一种具有治疗支原体肺炎作用的川杏多糖及其制备方法和应用

本发明涉及多糖及其制备和用途，具体涉及一种川杏多糖及其制备方法和在防治支原体肺炎中的应用。

背景技术：

1、支原体肺炎（mycoplasma pneumoniae pneumonia, mpp）是由肺炎支原体（

mycoplasma pneumoniae）引起的一种常见社区获得性肺炎，好发于儿童和青少年，近年多地mpp呈流行回升且秋冬季高发。目前临床上主要采用大环内酯类、氟喹诺酮类和四环素类药物治疗支原体感染，然而我国肺炎支原体对大环内酯类的耐药率处于全球最高水平。据报道，肺炎支原体对红霉素与罗红霉素的耐药率分别高达71.2%和73.1%，阿奇霉素耐药率约为25.0%。耐大环内酯类抗生素的肺炎支原体比例的持续高位，使得传统抗生素治疗面临严峻挑战。

2、川杏清肺糖浆由枇杷叶、麦冬、地黄、甘草、苦杏仁、桔梗、薄荷、桑叶及川贝母九味组成的中药复方制剂，已在临床应用近三十年。然而，该复方制剂中真正发挥作用的有效物质基础尚不明确。

技术实现思路

1、发明目的：本发明的目的在于提供一种结构明确的川杏多糖及其制备方法。本发明的另一目的是提供所述川杏多糖在治疗支原体肺炎中的应用。

2、技术方案：本发明所述的川杏多糖为均一多糖，单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、木糖，摩尔比为12.5:11.15:17.89:6.57:1.5；所述川杏多糖结构如下所示：

3、。

4、所述的川杏多糖，所述川杏多糖的重均分子量为16500~16900 da。优选的，所述川杏多糖的重均分子量为16700 da。

5、所述的川杏多糖的制备方法，包括以下步骤：

6、（1）称取枇杷叶、苦杏仁、川贝母、麦冬、地黄、甘草、桔梗、薄荷、桑叶；

7、（2）苦杏仁加水浸泡，与薄荷混合加热蒸馏，收集蒸馏液；

8、（3）其余七味药材与步骤（2）的药渣合并，加水煎煮提取，煎液滤过，静置，取上清液浓缩；

9、（4）合并步骤（2）最终所得蒸馏液与步骤（3）最终所得浓缩液，通过反复冻融法去除蛋白质，加入过氧化氢脱色；

10、（5）脱色液经乙醇沉淀、离心收集沉淀，用截留分子量为3000~4000 da的透析袋透析，冷冻干燥，得到粗多糖；

11、（6）粗多糖经纤维素柱纯化，用水洗脱，收集主要中性组分，透析、冷冻干燥，即得川杏多糖。

12、优选的，透析采用3500da的透析袋。

13、所述的川杏多糖的制备方法，步骤（1）按重量份称取枇杷叶200~300份、苦杏仁30~50份、川贝母3~5份、麦冬30~50份、地黄30~50份、甘草30~50份、桔梗15~30份、薄荷5~15份、桑叶5~15份。

14、所述的川杏多糖的制备方法，步骤（2）苦杏仁加温水浸泡10~30 h。

15、所述的川杏多糖的制备方法，步骤（4）中所述脱色的条件为：多糖加入过氧化氢于40~60℃水浴脱色3~12 h。

16、所述的川杏多糖的制备方法，步骤（5）中所述乙醇沉淀的条件为：加入乙醇至乙醇终浓度60~90%，1~10℃静置过夜。

17、所述的川杏多糖的制备方法，步骤（6）粗多糖经deae-52纤维素柱纯化；所述deae-52纤维素柱纯化的条件为：上样浓度5~15 mg/ml，洗脱流速0.5~1.5 ml/min，采用苯酚-硫酸法跟踪检测。

18、所述川杏多糖在制备治疗支原体肺炎的药物中的应用。

19、所述的应用，所述药物包括口服制剂。

20、所述川杏多糖的糖苷键连接方式包括1，4-连接的β-半乳糖、1，3，6-连接的β-葡萄糖、1，2，4-连接的α-鼠李糖，并具有β-1，3，6-葡萄糖侧链和α-1，2，4-鼠李糖及α-1，5阿拉伯糖侧链中的一种或多种。

21、有益效果：本发明与现有技术相比，具有如下优势：本发明提供的川杏多糖结构明确、纯度高（纯度≥95%），其重均分子量为16700 da，单糖鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、木糖组成，摩尔比为12.5:11.15:17.89:6.57:1.5，糖苷键连接方式多样，是一种结构新颖的均一多糖。实验证明，在肺炎支原体感染小鼠模型中，川杏多糖能有效缓解肺炎支原体感染导致的体重下降（p<0.05），高剂量组效果更为显著（p<0.01）；能显著减轻肺组织炎症细胞浸润和肺泡结构破坏，降低肺组织病理评分；能有效降低肺组织支原体载量，高剂量组抑菌效果最为显著。因此，川杏多糖可作为开发新型抗支原体肺炎药物的有效候选成分，尤其为耐大环内酯类抗生素的支原体肺炎患者提供了新的治疗选择。

1.一种川杏多糖，其特征在于，所述川杏多糖为均一多糖，单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、木糖，摩尔比为12.5:11.15:17.89:6.57:1.5；所述川杏多糖结构如下所示：

2.根据权利要求1所述的川杏多糖，其特征在于，所述川杏多糖的重均分子量为16500~16900 da。

3.一种权利要求1所述的川杏多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的川杏多糖的制备方法，其特征在于，步骤（1）按重量份称取枇杷叶200~300份、苦杏仁30~50份、川贝母3~5份、麦冬30~50份、地黄30~50份、甘草30~50份、桔梗15~30份、薄荷5~15份、桑叶5~15份。

5.根据权利要求3所述的川杏多糖的制备方法，其特征在于，步骤（2）苦杏仁加温水浸泡10~30 h。

6.根据权利要求3所述的川杏多糖的制备方法，其特征在于，步骤（4）中所述脱色的条件为：多糖加入过氧化氢于40~60℃水浴脱色3~12 h。

7.根据权利要求3所述的川杏多糖的制备方法，其特征在于，步骤（5）中所述乙醇沉淀的条件为：加入乙醇至乙醇终浓度60~90%，1~10℃静置过夜。

8.根据权利要求3所述的川杏多糖的制备方法，其特征在于，步骤（6）粗多糖经deae-52纤维素柱纯化；所述deae-52纤维素柱纯化的条件为：上样浓度5~15 mg/ml，洗脱流速0.5~1.5 ml/min，采用苯酚-硫酸法跟踪检测。

9.权利要求1所述的川杏多糖在制备治疗支原体肺炎的药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述药物包括口服制剂。