06；实验值288.0。

步骤4.

向4-(2,4-二氯-5,6,7,8-四氢喹唑啉-6-基)吗啉(200mg，0.69mmol)和3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(213mg，1.04mmol)在t-BuOH(2mL)中的混合物加入DIPEA(604μL，3.47mmol)。将混合物加热至90℃并搅拌10小时。在减压下浓缩混合物，加入H2O(20mL)并且用EtOAc(20mL×4)萃取混合物。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，在减压下浓缩溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-吗啉基-5,6,7,8-四氢喹唑啉-4-胺(50mg，15％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H26ClF3N5O计算值:456.17；实验值456.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.91-6.94(m,2H),6.81(s,1H),5.34-5.40(m,1H),3.78(t,J＝3.6Hz,4H),2.82(d,J＝4.4Hz,5H),2.69-2.73(m,3H),2.44-2.33(m,1H),2.21(d,J＝12.4Hz,1H),1.68-1.70(m,1H),1.56(d,J＝7.2Hz,3H)。

步骤5.

通过SFC分离N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-吗啉基-5,6,7,8-四氢喹唑啉-4-胺，得到每一种镜像异构体(60mg和52mg)。镜像异构体1：LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H26ClF3N5O计算值:456.17；实验值456.0；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.91-6.94(m,2H),6.80(s,1H),5.34-5.40(m,1H),3.75(t,J＝3.6Hz,4H),2.69-2.76(m,8H),2.36-2.37(m,1H),2.21(d,J＝12.4Hz,1H),1.56-1.64(m,1H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H)。镜像异构体2：LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H26ClF3N5O计算值:456.17；实验值456.0；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.90-6.93(m,2H),6.80(s,1H),5.33-5.36(m,1H),3.75(t,J＝3.6Hz,4H),2.66-2.70(m,8H),2.31-2.38(m,1H),2.20(d,J＝12.4Hz,1H),1.56-1.63(m,1H),1.55(d,J＝7.2Hz,3H)。

表6中所示的以下实施例431-444是以类似于实施例169和实施例170的方式合成。

表6.实施例431-444

实施例171.[2-氯-4-[1-[3-(1,1-二氟-2-羟基-乙基)苯基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

在室温下向2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(400mg，3.3mmol)和2-(3-乙酰基苯基)-2,2-二氟-乙酸乙酯(400mg，1.65mmol)在THF(5mL)中的混合物加入Ti(OEt)4(1.03mL，4.95mmol)。将混合物加热至80℃并搅拌11小时。将混合物冷却至-5℃，加入MeOH(67μL，1.65mmol)并加入LiBH4(36mg，1.65mmol)。在室温下将混合物搅拌1小时，然后冷却至0℃，加入H2O(10mL)并且用EtOAc(15mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且纯化残余物，得到N-[1-[3-(1,1-二氟-2-羟基-乙基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(90mg，18％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C14H22F2NO2S计算值:306.13；实验值306.0；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.55(s,1H),7.49-7.42(m,3H),4.56(m,1H),3.97(dt,J＝12.4,3.6Hz,2H),3.47(d,J＝3.6Hz,1H),2.81(br s,1H),1.55(d,J＝6.4Hz,3H),1.23(s,9H)。

步骤2.

向N-[1-[3-(1,1-二氟-2-羟基-乙基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(90mg，0.29mmol)在MeOH(2mL)中的混合物加入4M HCl/MeOH(147μL，0.58mmol)。在室温下将混合物搅拌12小时，然后通过加入NaOH/MeOH中和至pH～7，过滤并在减压下浓缩滤液。用DCM/MeOH(5:1)洗涤残余物，并在减压下浓缩合并的有机层，得到2-[3-(1-氨基乙基)苯基]-2,2-二氟-乙醇(55mg，93％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C10H14F2NO计算值:202.10；实验值202.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.46(br s,2H),7.69(s,1H),7.64(d,J＝6.4Hz,1H),7.59-7.50(m,2H),5.69(t,J＝6.0Hz,1H),4.48(q,J＝6.8Hz,1H),3.87(dt,J＝14.2,6.0Hz,2H),1.51(d,J＝6.8Hz,3H)。

步骤3.

将2-[3-(1-氨基乙基)苯基]-2,2-二氟-乙醇(55mg，0.27mmol)、(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(83mg，0.27mmol)和DIPEA(143μL，0.82mmol)在n-BuOH(2mL)中的混合物加热至80℃并搅拌24小时。过滤混合物并通过制备型HPLC纯化滤液(2次)，得到[2-氯-4-[1-[3-(1,1-二氟-2-羟基-乙基)苯基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(18mg，14％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H25ClF2N5O3计算值:468.16；实验值468.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.59(s,1H),7.51(d,J＝6.6Hz,1H),7.46-7.39(m,2H),5.43(q,J＝6.8Hz,1H),4.62-4.60(m,2H),4.57-4.55(m,2H),3.88(dt,J＝13.2,1.6Hz,2H),3.75-3.69(m,4H),3.38-3.33(m,4H),1.59(d,J＝7.2Hz,3H)。

实施例176.(R)-5-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1-甲基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-3,4-二氢嘧啶并[4,5-d]嘧啶-2(1H)-酮的合成

步骤1.

在0℃下向4,6-二氯代嘧啶-5-甲醛(7.5g，42mmol)在DCE(80mL)和HOAc(8mL)中的溶液加入四氢吡喃-4-胺(6.4g，64mmol)和NaBH(OAc)3(27g，127mmol)。在25℃下将反应物搅拌2小时，然后用H2O稀释。混合物未进行进一步纯化就用于下一步。LCMS(ESI):m/z:[M H]C10H13Cl2N3O计算值:262.0；实验值262.0。

步骤2.

向N-[(4,6-二氯代嘧啶-5-基)甲基]四氢吡喃-4-胺(12g，46mmol)在H2O(100mL)和THF(100mL)中的溶液加入(Boc)2O(30g，137mmol)和Na2CO3(9.7g，92mmol)。在25℃下将反应物搅拌12小时，然后用H2O稀释。用EtOAc萃取混合物，并且将合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在减压下去除溶剂。通过硅胶柱纯化残余物，得到N-[(4,6-二氯代嘧啶-5-基)甲基]-N-四氢吡喃-4-基-氨基甲酸叔丁酯(13g，78％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C15H21Cl2N3O3计算值:362.1；实验值362.3。

步骤3.

在45℃下将N-[(4,6-二氯代嘧啶-5-基)甲基]-N-四氢吡喃-4-基-氨基甲酸叔丁酯(13g，36mmol)在THF(40mL)和NH3(30％H2O溶液，80mL)中的溶液搅拌16小时。冷却至室温之后，加入水并且用EtOAc萃取混合物。合并的有机层用盐水洗涤，并且用Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到N-[(4-氨基-6-氯-嘧啶-5-基)甲基]-N-四氢吡喃-4-基-氨基甲酸叔丁酯(4.1g，33％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δ＝8.24(s,1H),4.62(s,2H),4.00-3.96(m,2H),3.49-3.47(m,1H),3.33-3.27(m,2H),2.20-2.11(m,2H),1.61(s,1H),1.52(s,9H),1.48-1.44(m,2H)。

步骤4.

在25℃下将N-[(4-氨基-6-氯-嘧啶-5-基)甲基]-N-四氢吡喃-4-基-氨基甲酸叔丁酯(4.1g，12mmol)在HCl/MeOH(4M，60ml)中的混合物搅拌2小时。在减压下去除溶剂，并且用MeOH稀释残余物。通过加入MeOH/NaOH直到pH～12来将溶液调节至pH～12。在减压下去除溶剂，得到6-氯-5-[(四氢吡喃-4-基氨基)甲基]嘧啶-4-胺(4.1g，粗物质)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H19N4O2计算值:239.1；实验值239.1。

步骤5.

向6-氯-5-[(四氢吡喃-4-基氨基)甲基]嘧啶-4-胺(4.1g，17mmol)在MeOH(60mL)中的溶液加入CH3ONa(4.56g，84.5mmol)。在70℃下将混合物搅拌3小时。在减压下去除溶剂。用H2O稀释残余物，并且用EtOAc萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在减压下去除溶剂，得到6-甲氧基-5-[(四氢吡喃-4-基氨基)甲基]嘧啶-4-胺(3.1g，77％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H19N4O2计算值:239.1；实验值239.1。

步骤6.

在0℃下向6-甲氧基-5-[(四氢吡喃-4-基氨基)甲基]嘧啶-4-胺(3.1g，13mmol)在DCM(30mL)中的溶液加入含三光气(39g，130mmol)的DCM(15mL)。在0℃下加入TEA(54ml，390mmol)，并且在0℃下将混合物搅拌30分钟。去除冷却浴，并且允许在25℃下将反应混合物搅拌2小时。加入NaHCO3水溶液，并且用EtOAc萃取混合物。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并且在减压下去除溶剂。通过柱色谱法纯化粗残余物，得到5-甲氧基-3-四氢吡喃-4-基-1,4-二氢嘧啶并[4,5-d]嘧啶-2-酮(1.5g，44％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H16N4O3计算值:265.1；实验值265.1。

步骤7.

向5-甲氧基-3-四氢吡喃-4-基-1,4-二氢嘧啶并[4,5-d]嘧啶-2-酮(400mg，1.5mmol)在DMF(6mL)中的溶液加入K2CO3(418mg，3.0mmol)和CH3I(188μL，3.0mmol)。在25℃下将混合物搅拌2小时。用H2O稀释反应混合物，并且用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并且在减压下去除溶剂。通过制备型TLC纯化粗残余物，得到5-甲氧基-1-甲基-3-四氢吡喃-4-基-4H-嘧啶并[4,5-d]嘧啶-2-酮(135mg，32％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δ＝8.44(s,1H),4.67-4.62(m,1H),4.25(s,2H),4.08-4.05(m,2H),4.01(s,3H),3.57-3.50(m,2H),3.39(s,3H),1.95-1.91(m,2H),1.69-1.63(m,2H)。

步骤8.

在100℃下将5-甲氧基-1-甲基-3-四氢吡喃-4-基-4H-嘧啶并[4,5-d]嘧啶-2-酮(135mg，485μmol)在HBr(33％AcOH溶液，2.5ml，15mmol)中的溶液搅拌1小时。冷却至室温之后，在减压下去除溶剂，得到5-羟基-1-甲基-3-四氢吡喃-4-基-4H-嘧啶并[4,5-d]嘧啶-2-酮(130mg，粗物质)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H16N4O3计算值:265.1；实验值265.1。

步骤9.

向5-羟基-1-甲基-3-四氢吡喃-4-基-4H-嘧啶并[4,5-d]嘧啶-2-酮(130mg，492μmol)和3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(110mg，541μmol)在DMF(2mL)中的溶液加入BOP(326mg，738μmol)和DBU(222ml，1.48mmol)。在25℃下将混合物搅拌16小时。用H2O稀释反应物，并且用EtOAc萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并且在减压下去除溶剂。通过制备型HPLC纯化残余物，得到5-[[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-1-甲基-3-四氢吡喃-4-基-4H-嘧啶并[4,5-d]嘧啶-2-酮(20mg，9％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H26F3N6O2计算值:451.2；实验值451.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ＝8.14(s,1H),6.94(d,J＝7.8Hz,2H),6.84(s,1H),5.42-5.30(m,1H),4.60-4.48(m,1H),4.28(s,2H),4.08-4.03(m,2H),3.61-3.47(m,2H),3.28(s,3H),2.12-2.00(m,2H),1.64(m,2H),1.56(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例348.(4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]氨基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)甲醇的合成

步骤1.

N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-2-乙烯基-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并-[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于2-乙烯基-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺被替换为2-氯-N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺，得到(1.95g，100％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H24F3N5O2计算值:447.19；实验值448.40；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.79(d,J＝7.1Hz,1H),7.47(t,J＝7.0Hz,1H),7.27(t,J＝7.7Hz,1H),7.22(t,J＝54.3Hz,1H),6.46(dd,J＝17.3,10.3Hz,1H),6.23(dd,J＝17.3,2.5Hz,1H),5.66-5.52(m,1H),5.48(dd,J＝10.3,2.5Hz,1H),4.71-4.40(m,4H),3.63(t,J＝4.7Hz,4H),3.25(t,J＝4.7Hz,4H),1.50(d,J＝7.0Hz,3H)。

步骤2.

向N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-2-乙烯基-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(1.93g，4.31mmol)在t-BuOH(92.6mL)和H2O(92.6mL)中的混合物加入K3[Fe(CN)6](5.11g，15.5mmol)、K2CO3(2.14g，15.5mmol)和DABCO(34mg，0.30mmol)，接着加入二水合锇酸(VI)钾(16mg，0.04mmol)。在室温下将混合物搅拌12小时，然后加入亚硫酸氢钠溶液并且用EtOAc萃取混合物(2次)。合并的有机层经无水MgSO4干燥，过滤，在减压下浓缩并且通过柱色谱法纯化粗残余物，得到1-(4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]氨基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)乙烷-1,2-二醇(1.40g，68％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H26F3N5O4计算值:481.19；实验值482.10；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.82(t,J＝8.2Hz,1H),7.64(t,J＝7.5Hz,1H),7.49(t,J＝7.0Hz,1H),7.29(t,J＝7.7Hz,1H),7.22(t,J＝54.4Hz,1H),5.61(q,J＝6.7Hz,1H),4.68(d,J＝5.9Hz,1H),4.66-4.49(m,4H),4.44(t,J＝6.0Hz,1H),4.39-4.12(m,1H),3.64(t,J＝5.6,3.7Hz,4H),3.58-3.39(m,2H),3.25(t,J＝4.7Hz,4H),1.51(d,J＝7.0Hz,3H)。

步骤3.

向1-(4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]氨基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)乙烷-1,2-二醇(1.40g，2.9mmol)在DCM(89.7mL)和H2O(11.2mL)中的混合物加入硅胶(22.4g)和NaIO4(1.87g，8.7mmol)。在室温下将混合物搅拌12小时，然后滤过垫，并且用DCM洗涤滤饼。用H2O稀释滤液并且分配各层，然后用DCM萃取水层。合并的有机层经MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]氨基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-甲醛(1.26g，96％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H22F3N5O3计算值:449.17；实验值450.05；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 9.66(s,1H),8.14(d,J＝7.5Hz,1H),7.67(t,J＝7.4Hz,1H),7.51(t,J＝7.1Hz,1H),7.30(t,J＝7.7Hz,1H),7.24(t,J＝54.4Hz,1H),5.75-5.64(m,1H),4.86-4.29(m,4H),3.65(t,J＝5.6,3.7Hz,4H),3.27(t,J＝4.7Hz,4H),1.55(d,J＝7.0Hz,3H)。

步骤4.

(4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]氨基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)甲醇是以类似于[6-(吗啉-4-羰基)-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基]-甲基的方式合成，但6-(吗啉-4-羰基)-4-{[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]-乙基]氨基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-甲醛被替换为4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]氨基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-甲醛，得到(120mg，70％产率)。¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.78(d,J＝7.6Hz,1H),7.64(t,J＝7.4Hz,1H),7.50(t,J＝7.1Hz,1H),7.29(t,J＝7.7Hz,1H),7.22(t,J＝54.4Hz,1H),5.66(t,J＝7.2Hz,1H),4.67(t,J＝5.9Hz,1H),4.63-4.46(m,4H),4.34-4.18(m,2H),3.64(t,J＝4.6Hz,4H),3.26(t,J＝4.7Hz,4H),1.50(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例445.(R)-5-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-1,7-二甲基-3-(1-甲基哌啶-4-基)-3,4-二氢嘧啶并[4,5-d]嘧啶-2(1H)-酮

(R)-5-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-1,7-二甲基-3-(1-甲基哌啶-4-基)-3,4-二氢嘧啶并[4,5-d]嘧啶-2(1H)-酮是以类似于实施例176的方式合成。

实施例446.[2-(氮杂环丁-3-基)-4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

在N2下向3-氰基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1g，5.49mmol)在EtOH(25mL)中的溶液加入羟胺水溶液(181.26mg，5.49mmol，1mL)。将混合物加热至80℃并搅拌24小时。在减压下浓缩反应混合物，得到3-(N-羟基氨甲酰亚胺基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.3g，粗物质)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C9H18N3O3计算值:216.1；实验值216.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.10(s,1H),5.48(s,2H),3.89(s,4H),3.09-3.23(m,1H),1.38(s,9H)。

步骤2.

在N2下向3-(N-羟基氨甲酰亚胺基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1g，4.65mmol)在MeOH(25mL)中的溶液加入雷尼镍(200mg，2.33mmol)。在真空下将悬浮液脱气并且用H2吹扫若干次。在0℃下，在H2下将混合物搅拌8小时。过滤反应混合物，并在减压下浓缩滤液，得到3-氨甲酰亚胺基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(900mg，粗物质)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C9H18N3O2计算值:200.1；实验值200.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝5.99(s,2H),3.96-3.77(m,4H),3.25-3.07(m,1H),1.41-1.31(m,9H)。

步骤3.

在室温下，在N2下向3-氨甲酰亚胺基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(800mg，4.02mmol)和4-氧代吡咯烷-1,3-二甲酸O1-苯甲酯O3-乙酯(1.29g，4.42mmol)在t-BuOH(16mL)中的溶液加入一份TEA(1.22g，12.05mmol，1.68mL)。将混合物加热至100℃并搅拌4小时。用H2O(20mL)缓慢淬灭反应物，然后用EtOAc(50mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱法纯化残余物，得到2-(1-叔丁氧羰基氮杂环丁-3-基)-4-羟基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸苯甲酯(1.3g，75.92％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H27N4O5计算值:427.2；实验值427.3。

步骤4.

在15℃下，在N2下向2-(1-叔丁氧羰基氮杂环丁-3-基)-4-羟基-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸苯甲酯(800mg，1.88mmol)和(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙胺(425.85mg，2.25mmol)在DMF(16mL)中的混合物加入一份BOP(1.33g，3.00mmol)、DBU(856.74mg，5.63mmol，848.26uL)。在15℃下将混合物搅拌12小时。用H2O(20mL)缓慢淬灭反应物，然后用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱法纯化残余物，得到2-(1-叔丁氧羰基氮杂环丁-3-基)-4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸苯甲酯(300mg，26.76％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C31H35F3N5O4计算值:598.3；实验值598.4。

步骤5.

在N2下向2-(1-叔丁氧羰基氮杂环丁-3-基)-4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸苯甲酯(100mg，167.33umol)在MeOH(2mL)中的溶液加入Pd/C(10mg)。在真空下将悬浮液脱气并且用H2吹扫若干次。在室温下，在H2下将混合物搅拌3小时。过滤反应混合物，并在减压下浓缩滤液，得到3-[4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(70mg，90.26％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H29F3N5O2计算值:464.2；实验值464.4。

步骤6.

在室温下，在N2下向3-[4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(70mg，151.03umol)和吗啉-4-羰基氯(22.59mg，151.03umol，17.65uL)在THF(1mL)中的溶液加入一份TEA(61.13mg，604.11umol，84.08uL)。在室温下将混合物搅拌1小时。在减压下浓缩反应混合物，并且通过柱色谱纯化残余物，得到3-[4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(43mg，49.38％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C28H36F3N6O4计算值:577.3；实验值577.2。

步骤7.

在室温下，在N2下向3-[4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(43mg，74.57umol)在MeOH(2mL)中的混合物加入一份HCl/MeOH(4M，1mL)。在室温下将混合物搅拌5小时。在减压下浓缩反应混合物。通过制备型HPLC纯化残余物，得到[2-(氮杂环丁-3-基)-4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]吗啉基-甲酮(12mg，33.56％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H28F3N6O2计算值:477.2；实验值:477.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ＝7.55-7.62(m,1H),7.44-7.51(m,1H),7.22-7.28(m,1H),6.85-7.16(m,1H),5.67-5.75(m,1H),4.66-4.72(m,2H),4.58-4.64(m,2H),4.18-4.37(m,3H),4.09-4.17(m,1H),3.98-4.09(m,1H),3.71-3.77(m,4H),3.35-3.40(m,4H),1.59-1.63(m,3H)。

实施例447.(R)-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-(1-甲基氮杂环丁-3-基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(吗啉基)甲酮

(R)-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-(1-甲基氮杂环丁-3-基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(吗啉基)甲酮是以类似于实施例446的方式合成。

实施例448.(R)-N-(1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-氯-6-((1-(甲氧基甲基)环丁基)磺酰基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1

向3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺(4.02g，19.6mmol)和2,4-二氯-5H,6H,7H,8H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(6.00g，19.7mmol)在DMA(40mL)中的混合物加入DIPEA(30.0mL，172mmol)。在室温下将反应混合物搅拌过夜。反应物用水淬灭，用EtOAc萃取，用盐水处理，经MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩成红色的油。通过快速色谱法纯化这种物质，得到4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5H,6H,7H,8H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(6.92g，74％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H26ClF3N5O2计算值:472.2；实验值:472.3。

步骤2

向4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-2-氯-5H,6H,7H,8H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(6.92g，14.6mmol)在甲醇(10mL)中的溶液加入HCl在二恶烷中的4M溶液(30mL，120mmol)。在室温下将反应物搅拌1小时，然后在真空下浓缩，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2,6-二氯-5H,6H,7H,8H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(5.32g，89％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C16H18ClF3N5计算值:372.1；实验值:372.4。

步骤3

在-40℃下向N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2,6-二氯-5H,6H,7H,8H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(106mg，260μmol)和三乙胺(358μL，2.58mmol)在DCM(5.0mL)中的溶液加入1-(甲氧基甲基)环丁烷-1-磺酰氯(159mg，578μmol)。去除冷却浴并且在室温下将反应物搅拌2天。然后在减压下浓缩反应物，并通过制备型HPLC纯化所得固体，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-{[1-(甲氧基甲基)环丁基]磺酰基}-5H,6H,7H,8H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(37.7mg，27％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H28ClF3N5O3S计算值:534.15；实验值:534.5；¹H NMR(500MHz,甲醇-d4)δ6.83(s,1H),6.80(s,1H),6.70(s,1H),5.28(q,J＝7.0Hz,1H),4.19–4.10(m,2H),3.65(s,2H),3.55–3.47(m,2H),3.15(s,3H),2.65–2.56(m,4H),2.09–1.91(m,4H),1.45(d,J＝7.0Hz,3H)。

表7中所示的以下实例449-459是以类似于实例xx的方式合成。

表7.实施例449-459

实施例538.和实施例460.(2-氯-4-(((1R)-1-(3-(二氟(吗啉-3-基)甲基)苯基)乙基)氨基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(吗啉基)甲酮(实施例538.)和(2-氯-4-(((1R)-1-(3-(二氟(4-甲基吗啉-3-基)甲基)苯基)乙基)氨基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(吗啉基)甲酮(实施例460.)的合成

步骤1.

在25℃下向3-(3-溴苯甲酰基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.1g，2.97mmol)在BAST(10mL)中的混合物加入MeOH(12.0μL，297μmol)。在50℃下将混合物搅拌6小时，然后用H2O(5mL)淬灭，用EtOAc萃取，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化残余物，得到3-[(3-溴苯基)-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(500mg，43％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.70–7.58(m,2H),7.48–7.35(m,2H),4.42–4.23(m,2H),3.95–3.83(m,2H),3.69–3.58(m,1H),3.47–3.40(m,1H),1.31-1.22(m,9H)。

步骤2.

将3-[(3-溴苯基)-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(500mg，1.27mmol)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(691mg，1.91mmol)、TEA(444μL，3.19mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(89.5mg，127μmol)在二恶烷(5mL)中的混合物用N2鼓泡，然后在100℃下、在N2气氛下将混合物搅拌4小时。用2M HCl水溶液(5mL)淬灭反应物并将混合物搅拌1小时，然后过滤。用EtOAc(30mL×2)萃取滤液，将合并的有机萃取物用水(20mL)和KF(100mg)处理并且将混合物搅拌2小时。过滤混合物并且将有机层用盐水(5mL)处理，经Na2SO3干燥，过滤并且真空浓缩。通过制备型TLC纯化粗残余物，得到3-[(3-乙酰基苯基)-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(300mg，66％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.17-8.08(m,2H),7.80-7.58(m,2H),4.48-4.24(m,2H),3.92(d,2H),3.65(dd,J＝12.8,4.0Hz,1H),3.53-3.38(m,2H),2.66(s,3H),1.29-1.16(m,9H)。

步骤3.

向3-[(3-乙酰基苯基)-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(270mg，760μmol)在THF(2mL)中的溶液加入Ti(OEt)4(473μL，2.28mmol)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(184mg，1.52mmol)。在80℃下将混合物搅拌7小时。冷却至-4℃之后，加入MeOH(30.7μL，760μmol)，然后加入LiBH4(49.6mg，2.28mmol)，并且在0℃下将混合物搅拌1小时。将反应物缓慢倒入H2O(4mL)和THF(4mL)中，滤过用THF洗涤并且在减压下蒸发。通过制备型TLC纯化粗残余物，得到3-[[3-[(1R)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]乙基]苯基]-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(220mg，63％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.58-7.37(m,4H),4.58–4.50(m,1H),4.22–4.14(m,1H),3.95–3.86(m,1H),3.58(dd,J＝12.4,3.6Hz,1H),3.51-3.35(m,2H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H),1.39-1.25(m,9H),1.24(s,9H)

步骤4.

向3-[[3-[(1R)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]乙基]苯基]-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(270mg，586μmol)在MeOH(2mL)中的溶液加入HCl在MeOH中的4M溶液(293μL，1.17mmol)。在25℃下将反应物搅拌30分钟，然后通过加入NaOH将其淬灭，直到pH＝7。过滤所得混合物并在减压下浓缩，得到3-[[3-[(1R)-1-氨基乙基]苯基]-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(200mg，96％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.61-7.34(m,4H),4.26–4.16(m,2H),4.01–3.85(m,2H),3.64–3.60(m,1H),3.57–3.37(m,3H),1.52-1.41(m,3H),1.38-1.16(m,9H)。

步骤5.

向3-[[3-[(1R)-1-氨基乙基]苯基]-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(100mg，280μmol)在t-BuOH(2mL)中的混合物加入DIPEA(97.7μL，561μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(128mg，421μmol)。在90℃下将混合物搅拌1小时，然后通过加入H2O将其淬灭，用EtOAc萃取，经Na2SO3干燥，过滤并在减压下浓缩。通过制备型TLC纯化粗残余物，得到3-[[3-[(1R)-1-[[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]苯基]-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(80mg，46％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C29H38ClF2N6O5计算值:623.2；实验值623.2。

步骤6.

在25℃下将3-[[3-[(1R)-1-[[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]苯基]-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸酯(80mg，128.39μmol)在4M HCl的甲醇溶液(32μL,128μmol)中的溶液搅拌1小时。在减压下浓缩混合物，并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-[二氟(吗啉-3-基)甲基]苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(27.0mg，40％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C24H30ClF2N6O3计算值:523.2；实验值523.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.60–7.53(m,2H),7.47(t,J＝7.2Hz,1H),7.39(d,J＝7.2Hz,1H),5.39(q,J＝6.4Hz,1H),4.62–4.56(m,4H),3.80-3.67(m,6H),3.53-3.41(m,3H),3.38-3.34(m,4H),2.94-2.88(m,2H),1.60(d,J＝7.2Hz,3H)。

步骤7.

