用于检测2019冠状病毒病(COVID-19)的测定的制作方法

技术特征：
1.用于样品中sars-cov-2的重组酶-聚合酶扩增和检测的寡核苷酸组，其包含：含有与seq id no: 17具有至少70%相似性的核酸序列的第一扩增寡核苷酸、含有与seq id no: 19具有至少70%相似性的核酸序列的第二扩增寡核苷酸和含有与seq id no: 18具有至少70%相似性的核酸序列的探针寡核苷酸；或含有与seq id no: 20或21具有至少70%相似性的核酸序列的第一扩增寡核苷酸、含有与seq id no: 25或26具有至少70%相似性的核酸序列的第二扩增寡核苷酸和含有与seq id no: 22-24中的任何一个具有至少70%相似性的核酸序列的探针寡核苷酸；或其组合，其中每个探针寡核苷酸包含可检测标记。2.权利要求1的组，其中第一扩增寡核苷酸包含与seq id no: 20具有至少70%相似性的核酸序列，第二扩增寡核苷酸包含与seq id no: 25具有至少70%相似性的核酸序列，和所述探针寡核苷酸包含与seq id no: 22或23具有至少70%相似性的核酸序列。3.权利要求1的组，其中第一扩增寡核苷酸包含与seq id no: 21具有至少70%相似性的核酸序列，第二扩增寡核苷酸包含与seq id no: 25或26具有至少70%相似性的核酸序列，和所述探针寡核苷酸包含与seq id no: 24具有至少70%相似性的核酸序列。4.权利要求1-3中任何一项的组，其中所述可检测标记为荧光团。5.一种用于检测样品中的sars-cov-2的方法，其包括：使样品与权利要求1-4中任何一项的寡核苷酸组和用于扩增的试剂接触；使用重组酶-聚合酶扩增来扩增所述样品中存在的一个或多个目标sars-cov-2核酸序列；使一个或多个寡核苷酸探针与一个或多个扩增的目标sars-cov-2核酸序列杂交；和通过测量来自所述可检测标记的信号，检测所述一个或多个探针寡核苷酸序列与所述一个或多个扩增的sars-cov-2目标核酸序列的杂交。6.权利要求5的方法，其中来自所述可检测标记的一个或多个信号的存在表明所述一个或多个探针寡核苷酸与所述一个或多个扩增的sars-cov-2目标核酸序列的杂交。7.权利要求5或权利要求6的方法，其进一步包括使来自所述寡核苷酸组的第一和第二扩增寡核苷酸与重组酶剂接触。8.权利要求5-7中任何一项的方法，其中所述用于扩增的试剂选自：聚合酶；重组酶；重组酶负载蛋白；单链结合蛋白；缓冲剂；脱氧核糖核苷三磷酸或核糖核苷三磷酸；群集剂；atp、atp类似物或atp生成系统；或其组合。9.权利要求5-8中任何一项的方法，其中所述样品包含鼻拭子或鼻刷、唾液、粘液、血液、血清、血浆或粪便。10.一种用于检测样品中的sars-cov-2的试剂盒，其包含：至少一个权利要求1-4中任何一项的寡核苷酸组；或包含与seq id no: 17-26具有至少70%相似性的核酸序列的任何寡核苷酸。11.权利要求10的试剂盒，其进一步包含用于扩增和检测核酸序列的试剂和/或使用说明。12.用于扩增和检测样品中的sars-cov-2的寡核苷酸群组，其包含：第一组寡核苷酸，其包含：含有与seq id no: 2具有至少70%相似性的核酸序列的第一
扩增寡核苷酸、含有与seq id no: 4具有至少70%相似性的核酸序列的第二扩增寡核苷酸和含有与seq id no: 6具有至少70%相似性的核酸序列的探针寡核苷酸，其中所述探针寡核苷酸包含可检测标记。13.权利要求12的群组，其进一步包含：第二组寡核苷酸，其包含：含有与seq id no: 11和15中的任何一个具有至少70%相似性的核酸序列的第一扩增寡核苷酸、含有与seq id no: 3具有至少70%相似性的核酸序列的第二扩增寡核苷酸和含有与seq id no: 5具有至少70%相似性的核酸序列的探针寡核苷酸，其中所述探针寡核苷酸包含可检测标记。14.权利要求12或权利要求13的群组，其中所述可检测标记为荧光团。15.一种用于检测样品中的sars-cov-2的方法，其包括：使样品与权利要求12-14中任何一项的寡核苷酸群组和用于扩增的试剂接触；扩增所述样品中存在的一个或多个目标sars-cov-2核酸序列；使一个或多个寡核苷酸探针与一个或多个扩增的目标sars-cov-2核酸序列杂交；和通过测量来自所述可检测标记的信号，检测所述一个或多个探针寡核苷酸序列与所述一个或多个扩增的sars-cov-2目标核酸序列的杂交。16.权利要求15的方法，其中来自所述可检测标记的一个或多个信号的存在表明所述一个或多个探针寡核苷酸与所述一个或多个扩增的sars-cov-2目标核酸序列的杂交。17.权利要求15或权利要求16的方法，其进一步包括使来自所述寡核苷酸组的第一和第二扩增寡核苷酸与重组酶剂接触。18.权利要求15-17中任何一项的方法，其中所述用于扩增的试剂包括：切口酶、聚合酶、单链结合蛋白、重组酶剂、解旋酶、解离酶、酶辅助因子、缓冲剂、脱氧核糖核苷三磷酸或核糖核苷三磷酸或者其组合。19.权利要求15-18中任何一项的方法，其中所述样品包含鼻拭子或鼻刷、唾液、粘液、血液、血清、血浆或粪便。20.一种用于检测样品中的sars-cov-2的试剂盒，其包含：至少一个权利要求12-14中任何一项的寡核苷酸群组；或包含与seq id no: 2-6、11和15具有至少70%相似性的核酸序列的任何寡核苷酸。21.权利要求20的试剂盒，其进一步包含用于扩增和检测核酸序列的试剂和/或使用说明。

技术总结
本公开涉及用于扩增和检测样品中的2019-CoV的材料和方法，其包含扩增寡核苷酸和寡核苷酸探针的各种组合。本公开还涉及用于检测COVID-19的寡核苷酸序列、试剂盒和方法。试剂盒和方法。试剂盒和方法。


技术研发人员：R
受保护的技术使用者：爱奥尼安技术有限责任公司
技术研发日：2021.03.26
技术公布日：2023/9/7