一种残膜回收机防缠绕挑膜装置的制 一种秧草收获机用电力驱动行走机构

抗BCMA嵌合抗原受体的制作方法

2021-11-10 02:57:00 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种嵌合抗原受体(car),包含:(i)抗b细胞成熟抗原(bcma)结合域;(ii)跨膜域;和(iii)胞浆域,其中所述抗bcma结合域包含seq id no:1

18中任一个的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的car,其中所述抗bcma结合域包含seq id no:2、3、5、6、8、9、11、13、14、15、17或18中任一个的氨基酸序列。3.根据权利要求1或2所述的car,其中所述抗bcma结合域包含seq id no:7

9中任一个的重链互补决定区(cdrh)3。4.根据权利要求1

3中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含seq id no:8或9的重链互补决定区(cdrh)3。5.根据权利要求1

4中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含seq id no:16

18中任一个的轻链互补决定区(cdrl)3。6.根据权利要求1

5中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含seq id no:17或18的轻链互补决定区(cdrl)3。7.根据权利要求1

6中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含重链互补决定区cdrh1、cdrh2和cdrh3,其中(i)所述cdrh1包含seq id no:1

3中的任一个;(ii)所述cdrh2包含seq id no:4

6中的任一个;以及(iii)所述cdrh3包含seq id no:7

9中的任一个。8.根据权利要求1

7中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含重链互补决定区cdrl1、cdrl2和cdrl3,其中,(i)所述cdrl1包含seq id no:10

11中的任一个;(ii)所述cdrl2包含seq id no:12

15中的任一个;以及(iii)所述cdrl3包含seq id no:16

18中的任一个。9.根据权利要求1

8中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含重链互补决定区cdrh1、cdrh2和cdrh3,以及轻链互补决定区cdrl1、cdrl2和cdrl3,其中,(i)所述cdrh1包含seq id no:1

3中的任一个;(ii)所述cdrh2包含seq id no:4

6中的任一个;(iii)所述cdrh3包含seq id no:7

9中的任一个;(iv)所述cdrl1包含seq id no:10

11中的任一个;(v)所述cdrl2包含seq id no:12

15中的任一个;和(vi)所述cdrl3包含seq id no:16

18中的任一个。10.根据权利要求1

9中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含重链互补决定区cdrh1、cdrh2和cdrh3,以及轻链互补决定区cdrl1、cdrl2和cdrl3,其中(i)所述cdrh1包含seq id no:3;(ii)所述cdrh2包含seq id no:4;(iii)所述cdrh3包含seq id no:7;(iv)所述cdrl1包含seq id no:10;
(v)所述cdrl2包含seq id no:12;和(vi)所述cdrl3包含seq id no:16。11.根据权利要求1

9中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含重链互补决定区cdrh1、cdrh2和cdrh3,以及轻链互补决定区cdrl1、cdrl2和cdrl3,其中,(i)所述cdrh1包含seq id no:1;(ii)所述cdrh2包含seq id no:4;(iii)所述cdrh3包含seq id no:8;(iv)所述cdrl1包含seq id no:10;(v)所述cdrl2包含seq id no:12;和(vi)所述cdrl3包含seq id no:16。12.根据权利要求1

9中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含重链互补决定区cdrh1、cdrh2和cdrh3,以及轻链互补决定区cdrl1、cdrl2和cdrl3,其中(i)所述cdrh1包含seq id no:1;(ii)所述cdrh2包含seq id no:4;(iii)所述cdrh3包含seq id no:7;(iv)所述cdrl1包含seq id no:11;(v)所述cdrl2包含seq id no:14;以及(vi)所述cdrl3包含seq id no:17。13.根据权利要求1

9中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含重链互补决定区cdrh1、cdrh2和cdrh3,以及轻链互补决定区cdrl1、cdrl2和cdrl3,其中,(i)所述cdrh1包含seq id no:1;(ii)所述cdrh2包含seq id no:4;(iii)所述cdrh3包含seq id no:7;(iv)所述cdrl1包含seq id no:11;(v)所述cdrl2包含seq id no:14;以及(vi)所述cdrl3包含seq id no:18。14.根据权利要求1

