包封的RNA复制子和使用方法与流程

技术特征：
1.一种重组rna复制子，其包含：小核糖核酸病毒基因组，其中所述小核糖核酸病毒基因组包含在一个或多个蛋白编码区中的缺失或截短；和异源多核苷酸。2.根据权利要求1所述的重组rna复制子，其中所述小核糖核酸病毒基因组包含在一个或多个vp编码区中的缺失或截短。3.根据权利要求1或2所述的重组rna复制子，其中所述小核糖核酸病毒基因组包含在vp1、vp3和vp2编码区中的每一个中的缺失或截短。4.根据权利要求1-3中任一项所述的重组rna复制子，其中所述小核糖核酸病毒基因组包含vp1和vp3编码区的缺失以及vp2编码区的截短。5.根据权利要求1-4中任一项所述的重组rna复制子，其中所述小核糖核酸病毒选自塞内卡病毒、心病毒和肠道病毒。6.根据权利要求1-5中任一项所述的重组rna复制子，其中所述缺失或所述截短包含至少500bp、至少1000bp、至少1500bp、至少2000bp、至少2500bp或至少3000bp。7.根据权利要求6所述的重组rna复制子，其中所述缺失或所述截短包含至少2000bp。8.根据权利要求1-7中任一项所述的重组rna复制子，其中所述缺失的位点或所述截短的位点包含所述异源多核苷酸。9.根据权利要求1-7中任一项所述的重组rna复制子，其中所述异源多核苷酸插入在2a编码区和2b编码区之间。10.根据权利要求1-7中任一项所述的重组rna复制子，其中所述异源多核苷酸插入在3d编码区和3’非翻译区(utr)之间。11.根据权利要求1-10中任一项所述的重组rna复制子，其中所述异源多核苷酸包含至少1000bp、至少2000bp或至少3000bp。12.根据权利要求1-11中任一项所述的重组rna复制子，其中所述小核糖核酸病毒是塞内卡谷病毒(svv)。13.根据权利要求12所述的重组rna复制子，其中所述缺失或所述截短包含根据seq id no:1的编号在核苷酸1261和3477(包括端点)之间的一个或多个核苷酸。14.根据权利要求12所述的重组rna复制子，其中所述缺失或所述截短包含根据seq id no:1的编号的核苷酸1261至3477(包括端点)。15.根据权利要求12或13所述的重组rna复制子，其中所述缺失或所述截短包含至少500bp、至少1000bp、至少1500bp或至少2000bp。16.根据权利要求15所述的重组rna复制子，其中所述缺失或所述截短包含至少2000bp。17.根据权利要求12至16中任一项所述的重组rna复制子，其中所述svv基因组包含5’前导蛋白编码序列。18.根据权利要求12至17中任一项所述的重组rna复制子，其中所述svv基因组包含vp4编码区。19.根据权利要求12至18中任一项所述的重组rna复制子，其中所述svv基因组包含vp2编码区或其截短体。
20.根据权利要求19所述的重组rna复制子，其中所述svv基因组从5’至3’方向包含5’前导蛋白编码序列、vp4编码区和vp2编码区或其截短体。21.根据权利要求20所述的重组rna复制子，其中包含5’前导蛋白编码序列、vp4编码区和vp2编码区或其截短体的svv基因组的部分与seq id no:1的核苷酸1至1260具有至少90％序列同一性。22.根据权利要求20或21所述的重组rna复制子，其中所述svv基因组从5’至3’方向包含5’前导蛋白编码序列、vp4编码区、vp2编码区或其截短体和异源多核苷酸。23.根据权利要求1-22中任一项所述的重组rna复制子，其中所述svv基因组包含顺式作用复制元件(cre)。24.根据权利要求23所述的重组rna复制子，其中所述cre包含10-200bp。25.根据权利要求23或24所述的重组rna复制子，其中所述cre包含在与根据seq id no:1的核苷酸1000至核苷酸1260对应的区域内的一个或多个核苷酸。26.