转谷氨酰胺酶在抑制或延缓近视药物中的应用的制作方法

1.本发明属于近视治疗技术领域，具体涉及转谷氨酰胺酶在抑制或延缓近视药物中的应用。


背景技术：

2.近视是人类发病率最高的疾病之一，防治近视是全球公共卫生面临的最大挑战之一。其中，高度近视危害极大，患者可继发严重并发症，导致失明。
3.近视的定义是指经过眼睛的屈光后，物象的焦点落在视网膜之前。根据近视发生的原因可分为屈光性近视和轴性近视两种。屈光性近视是由于眼的角膜或者晶状体的屈光力过强导致物象位于视网膜之前；治疗方法为改变眼的屈光性质。轴性近视的原因是巩膜不断延长，导致眼轴不断增长，从而形成视网膜在物象焦点之后；主要治疗方法是延缓、抑制眼轴的延长；如果眼轴延长这一病理无法停止或者及时抑制，眼轴会不断延长，患者可表现出近视度数不断增高，形成高度近视，可进一步引起视网膜萎缩、眼底出血、脉络膜新生血管、视网膜脱离等并发症，造成失明。
4.在近视中，轴性近视占了绝大多数的比例。目前近视的治疗手段主要包括眼镜、隐形眼镜、眼内植入晶体、角膜屈光手术等方法，均是针对改变眼屈光度，而并非针对产生轴性近视的根本原因，因此，开展有效地延缓、抑制眼轴延长从而治疗轴性近视的研究备受期待。
5.延缓或抑制眼轴延长的方法有两种途径，一种是增加眼轴延长的后负荷，另一种是增加眼球壁的坚固性。增加眼轴延长后负荷的具体方法是巩膜加固，这种方法是将异体生物材料植入眼球后部(后巩膜附近)增加眼轴增长的阻力，从而延缓近视的发展。
6.然而，巩膜加固手术的效果还存在很大争议。首先，巩膜加固手术并没有改变巩膜本身的结构和力学性质，近视所造成的巩膜胶原纤维结构异常，基质丢失等病理特征都还存在；其次，虽然可以选择自体阔筋膜，异体(尸体)巩膜、牛心包膜等各种材料，但其仍不是特别理想的加固材料；再有，后巩膜加固术作为一种创伤较大的手术，对眼部及眶部的扰动较大，可产生包括视网膜脱离、眼眶出血、眼部感染、眼球运动限制等一系列问题，长期疗效也不乐观，很多患者的巩膜还在不断延长，也就是手术不易达到预期效果。


