一种注射用盐酸表柔比星的制备方法与流程

1.本发明涉及药物制剂技术领域，尤其涉及一种注射用盐酸表柔比星的制备方法。


背景技术：

2.盐酸表柔比星(epirubicin hydrochloride)分子式为c
27
h
30
no
11
cl，属抗生素类抗肿瘤药，是阿霉素的一种立体异构体，具有降低心脏毒性的特性，通过靶向拓扑异构酶ii促成其抗肿瘤作用。注射用盐酸表柔比星是一种无菌冻干粉针剂，由意大利farmitalia carlo erba公司开发，1982年首次在法国上市，1998年在中国获批，1999年获fda批准，2000年在美国上市。原研公司farmitalia carlo erba于1995年并入pharmacia&upjohn，2003年pfizer与pharmacia&upjohn合并，盐酸表柔比星归pfizer所有，适应症为胰腺癌、食道癌、多发性骨髓瘤、乳腺癌症等。
3.市售的原研公司的注射用盐酸表柔比星其处方组成为盐酸表柔比星、乳糖、羟苯甲酯、注射用水，其中盐酸表柔比星为活性物质，乳糖为赋形剂，注射用水为溶剂，在冻干过程中除去得到冻干粉制剂，使用时再将冻干粉复溶即可。
4.为了降低患者的用药风险，确保注射用盐酸表柔比星的澄清度尤为重要，根据中国药典中对注射用盐酸表柔比星关于澄清度的规定：取本品5份,各10mg，分别加水5ml溶解后，溶液应澄清；如显浑浊，与1号浊度标准液(通则0902第一法)比较，均不得更浓。注射用盐酸表柔比星原研商品为在实际应用中发现其复溶后的澄清度不佳，绝大多数情况为较浑浊溶液，无法达到澄清状态，最多只能达到1号浊度，有时甚至大于1号浊度，存在安全隐患。这其中的原因主要是，盐酸表柔比星本身的溶解度并不高，且较不稳定，在干燥、储存的过程中，会有部分盐酸表柔比星解离挥发出hcl，导致api中存在溶解度低的表柔比星，因此使得复溶溶液浑浊度增大甚至超标。
5.可见，现有的注射用盐酸表柔比星产品还有待改进。


技术实现要素：

6.本发明目的在于提供一种含有羟苯甲酯的冻干制剂的冷冻干燥方法，能够提高产品的稳定性和质量。本发明的另一目的在于提供一种盐酸表柔比星冻干粉的制备方法。
7.本发明的发明人采用中国药典方法对注射用盐酸表柔比星原研产品本发明的发明人采用中国药典方法对注射用盐酸表柔比星原研产品(批号：cw3848，生产厂家：辉瑞无锡制药有限公司)进行澄清度检测，发现其澄清度已大于一号浊度，具有较高风险，说明原研产品在制备和/或储存中解离出了较多的表柔比星，使其澄清度超标，为了更好地保证患者的安全，应当对其进行改进，尽量减少制备/储存过程中盐酸表柔比星的解离，提高产品的稳定性。
8.同时，发明人观察到，在冷冻过程中，冻干溶液会逐渐形成分层体系，上层出现白色疏松粉末，经过hplc羟苯甲酯含量检测发现，分层后上层析出的白色疏松粉末为羟苯甲酯，推测是由于羟苯甲酯的溶解度低于盐酸表柔比星和乳糖，而在冷冻过程中液体底部温度低于顶部的温度，从而导致羟苯甲酯上移，聚集于上层，形成分层。另外，发明人还发现，
在完全冻结后，由于表面形成的块状物较蓬松，会有部分固体微粒在解析干燥过程中被气流带出，由于羟苯甲酯较多地聚集在上层，则会造成最终产品中的羟苯甲酯含量偏低。