根据权利要求23或24所述的重组rna复制子，其中所述cre包含在与根据seq id no:1的核苷酸1117至核苷酸1260对应的区域内的一个或多个核苷酸。27.根据权利要求23-26中任一项所述的重组rna复制子，其中所述cre包含与seq id no:149具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性的多核苷酸序列。28.根据权利要求12-27中任一项所述的重组rna复制子，其中所述svv基因组进一步包含2a编码区。29.根据权利要求28所述的重组rna复制子，其中所述2a编码区位于vp2编码区或其截短体和异源多核苷酸之间。30.根据权利要求12-29中任一项所述的重组rna复制子，其中所述svv基因组包含2b编码区、2c编码区、3a编码区、3b编码区、3cpro编码区和3d(rdrp)编码区中的一个或多个。31.根据权利要求12-29中任一项所述的重组rna复制子，其中所述svv基因组包含2b编码区、2c编码区、3a编码区、3b编码区、3cpro编码区和3d(rdrp)编码区。32.根据权利要求31所述的重组rna复制子，其中所述svv基因组从5’至3’包含2b编码区、2c编码区、3a编码区、3b编码区、3cpro编码区和3d(rdrp)编码区。33.根据权利要求32所述的重组rna复制子，其中包含2b编码区、2c编码区、3a编码区、3b编码区、3cpro编码区和3d(rdrp)编码区的svv基因组的部分与根据seq id no:1的核苷酸3505至7310具有至少90％序列同一性。34.根据权利要求30-33中任一项所述的重组rna复制子，其中所述svv基因组从5’至3’包含异源多核苷酸和2b编码区。35.根据权利要求1至11中任一项所述的重组rna复制子，其中所述小核糖核酸病毒是柯萨奇病毒。36.根据权利要求35所述的重组rna复制子，其中所述缺失或所述截短包含在根据seq id no:3的编号的核苷酸717至3332(包括端点)之间的一个或多个核苷酸。37.根据权利要求35所述的重组rna复制子，其中所述缺失或所述截短包含根据seq id no:3的编号的核苷酸717至3332(包括端点)。38.根据权利要求35或36所述的重组rna复制子，其中所述缺失或所述截短包含至少
500bp、至少1000bp、至少1500bp、至少2000bp或至少2600bp。39.根据权利要求35至38中任一项所述的重组rna复制子，其中所述柯萨奇病毒基因组包含5’utr。40.根据权利要求35至39中任一项所述的重组rna复制子，其中包含5’utr的柯萨奇病毒基因组的部分与seq id no:4具有至少90％序列同一性。41.根据权利要求35至40中任一项所述的重组rna复制子，其中所述柯萨奇病毒基因组包含2a编码区、2b编码区、2c编码区、3a编码区、3b编码区、vpg编码区、3c编码区、3d pol编码区和3’utr中的一个或多个。42.根据权利要求35至40中任一项所述的重组rna复制子，其中所述柯萨奇病毒基因组包含2a编码区、2b编码区、2c编码区、3a编码区、3b编码区、vpg编码区、3c编码区、3d pol编码区和3’utr。43.根据权利要求42所述的重组rna复制子，其中所述柯萨奇病毒基因组从5’至3’方向包含2a编码区、2b编码区、2c编码区、3a编码区、3b编码区、vpg编码区、3c编码区、3d pol编码区和3’utr。44.根据权利要求42所述的重组rna复制子，其中包含2a编码区、2b编码区、2c编码区、3a编码区、3b编码区、vpg编码区、3c编码区、3d pol编码区和3’utr的柯萨奇病毒基因组的部分与seq id no:3中的核苷酸3492至7435具有至少90％序列同一性。45.根据权利要求41至44中任一项所述的重组rna复制子，其中所述柯萨奇病毒基因组从5’至3’包含5’utr、异源多核苷酸和2a编码区。46.