一种TaqDNA聚合酶突变体及其应用的制作方法

技术特征：
1.一种taq dna聚合酶突变体，其特征在于，所述taq dna聚合酶突变体在氨基酸序列seq id no.1的基础上发生g46d和e230k突变。2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子含有编码权利要求1所述的taq dna聚合酶突变体的核酸序列。3.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体含有权利要求2所述的核酸分子；优选地，所述表达载体包括质粒载体或病毒载体。4.一种重组细胞，其特征在于，所述重组细胞含有权利要求2所述的核酸分子或权利要求3所述的表达载体。5.权利要求1所述的taq dna聚合酶突变体在制备逆转录反应试剂中的应用。6.一种逆转录试剂盒，其特征在于，所述逆转录试剂盒包括权利要求1所述的taq dna聚合酶突变体；优选地，所述试剂盒还包括pcr反应液。7.权利要求1所述的taq dna聚合酶突变体在逆转录反应中的应用。8.一种逆转录pcr方法，其特征在于，所述逆转录pcr方法包括：以rna为模板，利用权利要求1所述的taq dna聚合酶突变体进行逆转录pcr。9.权利要求1所述的taq dna聚合酶突变体在rna检测中的应用。10.一种rna检测方法，其特征在于，所述rna检测方法包括：以待测rna为模板，利用权利要求1所述的taq dna聚合酶突变体进行实时荧光定量pcr，分析荧光结果。

技术总结
本发明公开了一种TaqDNA聚合酶突变体及其应用。所述TaqDNA聚合酶突变体在氨基酸序列SEQ ID NO.1的基础上发生如下突变：E9K、L15S、D18R、H20E、H21E、K31E和R37D等。本发明通过点诱变获得TaqDNA聚合酶突变体，与野生型TaqDNA聚合酶不同，具备高效、稳定的逆转录酶活性，能够以RNA底物为高效转化cDNA，并在标准反应条件下扩增该cDNA，无需额外添加逆转录酶，能够显著提高通过实时荧光定量PCR检测目标核糖核酸(RNA)的效率。酸(RNA)的效率。酸(RNA)的效率。


技术研发人员：朱振宇 孙大鹏
受保护的技术使用者：武汉爱博泰克生物科技有限公司
技术研发日：2022.06.29
技术公布日：2023/9/23