一种中药提取物及其制备方法和应用与流程

本发明涉及药品，具体涉及一种中药提取物及其制备方法和在制备促进肺微血管内皮细胞增殖的药物中的应用。

背景技术：

1、慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease, copd），简称慢阻肺，是一种常见的、以反复呼吸道症状和持续的气流受限为主要特征的呼吸系统慢性进展性疾病，其核心病理机制为有毒颗粒或气体暴露引发的气道重塑与肺泡功能异常。目前已知的有毒颗粒或气体种类繁多，但吸烟仍是最常见的危险因素。

2、研究表明，香烟烟雾等有害物质通过诱导肺微血管内皮细胞（human pulmonarymicrovascular endothelial cells, hpmecs）凋亡及炎症级联反应，导致肺血管屏障破坏和肺泡结构损伤，进而驱动copd的疾病进程。hpmecs作为肺血管内膜的核心组分，不仅参与气体交换和微循环稳态调控，还通过分泌血管活性物质（如vegf、ang-2）介导炎症反应与组织修复，其功能障碍已被证实与copd的肺气肿、肺动脉高压等并发症密切相关。hpmecs损伤已被证实存在于多种肺部疾病中，且hpmecs是copd发病机制中的主要受损细胞，其介导copd 的发生和发展。

3、copd的高患病率、高发病率和高死亡率给全球公共卫生系统带来了巨大挑战。随着中国人口老龄化，copd的发病率和负担将持续显著上升。

4、当前现有药物的治疗靶点单一，治疗存在一定局限性，虽可缓解症状，但无法逆转肺微血管损伤或阻滞疾病进展。因此，探索治疗 copd的新药和方法已成为国际医学界关注的焦点。

技术实现思路

1、针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供一种中药提取物的制备方法，并进一步提供该制备方法制得的中药提取物及其在制备促进hpmecs增殖的药物中的应用。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、一种中药提取物的制备方法，所述中药提取物的原料药包括人参、檀香、降香、赤芍和酸枣仁，所述制备方法包括如下步骤：

4、(1)取人参，用乙醇水溶液提取，得醇提液和药渣；

5、(2)取檀香、降香，提取挥发油，得挥发油、水提液和药渣；

6、(3)取赤芍、酸枣仁以及步骤（1）和步骤（2）所得药渣，水提取，得水提液；

7、(4)分别将步骤(1)所得醇提液、步骤(2)所得水提液和步骤(3)所得水提液浓缩，合并，醇沉，取上清液并浓缩，得浓缩液；

8、(5)取步骤(4)所得浓缩液，稀释，经大孔树脂柱分离，依次用水、20%乙醇、50%乙醇、75%乙醇和95%乙醇洗脱，收集各洗脱液，取75%乙醇洗脱液，浓缩并干燥，得中药提取物。

9、进一步地，所述中药提取物的原料药以重量份数计包括人参3-10份、檀香1-5份、降香1-5份、赤芍3-9份、酸枣仁3-10份。

10、进一步地，所述中药提取物的原料药以重量份数计包括人参5-9份、檀香2-4份、降香2-4份、赤芍4-7份、酸枣仁4-9份。

11、进一步地，所述中药提取物的原料药以重量份数计包括人参6份、檀香2份、降香2份、赤芍5份、酸枣仁5份。

12、进一步地，步骤(1)中，用乙醇水溶液提取两次，每次加5-7倍量70%乙醇回流提取，第一次2.5-3.5h，第二次1.5-2.5h。

13、进一步地，步骤(2)中，取檀香、降香加9-11倍量水，回流提取挥发油1.5-2.5h，分别收集挥发油、水提液和药渣。

14、进一步地，步骤(2)中，用索氏提取器回流提取挥发油至挥发油不再增加为止。

15、进一步地，步骤(3)中，水提取两次，每次加8-10倍量水回流提取，第一次2.5-3.5h，第二次1.5-2.5h。

16、进一步地，步骤(5)中，浓缩液加水稀释至0.25g生药/ml，以上样流速1bv/h通过大孔树脂柱，完全通过后，依次用水、20%乙醇、50%乙醇、75%乙醇和95%乙醇洗脱5bv，流速2-3bv/h，收集各洗脱液，取75%乙醇洗脱液，浓缩并干燥。