根据权利要求1至11中任一项所述的重组rna复制子，其中所述小核糖核酸病毒是脑心肌炎病毒(emcv)。47.根据权利要求9和11-46中任一项所述的重组rna复制子，其中所述重组rna复制子包含插入在异源多核苷酸和2b编码区之间的内部核糖体进入位点(ires)。48.根据权利要求1至47中任一项所述的重组rna复制子，其中所述异源多核苷酸编码一个或多个有效负载分子。49.根据权利要求1至47中任一项所述的重组rna复制子，其中所述异源多核苷酸编码两个或更多个有效负载分子。50.根据权利要求49所述的重组rna复制子，其中所述两个或更多个有效负载分子通过一个或多个切割多肽可操作地连接。51.根据权利要求50所述的重组rna复制子，其中所述切割多肽包含2a家族自切割肽、3c切割位点、弗林蛋白酶位点、igsf1多肽或hiv蛋白酶位点。52.根据权利要求51所述的重组rna复制子，其中所述切割多肽包含igsf1多肽，并且其中所述igsf1多肽包含与seq id no:75具有至少90％同一性的氨基酸序列。53.根据权利要求51所述的重组rna复制子，其中所述切割多肽包含hiv蛋白酶位点。54.根据权利要求51所述的重组rna复制子，其中所述切割多肽包含2a家族自切割肽。55.根据权利要求50至54中任一项所述的重组rna复制子，其中所述切割多肽包含弗林蛋白酶位点。56.根据权利要求50至55中任一项所述的重组rna复制子，其中所述异源多核苷酸编码包含两个或更多个有效负载分子和切割多肽的多肽，所述多肽从n-端至c-端包含：n
’‑
有效
负载分子1-切割多肽-有效负载分子2-c’。57.根据权利要求53所述的重组rna复制子，其中所述异源多核苷酸进一步包含编码hiv蛋白酶的编码区，并且其中所述异源多核苷酸包含编码多肽的编码区，所述多肽从n-端至c-端包含：n
’‑
有效负载分子1-hiv蛋白酶位点-hiv蛋白酶-hiv蛋白酶位点-有效负载分子2-c’。58.根据权利要求57所述的重组rna复制子，其中所述异源多核苷酸进一步包含编码第三有效负载分子的编码区，并且其中所述异源多核苷酸包含编码多肽的编码区，所述多肽从n-端至c-端包含：n
’‑
有效负载分子1-hiv蛋白酶位点-hiv蛋白酶-hiv蛋白酶位点-有效负载分子2-hiv蛋白酶位点-有效负载分子3-c’。59.根据权利要求56至58中任一项所述的重组rna复制子，进一步包含在所编码的多肽的c-端处的切割多肽。60.根据权利要求48至59中任一项所述的重组rna复制子，其中所述有效负载分子选自荧光蛋白、酶、细胞因子、趋化因子、抗原、能够结合细胞表面受体的抗原结合分子和细胞表面受体的配体。61.根据权利要求48至59中任一项所述的重组rna复制子，其中所述有效负载分子选自：a)一种或多种细胞因子，包含ifnγ、gm-csf、il-2、il-12、il-15、il-18、il-23和il-36γ；b)一种或多种趋化因子，包含cxcl10、ccl4、ccl5和ccl21；c)一种或多种抗体，包含抗-pd1-vhh-fc抗体、抗-cd47-vhh-fc抗体和抗-tgfβ-vhh(或scfv)-fc抗体；d)一种或多种双组分多肽，包含结合dll3和效应细胞靶抗原的双组分多肽、结合fap和效应细胞靶抗原的双组分多肽、以及结合epcam和效应细胞靶抗原的双组分多肽；e)一种或多种肿瘤相关抗原，包含存活素、mage家族蛋白和根据表6的所有抗原；f)一种或多种肿瘤新抗原；g)一种或多种结合mhc-肽抗原复合物的双组分多肽；h)一种或多种促融合蛋白，包含单纯疱疹病毒(hsv)ul27/糖蛋白b/gb，hsv