含笑内酯烷基化衍生物、药物组合物及其用途的制作方法

1.本发明属于药物技术领域，具体涉及倍半萜内酯类化合物(含笑内酯)及其有效成分治疗癌症或辅助治疗肿瘤的药物组合物，以及该类药物化合物和组合物在制备抗癌或辅助抗癌药物中的应用。


背景技术：

2.恶性肿瘤严重威胁人类健康。据2020最新全球癌症数据报告显示，2020年全球新发癌症病例1929万例，其中男性1006万例，女性923万例；2020年全球癌症死亡病例996万例，其中男性553 万例，女性443万例。2020年全球新发癌症病例1929万例因此，抗肿瘤药物的研究是具有紧迫性和挑战性。
3.急性髓系白血病(aml)是一种恶性疾病，其特征是造血系统的髓系原始细胞克隆性恶性增殖性疾病。目前治疗方式仍然以化疗为主，大多数患者可以通过化疗获得更长的生存期。但是大约20％的患者在化疗后会产生耐药性，最终复发并演变为难治性白血病，导致治疗失败而死亡。耐药性是急性髓系白血病(aml)复发的一个重要原因。多重耐药的主要原因是p-糖蛋白或多药耐药相关蛋白的过度表达，其作为药物外排泵，将细胞内药物水平降低至亚致死浓度。因此，开发结构新颖的抗癌药物，是治愈急性髓系白血病的有效策略。
4.含笑内酯一种倍半萜内酯化合物，其植物来源为木兰科植物黄兰的根皮、含笑的根皮，也可以通过半合成得到，具有多重药理作用。近年来，许多课题组报道了含笑内酯优异的抗癌、抗炎和其他生物活性。例如：viennois等研究报道了含笑内酯可改善由右旋糖酐硫酸钠(dss)诱导的小鼠结肠炎。陈悦课题组报道了含笑内酯及其衍生物能够选择性抑制急性髓性白血病。含笑内酯不仅能够降低急性髓系白血病干细胞(cd34 cd38)在体内的比例，而且经过含笑内酯治疗后，原代急性髓系白血病细胞集落形成单位的急剧减少进一步证实了急性髓系白血病干细胞的靶向性。但是由于含笑内酯的水溶性差，在体内的药物血药浓度太低，影响其体内的药理作用。陈悦课题组发现含笑内酯的二甲胺加成物(dmamcl)能够在血浆和体内缓慢释放 mcl，并在非肥胖糖尿病/严重联合免疫缺陷急性髓系白血病模型中显示出显著的治疗效果。值得一提的是，dmamcl的成盐产物—— act001已经进入临床试验。


技术实现要素：

5.如下式中结构式i所示的含笑内酯衍生物在制备治疗癌症药物上的应用：
[0006][0007]
式(i)中的r1为芳基、取代基苯基、烷基、杂环、烯基以及酯键；其中取代基苯基上的取代基为甲基、甲氧基、卤素、三氟甲基；
[0008]
r2为芳基、烷基；
[0009]
权利要求1中所述的化合物在制备治疗癌症药物中的用途。
[0010]
权利要求1中所述的化合物在制备治疗癌症的辅助药物中的用途。
[0011]
根据权利2-3所述的用途，其中癌症包括急性髓系白血病、慢性淋巴白血病、乳腺癌、皮肤癌、卵巢癌、肝癌、肺癌、胶质瘤、胰腺癌、视网膜母细胞瘤、消化道肿瘤。
[0012]
一种用于治疗癌症的药物组合物，其中含有有效量的式(i)化合物和药学上可接受的载体或者其他抗癌药物。
[0013]
所述的药用载体或者赋形剂是一种或者多种固体、半固体、液体制剂以及药物制品辅剂。本发明的药物可以经注射和口服两种形式给药，注射可以静脉注射和肌肉注射，口服剂型可以是片剂和胶囊剂。
附图说明
[0014]
附图1是化合物ia的氢谱图；
[0015]
附图2是化合物ia的碳谱图；
[0016]
附图3是化合物ia的高分辨质谱图；
[0017]
附图4是化合物ib的氢谱图；
[0018]
附图5是化合物ib的碳谱图；
[0019]
附图6是化合物ib的高分辨质谱图；
[0020]
附图7是化合物ic的氢谱图；
[0021]
附图8是化合物ic的碳谱图；
[0022]
附图9是化合物id的氢谱图；
[0023]
附图10是化合物id的高分辨质谱图；
[0024]
附图11是化合物ie的氢谱图；
[0025]
附图12是化合物ie的碳谱图；
[0026]
附图13是化合物ie的高分辨质谱图；
[0027]
附图14是化合物if的氢谱图；
[0028]
附图15是化合物if的碳谱图；
具体实施方式
[0029]
为了理解本发明，下面以实施例进行进一步说明本发明，但不意于限制本发明的保护范围。
[0030]
化合物ia-if的合成：
[0031]
向史朗克管中加入含笑内酯(0.20mmol)，四聚醋酸铑催化剂(1mol％)，通入氮气，然后加入干燥的ch2cl2(0.5ml)，室温下搅拌，缓慢滴加重氮化合物(0.30～0.40mmol)的无水ch2cl2(0.5ml)溶液，室温下搅拌约10分钟，直到原料完全消耗。反应结束后，减压浓缩，硅胶柱层析纯化得到化合物ia-if。
[0032]
实施例1：
[0033][0034]
化合物ia：黄色油状物。rf＝0.2(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)。产率：72.9％。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ＝6.12(d,j＝3.3hz,1h),5.40(d,j＝3.1hz,1h),4.88(s,1h),4.28
–
4.19(m,4h),3.64(t,j＝10.1hz,1h),3.09(dd,j＝10.4,1.8hz,1h),2.72
–
2.64(m,1h),2.45-2.39(m,1h),2.27
–
2.15(m,3h),2.07-2.03(m,1h),1.97-1.89(m,1h),1.79-1.74(m,1h),1.70(s,3h),1.34
–
1.22(m,10h).
13
cnmr(100mhz,cdcl3):δ＝169.6,168.1,168.0,139.6,132.9,131.6,118.3,88.5,82.6,73.5,61.8,61.8,56.5,51.1,37.8,34.6,29.6,25.8,23.9,18.8,14.0,13.9.hrms(esi):m/z[m na]

