母乳化结构脂在结肠炎及其相关认知功能障碍改善中的应用

本发明涉及母乳化结构脂，尤其涉及母乳化结构脂在结肠炎及其相关认知功能障碍改善中的应用。

背景技术：

1、随着微生物群-肠-脑轴研究的深入发展，结肠炎已不再被视为单纯的消化道局部疾病，其伴随的空间工作记忆下降、识别记忆损伤等认知功能障碍逐渐受到关注；母乳化结构脂1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯（opo）是一类sn-2位为棕榈酸、sn-1和sn-3位主要为油酸的结构脂，能够模拟母乳脂肪的甘油三酯结构，现有研究已表明其在促进脂质与钙吸收、调节肠道菌群和改善肠上皮屏障方面具有营养学优势，但尚未系统揭示其能否通过肠-脑轴同时改善结肠炎相关的肠道炎症、肠黏膜屏障、菌群与代谢紊乱以及认知功能障碍。

2、现有技术中，中国专利申请cn118340760a公开了“一种预防或改善肠上皮屏障损伤的opo结构脂及其应用”，opo结构脂具有改善结肠上皮屏障损伤的作用，能够通过促进肠道干祖细胞的增殖和杯状细胞粘蛋白的分泌、增加紧密连接蛋白zo-1、occludin和claudin-1蛋白表达、抑制结肠上皮细胞凋亡，从而改善结肠上皮屏障损伤，而且在低剂量400mg/kg浓度时即能发挥保护效果。

3、中国专利申请cn121176525a公开了“一种促进婴幼儿生长发育、强化免疫的母乳型结构脂质组合物及应用”，本申请选择合适的工艺制备结构脂质组合物，制备出的结构脂质组合物与母乳结构脂质接近，具有如下功效：促进骨骼发育功效；促进生长发育功效；调节肠道菌群功效；增强免疫力功效；促进大脑发育功效；改善记忆力功效；促进智力发育。

4、中国专利申请cn107518382a公开了“一种提升肠道的中短链酸丰度的方法”，包括向所述受试者使用含脂肪源的组合物，其中所述脂肪源是甘油三酯，其中所述甘油三酯的sn-2脂肪酸组成中，棕榈酸含量20%-80%，其中sn-2棕榈酸占总棕榈酸的含量在33%以上。

5、现有技术虽然能够提升肠道短链脂肪酸丰度、促进blautia和allobaculum菌属、保护肠黏膜屏障，并改善肠上皮屏障损伤、增加紧密连接蛋白表达、抑制结肠上皮细胞凋亡；但是现有技术仅聚焦于营养吸收、肠屏障与结肠局部炎症，尚未系统研究其对结肠炎伴随认知功能障碍的改善，未揭示海马小胶质细胞、血脑屏障及突触蛋白等中枢靶点，也未阐明肠道菌群、脂质代谢物与短链脂肪酸同认知改善之间的关联，干预方案多局限于肠道局部。

技术实现思路

1、本发明旨在提供母乳化结构脂在结肠炎及其相关认知功能障碍改善中的应用，以解决背景技术中所提出的问题。

2、本发明提供母乳化结构脂在结肠炎及其相关认知功能障碍改善中的应用，包括以下步骤：

3、s1、将母乳化结构脂以饲料添加方式给予结肠炎模型动物进行干预，所述母乳化结构脂为1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯，其甘油三酯结构中sn-2位为棕榈酸，sn-1位和sn-3位主要为油酸；

4、s2、采集结肠组织样本，检测结肠炎症相关指标，所述结肠炎症相关指标包括促炎因子、、il-6和抗炎因子il-10的表达水平，以及结肠长度、脾脏指数和结肠组织病理学评分；

5、s3、检测结肠黏膜屏障功能相关指标，所述结肠黏膜屏障功能相关指标包括结肠组织中紧密连接蛋白occludin、zo-1和黏蛋白muc2的表达水平；

6、s4、采集结肠内容物样本和血清样本，检测肠道菌群组成及代谢物水平，其中肠道菌群和短链脂肪酸采用结肠内容物样本检测，甘油磷脂代谢物采用血清样本检测；所述肠道菌群包括lachnospiraceae_nk4a136_group、unclassified_oscillospiraceae和faecalibaculum，所述代谢物包括短链脂肪酸和甘油磷脂代谢物，所述短链脂肪酸包括乙酸、丁酸和异戊酸，所述甘油磷脂代谢物包括溶血磷脂酰胆碱18:1和磷脂酰胆碱(18:0/18:1)；

7、s5、进行认知功能行为学测试并采集海马脑组织样本，检测认知功能及海马脑区相关指标，所述认知功能包括空间工作记忆和识别记忆，所述海马脑区相关指标包括小胶质细胞活化标志物iba-1、血脑屏障紧密连接蛋白occludin和zo-1、突触素syp及突触后致密蛋白psd-95的表达水平。