ul53/糖蛋白k/gk，呼吸道合胞体病毒(rsv)f蛋白，fastp15，vsv-g，syncitin-1(来自人内源性逆转录病毒-w(herv-w))或syncitin-2(来自hervfrde1)，副粘病毒sv5-f，麻疹病毒-h，麻疹病毒-f，以及来自逆转录病毒或慢病毒诸如长臂猿白血病病毒(galv)、鼠白血病病毒(mlv)、mason-pfizer猴病毒(mpmv)和马传染性贫血病毒(eiav)的糖蛋白，任选地除去了r跨膜肽(r-版本)；i)一种或多种其它有效负载分子，包含il15r、pgdh、ada、ada2、hyal1、hyal2、chips、mlkl(或仅它的4hb结构域)、gsdmd(或它的l192a突变体、或它的氨基酸1-233片段、或它的具有l192a突变的氨基酸1-233片段)、gsdme(或它的氨基酸1-237片段)、hmgb1(或仅它的box b结构域)、蜂毒肽(例如，α-蜂毒肽)、smac/diablo(或它的氨基酸56-239片段)、蛇laao、蛇解聚素、瘦素、flt3l、trail、gasdermin d或其截短体和gasdermin e或其截短体；j)一种或多种来自病原体的抗原，所述病原体包含登革热病毒、切昆贡亚病毒、结核分
枝杆菌、人免疫缺陷病毒、sars-cov-2、冠状病毒、乙型肝炎病毒、披膜病毒科病毒、黄病毒科病毒、甲型流感病毒、流感b病毒和兽医病毒；或k)它们的任意组合。62.根据权利要求49至59中任一项所述的重组rna复制子，其中所述两个或更多个有效负载分子选自荧光蛋白、酶、细胞因子、趋化因子、能够结合细胞表面受体的抗原结合分子和细胞表面受体的配体。63.根据权利要求49至59中任一项所述的重组rna复制子，其中所述异源多核苷酸编码两个或更多个有效负载分子，其包含：a.il-2和il-36γ；b.cxcl10以及结合fap和cd3的抗原结合分子；c.il-2以及结合dll3和cd3的抗原结合分子；d.il-36γ以及结合dll3和cd3的抗原结合分子；或e.il-2、il-36γ以及结合dll3和cd3的抗原结合分子。64.根据权利要求1至63中任一项所述的重组rna复制子，进一步包含微rna(mirna)靶序列(mir-ts)盒，其包含一个或多个mirna靶序列。65.根据权利要求64所述的重组rna复制子，其中所述一个或多个mirna包含mir-124、mir-1、mir-143、mir-128、mir-219、mir-219a、mir-122、mir-204、mir-217、mir-137和mir-126。66.一种重组dna分子，其从5’至3’包含启动子序列、5’连接切割序列、编码根据权利要求1至65中任一项所述的重组rna复制子的多核苷酸序列和3’连接切割序列。67.根据权利要求66所述的重组dna分子，其中所述启动子序列是t7启动子序列。68.根据权利要求66或67所述的重组dna分子，其中所述5’连接切割序列是核酶序列并且所述3’连接切割序列是核酶序列。69.根据权利要求68所述的重组dna分子，其中所述5’核酶序列是锤头核酶序列并且其中所述3’核酶序列是丁型肝炎病毒核酶序列。70.根据权利要求66或67所述的重组dna分子，其中所述5’连接切割序列是核酶序列并且所述3’连接切割序列是限制性酶识别序列。71.根据权利要求70所述的重组dna分子，其中所述5’核酶序列是锤头核酶序列、手枪核酶序列或经修饰的手枪核酶序列。72.根据权利要求70或71所述的重组dna分子，其中3’限制性酶识别序列是iis型限制性酶识别序列。73.根据权利要求72所述的重组dna分子，其中所述iis型识别序列是sapi识别序列。74.根据权利要求66或67所述的重组dna分子，其中所述5’连接切割序列是rna酶h引物结合序列并且所述3’连接切割序列是限制性酶识别序列。75.一种生产根据权利要求1-65中任一项所述的重组rna复制子的方法，所述方法包含体外转录根据权利要求66-74中任一项所述的dna分子和纯化得到的重组rna复制子。76.一种组合物，其包含有效量的根据权利要求1-65中任一项所述的重组rna复制子和适用于施用给哺乳动物受试者的载体。77.一种载体，其包含根据权利要求1-65中任一项所述的重组rna复制子。