9.现有的文献报道原研注射用盐酸表柔比星中羟苯甲酯为抑菌剂，但是注射用盐酸表柔比星为单剂量给药，理论上并不需要使用抑菌剂，发明人在研究如何改善澄清度的过程中意外地发现，若处方中不添加羟苯甲酯，盐酸表柔比星冻干粉复溶后很容易呈浑浊，或放置一段时间后复溶浑浊度显著增大，但添加足量羟苯甲酯后能够保证复溶溶液澄清，因此推测羟苯甲酯能够增加盐酸表柔比星或表柔比星的溶解度，以保证溶液的澄清度，起到增溶剂的作用，改善冻干粉溶解后的浊度，因此，若能保证最终产品中羟苯甲酯的含量，减少其在生产过程中的损失，将有助于提高注射用盐酸表柔比星的产品稳定性。
10.由此可见，目前亟待提出一种注射用盐酸表柔比星的制备方法，以确保注射用盐酸表柔比星的质量稳定。
11.为此，本发明提供了一种冻干制剂的冷冻干燥方法，其冻干制剂含有羟苯甲酯，冷冻干燥方法包括：(1)预冻：先将药液在第一温度下保温0～120min，再降温至第二温度保温预冻；(2)升华干燥；(3)解析干燥；其中，所述第一温度为≤5℃，所述第二温度为
‑
35℃～
‑
45℃。
12.在步骤(1)中，保温时间为0min时，应当理解为，将药液直接从第一温度降温至第二温度，不在第一温度下保温。
13.本发明中，冻干制剂为盐酸表柔比星冻干粉。
14.本发明中的药液指的是含有盐酸表柔比星的液体，可以是溶液或悬浮液等形式。
15.本发明中，所述第一温度为
‑
40℃～5℃。进一步地，在一些实施例中，所述第一温度为
‑
5℃～5℃，例如
‑
5℃、
‑
4℃、
‑
3℃、
‑
2℃、
‑
1℃、0℃、1℃、2℃、3℃、4℃、5℃。进一步地，在一些实施例中，所述第一温度为
‑
5℃。
16.本发明中，所述预冻是先将搁板预冷至所述第一温度再放置样品进行预冻，或将样品放置于搁板后，在1～5min内使搁板温度调整至所述第一温度开始预冻程序。进一步地，在一些实施例中，是将所述样品放置于搁板后，在1min内使搁板温度调整至所述第一温度开始预冻程序。
17.所述“1～5min内”应当理解为包括本数，其余类似情况同理。
18.本发明中，在第一温度下的所述保温时间为0～80min。进一步地，在一些实施例中，所述保温时间为50min～70min，例如50min、55min、60min、65min、70min。进一步地，在一些实施例中，所述保温时间为60min。
19.本发明中，所述第二温度为
‑
40℃。进一步地，在一些实施例中，在第二温度下的所述保温时间为60～180min。进一步地，在一些实施例中，所述保温时间为100min～150min，例如100min、105min、110min、115min、120min、125min、130min、140min、150min。进一步地，在一些实施例中，所述保温时间为120min。
20.进一步地，由第一温度降温至第二温度的时间为1～50min。
21.在本发明的具体实施方式中，由第一温度降温至第二温度的时间为1～40min，优选1min。
22.本发明中，所述升华干燥包括如下步骤：
23.a.由第二温度升温至
‑
33～
‑
28℃后保温120～480min，升温时间为60～240min，保
持真空度为0.03～0.3mbar；
24.b.升温至
‑
27～
‑
23℃后保温240～480min，升温时间为120min，保持真空度为0～0.07mbar；
25.c.升温至
‑
22～
‑
18℃后保温240～360min，升温时间为120～600min，保持真空度为0～0.07mbar。
26.进一步地，在一些实施例中，所述升华干燥包括如下步骤：
27.a.由第二温度升温至
‑
30℃后保温120min，升温时间为60min，保持真空度为0.2
±
0.1mbar；
28.b.升温至
‑