9中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含重链互补决定区cdrh1、cdrh2和cdrh3,以及轻链互补决定区cdrl1、cdrl2和cdrl3,其中,(i)所述cdrh1包含seq id no:2;(ii)所述cdrh2包含seq id no:6;(iii)所述cdrh3包含seq id no:9;(iv)所述cdrl1包含seq id no:10;(v)所述cdrl2包含seq id no:12;以及(vi)所述cdrl3包含seq id no:16。15.根据权利要求1

9中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含重链互补决定区cdrh1、cdrh2和cdrh3,以及轻链互补决定区cdrl1、cdrl2和cdrl3,其中,(i)所述cdrh1包含seq id no:3;(ii)所述cdrh2包含seq id no:5;(iii)所述cdrh3包含seq id no:8;
(iv)所述cdrl1包含seq id no:10;(v)所述cdrl2包含seq id no:12;以及(vi)所述cdrl3包含seq id no:16。16.根据权利要求1

9中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含重链互补决定区cdrh1、cdrh2和cdrh3,以及轻链互补决定区cdrl1、cdrl2和cdrl3,其中,(i)所述cdrh1包含seq id no:3;(ii)所述cdrh2包含seq id no:4;(iii)所述cdrh3包含seq id no:9;(iv)所述cdrl1包含seq id no:10;(v)所述cdrl2包含seq id no:12;以及(vi)所述cdrl3包含seq id no:18。17.根据权利要求1

9中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含重链互补决定区cdrh1、cdrh2和cdrh3,以及轻链互补决定区cdrl1、cdrl2和cdrl3,其中,(i)所述cdrh1包含seq id no:2;(ii)所述cdrh2包含seq id no:6;(iii)所述cdrh3包含seq id no:9;(iv)所述cdrl1包含seq id no:11;(v)所述cdrl2包含seq id no:13;以及(vi)所述cdrl3包含seq id no:17。18.根据权利要求1

9中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含重链互补决定区cdrh1、cdrh2和cdrh3,以及轻链互补决定区cdrl1、cdrl2和cdrl3,其中,(i)所述cdrh1包含seq id no:1;(ii)所述cdrh2包含seq id no:4;(iii)所述cdrh3包含seq id no:7;(iv)所述cdrl1包含seq id no:10;(v)所述cdrl2包含seq id no:15;以及(vi)所述cdrl3包含seq id no:16。19.根据权利要求1

9中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含重链互补决定区cdrh1、cdrh2和cdrh3,以及轻链互补决定区cdrl1、cdrl2和cdrl3,其中,(i)所述cdrh1包含seq id no:2;(ii)所述cdrh2包含seq id no:6;(iii)所述cdrh3包含seq id no:9;(iv)所述cdrl1包含seq id no:11;(v)所述cdrl2包含seq id no:14;以及(vi)所述cdrl3包含seq id no:17。20.根据权利要求1

9中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含重链互补决定区cdrh1、cdrh2和cdrh3,以及轻链互补决定区cdrl1、cdrl2和cdrl3,其中,(i)所述cdrh1包含seq id no:2;(ii)所述cdrh2包含seq id no:6;
(iii)所述cdrh3包含seq id no:9;(iv)所述cdrl1包含seq id no:11;(v)所述cdrl2包含seq id no:14;以及(vi)所述cdrl3包含seq id no:18。21.根据权利要求1

9中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含重链互补决定区cdrh1、cdrh2和cdrh3,以及轻链互补决定区cdrl1、cdrl2和cdrl3,其中,(i)所述cdrh1包含seq id no:1;(ii)所述cdrh2包含seq id no:4;(iii)所述cdrh3包含seq id no:8;(iv)所述cdrl1包含seq id no:10;(v)所述cdrl2包含seq id no:15;以及(vi)所述cdrl3包含seq id no:17。22.根据权利要求1