向[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-[二氟(吗啉-3-基)甲基]苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(50mg，96μmol)在AcOH(1.2mL)和DCM(3mL)中的溶液加入NaBH(OAc)3(50.7mg，239μmol)和多聚甲醛(50mg)。在25℃下将反应物搅拌12小时，然后在减压下浓缩并通过制备型HPLC纯化，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-[二氟-(4-甲基吗啉-3-基)甲基]苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(30mg，58％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C25H32ClF2N6O3计算值:537.2；实验值537.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.55-7.50(m,2H),7.44-7.33(m,2H),5.40-5.31(m,1H),4.63-4.54(m,4H),3.74-3.65(m,5H),3.51-3.41(m,2H),3.45-3.35(m,4H),3.25-3.16(m,2H),2.93-2.84(m,1H),2.81-2.74(m,1H),2.53-2.45(m,3H),2.43-2.37(m,1H),1.59(d,J＝7.2Hz,3H)。

实施例461.(4-((1-(5-氨基-2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-氯-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(吗啉基)甲酮的合成

步骤1.

向3-(1-氨基乙基)-4-氟-5-(三氟甲基)苯胺HCl盐(5.0mg，19μmol)在t-BuOH(0.5mL)中的溶液加入DIEA(10.1μL，58.0μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(5.86mg，19.3μmol)。在80℃下将混合物搅拌2小时，然后在减压下浓缩。通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[4-[1-[5-氨基-2-氟-3-(三氟甲基)苯基]乙基氨基]2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(3.0mg，32％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H22ClF4N6O2计算值:489.1；实验值489.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.90-6.87(m,1H),6.83-6.79(m,1H),5.62-5.45(m,1H)4.73-4.54(m,4H),3.76-3.71(m,4H),3.39-3.30(m,4H),1.55(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例462. 2-氯-4-((1-(3-(五氟-l6-硫烷基)苯基)乙基)氨基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(吗啉基)甲酮的合成

步骤1.

在25℃下向1-[3-(五氟-硫烷基)苯基]乙酮(100mg，406μmol)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(98.5mg，812μmol)在THF(1.5mL)中的混合物加入Ti(OEt)4(253μL，1.22mmol)。将反应物加热至90℃并搅拌3小时。然后将混合物冷却至0℃，然后加入LiBH4(8.85mg，406μmol)和MeOH(16.4μL，406μmol)并且在0℃下将混合物搅拌30分钟。通过在0℃下加入H2O淬灭混合物并进行过滤。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到2-甲基-N-[1-[3-(五氟-硫烷基)苯基]乙基]丙烷-2-亚磺酰胺(60mg，42％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 7.77-7.66(m,2H),7.55-7.51(m,1H),7.50-7.44(m,1H),4.67-4.58(m,1H),3.49-3.45(m,1H),1.56(d,J＝6.6Hz,3H),1.25(s,9H)。

步骤2.

向2-甲基-N-[1-[3-(五氟-硫烷基)苯基]乙基]丙烷-2-亚磺酰胺(60mg，170μmol，1当量)在MeOH(0.5mL)中的溶液加入4M HCl/MeOH(128μL，512μmol)。在25℃下将混合物搅拌30分钟。在减压下去除溶剂，得到1-[3-(五氟-硫烷基)苯基]乙胺(60mg)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 7.93(s,1H),7.77(d,J＝8.1Hz,1H),7.69(d,J＝7.1Hz,1H),7.54-7.48(m,1H),3.82-3.81(m,1H),1.75-1.66(m,3H)。

步骤3.

向1-[3-(五氟-硫烷基)苯基]乙胺(60mg，240μmol)在n-BuOH(2mL)中的溶液加入(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(73.6mg，243μmol)和DIEA(211μL，1.21mmol)。在80℃下将混合物搅拌12小时，然后在减压下浓缩。通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[1-[3-(五氟-硫烷基)苯基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(26mg，20％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C19H22ClF5N5O2S计算值:514.1；实验值514.1；¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 7.80-7.78(m,1H),7.72-7.67(m,1H),7.57-7.53(m,1H),7.51-7.44(m,1H),5.50-5.43(m,1H),4.91(d,J＝6.2Hz,1H),4.66-4.54(m,4H),3.77-3.69(m,4H),3.39-3.30(m,4H),1.65(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例463.(2-氯-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-羟基乙基)苯基)-2-氟乙基)氨基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(吗啉基)甲酮的合成

步骤1.

向2-(3-乙酰基苯基)-2,2-二氟-乙酸乙酯(14.0g，57.8mmol)在MeCN(140mL)中的溶液加入NBS(10.3g，57.8mmol)和TsOH·H2O(11.0g，57.8mmol)。在50℃下将反应物搅拌15小时，然后将混合物加入冰水并且用NaHCO3中和。用EtOAc萃取混合物，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化粗残余物，得到2-[3-(2-溴乙酰基)苯基]-2,2-二氟-乙酸乙酯(8.0g，43％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 8.23(s,1H),8.14(d,J＝7.6Hz,1H),7.87(d,J＝7.6Hz,1H),7.63(t,J＝7.6Hz,1H),4.47(s,2H),4.33(q,J＝7.2Hz,2H),1.33(t,J＝7.2Hz,3H)。

步骤2.

在80℃下将KF(452mg，7.79mmol)、TBAF·3H2O(3.68g，11.7mmol)和ZnF2(1.61g，15.6mmol)在MeCN(50mL)中的溶液搅拌1小时，然后加入2-[3-(2-溴乙酰基)苯基]-2,2-二氟-乙酸乙酯(5.0g，16mmol)，并且在80℃下将混合物搅拌10小时。然后将反应混合物加入冰水，用EtOAc萃取，经Na2SO4干燥并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化粗残余物，得到2,2-二氟-2-[3-(2-氟乙酰基)苯基]乙酸乙酯(2.3g，57％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 8.15(s,1H),8.06(d,J＝7.6Hz,1H),7.89(d,J＝7.6Hz,1H),7.64(t,J＝8.0Hz,1H),5.54(d,J＝46.8Hz,2H),4.33(q,J＝7.2Hz,2H),1.33(t,J＝7.2Hz,3H)。

步骤3.

向2,2-二氟-2-[3-(2-氟乙酰基)苯基]乙酸乙酯(0.50g，1.9mmol)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(256mg，2.11mmol)在THF(5mL)中的溶液加入Ti(OEt)4(1.20mL，5.76mmol)。在80℃下将混合物搅拌10小时，然后冷却至0℃。加入MeOH(77.8μL，1.92mmol)和LiBH4(83.7mg，3.84mmol)，并且在0℃下将混合物搅拌1小时。将反应混合物加入冰水，过滤，经Na2SO4干燥并在减压下浓缩。通过制备型TLC纯化粗产物，得到N-[1-[3-(1,1-二氟-2-羟基-乙基)苯基]-2-氟-乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.30g，48％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C14H21F3NO2S计算值:324.1；实验值324.1。

步骤4.

向N-[1-[3-(1,1-二氟-2-羟基-乙基)苯基]-2-氟-乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(100mg，309μmol)在MeOH(1mL)中的混合物加入4M HCl/MeOH溶液(232μL，928μmol)。在25℃下将混合物搅拌2小时，然后用1M NaOH/MeOH溶液处理以调节至pH＝8，并在减压下浓缩，得到2-[3-(1-氨基-2-氟-乙基)苯基]-2,2-二氟-乙醇(55mg，粗产物)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C10H13F3NO计算值:220.0；实验值220.1。

步骤5.

向2-[3-(1-氨基-2-氟-乙基)苯基]-2,2-二氟-乙醇(50mg，230μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(69.2mg，228μmol)在n-BuOH(1mL)中的溶液加入DIEA(79.5μL，456μmol)。在80℃下将反应物搅拌5小时，然后过滤，在减压下浓缩并通过制备型HPLC纯化，得到[2-氯-4-[[1-[3-(1,1-二氟-2-羟基-乙基)苯基]-2-氟-乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(20mg，18％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H24ClF3N5O3计算值:486.1；实验值486.1。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.63(s,1H),7.56(s,1H),7.52-7.44(m,2H),5.76-5.64(m,1H),4.78(d,J＝6.4Hz,1H),4.67(s,2H),4.66(s,1H),4.59(s,2H),3.89(t,J＝13.2Hz,2H),3.77-3.68(m,4H),3.40-3.34(m,4H)。

实施例464和实施例465.(2-氯-4-(((R)-1-((R)-2-(羟基甲基)-2,3-二氢-1H-茚-4-基)乙基)氨基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(吗啉基)甲酮和(2-氯-4-(((R)-1-((S)-2-(羟基甲基)-2,3-二氢-1H-茚-4-基)乙基)氨基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(吗啉基)甲酮的合成

步骤1.

向(4-溴茚满-2-基)甲醇(900mg，3.96mmol)在DCM(3mL)中的混合物加入咪唑(1.08g，15.6mmol)和TBSCl(1.19g，7.93mmol)，并且在25℃下将混合物搅拌90分钟。然后用H2O淬灭反应物，用EtOAc萃取，经Na2SO4干燥，并在减压下浓缩。通过制备型TLC纯化粗残余物，得到(4-溴茚满-2-基)甲氧基-叔丁基-二甲基-硅烷(990mg，73％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.25(d,J＝7.8,1H),7.12(m,1H),7.01(m,1H),3.64–3.55(m,2H),3.15–3.07(m,1H),3.05-2.95(m,1H),2.71-2.60(m,3H),0.88(s,9H),0.05(s,6H)。

步骤2.

在-78℃下，在N2下向(4-溴茚满-2-基)甲氧基-叔丁基-二甲基-硅烷(990mg，2.90mmol)在THF(2mL)中的混合物加入n-BuLi在己烷中的2.5M溶液(2.32mL，5.80mmol)，并且在-78℃下将混合物搅拌2小时。然后在-30℃下、在N2下加入N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(449mg，4.35mmol)在THF(2mL)中的溶液，并且在-30℃下将混合物搅拌1小时。通过加入H2O淬灭反应物，然后用EtOAc萃取，经Na2SO4干燥，并在减压下浓缩。通过制备型TLC纯化粗残余物，得到1-[2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧甲基]茚满-4-基]乙酮(290mg，33％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.70(d,J＝7.7Hz,1H),7.36(d,J＝7.3Hz,1H),7.22(t,J＝7.6Hz,1H),3.54(d,J＝6.5Hz,2H),3.23(d,J＝8.2Hz,1H),3.05–2.95(m,2H),2.75–2.68(m,1H),2.62–2.54(m,1H),2.51(s,3H),0.87(s,9H),0.04(s,6H)。

步骤3.

向1-[2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧甲基]茚满-4-基]乙酮(270mg，887μmol)在THF(2mL)中的混合物加入Ti(OEt)4(607mg，2.66mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(215mg，1.77mmol)。将混合物加热至80℃并搅拌7小时。将混合物冷却至-4℃，然后加入MeOH(35.9μL，887μmol)和LiBH4(58.0mg，2.66mmol)，并且在0℃下将反应物搅拌1小时。将混合物缓慢倒入1:1H2O/THF中，然后滤过用THF洗涤，并且在减压下蒸发滤液。通过制备型TLC纯化粗残余物，得到(R)-N-((1R)-1-(2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧)甲基)-2,3-二氢-1H-茚-4-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(200mg，55％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.15–7.08(m,2H),4.60–4.56(m,1H),3.64–3.59(m,2H),3.01–2.95(m,2H),2.85–2.61(m,3H),1.48(d,J＝6.7Hz,3H),1.21(s,9H),0.91(s,9H),0.07(s,6H)。

步骤4.

向(R)-N-((1R)-1-(2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧)甲基)-2,3-二氢-1H-茚-4-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(200mg，488μmol)在MeOH(3mL)中的混合物加入4M HCl/MeOH溶液(1.22mL，4.88mmol)。在25℃下将混合物搅拌2小时，然后过滤并在减压下浓缩，得到(4-((R)-1-氨基乙基)-2,3-二氢-1H-茚-2-基)甲醇(93mg，粗物质)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H18NO计算值:192.0；实验值192.0。

步骤5.

在25℃下向(4-((R)-1-氨基乙基)-2,3-二氢-1H-茚-2-基)甲醇(40mg，87μmol，33％产率)在t-BuOH(2mL)中的混合物加入DIEA(60.1μL，345μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(34.9mg，115μmol)。在80℃下将混合物搅拌3小时，然后在减压下浓缩。通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[(2R)-2-(羟基甲基)茚满-4-基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(12.6mg，32％产率)和[2-氯-4-[[(1R)-1-[(2S)-2-(羟基甲基)茚满-4-基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(5.5mg，14％产率)。

[2-氯-4-[[(1R)-1-[(2R)-2-(羟基甲基)茚满-4-基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的数据：

LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H29ClN5O3计算值:458.2；实验值458.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.17-7.06(m,3H),5.36(d,J＝7.1Hz,1H),4.60-4.52(m,4H),3.74-3.69(m,4H),3.64-3.59(m,1H),3.53(d,J＝7.5Hz,1H),3.36-3.32(m,4H),3.10-3.02(m,2H),2.97–2.91(m,1H),2.78(d,J＝5.5Hz,1H),2.71-2.63(m,1H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H)。

[2-氯-4-[[(1R)-1-[(2S)-2-(羟基甲基)茚满-4-基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的数据：

LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H29ClN5O3计算值:458.2；实验值458.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.16-7.07(m,3H),5.38-5.30(m,1H),4.59-4.55(m,4H),3.69-3.73(m,4H),3.56(d,J＝6.4Hz,2H),3.34(d,J＝5.1Hz,4H),3.05-2.95(m,2H),2.77-2.69(m,3H),1.52(d,J＝7.1Hz,3H)。

实施例466.[2-氯-4-[[(1R)-1-(3,3-二氟-2H-苯并呋喃-7-基)乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

向(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(65.0mg，214μmol)在t-BuOH(1.5mL)中的溶液加入(1R)-1-(3,3-二氟-2H-苯并呋喃-7-基)乙胺盐酸盐(58.4mg，248μmol)和DIEA(187μL，1.07mmol)。在90℃下将反应混合物搅拌1小时，然后在减压下浓缩。通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-(3,3-二氟-2H-苯并呋喃-7-基)乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(23mg，23％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H23ClF2N5O3计算值:466.1；实验值466.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.50-7.45(m,1H),7.45-7.41(m,1H),7.09-7.03(m,1H),5.54-5.47(m,1H),4.72(t,J＝16.1Hz,2H),4.66-4.54(m,4H),3.76-3.68(m,4H),3.39-3.33(m,4H),1.58(d,J＝7.1Hz,3H)。

实施例467.[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(1,1-二氟乙基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

向(1R)-1-[3-(1,1-二氟乙基)苯基]乙胺(60.0mg，324μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(98.2mg，324μmol)在t-BuOH(2mL)中的溶液加入DIEA(169μL，972μmol)。在90℃下将混合物搅拌1小时，然后加入冰水，用EtOAc萃取，经Na2SO4干燥，并在减压下浓缩。通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(1,1-二氟乙基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(60mg，40％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H25ClF2N5O2计算值:452.2；实验值:451.9；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.58(s,1H),7.54–7.46(m,1H),7.45–7.37(m,2H),5.41(q,J＝6.4Hz,1H),4.61(s,2H),4.57(s,2H),3.75–3.68(s,4H),3.38–3.30(s,4H),1.90(t,J＝18.4Hz,3H),1.58(d,J＝7.2Hz,3H)。

实施例468.[2-氯-4-[[(1R)-1-(3-氟苯并呋喃-7-基)乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

将(1R)-1-(3-氟苯并呋喃-7-基)乙胺(50.0mg，279μmol)、(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(102mg，335μmol)和DIEA(243μL，1.40mmol)在t-BuOH(1mL)中的混合物用N2鼓泡，然后在90℃下搅拌15小时。然后在减压下浓缩混合物，并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-(3-氟苯并呋喃-7-基)乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(22.6mg，17％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H22ClFN5O3计算值:446.1；实验值446.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.86(d,J＝4.0Hz,1H)7.49(d,J＝8.0Hz,1H)7.34(d,J＝8.0Hz,1H)7.29-7.22(m,1H)5.80(q,J＝8.0Hz,1H)4.77-4.57(m,4H),3.74-3.69(m,4H)3.37-3.31(m,4H)1.66(d,J＝8.0Hz,3H)。

实施例469.[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]-2-氟-苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

向1-(3-溴-2-氟-苯基)-2-(环丙氧基)乙酮(1.85g，6.77mmol)在DAST(20mL)中的溶液加入MeOH(2.74μL，67.7μmol)，并且在50℃下将反应物搅拌12小时。然后将混合物倒入水中并且用EtOAc萃取。合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。然后通过柱色谱法纯化粗残余物，得到溴-3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]-2-氟-苯(1.5g，75％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.67(t,J＝7Hz,1H),7.52(t,J＝7.2Hz,1H),7.15-7.08(m,1H),4.06(t,J＝13.5Hz,2H),3.46-3.42(m,1H),0.60-0.54(m,2H),0.51-0.45(m,2H)。

步骤2.

向1-溴-3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]-2-氟-苯(500mg，1.69mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(858μL，2.54mmol)在二恶烷(5mL)中的混合物加入TEA(590μL，4.24mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(119mg，169μmol)。用氩气对混合物鼓泡，然后在100℃下搅拌12小时。冷却至室温之后，加入2M HCl水溶液(10mL，20mmol)并且将混合物搅拌1小时(pH＝2)。然后用EtOAc萃取反应物，将合并的有机萃取物用KF水溶液(20ml，5g KF)处理并搅拌2小时。过滤混合物并且用盐水洗涤溶液，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化粗残余物，得到1-[3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]-2-氟-苯基]乙酮(360mg，82％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 7.89(t,J＝6.8Hz,1H),7.67(t,J＝6.8Hz,1H),7.25-7.18(m,1H),4.01(t,J＝13.4Hz,2H),3.38-3.34(m,1H),2.60-2.58(m,3H),0.53-0.35(m,4H)。

步骤3.

向1-[3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]-2-氟-苯基]乙酮(360mg，1.39mmol)和(R)-( )-2-甲基-2-丙烷亚磺酰胺(253mg，2.09mmol)在THF(5mL)中的混合物加入Ti(OEt)4(1.45mL，6.97mmol)。将混合物加热至90℃并搅拌2小时。将混合物冷却至0℃。加入MeOH(56.4μL，1.39mmol)和LiBH4(33.4mg，1.53mmol)，并且在0℃下将混合物搅拌30分钟。将反应物倒入1:1H2O/THF中，然后滤过并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化粗残余物，得到(R)-N-((R)-1-(3-(2-环丙氧基-1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(170mg，34％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 7.53–-7.48(m,2H),7.22(t,J＝7.6Hz,1H),4.88-4.86(m,1H),4.05(t,J＝13.6Hz,2H),3.52(br d,J＝4.8Hz,1H),3.44(m,1H),1.54(d,J＝6.4Hz,3H),1.23(s,9H),0.60-0.54(m,2H),0.50-0.44(m,2H)。

步骤4.

向(R)-N-((R)-1-(3-(2-环丙氧基-1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(170mg，467μmol)在MeOH(2mL)中的混合物加入4M HCl/MeOH溶液(468μL，1.87mmol)。在25℃下将反应物搅拌30分钟。然后在减压下浓缩混合物，用NaOH/MeOH逐滴处理直到pH＝7，然后再次在减压下浓缩。将残余物溶解在10:1DCM:MeOH中并过滤。在减压下浓缩滤液，得到(1R)-1-[3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]-2-氟-苯基]乙胺(121mg，粗产物)。

步骤5.

向(1R)-1-[3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]-2-氟-苯基]乙胺(121mg，467μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(212mg，700μmol)在n-BuOH(2mL)中的混合物加入DIEA(406μL，2.33mmol)。在100℃下将反应物搅拌12小时。然后过滤混合物并通过制备型HPLC纯化滤液，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]-2-氟-苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(72mg，29％产率，2个步骤)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C24H28ClF3N5O3计算值:526.2；实验值526.4。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.54(t,J＝6.8Hz,1H),7.44(t,J＝6.6Hz,1H),7.22(t,J＝7.6Hz,1H),5.59(q,J＝7.2Hz,1H),4.65(br s,2H),4.60-4.55(m,2H),4.06(t,J＝13.4Hz,2H),3.75-3.69(m,4H),3.42-3.38(m,1H),3.38-3.34(m,4H),1.59(d,J＝6.8Hz,3H),0.39-0.44(m,4H)。

实施例470.N-{1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]丙基}-2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在0℃下向3-乙酰胺基-N-甲氧基-N-甲基-5-(三氟甲基)苯甲酰胺(5g，17.23mmol)在THF(35mL)中的溶液加入LiHMDS(1M，17.23mL)，在0℃下将反应混合物搅拌0.5小时，然后在0℃下加入EtMgBr(2M，30.15mL)。在25℃下将反应混合物搅拌0.5小时，然后倒在冰上并且用2M HCl调节至pH～4。用EtOAc萃取之后，合并的有机相用盐水洗涤并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到N-[3-丙酰基-5-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(3.3g，73.9％产率)，呈淡黄色固体状。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 8.22(s,1H)8.19(s,1H)7.97(br s,1H)7.91(s,1H)3.03(q,J＝7.2Hz,2H)2.25(s,3H)1.24(t,J＝7.2Hz,3H)。

步骤2.

在25℃下向N-[3-丙酰基-5-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(3.3g，12.73mmol)、2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(3.09g，25.46mmol)在THF(30mL)中的混合物加入Ti(OEt)4(8.71g，38.19mmol，7.92mL)。在90℃下将混合物搅拌10小时。冷却至0℃之后，加入MeOH(407.90mg，12.73mmol，515.16μL)，接着加入LiBH4(277.31mg，12.73mmol)，并且在0℃下将所得混合物搅拌1小时。加入H2O，过滤混合物。用EtOAc萃取滤液，合并的有机层用盐水洗涤并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到N-[3-[1-(叔丁基亚磺酰基氨基)丙基]-5-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(2.5g，53.89％产率)，呈黄色固体状。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.89(s,1H)7.73(s,1H)7.43(s,1H)4.22(t,J＝7.2Hz,1H)2.15(s,3H)1.97(m,1H)1.80(m,1H)1.23(s,9H)0.92(t,J＝7.4Hz,3H)。

步骤3.

在25℃下向N-[3-[1-(叔丁基亚磺酰基氨基)丙基]-5-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(500mg，1.37mmol)在HCl/MeOH(4M,10mL)中的溶液搅拌3小时。在减压下浓缩反应混合物，并且将粗残余物用MeOH(2mL)稀释并且用NaOH水溶液调节至pH～8。在减压下去除溶剂，得到3-(1-氨基丙基)-5-(三氟甲基)苯胺(290mg，96.9％产率)，呈无色油状。LCMS(ESI):m/z:[M H]C10H14F3N2计算值:219.1；实验值219.0。

步骤4.

向(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(100mg，329.88μmol)和3-(1-氨基丙基)-5-(三氟甲基)苯胺(107.98mg，494.8μmol)在n-BuOH(2mL)中的溶液加入DIEA(127.90mg，989.63μmol，172.38μL)。在80℃下将混合物搅拌10小时。在减压下去除溶剂，并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[4-[1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]丙基氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(57.8mg，35.01％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H25ClF3N6O2计算值:485.2；实验值485.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 6.92(s,1H)6.89(s,1H)6.81(s,1H)5.09(s,1H)4.62(s,2H)4.57(s,2H)3.72(t,J＝4.6Hz,4H)3.35(t,J＝4.6Hz,4H)1.95-1.84(m,2H)0.97(t,J＝7.4Hz,3H)。

实施例471. 2-[3-(1-{[2-氯-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基}乙基)-2-氟苯基]-2,2-二氟乙-1-醇的合成

步骤1.

向2-[3-(1-氨基乙基)-2-氟-苯基]-2,2-二氟-乙醇盐酸盐(80mg，312.9μmol)在n-BuOH(2mL)中的溶液加入DIEA(121.32mg，938.7μmol，163.5μL)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-(4-甲氧基四氢吡喃-4-基)甲酮(103.94mg，312.91μmol)。在80℃下将混合物搅拌2小时。在减压下去除溶剂，并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[1-[3-(1,1-二氟-2-羟基-乙基)-2-氟-苯基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-(4-甲氧基四氢吡喃-4-基)甲酮(60mg，37.2％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H27ClF3N4O4计算值:515.2；实验值515.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ＝7.54-7.59(m,1H),7.45-7.52(m,1H),7.22-7.28(m,1H),5.63-5.66(m,1H),4.98-5.07(s,2H),4.51-4.62(m,2H),4.01-3.98(m,2H),3.76-3.82(m,4H),3.23-3.33(m,3H),1.94-2.12(m,4H),1.60(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例472. 2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-{1-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基}-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向1-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙胺(100.00mg，525.86μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(159.41mg，525.86μmol)在n-BuOH(1mL)中的溶液加入DIEA(135.9mg，1.05mmol，183.19μL)。在90℃下将混合物搅拌1小时。冷却至室温之后，过滤混合物并通过制备型HPLC纯化滤饼，得到[2-氯-4-[1-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(50mg，20.68％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C19H21ClF3N6O2计算值:457.1；实验值457.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ＝8.75(d,J＝5.2Hz,1H),7.73(s,1H),7.56(d,J＝4.4Hz,1H),5.45(q,J＝7.2Hz,1H),4.67(s,2H),4.58(s,2H),3.76-3.70(m,4H),3.39-3.34(m,4H),1.63(d,J＝7.2Hz,3H)。

实施例473. 2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向(1R)-1-[6-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙胺(0.1g，525.86μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(159.41mg，525.86μmol)在n-BuOH(2mL)中的溶液加入DIEA(135.93mg，1.05mmol，183.19μL)。在90℃下将混合物搅拌1小时，然后倒入冰水中。用DCM萃取之后，将合并的有机相经Na2SO4干燥并且在减压下去除溶剂。通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[6-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(80mg，23％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C19H21ClF3N6O2计算值:457.1；实验值457.0；¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δ＝7.91(t,J＝7.6Hz,1H),7.63(d,J＝7.6Hz,1H),7.54(d,J＝7.6Hz,1H),6.29(br d,J＝7.2Hz,1H),5.52(t,J＝6.8Hz,1H),4.69-4.77(m,1H),4.55-4.66(m,3H),3.70-3.79(m,4H),3.42-3.32(m,4H),1.61(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例474. 2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[2-(三氟甲基)-1,3-噻唑-5-基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

将(1R)-1-[2-(三氟甲基)噻唑-5-基]乙胺(120mg，611.64μmol)、(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(185.41mg，611.64μmol)和DIEA(395.25mg，3.06mmol，532.69μL)在n-BuOH(4mL)中的混合物脱气，然后在90℃下在N2下搅拌10小时。冷却至室温之后，在减压下去除溶剂并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[2-(三氟甲基)噻唑-5-基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(5.8mg，2.05％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C17H19ClF3N6O2S计算值:463.09；实验值462.8；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ＝7.96(s,1H)5.76(q,J＝7.00Hz,1H),4.55-4.63(m,4H),3.78-3.65(m,4H),3.37-3.33(m,4H),1.76(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例475. 2-氯-N-[(1R)-1-{3-[二氟(甲氧基)甲基]苯基}乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向3-溴苯甲酸甲酯(10g，46.50mmol)在甲苯(10mL)中的溶液加入2,4-双(4-甲氧基苯基)-2,4-二硫酮基-1,3,2,4-二硫杂二磷杂环丁烷(20.69g，51.15mmol)。在微波反应器中在140℃下将混合物搅拌4小时。冷却至室温之后，在减压下去除溶剂并通过柱色谱法纯化粗残余物，得到3-溴硫代苯甲酸O-甲酯(4g，37.22％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.29(t,J＝1.76,1H)8.08-8.16(m,1H)7.70-7.77(m,1H)7.34(t,J＝7.94,1H)4.27-4.33(m,3H)。

步骤2.