25℃后保温480min，升温时间为120min，保持真空度为0mbar；
29.c.升温至
‑
20℃后保温240min，升温时间为600min，保持真空度为0mbar。
30.本发明中，所述解析干燥包括如下步骤：
31.i.升华干燥后，将搁板温度升温至
‑
5℃～5℃后保温120～180min，升温时间为450～530min，保持真空度为0～0.22mbar；
32.ii.升温至25～40℃，升温时间为120～180min，维持时间为120min，保持真空度为0～0.22mbar。
33.进一步地，在一些实施例中，所述解析干燥包括如下步骤：
34.i.升华干燥后，将搁板温度升温至0℃后保温180min，升温时间为480min，保持真空度为0mbar；
35.ii.升温至25℃，升温时间为180min，维持时间为120min，保持真空度为0mbar。
36.本发明另一方面提供了一种盐酸表柔比星冻干粉的制备方法，所述盐酸表柔比星冻干粉的组分包括羟苯甲酯，采用上述任一项所述冷冻干燥方法进行冷冻干燥；所述制备方法包括如下步骤：
37.i.原料混合；
38.ii.过滤：对混合后的药液进行预过滤后再进行除菌过滤；
39.iii.灌装；
40.iv.采用上述任一项所述冷冻干燥方法进行冷冻干燥；
41.进一步地，在一些实施例中，所述预过滤为：将药液经0.45μm 0.22μmpvdf材质过滤器预过滤；所述除菌过滤为：将预过滤得到的药液经过2道0.22μm 0.22μm pvdf材质过滤器过滤。
42.进一步地，在一些实施例中，所述除菌过滤在保护气体氛围下进行。
43.所述原料混合、过滤、灌装均为本领域常用的工艺步骤，采用了上述任意一项或多项与本发明的冷冻干燥工艺组成的制备方法，均属于本发明的保护范围。
44.所述原料混合是指将制剂配方中的原料进行混合。
45.所述保护气体，是指与表柔比星或盐酸表柔比星反应惰性的气体，用于将表柔比星或盐酸表柔比星与氧气隔绝，且在除菌过程中不会与表柔比星或其它组分发生化学反应，可选的保护气体包括但不限于氮气、氦气、氖气、氩气、氪气或氙气。
46.本发明实施例中，所述保护气体为氮气。
47.进一步地，所述灌装容器可以是本领域任意可耐受本发明冷冻干燥过程的容器，包括但不限于注射剂瓶、西林瓶、安瓿瓶、聚乙烯瓶、卡式瓶。
48.进一步地，在一些具体实施例中，所述原料混合为：将辅料与低于配方量的水混合溶解，得药液a，再将盐酸表柔比星与药液a混合得药液b，再将剩余量的水与药液b混合，得药液c；
49.进一步地，所述水为注射用水；
50.进一步地，所述水的总用量为每克盐酸表柔比星使用250ml水。
51.在本发明的具体实施方式中，所述盐酸表柔比星冻干粉包括如下组分：盐酸表柔比星240～580份、乳糖1500～2500份、羟苯甲酯50～100份；
52.进一步地，所述盐酸表柔比星冻干粉包括如下组分：盐酸表柔比星400份、乳糖2104份、羟苯甲酯80份。
53.本发明的有益效果：
54.(1)本发明提供的包含羟苯甲酯的冻干制剂的冷冻干燥方法保障了冻干制剂的质量和稳定性。实验表明，本发明方法在保证冻干制剂符合质量标准要求的前提下，更好地保证了产品的稳定性，可广泛应用于包含羟苯甲酯的冻干制剂的制备工艺中，提升用药安全。
55.(2)通过本发明冷冻干燥方法制备的盐酸表柔比星冻干粉，可提高产品中盐酸表柔比星的稳定性，降低其在制备/储存过程中的解离程度，同时可保证羟苯甲酯的含量不损失。经检测，通过本发明制备得到的产品有关物质等指标均优于进口产品在稳定性加速实验中，稳定性实验数据表明该产品在60℃保存稳定，且30天后总杂质含量远低于进口产品的总杂质含量，质量更优。
