一种基于EST-SSR分子标记的映山红亚属杜鹃花杂交品种鉴定方法与流程

技术特征：
1.一种基于est
‑
ssr分子标记的映山红亚属杜鹃花杂交品种鉴定方法，其特征在于：采用seq id no.1～10的引物对杜鹃花杂交品种的样品进行扩增，然后利用荧光毛细管电泳技术对所有供试样品的扩增条带进行比对，通过比较鉴定杜鹃花杂交品种。2.根据权利要求1所述的一种基于est
‑
ssr分子标记的映山红亚属杜鹃花杂交品种鉴定方法，其特征在于：还包含采用seq id no.11～30的引物对杜鹃花杂交品种的样品进行扩增，然后利用荧光毛细管电泳方法对所有供试样品的扩增条带进行比对，通过比较鉴定杜鹃花杂交品种。3.根据权利要求1所述的一种基于est
‑
ssr分子标记的映山红亚属杜鹃花杂交品种鉴定方法，其特征在于：在鉴定的过程中，pcr扩增体系为：
①
梯度pcr反应体系为20μl:超纯水7.4μl，上下游引物各0.8μl，上下游引物的浓度为2.5μmol/l，dna样品1μl，pcrmix10μl；
②
梯度pcr反应程序：94℃预变性5min，94℃变性20s，退火30s，72℃延伸1min，72℃保持10min，4℃保存；2)琼脂糖凝胶电泳：用1
×
tae电泳缓冲液制备质量体积百分比浓度(g/ml)为2％的琼脂糖凝胶，将2μl的pcr扩增产物在凝胶板上进行点样，电压220v，电泳时间20min；3)荧光毛细管电泳将1μlpcr扩增产物、10.41μl高浓度去离子甲酰胺和0.05μl分子量内标liz500，混匀后加入96孔板，94℃变性5min，冰水冷却1min,
‑
20℃冰箱5min，使用测序仪进行毛细管电泳，对检测结果进行读取分析；如果后代的扩增带具有父系特有的条带，则它们是真正的杂种；反之，是自交或伪杂交种。4.一种用于鉴定映山红亚属杜鹃花杂交品种的试剂盒，其特征在于，含有seq id no.1～10的引物序列。5.根据权利要求1所述的一种用于鉴定映山红亚属杜鹃花杂交品种的试剂盒，其特征在于，还含有seq id no.11～30的引物序列。

技术总结
一种基于EST


技术研发人员：苏鸣 张春英 张杰 夏溪 龚睿
受保护的技术使用者：上海植物园
技术研发日：2021.09.06
技术公布日：2021/11/2