向3-溴硫代苯甲酸O-甲酯(3g，12.98mmol)在DCM(14mL)中的溶液加入DAST(6.28g，38.94mmol，5.15mL)和NBS(5.54g，31.15mmol)。在25℃下将混合物搅拌16小时，然后倒入碳酸氢盐水溶液中。用DCM萃取水相，将合并的有机相用盐水洗涤并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱法纯化粗残余物，得到1-溴-3-[二氟(甲氧基)甲基]苯(2.5g，81.25％产率。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.71(s,1H)7.62-7.66(m,1H)7.54-7.57(m,1H)7.33-7.40(m,1H)3.69(s,3H)。

步骤3.

向1-溴-3-[二氟(甲氧基)甲基]苯(1g，4.22mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(2.29g，6.33mmol，2.14mL)在二恶烷(10mL)中的混合物加入TEA(1.07g，10.55mmol，1.47mL)和Pd(PPh3)2Cl2(296.11mg，421.87μmol)。用N2对混合物鼓泡，然后在N2下在100℃下搅拌3小时，在这之后将混合物冷却至室温并加入HCl水溶液(5mL，1M)。在室温下将混合物搅拌1小时，然后过滤。滤液用EtOAc萃取，合并的有机层倒入KF水溶液(20mL，5g KF)并搅拌2小时。过滤混合物，有机层用盐水洗涤并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且在减压下去除溶剂。通过柱色谱法纯化粗残余物，得到1-[3-[二氟(甲氧基)甲基]苯基]乙酮(530mg，62.8％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.17(s,1H)8.11-8.13(d,J＝8,1H)7.81-7.83(d,J＝7.2,1H)7.58-7.62(m,J＝8,1H)3.79(s,3H)2.62(s,3H)。

步骤4.

向1-[3-[二氟(甲氧基)甲基]苯基]乙酮(530mg，2.65mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(481.34mg，3.97mmol)在THF(5mL)中的溶液加入四乙氧基钛(3.02g，13.24mmol，2.75mL)，并且在90℃下将混合物搅拌3小时。冷却至0℃之后，加入LiBH4(63.43mg，2.91mmol)和MeOH(84.83mg，2.65mmol，107.13μL)并且在0℃下将反应物搅拌30分钟。然后将反应混合物倒入水中并且用EtOAc萃取水相。合并的有机相用盐水洗涤，并且用Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱法纯化粗残余物，得到N-[(1R)-1-[3-[二氟(甲氧基)甲基]苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(640mg，60.95％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.67(s,1H)7.53-7.59(m,1H)7.48-7.52(m,1H)7.42-7.47(m,1H)4.55(q,J＝6.72,1H)3.72(s,3H)1.48-1.62(m,3H)1.18-1.34(m,9H)。

步骤5.

向N-[(1R)-1-[3-[二氟(甲氧基)甲基]苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(200mg，654.92μmol)在二恶烷(2mL)中的溶液加入HCl/二恶烷(4M，327.46μL)。在25℃下将混合物搅拌2小时。在减压下去除溶剂，得到(1R)-1-[3-[二氟(甲氧基)甲基]苯基]乙胺(131.78mg，粗物质)，未进行纯化就用于下一步。LCMS(ESI):m/z:[M H]C10H14F2NO计算值:202.1；实验值202.2。

步骤6.

向(1R)-1-[3-[二氟(甲氧基)甲基]苯基]乙胺(131mg，651.05μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(197.36mg，651.05μmol)在n-BuOH(2mL)中的溶液加入DIEA(252.43mg，1.95mmol，340.20μL)。在100℃下将混合物搅拌3小时。冷却至室温之后，在减压下去除溶剂并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-[二氟(甲氧基)甲基]苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(30mg，9.61％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H25ClF2N5O3计算值:468.2；实验值468.2；¹H NMR(400MHz,MeOH-d6)δppm 7.64(s,1H)7.51-7.53(d,J＝8Hz,1H)7.45-7.47(d,1H)7.38-7.42(t,J＝8Hz,1H)5.38–5.42(m,1H)4.54–4.59(m,4H)3.69-3.72(m,4H)3.68(s,3H)3.30-3.34(m,4H)1.56(d,J＝7.2,3H)。

实施例476. 2-氯-N-[1-(4,4-二氟-3,4-二氢-2H-1-苯并吡喃-8-基)乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向8-溴色满-4-酮(1g，4.40mmol)在DCM(5mL)和EtOH(0.1mL)中的溶液加入BAST(9.74g，44.04mmol，9.65mL)。在50℃下将混合物搅拌36小时。冷却至室温之后，加入NaHCO3水溶液并且用EtOAc萃取混合物。合并的有机层用盐水洗涤，并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱法纯化粗残余物，得到8-溴-4,4-二氟-色满(0.6g，54.70％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.63(d,J＝8.0Hz,1H)7.55(d,J＝7.2Hz,1H)6.95(t,J＝8.0Hz,1H)4.49-4.39(m,2H)2.60-2.43(m,2H)。

步骤2.

向8-溴-4,4-二氟-色满(600mg，2.41mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(1.31g，3.61mmol，1.22mL)在二恶烷(10mL)中的混合物加入TEA(609.45mg，6.02mmol，838.31μL)和Pd(PPh3)2Cl2(169.10mg，240.91μmol)。用Ar吹扫混合物，并且在100℃下搅拌10小时。冷却至室温之后，逐滴加入2M HCl直到pH～2，并且将混合物搅拌3小时。然后过滤混合物，并且用EtOAc萃取滤液。将合并的有机层倒入KF水溶液(30mL，约10g KF)并搅拌20分钟。过滤混合物，有机层用盐水洗涤并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱法(SiO2，石油醚:乙酸乙酯＝1:0至5:1)纯化粗残余物，得到1-(4,4-二氟色满-8-基)乙酮(460mg，89.98％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.81-7.75(m,2H)7.11(t,J＝7.6Hz,1H)4.52-4.46(m,2H)2.59(s,3H)2.58-2.50(m,2H)。

步骤3.

在25℃下向1-(4,4-二氟色满-8-基)乙酮(460mg，2.17mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(525.49mg，4.34mmol)在THF(5mL)中的混合物加入Ti(OEt)4(1.98g，8.67mmol，1.80mL)。在80℃下将混合物搅拌10小时。冷却至0℃之后，加入MeOH(69.46mg，2.17mmol，87.73μL)，然后加入LiBH4(51.95mg，2.38mmol)，并且在0℃下将混合物搅拌1小时。加入水并过滤混合物。用EtOAc萃取滤液，合并的有机层用盐水洗涤并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到N-[1-(4,4-二氟色满-8-基)乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(480mg，69.76％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.49(t,J＝9.2Hz,2H)7.03(t,J＝7.6Hz,1H)4.77(q,J＝6.7Hz,1H)4.41(t,J＝5.2Hz,2H)2.43-2.56(m,2H)1.46(d,J＝6.8Hz,3H)1.21(s,9H)。

步骤4.

在25℃下将N-[1-(4,4-二氟色满-8-基)乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(200.00mg，630.13μmol)在HCl/MeOH(4M，5mL)中的溶液搅拌1小时。在减压下浓缩反应混合物，得到1-(4,4-二氟色满-8-基)乙胺盐酸盐(150mg，95.34％产率)，未进行进一步纯化就使用。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H14F2NO计算值:214.1；实验值214.2。

步骤5.

向1-(4,4-二氟色满-8-基)乙胺盐酸盐(150mg，600.76μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(182.12mg，600.76μmol)在n-BuOH(1.5mL)中的溶液加入DIEA(388.21mg，3.00mmol，523.19μL)。在80℃下将混合物搅拌10小时。冷却至室温之后，在减压下去除溶剂并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[1-(4,4-二氟色满-8-基)乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(99.1mg，34.18％产率)，呈白色固体状。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H25ClF2N5O3计算值:480.2；实验值480.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.46(d,J＝7.6Hz,1H)7.39(d,J＝7.6Hz,1H)6.99(t,J＝7.6Hz,1H)5.58(d,J＝6.0Hz,1H)4.63(s,2H)4.55(d,J＝2.4Hz,2H)4.43(t,J＝5.6Hz,2H)3.72(t,J＝4.6Hz,4H)3.35(t,J＝4.6Hz,4H)2.56-2.46(m,2H)1.52(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例477. 2-氯-N-[(1R)-1-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

将(1R)-1-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙胺(70mg，344.48μmol)、(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(114.87mg，378.93μmol)和DIEA(222.61mg，1.72mmol，300.01μL)在t-BuOH(2.1mL)中的混合物用N2鼓泡并且在90℃下在N2下搅拌15小时。冷却至室温之后，在减压下去除溶剂并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(29mg，17.72％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H24ClF3N5O2计算值:470.15；实验值470.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ＝7.62(d,J＝7.7Hz,1H),7.54(d,J＝7.8Hz,1H),7.36-7.27(m,1H),5.60(q,J＝7.0Hz,1H),4.63(s,2H),4.56(d,J＝3.9Hz,2H),3.75-3.70(m,4H),3.35-3.34(m,4H),2.60(s,3H),1.54(d,J＝7.1Hz,3H)

实施例478. 2-氯-N-[(1R)-1-[3-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向(1R)-1-[3-(1,1-二氟乙基)-2-氟-苯基]乙胺(90mg，442.90μmol)在t-BuOH(2mL)中的溶液加入(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(134.26mg，442.90μmol)和DIEA(171.73mg，1.33mmol，231.44μL)。然后在90℃下将混合物搅拌2小时。冷却至室温之后，过滤混合物并通过制备型HPLC纯化滤饼，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(1,1-二氟乙基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(70.92mg，149.03μmol，33.65％产率，98.74％纯度)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H24ClF3N5O2计算值:470.2；实验值470.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.50(t,J＝7.2Hz,1H),7.45(t,J＝7.2Hz,1H),7.16-7.24(m,1H),5.59(m,1H),4.65(s,2H),4.57(d,J＝2.4Hz,2H),3.69-3.76(m,4H),3.34-3.38(m,4H),1.99(t,J＝18.6Hz,3H),1.59(d,J＝7.2Hz,3H)。

实施例479. 2-氯-N-[(1R)-1-{3-[1,1-二氟-2-(氧杂环丁-3-基氧)乙基]苯基}乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在-60℃下向N-[(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-羟基-乙基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(12.08g，39.56mmol)在DCM(120mL)中的溶液加入三氟甲烷磺酰氯(10g，59.34mmol，6.29mL)和Et3N(16.01g，158.24mmol，22.02mL)。去除冷却浴并且在25℃下将混合物搅拌2小时。加入氯化铵水溶液并且用EtOAc萃取混合物。合并的有机相用盐水洗涤，并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱法纯化粗残余物，得到[2-[3-[(1R)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]乙基]苯基]-2,2-二氟-乙基]三氟甲烷磺酸酯(10g，57.79％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C15H21F5NO4S2计算值:438.1；实验值438.0。

步骤2.

在0℃下向氧杂环丁-3-醇(677.37mg，9.14mmol)在THF(5mL)中的溶液加入NaH(109.72mg，2.74mmol，以60wt％处在矿物油中)。在0℃下将混合物搅拌1小时，然后加入[2-[3-[(1R)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]乙基]苯基]-2,2-二氟-乙基]三氟甲烷磺酸酯(0.4g，914.40μmol)并且在25℃下将混合物搅拌10小时。将反应混合物倒入冰水中并且用EtOAc萃取。合并的有机相用盐水洗涤，并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到N-[(1R)-1-[3-[1,1-二氟-2-(氧杂环丁-3-基氧)乙基]苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(100mg，30.26％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C17H26F2NO3S计算值:362.2；实验值362.1。

步骤3.

向N-[(1R)-1-[3-[1,1-二氟-2-(氧杂环丁-3-基氧)乙基]苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(70mg，193.67μmol，1当量)在MeCN(3mL)中的溶液加入NBS(34.47mg，193.67μmol)，并且在25℃下将反应物搅拌1小时。将混合物倒入Na2SO3水溶液中，搅拌15分钟并过滤。在减压下去除溶剂，得到(1R)-1-[3-[1,1-二氟-2-(氧杂环丁-3-基氧)乙基]苯基]乙胺(49mg，粗物质)，未进行进一步纯化就使用。LCMS(ESI):m/z:[M H]C13H18F2NO2计算值:258.1；实验值258.1。

步骤4.

向(1R)-1-[3-[1,1-二氟-2-(氧杂环丁-3-基氧)乙基]苯基]乙胺(49mg，190.46μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(57.74mg，190.46μmol)在t-BuOH(2mL)中的溶液加入DIEA(49.23mg，380.91μmol，66.35μL)。在90℃下将混合物搅拌1小时。冷却至室温之后，过滤混合物并通过制备型HPLC纯化滤饼，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-[1,1-二氟-2-(氧杂环丁-3-基氧)乙基]苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(28mg，27.15％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C24H29ClF2N5O4计算值:524.2；实验值524.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ＝7.58(s,1H),7.53(d,J＝6.8Hz,1H),7.39-7.46(m,2H),5.37-5.45(m,1H),4.67-4.88(m,5H),4.62-4.66(m,2H),4.46-4.50(m,1H),4.35-4.45(m,1H),3.88-3.93(m,2H),3.70-3.73(m,4H),3.33-3.36(m,4H),1.58(d,J＝7.2Hz,3H)

实施例480. 2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向(1R)-1-[5-(三氟甲基)-3-吡啶基]乙胺盐酸盐(115mg，507.44μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(153.83mg，507.44μmol)在n-BuOH(2mL)中的溶液加入DIEA(131.17mg，1.01mmol，176.77μL)，并且在90℃下将混合物搅拌1小时。冷却至室温之后，过滤反应混合物并且在减压下去除溶剂。通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[5-(三氟甲基)-3-吡啶基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(23.5mg，10.08％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C19H21ClF3N6O2计算值:457.1；实验值457.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.87(s,1H)8.77(s,1H)8.17(s,1H)5.44(q,J＝7.2Hz,1H)4.65(s,2H)4.58(s,2H)3.72(t,J＝4.6Hz,4H)3.36(t,J＝4.6Hz,4H)1.65(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例481. 2-氯-N-[(1R)-1-[5-(二氟甲基)-4-氟噻吩-3-基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向(4-溴-3-氟-2-噻吩基)甲醇(1.6g，7.58mmol)在DCE(70mL)中的溶液加入MnO2(3.30g，37.91mmol)。然后在85℃下使混合物回流2小时。冷却至室温之后，过滤混合物并且在减压下去除溶剂，得到4-溴-3-氟-噻吩-2-甲醛(1.4g，88.34％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δ＝10.04(m,1H),7.63(m,1H)。

步骤2.

在0℃下，在N2下向4-溴-3-氟噻吩-2-甲醛(1.4g，6.70mmol)在DCM(14mL)中的混合物加入DAST(2.70g，16.74mmol，2.21mL)。在20℃下将混合物搅拌2小时。将混合物倒入水中并且用EtOAc萃取。合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并且在减压下去除溶剂。通过柱色谱法纯化粗残余物，得到4-溴-2-(二氟甲基)-3-氟噻吩(850mg，54.93％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δ＝7.34-7.39(m,1H),6.77-7.08(m,1H)。

步骤3.

向4-溴-2-(二氟甲基)-3-氟-噻吩(850mg，3.68mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(1.99g，5.52mmol，1.86mL)在二恶烷(9mL)中的混合物加入TEA(930.72mg，9.20mmol，1.28mL)和Pd(PPh3)2Cl2(258.24mg，367.91μmol)。将混合物用N2鼓泡，然后在90℃下、在N2下搅拌2小时。冷却至室温之后，使用HCl水溶液将pH调节至pH＝2，并且将混合物搅拌30分钟。过滤之后，用EtOAc萃取滤液。将合并的有机相倒入KF水溶液(30mL，约3g KF)并搅拌1小时。过滤混合物，有机层用盐水洗涤并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱法纯化粗残余物，得到1-[5-(二氟甲基)-4-氟-3-噻吩基]乙酮(630mg，88.19％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δ＝8.12(d,J＝4.0Hz,1H),6.78-7.13(m,1H),2.54(d,J＝2.8Hz,3H)。

步骤4.

向1-[5-(二氟甲基)-4-氟-3-噻吩基]乙酮(600mg，3.09mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(561.77mg，4.64mmol)在THF(6mL)中的溶液加入Ti(OEt)4(2.11g，9.27mmol，1.92mL)，并且在80℃下将混合物搅拌3小时。然后将反应物冷却至0℃并加入LiBH4(87.51mg，4.02mmol)。30分钟之后，将反应物倒入冰水中并过滤所得混合物。用EtOAc萃取滤液，并且将合并的有机相经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[5-(二氟甲基)-4-氟-3-噻吩基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(520mg，56.21％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δ＝7.32(d,J＝4.6,1H),6.77-7.05(m,1H),4.58(m,1H),3.45(d,J＝4.4,1H),1.56(d,J＝6.8,3H),1.23(s,9H)。

步骤5.

在25℃下向N-[(1R)-1-[5-(二氟甲基)-4-氟-3-噻吩基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(200mg，668.06μmol)在MeOH(2mL)中的混合物加入HCl/MeOH(4M，668.06μL)。在25℃下将混合物搅拌2小时。然后在减压下去除溶剂，并且将残余物溶解在MeOH(2mL)中。加入MeOH/NaOH以便将混合物的pH调节至8。将所得残余物与DCM/MeOH＝10/1一起湿磨，过滤并且在减压下去除溶剂，得到(1R)-1-[5-(二氟甲基)-4-氟-3-噻吩基]乙胺(120mg，92.02％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C7H9F3NS计算值:196.1实验值196.1。

步骤6.

向(1R)-1-[5-(二氟甲基)-4-氟-3-噻吩基]乙胺(120mg，614.74μmol)在t-BuOH(3mL)中的溶液加入(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(186.35mg，614.74μmol)和DIEA(238.35mg，1.84mmol，321.23μL)。在90℃下将混合物搅拌2小时。冷却至室温之后，通过制备型HPLC纯化残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[5-(二氟甲基)-4-氟-3-噻吩基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(58.6mg，20.62％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C18H20ClF3N5O2S计算值:462.1实验值462.0；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ＝7.50(d,J＝4.4,1H),6.86-7.23(m,1H),5.44(m,1H),4.57-4.63(m,4H),3.70-3.75(m,4H),3.34-3.37(m,4H),1.59(d,J＝7.2,3H)。

实施例482. 2-{3-[(1R)-1-{[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基}乙基]苯基}-2-甲基丙腈的合成

步骤1.

向2-(3-溴苯基)-2-甲基-丙腈(2g，8.92mmol)在二恶烷(20mL)中的混合物加入TEA(2.26g，22.31mmol，3.11mL)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(3.87g，10.71mmol，3.61mL)和Pd(PPh3)2Cl2(626.42mg，892.47μmol)。在100℃下，在氩气下将混合物搅拌3小时。冷却至室温之后，过滤反应混合物并且向滤液加入1M HCl(20mL)。在20℃下将混合物搅拌0.5小时，加入KF水溶液并且将反应物搅拌0.5小时。用EtOAc萃取之后，将合并的有机相经Na2SO4干燥并且在减压下去除溶剂。通过柱色谱法纯化粗残余物，得到2-(3-乙酰基苯基)-2-甲基-丙腈(1.4g，83.78％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 8.06(d,J＝1.6Hz,1H)7.91(d,J＝8Hz,1H)7.70-7.77(m,1H)7.48-7.56(m,1H)2.64(s,3H)1.74-1.82(s,6H)。

步骤2.

向2-(3-乙酰基苯基)-2-甲基-丙腈(900mg，4.81mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(640.84mg，5.29mmol)在THF(15mL)中的溶液加入Ti(OEt)4(2.19g，9.61mmol，1.99mL)。在70℃下将混合物搅拌16小时。冷却至室温之后，将混合物倒入水中并且用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，得到(NZ)-N-[1-[3-(1-氰基-1-甲基-乙基)苯基]亚乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.40g，粗物质)，呈黄色油状。在-30℃下，在N2下向(NZ)-N-[1-[3-(1-氰基-1-甲基-乙基)苯基]亚乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.4g，4.82mmol)在MeOH(15mL)中的混合物加入LiBH4(210.02mg，9.64mmol)。去除冷却浴并且在室温下将反应物搅拌30分钟，然后加入H2O(20mL)并且用EtOAc萃取水相。合并的有机相用盐水洗涤，并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱法纯化粗残余物，得到N-[(1R)-1-[3-(1-氰基-1-甲基-乙基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(550mg，39.02％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 7.40(s,1H)7.26-7.34(m,2H)7.18-7.25(m,1H)4.54(qd,J＝6.62,3.00Hz,1H)3.27(br d,J＝2.08Hz,1H)1.66(d,J＝0.98Hz,6H)1.47(d,J＝6.60Hz,3H)1.07-1.22(m,9H)。

步骤3.

在20℃下将N-[(1R)-1-[3-(1-氰基-1-甲基-乙基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(170mg，581.32μmol)在HCl/二恶烷(4M，1.45mL)中的混合物搅拌1小时。在减压下去除溶剂，得到2-[3-[(1R)-1-氨基乙基]苯基]-2-甲基-丙腈盐酸盐(130mg，99.51％产率)，未进行进一步纯化就使用。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 8.66(br s,3H)7.63(s,1H)7.49(br d,J＝7.03Hz,1H)7.34-7.46(m,2H)4.45(s,1H)3.71(s,3H)1.72(d,J＝10.85Hz,6H)1.42(s,3H)。

步骤4.

向2-[3-[(1R)-1-氨基乙基]苯基]-2-甲基-丙腈盐酸盐(130mg，578.47μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(157.82mg，520.63μmol)在t-BuOH(2mL)中的混合物加入DIEA(373.82mg，2.89mmol，503.80μL)。在90℃下，在N2下将混合物搅拌1小时。在减压下去除溶剂，并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到2-[3-[(1R)-1-[[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]苯基]-2-甲基-丙腈(67.31mg，23.68％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H28ClN6O2计算值:455.2；实验值455.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.59(s,1H)7.39(s,3H)5.43(d,J＝5.07Hz,1H)4.63(s,4H)3.72(s,4H)3.36(s,4H)1.73(d,J＝1.54Hz,6H)1.62(d,J＝4.85Hz,3H)

实施例483. 2-氯-N-[(1R)-1-{3-[2-(二甲基氨基)-1,1-二氟乙基]苯基}乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在-78℃下向N-[(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-羟基-乙基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(2.00g，6.55mmol)在DCM(20mL)中的溶液加入三氟甲烷磺酰氯(1.66g，9.82mmol，1.04mL)和Et3N(2.65g，26.20mmol，3.65mL)。去除冷却浴并且在25℃下将混合物搅拌2小时。反应混合物通过加入氯化铵水溶液淬灭，用水稀释并且用EtOAc萃取。有机相用盐水洗涤，并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，得到[2-[3-[(1R)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]乙基]苯基]-2,2-二氟-乙基]三氟甲磺酸酯(2g，69.81％产率)，未进行进一步纯化就使用。LCMS(ESI):m/z:[M H]C16H21F5NO4S2计算值:438.2；实验值438.0。

步骤2.

在0℃下向[2-[3-[(1R)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]乙基]苯基]-2,2-二氟-乙基]三氟甲磺酸酯(2.00g，4.57mmol)在DCM(20mL)中的溶液加入Me2NH(4M，3.43mL)和TEA(1.85g，18.29mmol，2.55mL)。去除冷却浴并且在25℃下将混合物搅拌2小时。反应物通过加入氯化铵水溶液淬灭，用水稀释并且用EtOAc萃取。有机相用盐水洗涤，并且经Na2SO4干燥。通过柱色谱法纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-[2-(二甲基氨基)-1,1-二氟-乙基]苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.3g，76.98％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C16H27F2N2OS计算值:333.2；实验值333.1。

步骤3.

向N-[(1R)-1-[3-[2-(二甲基氨基)-1,1-二氟-乙基]苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(500.00mg，1.50mmol)在MeOH(5mL)中的溶液加入HCl/MeOH(4M，1.50mL)并且在20℃下将混合物搅拌2小时。在减压下去除溶剂，并且将残余物与MTBE和乙腈一起湿磨。将固体溶解在MeOH(2mL)中并加入MeOH/NaOH溶液，直至pH＝8。过滤之后，在减压下去除溶剂并且将残余物依次与DCM:MeOH＝10:1和乙腈一起湿磨。过滤之后，将滤饼真空干燥，得到2-[3-[(1R)-1-氨基乙基]苯基]-2,2-二氟-N,N-二甲基-乙胺(0.3g，87.38％产率)，未进行进一步纯化就使用。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H19F2N2计算值:229.1；实验值229.4。

步骤4.

向2-[3-[(1R)-1-氨基乙基]苯基]-2,2-二氟-N,N-二甲基-乙胺(100mg，438.06μmol)在t-BuOH(2mL)中的溶液加入DIEA(169.85mg，1.31mmol，228.90μL)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(132.79mg，438.06μmol)。在90℃下将反应物搅拌3小时。冷却至室温之后，过滤混合物并通过制备型HPLC纯化滤饼，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-[2-(二甲基氨基)-1,1-二氟-乙基]苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(35mg，15.82％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C24H30ClF2N6O2计算值:495.2；实验值495.1。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ＝7.57(s,1H),7.51(d,J＝7.2Hz,1H),7.45-7.37(m,2H),5.40(d,J＝6.8Hz,1H),4.55-4.64(m,4H),3.70-3.74(m,4H),3.34-3.37(m,4H),2.98(t,J＝15.2Hz,2H),2.27(s,6H),1.59(d,J＝7.2Hz,3H)。

实施例484. 2-氯-N-[(1R)-1-{3-[二氟(吗啉-2-基)甲基]苯基}乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在25℃下向2-(3-溴苯甲酰基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.8g，4.86mmol)在DAST(5mL)中的溶液加入MeOH(15.58mg，486.17μmol，19.67μL)。在60℃下将混合物搅拌2小时，冷却至室温并加入冰水中。加入NaHCO3水溶液直到pH＝7，并且用EtOAc萃取混合物。合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并且在减压下去除溶剂。通过柱色谱法纯化粗残余物，得到2-[(3-溴苯基)-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.1g，57.68％产率)。¹H NMR(三氯甲烷-d,400MHz)δppm＝7.66(s,1H),7.60(d,J＝8.4Hz,1H),7.44(d,J＝7.2Hz,1H),7.29-7.34(m,1H),4.13(m,1H),3.92(dd,J＝7.4,1H),3.72-3.87(m,2H),3.45-3.52(m,1H),2.92(s,2H),1.47(s,9H)。

步骤2.