具体实施方式
56.本发明提供了一种注射用盐酸表柔比星的制备方法。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。本发明采用的试材皆为普通市售品，皆可于市场购得。下面结合实施例，进一步阐述本发明：
57.实施例1
58.处方：
59.表1
[0060][0061][0062]
注射用盐酸表柔比星的制备方法，包括如下步骤：
[0063]
步骤1：向1l烧杯中加入约70％的配制体积的纯化水，开启搅拌，加热至40
‑
50℃，转速设为100
‑
150rpm。
[0064]
步骤2：将处方量的羟苯甲酯在容器中每次用约2％注射用水(60
‑
80℃)搅拌2min后静置10s将悬浊液倒入烧杯中，此步骤连续进行5次，持续搅拌，转速设为100
‑
300rpm；
[0065]
步骤3：在烧杯中加入处方量乳糖，用2％注射用水淌洗盛装乳糖的容器，洗液并入药液中，转速设为100
‑
300rpm；
[0066]
步骤4：在烧杯中加入api，继续搅拌使api和辅料完全溶解；
[0067]
步骤5：补加纯化水至总重，降温至≤30℃，继续搅拌≥10min；
[0068]
步骤6：将步骤5所得的药液经过0.22μm的除菌滤头过滤；
[0069]
步骤7：灌装机开机，调节速度和装量；将步骤6所得的药液灌装于10ml中硼硅玻璃管制注射剂瓶中，灌装速度≤450瓶/分钟；
[0070]
步骤8：按照表2设定冷冻干燥参数，将搁板预冷至
‑
40℃后，将步骤7灌装后的样品进箱完毕后关闭箱门启动冻干程序。冻干结束后氮气复压至800mbar、压塞、出箱、轧盖。
[0071]
表2冻干工艺参数一览表
[0072][0073][0074]
实施例2
[0075]
处方：
[0076]
表3
[0077]
组份用量盐酸表柔比星4g乳糖21.04g羟苯甲酯800mg注射用水足量，加至1l制成400瓶(2.5ml/瓶)
[0078]
注射用盐酸表柔比星的制备方法，包括如下步骤：
[0079]
步骤1：向1l烧杯中加入约70％的配制体积的纯化水，开启搅拌，加热至40
‑
50℃，转速设为100
‑
150rpm；
[0080]
步骤2：在容器中将处方量的羟苯甲酯每次用约2％注射用水(60
‑
80℃)搅拌2min后静置10s，将悬浊液倒入烧杯中，此步骤连续进行5次，持续搅拌，转速设为100
‑
300rpm；
[0081]
步骤3：在烧杯中加入处方量乳糖，用2％注射用水淌洗盛装乳糖的容器，洗液并入
药液中，转速设为100
‑
300rpm；
[0082]
步骤4：在烧杯中加入api，继续搅拌使api和辅料完全溶解；
[0083]
步骤5：补加纯化水至总重，降温至≤30℃，继续搅拌≥10min；
[0084]
步骤6：将步骤5所得的药液经过0.22μm的除菌滤头过滤；
[0085]
步骤7：灌装机开机，调节速度和装量；将步骤6所得的药液灌装于10ml中硼硅玻璃管制注射剂瓶中，灌装速度≤450瓶/分钟；
[0086]
步骤8：按照表4设定冷冻干燥参数，将搁板预冷至5℃后，将步骤7灌装后的样品进箱完毕后关闭箱门启动冻干程序。冻干结束后氮气复压至800mbar、压塞、出箱、轧盖。
[0087]
表4冻干工艺参数一览表
[0088][0089]
实施例3
[0090]
处方：
[0091]
表5