9中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含重链互补决定区cdrh1、cdrh2和cdrh3,以及轻链互补决定区cdrl1、cdrl2和cdrl3,其中,(i)所述cdrh1包含seq id no:1;(ii)所述cdrh2包含seq id no:4;(iii)所述cdrh3包含seq id no:7;(iv)所述cdrl1包含seq id no:10;(v)所述cdrl2包含seq id no:12;以及(vi)所述cdrl3包含seq id no:16。23.根据权利要求1

22中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含针对bcma的单克隆抗体的抗原结合片段。24.根据权利要求1

23中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含与来自seq id no:19

28中的任一个的可变区至少80%、85%、90%、95%、98%或99%相同的氨基酸序列。25.根据权利要求1

24中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含来自seq id no:19

28中任一个的可变区。26.根据权利要求1

23中任一项所述的car,其中所述抗bcma结合域包含针对bcma的单链可变片段(scfv)。27.根据权利要求26所述的car,其中所述单链可变片段(scfv)包含与seq id no:48

72中的任一个具有至少80%、85%、90%、95%、98%或99%相同的氨基酸序列。28.根据权利要求26或27所述的car,其中所述单链可变片段(scfv)包含seq id no:48

72中任一个的氨基酸序列。29.根据权利要求1

28中任一项所述的car,还包含信号肽。30.根据权利要求29所述的car,其中所述信号肽是cd8信号肽。31.根据权利要求29或30所述的car,其中所述cd8信号肽包含与seq id no:110至少80%、85%、90%、95%、98%或99%相同的氨基酸序列。32.根据权利要求29

31中任一项所述的car,其中所述信号肽包含seq id no:110的氨基酸序列。33.根据权利要求1

32中任一项所述的car,其中所述跨膜域是选自由cd3

ζ、cd4、cd8
和cd28组成的组的跨膜域。34.根据权利要求1

33中任一项所述的car,其中所述跨膜域是cd8跨膜域。35.根据权利要求33或34所述的car,其中所述跨膜域包含与seq id no:118至少80%、85%、90%、95%、98%或99%相同的氨基酸序列。36.根据权利要求33

35中任一项所述的car,其中所述跨膜域包含seq id no:118的氨基酸序列。37.根据权利要求1

36中任一项所述的car,还包含铰链区。38.根据权利要求37所述的car,其中所述铰链区位于所述抗bcma结合域和所述跨膜(tm)域之间。39.根据权利要求37或38所述的car,其中铰链tm区包含与seq id no:111至少80%、85%、90%、95%、98%或99%相同的氨基酸序列。40.根据权利要求37

39中任一项所述的car,其中铰链tm区包含seq id no:111的氨基酸序列。41.根据权利要求1

40中任一项所述的car,其中所述胞浆域包含t细胞信号传导域。42.根据权利要求1

41中任一项所述的car,其中所述胞浆域包含选自由cd8

α蛋白、cd28蛋白、cd3ζ蛋白、fcrγ蛋白、cd27蛋白质、ox40蛋白质、41bb蛋白质以及它们的任何组合组成的组的t细胞信号传导域。43.根据权利要求1

42中任一项所述的car,其中所述胞浆域包含选自由cd28

cd3ζ蛋白、41bb

cd3ζ蛋白、ox40

cd3ζ蛋白和41bb

ox40

cd3ζ蛋白组成的组的t细胞信号传导域。44.根据权利要求41

43中任一项所述的car,其中所述t细胞信号传导域是人的。45.根据权利要求41

44中任一项所述的car,其中所述胞浆域包含与seq id no:100

107中任一个至少80%、85%、90%、95%、98%或99%相同的氨基酸序列。46.根据权利要求41

45中任一项所述的car,其中所述胞浆域包含seq id no:100

107中任一个的氨基酸序列。47.一种多核苷酸,所述多核苷酸编码权利要求1

46中任一项所述的car。48.根据权利要求47所述的多核苷酸,还包含编码5'非翻译区(5'utr)的核酸。49.根据权利要求48所述的多核苷酸,其中所述编码所述5'utr的多核苷酸是编码来自igg、cd8、myo、cd3、afp、肌动蛋白、ifng或actbl2的5'utr的至少一部分的多核苷酸,其中所述部分是来自igg、cd8、myo、cd3、afp、肌动蛋白、ifng或actbl2的5'utr的至少60%、70%、80%、85%、90%、95%、98%或99%部分。50.根据权利要求48或49所述的多核苷酸,其中所述编码所述5'utr的多核苷酸包含与seq id no:73