向2-[(3-溴苯基)-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.1g，2.80mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(1.52g，4.21mmol，1.42mL)在二恶烷(10mL)中的混合物加入TEA(709.45mg，7.01mmol，975.86μL)和Pd(PPh3)2Cl2(196.84mg，280.44μmol)。用N2吹扫混合物，然后在100℃下在N2下搅拌3小时。冷却至室温之后，向混合物加入HCl水溶液(15mL，0.8M)并搅拌0.5小时(pH＝2)。然后过滤混合物，并且用EtOAc萃取滤液。将合并的有机层倒入KF水溶液(30mL，约3g KF)并且在室温下搅拌1小时。过滤混合物并用盐水洗涤有机层，经Na2SO4干燥并在减压下去除溶剂。通过柱色谱法纯化粗残余物，得到2-[(3-乙酰基苯基)-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(835mg，83.78％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C18H24F2NO4计算值:356.2；实验值356.4。

步骤3.

向2-[(3-乙酰基苯基)-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(835mg，2.35mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(711.94mg，5.87mmol)在THF(9mL)中的溶液加入Ti(OEt)4(2.68g，11.75mmol，2.44mL)，并且在80℃下将混合物搅拌3小时。冷却至0℃之后，加入LiBH4(66.54mg，3.05mmol)并且将反应物搅拌30分钟。然后将混合物加入冰水中并过滤。滤液用EtOAc萃取，并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱法纯化粗残余物，得到2-[[3-[(1R)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]乙基]苯基]-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(570mg，52.67％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H35F2N2O4S计算值:461.2；实验值461.1；

步骤4.

在25℃下向2-[[3-[(1R)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]乙基]苯基]-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(570mg，1.24mmol)在MeOH(6mL)中的溶液加入HCl/MeOH(4M，618.79μL)，并且在室温下将所得混合物搅拌4小时。在减压下去除溶剂，并且将粗残余物溶解在MeOH(5mL)中。然后加入MeOH/NaOH溶液直到pH＝8。过滤混合物并且在减压下去除溶剂。将粗残余物与DCM:MeOH＝10/1一起湿磨，并且在减压下去除溶剂，得到2-[[3-[(1R)-1-氨基乙基]苯基]-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(520mg，粗物质)，未进行进一步纯化就使用。LCMS(ESI):m/z:[M H]C18H27F2N2O3计算值:357.2；实验值357.1。

步骤5.

向2-[[3-[(1R)-1-氨基乙基]苯基]-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(470mg，1.32mmol)在t-BuOH(5mL)中的溶液加入(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(399.76mg，1.32mmol)和DIEA(511.31mg，3.96mmol，689.09μL)。在90℃下将混合物搅拌2小时。冷却至室温之后，通过加入15mL水来淬灭反应物。用EtOAc萃取混合物，合并的有机层用盐水洗涤并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱法纯化粗残余物，得到2-[[3-[(1R)-1-[[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]苯基]-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸三级丁酯(570mg，65.83％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C29H38ClF2N6O5计算值:623.3；实验值623.1。

步骤6.

在25℃下将2-[[3-[(1R)-1-[[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]苯基]-二氟-甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(470mg，754.31μmol)在HCl/MeOH(5mL)中的溶液搅拌0.5小时。在减压下去除溶剂，并且将粗残余物溶解在MeOH中。向所得混合物加入MeOH/NaOH溶液直到pH＝8。过滤混合物并且将粗残余物与DCM/MeOH＝10/1一起湿磨。在减压下去除溶剂，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-[二氟(吗啉-2-基)甲基]苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(230.3mg，57.10％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C24H30ClF2N6O3计算值:523.2；实验值523.2；¹H NMR(甲醇-d4,400MHz)δppm＝7.52(t,J＝5.8Hz,2H),7.39-7.45(m,1H),7.35-7.39(m,1H),5.41(d,J＝6.8Hz,1H),4.62(s,2H),4.57(d,J＝2.0Hz,2H),3.77-3.93(m,2H),3.70-3.74(m,4H),3.48-3.56(m,1H),3.34-3.38(m,4H),2.93(m,1H),2.58-2.74(m,3H),1.58(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例485. 2-氯-N-[(1R)-1-{3-[二氟(4-甲基吗啉-2-基)甲基]苯基}乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-[二氟(吗啉-2-基)甲基]苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(100mg，191.21μmol)在AcOH(1.2mL)和DCM(3mL)中的溶液加入NaBH(OAc)3(101.32mg，478.04μmol)和多聚甲醛(100mg)。在25℃下将混合物搅拌2小时。将混合物倒入冰水中并且用EtOAc萃取。合并的有机相用盐水洗涤，并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-[二氟-(4-甲基吗啉-2-基)甲基]苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(8.3mg，7.68％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C25H32ClF2N6O3计算值:537.2；实验值537.3；¹H NMR(甲醇-d4,400MHz):δ＝7.50-7.55(m,2H),7.40-7.45(m,1H),7.35-7.40(m,1H),5.33-5.45(m,1H),4.63(s,2H),4.57(s,2H),3.88-3.98(m,1H),3.84(m,1H),3.70-3.76(m,4H),3.57(m,1H),3.33-3.39(m,4H),2.82(d,J＝11.3Hz,1H),2.61-2.69(m,1H),2.26(d,J＝3.9Hz,3H),1.89-2.11(m,2H),1.59(d,J＝7.2Hz,3H)。

实施例486. 2-氯-N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向(1R)-1-[3-(二氟甲基)苯基]乙胺盐酸盐(150mg，722.38μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(218.98mg，722.38μmol)在t-BuOH(1mL)中的混合物加入DIEA(280.09mg，2.17mmol，377.48μL)。在90℃下，在N2下将混合物搅拌1小时。在减压下去除溶剂，并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(52.26mg，16.52％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H23ClF2N5O2计算值:438.1；实验值438.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.39-7.59(m,4H)6.65(t,J＝56.8,1H)5.39-5.54(m,1H)5.08(d,J＝6.48Hz,1H)4.48-4.70(m,4H)3.61-3.81(m,4H)3.22-3.42(m,4H)1.63(d,J＝6.97Hz,4H)。

实施例487.(R)-(2-(1,1-二氟-2-羟基乙基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)(4-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)甲酮的合成

步骤1.

向2-氯-N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-6-(4-甲氧基-环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(1.0g，2.1mmol)在无水ACN(7.5mL)中的溶液中加入三甲基溴代硅烷(820μL，6.3mmol)。在80℃下将反应混合物搅拌3天。蒸发溶剂，用饱和NaHCO3水溶液淬灭残余物并且用EtOAc萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到2-溴-N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(840mg，76％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M-H C22H23BrF3N4O3计算值:527.10；实验值:527.79。

步骤2.

向溴二氟乙酸乙酯(390μL，3.07mmol)在DMSO(3.8mL)中的溶液加入铜(195mg，3.07mmol)。在室温下将反应混合物搅拌1小时，然后加入2-溴-N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-6-(4-甲氧基-环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(650mg，1.23mmol)，并且在50℃下将反应物搅拌3小时。用冰水淬灭反应混合物，过滤并且用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，在减压下浓缩，并且通过快速柱色谱法纯化残余物，得到2-(4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]氨基}-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并-[3,4-d]嘧啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(620mg，88％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C26H30F5N4O5计算值:573.21；实验值:573.35。

步骤3.

在0℃下向2-(4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]氨基}-6-(4-甲氧基-环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(565mg，0.99mmol)在无水THF(28mL)中的溶液加入硼氢化钠(112mg，2.96mmol)。反应混合物在室温下搅拌过夜，然后加入饱和NH4Cl溶液并且用EtOAc萃取混合物。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到2-(4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]氨基}-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)-2,2-二氟乙-1-醇(477mg；91％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C24H28F5N4O4计算值:531.20；实验值:531.15。¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.28–8.22(m,1H),7.63(t,J＝7.6Hz,1H),7.49(t,J＝7.2Hz,1H),7.37–7.24(m,1H),7.42–7.00(m,1H),5.61–5.49(m,1H),5.35(t,J＝6.5Hz,1H),4.92–4.85(m,2H),4.65–4.57(m,2H),4.04–3.49(m,6H),3.18(s,3H),2.05–1.81(m,4H),1.53(dd,J＝7.1,4.3Hz,3H)。

实施例488. 2-(2-氨基-1,1-二氟乙基)-N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在0℃下向2-(4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]氨基}-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)-2,2-二氟乙-1-醇(220mg，0.41mmol)和DIPEA(87μL，0.50mmol)在DCM(7.7mL)中的搅拌溶液中逐滴加入甲烷磺酰氯(35μL，0.46mmol)。反应混合物在室温下搅拌2小时。然后用饱和NaHCO3溶液淬灭反应物并且用EtOAc萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥，然后过滤，并在减压下浓缩，得到甲烷磺酸2-(4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]氨基}-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)-2,2-二氟乙酯(280mg，定量)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C25H30F5N4O6S计算准确质量:609.17；实验值:609.05。

步骤2.

向甲烷磺酸2-(4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]氨基}-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)-2,2-二氟乙酯(192mg，0.32mmol)在HMPA(6.7mL)中的搅拌溶液加入叠氮化钠(103mg，1.58mmol)。在120℃下将反应混合物搅拌过夜，然后用水淬灭并且用乙醚萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速柱色谱法纯化所得物质，得到2-(2-叠氮基-1,1-二氟乙基)-N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(118mg，67％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C24H27F5N7O3计算值:556.20；实验值:556.15。

步骤3.

向2-(2-叠氮基-1,1-二氟乙基)-N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]-乙基]-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(105mg，0.19mmol)在MeOH(5.3mL)中的溶液加入10％钯/碳(42mg)。将混合物脱气，用氢气重填(4次)并搅拌2小时，然后滤过垫并且用甲醇、丙酮和DCM洗涤滤饼。通过制备型HPLC纯化滤液，得到2-(2-氨基-1,1-二氟乙基)-N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(32.9mg，33％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C24H29F5N5O3计算值:530.21；实验值:529.81；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.33–8.20(m,1H),7.62(t,J＝7.5Hz,1H),7.49(t,J＝7.1Hz,1H),7.32–7.24(m,1H),7.22(t,J＝54.4Hz,1H),5.54(d,J＝9.7Hz,1H),4.97–4.81(m,2H),4.70–4.52(m,2H),3.77–3.53(m,4H),3.25–2.98(m,5H),2.08–1.77(m,4H),1.53(dd,J＝7.1,4.3Hz,3H),1.39(s,2H)。

实施例500. 2-[3-(1-{[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基}乙基)苯基]丙-1-醇的合成

步骤1.

在室温下向2-(3-乙酰基苯基)丙酸乙酯(400mg，1.82mmol)和2M NH3/MeOH(4.6mL，9.2mmol)的混合物加入异丙醇钛(IV)(1.1mL，3.63mmol)。在室温下将混合物搅拌过夜，然后加入NaBH4(240mg，6.4mmol)，并且在室温下将混合物再搅拌30分钟。在减压下浓缩混合物并且向残余物加入H2O，然后滤过垫并用EtOAc和MeOH洗涤滤饼。在减压下浓缩滤液，然后用EtOAc稀释并用H2O和盐水洗涤。合并的水层用EtOAc萃取(4次)，合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到2-[3-(1-氨基乙基)苯基]丙酸乙酯(360mg，90％产率)，未进行进一步纯化就直接用于下一步。¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.33-7.03(m,4H),4.15-3.89(m,3H),3.73(q,J＝7.1Hz,1H),1.37(d,J＝7.1Hz,3H),1.22(d,J＝6.6Hz,3H),1.13(t,J＝7.1Hz,3H)。

步骤2.

在0℃下，在5分钟内向2M LiAlH4/THF(1.44mL，2.88mmol)在THF(19mL)中的混合物加入2-[3-(1-氨基乙基)苯基]丙酸乙酯(319mg，1.44mmol)在THF(9.6mL)中的溶液。允许混合物升温至室温并搅拌1小时，然后用H2O(114μL)和15％NaOH水溶液(114μL)淬灭。搅拌10分钟之后，再加入一份H2O(228μL)。将混合物搅拌2小时，过滤并且用THF洗涤滤饼。在减压下浓缩滤液，得到2-[3-(1-氨基乙基)苯基]丙-1-醇(240mg，93％产率)。产物未进行进一步纯化就用于下一步。¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.27-6.93(m,4H),4.61(t,J＝5.3Hz,1H),3.93(q,J＝6.6Hz,1H),3.55-3.37(m,2H),2.84-2.69(m,1H),1.76(br s,2H),1.22(d,J＝6.6Hz,3H),1.18(d,J＝7.0Hz,3H)。

步骤3.

2-[3-(1-{[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基}乙基)苯基]丙-1-醇是以类似于2-氯-N-{1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙-1-胺被替换为2-[3-(1-氨基乙基)苯基]丙-1-醇，得到(227mg，53％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H28ClN5O3计算值:445.19；实验值446.04；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.11(d,J＝8.0Hz,1H),7.29-7.16(m,3H),7.13-7.06(m,1H),5.38-5.17(m,1H),4.64(t,J＝5.2Hz,1H),4.59-4.43(m,4H),3.63(t,J＝4.6Hz,4H),3.55-3.38(m,2H),3.24(t,J＝4.7Hz,4H),2.85-2.71(m,1H),1.48(d,J＝7.0Hz,3H),1.19(dd,J＝7.0,1.9Hz,3H)。

实施例501. 2-[3-(1-{[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基}乙基)苯基]乙-1-醇的合成

步骤1.

2-[3-(1-{[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基}乙基)苯基]乙-1-醇是以类似于2-氯-N-{1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙-1-胺被替换为2-[3-(1-氨基乙基)苯基]乙-1-醇，得到(226mg，46％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H26ClN5O3计算值:431.17；实验值432.00；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.10(d,J＝8.0Hz,1H),7.29-7.15(m,3H),7.14-7.05(m,1H),5.27(t,J＝7.3Hz,1H),4.65(t,J＝5.2Hz,1H),4.53(d,J＝13.0Hz,4H),3.68-3.53(m,6H),3.24(t,J＝4.6Hz,4H),2.72(t,J＝7.1Hz,2H),1.48(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例502. 4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-8-甲基-6-(吗啉-4-基)-5H,6H,7H,8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的合成

步骤1.

在-15℃下，在Ar气氛下向2-(4,6-二氯代嘧啶-5-基)乙醛(6.0g，31.4mmol)在DCM(180mL)中的混合物加入吗啉(2.9mL，32.9mmol)和TFA(7.2mL，94.2mmol)。使混合物升温至室温并搅拌过夜，然后加入TMSCN(7.9mL，62.8mmol)并且在室温下将混合物搅拌过夜。加入H2O和K2CO3并且用DCM萃取混合物。将有机层干燥，过滤，在减压下浓缩并且通过柱色谱法纯化粗残余物，得到3-(4,6-二氯代嘧啶-5-基)-2-(吗啉-4-基)丙腈(3.7g，41％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H12Cl2N4O计算值:286.04；实验值287.05；¹H NMR(300MHz,CDCl3)δppm 8.76(s,1H),3.98(t,J＝8.0Hz,1H),3.80-3.70(m,4H),3.41(dd,J＝8.0,1.8Hz,2H),2.88(dt,J＝10.1,4.6Hz,2H),2.57(dt,J＝10.3,4.5Hz,2H)。

步骤2.

在Ar气氛下向3-(4,6-二氯代嘧啶-5-基)-2-(吗啉-4-基)丙腈(4.10g，14.3mmol)在THF(123mL)中的混合物加入2M MeNH2/THF(17.8mL，35.7mmol)。在室温下将混合物搅拌过夜，然后分配在H2O与EtOAc之间。将有机层干燥，过滤并在减压下浓缩滤液，得到3-[4-氯-6-(甲基氨基)嘧啶-5-基]-2-(吗啉-4-基)丙腈(4.27gg,100％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H16ClN5O计算值:281.10；实验值282.00；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.23(s,1H),7.54(d,J＝4.8Hz,1H),4.10-3.97(m,2H),3.68-3.55(m,4H),3.16(dd,J＝14.6,8.7Hz,1H),2.98(dd,J＝14.6,7.9Hz,1H),2.87(d,J＝4.4Hz,3H),2.77-2.65(m,2H),1.99(s,1H)。

步骤3.

在50℃下将3-[4-氯-6-(甲基氨基)嘧啶-5-基]-2-(吗啉-4-基)丙腈(2.0g，7.1mmol)和20％H2SO4溶液(85mL)的混合物搅拌过夜，然后在60℃下再搅拌1天。加入H2O和NaHSO3并且用EtOAc萃取混合物。在减压下浓缩有机层，并通过柱色谱法纯化粗产物，得到4-氯-8-甲基-6-(吗啉-4-基)-5H,6H,7H,8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(287mg，14％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H15ClN4O2计算值:282.09；实验值283.10；¹H NMR(300MHz,CDCl3)δppm 8.65(s,1H),3.69(t,J＝4.4Hz,4H),3.47(s,3H),3.44(dd,J＝7.6,5.7Hz,1H),3.28(dd,J＝16.9,7.7Hz,1H),3.12(dd,J＝17.0,5.6Hz,1H),2.69(t,J＝4.9Hz,4H)。

步骤4.

在密封管中，向4-氯-8-甲基-6-(吗啉-4-基)-5H,6H,7H,8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(159mg，0.56mmol)和3-[(1R)-1-氨基乙基]-5-(三氟甲基)苯胺HCl盐(162mg，0.68mmol)在1,4-二恶烷(4.8mL)中的混合物加入Cs2CO3(458mg，1.40mmol)。将混合物用Ar吹扫10分钟，然后加入Pd2(dba)3(26mg，0.28mmol)和XantPhos(33mg，0.56mmol)。将混合物加热至100℃并搅拌过夜，然后滤过并且用EtOAc萃取滤液。有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，在减压下浓缩滤液并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到4-{[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基}-8-甲基-6-(吗啉-4-基)-5H,6H,7H,8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(102mg，40％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H26F3N6O2计算值:450.20；实验值451.15；¹H NMR(300MHz,CDCl3)δppm 8.54(s,1H),7.90(s,1H),7.75(s,1H),7.37(s,1H),6.53(s,1H),4.26(q,J＝6.5Hz,1H),3.74(t,J＝4.6Hz,4H),3.57(t,J＝8.1Hz,1H),3.47(s,3H),2.92(d,J＝8.1Hz,2H),2.80(dt,J＝4.8Hz,4H),2.20(s,1H),1.46(d,J＝6.6Hz,3H)。

实施例503.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟-甲基)苯基]乙基]-2-[(甲基氨基)甲基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]-嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

将N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(600mg，1.27mmol)、N-苯甲基-N-甲基-氨基甲基三氟硼酸钾(399mg，1.66mmol)和Cs2CO3(623mg，1.91mmol)在EtOH(21.2mL)中的混合物用Ar吹扫。加入Pd(Ph3P)4(147mg，0.13mmol)，将混合物加热至135℃并且搅拌过夜。将混合物滤过垫，并在减压下浓缩滤液，然后分配在EtOAc与H2O之间。用EtOAc萃取水层(4次)，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，在减压下浓缩，并且通过柱色谱法纯化粗残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-{[苯甲基(甲基)氨基]甲基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(425mg，59％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C29H34F3N7O2计算值:569.27；实验值570.25；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.58(d,J＝7.6Hz,1H),7.34-7.12(m,5H),6.79(d,J＝7.3Hz,2H),6.65(s,1H),5.49(d,J＝5.5Hz,2H),5.29(t,J＝7.3Hz,1H),4.68-4.43(m,4H),3.63(t,J＝4.6Hz,4H),3.52(s,2H),3.49(d,J＝2.0Hz,2H),3.25(t,J＝4.7Hz,4H),2.09(s,3H),1.46(d,J＝7.0Hz,3H)。

步骤2.

在Ar气氛下将N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-{[苯甲基(甲基)-氨基]甲基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(425mg，0.74mmol)在MeOH(19.1mL)中的混合物排空并重填(3次)。在Ar气氛下加入Pd/C(20wt％，85mg)，将烧瓶排空并且将混合物置于H2气氛(气球)下。在室温下将混合物搅拌过夜，然后滤过垫，在减压下浓缩滤液并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟-甲基)苯基]乙基]-2-[(甲基氨基)甲基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]-嘧啶-4-胺(115mg，35％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H28F3N7O2计算值:479.23；实验值480.09；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.62(d,J＝7.5Hz,1H),6.80(d,J＝12.8Hz,2H),6.67(d,J＝1.9Hz,1H),5.51(s,2H),5.24(t,J＝7.3Hz,1H),4.68-4.40(m,4H),3.63(t,J＝4.6Hz,4H),3.58-3.38(m,2H),3.24(t,J＝4.6Hz,4H),2.14(s,3H),1.44(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例504.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-[(吗啉-4-基)-甲基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-[(吗啉-4-基)-甲基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2-{[苯甲基(甲基)氨基]甲基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但N-苯甲基-N-甲基-氨基甲基三氟硼酸钾被替换为(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾，得到(61mg，31％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C25H32F3N7O3计算值:535.25；实验值536.1；¹H NMR(300MHz,甲醇-d4)δppm 6.85(s,2H),6.75(s,1H),5.34(q,J＝7.0Hz,1H),4.72-4.64(m,2H),4.61(t,2H),3.74(t,J＝4.7Hz,4H),3.57(t,4H),3.38(t,J＝4.7Hz,4H),2.41(dt,J＝9.2,5.0Hz,4H),1.54(d,J＝7.1Hz,3H)。

以下实施例539是以类似于实例xx的方式合成。

实施例505.N4-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-N2-甲基-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2,4-二胺的合成

步骤1.

N4-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-N2-甲基-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2,4-二胺是以类似于N2-甲基-6-(吗啉-4-羰基)-N4-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2,4-二胺的方式合成，但2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-N-[(1R)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]-乙基]-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺被替换为2-氯-N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺，得到(156mg，63％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H25F3N6O2计算值:450.20；实验值450.97；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.59(t,J＝7.4Hz,1H),7.47(t,J＝7.1Hz,1H),7.36-7.24(m,2H),7.20(t,J＝54.4Hz,1H),6.38-6.18(m,1H),5.54(p,J＝7.0Hz,1H),4.48(q,J＝13.3Hz,2H),4.31(s,2H),3.63(t,4H),3.23(t,J＝4.6Hz,4H),2.59(d,J＝4.6Hz,3H),1.46(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例506. 2-[2-氯-3-(1-{[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基}乙基)苯基]-2,2-二氟-乙-1-醇的合成

步骤1.

在0℃下向2-(3-溴-2-氯苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1.06g，3.38mmol)在MeOH(21.8mL)中的混合物加入NaBH4(256mg，6.76mmol)。将混合物升温至室温并搅拌2小时，然后加入NH4Cl水溶液并且用Et2O萃取混合物(3次)。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，在减压下浓缩滤液并且通过柱色谱法纯化粗残余物，得到2-(3-溴-2-氯苯基)-2,2-二氟乙-1-醇(345mg，38％产率)。¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.15-7.78(m,1H),7.65(dd,J＝7.9,1.6Hz,1H),7.42(t,J＝7.9Hz,1H),5.70(t,J＝6.5Hz,1H),4.02(td,J＝14.2,6.5Hz,2H)。

步骤2.

在压力管中将2-(3-溴-2-氯苯基)-2,2-二氟乙-1-醇(345mg，1.27mmol)和Et3N(350μL，2.54mmol)在1,4-二恶烷(3.9mL)中的混合物用Ar脱气。加入三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡(558μL，1.65mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(89mg，0.13mmol)，将混合物加热至80℃并且搅拌过夜。冷却之后，加入1M HCl，将混合物搅拌1小时，然后分离水层与有机层。将1M KF溶液加入有机层，并且将混合物用力搅拌1小时，然后滤过垫。分配水层和有机层，并且用1M KF重复该程序。有机层经Na2SO4干燥，过滤，在减压下浓缩滤液并且通过柱色谱法纯化粗残余物，得到1-[2-氯-3-(1,1-二氟-2-羟基乙基)苯基]乙-1-酮(161mg，54％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C10H9ClF2O2计算值:234.03；实验值234.95；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.80-7.64(m,2H),7.56(t,J＝7.7Hz,1H),5.71(t,J＝6.5Hz,1H),4.02(td,J＝14.3,6.5Hz,2H),2.58(s,3H)。

步骤3.

2-[3-(1-氨基乙基)-2-氯苯基]-2,2-二氟乙-1-醇是以类似于2-[3-(1-氨基乙基)苯基]丙酸乙酯的方式合成，但2-(3-乙酰基苯基)丙酸乙酯被替换为1-[2-氯-3-(1,1-二氟-2-羟基乙基)苯基]乙-1-酮，得到(123mg，76％产率)。

步骤4.

2-[2-氯-3-(1-{[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基}乙基)苯基]-2,2-二氟-乙-1-醇是以类似于2-氯-N-{1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙-1-胺被替换为2-[3-(1-氨基乙基)-2-氯苯基]-2,2-二氟乙-1-醇，得到(56mg，32％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H23ClF2N5O3计算值:520.24；实验值521.0；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.28(d,J＝7.5Hz,1H),7.64(d,J＝7.5Hz,1H),7.52(dd,J＝7.9,1.8Hz,1H),7.44(t,J＝7.7Hz,1H),5.67(dt,J＝13.9,6.7Hz,2H),4.69-4.42(m,4H),4.03(tt,J＝13.7,6.4Hz,2H),3.63(t,J＝4.6Hz,4H),3.25(t,J＝4.6Hz,4H),1.47(d,J＝6.9Hz,3H)。

实施例507. 2-[3-(1-{[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基}乙基)-2-甲基苯基]-2,2-二氟乙-1-醇的合成

步骤1.

1-[3-(1,1-二氟-2-羟基乙基)-2-甲基苯基]乙-1-醇是以类似于1-[2-氯-3-(1,1-二氟-2-羟基乙基)苯基]乙-1-酮的方式合成，但2-(3-溴-2-氯苯基)-2,2-二氟乙-1-醇被替换为2-(3-溴-2-甲基苯基)-2,2-二氟乙-1-醇，得到(482mg，56％产率)。¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.72(d,J＝7.6Hz,1H),7.59(dd,J＝8.0,1.4Hz,1H),7.41(t,J＝7.8Hz,2H),5.70(t,J＝6.5Hz,1H),3.91(td,J＝14.4,6.4Hz,2H),2.56(s,3H),2.38(t,J＝2.2Hz,3H)。

步骤2.