[0092]
组份用量盐酸表柔比星400g乳糖2104g羟苯甲酯80g注射用水足量，加至100l制成40000瓶(2.5ml/瓶)
[0093]
注射用盐酸表柔比星的制备方法，包括如下步骤：
[0094]
步骤1：向500l配液罐中加入约70％的配制体积的注射用水，冷却至40
‑
50℃后，开启搅拌，转速设为100
‑
150rpm；
[0095]
步骤2：在容器中，将处方量的羟苯甲酯用约2％注射用水(60
‑
80℃)搅拌2min后静置10s，然后将容器中的悬浊液倒入配液罐中，此步骤连续进行5次后，将容器淌洗干净，持续搅拌，转速设为100
‑
300rpm；
[0096]
步骤3：在配液罐中加入处方量乳糖，用2％注射用水淌洗盛装乳糖的容器，洗液并入药液中，转速设为100
‑
300rpm；
[0097]
步骤4：在投料隔离器中将处方量的盐酸表柔比星，缓慢加入盛有5％配制体积的注射用水(40
‑
50℃)的不锈钢桶中，预溶后加入到配液罐中，每次用约2％配制量注射用水(40
‑
50℃)共2次冲洗盛装盐酸表柔比星的容器，洗液并入药液中。搅拌≥10min使api和辅
料完全溶解；
[0098]
步骤5：补加注射用水至总重，降温至≤30℃，继续搅拌≥10min；
[0099]
步骤6：过滤
[0100]
(1)预过滤：用洁净氮气向配液罐加压，压力控制为1.0～2.0bar，将药液经过0.45μm 0.22μm预过滤器过滤至储液罐内；
[0101]
(2)除菌过滤：向储液罐通入氮气，控制压力1.0～2.0bar。将药液经过2道0.22μm 0.22μm除菌过滤器过滤至灌装缓冲罐中，此步骤持续进行，直至灌装结束。药液在储液罐中贮存时，每30min记录1次药液温度、过滤压力；
[0102]
步骤7：灌装机开机，调节速度和装量；将步骤6所得药液灌装于10ml中硼硅玻璃管制注射剂瓶中，灌装速度≤450瓶/分钟；
[0103]
步骤8：按照表6设定冷冻干燥参数，步骤7灌装后样品进箱完毕后关闭箱门启动冻干程序。冻干结束后氮气复压至800mbar、压塞、出箱、轧盖。
[0104]
表6冻干工艺参数一览表
[0105][0106]
对比例1
[0107]
处方：
[0108]
表7
[0109]
组份用量盐酸表柔比星4g乳糖21.04g注射用水足量，加至1l制成400瓶(2.5ml/瓶)
[0110]
注射用盐酸表柔比星的制备方法，包括如下步骤：
[0111]
步骤1：向1l烧杯中加入约70％的配制体积的纯化水，开启搅拌，加热至40
‑
50℃，转速设为100
‑
150rpm；
[0112]
步骤2：在烧杯中加入处方量乳糖，用2％注射用水淌洗盛装乳糖的容器，洗液并入药液中，转速设为100
‑
300rpm；
[0113]
步骤3：加入api，继续搅拌使api和辅料完全溶解；
[0114]
步骤4：补加纯化水至总重，降温至≤30℃，继续搅拌≥10min；
[0115]
步骤5：将步骤4所得的药液经过0.22μm的除菌滤头过滤；
[0116]
步骤6：灌装机开机，调节速度和装量；将步骤5所得的药液灌装于10ml中硼硅玻璃管制注射剂瓶中，灌装速度≤450瓶/分钟；
[0117]
步骤7：按照表8设定冷冻干燥参数，步骤6灌装后的样品进箱完毕后关闭箱门启动冻干程序。冻干结束后氮气复压至800mbar、压塞、出箱、轧盖。
[0118]
表8冻干工艺参数一览表
[0119][0120][0121]
对比例2
[0122]
处方：
[0123]
表9