82中任一个至少80%、85%、90%、95%、98%或99%相同的多核苷酸序列。51.根据权利要求48

50中任一项所述的多核苷酸,其中所述编码所述5'utr的多核苷酸包含seq id no:73

82中任一个的多核苷酸序列。52.根据权利要求47

51中任一项所述的多核苷酸,还包含编码3'非翻译区(3'utr)的多核苷酸。53.根据权利要求52所述的多核苷酸,其中所述编码所述3'utr的多核苷酸是编码来自人β珠蛋白、igg、肌动蛋白、afp、cd3、ifng、myo、foxp3、gapdh、gata3、h2afv、rorc、sod2或小鼠α珠蛋白的3'utr的至少一部分的多核苷酸,其中所述部分是来自人β珠蛋白、igg、肌动蛋
白、afp、cd3、ifng、myo、foxp3、gapdh、gata3、h2afv、rorc、sod2或小鼠α珠蛋白的3'utr的至少60%、70%、80%、85%、90%、95%、98%或99%部分。54.根据权利要求52或53所述的多核苷酸,其中所述编码所述3'utr的多核苷酸包含与seq id no:83

99中的任一个至少80%、85%、90%、95%、98%或99%相同的多核苷酸序列。55.根据权利要求52

54中任一项所述的多核苷酸,其中所述编码所述3'utr的多核苷酸包含seq id no:83

99中任一个的多核苷酸序列。56.根据权利要求47

55中任一项所述的多核苷酸,包含与seq id no:29

47中任一个至少80%、85%、90%、95%、98%或99%相同的多核苷酸序列。57.根据权利要求47

56中任一项所述的多核苷酸,其中所述多核苷酸是dna。58.一种载体,所述载体包含权利要求47

57中任一项的多核苷酸。59.根据权利要求58所述的载体,其中所述载体包含驱动所述多核苷酸的表达的异源启动子。60.根据权利要求58或59所述的载体,其中所述载体是粘粒、质粒、逆转录转座子、病毒、慢病毒、逆转录病毒、腺病毒或腺相关病毒载体。61.一种mrna构建体,所述mrna构建体由权利要求47

57中任一项所述的多核苷酸或权利要求58

60中任一项所述的载体编码。62.根据权利要求61所述的mrna构建体,其中所述mrna构建体包含7

甲基鸟苷帽。63.根据权利要求61或62所述的mrna构建体,其中所述mrna构建体通过体外转录产生。64.根据权利要求61

63中任一项所述的mrna构建体,其中所述mrna构建体在细胞中产生。65.根据权利要求61

64中任一项所述的mrna构建体,还包含多腺嘌呤尾。66.根据权利要求65所述的mrna构建体,其中所述多腺嘌呤尾包含至少50、100、150或200个腺嘌呤残基。67.一种细胞,包含权利要求1

46中任一项所述的car、权利要求47

57中任一项所述的多核苷酸、权利要求58

60中任一项所述的载体、和/或权利要求61

66中任一项所述的mrna构建体。68.一种细胞,包含权利要求61

66中任一项所述的mrna构建体。69.根据权利要求67或68所述的细胞,其中所述细胞是免疫效应子细胞。70.根据权利要求67

69中任一项所述的细胞,其中所述细胞是干细胞、nk细胞或t细胞。71.根据权利要求67

70中任一项所述的细胞,其中所述细胞是t细胞。72.根据权利要求67

71中任一项所述的细胞,其中所述细胞是cd8 细胞。73.根据权利要求67

72中任一项所述的细胞,其中所述细胞是通过将权利要求61

66中任一项所述的mrna构建体转染到所述细胞中而产生的。74.根据权利要求73所述的细胞,其中所述转染包括电穿孔。75.一种组合物,所述组合物包含多个权利要求67