2-[3-(1-氨基乙基)-2-甲基苯基]-2,2-二氟乙-1-醇是以类似于2-[3-(1-氨基乙基)苯基]丙酸乙酯的方式合成，但2-(3-乙酰基苯基)丙酸乙酯被替换为1-[3-(1,1-二氟-2-羟基乙基)-2-甲基苯基]乙-1-醇，得到(211mg，93％产率)，直接用于下一步。

步骤3.

2-[3-(1-{[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基}乙基)-2-甲基苯基]-2,2-二氟乙-1-醇是以类似于2-氯-N-{1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙-1-胺被替换为2-[3-(1-氨基乙基)-2-甲基苯基]-2,2-二氟乙-1-醇，得到(118mg，50％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H26ClF2N5O3计算值:481.17；实验值481.66；¹H NMR(300MHz,甲醇-d4)δppm 7.50(d,J＝7.7Hz,1H),7.43(d,J＝7.6Hz,1H),7.24(t,J＝7.8Hz,1H),5.61(q,J＝6.9Hz,1H),4.67-4.50(m,4H),3.96(td,J＝13.9,4.4Hz,2H),3.76-3.68(m,4H),3.40-3.33(m,4H),2.57(s,3H),1.53(d,J＝6.9Hz,3H)；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.26(d,J＝7.4Hz,1H),7.55(d,J＝7.6Hz,1H),7.37(dd,J＝7.9,1.5Hz,1H),7.28(t,J＝7.7Hz,1H),5.68(t,J＝6.4Hz,1H),5.55-5.39(m,1H),4.63-4.40(m,4H),3.89(td,J＝14.7,6.3Hz,2H),3.63(t,J＝4.6Hz,3H),3.24(t,J＝4.8Hz,4H),1.45(d,J＝6.9Hz,3H)。

实施例508. 2-[(环丙基氨基)甲基]-N-{1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在室温下向4-({1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基}氨基)-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-甲醛(200mg，0.44mmol)在MeOH(4mL)中的混合物加入环丙胺(40μL，0.58mmol)和pTSA(7.7mg，0.04mmol)。在室温下将混合物搅拌过夜，然后加入NaBH(OAc)3(28mg，0.44mmol)，并且在室温下将混合物再搅拌30分钟。在减压下浓缩混合物，用饱和NH4Cl稀释残余物并且用EtOAc萃取。合并的有机层经无水MgSO4干燥，过滤，在减压下浓缩滤液并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到2-[(环丙基氨基)甲基]-N-{1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(41mg，19％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C24H29F3N6O2计算值:490.23；实验值491.01；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.79(d,J＝7.0Hz,1H),7.66-7.55(m,1H),7.47(t,J＝7.1Hz,1H),7.26(t,J＝7.7Hz,1H),7.21(t,J＝54.4Hz,1H),5.56(q,J＝7.0Hz,1H),4.71-4.45(m,4H),3.75-3.59(m,4H),3.54(d,J＝6.3Hz,2H),3.25(t,J＝4.6Hz,4H),2.45-2.35(s,1H),1.89-1.78(m,1H),1.51(d,J＝7.0Hz,3H),0.31--0.01(m,4H)；¹H NMR(300MHz,甲醇-d4)δppm 7.57(t,J＝7.4Hz,1H),7.48(t,J＝7.0Hz,1H),7.24(t,J＝7.8Hz,1H),7.02(t,J＝54.9Hz,1H),5.66(q,J＝7.1Hz,1H),4.71(s,2H),4.62(s,2H),3.87-3.60(m,6H),3.50-3.37(m,4H),1.99-1.85(m,1H),1.62(d,J＝7.1Hz,3H),0.46-0.25(m,4H)。

实施例509.N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-2-{[(氧杂环丁-3-基)氨基]甲基}-5H,6H,7H-吡咯并-[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-2-{[(氧杂环丁-3-基)氨基]甲基}-5H,6H,7H-吡咯并-[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于2-[(环丙基氨基)甲基]-N-{1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但环丙胺被替换为氧杂环丁-3-胺HCl盐和Et3N，得到(11mg，59％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C24H29F3N6O3计算值:506.23；实验值507.03；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.80(d,J＝7.1Hz,1H),7.62(t,J＝7.4Hz,1H),7.50(t,J＝7.2Hz,1H),7.29(t,J＝7.7Hz,1H),7.23(t,J＝54.4Hz,1H),5.65-5.51(m,1H),4.76-4.46(m,4H),4.38(dt,J＝13.1,6.6Hz,2H),4.08(dt,J＝18.6,6.2Hz,2H),3.74(t,J＝6.4Hz,1H),3.64(t,4H),3.47(s,2H),3.26(t,J＝4.7Hz,4H),1.75(s,1H),1.51(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例510. 4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-氨基}-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-甲酰胺的合成

步骤1.

将2-氯-N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(300mg，0.62mmol)、5050(61mg，1.2mmol)、DABCO(69mg，0.62mmol)在DMSO(6mL)和异丙醇(3mL)中的混合物加热至50℃并搅拌过夜。减少混合物的体积以去除异丙醇，然后用Et2O萃取(3次)。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩滤液，得到4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]-乙基]氨基}-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-甲腈(330mg，100％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H24F3N5O3计算值:475.18；实验值476.18；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.64-8.49(m,1H),7.65(t,J＝7.6Hz,1H),7.54(t,J＝7.2Hz,1H),7.33(td,J＝7.7,3.2Hz,1H),7.24(t,J＝54.2Hz,1H),5.62-5.46(m,1H),4.90(d,J＝27.2Hz,2H),4.72-4.48(m,2H),3.77-3.54(m,4H),3.32(d,J＝7.2Hz,2H),3.17(d,J＝13.3Hz,2H),2.01-1.79(m,4H),1.53(dd,J＝7.0,4.5Hz,3H)。

步骤2.

向4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]氨基}-6-(4-甲氧基-环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-甲腈(325mg，0.68mmol)在THF(6.5mL)中的混合物加入NaOH(109mg，2.7mmol)和H2O(1.3mL)。将混合物冷却至0℃并逐滴加入H2O2(279μL，2.7mmol)，然后允许升温至室温并搅拌过夜。加入H2O，将混合物搅拌5分钟并且用EtOAc萃取(4次)。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，在减压下浓缩滤液，并通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-氨基}-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-甲酰胺(151mg，45％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H26F3N5O4计算值:493.19；实验值494.00；¹H NMR(300MHz,甲醇-d4)δppm 7.62(t,J＝7.7Hz,1H),7.48(t,J＝7.3Hz,1H),7.25(t,J＝7.7Hz,1H),6.99(t,J＝54.8Hz,1H),5.71(q,J＝7.0Hz,1H),5.02(d,J＝30.2Hz,2H),4.72(d,J＝13.0Hz,2H),3.85-3.70(m,4H),3.29(s,1H),3.25(s,2H),2.18-1.92(m,4H),1.63(d,J＝7.0Hz,3H)；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.15(t,J＝8.7Hz,1H),7.68(d,J＝7.4Hz,2H),7.59(s,1H),7.51(t,J＝7.2Hz,1H),7.31(dt,J＝7.6,3.8Hz,1H),7.21(t,J＝54.4Hz,1H),5.73(t,J＝7.1Hz,1H),4.89(d,J＝24.0Hz,2H),4.61(d,J＝22.3Hz,2H),3.63(d,J＝18.7Hz,4H),3.18(d,J＝12.3Hz,3H),2.03-1.79(m,4H),1.57-1.49(m,3H)。

实施例511. 2-氯-N-[(1R)-1-[3-氟-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

2-氯-N-[(1R)-1-[3-氟-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于2-氯-N-{1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙-1-胺被替换为(1R)-1-[3-氟-5-(三氟甲基)苯基]乙-1-胺，得到(227mg，80％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M-H]C20H20ClF4N5O2计算值:473.12；实验值471.74；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.16(d,J＝7.6Hz,1H),7.64(s,1H),7.60-7.52(m,2H),5.42-5.26(m,1H),4.67-4.45(m,4H),3.70-3.55(m,4H),3.29-3.19(m,4H),1.50(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例512. 2-氯-N-[(1R)-1-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

2-氯-N-[(1R)-1-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于2-氯-N-{1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙-1-胺被替换为(1R)-1-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]乙-1-胺，得到(251mg，87％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M-H]C20H20Cl2F3N5O2计算值:489.09；实验值487.65；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.16(d,J＝7.6Hz,1H),7.78(s,1H),7.77-7.72(m,2H),5.38-5.27(m,1H),4.68-4.45(m,4H),3.67-3.58(m,4H),3.29-3.19(m,4H),1.50(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例513. 2-氯-N-[(1R)-1-[3-溴-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

2-氯-N-[(1R)-1-[3-溴-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于2-氯-N-{1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙-1-胺被替换为(1R)-1-[3-溴-5-(三氟甲基)苯基]乙-1-胺，得到(160mg，60％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H20BrClF3N5O2计算值:533.04；实验值535.9；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.15(d,J＝7.6Hz,1H),7.92(s,1H),7.85(s,1H),7.79(s,1H),5.32(p,J＝6.4Hz,1H),4.67-4.39(m,4H),3.62(t,J＝4.6Hz,4H),3.24(t,J＝4.7Hz,4H),1.50(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例514.N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2'-氯-7',8'-二氢-5'H-螺[1,3-二氧戊环-2,6'-喹唑啉]-4'-胺的合成

步骤1.

将2',4'-二氯-7',8'-二氢-5'H-螺[1,3-二氧戊环-2,6'-喹唑啉](104mg，0.4mmol)和3-(1-氨基乙基)-5-(三氟甲基)苯胺HCl盐(101mg，0.42mmol)在DMSO(3mL)中的混合物用Ar吹扫。加入DIPEA(0.28mL，1.6mmol)，在微波照射下将混合物加热至150℃并搅拌1小时。用H2O和Et2O稀释混合物并且用Et2O(2次)和Et2O/EtOAc(1:1)萃取水层。合并的有机层用H2O洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩滤液，并通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到N-[(1R)-1-[3-氨基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-2'-氯-7',8'-二氢-5'H-螺[1,3-二氧戊环-2,6'-喹唑啉]-4'-胺(102mg，60％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C19H20ClF3N4O2计算值:428.12；实验值429.01；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 7.38(d,J＝8.0Hz,1H),6.85(s,1H),6.77(s,1H),6.70(s,1H),5.56(s,2H),5.20(p,J＝7.1Hz,1H),3.98(s,4H),2.69(t,J＝6.7Hz,2H),2.62(s,2H),1.88(t,J＝6.7Hz,2H),1.45(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例515. 2-氯-N-[(1R)-1-[3-甲基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

2-氯-N-[(1R)-1-[3-甲基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺是以类似于2-氯-N-{1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的方式合成，但1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙-1-胺被替换为(1R)-1-[3-甲基-5-(三氟甲基)苯基]乙-1-胺HCl盐，得到(148mg，64％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M-H]C21H23ClF3N5O2计算值:469.15；实验值467.76；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 8.15(d,J＝7.8Hz,1H),7.54(s,1H),7.50(s,1H),7.42(s,1H),5.35-5.26(m,1H),4.66-4.43(m,4H),3.67-3.58(m,4H),3.27-3.20(m,4H),2.38(s,3H),1.49(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例516.[4-[1-[3-(1-羟基乙基)苯基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

在N2下向1-(3-溴苯基)乙酮(3.31mL，25.1mmol)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(3.04g，25.1mmol)在THF(50mL)中的混合物加入一份Ti(OEt)4(10.4mL，50.2mmol)。将混合物加热至75℃并搅拌14小时。将混合物冷却至0℃，然后加入MeOH(937μL，23.1mmol)和LiBH4(504mg，23.2mmol)，并且在25℃下将所得混合物搅拌2小时。加入H2O(30mL)并且用EtOAc萃取混合物。合并的有机萃取物用盐水处理，用Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，获得N-[1-(3-溴苯基)乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(5.5g，78％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H19BrNOS计算值:304.0；实验值:304.0。

步骤2.

在-78℃下，在N2下向N-[1-(3-溴苯基)乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(2.0g，6.57mmol)在THF(35mL)中的混合物加入一份2.5M n-Buli溶液(7.89mL，19.7mmol)。在-78℃下将混合物搅拌30分钟，然后加入含N-甲氧基-N-甲基-乙酰胺(908μL，8.55mmol)的THF(5mL)并且在25℃下将混合物搅拌2小时。将混合物加入冰水(50mL)，搅拌20分钟并用EtOAc萃取。合并的有机萃取物用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，获得N-[1-(3-乙酰基苯基)乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(800mg，粗物质)，直接用于下一步反应。

步骤3.

将N-[1-(3-乙酰基苯基)乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(794mg，2.97mmol)溶解在4M HCl/甲醇溶液中(10mL，40mmol)，并且在25℃下将混合物搅拌30分钟。然后过滤混合物并在减压下浓缩，得到1-[3-(1-氨基乙基)苯基]乙酮盐酸盐(450mg，42％产率，2个步骤)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.64(br s,3H)8.16(s,1H)7.95(d,J＝7.6Hz,1H)7.79(d,J＝7.6Hz,1H)7.58(t,J＝7.6Hz,1H)4.48-4.52(m,1H)2.61(s,3H)1.54(d,J＝6.4Hz,3H)。

步骤4.

在N2下向1-[3-(1-氨基乙基)苯基]乙酮盐酸盐(250mg，1.53mmol)和4-氧代-5,7-二氢-4aH-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(363mg，1.53mmol)在DMF(12mL)中的混合物加入一份DBU(693μL，4.60mmol)和BOP(1.02g，2.30mmol)。在25℃下将混合物搅拌14小时。然后过滤混合物并在减压下浓缩。通过快速柱色谱法纯化粗残余物，得到4-[[(1R)-1-(3-乙酰基苯基)乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(200mg，34％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H27N4O3计算值:383.2；实验值:383.2。

步骤5.

将4-[1-(3-乙酰基苯基)乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(170mg，445μmol)溶解在4M HCl/二恶烷溶液(10mL，40mmol)中并且在25℃下搅拌30分钟。过滤混合物并在减压下浓缩，得到1-[3-[1-(6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基氨基)乙基]苯基]乙烯酮盐酸盐(75mg，粗物质)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C16H19N4O计算值:283.2；实验值:283.1。

步骤6.

向吗啉-4-羰基氯(40.7mg，273μmol)和TEA(173μL，1.24mmol)在THF(2mL)中的混合物加入1-[3-[1-(6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基氨基)乙基]苯基]乙酮盐酸盐(70mg，220μmol)。在25℃下将混合物搅拌2小时。过滤混合物并在减压下浓缩。通过制备型TLC纯化残余物，得到1-[3-[1-[[6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]苯基]乙酮(50mg，51％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H26N5O3计算值:396.2；实验值:396.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.30(br s,1H)7.96(s,1H)7.82(d,J＝7.6Hz,1H)7.72(d,J＝7.6Hz,1H)7.64(d,J＝7.6Hz,1H)7.46(t,J＝7.6Hz,1H)5.41(t,J＝7.2Hz,1H)4.47-4.69(m,4H)3.60-3.66(m,4H)3.26(m,4H)2.57(s,3H)1.50(d,J＝6.8Hz,3H)。

步骤7.

在0℃下，在N2下向1-[3-[1-[[6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]苯基]乙酮(45mg，114μmol)在MeOH(1mL)中的混合物加入NaBH4(4.3mg，114μmol)。使混合物升温至25℃并搅拌2小时。用水(0.2mL)淬灭混合物，过滤并在减压下浓缩。通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[4-[1-[3-(1-羟基乙基)苯基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(10mg，22％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H28N5O3计算值:398.2；实验值:398.1；¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 8.52(s,1H)7.40(s,1H)7.38–7.25(m,3H),5.46–5.36(m,1H)4.98–4.90(m,1H)4.73(br s,1H)3.74(t,J＝4.8Hz,4H)3.36(t,J＝4.8Hz,4H)1.94(d,J＝14.4Hz,1H)1.62(d,J＝6.8Hz,3H)1.51(dd,J＝6.8,2.0Hz,3H)。

实施例517.[2-氯-4-[1-[3-(3-氟氮杂环丁-3-基)苯基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

在-78℃下向3-(3-溴苯基)-3-氟-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.0g，3.03mmol)在THF(10ml)中的溶液加入2.5M n-BuLi溶液(3.03ml，7.58mmol)。将混合物搅拌1小时，然后在-78℃下将N-甲氧基-N-甲基-乙酰胺(468mg，4.54mmol，482.94μL)加入反应物并将混合物搅拌4小时。用水淬灭混合物，用EtOAc萃取，用盐水处理，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。通过硅胶色谱纯化粗残余物，得到3-(3-乙酰基苯基)-3-氟-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(240mg，9％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 7.98(s,1H)7.88(d,J＝7.6Hz,1H)7.61(d,J＝7.6Hz,1H)7.47(t,J＝8.0Hz,1H)4.36(dd,J＝22.4,10.0Hz,2H)4.20(dd,J＝19.2,10.0Hz,2H)2.56(s,3H)1.40(s,9H)。

步骤2.

向3-(3-乙酰基苯基)-3-氟-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(240mg，818μmol)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(198mg，1.64mmol)在THF(2.5mL)中的混合物加入Ti(OEt)4(679μL,3.27mmol)。将混合物加热至80℃并搅拌4小时。将混合物冷却至0℃，然后逐滴加入2M LiBH4溶液(409μL，818μmol)并且在0℃下将所得混合物搅拌1小时。将水加入反应混合物，然后用EtOAc萃取，用盐水处理，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过快速柱色谱法纯化粗残余物，得到3-[3-[1-(叔丁基亚磺酰基氨基)乙基]苯基]-3-氟-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(120mg，37％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H32FN2O3S计算值:399.2；实验值399.2。

步骤3.

在25℃下将3-[3-[1-(叔丁基亚磺酰基氨基)乙基]苯基]-3-氟-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(120mg，301μmol)和N-溴代琥珀酰亚胺(59.0mg，331μmol)在THF(1.5ml)中的溶液搅拌1小时。在减压下浓缩混合物，得到残余物，通过制备型HPLC进行纯化，得到3-[3-(1-氨基乙基)苯基]-3-氟-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(60mg，68％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C16H24FN2O2计算值:295.2；实验值295.1。

步骤4.

向3-[3-(1-氨基乙基)苯基]-3-氟-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(60mg，204μmol)在n-BuOH(1.5mL)中的溶液加入2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(61.8mg，204μmol)和DIPEA(142μL，815μmol)。在80℃下将混合物搅拌3小时。用水淬灭混合物，用EtOAc萃取，用盐水处理，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。通过柱色谱法纯化粗残余物，得到3-[3-[1-[[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]苯基]-3-氟-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(100mg，87％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C27H35ClFN6O4计算值:561.2；实验值561.3。

步骤5.

将3-[3-[1-[[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]苯基]-3-氟-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(100mg，178μmol)溶解在4M HCl/EtOAc溶液(89.1μL，356μmol)中，并且在25℃下将溶液搅拌2小时。在减压下浓缩混合物，得到残余物。通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[1-[3-(3-氟氮杂环丁-3-基)苯基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(40mg，45％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H27ClFN6O2计算值:461.2；实验值461.1；¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 7.90(s,1H)7.47-7.38(m,3H)6.45(br s,1H)5.52(br s,1H)4.34-4.34(m,8H)3.77-3.66(m,4H)3.37–3.28(m,4H)1.61(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例518.[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(3-羟基氮杂环丁-1-基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

在N2下向N-[(1R)-1-(3-溴苯基)乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.50g，1.64mmol)、氮杂环丁-3-醇盐酸盐(360mg，3.29mmol)和Cs2CO3(1.61g，4.93mmol)在二恶烷(5mL)中的混合物加入Xantphos(95.1mg，164μmol)和Pd2(dba)3(75.3mg，82.2μmol)。将混合物加热至100℃并且在N2下搅拌18小时。过滤反应混合物并在减压下浓缩滤液，得到残余物，通过快速柱色谱法加以纯化，得到N-[(1R)-1-[3-(3-羟基氮杂环丁-1-基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(160mg，33％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C15H25N2O2S计算值:297.2；实验值297.3。

步骤2.

向N-[(1R)-1-[3-(3-羟基氮杂环丁-1-基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-磺酰胺(90mg，304μmol)在MeOH(0.9mL)中的混合物加入4M HCl/MeOH溶液(152μL，608μmol)。在25℃下将混合物搅拌2小时。在减压下浓缩反应混合物，用MeOH(3mL)稀释残余物并且将溶液用NaOH/MeOH溶液处理，直到pH＝8。在减压下浓缩混合物，得到残余物，然后用CH2Cl2:MeOH的5:1混合物(3mL)稀释，过滤并在减压下浓缩，得到1-[3-[(1R)-1-氨基乙基]苯基]氮杂环丁-3-醇盐酸盐(65mg，94％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H17N2O计算值:193.1；实验值193.1。

步骤3.

向1-[3-[(1R)-1-氨基乙基]苯基]氮杂环丁-3-醇(110mg，572μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(173mg，572μmol)在n-BuOH(2.8mL)中的混合物加入DIEA(498μL，2.86mmol)。在80℃下将混合物搅拌3小时。然后过滤混合物并通过制备型HPLC纯化滤液，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(3-羟基氮杂环丁-1-基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(14mg，5％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H28ClN6O3计算值:459.2；实验值:459.3；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.14(t,J＝8.0Hz,1H),6.76(d,J＝7.6Hz,1H),6.55(s,1H),6.39(d,J＝8.0Hz,1H),5.37-5.30(m,1H),4.69-4.61(m,1H),4.61-4.53(m,4H),4.12(t,J＝8.0Hz,2H),3.75-3.68(m,4H),3.60-3.53(m,2H),3.39-3.33(m,4H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H)。

实施例519.[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(1-氟-2-羟基-乙基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

在室温下，在N2下向(3-乙酰基苯基)硼酸(885.42mg，5.40mmol，712.56μL)、K3PO4·3H2O(2.16g，8.10mmol)、Pd(OAc)2(30.31mg，135.00μmol)和PPh3(141.64mg，540.00μmol)的混合物加入一份二恶烷(8mL)。在室温下将混合物搅拌5分钟，然后在室温下，在N2下逐滴加入2-溴-2-氟-乙酸乙酯(500mg，2.70mmol，318.47μL)。搅拌反应混合物并加热至100℃，持续3小时。过滤混合物并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化残余物，得到2-(3-乙酰基苯基)-2-氟-乙酸乙酯(280mg，46.25％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H14FO3计算值:225.08；实验值:225.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.05(m,1H)8.01(m,1H)7.70-7.72(m,1H)7.63-7.65(m,1H)6.22-6.33(d,1H)4.19(q,J＝7.2Hz,2H)2.61(s,3H)1.16(t,J＝7.2Hz,3H)。

步骤2.

在室温下，在N2下向2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(151.35mg，1.25mmol)和2-(3-乙酰基苯基)-2-氟-乙酸乙酯(280mg，1.25mmol)在THF(5mL)中的混合物加入一份Ti(OEt)4(569.69mg，2.50mmol，517.90μL)。搅拌混合物并加热至80℃，持续8小时，得到2-[3-[(Z)-N-[(R)-叔丁基亚磺酰基]-C-甲基-碳亚氨酰]苯基]-2-氟-乙酸乙酯(400mg，97.84％产率)，呈粗物质混合物形式，未进行纯化就用于下一步。LCMS(ESI):m/z:[M H]C16H23FNO3S计算值:328.13；实验值:328.1。

步骤3.

在0℃下，在N2下向2-[3-[(Z)-N-叔丁基亚磺酰基-C-甲基-碳亚氨酰]苯基]-2-氟-乙酸乙酯(400.00mg，1.22mmol)在THF(5mL)中的混合物分批加入MeOH(39.15mg，1.22mmol，49.44μL)和LiBH4(93.15mg，4.28mmol)。在室温下将混合物搅拌30分钟。向混合物加入水(2mL)并且搅拌5分钟。用EtOAc萃取水相。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-(1-氟-2-羟基-乙基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(220mg，62.66％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C14H23FNO2S计算值:288.14；实验值:288.1。

步骤4.

在室温下将N-[(1R)-1-[3-(1-氟-2-羟基-乙基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(220mg，765.50μmol)在4M HCl/MeOH(4mL)中的混合物搅拌30分钟。在减压下浓缩混合物。向残余物加入饱和NaOH/MeOH溶液，直到pH＝7，然后过滤并在减压下浓缩。在室温下将粗产物与DCM(1mL)一起湿磨5分钟，在减压下浓缩过滤器，得到2-[3-[(1R)-1-氨基乙基]苯基]-2-氟-乙醇(200mg，粗物质)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C10H15FNO计算值:184.11；实验值:184.1。

步骤5.

在室温下，在N2下向(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(82.73mg，272.89μmol)和2-[3-[(1R)-1-氨基乙基]苯基]-2-氟-乙醇(100mg，545.79μmol)在n-BuOH(2mL)中的混合物加入一份DIEA(105.81mg，818.68μmol，142.60μL)。搅拌混合物并加热至100℃，持续1小时。过滤混合物并在减压下浓缩。通过制备型HPLC纯化粗产物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(1-氟-2-羟基-乙基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(35mg，27.15％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C21H26ClFN5O3计算值:450.16；实验值:450.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.11(br d,J＝8.4Hz,1H)7.32-7.41(m,3H)7.24(d,J＝5.2Hz,1H)5.42-5.57(m,1H)5.28-5.30(m,1H)5.17-5.18(m,1H)4.5-4.54(m,4H)3.61-3.72(m,6H)3.23-3.25(m,4H)1.48(d,J＝7.2Hz,3H)。

实施例520. 2-氯-N-[(1R)-1-[3-(环丙基氨基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向环丙基硼酸(6.36g，73.98mmol)和1-(3-氨基苯基)乙酮(2g，14.80mmol)在DCE(20mL)中的溶液加入联吡啶(2.31g，14.80mmol)、Na2CO3(3.14g，29.59mmol)和Cu(OAc)2(2.69g，14.80mmol)。在70℃下，在N2下将混合物搅拌8小时。冷却至室温之后，过滤反应物并将水加入滤液。用DCM萃取水相，并且将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并在减压下去除溶剂。通过硅胶色谱纯化粗残余物，得到1-[3-(环丙基氨基)苯基]乙酮(750mg，28.93％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H14NO计算值:176.10；实验值176.1。

步骤2.

在80℃下将1-[3-(环丙基氨基)苯基]乙酮(100mg，570.69μmol)、2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(138.34mg，1.14mmol)和Ti(OEt)4(520.72mg，2.28mmol，473.38μL)在THF(1mL)中的溶液搅拌4小时。冷却至0℃之后，加入LiBH4(2M，285.34μL)并在0℃下将所得混合物搅拌1小时。加入水并过滤反应物。用EtOAc萃取水相并且将合并的有机相用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥并在减压下去除溶剂。通过制备型TLC纯化粗残余物，得到N-[(1R)-1-[3-(环丙基氨基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(60mg，37.49％产率)。

步骤3.

