一种来源于丝状真菌黑曲霉的诱导型启动子及其应用的制作方法

技术特征：
1.一种诱导型启动子，其特征在于，所述启动子的核苷酸序列如seq id no：1所示。2.包含权利要求1所述诱导型启动子的重组质粒、重组载体或宿主菌株。3.如权利要求2所述的重组载体或表达载体，其特征在于，所述重组载体为pbg-cyp68j5，所述表达质粒载体为pg-cyp68j5。4.如权利要求2所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为丝状真菌。5.如权利要求4所述的宿主细胞，其特征在于，所述丝状真菌为黑曲霉或相近曲霉菌种。6.扩增权利要求1所述诱导型启动子dna全长的上下游引物，其特征在于，所述引物对序列，c7-f：aaggcgatgaggttgtaatg，c7-r：ggattacggcacagacac；或是在其中至少一条引物的3’端连续减少若干个碱基的序列。7.权利要求1所述诱导型启动子的用途，其特征在于，所述羟化酶基因包括11α-羟化酶、11β-羟化酶的基因、15α-羟化酶、16α-羟化酶、7α-羟化酶、14α-羟化酶、9α-羟化酶，但不限于甾体羟化酶。8.如权利要求7所述诱导型启动子的用途，其特征在于，所述诱导型启动子用于丝状真菌中外源基因的诱导表达。9.如权利要求7所述诱导型启动子的用途，其特征在于，所述诱导型启动子用于构建高效黑曲霉甾体羟化基因工程菌。

技术总结
本发明专利提供了一种来自丝状真菌黑曲霉的新型诱导型启动子及其质粒载体构建，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，该启动子能够诱导外源基因在黑曲霉细胞中高效诱导表达，如P450甾体羟化酶基因的高水平表达，考察了赭曲霉C11α-羟化酶基因68J5在黑曲霉ATCC1015细胞中高水平表达以及重组菌对甾体底物16，17α-环氧黄体酮的转化效率，因此可用于构建黑曲霉高效基因工程菌。曲霉高效基因工程菌。曲霉高效基因工程菌。


技术研发人员：刘晓光 郭文丽 路福平
受保护的技术使用者：天津科技大学
技术研发日：2020.05.14
技术公布日：2021/11/19