含有黄芩提取物的具有防腐、抑菌制剂的制备方法及其应用与流程

1.本发明涉及重要中药材提取物的应用，尤其是涉及一种含有黄芩提取物的具有防腐、抑菌的制剂。


背景技术：

2.黄芩(scutellaria baicalensis georgi)是唇形科植物，其药用部位为干燥的根。采收季节在春秋二季，除去须根及泥沙，晒后除去粗皮，晒干。地上部位为开紫色唇状花的多年生草本植物。《本经》上记载“主诸热黄疸，肠沘，泄利，逐水，下血闭，(治)恶疮，疽蚀，火疡”。《滇南本草》：“上行泻肺火，下行泻膀胱火，(治)男子五淋，女子暴崩，调经清热，胎有火热不安，清胎热，除六经实火实热。”《纲目》：“治风热湿热头疼，奔豚热痛，火咳，肺痿喉腥，诸失血。”《品汇精要》：“行手太阴、阳明经。”《纲目》：“入手少阴、阳明，手足太阴、少阳六经。”《雷公炮制药性解》：“入肺、大肠、膀胱、胆四经。”历史上诸医药家对黄芩的药性都做了总结，到了近代随着提取技术、检测技术、药代动力学的发展，对黄芩的主要药效成分进行了研究。得出了质量要求，2015年《中国药典》上规定了hplc法检测的药效成分为黄芩苷，并分别要求：饮片中含黄芩苷≧8％，黄芩提取物中黄芩苷≧85％。陈勇川，谢林利，熊丽蓉等《黄芩苷/黄芩素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抗药性的逆转作用研究》显示结果:黄芩苷/黄芩素联合苯唑西林对临床分离的mrsa有显著的协同抗茵作用。
3.白刺为白刺属(nitraria l.)，蒺藜科(zygophyllaceae)，为多分枝耐盐碱，旱生型低矮灌木。白刺常生长于荒漠区的盐碱化地区，具有耐干旱，抗高温和保水力强等生理特性。白刺是我国沙区优良的固沙灌木植物，在风沙防护上是重要的研究对象。其果实如大豆粒一般大小，呈卵圆形，成熟后呈黑红色或橙黄色，可直接食用，具有“沙漠樱桃”之称，被称为“第三类水果”。冯云子，冯淑环，段丽君等在《白刺主要功能性成分及其功效研究进展》中介绍，迄今为止(2010年)从白刺中已经分离出的黄酮类化合物有16种。主要是：异鼠李素、槲皮素、山奈素、山奈黄素、香叶木素苷元和7,3
′‑
二羟基
‑4′
甲氧基黄酮、7,4
′‑
二羟基黄酮、7,3
′
，4
‑
三羟基黄酮。
4.防腐剂作为一种可以抑制微生物生长的制剂，在药物、食品、化妆品中广泛应用。致病性微生物是热源，在人体中会引起免疫反应，同时微生物生长会产生毒素，免疫细胞产生炎症因子对抗这些毒素，这些毒素对于微生物的生长是有利的，但对于人体的体胞是一种外来的有害的物质。我们通过控制这种毒素，就可以阻止微生物的生长。正常微生物的代谢都是有一定的周期，如果周期内得不到营养物质就会自动死亡。
5.醇系列的抑菌剂，例如：乙醇作为常规的消毒剂以75％体积比用于医疗卫生方面消毒；参照上海市吴淞医院的吴德松在《苯氧乙醇溶液配制经验介绍》表述，苯氧乙醇在二十世纪70年代就被发现有较好的抗绿脓杆菌作用，1～2％的水溶液被广泛用于医疗机构的消毒剂。参照河北医学院附属第二医院眼科的肖荣珍，胡永亭，胡根山等在《用1％苯氧乙醇预防绿脓杆菌感染》介绍，已经被试用在兽医用滴眼制剂。苯乙醇在二十世纪90年代苯乙醇也被证实对绿脓杆菌等有较好的抑制效果，β
‑
苯乙醇是一种令人愉悦的具有玫瑰花香味的
挥发性物质，天然的β
‑
苯乙醇主要存在于许多鲜花植物的花果及其提取的精油中。部分微生物(如酿酒酵母、黑曲酶、白地霉等)可通过代谢生成β
‑
苯乙醇，从而赋予发酵产品(如面包、干酪、酒和酱油等)香味感。
6.单辛酸甘油酯，是常用的一种防腐抑菌剂。可以用于化妆品、食品中。这种脂肪酸及其酯类防腐剂与微生物膜的关系假说，其中指出，脂肪酸及其酯首先接近作为对象的细胞膜表面然后亲油部分的脂肪酸及其酯在细胞膜中多数呈刺透进入状态。这种状态下在物理方面细胞膜的脂质机能低下，结果其细胞机能终止。
7.现有防腐剂大多是化学合成，有的具有较多的刺激性，如尼泊金酯、尼泊丙酯。这种防腐剂在化妆品中属于限量使用，且不能或很少用于药物制剂中。大多是因为这些酚羟基类防腐剂在空气中不稳定，会被继续氧化成苯醌，苯醌会继续被氧化成甲醛等对人体有危害的化学物质。本发明通过对黄芩植物提取物(主要成分为黄酮)的应用，结合醇系列防腐剂的优点。制备出一种具有较好抑菌效果的防腐消炎剂。
8.引证技术：j o y e e a.k o r v i e k&.v i e t o r l.y u《绿脓杆菌的抗菌剂疗法》，介绍对于绿脓杆菌生长的抑制，需要有协同作用的药物共同作用，才能降低这种微生物的耐药性。专利cn201710644774.1中介绍了一种尼泊金酯与苯氧乙醇复配组合物的抗菌剂，这种抗菌剂主要应用于化妆品中，对化妆品的使用保质期有较好的帮助，未能体现协同增效抵抗微生物生长的功能。目前苯氧乙醇的合成已经有清洁环保的方式，如中国科学院成都有机化学研究所中研究者杜治平在《苯氧乙醇的清洁合成》中介绍了一种副产物只有二氧化碳，其它副产物很少的合成方式。