在25℃下将N-[(1R)-1-[3-(环丙基氨基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(60mg，213.96υμoλ)在HCl/MeOH(4M，1mL)中的溶液搅拌搅拌0.5小时。用饱和NaOH/MeOH溶液将pH调节至7，在减压下去除溶剂并将粗残余物与DCM/MeOH(5:1，5mL)一起搅拌10分钟。过滤之后，在减压下去除溶剂，得到3-[(1R)-1-氨基乙基]-N-环丙基-苯胺(44mg，86.34％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 7.14-7.18(m,1H)6.83(s,1H)6.73-6.78(m,2H)4.16-4.23(m,1H)3.81(br d,J＝0.8Hz,2H)3.49(s,1H)2.37-2.42(m,1H)1.58(d,J＝6.8Hz,3H)0.72-0.75(m,2H)0.48-0.50(m,2H)。

步骤4.

向(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(68.80mg，226.94υμoλ)在n-BuOH(1mL)中的溶液加入DIEA(293.30mg，2.27mmol，395.29μL)和3-[(1R)-1-氨基乙基]-N-环丙基-苯胺(40mg，226.94υμoλ)。在85℃下将混合物搅拌10小时。冷却至室温之后，在减压下去除溶剂并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(环丙基氨基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(12mg，11.41％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H28ClN6O2计算值:443.19；实验值443.3；¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 7.20(t,J＝7.6Hz,1H)6.72-6.77(m,3H)5.25-5.30(m,1H)4.87(br s,1H)4.56(s,4H)3.71-3.73(m,4H)3.32-3.34(m,4H)2.43-2.45(m,1H)1.59(d,J＝6.8Hz,3H)0.75-0.76(m,2H)0.51-0.53(m,2H)。

实施例521. 2-氯-N-{1-[4-(二氟甲基)-3-氟吡啶-2-基]乙基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在25℃下，在N2下向2-溴-4-(二氟甲基)-3-氟-吡啶(0.8g，3.54mmol)在DMF(5mL)中的混合物加入一份Pd(PPh3)2Cl2(124.23mg，177.00υμoλ)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(1.53g，4.25mmol，1.43mL)。将混合物加热至100℃并搅拌2小时。加入CsF水溶液(10mL)并将混合物搅拌10分钟。过滤之后，用EtOAc萃取水相并且将合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并在减压下去除溶剂。加入HCl水溶液(2M，8.00mL)并且在25℃下将混合物搅拌1小时。加入水并且在用EtOAc萃取之后，将合并的有机相用盐水洗涤并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱法纯化粗残余物，得到1-[4-(二氟甲基)-3-氟-2-吡啶基]乙酮(0.4g，57.42％产率)。¹HNMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.54-8.64(m,1H),7.82-7.84(t,J＝4.4Hz,1H),7.13(t,J＝54.0Hz,1H),2.68(s,3H)。

步骤2.

在25℃下，在N2下向1-[4-(二氟甲基)-3-氟-2-吡啶基]乙酮(400mg，2.11mmol)在THF(5mL)中的混合物加入Ti(OEt)4(1.93g，8.46mmol，1.75ml)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(512.65mg，4.23mmol)。在80℃下将混合物搅拌2小时。冷却至0℃之后，加入LiBH4(184.28mg，8.46mmol)和MeOH(67.76mg，2.11mmol，85.58μL)并且在0℃下将反应物搅拌1小时。将混合物倒入冰水中并且用EtOAc萃取水相。合并的有机相用盐水洗涤，并且经无水Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并通过柱色谱法纯化粗残余物，得到N-[1-[4-(二氟甲基)-3-氟-2-吡啶基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-磺酰胺(0.470g，75.50％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H18F3N2SO计算值:294.10；实验值295.1。

步骤3.

向N-[1-[4-(二氟甲基)-3-氟-2-吡啶基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.180g，611.55υμoλ)在MeOH(7mL)中的溶液加入HCl/MeOH(4M,305.77μL)，并且在25℃下将反应物搅拌0.5小时。在减压下去除溶剂，并且将粗残余物溶解在MeOH(4mL)中，并且用饱和NaOH/MeOH溶液调节至pH＝7。在减压下去除溶剂并且将残余物溶解在DCM:MeOH(5:1，5mL)中。过滤混合物并浓缩，得到1-[4-(二氟甲基)-3-氟-2-吡啶基]乙胺(50mg，42.99％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C8H10F3N2计算值:191.07；实验值191.1。

步骤4.

向1-[4-(二氟甲基)-3-氟-2-吡啶基]乙胺(100mg，525.86μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(191.29mg，631.03μmol)在n-BuOH(2mL)中的混合物加入DIEA(339.82mg，2.63mmol，457.98μL)。然后将混合物加热至80℃并且在N2下搅拌2小时。在减压下去除溶剂之后，通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[1-[4-(二氟甲基)-3-氟-2-吡啶基]乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(70mg，28.70％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C19H21ClF3N6O4计算值:456.13；实验值457.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.46(d,J＝4.8Hz,1H),7.52(t,J＝5.2Hz,1H),7.10(t,J＝54Hz,1H),5.66-5.72(m,1H),4.65(s,2H),4.54(d,J＝1.6Hz,2H),3.71-3.73(m,4H),3.34-3.37(m,4H),1.60(d,J＝7.2Hz,3H)。

实施例522. 2-氯-N-[(1R)-1-[2-氯-3-(二氟甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在80℃下将1-[2-氯-3-(二氟甲基)苯基]乙酮(250mg，1.22mmol)、2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(296.19mg，2.44mmol)和Ti(OEt)4(1.11g，4.89mmol，1.01mL)在THF(2mL)中的混合物搅拌4小时。冷却至0℃之后，加入LiBH4(2M，610.95μL)并且在0℃下将反应物搅拌1小时。加入水并且用EtOAc萃取混合物。合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并且在减压下去除溶剂。通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到N-[(1R)-1-[2-氯-3-(二氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(160mg，53.33％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C13H19ClF2NOS计算值:310.08；实验值310.1。

步骤2.

在25℃下，将N-[(1R)-1-[2-氯-3-(二氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(150mg，484.18μmol)在HCl/MeOH(1.3mL，4M)中的溶液搅拌0.5小时。用饱和NaOH/MeOH溶液将pH调节至7。在减压下去除溶剂，并且将残余物与DCM/MeOH(10:1)(4mL)一起搅拌10分钟，然后过滤。在减压下去除溶剂，得到(1R)-1-[2-氯-3-(二氟甲基)苯基]乙胺(62mg，62.27％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C9H11ClF2N计算值:206.05；实验值206.1。

步骤3.

向(1R)-1-[2-氯-3-(二氟甲基)苯基]乙胺(62.00mg，301.51μmol)在n-BuOH(0.6mL)中的溶液加入DIEA(311.74mg，2.41mmol，420.13μL)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(100.54mg，331.66μmol)。在85℃下将混合物搅拌10小时。冷却至室温之后，在减压下去除溶剂并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[2-氯-3-(二氟甲基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(61mg，42.54％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H22Cl2F2N5O2计算值:472.10；实验值472.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.57-7.60(m,2H)7.40-7.44(m,1H)7.11(t,J＝54.8Hz,1H)5.72-5.73(m,1H)4.66(m,2H)4.57(m,2H)3.72-3.74(m,4H)3.35-3.37(m,4H)1.57(d,J＝7.2Hz,3H)。

实施例523. 2-氯-N-[(1R)-1-(4,4-二氟-3,4-二氢-1H-2-苯并吡喃-8-基)乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向8-溴异色满-4-酮(200mg，880.85μmol)在BAST(2mL)中的溶液加入EtOH(4.06mg，88.08μmol，5.15μL)。在80℃下将混合物搅拌2小时。冷却至室温之后，加入水并且用EtOAc萃取混合物。然后将合并的有机相用盐水洗涤，并且用无水Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱法纯化粗残余物，得到化合物8-溴-4,4-二氟-异色满(400mg，91.17％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.69(d,J＝7.6Hz,2H),7.36(t,J＝8.0Hz,1H),4.77(s,2H),4.06-4.11(m,2H)。

步骤2.

向8-溴-4,4-二氟-异色满(0.4g，1.61mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(696.05mg，1.93mmol，650.51μL)在DMF(4mL)中的溶液加入Pd(PPh3)2Cl2(56.37mg，80.30μmol)。在100℃下，在N2下将混合物搅拌2小时。加入CsF水溶液(5mL)并将混合物搅拌10分钟。用EtOAc萃取水相。合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并在减压下去除溶剂，得到8-(1-乙氧基乙烯基)-4,4-二氟-异色满(1g，粗物质)，未进行进一步纯化就使用。LCMS(ESI):m/z:[M H]C13H15F2O2计算值:241.10；实验值241.0。

步骤3.

在25℃下，将8-(1-乙氧基乙烯基)-4,4-二氟-异色满(1g，4.16mmol)在2N HCl(10mL)中的溶液搅拌1小时。用EtOAc萃取混合物，合并的有机相用盐水洗涤并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过柱色谱法(SiO2，石油醚:EtOAc＝100:1至0:1)纯化粗残余物，得到1-(4,4-二氟异色满-8-基)乙酮(90mg，10.19％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H11F2O2计算值:213.1；实验值213.2。

步骤4.

在25℃下向1-(4,4-二氟异色满-8-基)乙酮(90mg，424.14μmol)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(102.81mg，848.29μmol)在THF(1mL)中的混合物加入Ti(OEt)4(387.00mg，1.70mmol，351.82μL)。在80℃下将混合物搅拌1小时。冷却至0℃之后，在0℃下将MeOH(13.59mg，424.14μmol，17.16μL)和LiBH4(36.96mg，1.70mmol)加入混合物。在25℃下将混合物搅拌1小时。加入水并且用EtOAc萃取混合物。合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并且在减压下去除溶剂。通过柱色谱法纯化粗残余物，得到化合物N-[(1R)-1-(4,4-二氟异色满-8-基)乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(40mg，29.71％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C15H22F2NO2S计算值:318.13；实验值318.2；

步骤5.

向N-[(1R)-1-(4,4-二氟异色满-8-基)乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(40mg，126.03μmol)在MeOH(2mL)中的溶液加入HCl/MeOH(4M,63.01μL)。在25℃下将混合物搅拌1小时。在减压下去除溶剂，并且将残余物溶解在MeOH(2mL)中。用饱和NaOH/MeOH溶液将pH调节至pH＝7。然后浓缩混合物并且再溶解在DCM和MeOH的混合物(5:1，5mL)中。过滤之后，在减压下去除溶剂，得到(1R)-1-(4,4-二氟异色满-8-基)乙胺(40mg，粗物质)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H14F2NO计算值:214.1；实验值214.2。

步骤6.

向(1R)-1-(4,4-二氟异色满-8-基)乙胺(40mg，187.60μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(68.24mg，225.12μmol)在n-BuOH(1mL)中的溶液加入DIEA(242.46mg，1.88mmol，326.76μL)。在85℃下将混合物搅拌1小时。冷却至室温之后，在减压下去除溶剂并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-(4,4-二氟异色满-8-基)乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(23mg，25.16％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H25ClF2N5O3计算值:480.15；实验值480.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.53-7.58(m,1H),7.37-7.42(m,1H),5.36(d,J＝15.2Hz,1H),5.15-5.20(m,1H),4.97(d,J＝15.6Hz,1H),4.54-4.61(m,4H),4.03-4.12(m,2H),3.70-3.73(m,4H),3.33-3.36(m,4H),1.54(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例524. 2-氯-N-[(1R)-1-[3-(环丙氧基二氟甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

将P2S5(1.01g，4.56mmol，485.26μL)和三甲基(三甲基硅氧基)硅烷(2.96g，18.25mmol，3.88mL)加入3-溴苯甲酸环丙酯(4.4g，18.25mmol)在二甲苯(44mL)中的溶液，并且在140℃下将溶液搅拌12小时。将反应物冷却至0℃，倒入K2CO3水溶液并且用MTBE萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并且在减压下去除溶剂。在硅胶上通过柱色谱法纯化粗残余物，得到3-溴硫代苯甲酸O-环丙酯(3.2g，68.18％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.27(t,J＝2.0Hz,1H),8.10(t,J＝8.0Hz,1H),7.68(t,J＝7.2Hz,1H),7.30(t,J＝4.0Hz,1H),4.78-4.80(m,1H),0.99-1.02(m,4H)。

步骤2.

将SbCl3(47.90mg，210.00μmol)和2-甲氧基-N-(2-甲氧基乙基)-N-(三氟-硫烷基)乙胺(650.44mg，2.94mmol，644.00μL)加入3-溴硫代苯甲酸O-环丙酯(0.54g，2.10mmol)在DCM(6mL)中的溶液。在25℃下将溶液搅拌2小时。将反应物倒入水中并且用DCM萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并且在减压下去除溶剂。在硅胶上通过柱色谱法(石油醚:EtOAc＝1:0至0:1)纯化粗残余物，得到1-溴-3-[环丙氧基(二氟)甲基]苯(0.5g，90.50％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.74(s,1H),7.60(d,J＝8.0Hz,1H),7.53(d,J＝8.0Hz,1H),7.30(t,J＝8.0Hz,1H),3.91-3.94(m,1H),0.84-0.88(m,2H),0.67-0.72(m,2H)。

步骤3.

向1-溴-3-[环丙氧基(二氟)甲基]苯(0.4g，1.52mmol)在DMF(4mL)中的混合物加入Pd(PPh3)2Cl2(53.36mg，76.02μmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(658.94mg，1.82mmol，615.83μL)。将混合物加热至100℃并且在N2下搅拌2小时。加入饱和CsF水溶液并将混合物搅拌10分钟。用MTBE萃取水相，合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并且在减压下去除溶剂，得到1-[环丙氧基(二氟)-甲基]-3-(1-乙氧基乙烯基)苯(0.75g，粗物质)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C14H17F2O2计算值:255.12；实验值255.2。

步骤4.

在20℃下将1-[环丙氧基(二氟)甲基]-3-(1-乙氧基乙烯基)苯(0.75g，2.95mmol)在HCl水溶液(2M，7.50mL)中的溶液搅拌1小时。将混合物倒入水中并且用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并且在减压下去除溶剂。在硅胶上通过柱色谱法纯化粗残余物，得到1-[3-[环丙氧基(二氟)甲基]苯基]乙酮(0.13g，19.48％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.17(s,1H),8.06(d,J＝7.6Hz,1H),7.80(d,J＝7.6Hz,1H),7.54(t,J＝7.6Hz,1H),3.95-3.97(m,1H),2.64(s,3H),0.86-0.95(m,2H),0.70-0.73(m,2H)。

步骤5.

向1-[3-[环丙氧基(二氟)甲基]苯基]乙酮(100mg，442.05μmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(107.15mg，884.10μmol)在THF(2mL)中的混合物加入Ti(OEt)4(403.34mg，1.77mmol，366.67μL)。然后在70℃下将混合物搅拌3小时。冷却至0℃之后，加入MeOH(14.16mg，442.05μmol，17.89μL)和LiBH4(38.52mg，1.77mmol，1.50mL)，并且在0℃下将混合物搅拌1小时。加入水并且用EtOAc萃取混合物。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并且在减压下去除溶剂。通过制备型TLC纯化粗残余物，得到N-[(1R)-1-[3-[环丙氧基(二氟)甲基]苯基]乙基]-2-甲基-丙-2-亚磺酰胺(0.12g，81.91％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.56(s,1H),7.52(d,J＝7.6Hz,1H),7.47(d,J＝8.0Hz,1H),7.41(t,J＝7.2Hz,1H),4.58-4.61(m,1H),3.92-3.94(m,1H),3.41(s,1H),1.53(d,J＝6.4Hz,3H),1.25(s,9H),0.85-0.88(m,2H),0.68-0.70(m,2H)。

步骤6.

将HCl/MeOH(4M，181.04μL)加入N-[(1R)-1-[3-[环丙氧基(二氟)甲基]苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.12g，362.08μmol)在MeOH(2.4mL)中的溶液。在20℃下将溶液搅拌2小时。用NaOH/MeOH将混合物的pH调节至8。在减压下去除溶剂，并且将残余物加入6mL(MeOH:DCM＝1:5)溶液。在20℃下将悬浮液搅拌10分钟，并且在减压下去除溶剂，得到(1R)-1-[3-[环丙氧基(二氟)甲基]苯基]乙胺(0.1g，粗物质。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.61(br s,2H),7.68(s,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,1H),7.57(d,J＝8.0Hz,1H),7.42(t,J＝7.6Hz,1H),4.39-4.46(m,1H),3.91-3.93(m,1H),1.66(d,J＝6.8Hz,3H),0.83-0.87(m,2H),0.63-0.68(m,2H)。

步骤7.

向(1R)-1-[3-[环丙氧基(二氟)甲基]苯基]乙胺(0.1g，440.04μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(160.08mg，528.05μmol)在n-BuOH(2mL)中的溶液加入DIEA(284.36mg，2.20mmol，383.24μL)。在100℃下将混合物搅拌3小时。冷却至室温之后，将混合物倒入水中并且用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并且在减压下去除溶剂。通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-[环丙氧基(二氟)甲基]苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(63mg，25.56％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H27ClF2N5O3计算值:494.17；实验值494.3；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.60(s,1H),7.53(d,J＝8.0Hz,1H),7.48(d,J＝7.2Hz,1H),7.42(t,J＝8.0Hz,1H),5.45-5.46(m,1H),4.87-4.88(m,1H),4.57-4.59(m,4H),3.92-3.95(m,1H),3.73(t,J＝4.8Hz,4H),3.34(t,J＝4.8Hz,4H),1.63(d,J＝7.2Hz,3H),0.84-0.88(m,2H),0.66-0.71(m,2H)。

实施例525.N-[(1R)-1-[3-(2-氨基-1,1-二氟乙基)苯基]乙基]-2-氯-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在-78℃下，向N-[(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-羟基-乙基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(2g，6.55mmol)和异吲哚啉-1,3-二酮(1.93g，13.10mmol)在THF(20mL)中的溶液逐滴加入PPh3(3.44g，13.10mmol)和DIAD(2.65g，13.10mmol，2.55mL)。在25℃下将反应物搅拌12小时，在减压下去除溶剂，将残余物溶解在H2O中并且用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，并且经Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂，并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到N-[(1R)-1-[3-[2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1,1-二氟-乙基]苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(380mg，12％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H25F2N2O3S计算值:435.1；实验值435.2。

步骤2.

向N-[(1R)-1-[3-[2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1,1-二氟-乙基]苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(350mg，805.53μmol)在MeOH(3.5mL)中的溶液加入HCl/MeOH(4M，402.76μL)。在25℃下将混合物搅拌2小时，然后使用饱和NaOH/MeOH调节至pH＝7～8。在减压下去除溶剂，得到2-[2-[3-[(1R)-1-氨基乙基]苯基]-2,2-二氟-乙基]异吲哚啉-1,3-二酮(266mg，粗物质)，未进行进一步纯化就使用。LCMS(ESI):m/z:[M H]C18H17F2N2O2计算值:331.1；实验值331.2。

步骤3.

向2-[2-[3-[(1R)-1-氨基乙基]苯基]-2,2-二氟-乙基]异吲哚啉-1,3-二酮(266mg，805.26μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-(4-甲氧基四氢吡喃-4-基)甲酮(267.49mg，805.26μmol)在t-BuOH(1mL)中的溶液加入DIEA(1.04g，8.05mmol，1.40mL)。在90℃下将混合物搅拌8小时，冷却至室温，并且在减压下去除溶剂。用H2O稀释残余物，并且用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并且在减压下去除溶剂。通过柱色谱法纯化粗残余物，得到2-[2-[3-[(1R)-1-[[2-氯-6-(4-甲氧基四氢吡喃-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]苯基]-2,2-二氟-乙基]异吲哚啉-1,3-二酮(260mg，51.57％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C31H31ClF2N5O5计算值:626.2；实验值626.4。

步骤4.

向2-[2-[3-[(1R)-1-[[2-氯-6-(4-甲氧基四氢吡喃-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]苯基]-2,2-二氟-乙基]异吲哚啉-1,3-二酮(100mg，159.73μmol)在EtOH(0.5mL)中的溶液加入NH2NH2·H2O(8.00mg，159.73μmol，7.76μL)。在50℃下将混合物搅拌2小时。加入水并且通过制备型HPLC直接纯化混合物，得到[4-[[(1R)-1-[3-(2-氨基-1,1-二氟-乙基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-(4-甲氧基四氢吡喃-4-基)甲酮(10mg，12.62％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H29ClF2N5O3计算值:496.2；实验值496.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.58(s,1H)7.52(d,J＝7.2Hz,1H)7.39-7.46(m,2H)5.40-5.43(m,1H)4.96(s,1H)4.87(s,1H)4.61(d,J＝16.4Hz,2H)3.76-3.77(m,4H)3.16-3.27(m,5H)1.92-2.10(m,4H)1.59(d,J＝7.2Hz,3H)。

实施例526.N-[(1R)-1-[3-(2-氨基-1,1-二氟乙基)-2-氟苯基]乙基]-2-氯-6-(4-甲氧基环氧乙烷-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在25℃下，向2-溴-2,2-二氟-乙酸乙酯(10.12g，49.85mmol，6.40mL)在DMSO(70mL)中的溶液加入Cu(3.80g，59.82mmol，424.27μL)。在25℃下将反应混合物搅拌1小时，此后加入1-溴-2-氟-3-碘-苯(6g，19.94mmol)。在70℃下将所得反应混合物搅拌3小时。允许反应物冷却至室温，然后用H2O(60mL)稀释。过滤混合物并且用EtOAc萃取溶液。合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并且真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化所得残余物，得到2-(3-溴-2-氟-苯基)-2,2-二氟-乙酸乙酯(4.8g，81.03％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.68-7.72(m,1H)7.59(t,J＝6.4Hz,1H)7.15(t,J＝8.0Hz,1H)4.37(q,J＝7.2Hz,2H)1.34(t,J＝7.2Hz,3H)。

步骤2.

在25℃下，将2-(3-溴-2-氟-苯基)-2,2-二氟-乙酸乙酯(4.8g，16.16mmol)在5M NH3/MeOH(50mL)中的溶液搅拌2小时。在减压下浓缩反应物，得到2-(3-溴-2-氟-苯基)-2,2-二氟-乙酰胺(4.2g，96.98％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.70(t,J＝7.2Hz,1H)7.62(t,J＝6.8Hz,1H)7.15(t,J＝7.6Hz,1H)6.25(br d,J＝205.6Hz,2H)

步骤3.

在0℃下将硼烷二甲硫醚(10M，10.97mL)逐滴加入a solution of 2-(3-溴-2-氟-苯基)-2,2-二氟-乙酰胺(4.2g，15.67mmol)在THF(42mL)中的溶液。在0℃下将反应混合物搅拌0.5小时。然后在70℃下将混合物搅拌10小时。将反应混合物冷却至25℃，并通过逐滴加入2N HCl(50mL)直到将pH调节至pH＝9进行淬灭。用EtOAc萃取混合物并且用盐水洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥，并真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化所得残余物，得到2-(3-溴-2-氟-苯基)-2,2-二氟-乙胺(2.5g，62.80％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C8H8BrF3N计算值:253.97；实验值254.0；

步骤4.

向2-(3-溴-2-氟-苯基)-2,2-二氟-乙胺(2.4g，9.45mmol)在THF(25mL)中的溶液加入DIPEA(2.44g，18.89mmol，3.29mL)和Boc2O(2.06g，9.45mmol，2.17mL)。在25℃下将混合物搅拌3小时。用水稀释反应物，然后用EtOAc萃取。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到N-[2-(3-溴-2-氟-苯基)-2,2-二氟-乙基]氨基甲酸叔丁酯(3.0g，84.28％产率，94％纯度)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.65(t,J＝6.4Hz,1H)7.47(t,J＝6.8Hz,1H)7.09(t,J＝7.6Hz,1H)4.83-4.85(m,1H)3.82-3.90(m,2H)1.36(s,9H)

步骤5.

在20℃下，在N2下向N-[2-(3-溴-2-氟-苯基)-2,2-二氟-乙基]氨基甲酸叔丁酯(3.0g，8.47mmol)在DMF(40mL)中的溶液一次性加入Pd(PPh3)2Cl2(297.28mg，423.53μmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(4.28g，11.86mmol，4.00mL)。将混合物加热至100℃，持续2小时。加入饱和CsF(50mL)并且将所得混合物搅拌10分钟，然后过滤。用EtOAc萃取水相。合并的有机相用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并且真空浓缩。然后将1N HCl(40mL)水溶液加入混合物。在25℃下将反应物搅拌2小时。用EtOAc萃取混合物。合并的有机相用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并且真空浓缩。通过柱色谱法纯化剩余的残余物，得到N-[2-(3-乙酰基-2-氟-苯基)-2,2-二氟-乙基]氨基甲酸叔丁酯(1.65g，61.39％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.90-8.10(m,1H)7.69-7.72(m,1H)7.28-7.30(m,1H)7.85-7.87(m,1H)3.88-3.97(m,2H)2.68(d,J＝5.6Hz,3H)1.33(s,9H)

步骤6.

向N-[2-(3-乙酰基-2-氟-苯基)-2,2-二氟-乙基]氨基甲酸叔丁酯(300mg，945.47μmol)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(229.18mg，1.89mmol)在THF(4mL)中的溶液加入Ti(OEt)4(862.68mg，3.78mmol，784.25μL)。在80℃下将混合物搅拌4小时。然后将反应物冷却至0℃，并且将LiBH4(20.60mg，945.47μmol，472.73μL)加入混合物。在0℃下将反应物搅拌1小时。用水(2mL)稀释反应物并过滤。用EtOAc萃取所得滤液。合并的有机相用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并且真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，得到N-[2-[3-[(1R)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]乙基]-2-氟-苯基]-2,2-二氟-乙基]氨基甲酸叔丁酯(120mg，30.04％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.45-7.50(m,2H)7.10-7.22(m,1H)4.81-4.85(m,1H)3.84-3.95(m,2H)1.56(d,J＝6.8Hz,3H)1.35(s,9H)1.24(s,9H)

步骤7.

向N-[2-[3-[(1R)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]乙基]-2-氟-苯基]-2,2-二氟-乙基]氨基甲酸叔丁酯(120mg，284.02μmol)在MeOH(1mL)中的溶液加入HCl/MeOH(4M，142.01μL)。在25℃下将混合物搅拌2小时。然后通过加入饱和NaOH/MeOH溶液将pH调节至7。真空浓缩所得混合物。将剩余的残余物与DCM/MeOH(5:1)(5mL)一起搅拌10分钟，然后过滤并真空浓缩，得到N-[2-[3-[(1R)-1-氨基乙基]-2-氟-苯基]-2,2-二氟-乙基]氨基甲酸叔丁酯(90mg，282.72μmol，99.54％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C15H22F3N2O2计算值:319.16；实验值319.2。

步骤8.

