益生菌组合物及其用途的制作方法

本发明属于微生物研究，具体涉及益生菌组合物及其用途。

背景技术：

1、肠是脊椎动物最大的免疫器官，肠黏膜免疫稳态需具备良好的黏膜上皮屏障完整性，提高吸收能力从而抵御病原的侵袭。肠上皮屏障功能的破坏会导致多种肠道疾病。肠上皮屏障包括多种肠上皮细胞，其除消化作用外还可调节肠黏膜免疫反应。同时，肠道内存在大量共生菌群，这些微生物对营养物质的摄入、新陈代谢和免疫稳态也具有调节作用。近年来肠道菌群紊乱与炎症性肠病的关系受到越来越多关注。

2、克罗诺杆菌（cronobacter，原称阪崎肠杆菌）是一种食源性条件致病菌，耐高温（54-62℃）、耐酸（ph值＜3.9）和干燥，对环境抵抗力强，广泛分布在食品和自然环境中。即使在干燥等恶劣的环境中，阪崎肠杆菌也能长期存活，并形成一种保护性生物膜，表现出较高的毒性和致病性。阪崎肠杆菌感染主要危害婴幼儿，其可通过污染婴幼儿配方食品导致婴儿脑膜炎、坏死性小肠结肠炎和菌血症，感染后婴儿发病急，死亡率高达50%以上，幸存者也会遗留严重的神经系统后遗症。同时，阪崎肠杆菌还可感染其他各年龄段的人群，例如老年人和免疫力低下的人群，感染后可引起败血症、神经炎、脑脊髓炎、脑脓肿、脑积水和坏死性小肠结肠炎。

3、目前已有许多学者致力于该菌的研究，已建立了准确、灵敏、特异的检测方法，然而目前对阪崎肠杆菌污染的致病性机理研究还不够深入，防治手段主要以药物和抗生素为主。但新生儿，尤其是早产儿，作为一类特殊人群，通常无法直接服用药物。并且婴儿出生时肠道内尚未建立相对稳定的正常菌群生态系统，胃酸的酸度比成年人高，更适于阪崎肠杆菌生存，从而增加了阪崎肠杆菌感染后的致病风险，其次婴儿血脑屏障发育不完全，阪崎肠杆菌进入肠上皮细胞后可进一步从血液进入脑部，从而引起脑部感染，最终导致死亡或留下严重的神经系统后遗症。

技术实现思路

1、发明要解决的问题

2、针对现有技术中存在的，例如目前对于肠道菌群紊乱与炎症性肠病的关系研究还不够充分，以及针对致病菌感染导致的症状主要以药物、抗生素等治疗为主，没有考虑婴儿、早产儿等重点人群的自身特殊性，其无法直接服用药物进行防治和辅助治疗的问题。

3、本发明通过了大量的筛选，获得了一种益生菌组合物，其有助于调节肠道菌群，并且适用于缓解阪崎肠杆菌侵染导致的炎症反应和组织损伤等症状，也可用于婴儿等特殊人群。

4、用于解决问题的方案

5、为了解决上述现有技术中的问题，本发明提供了以下技术方案：

6、[1]. 一种益生菌组合物，其中，所述益生菌组合物包含两种动物双歧杆菌乳亚种菌株，或包含一种动物双歧杆菌乳亚种菌株和一种长双歧杆菌长亚种菌株，或两种长双歧杆菌长亚种菌株；并且，以所述组合物的总质量计，所述组合物中包含的活菌数为1×108cfu/100g~1×1012 cfu/100g。

7、[2]. 根据[1]所述的益生菌组合物，其中，在所述组合物中，以活菌数计，所述两种动物双歧杆菌乳亚种菌株之间，或所述一种动物双歧杆菌乳亚种菌株与一种长双歧杆菌长亚种菌株之间，或所述两种长双歧杆菌长亚种菌株之间的比例为4:1~1:4。

8、[3]. 根据[1]或[2]所述的益生菌组合物的制备方法，其中，所述方法包括将所述两种动物双歧杆菌乳亚种菌株，或所述一种动物双歧杆菌乳亚种菌株与一种长双歧杆菌长亚种菌株，或所述两种长双歧杆菌长亚种菌株混合的步骤。

9、[4]. 根据[1]或[2]所述的益生菌组合物在制备有助于调节肠道菌群的产品中的用途。

10、[5]. 根据[1]或[2]所述的益生菌组合物在制备具有缓解阪崎肠杆菌感染导致的症状的功能的产品中的用途。

11、[6]. 根据[5]所述的用途，其中，所述阪崎肠杆菌感染导致的症状包括炎症反应、组织损伤和/或肠道菌群变化。

12、[7]. 根据[6]所述的用途，其中，

13、所述炎症反应包括以下症状中的任意一种或多种：肠组织促炎性细胞因子表达水平升高，肠组织抑炎性细胞因子表达水平升高，肠组织核转录因子表达水平升高，全血中血小板增多，血尿酸升高；

14、所述组织损伤包括以下症状中的任意一种或多种：肠上皮结构破坏，出现水肿，绒毛、隐窝结构消失，炎症细胞浸润，杯状细胞破坏，粘液层丧失，肠道屏障相关基因表达下降。

15、[8]. 一种产品，其中，所述产品含有根据[1]或[2]所述的益生菌组合物。

16、[9]. 根据[8]所述的产品，其中，所述产品还含有植物或其提取物、含乳成分、动物类成分、功能性添加组分、微量元素补充剂和/或任意的可接受的辅料。

17、[10]. [8]或[9]所述的产品有助于调节肠道菌群或缓解阪崎肠杆菌感染导致的症状的用途。

18、发明的效果

19、通过以上技术方案的实施，本发明获得了以下技术效果：

20、本发明通过大量筛选，开发了一种有助于调节肠道菌群，并可以用于缓解阪崎肠杆菌侵染导致的炎症反应和组织损伤等症状的益生菌组合物。

21、实验结果表明，复合双歧杆菌能够调节肠道菌群，同时对阪崎肠杆菌感染导致的肠道菌群紊乱具有调节作用，进一步可以干预阪崎肠杆菌肠道定植过程，从而降低阪崎肠杆菌在小鼠肠道内的定植水平，并能够抑制小鼠肠道内阪崎肠杆菌的活力。并且益生菌组合物可以缓解阪崎肠杆菌侵染导致的炎症反应和组织损伤。同时，本发明提供的益生菌组合物可以添加在食品或保健品等产品中供婴儿、早产儿等特殊人群使用，有助于其肠道菌群的调节。

1.一种益生菌组合物在制备具有有助于调节肠道菌群和/或缓解阪崎肠杆菌感染导致的症状的功能的产品中的用途；

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，

3.一种产品有助于调节肠道菌群和/或缓解阪崎肠杆菌感染导致的症状的用途，其特征在于，所述产品含有根据权利要求1或2所定义的益生菌组合物；所述阪崎肠杆菌感染导致的症状包括炎症反应、组织损伤和肠道菌群变化。

4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述产品还含有植物或其提取物、含乳成分、动物类成分、功能性添加组分、微量元素补充剂和/或任意的可接受的辅料。

5.根据权利要求3或4所述的用途，其特征在于，所述炎症反应包括以下症状中的任意一种或多种：肠组织促炎性细胞因子表达水平升高，肠组织抑炎性细胞因子表达水平升高，肠组织核转录因子表达水平升高，全血中血小板增多，血尿酸升高；