[0124]
组份用量盐酸表柔比星4g乳糖21.04g羟苯甲酯800mg注射用水足量，加至1l制成400瓶(2.5ml/瓶)
[0125]
注射用盐酸表柔比星的制备方法，包括如下步骤：
[0126]
步骤1：向1l烧杯中加入约70％的配制体积的纯化水，开启搅拌，加热至40
‑
50℃，转速设为100
‑
150rpm；
[0127]
步骤2：将处方量的羟苯甲酯在容器中每次用约2％注射用水(60
‑
80℃)搅拌2min后静置10s将悬浊液倒入烧杯中，此步骤连续进行5次，持续搅拌，转速设为100
‑
300rpm；
[0128]
步骤3：在烧杯中加入处方量乳糖，用2％注射用水淌洗盛装乳糖的容器，洗液并入药液中，转速设为100
‑
300rpm；
[0129]
步骤4：在烧杯中加入api，继续搅拌使api和辅料完全溶解；
[0130]
步骤5：补加纯化水至总重，降温至≤30℃，继续搅拌≥10min；
[0131]
步骤6：将步骤5所得的药液经过0.22μm的除菌滤头过滤；
[0132]
步骤7：灌装机开机，调节速度和装量；将步骤6所得的药液灌装于10ml中硼硅玻璃管制注射剂瓶中，灌装速度≤450瓶/分钟；
[0133]
步骤8：按照表10设定冷冻干燥参数，将搁板预冷至
‑
40℃后，将步骤7灌装后的样品进箱完毕后关闭箱门启动冻干程序。冻干结束后氮气复压至800mbar、压塞、出箱、轧盖。
[0134]
表10冻干工艺参数一览表
[0135]
阶段设定温度(℃)设定时间(min)维持时间(min)设定真空度(mbar)搁板预冷
‑
40nanana预冻
‑
401120na
一次升华
‑
51203600.2
±
0.02解析干燥5603600.2
±
0.02
[0136]
对比例3
[0137]
处方：
[0138]
表11
[0139]
组份用量盐酸表柔比星4g乳糖21.04g羟苯甲酯800mg注射用水足量，加至1l制成400瓶(2.5ml/瓶)
[0140]
注射用盐酸表柔比星的制备方法，包括如下步骤：
[0141]
步骤1：向1l烧杯中加入约70％的配制体积的纯化水，开启搅拌，加热至40
‑
50℃，转速设为100
‑
150rpm；
[0142]
步骤2：将处方量的羟苯甲酯在容器中每次用约2％注射用水(60
‑
80℃)搅拌2min后静置10s将悬浊液倒入烧杯中，此步骤连续进行5次，持续搅拌，转速设为100
‑
300rpm；
[0143]
步骤3：在烧杯中加入处方量乳糖，用2％注射用水淌洗盛装乳糖的容器，洗液并入药液中，转速设为100
‑
300rpm；
[0144]
步骤4：在烧杯中加入api，继续搅拌使api和辅料完全溶解；
[0145]
步骤5：补加纯化水至总重，降温至≤30℃，继续搅拌≥10min；
[0146]
步骤6：将步骤5所得的药液经过0.22μm的除菌滤头过滤；
[0147]
步骤7：灌装机开机，调节速度和装量；将步骤6所得的药液灌装于10ml中硼硅玻璃管制注射剂瓶中，灌装速度≤450瓶/分钟；
[0148]
步骤8：按照表12设定冷冻干燥参数，将搁板预冷至
‑
40℃后，将步骤7灌装后的样品进箱完毕后关闭箱门启动冻干程序。冻干结束后氮气复压至800mbar、压塞、出箱、轧盖。
[0149]
表12冻干工艺参数一览表
[0150][0151]
对比例4
[0152]
处方：
[0153]
表13
[0154]
组份用量盐酸表柔比星200g乳糖1052g羟苯甲酯40g注射用水足量，加至50l制成20000瓶(2.5ml/瓶)