78.根据权利要求77所述的载体，其中所述载体是病毒载体。79.根据权利要求77所述的载体，其中所述载体是非病毒载体。80.一种颗粒，其包含根据权利要求1-65中任一项所述的重组rna复制子。81.根据权利要求80所述的颗粒，其中所述颗粒选自纳米颗粒、外泌体、脂质体和脂质体复合物。82.根据权利要求81所述的颗粒，其中所述纳米颗粒是脂质纳米颗粒(lnp)，其包含阳离子脂质、一种或多种辅助脂质和磷脂-聚合物缀合物。83.根据权利要求82所述的颗粒，其中所述阳离子脂质选自dlindma、dlin-kc2-dma、dlin-mc3-dma(mc3)、ss-lc(以前名称:ss-18/4pe-13)、ss-ec(以前名称:ss-33/4pe-15)、ss-oc、ss-op、9-((4-二甲基氨基)丁酰基)氧基)十七烷二酸二((z)-壬-2-烯-1-基)酯(l-319)或n-(2,3-二油酰氧基)丙基)-n,n,n-三甲基氯化铵(dotap)。84.根据权利要求82或83所述的颗粒，其中所述辅助脂质选自1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dspc)；1,2-二月桂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(dlpe)；1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dopc)；1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(dope)；和胆固醇。85.根据权利要求82所述的颗粒，其中所述阳离子脂质是1,2-二油酰基-3-三甲基铵-丙烷(dotap)，并且其中中性脂质是1,2-二月桂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(dlpe)或1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(dope)。86.根据权利要求82-85中任一项所述的颗粒，其中所述peg-脂质选自1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-n-[氨基(聚乙二醇)](dspe-peg)；1,2-二棕榈酰基-消旋-甘油甲氧基聚乙二醇(dpg-peg)；1,2-二硬脂酰基-消旋-甘油-3-甲基聚氧乙烯(dsg-peg)；1,2-二硬脂酰基-消旋-甘油-3-甲基聚氧乙烯(dsg-peg)；1,2-二肉豆蔻酰基-消旋-甘油-3-甲基聚氧乙烯(dmg-peg)；和1,2-二肉豆蔻酰基-消旋-甘油-3-甲基聚氧乙烯(dmg-peg),或1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-n-[氨基(聚乙二醇)](dspe-peg-胺)。87.根据权利要求82-86中任一项所述的颗粒，其中所述peg-脂质选自1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-n-[氨基(聚乙二醇)-5000](dspe-peg5k)；1,2-二棕榈酰基-消旋-甘油甲氧基聚乙二醇-2000(dpg-peg2k)；1,2-二硬脂酰基-消旋-甘油-3-甲基聚氧乙烯-5000(dsg-peg5k)；1,2-二硬脂酰基-消旋-甘油-3-甲基聚氧乙烯-2000(dsg-peg2k)；1,2-二肉豆蔻酰基-消旋-甘油-3-甲基聚氧乙烯-5000(dmg-peg5k)；和1,2-二肉豆蔻酰基-消旋-甘油-3-甲基聚氧乙烯-2000(dmg-peg2k)。88.根据权利要求82所述的颗粒，其中所述阳离子脂质包含ss-oc，其中所述一种或多种辅助脂质包含胆固醇(chol)和dspc，并且其中所述磷脂-聚合物缀合物包含dpg-peg2000。89.根据权利要求88所述的颗粒，其中ss-oc:dspc:chol:dpg-peg2k(作为总脂质含量的百分比)的比率是a:b:c:d，其中：a.a＝40％-60％，b＝10％-25％，c＝20％-30％，且d＝0％-3％并且其中a b c d＝100％；b.a＝45％-50％，b＝20％-25％，c＝25％-30％，且d＝0％-1％并且其中a b c d＝100％