17、进一步地，大孔树脂柱树脂型号为ab-8，树脂用量以2.5g生药/g树脂的比例装柱。

18、本发明还提供了一种中药提取物，由上述的中药提取物的制备方法制得。

19、进一步地，所述中药提取物中含有人参皂苷rb2。

20、本发明还提供了上述的中药提取物在制备促进肺微血管内皮细胞增殖的药物中的应用。

21、在上述应用中，包括用于制备药物组合物或制剂，所述药物组合物或制剂用于：

22、(a)调节肺微血管内皮细胞aplnr信号通路；

23、(b)促进肺微血管内皮细胞aplnr蛋白表达水平；

24、(c)靶向激活apj信号通路；

25、(d)促进肺微血管内皮细胞增殖；和/或

26、(e)促进肺微血管内皮细胞损伤后修复。

27、本发明还提供了上述的中药提取物在制备治疗慢性阻塞性肺疾病的药物中的应用。

28、本发明还提供了一种药物组合物，包含上述的中药提取物，以及药学上可接受的载体。

29、本发明提供的中药提取物制备方法，通过多维度技术集成与工艺创新，实现了中药复方活性成分的高效富集与协同增效。本发明针对药材特性采用差异化工序，人参先以乙醇水溶液提取脂溶性成分（如人参皂苷），后续药渣与其他药材（如赤芍、酸枣仁）水提，实现成分互补提取，资源利用充分，减少原料浪费，再通过大孔树脂梯度洗脱（20%-95%乙醇），选择性富集目标成分，简化杂质去除流程。

30、本发明通过合理的分步提取与纯化工艺，获得具有明确体外活性的中药提取物，其制备方法兼顾成分提取效率与工艺可操作性，为复方中药的现代化开发提供参考。

31、本发明体外实验表明该中药提取物能缓解cse诱导的肺微血管内皮细胞损伤，可以促进cse诱导的肺微血管内皮细胞细胞aplnr的表达水平，从而促进肺微血管内皮细胞增殖，为探索慢阻肺相关血管病变的治疗提供了实验依据，为临床治疗copd提供新的思路与方向。

32、本发明对中药提取物进行系统活性成分鉴定，证实提取物中包含四十余种人参活性单体，成分丰富且活性基础扎实。经过靶点亲和力筛选验证，其中27种人参活性单体可与apj受体靶点形成高特异性结合，具备良好的靶向结合能力。同时，本发明通过药效筛选验证，从众多活性单体中锁定人参皂苷g-rb2为靶向激活apj受体、发挥肺损伤修复作用的核心优势活性成分，是支撑本提取物核心药效的关键物质。本发明明确的活性成分组成及核心有效单体，为该类复方提取物的药效溯源、质量控制与标准化开发提供了明确依据。

33、本发明提取物包含高靶向性g-rb2核心活性成分，针对copd特征性肺微血管内皮损伤具备多重确切保护作用。在cse诱导的肺微血管内皮损伤copd相关细胞模型中，核心活性成分可有效提升损伤内皮细胞活力、促进细胞增殖、抑制内皮细胞凋亡，稳定肺血管内皮正常生理功能。同时，其可显著下调tnf-α、il-1β等促炎因子水平，抑制肺部持续性炎症浸润，减轻copd气道及肺组织炎性病理损伤；还可有效提升肺微血管内皮紧密连接蛋白表达与内皮屏障完整性，降低血管渗漏，阻断copd“内皮损伤 炎症加重 气道重塑”的恶性病理循环，从根源上干预copd病程进展。