calcdfor:c
22h30
nao7:429.1889；found:429.1884.
[0035]
实施例2：
[0036][0037]
化合物ib：黄色油状物。rf＝0.2(石油醚：乙酸乙酯＝3:1)。产率：53％。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ＝6.13(d,j＝3.3hz,1h),5.41(d,j＝3.1hz,1h),4.94(s,1h),3.78(d,j＝4.1hz,6h),3.64(t,j＝10.1hz,1h),3.07(dd,j＝10.4,1.7hz,1h),2.72-2.65(m,1h),2.44-2.38(m,1h),2.25-2.16(m,3h),2.08
–
2.01(m,1h),1.96-1.88(m,1h),1.79-1.74(m,1h),1.70(s,3h),1.32-1.27(m,1h),1.24(s,3h).
13
cnmr(100mhz,cdcl3):δ＝169.6,168.4,139.5,132.6,131.7,118.4,88.5,82.6,73.2,56.4,52.8,52.7,50.9,37.8,34.6,29.7,29.5,25.8,23.9,18.8.hrms(esi):m/z[m na]

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20h26
nao7:401.1576；
found:401.1575.
[0038]
实施例3：
[0039][0040]
化合物ic：黄色油状物。rf＝0.2(石油醚：乙酸乙酯＝6:1)。产率：55％。1h nmr(400mhz,cdcl3):δ＝7.59(d,j＝7.3hz,2h), 7.54
–
7.49(m,2h),7.37
–
7.27(m,6h),6.15(dd,j＝5.5,3.4hz,2h), 5.41(dd,j＝3.8,3.2hz,2h),5.35(s,2h),3.74
–
3.65(m,8h),3.11(dd, j＝10.5,1.8hz,1h),3.02(d,j＝10.2hz,1h),2.70-2.64(m,j＝9.8, 6.1,2.9hz,2h),2.37(dd,j＝29.9,8.4hz,2h),2.26
–
2.12(m,6h), 2.08
–
2.02(m,2h),1.97
–
1.78(m,4h),1.69(s,6h),1.38
–
1.22(m, 8h).
13
c nmr(100mhz,cdcl3):δ＝173.0,172.9,169.9,169.8,139.7, 138.6,138.2,133.3,132.5,131.5,131.4,128.3,127.9,127.9,126.9, 126.6,118.2,118.2,87.5,87.4,82.9,74.6,74.5,57.3,56.5,52.3,52.1, 51.3,50.8,38.4,37.4,34.8,34.6,29.9,29.6,25.9,23.9,23.8,19.3,18.7. hrms(esi):m/z[m na]