c.a＝40％-60％，b＝10％-30％，c＝20％-45％，且d＝0％-3％并且其中a b c d＝100％；d.a＝40％-60％，b＝10％-30％，c＝25％-45％，且d＝0％-3％并且其中a b c d＝100％；e.a＝45％-55％，b＝10％-20％，c＝30％-40％，且d＝1％-2％并且其中a b c d＝100％；f.a＝45％-50％，b＝10％-15％，c＝35％-40％，且d＝1％-2％并且其中a b c d＝100％；g.a＝45％-65％，b＝5％-20％，c＝20％-45％，且d＝0％-3％并且其中a b c d＝100％；h.a＝50％-60％，b＝5％-15％，c＝30％-45％，且d＝0％-3％并且其中a b c d＝100％；i.a＝55％-60％，b＝5％-15％，c＝30％-40％，且d＝1％-2％并且其中a b c d＝100％；j.a＝55％-60％，b＝5％-10％，c＝30％-35％，且d＝1％-2％并且其中a b c d＝100％。90.根据权利要求88所述的颗粒，其中ss-oc:dspc:chol:dpg-peg2k(作为总脂质含量的百分比)的比率是：a.约49:22:28.5:0.5；b.约49:11:38.5:1.5；或c.约58:7:33.5:1.5。91.根据权利要求88所述的颗粒，其中ss-oc:dspc:chol:dpg-peg2k(作为总脂质含量的百分比)的比率是约49:22:28.5:0.5。92.根据权利要求82所述的颗粒，其中所述阳离子脂质是1,2-二油酰基-3-三甲基铵-丙烷(dotap)，并且其中中性脂质是1,2-二月桂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(dlpe)或1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(dope)。93.根据权利要求82或92所述的颗粒，所述颗粒进一步包含peg-脂质，其中所述peg-脂质是1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-聚(乙二醇)(dspe-peg)或1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-n-[氨基(聚乙二醇)](dspe-peg-胺)。94.根据权利要求80-93中任一项所述的颗粒，所述颗粒进一步包含编码溶瘤病毒的第二重组rna分子。95.根据权利要求94所述的颗粒，其中所述溶瘤病毒是小核糖核酸病毒。96.根据权利要求95所述的颗粒，其中所述小核糖核酸病毒选自塞内卡病毒、心病毒和肠道病毒。97.根据权利要求95所述的颗粒，其中所述小核糖核酸病毒是塞内卡谷病毒(svv)。98.根据权利要求95所述的颗粒，其中所述小核糖核酸病毒是柯萨奇病毒。99.根据权利要求95所述的颗粒，其中所述小核糖核酸病毒是脑心肌炎病毒(emcv)。100.一种治疗组合物，其包含多个根据权利要求82-99中任一项所述的脂质纳米颗粒。101.根据权利要求100所述的治疗组合物，其中所述多个lnp具有约50nm至约120nm的
