一种矮牵牛耐涝性综合鉴定方法与流程

技术特征：
1.一种矮牵牛耐涝性综合鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：淹水处理选择生长一致的矮牵牛的8周生根苗，每个株系各18盆，分别进行正常水分处理和涝渍胁迫处理；步骤2：生理生化指标测定与分析
①
测定叶片抗氧化酶活性，包括pod酶活性、sod酶活性和cat酶活性；
②
测定叶片无氧呼吸酶活性，包括adh酶活性、pdc酶活性和ldh酶活性；
③
测定叶片丙二醛含量；
④
测定叶片净光合速率；
⑤
测定可溶性蛋白含量；
⑥
测定胞间co2浓度；
⑦
测定气孔导度；
⑧
测定蒸腾速率；
⑨
测定根系活力；
⑩
测定叶绿素含量；用excel统计数据，计算平均值和标准偏差，并运用公式计算综合得分；用spss软件进行分析处理，采用单因素方差分析，用duncan多重比较检验在p＜0.05和p＜0.01水平上不同品种植株的差异，3次重复；运用spss软件对前述单项指标进行主成分分析且进行综合评定，确定矮牵牛耐涝等级；步骤3：评价体系的建立s1：生理生化数据耐涝主成分分析
①
总方差解释对前述14个单项指标的耐涝系数进行主成分分析，所述主成分分析包括光合指标、无氧呼吸指标和抗氧化指标，根据表1得到总方差解释，所述光合指标、无氧呼吸指标和抗氧化指标的贡献率分别为35.658％、22.809％和16.326％，累积贡献率为74.793％；根据表1，光合指标、无氧呼吸指标和抗氧化指标代表了前述14个单项指标的74.793％的信息，可分别用光合指标、无氧呼吸指标和抗氧化指标对矮牵牛品种耐涝性进行概括分析；表1总方差解释
②
主成分表达式前述指标对应的特征向量表达式分别为:z1＝
‑
0.843*zx1
‑
0.475*zx2
‑
0.654*zx3
‑
0.298*zx4 0.726*zx5
‑
0.077*zx6 0.043*xz7 0.551*zx8 0.739*zx9 0.874*zx10
‑
0.096*zx11 0.945*zx12 0.883*zx13
‑
0.301*zx14；z2＝0.301*zx1
‑
0.681*zx2 0.116*zx3 0.847*zx4 0.726*zx5 0.790*zx6 0.597*xz7 0.032*zx8
‑
0.478*zx9 0.204*zx10
‑
0.134*zx11 0.051*zx12
‑
0.332*zx13 0.016*zx14；z3＝0.208*zx1 0.363*zx2 0.052*zx3 0.321*zx4
‑
0.023*zx5
‑
0.012*zx6
‑
.353*xz7 0.633*zx8 0.057*zx9
‑
0.073*zx10
‑
0.849*zx11 0.102*zx12
‑
0.084*zx13 0.855*zx14；其中：z1为光合指标、z2为无氧呼吸指标、z3为抗氧化指标、zx1为pod酶活性、zx2为sod酶活性、zx3为cat酶活性、zx4为ldh酶活性、zx5为adh酶活性、zx6为pdc酶活性、zx7为叶片丙二醛含量、zx8为叶绿素含量、zx9为叶片净光合速率、zx10为气孔导度、zx11为胞间co2浓度、zx12为蒸腾速率、zx13为根系活力、zx14为可溶性蛋白含量；由以上表达式以及表2公开的成分得分系数矩阵可知，所述光合指标中叶绿素含量、净光合速率、气孔导度、蒸腾速率、根系活力的系数较大，所述无氧呼吸指标中ldh酶活性、adh酶活性、pdc酶活性、pod酶活性、mda含量的系数较大，所述抗氧化指标中pod酶活性、sod酶活性、cat酶活性、叶绿素含量和可溶性蛋白含量系数较大；表2成分得分系数矩阵
s2：生理生化涝害指数综合分析
①
综合指标权重所述光合指标、无氧呼吸指标和抗氧化指标的贡献率的权重分别为0.4767、0.3050和0.2183，根据综合评价公式＝0.4767*z1 0.3050*z2 0.2183*z3，得到矮牵牛pherf2转基因株系及其野生型的综合得分，根据得分判定矮牵牛的耐涝性；
②
生理生化指标等级评定表3生理生化指标定级范围及得分标准2.根据权利要求1所述的一种矮牵牛耐涝性综合鉴定方法，其特征在于，所述涝渍胁迫处理为对盆栽淹水处理，淹水至根部2
‑
3cm，分别于淹水的0d、1d、2d、3d取处理植株叶片重复3次，取下后放在液氮中，随后转移至
‑
80℃冰箱保存备用。

技术总结
本发明公开了一种矮牵牛耐涝性综合鉴定方法，以筛选矮牵牛耐涝性资源为目标，选择不同品种的矮牵牛进行涝渍胁迫，通过对14项生理生化指标进行主成分分析，得出3个独立指标，并通过综合分析划分为4类：耐涝、较耐涝、较不耐涝、不耐涝；本发明通过多指标测定，以综合的数据结果来评价，鉴定结果客观，可重复，针对矮牵牛耐涝性研究基础薄弱以及耐涝鉴定方法不完善等缺陷，对涝胁迫下对矮牵牛PhERF2转基因株系及其野生型生理生化特性的变化作出研究，为后续矮牵牛耐涝品种鉴定提供了实验依据，在园林绿化应用中可优先选用耐涝性强的品种，减少因涝渍灾害造成的植株死亡，增强矮牵牛的观赏品质和绿化环境。品质和绿化环境。品质和绿化环境。


技术研发人员：尹冬梅 王月悦 齐帅 韩竹青 董婷婷 赵安琪 尹高菲
受保护的技术使用者：上海应用技术大学
技术研发日：2021.08.20
技术公布日：2021/11/2