74中任一项所述的细胞。76.根据权利要求74所述的组合物,其中至少80%、85%、90%、95%、98%或99%的所述细胞是cd8 细胞。
77.一种组合物,所述组合物包含多个权利要求58

60中任一项所述的载体。78.一种组合物,所述组合物包含多个权利要求61

66中任一项所述的mrna构建体。79.根据权利要求75

78中任一项所述的组合物,其中所述组合物是包含药学上可接受的赋形剂的药物组合物。80.一种制备细胞的方法,包括用权利要求58

60中任一项所述的载体或权利要求61

66中任一项所述的mrna构建体转导免疫效应子细胞。81.根据权利要求80所述的方法,其中用多个权利要求58

60中任一项所述的载体或权利要求61

66中任一项所述的mrna构建体转导多个细胞。82.根据权利要求80或81所述的方法,其中所述转导包括转染。83.根据权利要求82所述的方法,其中所述转染包括电穿孔。84.根据权利要求80

83中任一项所述的方法,其中所述转导包括感染。85.根据权利要求80

84中任一项所述的方法,其中所述细胞是免疫效应子细胞。86.根据权利要求80

85中任一项所述的方法,其中所述细胞是t细胞。87.根据权利要求80

86中任一项所述的方法,其中所述细胞是cd8 t细胞。88.根据权利要求80

87中任一项所述的方法,其中所述细胞获自人。89.根据权利要求80

88中任一项所述的方法,其中所述细胞通过单采术获得。90.一种产生细胞群的方法,包括将体外转录的rna或合成rna引入细胞中,其中所述体外转录的rna包含权利要求61

66中任一项所述的mrna构建体。91.根据权利要求90所述的方法,其中所述引入包括转染。92.根据权利要求90所述的方法,其中所述引入包括感染。93.根据权利要求90所述的方法,其中所述转染包括电穿孔。94.根据权利要求90

93中任一项所述的方法,其中所述细胞是免疫效应子细胞。95.根据权利要求90

94中任一项所述的方法,其中所述细胞是t细胞。96.根据权利要求90

95中任一项所述的方法,其中所述细胞是cd8 t细胞。97.根据权利要求90

96中任一项所述的方法,其中所述细胞获自人。98.根据权利要求90

97中任一项所述的方法,其中所述细胞通过单采术获得。99.一种在受试者中提供抗肿瘤免疫性的方法,包括向受试者施用有效量的权利要求67

74中任一项所述的细胞或权利要求75

79中任一项所述的组合物。100.根据权利要求86所述的方法,其中所述细胞是通过权利要求80

98中任一项所述的方法产生的。101.根据权利要求99或100所述的方法,其中所述细胞获自与施用所述细胞相同的受试者。102.一种治疗患有癌症、怀疑患有癌症或有发展成癌症的风险的受试者的方法,所述方法包括:向所述受试者施用权利要求67

74中任一项所述的细胞、权利要求75

79中任一项所述的组合物、或通过权利要求80

98中任一项所述的方法产生的细胞。103.根据权利要求102所述的方法,其中所述癌症与bcma的表达相关。104.根据权利要求102或103所述的方法,其中所述癌症是多发性骨髓瘤。105.根据权利要求102

104中任一项所述的方法,还包括施用检查点抑制剂。
106.根据权利要求102

105中任一项所述的方法,还包括施用选自由imid、蛋白酶体抑制剂或其组合组成的组的治疗。107.根据权利要求102

106中任一项所述的方法,还包括自体干细胞移植。108.根据权利要求102

106中任一项所述的方法,还包括同种异体干细胞移植。109.一种治疗患有自身免疫性疾病、怀疑患有自身免疫性疾病或有发展成自身免疫性疾病的风险的受试者的方法,所述方法包括:向所述受试者施用权利要求67

