鉴定IL-17途径的调节剂的方法与流程

技术特征：
1.一种鉴定调节白介素-17(il-17)途径的药剂的方法，所述方法包括：a)使细胞与il-17，优选地il-17a，或t细胞条件培养基接触；b)使所述细胞与所述药剂接触；c)将所述细胞与所述il-17或所述t细胞条件培养基和所述药剂一起孵育；d)在孵育步骤后收集细胞上清液；e)检测所述细胞上清液中粒细胞集落刺激因子(g-csf)的水平；以及f)将与所述药剂接触的所述细胞上清液中的所述g-csf水平与对照细胞上清液进行比较，其中与所述对照细胞上清液相比，与所述药剂接触的所述细胞上清液中的所述g-csf水平的调节表明所述药剂能够调节所述il-17途径。2.根据权利要求1所述的方法，其中在所述细胞与所述药剂接触后24小时收集所述细胞上清液。3.根据权利要求1所述的方法，其中g-csf的水平使用抗体来测量。4.根据权利要求1所述的方法，其中g-csf的水平使用均相时间分辨荧光测定来测量。5.根据权利要求1所述的方法，其中所述药剂降低所述细胞上清液中的所述g-csf的水平。6.根据权利要求1所述的方法，还包括a)收集所述细胞；b)在所述孵育步骤后，检测所述细胞中选自defb4a、s100a7a、saa2、ccl20、rnase7、saa4、il-23a、s100a12、defb103a、c15orf48、zc3h12a、saa1、sprr2b、prss22、cxcl1、il-36g、nfkbiz、il-8、plat、cxcl5、pdzk1ip1、rsad2、krt78、slc39a2、csf3、lcn2、sprr3、dhrs9、glul、rhcd、cxcl2、serpinb3和s 100p的一个基因或一组基因的表达水平；c)将与所述药剂接触的所述细胞的所述一个基因或一组基因的所述表达水平与对照细胞进行比较，其中与所述对照细胞相比，与所述药剂接触的所述细胞中的所述一个或多个基因的所述表达水平的调节证实所述药剂能够调节所述il-17途径。7.一种鉴定调节白介素-17(il-17)途径的药剂的方法，所述方法包括：a)使细胞与il-17，优选地il-17a，或t细胞条件培养基接触；b)使所述细胞与所述药剂接触；c)将所述细胞与所述il-17或所述t细胞条件培养基和所述药剂一起孵育，优选地持续6至72小时；d)在所述孵育步骤后收集所述细胞；e)在所述孵育步骤后，检测所述细胞中选自defb4a、s100a7a、saa2、ccl20、rnase7、saa4、il-23a、s100a12、defb103a、c15orf48、zc3h12a、saa1、sprr2b、prss22、cxcl1、il-36g、nfkbiz、il-8、plat、cxcl5、pdzklip1、rsad2、krt78、slc39a2、csf3、lcn2、sprr3、dhrs9、glul、rhcd、cxcl2、serpinb3和s100p的一个基因或包含1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个或更多个基因的组的表达水平；以及f)将与所述药剂接触的所述细胞的所述1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个或更多个基因的所述表达水平与对照细胞进行比较，其中
与所述对照细胞相比，与所述药剂接触的所述细胞的所述一个或多个基因的所述表达水平的调节指示所述药剂能够调节所述il-17途径。8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述方法包括使所述细胞与il-17和所述药剂顺序地接触。9.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述方法包括使所述细胞与il-17和所述药剂同时接触。10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述il-17是重组il-17；优选地重组人il-17a。11.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述t细胞条件培养基是t辅助性17(th17)细胞条件培养基。12.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述方法包括使所述细胞与0.2ng/ml至200ng/ml i1-17接触；优选地，所述方法包括使所述细胞与5ng/ml il-17接触。13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述药剂选自小分子、多肽、抗体和多核苷酸。14.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述药剂是小分子或抗体。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述药剂是小分子。16.根据权利要求14所述的方法，其中所述药剂是抗体。17.根据权利要求13至16中任一项所述的方法，其中所述药剂具有1μm或更小的ic50。18.根据权利要求15所述的方法，其中所述药剂是选自以下结构的il-17ai-1至6及其药学上可接受的盐：
19.根据权利要求1至18中任一项所述的方法，其中所述细胞在所述孵育步骤中与所述il-17和所述药剂一起孵育18至24小时。20.根据权利要求1至19中任一项所述的方法，其中所述细胞是人细胞。21.根据权利要求1至20中任一项所述的方法，其中所述细胞是角质细胞或成纤维细胞，优选地人角质细胞。22.根据权利要求21所述的方法，其中所述方法还包括在使所述细胞与所述il-17接触之前使所述人角质细胞在角质细胞生长培养基中生长，直至达到约70％-90％汇合。23.根据权利要求6至22中任一项所述的方法，其中所述组基因由defb4a、s100a7a、saa2、ccl20、rnase7、saa4、il-23a、s100a12、defb103a、c15orf48、zc3h12a、saa1、sprr2b、prss22、cxcl1、il-36g、nfkbiz、il-8、plat、cxcl5、pdzk1ip1、rsad2、krt78、slc39a2和csf3组成。24.一种用于鉴定白介素-17(il-17)途径的调节剂的试剂盒，所述试剂盒包括a)能够检测一组基因的一组探针，所述组基因包含选自defb4a、s100a7a、saa2、ccl20、rnase7、saa4、il-23a、s100a12、defb103a、c15orf48、zc3h12a、saa1、sprr2b、prss22、cxcl1、il-36g、nfkbiz、il-8、plat、cxcl5、pdzklip1、rsad2、krt78、slc39a2、csf3、lcn2、sprr3、dhrs9、glul、rhcd、cxcl2、serpinb3和s100p的2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个或更多个基因；以及b)用于进行鉴定所述il-17途径调节剂的测定的说明书。25.根据权利要求24所述的试剂盒，其中所述组基因由defb4a、s100a7a、saa2、ccl20、rnase7、saa4、il-23a、s100a12、defb103a、c15orf48、zc3h12a、saa1、sprr2b、prss22、cxcl1、il-36g、nfkbiz、il-8、plat、cxcl5、pdzk1ip1、rsad2、krt78、slc39a2和csf3组成。26.根据权利要求24或25所述的试剂盒，其中所述探针是寡核苷酸。27.根据权利要求24至26中任一项所述的试剂盒在根据权利要求6至23中任一项所述
的方法中的用途。

技术总结
描述了鉴定调节白介素-17(IL-17)途径的药剂的方法。所述方法使用检测细胞上清液中粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的水平和/或检测用药剂治疗的细胞的一个基因或一组基因的表达水平。还描述了能够检测基因或一组基因的探针以及用于鉴定调节该IL-17途径的药剂的试剂盒。盒。盒。


技术研发人员：薛晓华 K
受保护的技术使用者：詹森药业有限公司
技术研发日：2021.04.28
技术公布日：2023/3/3