[0155]
注射用盐酸表柔比星的制备方法，包括如下步骤：
[0156]
步骤1：向500l配液罐中加入约70％的配制体积的注射用水，冷却至40
‑
50℃。开启搅拌，转速设为100
‑
150rpm；
[0157]
步骤2：将处方量的羟苯甲酯在容器中每次用约2％注射用水(60
‑
80℃)搅拌2min后静置10s将悬浊液倒入配液罐中，此步骤连续进行5次，将容器淌洗干净持续搅拌，转速设为100
‑
300rpm；
[0158]
步骤3：在配液罐中加入处方量乳糖，用2％注射用水淌洗盛装乳糖的容器，洗液并入药液中，转速设为100
‑
300rpm；
[0159]
步骤4：在投料隔离器中将处方量的盐酸表柔比星，缓慢加入盛有5％配制体积的注射用水(40
‑
50℃)的不锈钢桶中，预溶后加入到配液罐中，每次用约2％配制量注射用水(40
‑
50℃)共2次冲洗盛装盐酸表柔比星的容器，洗液并入药液中。搅拌≥10min使api和辅料完全溶解；
[0160]
步骤5：补加注射用水至总重，降温至≤30℃，继续搅拌≥10min；
[0161]
步骤6：过滤:
[0162]
(1)过滤：用洁净氮气向配液罐加压，压力控制为1.0～2.0bar，将药液经过0.45μm 0.22μm预过滤器过滤至储液罐内；
[0163]
(2)除菌过滤：向储液罐通入氮气，控制压力1.0～2.0bar。将药液经过2道0.22μm 0.22μm除菌过滤器过滤至灌装缓冲罐中，此步骤持续进行，直至灌装结束。药液在储液罐中贮存时，每30min记录1次药液温度、过滤压力；
[0164]
步骤7：灌装机开机，调节速度和装量；将步骤6所得的药液灌装于10ml中硼硅玻璃管制注射剂瓶中，灌装速度≤450瓶/分钟；
[0165]
步骤8：按照表14设定冷冻干燥参数，将搁板预冷至5℃后，将步骤7灌装后的样品进箱完毕后关闭箱门启动冻干程序。冻干结束后氮气复压至800mbar、压塞、出箱、轧盖。
[0166]
表14冻干工艺参数一览表
[0167]
[0168][0169]
产品品质检测：
[0170]
1.有关物质的检测
[0171]
采用高效液相色谱法检测实施例1、3、对比例1、2、4得到的注射用表柔比星以及进口产品的有关物质含量，其中色谱检测条件如表15所示：
[0172]
表15注射用盐酸表柔比星有关物质色谱检测条件
[0173][0174]
有关物质检测结果如表16所示：
[0175]
表16注射用盐酸表柔比星有关物质检测结果
[0176][0177]
2.羟苯甲酯含量检测
[0178]
采用高效液相色谱法检测实施例1～3、对比例2～4得到的注射用表柔比星中的羟苯甲酯含量，其中色谱检测条件如表17所示：
[0179]
表17注射用盐酸表柔比星羟苯甲酯含量色谱检测条件
[0180]
色谱柱welch ultimate lp
‑
c18 4.6
×
250mm，5μm检测波长272nm柱温35℃流速1.3ml/min进样量10μl样品室温度5℃运行时间37min稀释剂6.8g/l磷酸二氢钾
‑
甲醇(40：60)流动相6.8g/l磷酸二氢钾
‑
甲醇(40：60)采集时间20min
[0181]
羟苯甲酯含量检测结果如表18所示：
[0182]
表18注射用盐酸表柔比星羟苯甲酯相对含量检测结果(以处方量为100％计)
[0183][0184][0185]
注：中间体指本品冻干前的液体，即最终成品冻干粉的液体状态。
[0186]