技术实现要素：

7.因此，本发明要解决的技术问题针对改变巩膜本技术力学性质治疗手段的空白、克服现有技术中巩膜加固手术的效果存在争议的缺陷，提供了一种抑制或延缓眼轴延长的药物及转谷氨酰胺酶在抑制或延缓近视药物中的应用。
8.为此，本发明提供了以下技术方案。
9.本发明提供了转谷氨酰胺酶在制备抑制眼轴延长的药物中的应用。
10.本发明提供了转谷氨酰胺酶在制备延缓眼轴延长的药物中的应用。
11.此外，本发明提供了一种抑制或延缓眼轴延长的药物，包括活性成分转谷氨酰胺
酶。
12.所述药物的剂型为注射剂或植入型缓释制剂。
13.所述药物中转谷氨酰胺酶的浓度为0.1-2u/ml。
14.本发明技术方案，具有如下优点：
15.1.本发明提供的转谷氨酰胺酶在制备抑制眼轴延长的药物中的应用，转谷氨酰胺酶作用于巩膜表面，可通过促进胶原纤维氨基酸之间的异肽键生成，增加胶原蛋白分子之间的连接密度，提高巩膜的生物力学性质。巩膜是眼球壁的主要组成部分，是眼球壁的坚固性的来源和保障，当巩膜自身的力学性能提高后，使眼球壁的坚固性可以大大增加，眼轴增长将受限或停止，从而达到控制、治疗近视的目的。转谷氨酰胺酶可增加巩膜力学性质50-200％，且未观察到对眼睛其他部位产生毒副作用。
16.2.本发明提供的转谷氨酰胺酶在制备抑制眼轴延长的药物中的应用，通过注射的方式穿透眼表粘膜组织，到达巩膜表面产生效果，能够真正实现增加眼球壁坚固性、抑制眼轴延长的效果，同时也可以实现微创治疗。
17.3.本发明提供的抑制或延缓眼轴延长的药物，包括活性成分转谷氨酰胺酶，该药物可以从病因学角度对不断发展的轴性近视进行治疗。
附图说明
18.为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
19.图1是本发明实施例2中巩膜条带制备的示意图；
20.图2是本发明实施例3中巩膜组织的masson染色图；其中，a和c为观察组的masson染色图，b和d为对照组的masson染色图。
具体实施方式
21.提供下述实施例是为了更好地进一步理解本发明，并不局限于所述最佳实施方式，不对本发明的内容和保护范围构成限制，任何人在本发明的启示下或是将本发明与其他现有技术的特征进行组合而得出的任何与本发明相同或相近似的产品，均落在本发明的保护范围之内。
22.实施例中未注明具体实验步骤或条件者，按照本领域内的文献所描述的常规实验步骤的操作或条件即可进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规试剂产品。
23.在以下实施例中用到的转谷氨酰胺酶可以通过市售的形式获得生产转谷氨酰胺酶的公司有德国ruibio公司和日本味之素公司；本发明实施例中用到的转谷氨酰胺酶购于德国ruibio公司。
24.实施例1
25.本实施例提供了转谷氨酰胺酶用于提高家兔巩膜生物力学性能的实验，包括，
26.取10只家兔，以右眼为观察对象，作为处理组，其中对侧眼(左眼)作为对照组。对
家兔右眼tenon囊下注入含有1u/ml转谷氨酰胺酶的pbs溶液0.15ml，左眼不处理，正常饲养14天后。耳缘静脉注射空气处死实验动物，取出实验动物双侧眼球，制作成4mm
×
14mm的巩膜条带，进行巩膜在体动物实验测定。采用微力学测试仪(岛津ez-test)，巩膜条带进行拉伸试验，记录巩膜条带分别在5％和10％的形变程度下所需要的拉伸力，得到巩膜的弹性模量(e)。弹性模量可反映材料生物力学属性。通过比较处理眼和对照眼的弹性模量的差距，从而评估转谷氨酰胺酶对巩膜生物力学性质的增强作用。测试结果见表1，其中增强度的测试方法见式ⅰ；
[0027][0028]
其中，e
对照组
为对照组10个巩膜条带弹性模量的平均值，e
处理组
是处理组10个巩膜条带弹性模量的平均值。
[0029]
表1在体动物实验的巩膜条带的力学性能测试结果
[0030][0031]
实施例2
[0032]
本实施例提供了转谷氨酰胺酶用于提高离体猪巩膜生物力学性能的实验，包括，
[0033]
按照规格为14mm
×
4mm的巩膜条带进行离体动物实验，取24h内的离体猪眼40只，每个眼球取对称部位的巩膜条带2条，随机选择一条巩膜条带作为处理组，将其在1u/ml转谷氨酰胺酶溶液的pbs溶液中浸泡1h进行交联，交联条件为37℃，另外一条巩膜条带作为对照组，其中巩膜条带的制备的示意图见图1；然后采用微力学拉伸仪(岛津ez-test)测试巩膜条带的力学性质，巩膜条带进行拉伸试验，记录巩膜条带分别在5％和10％的形变程度下所需要的拉伸力，得到巩膜的弹性模量(e)。测试结果见表2；其中，表2中，处理组弹性模量是处理组中40条巩膜条带弹性模量的平均值，对照组弹性模量是对照组中40条巩膜条带弹性模量的平均值。
[0034]
表2离体动物实验巩膜的力学性能测试结果
[0035][0036]
实施例3
[0037]
本实施例提供了眼球壁在转谷氨酰胺酶的作用下组织学结构变化的实验，包括，
[0038]
取24h内的离体猪眼10只，共10个样本，分为观察组和对照组两组，每组5个样本，将观察组和对照组中的眼球分别在不同的浸泡液中浸泡0.5h进行交联，交联温度为37℃，然后取出眼球，取出后部巩膜组织，然后行masson三色染色后观察巩膜组织的胶原纤维密度。其中，观察组眼球浸泡在1u/ml转谷氨酰胺酶溶液的pbs溶液中浸泡，对照组眼球的浸泡
液仅含有pbs溶液。图2中，a和c可以看出，观察组的巩膜组织的胶原纤维更加紧致(见a中的1和c中的3)，胶原纤维横截面的纤维小束的密度更高(见a中的1’和c中的3’)；对照组的胶原排列明显更加疏松(见b中的2、2’和d中的4、4’)。
[0039]
从实施例1和实施例2中可以看出，本发明提供的转谷氨酰胺酶可以增加巩膜力学性能。实施例3同样可以说明转谷氨酰胺酶可以增加巩膜力学性能。
[0040]
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。