8、优选的，步骤s1中，所述母乳化结构脂以饲料添加方式给予，饲料中母乳化结构脂的添加量为8%或16%，折算给药剂量分别为9.6g/kg/天或19.2g/kg/天；所述结肠炎模型为dss诱导的溃疡性结肠炎模型，采用3%dss饮水诱导7天。

9、优选的，步骤s2中，所述促炎因子、、il-6和抗炎因子il-10采用酶联免疫吸附实验检测；所述结肠组织病理学评分采用h&e染色，包括上皮屏障破坏程度0-4分、黏膜损伤程度0-3分、炎性细胞浸润程度0-3分；疾病活动指数按体重变化、粪便性状和粪便隐血三项评分之和除以3计算。

10、优选的，步骤s3中，所述紧密连接蛋白occludin、zo-1和黏蛋白muc2采用免疫组织化学法检测，将结肠组织石蜡切片经脱蜡、抗原修复后，分别加入对应一抗4℃孵育过夜，再加入二抗室温孵育并显色，采用imagej软件对免疫阳性染色区域面积进行定量分析。

11、优选的，步骤s4中，所述肠道菌群组成采用16s rrna高通量测序检测，扩增v3-v4高变区，采用qiime2流程进行数据分析，以lefse法筛选差异菌群，判定标准为lda评分＞3且p＜0.05；所述短链脂肪酸采用气相色谱-质谱联用法检测；所述甘油磷脂代谢物采用超高效液相色谱-串联质谱法进行非靶向脂质代谢组学分析。

12、优选的，步骤s5中，所述空间工作记忆采用y迷宫自发交替实验评价，小鼠在y迷宫中自由探索8min，计算自发交替率；所述识别记忆采用新物体识别实验评价，包括3min熟悉阶段和间隔1h后的3min测试阶段，计算认知指数；所述海马脑区相关指标采用免疫组织化学法检测。

13、优选的，产品为药物、功能食品、特殊膳食食品、营养补充剂或可食用组合物。

14、有益效果：通过将母乳化结构脂opo用于结肠炎及其伴随认知功能障碍的干预，可同时作用于肠道与中枢，改善结肠炎症损伤与认知行为表现；其中借助肠-脑轴多靶点调控，有助于修复肠黏膜屏障、重塑肠道菌群结构、调节脂质与短链脂肪酸代谢，并抑制海马神经炎症、改善血脑屏障与突触可塑性，从而形成肠道与中枢协同改善的整体效果；此外，opo作为已用于婴幼儿食品的营养成分，安全性较好，适于长期使用，不仅拓展应用范围，也为结肠炎相关肠外表现提供营养干预思路。

1.母乳化结构脂在结肠炎及其相关认知功能障碍改善中的应用，其特征在于，所述母乳化结构脂为1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯，其甘油三酯结构中sn-2位为棕榈酸，sn-1位和sn-3位主要为油酸。

2.根据权利要求1所述的母乳化结构脂在结肠炎及其相关认知功能障碍改善中的应用，其特征在于，产品为药物、功能食品、特殊膳食食品、营养补充剂或可食用组合物。

3.根据权利要求1所述的母乳化结构脂在结肠炎及其相关认知功能障碍改善中的应用，其特征在于，所述母乳化结构脂以饲料添加方式给予，饲料中母乳化结构脂的添加量为8%或16%，折算给药剂量分别为9.6 g/kg/天或19.2 g/kg/天。

4.根据权利要求1所述的母乳化结构脂在结肠炎及其相关认知功能障碍改善中的应用，其特征在于，结肠炎为溃疡性结肠炎，认知功能障碍包括空间工作记忆下降和/或识别记忆损伤。

5.根据权利要求1所述的母乳化结构脂在结肠炎及其相关认知功能障碍改善中的应用，其特征在于，改善结肠炎包括减轻结肠炎症损伤、修复肠黏膜屏障、重塑肠道菌群、调节短链脂肪酸与甘油磷脂代谢中的一种或多种。

6.根据权利要求5所述的母乳化结构脂在结肠炎及其相关认知功能障碍改善中的应用，其特征在于，所述肠道菌群包括lachnospiraceae_nk4a136_group、unclassified_oscillospiraceae和faecalibaculum；所述短链脂肪酸包括乙酸、丁酸和异戊酸；所述甘油磷脂代谢物包括溶血磷脂酰胆碱18:1和磷脂酰胆碱(18:0/18:1)。

7.根据权利要求1所述的母乳化结构脂在结肠炎及其相关认知功能障碍改善中的应用，其特征在于，所述改善认知功能障碍包括抑制海马神经炎症、改善血脑屏障完整性和/或改善突触可塑性。

8.根据权利要求1所述的母乳化结构脂在结肠炎及其相关认知功能障碍改善中的应用，其特征在于，所述母乳化结构脂通过肠-脑轴多靶点协同改善结肠炎及其相关认知功能障碍。