免疫检查点抑制剂相关心肌炎诊断标志物及其应用

本技术属生物医药领域，具体涉及免疫检查点抑制剂相关心肌炎诊断标志物及其应用。

背景技术：

1、免疫检查点抑制剂（ici）作为肿瘤免疫治疗的革命性手段，已广泛应用于黑色素瘤、非小细胞肺癌、胃癌等多种恶性肿瘤的临床治疗，显著改善了晚期肿瘤患者的生存率和生存质量。其通过阻断免疫检查点分子（如pd-1/pd-l1、ctla-4）的抑制性信号，激活机体自身免疫系统对肿瘤细胞的杀伤作用，实现肿瘤消退。

2、然而，ici在激活抗肿瘤免疫的同时，也可能打破机体免疫稳态，诱发一系列免疫相关不良事件（iraes），累及多个器官系统。其中，免疫检查点抑制剂相关心肌炎（icim）是一种罕见但极为凶险的严重irae，发生率虽仅为0.04%~1.14%，但致死率高达30%~50%，且发病隐匿、进展迅速，严重限制了ici的临床应用安全性，成为制约肿瘤免疫治疗获益的关键瓶颈。

3、目前，icim的临床诊断主要依赖《不良事件通用术语标准》（ctcae）、欧洲心脏病学会（esc）等指南，结合患者的临床症状（如胸痛、呼吸困难、心律失常）、心电图异常、心肌酶谱（肌钙蛋白i/t、肌酸激酶同工酶）升高、心脏影像学检查（超声心动图、心脏磁共振）及心内膜心肌活检结果综合判断。其中，心内膜心肌活检被认为是icim诊断的“金标准”，可通过病理检查明确心肌炎症浸润及损伤特征，但该检查为有创操作，存在出血、感染、心律失常等并发症风险，且受检测时机、取样部位局限性影响，临床应用普及率低，难以作为早期筛查手段。

4、随着精准医疗的发展，生物标志物在疾病早期诊断、病情评估、预后判断中的作用日益凸显。现有研究尝试探索icim相关生物标志物，主要集中于传统心肌损伤标志物（肌钙蛋白、肌酸激酶同工酶）、炎症因子（il-6、tnf-α）等，但这类标志物缺乏特异性——肌钙蛋白升高也可见于病毒性心肌炎、心力衰竭、急性心肌梗死等其他心血管疾病，炎症因子升高在感染、自身免疫性疾病中均普遍存在，尤其在使用ici的肿瘤患者合并基础心血管疾病时，易导致误诊或漏诊，导致治疗方案偏差（如过度使用免疫抑制剂或延误icim治疗）。此外，传统标志物的升高往往滞后于icim的病理生理改变，难以实现疾病的早期预警，无法为及时干预、改善患者预后争取时间，导致部分患者进展为重症心肌炎、心源性休克甚至死亡。

5、综上，目前缺乏特异性强、灵敏度高、无创便捷的icim早期诊断或鉴别诊断标志物，无法满足临床对icim精准防控、个体化治疗的需求，亟需开发新型生物标志物以弥补上述技术空白。

技术实现思路

1、基于此，本技术提供了一种标志物，及其在制备用于诊断或辅助诊断免疫检查点抑制剂相关心肌炎的产品中的应用，该标志物特异性强、灵敏度高、无创便捷的icim早期诊断或鉴别诊断。

2、本技术具体技术方案包括：

3、第一方面，本技术提供了检测样本中标志物含量的试剂在制备用于诊断或辅助诊断免疫检查点抑制剂相关心肌炎的产品中的应用，所述标志物包括chmp6（chargedmultivesicular body protein 6，在uniprot数据库中的id为q96fz7）、eef1g（elongationfactor 1-gamma，在uniprot数据库中的id为p26641）和srpx（sushi repeat-containingprotein srpx，在uniprot数据库中的id为p78539）中的一种或多种。

4、在其中一个实施例中，诊断包括鉴别诊断、早期诊断或辅助诊断。

5、在其中一个实施例中，诊断包括：鉴别接受ici治疗的肿瘤患者中是否发生icim或存在发生icim风险。

6、在其中一个实施例中，所述标志物包括chmp6和eef1g。

7、在其中一个实施例中，所述标志物包括chmp6和srpx。

8、在其中一个实施例中，所述标志物包括eef1g和srpx。

9、在其中一个实施例中，所述标志物包括chmp6、eef1g和srpx。

10、第二方面，本技术提供了检测样本中标志物含量的试剂在制备用于早期预警或实时监测免疫检查点抑制剂相关心肌炎的产品中的应用，所述标志物包括chmp6、eef1g和srpx中的一种或多种。

11、在其中一个实施例中，所述标志物包括chmp6和eef1g。

12、在其中一个实施例中，所述标志物包括chmp6和srpx。

13、在其中一个实施例中，所述标志物包括eef1g和srpx。

14、在其中一个实施例中，所述标志物包括chmp6、eef1g和srpx。

15、在其中一个实施例中，所述产品用于对接受ici治疗的肿瘤患者进行icim发生风险的早期预警或动态监测。

16、在其中一个实施例中，与接受ici治疗未发生icim肿瘤患者相比，所述chmp6、eef1g和/或srpx在icim患者的样本中表达水平升高。

17、在其中一个实施例中，检测的样本包括血清、血浆或全血。

18、在其中一个实施例中，所述产品包括试纸、试剂盒、芯片和装置中的一种或多种。

19、在其中一个实施例中，所述试剂选自以下方法中所适用的试剂：液相色谱法、质谱方法和免疫测定法中的一种或多种。

20、在其中一个实施例中，免疫测定法包括western印迹分析、放射免疫测定法、免疫荧光法、免疫沉淀、免疫扩散、电化学发光免疫测定法、elisa测定法和免疫聚合酶链反应中的一种或多种。