技术实现要素：

9.本发明所要解决的问题是，针对上述现有技术中的缺点，提出创新方案，尤其是一种能够同时有效抑制金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的生长，并且减少金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的耐药性的制剂，该制剂还要能够减少化学合成的化合物的使用量。
10.为解决上述问题，本发明采用的方案如下：一种含有黄芩提取物的具有防腐、抑菌的制剂，其特征在于，由黄芩提取物、白刺果提取物、苯乙醇或苯氧乙醇、单辛酸甘油酯、脂肪醇系列、去离子水组成，所述脂肪醇系列包括：乙基己基甘油、1,3—丁二醇、α
‑
红没药醇。
11.进一步，根据上述设计方案所述含有黄芩提取物的具有防腐、抑菌的制剂，其特征在于，按照质量百分比包括黄芩提取物0.1
‑
2％、白刺果提取物0.1
‑
0.8％、苯乙醇或苯氧乙醇20
‑
60％、单辛酸甘油酯20
‑
30％、脂肪醇系列26
‑
58％、去离子水0.01
‑
0.2％，其中脂肪醇系列包括：乙基己基甘油、1,3—丁二醇、α
‑
红没药醇。
12.一种含有黄芩提取物的具有防腐、抑菌的制剂的制备方法，其特征在于：将黄芩提取物、去离子水、白刺果提取物、加入到1,3—丁二醇中加热至35℃，待完全溶解后、依次加入苯乙醇或苯氧乙醇、单辛酸甘油酯、脂肪醇系列，搅拌均匀后，冷却到室温即得到该种具有防腐、抗炎功能的制剂。
13.将本技术的含有黄芩提取物的具有防腐、抑菌的制剂应用于医学制剂中。
14.将本技术的含有黄芩提取物的具有防腐、抑菌的制剂应用于化妆品中。
15.本技术中黄芩提取物的制备方法如下：
16.a1:含水量为不得过8％黄芩药材的粉碎：采用球磨振动粉碎，粉碎2～4h，得到黄
芩超微粉；
17.a2:选择a1中150μm以下的黄芩药粉，75μm以下的药粉占85％～100％，为待提取的原料，其中最大粒径75μm～150μm的黄芩药粉，不超过15％；
18.a3:采用超声提取a2中黄芩药材中的总黄酮。超声提取功率10kh～80khz，溶剂选择40～75％的乙醇水溶液、提取温度选择50℃以下、时间5～10min、料液比1:10～1:15；
19.a4:对于a3超声提取后的黄芩提取物进行过滤、减压浓缩、喷雾干燥或冷冻干燥，得到固体黄芩提取物。
20.其中白刺提取物的制备方法参照本公司已经申请的发明专利：cn201921481494.4、cn202010853158.9。
21.本发明的技术效果如下：
22.(1)采用黄芩提取物、白刺提取物协同增效抑制金黄色葡萄球菌的生长，减少金黄色葡萄球菌的耐药性。
23.(2)苯氧乙醇或β
‑
苯乙醇、单辛酸甘油酯、黄芩提取物协同增效抑制绿脓杆菌的生长，减少绿脓杆菌的耐药性。苯氧乙醇或β
‑
苯乙醇在该制剂中除具有抑菌作用以外还具有助溶黄芩提取物与白刺提取物作用。
24.(3)植物防腐抑菌剂的加入可以减少化学合成的防腐剂，如苯氧乙醇、乙基己基甘油的使用量。
附图说明
25.图1空白对照a、1.0％、1.2％的组合物
⑩
的抑菌效果。
26.图2空白对照a、1.5％的空白对照b2的抑菌效果。
具体实施方式
27.一种含有黄芩提取物的具有防腐、消炎制剂的制备方法为：将黄芩提取物、去离子水、加入到1,3—丁二醇中，加热35℃，待完全溶解后、依次加入苯乙醇或苯氧乙醇、单辛酸甘油酯、脂肪醇系列(乙基己基甘油、1,3－丁二醇、α
‑
红没药醇)、搅拌均匀后，冷却到室温即可以得到该种具有防腐、抗炎功能的制剂。
28.具体组合物的配比方式，见表一、表二，表一、表二中的比例均为质量百分数。