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24h28
nao5:419.1834；found: 419.1830.
[0041]
实施例4：
[0042][0043]
化合物id：黄色油状物。rf＝0.2(石油醚：乙酸乙酯＝8:1)。产率：35％。1h nmr(400mhz,cdcl3):δ＝7.60(d,j＝7.2hz,2h), 7.55
–
7.49(m,2h),7.35-7.26(m,6h),6.15(dd,j＝6.3,3.3hz,2h), 5.40(dd,j＝4.8,3.1hz,2h),5.34
–
5.28(m,2h),4.20
–
4.12(m,4h), 3.74-3.65m,2h),3.10(d,j＝8.5hz,1h),3.02(d,j＝9.2hz,1h), 2.71
–
2.64(m,2h),2.46
–
2.35(m,2h),2.26
–
2.14(m,6h),2.0
–
2.02(m, 2h),1.92
–
1.83(m,4h),1.70(s,6h),1.27
–
1.16(m,14h).hrms(esi): m/z[m h]

calcd for:c
25h30
nao5:433.1991；found:433.1986.
[0044]
实施例5：
[0045][0046]
化合物ie：黄色油状物。rf＝0.2(石油醚：乙酸乙酯＝6:1)。产率：68％。1h nmr(400mhz,cdcl3):δ＝7.52
–
7.38(m,8h),6.15(dd, j＝5.6,3.4hz,2h),5.41(dd,j＝4.7,3.1hz,2h),5.30(d,j＝9.6hz, 2h),3.74
–
3.63(m,8h),3.11
–
3.03(m,1h),2.99(d,j＝10.3hz,1h), 2.72
–
2.60(m,2h),2.46
–
2.32(m,2h),2.27
–
2.12(m,6h),2.09
–
2.02(m, 2h),1.95
–
1.76(m,4h),1.69(s,6h),1.35
–
1.20(m,8h).
13
c nmr(100 mhz,cdcl3):δ＝172.5,172.4,169.8,169.7,139.5,139.5,137.7,137.3, 133.0,132.1,131.6,131.5,131.4,128.6,128.4,121.9,118.4,118.3,87.7, 87.4,82.8,82.8,74.0,73.8,57.4,56.4,52.4,52.2,51.2,50.6,38.4,37.3, 34.8,34.6,29.9,29.6,25.8,25.8,23.9,23.8,19.2,18.5.hrms(esi): m/z[m na]

calcd for:c
24h27
brnao5:497.0940；found:497.0936.
[0047]
实施例6：
[0048][0049]
化合物if：黄色油状物。rf＝0.2(石油醚：乙酸乙酯＝8:1)。产率：40％。1h nmr(400mhz,cdcl3):δ＝7.57
–
7.46(m,4h), 7.33
–
7.28(m,4h),6.15(dd,j＝6.7,3.3hz,1h),5.41(dd,j＝6.0,3.1 hz,2h),5.29(m,1h),4.20
–
4.11(m,4h),3.73
–
3.65(m,2h),3.10
–
2.96 (m,2h),2.70
–
2.63(m,2h),2.46
–
2.34(m,2h),2.25
–
2.13(m,6h), 2.08
–
2.03(m,2h),1.94
–
1.81(m,4h),1.70-1.67(m,6h),1.25-1.21(m, 8h).
13
c nmr(400mhz,cdcl3):δ＝172.2,172.1,169.9,169.8,139.6, 139.5,137.2,136.8,133.7,133.6,133.1,132.2,131.5,128.4,128.4, 128.2,128.1,118.4,118.3,87.6,87.4,82.8,82.8,73.9,73.9,61.3,61.3, 57.6,56.3,51.2,50.7,38.2,37.5,34.8,34.6,30.0,29.6,25.8,25.8,23.9, 23.9,19.4,18.4,14.1,13.9.hrms(esi):m/z[m h]

calcd for: c
25h30
clo5:445.1782；found:445.1785.
[0050]
实施例7：含笑内酯烷基化衍生物的药理作用：
[0051]
将kg-1a白血病细胞配成4.5
×
104个/ml细胞悬液，加入96孔细胞培养板内，每孔100μl，培养24小时后，分别加入不同浓度的化合物，每一测试浓度设6个复孔，置37℃、5％co2饱和湿度条件下培养72小时，每孔加入10μlcck-8，37℃孵育1-4小时后，用酶联检测仪450nm波长测得吸光度(a)值，计算出本化合物对测试癌细胞的抑制作用。
[0052]
表1实施例1-6中化合物对各种癌细胞的抑制活性(ic
50
，μm)
[0053]
细胞iaibicidieifkg-1a29.6318.0442.7636.7812.8135.19
[0054]
其中，kg-1a表示高表达cd34

的急性髓系白血病细胞株。
[0055]
实施例8：注射液
[0056]
实施例1-6中制备的化合物用少量的dmso溶解后，按照常规加注射用水，精滤，灌封灭菌制成注射液。
[0057]
实施例9：片剂
[0058]
实施例1-6中制备的化合物与赋形剂按照重量比为5:1的比例加入赋形剂，制粒压片，得片剂。
[0059]
实施例10：胶囊
[0060]
实施例1-6中制备的化合物与赋形剂按照重量比为5:1的比例加入赋形剂，制成胶囊。
[0061]
本发明的化合物、用途和方法已经通过具体实施例进行了描述。所有类似的替换和改动都被视为包括在本发明范围之内。