根据表18的结果可知，通过本发明制备方法得到的盐酸表柔比星冻干粉中羟苯甲酯含量可达到处方量的98％以上，实施例3制备的产品中羟苯甲酯含量可达100％，实现了羟苯甲酯在干燥过程中不损失，进而提高产品质量；而对比例3的升华干燥过程不同，对比例4的解析干燥温度较高，最终得到的产品中羟苯甲酯的含量均显著偏低。
[0187]
3.理化性质检测
[0188]
(1)性状：取本品，在光线明亮处，目视观察。
[0189]
(2)澄清度：取本品1瓶，按标示量加水制成每1ml中含2mg的溶液。与1号浊度标准液比较，分别置配对的比浊用玻璃管中，在浊度标准液制备5分钟后。同置于伞棚灯下，照度1000lux，从垂直于黑色背景板方向观察、比较。
[0190]
(3)水分：量取1ml甲酰胺溶液，加入库伦水分仪中进行测定，平行测定3份，3次连续标定结果rsd≤4％，测得水分记为b。
[0191]
取供试品1瓶，去除标签、铝盖，容器外壁用乙醇擦净，干燥后精密称定，记为ma。
[0192]
用注射器量取2ml甲酰胺加入样品中，擦净后再次称重，记为mb。充分振摇使内容物溶解完全，必要时可超声，确认样品完全溶解，无粘壁不溶物。
[0193]
另取一洁净注射器抽取1ml溶解液，直接注入库仑水分测定仪中测定，测得水分记为a。
[0194]
测定结束后，将容器内容物倾出，容器用水洗净，干燥后精密称定，记为mc。
[0195][0196]
a：供试品溶液水分，％
[0197]
b：空白溶剂水分，％
[0198]
ma：样品带包材总重，g
[0199]
mb：溶解后的供试品溶液带包材总重，g
[0200]
mc：包材总重，g。
[0201]
理化性质检测结果如表19所示：
[0202]
表19注射用盐酸表柔比星理化性质检测结果
[0203][0204]
根据表19结果可知，采用中国药典的方法检测，原研产品法玛新的澄清度较差；对比例1未添加羟苯甲酯，在60℃储存30天后，产品的浑浊度增大，说明盐酸表柔比星部分解离，存在用药风险，且储存时间越长，风险越大，应添加足量羟苯甲酯保证其产品的稳定性；对比例2的羟苯甲酯含量虽然也为100％左右，但根据表19可知其含水量较高，不利于长期
储存；本发明实施例制备的产品则能够在长时间高温储存后仍具有好的澄清度，说明本发明制备得到的产品复溶稳定性更佳，可降低盐酸表柔比星在制备/储存过程中的解离程度，保证羟苯甲酯的含量不损失，从而降低用药风险，且产品含水量较低，更有利于保证产品的稳定性。
[0205]
4.稳定性实验
[0206]
将实验施例1
‑
2、对比例1、2、4所得的注射用表柔比星以及进口产品在60℃放置30天，分别对有关物质含量进行考察。
[0207]
有关物质含量检测结果如表20所示：
[0208]
表20注射用盐酸表柔比星影响因素考察(60℃，30天)有关物质检测结果
[0209][0210]
表中所述杂质a为多柔比星酮，杂质c为多柔比星，杂质g为表柔比星二聚体。由表20可以看出，本发明方法制备的注射用盐酸表柔比星各杂质及总杂含量等指标均优于进口产品且根据前述结果可知，实施例3得到的冻干产品中羟苯甲酯含量能够保持100％。在稳定性加速实验中，实施例3的稳定性实验数据表明该产品在60℃保存稳定，复溶后仍然澄清，且30天后总杂质含量远低于进口产品的总杂质含量，说明本发明方法制备的注射用盐酸表柔比星的质量和稳定性优于原研制剂
[0211]
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。