向N-[2-[3-[(1R)-1-氨基乙基]-2-氟-苯基]-2,2-二氟-乙基]氨基甲酸叔丁酯(90mg，282.72μmol)在n-BuOH(1mL)中的溶液加入(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-(4-甲氧基四氢吡喃-4-基)甲酮(103.31mg，310.99μmol)和DIEA(146.16mg，1.13mmol，196.98μL)。在80℃下将混合物搅拌2小时。通过水(1mL)淬灭反应混合物，然后用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化所得残余物，得到N-[2-[3-[(1R)-1-[[2-氯-6-(4-甲氧基四氢吡喃-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]-2-氟-苯基]-2,2-二氟-乙基]氨基甲酸叔丁酯(120mg，69.12％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C28H36ClF3N5O5计算值:614.24；实验值614.3；RT＝0.859min。¹H NMR(400MHz,MeOH)δppm 7.52(m,1H)7.41(m,1H)7.18(m,1H)5.57-5.60(m,1H)4.90-5.00(m,2H)4.56-4.67(m,2H)3.65-3.77(m,6H)3.24(d,J＝14.8Hz,3H)2.04-2.10(m,2H)1.86-1.96(m,2H)1.60-1.63(m,3H)1.22(s,9H)

步骤9.

向N-[2-[3-[(1R)-1-[[2-氯-6-(4-甲氧基四氢吡喃-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]-2-氟-苯基]-2,2-二氟-乙基]氨基甲酸叔丁酯(120mg，195.42μmol)在EtOAc(1mL)中的溶液加入HCl/EtOAc(4M，97.71μL)。在25℃下将反应物搅拌2小时。在减压下浓缩反应物，并通过制备型HPLC纯化所得残余物，得到[4-[[(1R)-1-[3-(2-氨基-1,1-二氟-乙基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-(4-甲氧基四氢吡喃-4-基)甲酮(38mg，37.59％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H28ClF3N5O3计算值:514.18；实验值514.3；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.45-7.51(m,2H)7.19-7.24(m,1H)5.58-5.60(m,1H)4.87-5.12(m,1H)4.84(d,J＝15.6Hz,2H)4.67(d,J＝23.6Hz,2H)3.72-3.82(m,4H)3.33(t,J＝16.0Hz,2H)3.23(d,J＝24.0Hz,3H)2.09-2.18(m,2H)1.85-1.93(m,2H)1.65(d,J＝7.2Hz,3H)

实施例527. 2-氯-N-[(1R)-1-[2-氟-3-(氟甲基)苯基]乙基]-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

在0℃下，在N2下向(3-溴-2-氟-苯基)甲醇(1g，4.88mmol)在DCM(10mL)中的溶液加入含DAST(1.57g，9.75mmol，1.29mL)的DCM(10mL)。然后使反应混合物升温至25℃并搅拌2小时。用水稀释反应物并用EtOAc萃取水相。合并的有机相用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并且真空浓缩。通过柱色谱法纯化所得残余物，得到1-溴-2-氟-3-(氟甲基)苯(0.8g，粗物质)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.62-7.66(m,1H),7.43-7.47(m,1H),7.13-7.17(m,1H),5.48(d,J＝48.0Hz,2H)。

步骤2.

在25℃下，在N2下向1-溴-2-氟-3-(氟甲基)苯(0.5g，2.42mmol)在DMF(3mL)中的溶液一次性加入Pd(PPh3)2Cl2(84.76mg，120.76μmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(1.05g，2.90mmol，978.25μL)。将混合物加热至100℃并搅拌2小时。然后加入CsF水溶液(3mL)并将反应物搅拌10分钟，然后过滤。用EtOAc萃取水相。合并的有机相用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并且真空浓缩。将所得残余物溶解在2N HCl(10mL)中，并在25℃下搅拌2小时。通过柱色谱法纯化混合物，得到1-[2-氟-3-(氟甲基)苯基]乙酮(150mg，36.50％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.87-7.95(m,1H),7.70-7.73(m,1H),7.31-7.36(m,1H),5.53(d,J＝48.4Hz 2H),2.64(d,J＝4.8Hz,3H)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C9H9F2O计算值:171.05；实验值171.2。

步骤3.

在25℃下，在N2下向1-[2-氟-3-(氟甲基)苯基]乙酮(0.150g，881.55μmol)在THF(5mL)中的溶液加入Ti(OEt)4(804.36mg，3.53mmol，731.23μL)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(213.69mg，1.76mmol)。在80℃下将混合物搅拌2小时。冷却至0℃之后，将LiBH4(76.80mg，3.53mmol)和MeOH(28.24mg，881.55μmol，35.67μL)加入混合物并且在0℃下将混合物搅拌1小时。用水稀释残余物，并且用EtOAc萃取。合并的有机相用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并且真空浓缩。纯化剩余的残余物，得到N-[(1R)-1-[2-氟-3-(氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(100mg，41.20％产率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.53-7.57(m,1H),7.36-7.39(m,1H),7.19-7.23(m,1H),5.47(d,J＝49.2Hz 2H),4.79-4.82(m,1H),1.52(d,J＝6.8Hz,3H),1.21(s,9H)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C13H20NF2OS计算值:276.12；实验值276.2。

步骤4.

在25℃下，向N-[(1R)-1-[2-氟-3-(氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(100mg，363.16μmol)在MeOH(3mL)中的溶液加入HCl/MeOH(4M，181.58μL)。将混合物搅拌2小时，此后浓缩反应混合物。将残余物溶解在MeOH(4mL)中，用饱和NaOH/MeOH溶液调节至pH＝7，然后浓缩。将剩余的残余物溶解在DCM和MeOH(5:1，5mL)中，过滤并浓缩，得到(1R)-1-[2-氟-3-(氟甲基)苯基]乙胺(50mg，80.43％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C9H12F2N计算值:172.19；实验值172.2。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.49-7.53(m,1H),7.33-7.37(m,1H),7.19-7.22(m,1H),5.45(d,J＝48.0Hz2H),4.27-4.39(m,1H),1.41(d,J＝6.8Hz,3H)。

步骤5.

在25℃下向(1R)-1-[2-氟-3-(氟甲基)苯基]乙胺(0.05g，292.08μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(97.40mg，321.29μmol)在n-BuOH(1mL)中的溶液加入DIEA(188.75mg，1.46mmol，254.37μL)。然后在80℃下将反应混合物搅拌2小时。过滤混合物并通过制备型HPLC进行纯化，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[2-氟-3-(氟甲基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(59.3mg，135.43μmol，46.37％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H23ClF2N5O2计算值:438.14；实验值438.3。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.34-7.45(m,2H),7.15-7.19(m,1H),5.57-5.62(m,1H),5.45(d,J＝48.0Hz 2H),4.61-4.64(m,2H),4.56-4.57(m,1H),4.55-4.59(m,1H),3.66-3.73(m,4H),3.34-3.37(m,4H),1.55(d,J＝7.2Hz,3H)

实施例528.N-[(1R)-1-[2-溴-3-(二氟甲基)苯基]乙基]-2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺的合成

步骤1.

向2-溴苯-1,3-二甲醛(1.5g，7.04mmol)在甲苯(27mL)中的溶液加入4-甲基苯磺酸水合物(26.79mg，140.83μmol)，并将所得混合物加热至130℃。在3小时内加入乙二醇(437.04mg，7.04mmol，393.73μL)，并且用迪安-斯达克分水器(Dean-Stark trap)去除由反应混合物生成的水。然后在130℃下将混合物再搅拌1小时。将反应混合物冷却至室温，用饱和NaHCO3溶液洗涤并且用DCM萃取。有机相用盐水洗涤，经无水MgSO4干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱法纯化所得残余物，得到2-溴-3-(1,3-二氧戊环-2-基)苯甲醛(1.1g，60.77％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C10H10BrO3计算值:256.97；实验值257.0。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.33(s,1H),7.86(d,J＝7.6Hz,2H),7.58-7.62(m,1H),6.11(s,1H),4.02-4.11(m,4H)。

步骤2.

在0℃下，在N2下向2-溴-3-(1,3-二氧戊环-2-基)苯甲醛(2g，7.78mmol)在DCM(20mL)中的溶液加入N-乙基-N-(三氟-硫烷基)乙胺(3.76g，23.34mmol，3.08mL)。然后在15℃下将所得混合物搅拌2小时。然后将溶液倒入冰水中并分配在饱和碳酸氢钠与EtOAc之间。用EtOAc萃取混合物。合并有机层，并在真空中浓缩。通过柱色谱法纯化所得残余物，得到2-[2-溴-3-(二氟甲基)苯基]-1,3-二氧戊环(1.67g，76.92％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.74(d,J＝7.6Hz,1H),7.69(d,J＝7.6Hz,1H),7.47(t,J＝7.6Hz,1H),7.00(t,J＝54.4Hz,1H),6.17(s,1H),4.10-4.18(m,4H)。

步骤3.

在15℃下向2-[2-溴-3-(二氟甲基)苯基]-1,3-二氧戊环(1.6g，5.73mmol)在二恶烷(16mL)中的溶液加入HCl水溶液(6M，16.00mL)，并且在80℃下将所得混合物搅拌10小时。将溶液倒入水和EtOAc中，并且用EtOAc萃取水层。合并的有机相用盐水洗涤，经无水MgSO4干燥，并且在真空中浓缩。通过柱色谱法纯化残余物，得到2-溴-3-(二氟甲基)苯甲醛(1.15g，85.35％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)ppm 10.47(s,1H),8.04(d,J＝7.6Hz,1H),7.91(d,J＝7.6Hz,1H),7.58(t,J＝7.6Hz,1H),7.05(t,J＝54.4Hz,1H)。

步骤4.

在0℃下，在N2下向2-溴-3-(二氟甲基)苯甲醛(1.05g，4.47mmol)在THF(10mL)中的溶液加入MeMgBr(3M，1.94mL)，并且在15℃下将所得混合物搅拌3小时。将反应物倒在冰水上，并且用4N HCl水溶液酸化至pH 2～3。用EtOAc萃取所得混合物并且将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到1-[2-溴-3-(二氟甲基)苯基]乙醇(1.05g，93.61％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.77(d,J＝7.6Hz,1H),7.59(d,J＝7.6Hz,1H),7.48(t,J＝7.6Hz,1H),6.98(t,J＝54.8Hz,1H),5.32-5.37(m,1H),1.96(br s,1H),1.51(d,J＝6.4Hz,3H)

步骤5.

在20℃下，在N2下向1-[2-溴-3-(二氟甲基)苯基]乙醇(1g，3.98mmol)在DCM(10mL)中的溶液加入PCC(2.58g，11.95mmol)和硅胶(2.58g，42.94mmol)。在20℃下将反应混合物搅拌1小时。过滤反应溶液并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化所得残余物，得到1-[2-溴-3-(二氟甲基)苯基]乙酮(683mg，68.85％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.75(dd,J＝2.4,7.6Hz,1H),7.47-7.53(m,2H),6.99(t,J＝54.8Hz,1H),2.64(s,3H)

步骤6.

在N2下向1-[2-溴-3-(二氟甲基)苯基]乙酮(680mg，2.73mmol)在THF(8mL)中的溶液加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(661.84mg，5.46mmol)和Ti(OEt)4(2.49g，10.92mmol，2.26mL)。在80℃下将反应混合物搅拌3小时，此后在0℃下将LiBH4(59.48mg，2.73mmol)加入反应溶液。在0℃下将所得混合物搅拌2小时。然后将反应物倒入冰水。用EtOAc萃取水层并且将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化剩余的残余物，得到N-[(1R)-1-[2-溴-3-(二氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(350mg，35.46％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C13H19BrF2NOS计算值:354.03；实验值354.1。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.75(d,J＝7.6Hz,1H),7.58(d,J＝6.4Hz,1H),7.52(t,J＝7.6Hz,1H),7.06(t,J＝54.8Hz,1H),5.01-5.06(m,1H),1.49(d,J＝6.8Hz,3H),1.22(s,9H)。

步骤7.

在15℃下将N-[(1R)-1-[2-溴-3-(二氟甲基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(100mg，282.28μmol)在HCl/MeOH(4M，1mL)中的溶液搅拌3小时。然后用饱和NaOH/MeOH溶液将反应混合物调节至pH 7，此后在减压下浓缩混合物。将所得残余物溶解在DCM(3mL)和MeOH(0.6mL)中，并过滤溶液。在减压下浓缩所得有机层，得到(1R)-1-[2-溴-3-(二氟甲基)苯基]乙胺(60mg，84.99％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C9H11BrF2N计算值:250.00；实验值250.0。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.65-7.76(m,3H),7.10(t,J＝54.4Hz,1H),5.02-5.07(m,1H),1.64(d,J＝6.8Hz,3H)

步骤8.

在N2下向(1R)-1-[2-溴-3-(二氟甲基)苯基]乙胺(60mg，239.92μmol)在t-BuOH(1mL)中的溶液加入(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(72.73mg，239.92μmol)和DIEA(93.02mg，719.76μmol，125.37μL)。在80℃下将反应混合物搅拌2小时。将混合物倒入水中并且用EtOAc萃取水相。合并的有机相用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并且真空浓缩。通过制备型HPLC纯化剩余的残余物，得到[4-[[(1R)-1-[2-溴-3-(二氟甲基)苯基]乙基]氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(51mg，40.96％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H22BrClF2N5O2计算值:516.05；实验值516.1。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.55-7.58(m,2H),7.45(t,J＝7.2Hz,1H),7.10(t,J＝54.8Hz,1H),5.68-5.72(m,1H),4.57-4.66(m,4H),3.69-3.77(m,4H),3.35-3.39(m,4H),1.55(d,J＝7.2Hz,3H)

实施例529. 1-[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-嗡-6-亚基]-N,N,N',N'-四甲基-甲二胺甲酸盐的合成

步骤1.

向2-氯-N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(50mg，132μmol)和(3-羟基氧杂环丁烷-3-羰基)氧锂(16.4mg，132μmol)在THF(1mL)中的混合物加入HATU(11.7μL，198μmol)和DIEA(68.9μL，396μmol)。在25℃下，在N2下将混合物搅拌10小时。然后过滤反应混合物并通过制备型HPLC纯化滤液，得到1-[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-嗡-6-亚基]-N,N,N',N'-四甲基-甲二胺甲酸盐(20mg，34％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H25ClF3N6计算值:441.2；实验值:441.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.58(t,J＝7.2Hz,1H)7.50(t,J＝6.8Hz,1H)7.26(t,J＝7.2Hz,1H)6.99(t,J＝54.8Hz,1H)5.66-5.56(m,1H)4.67(br s,2H)4.58(br s,2H)3.04(s,12H)1.61(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例530.[5-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-基]-哌嗪-1-基-甲酮盐酸盐的合成

步骤1.

向5,7-二氯咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-甲酸乙酯(450mg，1.73mmol)和(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙胺(327mg，1.73mmol)在n-BuOH(1mL)中的混合物加入DIEA(1.12g，8.65mmol)。在85℃下，在N2下将反应物搅拌3小时。通过加入水(10mL)淬灭混合物，并且用EtOAc萃取。合并的有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化粗残余物，得到7-氯-5-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-甲酸乙酯(640mg，90％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C18H17ClF3N4O2计算值:413.1；实验值:413.1。

步骤2.

在N2下向7-氯-5-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-甲酸乙酯(640mg，1.55mmol)在MeOH(1mL)中的溶液加入10％Pd/C(43.6mg，31.01μmol)。在真空下将悬浮液脱气并且用H2气体吹扫三次。在30℃下，在H2(15psi)下将混合物搅拌3小时。然后过滤反应混合物并浓缩滤液，得到5-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-甲酸乙酯(580mg，99％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C18H18F3N4O2计算值:379.1；实验值:379.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.01(s,1H)8.10(d,J＝7.2Hz,1H)7.67(t,J＝7.2Hz,1H)7.52(t,J＝7.2Hz,1H)7.27(t,J＝7.6Hz,1H)6.86-7.14(m,2H)5.73(q,J＝7.2Hz,1H)4.50(q,J＝7.2Hz,2H)1.74(d,J＝7.2Hz,3H)1.45(t,J＝7.2Hz,3H)。

步骤3.

向5-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-甲酸乙酯(580mg，1.53mmol)在EtOH(2mL)、THF(2mL)和H2O(2mL)中的混合物加入LiOH·H2O(162mg，3.83mmol)。在25℃下，在N2下将混合物搅拌2小时。用HCl溶液(2N H2O溶液)处理反应混合物直到pH～4，然后用CH2Cl2萃取，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到5-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-甲酸(0.50g，粗物质)。LCMS(ESI):m/z:[M-H]C16H12F3N4O2计算值:349.1；实验值349.0；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.47(s,1H)7.65-7.55(m,2H)7.49(t,J＝6.8Hz,1H)7.23(t,J＝7.6Hz,1H)7.14-6.87(m,2H)5.66(q,J＝6.4Hz,1H)1.67(d,J＝7.2Hz,3H)。

步骤4.

向5-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-甲酸(100mg，285μmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(53.2mg，285μmol)在THF(2mL)中的混合物加入T3P(273mg，428μmol)和DIEA(249μL，1.43mmol)。在25℃下，在N2下将混合物搅拌10小时。通过水淬灭反应混合物，用EtOAc萃取，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化粗残余物，得到4-[5-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-羰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(120mg，81％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C25H30F3N6O3计算值:519.2；实验值519.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.44(s,1H)7.63-7.59(m,2H)7.50(t,J＝7.2Hz,1H)7.24(t,J＝7.6Hz,1H)7.00(t,J＝55.2Hz,1H)6.81(d,J＝6.4Hz,1H)5.66(q,J＝6.8Hz,1H)3.98-3.77(m,4H)3.53(br s,4H)1.67(d,J＝6.8Hz,3H)1.47(s,9H)。

步骤5.

在25℃下将4-[5-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-羰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(120mg，231μmol)在4M HCl/EtOAc溶液(578μL，2.31mmol)中搅拌1小时。然后过滤反应混合物，得到[5-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-基]-哌嗪-1-基-甲酮盐酸盐(60mg，61％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H22F3N6O计算值:419.2；实验值:419.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.12(s,1H)8.12(d,J＝6.8Hz,1H)7.77(t,J＝7.2Hz,1H)7.52(t,J＝7.2Hz,1H)7.27(t,J＝8.0Hz,1H)7.14-7.00(m,2H)5.76(q,J＝6.8Hz,1H)4.14-4.08(m,4H)3.42(t,J＝5.2Hz,4H)1.76(d,J＝7.2Hz,3H)。

实施例531.[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

在25℃下向1-(3-溴苯基)-2-(环丙氧基)乙酮(430mg，1.69mmol)在DAST(4.5mL)中的溶液加入MeOH(6.82μL，169μmol)。将混合物加热至50℃并搅拌12小时。然后用冰水(10mL)稀释混合物并用EtOAc萃取，用盐水处理，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化粗残余物，得到1-溴-3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]苯(250mg，54％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 7.67(s,1H)7.60-7.58(m,1H)7.47-7.44(m,1H)7.33-7.27(m,1H)3.90(t,J＝12Hz,2H)3.46-3.41(m,1H)0.60-0.46(m,4H)。

步骤2.

向1-溴-3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]苯(100mg，361μmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(183μL，541μmol)在1,4-二恶烷(2mL)中的溶液加入TEA(126μL，902μmol)和Pd(PPh3)2Cl2(25.3mg，36.1μmol)。用N2气体对混合物鼓泡，然后加热至100℃并搅拌2小时。加入2M HCl水溶液(20mL)并且将混合物搅拌5小时。过滤混合物，并且用EtOAc萃取滤液。将合并的有机层倒入KF水溶液(10mL)并搅拌1小时。过滤混合物并且用盐水处理滤液，用Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过制备型TLC纯化粗残余物，得到1-[3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]苯基]乙酮(20mg，23％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 8.09(s,1H)8.03(d,J＝8Hz,1H)7.71(d,J＝8Hz,1H)7.54(t,J＝8Hz,1H)3.94(t,J＝14Hz,2H)3.44-3.40(m,1H)2.63(s,3H)0.57-0.44(m,4H)。

步骤3.

向1-[3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]苯基]乙酮(300mg，1.25mmol)在THF(4mL)中的溶液中加入(R)-2-甲基-2-丙烷亚磺酰胺(303mg，2.50mmol)和Ti(OEt)4(1.04mL，4.99mmol)。将混合物加热至80℃并搅拌2小时。将混合物冷却至0℃，加入MeOH(50.5μL，1.25mmol)和LiBH4(29.9mg，1.37mmol)，并且在0℃下将所得混合物搅拌1小时。H2O(10mL)，过滤混合物，并且用EtOAc萃取滤液。合并的有机萃取物用盐水处理，用Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(215mg，49％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 7.49(s,1H)7.46-7.44(m,3H)4.63-4.57(m,1H)3.94(t,J＝14Hz,2H)3.46-3.42(m,1H)1.57-1.53(m,3H)1.25(s,9H)0.60-0.45(m,4H)。

步骤4.

向N-[(1R)-1-[3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(60mg，173μmol)在MeOH(1mL)中的溶液加入4M HCl/MeOH溶液(86.8μL，347μmol)。在25℃下将混合物搅拌2小时。加入饱和NaOH/MeOH溶液直到pH～7，并在减压下浓缩混合物。将残余物稀释在10:1DCM/MeOH混合物中，搅拌30分钟，然后过滤并浓缩，得到(1R)-1-[3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]苯基]乙胺(41.9mg，粗物质)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C13H18F2NO计算值:242.1；实验值:242.1。

步骤5.

向(1R)-1-[3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]苯基]乙胺(41.9mg，174μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(52.6mg，174μmol)在t-BuOH(1.5mL)中的溶液加入DIEA(151μL,868μmol)。在80℃下将混合物搅拌16小时。过滤混合物并在减压下浓缩，并且通过制备型HPLC纯化粗残余物，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-[2-(环丙氧基)-1,1-二氟-乙基]苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(7.1mg，8％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C24H29ClF2N5O3计算值:508.1；实验值508.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.56(s,1H)7.52(d,J＝8Hz,1H)7.45-7.38(m,2H)5.43-5.39(m,1H)4.63(br s,2H)4.57(br s,2H)3.96-3.89(m,2H)3.74-3.71(m,4H)3.37-3.35(m,5H)1.59(d,J＝8Hz,3H)0.41-0.39(m,4H)。

实施例532.[2-氯-4-[1-(5-苯基-2-噻吩基)乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

向1-(5-溴-2-噻吩基)乙酮(1g，4.88mmol)和苯基硼酸(713.48mg，5.85mmol)在DME(10mL)和H2O(2mL)中的溶液加入Na2CO3(1.55g，14.63mmol)和Pd(PPh3)4(1.13g，975.27μmol)。在90℃下，在N2下将混合物搅拌16小时，然后用水稀释并且用EtOAc萃取。合并的有机相用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化残余物，得到1-(5-苯基-2-噻吩基)乙酮(750mg，76.04％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H11OS计算值:203.5；实验值203.2。

步骤2.

向1-(5-苯基-2-噻吩基)乙酮(750mg，3.71mmol)在THF(7.5mL)中的溶液加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(898.80mg，7.42mmol)和Ti(OEt)4(2.54g，11.12mmol，2.31mL)。在90℃下将混合物搅拌16小时。然后在0℃下将MeOH(118.81mg，3.71mmol，150.05μL)和LiBH4(242.31mg，11.12mmol)加入混合物并搅拌1小时。然后用水(10.0mL)稀释反应混合物并用EtOAc萃取。合并的有机相用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化残余物，得到2-甲基-N-[1-(5-苯基-2-噻吩基)乙基]丙烷-2-亚磺酰胺(385mg，33.71％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C16H22NOS2计算值:308.1；实验值308.2。

步骤3.

在室温下将2-甲基-N-[1-(5-苯基-2-噻吩基)乙基]丙烷-2-亚磺酰胺(380mg，1.24mmol)在HCl/MeOH(4M，4mL)中的溶液搅拌2小时。向混合物加入NaOH/MeOH达到pH＝8。在减压下浓缩混合物，得到1-(5-苯基-2-噻吩基)乙胺(250mg，99.50％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M-NH2]C12H11S计算值:187.06；实验值187.1。

步骤4.

向1-(5-苯基-2-噻吩基)乙胺(150mg，737.82μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(246.03mg，811.60μmol)在n-BuOH(1.5mL)中的溶液加入DIEA(286.07mg，2.21mmol，385.54μL)。在80℃下将混合物搅拌16小时。在减压下浓缩混合物，并通过制备型HPLC纯化，得到[2-氯-4-[1-(5-苯基-2-噻吩基)乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(50mg，14.42％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C23H25ClN5O2S计算值:470.1；实验值470.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.27-8.29(d,J＝8.00,1H)7.58-7.60(d,J＝8.40,2H)7.35-7.40(m,3H)7.26-7.30(t,J＝7.20,1H)7.03-7.04(d,J＝3.20Hz,1H)5.54-5.57(m,1H)4.52(s,4H)3.60-3.62(t,J＝4.40,4H)3.22-3.24(t,J＝4.40,4H)1.60-1.62(d,J＝7.20,3H)。

实施例533.[4-[1-[3-氨基-4-氟-5-(三氟甲基)苯基]乙基氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

在0℃下向4-氟-3-(三氟甲基)苯甲酸(3g，14.42mmol)在HNO3(25mL)中的混合物加入H2SO4(6.90g，70.35mmol，3.75mL)。在75℃下将混合物搅拌5小时。用冰水(40mL)淬灭反应混合物，并且用EtOAc萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并在减压下浓缩，得到4-氟-3-硝基-5-(三氟甲基)苯甲酸(2.5g，68.52％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.78(dd,J＝4.5,1H),8.47(dd,J＝3.25,1H)。

步骤2.

在室温下向4-氟-3-硝基-5-(三氟甲基)苯甲酸(2.5g，9.88mmol)在EtOH(10mL)和H2O(5mL)中的溶液加入NH4Cl(264.17mg，4.94mmol)和Fe(1.65g，29.63mmol)。在室温下将混合物搅拌5小时。用冰水(40mL)淬灭反应混合物，并且用EtOAc萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到3-氨基-4-氟-5-(三氟甲基)苯甲酸(2.2g，99.83％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C8H6F4NO2计算值:224.0；实验值224.0。

步骤3.

向3-氨基-4-氟-5-(三氟甲基)苯甲酸(2.2g，9.86mmol)在DCM(10mL)中的溶液加入TEA(997.73mg，9.86mmol，1.37mL)和乙酸乙酯(3.52g，34.51mmol，3.23mL)。在室温下将混合物搅拌3小时。向反应混合物中加入NaHCO3水溶液(5mL)。过滤混合物，并且用DCM萃取滤液。合并的有机层经无水Na2SO4干燥并过滤。在减压下浓缩溶剂，并且通过柱色谱纯化残余物，得到3-乙酰胺基-4-氟-5-(三氟甲基)苯甲酸(2.6g，99.45％产率)。¹H NMR(三氯甲烷-d,400MHz)δppm＝8.85(s,J＝6.0Hz 1H),8.08(d,J＝4.8Hz,1H),2.19(m,3H)

步骤4.