21、在其中一个实施例中，所述试剂为液相色谱-串联质谱法(lc-ms/ms)或双抗体夹心elisa法所适用的试剂。

22、在其中一个实施例中，所述试剂包含针对chmp6、eef1g和srpx中的至少一个的特异性抗体或其功能片段。

23、第三方面，本技术提供了一种用于免疫检查点抑制剂相关心肌炎的诊断、早期预警或实时监测的产品，所述产品包含检测样本中标志物的试剂，所述标志物包括chmp6、eef1g和srpx中的一种或多种。

24、第四方面，本技术提供了一种计算机诊断、早期预警或实时监测的系统或装置，包括：

25、数据获取模块，用于获取待测受试者样本中的标志物的表达量，所述标志物包括chmp6、eef1g和srpx中的一种或多种；

26、分析模块，用于将所述数据获取模块得到的标志物表达量进行分析，分析受试者是否发生icim；以及

27、结果输出模块，用于输出所述分析模块的分析结果，得到患者是否发生icim的诊断结果。

28、在其中一个实施例中，所述受试者为接受ici治疗的肿瘤患者。

29、在其中一个实施例中，还包括检测模块，用于检测样本中标志物的表达量。

30、在其中一个实施例中，所述样本选自血清、血浆或全血。

31、第五方面，本技术提供了一种计算机可读存储介质，存储有用于执行所述系统功能的计算机程序。

32、计算机可读介质可以是计算机可读信号介质或者计算机可读存储介质。计算机可读存储介质例如可以是电、磁、光、电磁、红外线或半导体的系统、装置或器件，或者任意以上的组合。在本发明中，所述计算机可读存储介质可以是任何包含或存储程序的有形介质，该程序可以被指令执行系统、装置或器件使用或者与其结合使用。在一些实施例中，计算机可读存储介质的更具体的例子包括但不限于具有一个或多个导线的电连接、便携式计算机磁盘、硬盘、随机存取存储器（ram）、只读存储器（rom）、可擦拭可编程只读存储器（eprom或闪存）、光纤、便携式紧凑磁盘只读存储器（cd rom）、光存储器件、磁存储器件，或者上述的任意合适的组合。

33、第六方面，本技术提供了一种用于诊断免疫检查点抑制剂相关心肌炎（icim）的方法，包括以下步骤：

34、检测受试者样本中标志物的表达水平或浓度；以及

35、将所述标志物的表达水平或浓度与参考值进行比较，获得诊断结果。

36、在其中一个实施例中，所述诊断包括鉴别诊断。

37、在其中一个实施例中，所述标志物的表达水平或浓度高于所述参考值，判定所述待测受试者存在发生icim的风险或状态。

38、在其中一个实施例中，所述受试者为接受ici治疗的肿瘤患者。

39、在其中一个实施例中，所述参考值基于来自接受ici治疗未发生icim的肿瘤患者的样本数据确定。

40、与现有技术相比，本技术的有益效果在于：

41、本技术通过筛选并验证得到icim特异性血浆诊断标志物（chmp6、eef1g、srpx），具有以下显著有益效果：

42、（1）提升icim诊断特异性与灵敏度，实现精准鉴别：本技术的血浆标志物基于icim患者与非icim肿瘤患者的蛋白质组学差异筛选得到，经验证具有高度icim特异性。其在使用icis的肿瘤患者中可有效区分icim与其他心血管疾病、自身免疫性疾病及肿瘤患者的基础炎症状态，解决了现有标志物特异性不足、易误诊的技术难题，显著降低漏诊率和误诊率，为icim精准诊断提供可靠依据。

43、（2）实现icim早期预警与诊断，改善患者预后：本技术的血浆标志物在icim疾病早期（亚临床阶段或疑似症状出现初期）即可在血浆中检测到异常表达，且表达水平与疾病严重程度相关，较传统肌钙蛋白等标志物具有更早的预警窗口。通过检测该组标志物，可在患者心肌实质严重损伤前发现病变，为临床及时停用ici、启动糖皮质激素及免疫抑制剂治疗争取时间，有效阻止病情进展为重症心肌炎、心源性休克，显著降低icim患者的致死率。

44、（3）采用无创检测方式，提升临床适用性与依从性：本技术的标志物检测仅需采集患者外周血血浆样本，操作便捷、无创、安全，无传统心内膜心肌活检的并发症风险，且样本易获取、可重复采集。其适用于所有接受ici治疗的肿瘤患者的大规模筛查、动态监测，也可用于基层医疗机构的临床应用，显著提升了icim诊断技术的普及性和患者依从性。

45、（4）为icim发病机制研究提供新方向，推动精准诊疗发展：本技术的标志物涉及囊泡运输、蛋白合成、免疫细胞活化、炎症反应调控等多个生物学过程，其异常表达不仅为icim诊断提供指标，更揭示了icim发病的潜在分子机制，为开发icim靶向治疗药物、优化治疗方案提供了新的靶点和理论基础，推动icim从经验性治疗向精准靶向治疗转变。

46、（5）降低医疗成本，优化医疗资源配置：通过本技术的标志物实现icim早期筛查与精准诊断，可减少不必要的影像学检查、有创活检及广谱免疫抑制剂的使用，降低患者的医疗费用及不良反应风险；同时避免因icim误诊、漏诊导致的重症救治成本增加，优化医疗资源在肿瘤免疫治疗并发症防控中的配置效率。

47、综上，本技术的icim血浆诊断标志物解决了现有技术中icim诊断特异性差、早期预警不足、检测手段有创等核心缺陷，为icim的精准、早期、无创诊断及个体化治疗提供了全新的技术方案，具有重要的临床应用价值和社会意义。