29.表一：不含白刺提取物的制剂组合物。
[0030][0031]
表二：含有白刺提取物的制剂组合物。
[0032]
[0033][0034]
通过测定最低抑菌浓度mic来确定该种含有黄芩提取物的具有防腐的功效，确定该种制剂的最佳组合方式，不同组分含量的防腐、抑菌制剂对绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌mic的测试，参见表三。
[0035]
表三：防腐、抑菌制剂对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌的mic测试。
[0036]
[0037][0038]
通过空白组a、b1、b2实验可知，黄芩提取物和白刺果提取物是本技术的制剂的重要组成部分，缺少了无法实现对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的双重抑制。
[0039]
通过对照组
①‑⑩
可以看出，黄芩提取物是主要抑菌成分，白刺果提取物是辅助黄芩提取物产生协同作用，从而实现少量制剂即可对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的抑制，并且减少化学合成防腐剂的使用。尤其是组合物
⑤
与组合物
⑩
中可以看出黄芩提取物、白刺提取物能够协同增效抑制金黄色葡萄球菌的生长，并且减少金黄色葡萄球菌的耐药性，这是单独使用组合物
⑤
中黄芩提取物所不具备的。
[0040]
上述实验均为两次平行实验，可以发现制剂组合物
⑩
的效果最佳。
[0041]
如图1所示，第一排为空白对照(a)，第二排为1.0％的组合物
⑩
，第三排为1.2％的组合物
⑩
，其中g、l分别代表金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌，空白对照组中两种菌组长势良好，1.0％、1.2％的培养琼脂中无菌落生长，说明组合物
⑩
体积百分数在1.0％、1.2％时对这两种微生物的生长都有抑制作用。且最小mic为1.0％，建议在配方或处方中的添加量为1.0
‑
1.5％。
[0042]
如图2所示，第一排为空白对照(a)，第二排为1.5％的空白对照(b2)，其中g、l分别代表金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌。
[0043]
将组合物
⑩
应用到精华油中。
[0044][0045][0046]
具体制备方法：加热到40摄氏度，依次加入上述物质：蒺藜科白刺籽油、油橄榄油、碳酸二辛酯、醇类组合物、组合物
⑩
、白刺提取物。
[0047]
将组合物
⑩
应用到精华液中。
[0048]
编号名称百分含量(％)1甘油1021,3丁二醇53吐温
‑
8014去离子水82.55乙二胺四乙酸二钠盐0.016组合物
⑩
1.07白刺提取物0.058黄芩提取物0.1
[0049]
具体制备方法：先用少量的水依次将3、7、8溶解后，在分别依次加入1、2、4、5、6，混合均匀和即得所制精华液。
[0050]
将组合物
⑩
应用到保湿霜乳中。
[0051]
[0052][0053]
具体制备方法：将a相、b相分别加热到90℃，后混合均匀，在均质机中乳化，乳化后，冷却到45℃，依次加入c相和d相，混合均匀后冷却到室温，装入容器中。
[0054]
此外，对制剂其他组分的研究发现，苯氧乙醇或β
‑
苯乙醇、单辛酸甘油酯、黄芩提取物协同增效抑制绿脓杆菌的生长，减少绿脓杆菌的耐药性。苯氧乙醇或β
‑
苯乙醇在该制剂中除具有抑菌作用以外还具有助溶黄芩提取物与白刺提取物作用。