向3-乙酰胺基-4-氟-5-(三氟甲基)苯甲酸(2.6g，9.81mmol)在DCM(20mL)中的溶液加入HOBt(2.65g，19.61mmol)、4-甲基吗啉(2.98g，29.42mmol，3.23mL)、N-甲氧基甲胺盐酸盐(1.91g，14.27mmol)和EDCI(3.76g，19.61mmol)。在室温下将混合物搅拌5小时。在减压下浓缩反应混合物，并且用H2O(20mL)稀释残余物并且用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。通过柱色谱法纯化残余物，得到3-乙酰胺基-4-氟-N-甲氧基-N-甲基-5-(三氟甲基)苯甲酰胺(1.3g，43.01％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C12H13F4N2O3计算值:309.1；实验值309.1。

步骤5.

在0℃下向3-乙酰胺基-4-氟-N-甲氧基-N-甲基-5-(三氟甲基)苯甲酰胺(1g，3.24mmol)在THF(10mL)中的溶液加入LiHMDS(1M,3.24mL)并搅拌30分钟。然后将MeMgBr(3M，1.08mL)加入混合物。在0℃下将混合物搅拌3小时。将反应物倒在冰水(2mL)上并用HCl调节至pH＝4，然后用EtOAc萃取。合并的有机相用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型TLC纯化残余物，得到N-[5-乙酰基-2-氟-3-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(700mg，81.98％产率)。

步骤6.

在室温下向N-[5-乙酰基-2-氟-3-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(110mg，417.95μmol)在THF(5mL)中的溶液加入Ti(OEt)4(286.02mg，1.25mmol，260.02μL)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(101.31mg，835.90μmol)。在80℃下将混合物搅拌4小时。冷却至-4℃之后，在0℃下向混合物加入MeOH(1mL)，然后加入LiBH4(27.31mg，1.25mmol)并且搅拌1小时。将反应物缓慢倒在H2O(2mL)和THF(2mL)上，然后滤过硅藻土。用THF洗涤滤饼并在减压下浓缩滤液，并且通过制备型TLC纯化残余物，得到N-[5-[1-(叔丁基亚磺酰基氨基)乙基]-2-氟-3-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(140mg，90.93％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C15H21F4N2O2S计算值:369.1；实验值369.1。

步骤7.

向N-[5-[1-(叔丁基亚磺酰基氨基)乙基]-2-氟-3-(三氟甲基)苯基]乙酰胺(140mg，380.03μmol)在MeOH(1mL)中的溶液加入HCl/MeOH(4M，95.01μL)。在室温下将混合物搅拌8小时。在减压下浓缩混合物，得到残余物。将残余物溶解在MeOH(1mL)中。向溶液加入MeOH/NaOH水溶液直到pH＝8。过滤溶液并在减压下浓缩，得到残余物。用DCM/MeOH＝10/1洗涤残余物，过滤，并在减压下浓缩滤液，得到5-(1-氨基乙基)-2-氟-3-(三氟甲基)苯胺(50mg，59.22％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C9H11F4N2计算值:223.1；实验值223.1。

步骤8.

在室温下向5-(1-氨基乙基)-2-氟-3-(三氟甲基)苯胺2HCl(50mg，169.43μmol)在n-BuOH(1mL)中的溶液加入DIEA(65.69mg，508.29μmol，88.53μL)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(56.50mg，186.37μmol)。在80℃下将混合物搅拌2小时。在减压下浓缩混合物，并且通过制备型HPLC纯化残余物，得到[4-[1-[3-氨基-4-氟-5-(三氟甲基)苯基]乙基氨基]-2-氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(60mg，72.44％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C20H22ClF4N6O2计算值:489.1；实验值489.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ＝7.07(d,J＝7.9,1H),6.89(d,J＝4.0,1H),5.30(d,J＝6.5,1H),4.59(d,J＝14.4,4H),3.76-3.70(m,4H),3.35(d,J＝4.4,4H),1.53(d,J＝7.0,3H)。

实施例534.[2-氯-4-[1-(3-环丙基苯基)乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮的合成

步骤1.

向1-(3-溴苯基)乙酮(1g，5.02mmol，662.25μL)在甲苯(10mL)中的溶液加入环丙基硼酸(863.10mg，10.05mmol)、Pd(dppf)Cl2(367.61mg，502.40μmol)、K3PO4(3.20g，15.07mmol)和H2O(0.5mL)。在N2下搅拌反应混合物并加热至100℃，持续10小时。用H2O(10mL)稀释反应混合物并且用EtOAc萃取。合并的有机层用NaCl水溶液洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。通过柱色谱法纯化残余物，得到1-(3-环丙基苯基)乙酮(580mg，72.06％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H13O计算值:161.1；实验值161.0；¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 7.73(dt,J＝7.6,1.4Hz,1H)7.68(t,J＝1.8Hz,1H)7.35(t,J＝7.6Hz,1H)7.27(dt,J＝7.6,1.4Hz,1H)2.60(s,3H)2.00-1.93(m,1H)1.04-0.99(m,2H)0.77-0.73(m,2H)。

步骤2.

在室温下将1-(3-环丙基苯基)乙酮(580mg，3.62mmol)、2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(877.54mg，7.24mmol)在THF(10mL)中的混合物加入Ti(OEt)4(2.48g，10.86mmol，2.25mL)。在90℃下将混合物搅拌10小时。冷却至0℃之后，在0℃下将MeOH(116.00mg，3.62mmol，146.50μL)和LiBH4(78.86mg，3.62mmol)加入混合物并搅拌1小时。用H2O(10mL)稀释反应混合物并过滤。用EtOAc萃取滤液。合并的有机层用NaCl水溶液洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。通过柱色谱法纯化残余物，得到N-[1-(3-环丙基苯基)乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(380mg，39.55％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C15H24NOS计算值:266.2；实验值266.1；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.22-7.18(m,1H)7.15-7.11(m,2H)6.96-6.94(m,1H)4.42(q,J＝6.8Hz,1H)1.94-1.87(m,1H)1.48(d,J＝6.8Hz,3H)1.22(s,9H)0.97-0.92(m,2H)0.70-0.66(m,2H)。

步骤3.

在室温下将N-[1-(3-环丙基苯基)乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(380mg，1.43mmol)在HCl/MeOH(4M,10mL)中的溶液搅拌0.5小时。在减压下浓缩反应混合物，得到1-(3-环丙基苯基)乙胺HCl(280mg，99.04％产率)。

步骤4.

向(2,4-二氯-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6(7H)-基)(吗啉基)甲酮(150mg，494.81μmol)在n-BuOH(2mL)中的溶液加入DIEA(319.76mg，2.47mmol，430.94μL)和1-(3-环丙基苯基)乙胺HCl(117.39mg，593.78μmol)。在80℃下将混合物搅拌12小时。在减压下浓缩反应混合物，得到残余物。通过制备型HPLC纯化残余物，得到[2-氯-4-[1-(3-环丙基苯基)乙基氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-吗啉基-甲酮(74.3mg，34.75％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C22H27ClN5O2计算值:428.2；实验值428.2；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.20-7.12(m,3H)6.93(dt,J＝7.2,1.6Hz,1H)5.36(q,J＝6.8Hz,1H)4.59-4.55(m,4H)3.72(t,J＝4.8Hz,4H)3.35(t,J＝4.6Hz,4H)1.92-1.86(m,1H)1.54(d,J＝6.8Hz,3H)0.96-0.92(m,2H)0.69-0.65(m,2H)。

实施例535. 3-[1-[[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]苯磺酰胺的合成

步骤1.

向3-氯磺酰基苯甲酸(1g，4.53mmol)在DCM(10mL)中的溶液加入2-甲基丙-2-胺(1.16g，15.86mmol，1.67mL)的溶液。将混合物在0℃下搅拌0.5小时并且在室温下搅拌2小时。反应过程中形成了白色固体。过滤固体并且用10mL DCM洗涤。将固体倒在20mL H2O上，并缓慢加入5N HCl水溶液(同时搅拌)，直到pH～5。在室温下将混合物搅拌30分钟。过滤混合物，用水洗涤并在真空下干燥，得到3-(叔丁基氨磺酰基)苯甲酸(0.9g，77.17％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.37(t,J＝1.6Hz,1H)8.13(dt,J＝7.6,1.4Hz,1H)8.05(dt,J＝7.6,1.4Hz,1H)7.70(t,J＝7.8Hz,2H)1.09(s,9H)。

步骤2.

向3-(叔丁基氨磺酰基)苯甲酸(0.6g，2.33mmol)在DCM(15mL)中的溶液加入HOBt(630.17mg，4.66mmol)和N-甲氧基甲胺盐酸盐(409.43mg，4.20mmol)，然后加入EDCI(894.04mg，4.66mmol)和4-甲基吗啉(707.58mg，7.00mmol，769.11μL)。在室温下将混合物搅拌12小时。反应混合物用H2O和NaCl水溶液洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到3-(叔丁基氨磺酰基)-N-甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺(630mg，89.95％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C13H21N2O4S计算值:301.1；实验值301.1；¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 8.24(t,J＝1.4Hz,1H)8.00-7.98(m,1H)7.89-7.87(m,1H)7.56(t,J＝7.8Hz,1H)4.55(s,1H)3.54(s,3H)3.39(s,3H)1.25(s,9H)。

步骤3.

在-78℃下向3-(叔丁基氨磺酰基)-N-甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺(0.5g，1.66mmol)在THF(10mL)中的溶液逐滴加入MeMgBr(3M，1.66mL)。在-78℃下将混合物搅拌20分钟，然后升温至室温，持续12小时。在-78℃下用NH4Cl水溶液(5mL)淬灭反应混合物。然后用EtOAc萃取混合物。有机层用盐水洗涤并且经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到3-乙酰基-N-叔丁基-苯磺酰胺(310mg，72.94％产率)。¹H NMR(400MHz,三氯甲烷-d)δppm 8.46(t,J＝1.6Hz,1H)8.14-8.09(m,2H)7.62(t,J＝7.8Hz,1H)4.56(s,1H)2.66(s,3H)1.26(s,9H)。

步骤4.

向3-乙酰基-N-叔丁基-苯磺酰胺(260mg，1.02mmol)在MeOH(3mL)中的溶液加入NaBH3CN(95.99mg，1.53mmol)和NH4OAc(784.91mg，10.18mmol)在MeOH(3mL)中的溶液。在室温下将混合物搅拌24小时。使用1N HCl将反应物酸化至pH～2，然后在减压下浓缩。将残余物再溶解在水中，然后用EtOAc萃取。水层使用饱和氢氧化钠溶液碱化至pH～10，然后用EtOAc萃取，过滤并在减压下浓缩，得到3-(1-氨基乙基)-N-叔丁基-苯磺酰胺(77mg，29.50％产率)。

步骤5.

在室温下将3-(1-氨基乙基)-N-叔丁基-苯磺酰胺(77mg，300.35μmol)在TFA(2mL)中的溶液搅拌5小时。在减压下浓缩混合物，得到3-(1-氨基乙基)苯磺酰胺TFA盐(90mg，95.34％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C8H13N2O2S计算值:201.1；实验值201.0。

步骤6.

向3-(1-氨基乙基)苯磺酰胺TFA盐(90mg，286.37μmol)和(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-吗啉基-甲酮(86.81mg，286.37μmol)在n-BuOH(1mL)中的溶液加入DIEA(185.06mg，1.43mmol，249.40μL)。在80℃下将混合物搅拌10小时。过滤反应混合物并在减压下浓缩，得到残余物。通过制备型HPLC纯化残余物，得到3-[1-[[2-氯-6-(吗啉-4-羰基)-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]苯磺酰胺(36mg，26.92％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C19H24ClN6O4S计算值:467.1；实验值467.0；¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.93(s,1H)7.79(d,J＝8.0Hz,1H)7.63(d,J＝7.6Hz,1H)7.51(t,J＝7.8Hz,1H)5.45(q,J＝6.8Hz,1H)4.64-4.57(m,4H)3.73(t,J＝4.8Hz,4H)3.36(t,J＝4.6Hz,4H)1.60(d,J＝6.8Hz,3H)。

实施例536.[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-甲氧基-乙基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-(4-甲氧基四氢吡喃-4-基)甲酮的合成

步骤1.

将N-[(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-羟基-乙基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(500mg，1.64mmol)、NaH(65.49mg，1.64mmol)在THF(10mL)中的混合物加入MeI(464.79mg，3.27mmol，203.85μL)。在室温下，在N2下将混合物搅拌5小时。在0℃下用20mL水淬灭反应混合物，然后用EtOAc萃取。合并的有机层用30mL盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。通过柱色谱法纯化残余物，得到N-[(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-甲氧基-乙基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(200mg，38.24％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C15H24F2NO2S计算值:320.1；实验值320.1；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δppm＝7.51-7.41(m,4H),4.60(qd,J＝6.4,2.8Hz,1H),3.82(t,J＝13.2Hz,2H),3.45(s,3H),3.44(br s,1H),1.54(d,J＝6.4Hz,3H),1.25(s,9H)。

步骤2.

将N-[(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-甲氧基-乙基)苯基]乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(200mg，626.16μmol)在MeOH(5mL)中的混合物加入HCl/MeOH(4M，313.08μL)。在室温下将混合物搅拌3小时。用NaOH/甲醇将反应混合物中和至pH＝7并过滤。在减压下浓缩滤液，得到残余物。用二氯甲烷:甲醇(5:1)洗涤残余物。合并有机相并且在真空下浓缩，得到(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-甲氧基-乙基)苯基]乙胺(120mg，89.04％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C11H16F2NO计算值:216.1；实验值216.0；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm＝7.70(s,1H),7.68-7.62(m,1H),7.57-7.50(m,2H),4.40(q,J＝6.8Hz,1H),3.92(t,J＝13.6Hz,2H),3.34(s,3H),1.47(d,J＝6.8Hz,3H)。

步骤3.

在80℃下将(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-甲氧基-乙基)苯基]乙胺(60mg，278.76μmol)、(2,4-二氯-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基)-(4-甲氧基四氢-吡喃-4-基)甲酮(92.60mg，278.76μmol)和DIEA(108.08mg，836.28μmol，145.66μL)在n-BuOH(2mL)中的混合物搅拌3小时。过滤反应混合物。通过制备型HPLC纯化滤液，得到[2-氯-4-[[(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-甲氧基-乙基)苯基]乙基]氨基]-5,7-二氢吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基]-(4-甲氧基四氢吡喃-4-基)甲酮(25mg，16.06％产率)。LCMS(ESI):m/z:[M H]C24H30ClF2N4O4计算值:511.2；实验值511.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm＝8.37-8.25(m,1H),7.59(s,1H),7.56-7.49(m,1H),7.49-7.38(m,2H),5.37-5.28(m,1H),4.87-4.75(m,2H),4.59-4.47(m,2H),3.89(t,J＝13.8Hz,2H),3.74-3.54(m,4H),3.17和3.13(s,3H),2.02-1.81(m,4H),1.50(t,J＝6.8Hz,3H)；¹⁹F NMR(376MHz,DMSO-d6)δppm＝-101.02(t,J＝13.8Hz),-101.06(t,J＝13.8Hz)。

实施例540.N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-2-(氟甲基)-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺合成

步骤1.

在0℃下向(4-{[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]氨基}-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-2-基)甲醇(420mg，0.93mmol)在DCM(12.6mL)中的溶液中加入DAST(123μL，0.93mol)，并且在室温下将混合物搅拌2小时。用饱和NaHCO3水溶液淬灭反应混合物，并且用DCM萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥，并且在减压下去除溶剂。通过制备型HPLC纯化粗产物，得到N-[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟苯基]乙基]-2-(氟甲基)-6-(吗啉-4-羰基)-5H,6H,7H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-4-胺(19mg，产率＝5％)。LCMS(ESI):C21H23F4N5O2的准确质量:454.2；[M H]＝454.0实验值；¹H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.91(d,J＝7.5Hz,1H),7.64(t,J＝7.4Hz,1H),7.50(t,J＝7.1Hz,1H),7.29(t,J＝7.7Hz,1H),7.23(t,J＝54.3Hz,1H),5.72–5.54(m,1H),5.15(dd,J＝47.0,3.8Hz,2H),4.74–4.48(m,4H),3.64(t,J＝4.6Hz,4H),3.26(t,J＝4.7Hz,4H),1.51(d,J＝7.0Hz,3H)。

生物学实例

氟硼二吡咯-FL-GTP缔合测定。

本测定用于检查化合物在限定生化设置下抑制SOS1介导的KRAS-4B:GDP交换为KRAS-4B:GTP的效能。指定化合物的低IC50值表明了该化合物在本测定设置下抑制SOS1对KRAS-4B的鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)活性的高效能。

试剂：氟硼二吡咯FL GTP(ThermoFisher Scientific，目录号G12411)；KRAS4-B(Cytoskeleton Inc.，目录号CSRS03)；SOS1(Cytoskeleton Inc.，目录号CS-GE02)；2×测定缓冲液：40mM Tris-HCl，pH 7.5；100mM NaCl；20mM MgCl2；0.1mg/mL BSA；0.02％NP-40

测定程序：将测试化合物溶解在DMSO中以产生20mM母液储备液。将储备液以3倍稀释系列稀释在100％DMSO中，以获得100倍化合物储备液。在进行测定前，将每一种测试化合物储备液的1μl点样递送到96孔测定板的两个相邻孔中。反应混合物制备：在室温下按顺序混合以下各物以获得“反应混合物”(5.75mL 2×交换缓冲液；3.22mL MilliQ ddH2O；3μL 5mM氟硼二吡咯FL GTP；230μL 50μM KRAS-4B；9.203mL总体积。反应引发：将80μL反应混合物吸移到半区黑色96孔板(Corning，目录号3686)的各个孔中，其中含有1μL DMSO点样或1μL以上所列浓度的测试化合物点样。然后将20μL 1μM SOS1加入各个孔中以引发反应。对于无GEF对照孔，这被替换为1×交换缓冲液。动力学测量：在SpectraMax M2酶标仪(Molecular Devices)中按照以下方案监测反应：5秒快速循环混合后进行第一次读取；61个读数，间隔30秒；测定温度：22℃；激发波长：485nm；发射波长：513nm。数据分析：将存在测试化合物时SOS1介导的氟硼二吡咯FL GTP交换曲线的Vmax值相对于最稀测试样品柱或仅有DMSO的对照孔进行归一化，得到每一个测试化合物浓度的活性％。通过非线性回归将活性％相对于化合物浓度的常用对数的图与4参数逻辑模型拟合。

氟硼二吡咯-FL-GTP缔合测定(uM)

氟硼二吡咯-FL-GTP缔合测定结果示于以下表8中。效能表图例：<1μM ；1-5μM ；>5μM 。

表8.

空白＝未测定

作用模式测定：对SOS1核苷酸交换活性的抑制

本测定的目的是表征化合物对KRAS的SOS1核苷酸交换的抑制活性。数据报告为基于TR-FRET信号的IC50值。

注意：以下方案描述了用于监测野生型KRAS响应于本发明化合物抑制SOS1核苷酸交换活性的程序。可以采用其他KRAS突变体和RAS同种型。

在含有20mM HEPES pH 7.5、150mM NaCl、5mM MgCl2、0.05％Tween-20、0.1％BSA、1mM DTT的测定缓冲液中，在384孔测定板中以20μL的体积经十一次3倍连续稀释产生了跨越100μM至1.7nM的测试化合物浓度系列。首先将纯化过的SOS1无标签催化域(残基564-1049)以100nM的浓度稀释在测定缓冲液中，然后将20μL含SOS1的溶液直接分配至化合物板中。在室温下孵育SOS1/化合物混合物，在定轨振荡器上恒定混合20分钟，以允许反应达到平衡。通过将66.7nM avi标签KRAS(残基1-169)、3.33nM链霉亲和素-Tb和333nM EDA-GTP-DY-647P1稀释在测定缓冲液中来制备KRAS混合物。在即将加入SOS1/化合物混合物之前制备该混合物以防止内在核苷酸交换。然后在384孔低容量黑色圆底板中顺序加入5μL预孵育SOS1/化合物混合物和7.5μL KRAS混合物，并且在室温下伴随恒定振荡孵育30分钟。在PerkinElmer Envision读板器上测量时间分辨荧光。DMSO和10μM化合物(i)分别用作阴性对照物和阳性对照物。

化合物(i)

对每一种化合物进行三次重复实验。如下对数据进行归一化：(阳性对照物-样品信号)/(阳性对照物-阴性对照物)*100。使用四参数对数拟合来拟合数据。

SOS1 TR-FRET IC50测定结果示于以下表9中：

表6图例：≤1μM ；>1μM 。

表9.

空白＝未测定

效能测定：使用表面等离子体共振(SPR)测量本发明化合物与SOS1的结合亲和力

SPR测定的目的是测量化合物与固定在传感器芯片上的SOS1催化结构域(残基564-1049)的直接结合。数据报告为平衡解离常数(Kd)值。

使用GE Biacore 8K SPR仪器，在含有0.01M HEPES、0.15M NaCl和0.05％v/v表面活性剂P20的测定缓冲液中将avi标签SOS1催化域蛋白固定在链霉亲和素涂覆过的SPR传感器芯片上，达到约6000个响应单位(RU)的水平。在含有2％DMSO的测定缓冲液中，在十次2倍稀释中产生了跨越5μM至4.9nM的测试化合物浓度系列。对于每一种测试化合物，产生了单独的0μM样品以便在后续双参考物减去过程中使用。依次针对每一种测试化合物，使个别稀释样品以50μL/分钟的流速流经已固定的SOS1蛋白，以监测与SOS1的缔合。立即通过使测定缓冲液流经传感器表面并监测结合信号降低回到不存在化合物时所见的基线水平来监测已结合的测试化合物与SOS1蛋白的解离。对每一个系列中的所有化合物稀释液重复这个操作。在缔合阶段即将结束前指出每一个测试化合物浓度的结合水平反应，并产生了示出针对每一个化合物稀释系列产生的结合反应水平对比测试化合物浓度的二级图。将该数据与描述测试化合物与SOS1之间的可逆平衡1:1结合的模型拟合，从而产生相互作用Kd值的估计值。

使用SOS1的表面等离子体共振(SPR)结果示于以下表10中：

表7图例：≤0.4μM ；>0.4μM 。

表10.

空白＝未测定

效能测定：pERK

本测定的目的是测量测试化合物抑制细胞中SOS1功能的能力。SOS1响应于受体酪氨酸激酶激活通过催化RAS·GDP向RAS·GTP转化来激活RAS蛋白。RAS激活诱导了一系列细胞信号传导事件，导致苏氨酸202和酪氨酸204处的ERK磷酸化(pERK)增加。下文描述的程序测量了PC-9细胞(EGFR Ex19Del)中响应于测试化合物的细胞pERK水平。

使用ATCC推荐的培养基和程序生长和维持PC-9细胞。在加入化合物的前一天，将细胞接种在384孔细胞培养板(40μL/孔)中，并且在37℃、5％CO2孵育箱中生长过夜。在DMSO中以10、3倍稀释度制备测试化合物，最高浓度是10mM。在测定当天，使用Echo550液体处理器(LabCyte)将40nL测试化合物加入细胞培养板的各个孔。测试化合物的浓度以一式两份进行测试，最高测试浓度是10μM。加入化合物之后，在37℃、5％CO2下将细胞孵育1小时。孵育后，去除培养基并且用磷酸盐缓冲盐水将细胞洗涤一次。

使用AlphaLISA SureFire Ultra p-ERK1/2测定试剂盒(PerkinElmer)测定细胞pERK水平。将细胞溶解在25μL溶解缓冲液中，在室温下以600RPM振荡15分钟。将溶解物(10μL)转移到384孔Opti-plate(PerkinElmer)，并加入5μL受体混合物。以1000RPM将板离心1分钟，并在暗处孵育2小时。在本次孵育后，加入5μL供体混合物，将板密封并以1000RPM离心1分钟，并且在室温下将混合物孵育2小时。在Envision读板器(PerkinElmer)上使用标准AlphaLISA设置读取信号。在Excel(Microsoft)和Prism(GraphPad)中对原始数据进行分析。将信号相对于化合物浓度的常用对数进行绘图，并通过拟合4参数S形浓度响应模型来确定IC50。

SOS1 pERK IC50测定结果示于以下表11中。

表8图例：≤1μM ；>1μM 。

表11.

空白＝未测定

SOS1抑制剂(化合物A)单独和与KRAS^G12C抑制剂MRTX1257组合时对体内肿瘤细胞生长的影响

目标：为了评估SOS1抑制剂化合物A单独和与KRAS G12C抑制剂MRTX1257组合口服施用于裸鼠中的人非小细胞肺癌(NSCLC)NCI-H358异种移植模型后的功效。

方法：在使用雌性balb/c无胸腺裸鼠(6-8周龄)的NSCLC NCI-H358异种移植模型中评估本发明的SOS1抑制剂(化合物A)对体内肿瘤细胞生长的影响。在小鼠胁腹经皮下植入含H358肿瘤细胞的50％基质胶(5^e6个细胞/小鼠)。一旦肿瘤达到约200mm³的平均大小，就将小鼠随机分到处理组并施用测试物品或媒介物(含2％HPMC、0.1％tween的50mM柠檬酸钠缓冲液pH 4)。每周两次测量体重和肿瘤体积(使用数显卡尺)，直到研究终点。每天通过口服管饲法施用化合物。

结果：图1A示出了重复每日给与50和250mg/kg po化合物A(肿瘤生长抑制，TGI分别是44％和78％)和10mg/kg MRTX1257(76％)的功效。如通过肿瘤体积的普通单向ANOVA以及通过Graphpad Prism软件中的事后Tukey测试进行的多重比较所评估，与媒介物对照相比，250mg/kg化合物A和MRTX1257作为单一剂时引起了显著肿瘤生长抑制，分别为***p<0.001和*p<0.05。注意，对于H358模型，50mg/kg MRTX1257实现了消退，因此使用次优剂量来观测与化合物A的组合效果。

当组合给药时，50mg/kg化合物A与10mg/kg MRTX1257产生了21％的平均消退。在研究结束时，组合组中有7/10只小鼠实现了相对于基线减少>10％的肿瘤消退。

如通过体重所评估，所有处理在研究持续期间都被良好耐受(图1B)。图1C示出了MRTX1257的结构。MRTX1257可得自市面(CAS号2206736-04-9)。

结论：每天以50mg/kg和250mg/kg口服施用后，化合物A在NCI-H358非小细胞肺癌异种移植模型中表现出了统计学上显著的剂量依赖性的功效。MRTX1257在本模型中在每天10mg/kg的次优剂量下也表现出了功效。化合物A作为单一剂和与MRTX1257组合时被良好耐受，并且所述组合方案在研究结束时获得了7/10肿瘤消退。

等效方案

尽管已经结合上文阐述的具体实施方案描述了本发明，但其许多替代方案、修改形式和其他变化形式对本领域普通技术人员将显而易知。希望所有此类替代方案、修改形式和变化形式都落在本发明的精神和范围内。

再多了解一些

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本文用于企业家、创业者技术爱好者查询，结果仅供参考。

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