一种用于肝细胞癌诊断、预后评估或复发预警的分子标志物及应用的制作方法

本发明属于肿瘤分子生物学、肝癌精准诊疗、靶向生物医药，具体是一种用于肝细胞癌诊断、预后评估或复发预警的分子标志物及应用。

背景技术：

1、肝细胞癌（hcc）是全球高发高致死性消化系统恶性肿瘤，具有起病隐匿、进展迅速、术后复发率高、耐药性强的特点。目前临床肝癌诊疗以afp、异常凝血酶原为核心血清标志物，以手术切除/介入/靶向药物（索拉非尼、仑伐替尼）、免疫治疗为主，但整体疗效有限，5年生存率不足20%。

2、脂质代谢重编程是肝癌恶性进展的核心特征之一，肝癌细胞通过异常激活脂肪酸合成、胆固醇代谢等通路，满足自身快速增殖、侵袭转移及免疫逃逸的能量与物质需求。现有研究证实srebf1是脂质代谢核心转录因子，可驱动肝癌脂质异常合成、促进肿瘤增殖转移；foxq1作为致癌转录因子，在肝癌中异常高表达，参与调控肿瘤干性、侵袭及代谢重塑。但现有研究仅单独报道foxq1、srebf1在肝癌中的作用，未揭示上游关键调控基因，尚无heatr1调控foxq1/srebf1脂质代谢轴介导肝癌进展的完整分子机制体系，无法解释肝癌脂质代谢紊乱的上游启动机制。

3、同时，传统afp标志物存在灵敏度、特异性局限，早期肝癌漏诊率高达30%-40%，无法精准评估肿瘤脂质代谢活性与恶性进展风险；现有靶向药物多针对血管生成通路，未靶向肝癌核心的代谢重编程机制，易产生耐药、疗效受限；目前代谢相关肝癌研究多停留在基础实验阶段，未形成“机制-标志物-靶向干预-预后评估”一体化的临床转化技术体系，无法直接应用于临床精准诊疗。。

技术实现思路

1、本发明的目的，是克服上述技术不足，提供一种用于肝细胞癌诊断、预后评估或复发预警的分子标志物及应用，具体是基于heatr1-foxq1/srebf1脂质代谢调控轴的肝细胞癌进展机制、分子标志物筛选及靶向干预转化技术，可应用于肝细胞癌的早期诊断、预后评估、复发转移预警及新型靶向药物研发与临床治疗。

2、本发明采用的技术方案如下。

3、一种用于肝细胞癌诊断、预后评估或复发预警的分子标志物，所述分子标志物组合包括heatr1、foxq1和srebf1中的至少一种，或三者的组合。

4、一种肝细胞癌诊断或预后评估试剂盒，所述试剂盒包含检测heatr1、foxq1、srebf1基因或蛋白表达水平的试剂。

5、进一步的，所述试剂盒通过qrt-pcr、免疫组织化学、western blot或elisa方法检测所述分子标志物的表达水平。

6、heatr1作为靶点在制备治疗肝细胞癌的药物中的应用，所述药物通过抑制heatr1的表达或活性，下调foxq1和srebf1的表达，阻断肝癌脂质代谢重编程，抑制肝癌进展与转移。

7、 foxq1作为靶点在制备治疗肝细胞癌的药物中的应用，所述药物通过抑制foxq1的表达或活性，下调srebf1的转录激活，阻断肝癌脂质代谢重编程，抑制肝癌进展与转移。

8、srebf1作为靶点在制备治疗肝细胞癌的药物中的应用，所述药物通过抑制srebf1的表达或活性，阻断下游脂质合成通路，逆转肝癌脂质代谢重编程，抑制肝癌进展与转移。

9、一种治疗肝细胞癌的联合用药组合物，所述组合物包含抑制heatr1、foxq1、srebf1中至少两个靶点的抑制剂，或包含抑制heatr1/foxq1/srebf1轴的抑制剂与仑伐替尼、免疫检查点抑制剂的组合。

10、所述分子标志物组在筛选抗肝细胞癌药物中的应用，以heatr1、foxq1或srebf1的表达或活性为指标，筛选能够阻断该调控轴、抑制脂质代谢重编程的候选药物。

11、本发明有益效果：

12、本发明首次证实heatr1是肝细胞癌脂质代谢重编程及恶性进展的核心上游调控基因，通过正向调控foxq1表达，进一步激活下游srebf1介导的脂质合成代谢通路，重塑肝癌细胞脂质代谢表型，最终驱动肝癌细胞增殖、侵袭、迁移、干性维持及肿瘤原位生长与远处转移。

13、本发明提供heatr1-foxq1/srebf1分子轴作为肝细胞癌诊断、预后评估的分子标志物，构建三基因联合检测模型，相较于传统afp标志物，诊断灵敏度提升25%以上，特异性提升20%以上，可精准区分良性肝病、早期肝癌、进展期肝癌。

1.一种用于肝细胞癌诊断、预后评估或复发预警的分子标志物组合，其特征在于，所述分子标志物组合包括heatr1、foxq1和srebf1中的至少一种，或三者的组合。

2.一种肝细胞癌诊断或预后评估试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含检测heatr1、foxq1、srebf1基因或蛋白表达水平的试剂。

3. 根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒通过qrt-pcr、免疫组织化学、western blot或elisa方法检测所述分子标志物的表达水平。

4.根据权利要求1所述的一种用于肝细胞癌诊断、预后评估或复发预警的分子标志物组合，其特征在于，所述药物通过抑制heatr1的表达或活性，下调foxq1和srebf1的表达，阻断肝癌脂质代谢重编程，抑制肝癌进展与转移。

5.根据权利要求1所述的一种用于肝细胞癌诊断、预后评估或复发预警的分子标志物组合，其特征在于，所述药物通过抑制foxq1的表达或活性，下调srebf1的转录激活，阻断肝癌脂质代谢重编程，抑制肝癌进展与转移。

6.根据权利要求1所述的一种用于肝细胞癌诊断、预后评估或复发预警的分子标志物组合，其特征在于，所述药物通过抑制srebf1的表达或活性，阻断下游脂质合成通路，逆转肝癌脂质代谢重编程，抑制肝癌进展与转移。

7.一种治疗肝细胞癌的联合用药组合物，其特征在于，所述组合物包含抑制heatr1、foxq1、srebf1中至少两个靶点的抑制剂，或包含抑制heatr1/foxq1/srebf1轴的抑制剂与仑伐替尼、免疫检查点抑制剂的组合。

8.据权利要求1所述的一种用于肝细胞癌诊断、预后评估或复发预警的分子标志物组合，其特征在于，以heatr1、foxq1或srebf1的表达或活性为指标，筛选能够阻断该调控轴、抑制脂质代谢重编程的候选药物。