74中任一项所述的细胞、权利要求75

79中任一项所述的组合物、或通过权利要求80

98中任一项所述的方法产生的细胞。110.根据权利要求109所述的方法,其中所述自身免疫性疾病与bcma的表达相关。111.根据权利要求109或110所述的方法,其中所述自身免疫性疾病选自由重症肌无力、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、天疱疮、银屑病、炎性肠病、乳糜泻、恶性贫血、特发性血小板减少性紫癜、硬皮病、格雷夫斯病、干燥综合征、肺出血

肾炎综合征和1型糖尿病组成的组。112.一种治疗患有变应性疾病、怀疑患有变应性疾病或有发展成变应性疾病的风险的受试者的方法,所述方法包括:向所述受试者施用权利要求67

74中任一项所述的细胞、权利要求75

79中任一项所述的组合物、或通过权利要求80

98中任一项所述的方法产生的细胞。113.根据权利要求112所述的方法,其中所述变应性疾病与bcma的表达相关。114.根据权利要求112或113所述的方法,其中所述变应性疾病选自由过敏反应、哮喘、食物变应、昆虫叮咬变应、药物变应、变应性鼻炎、荨麻疹、血管性水肿、湿疹、特应性皮炎、接触性皮炎和嗜酸性食管炎组成的组。115.根据权利要求99

115中任一项所述的方法,还包括施用选自由以下组成的组的剂:(i)增加所述细胞的功效的剂;(ii)改善与所述细胞的施用相关的一种或多种副作用的剂;(iii)治疗所述癌症的剂;和(iv)两种或三种所述剂的组合。116.权利要求67

74中任一项所述的细胞用于治疗癌症的用途。117.权利要求75

79中任一项所述的组合物用于治疗癌症的用途。118.通过权利要求80

98中任一项所述的方法产生的细胞用于治疗癌症的用途。119.根据权利要求116

118中任一项所述的用途,其中所述癌症与bcma的表达相关。120.根据权利要求116或119中任一项所述的用途,其中所述癌症是多发性骨髓瘤。121.根据权利要求116

120中任一项所述的用途,还包括使用检查点抑制剂。122.根据权利要求116

121中任一项所述的用途,还包括使用imid、蛋白酶体抑制剂或其组合。123.根据权利要求116

122中任一项所述的用途,还包括使用人工分离的自体干细胞。124.根据权利要求116

122中任一项所述的用途,还包括使用人工分离的异源干细胞。125.权利要求67

74中任一项所述的细胞用于治疗自身免疫性疾病的用途。126.权利要求75

79中任一项所述的组合物用于治疗自身免疫性疾病的用途。
127.通过权利要求80

98中任一项所述的方法产生的细胞用于治疗自身免疫性疾病的用途。128.根据权利要求125

127中任一项所述的用途,其中所述自身免疫病与bcma的表达相关。129.根据权利要求125

138中任一项所述的用途,其中所述自身免疫性疾病选自由重症肌无力、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、天疱疮、银屑病、炎性肠病、乳糜泻、恶性贫血、特发性血小板减少性紫癜、硬皮病、格雷夫斯病、干燥综合征、肺出血

肾炎综合征和1型糖尿病组成的组。130.权利要求67

74中任一项所述的细胞用于治疗变应性疾病的用途。131.权利要求75

79中任一项所述的组合物用于治疗变应性疾病的用途。132.通过权利要求80

98中任一项的方法产生的细胞用于治疗变应性疾病的用途。133.根据权利要求130

132中任一项所述的用途,其中所述变应性疾病与bcma的表达相关。

技术总结
本发明提供了具有改进特性的嵌合抗原受体(CAR),例如对BCMA具有特异性的那些嵌合抗原受体,所述改进特性包括增加的CAR T细胞与BCMA的结合和提高的CAR T细胞对表达BCMA的癌细胞的杀伤。还考虑了CAR在免疫细胞(例如T细胞)、组合物(例如CAR和编码CAR的核酸构建体)中的用途和方法。中的用途和方法。中的用途和方法。


技术研发人员:张毅 C
受保护的技术使用者:笛卡尔疗法股份有限公司
技术研发日:2020.03.13
技术公布日:2021/11/9
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