平均大小。102.根据权利要求100所述的治疗组合物，其中所述多个lnp具有约100nm的平均大小。103.根据权利要求100-102中任一项所述的治疗组合物，其中所述多个lnp具有约20mv至约-20mv、约10mv至约-10mv、约5mv至约-5mv、或约20mv至约-40mv、-50mv至约-20mv、约-40mv至约-20mv、或约-30mv至约-20mv之间的平均ζ电位。104.根据权利要求103所述的治疗组合物，其中所述多个lnp具有约-30mv、约-31mv、约-32mv、约-33mv、约-34mv、约-35mv、约-36mv、约-37mv、约-38mv、约-39mv或约-40mv的平均ζ电位。105.一种杀死癌细胞的方法，所述方法包含将所述癌细胞暴露于根据权利要求80-97中任一项所述的颗粒、根据权利要求77-79中任一项所述的载体、根据权利要求1-65中任一项所述的重组rna复制子、或其组合物。106.根据权利要求105所述的方法，其中在体内、在体外或离体执行所述方法。107.一种治疗受试者中的癌症的方法，所述方法包含给遭受癌症的受试者施用有效量的根据权利要求80-97中任一项所述的颗粒、根据权利要求77-79中任一项所述的载体、根据权利要求1-65中任一项所述的重组rna复制子、或其组合物。108.根据权利要求107所述的方法，其中将所述颗粒、所述重组rna复制子或其组合物静脉内地、鼻内地、作为吸入剂施用，或直接注射进肿瘤中。109.根据权利要求107或108所述的方法，其中将所述颗粒、所述重组rna复制子或其组合物重复施用给所述受试者。110.根据权利要求107-109中任一项所述的方法，其中所述受试者是小鼠、大鼠、兔、猫、狗、马、非人灵长类动物或人。111.根据权利要求107-110中任一项所述的方法，其中所述癌症选自肺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宫颈癌、前列腺癌、睾丸癌、结肠直肠癌、结肠癌、胰腺癌(例如，阉割抗性的神经内分泌前列腺癌)、肝癌、胃癌、头颈癌、甲状腺癌、恶性神经胶质瘤、胶质母细胞瘤、黑色素瘤、b-细胞慢性淋巴细胞性白血病、弥漫性大b细胞性淋巴瘤(dlbcl)、肉瘤、神经母细胞瘤、神经内分泌癌、横纹肌肉瘤、髓母细胞瘤、膀胱癌、边缘区淋巴瘤(mzl)、梅克尔细胞癌和肾细胞癌。112.根据权利要求111所述的方法，其中：a.所述肺癌是小细胞肺癌或非小细胞肺癌；b.所述肝癌是肝细胞癌(hcc)；和/或c.所述前列腺癌是治疗引发的神经内分泌前列腺癌。113.根据权利要求1111所述的方法，其中所述癌症是神经内分泌癌。114.一种针对疾病免疫受试者的方法，所述方法包含给所述受试者施用有效量的根据权利要求80-97中任一项所述的颗粒、根据权利要求77-79中任一项所述的载体、根据权利要求1-65中任一项所述的重组rna复制子、或其组合物。115.根据权利要求114所述的方法，其中将所述颗粒、所述重组rna复制子或其组合物静脉内地、肌肉内地、真皮内地、鼻内地或作为吸入剂施用。116.根据权利要求114或115所述的方法，其中将所述颗粒、所述重组rna复制子或其组合物重复施用给所述受试者。
117.根据权利要求114至116中任一项所述的方法，其中所述疾病是传染性疾病。118.根据权利要求117所述的方法，其中所述传染性疾病由病原体之一造成，所述病原体包含登革热病毒、切昆贡亚病毒、结核分枝杆菌、人免疫缺陷病毒、sars-cov-2、冠状病毒、乙型肝炎病毒、披膜病毒科病毒、黄病毒科病毒、甲型流感病毒、流感b病毒和兽医病毒。119.一种重组rna复制子，其包含小核糖核酸病毒基因组和异源多核苷酸。120.根据权利要求119所述的重组rna复制子，其中所述异源多核苷酸插入在2a编码区和2b编码区之间。121.根据权利要求119所述的重组rna复制子，其中所述异源多核苷酸插入在5’utr和2a编码区之间。122.根据权利要求119所述的重组rna复制子，其中所述异源多核苷酸插入在3d编码区和3’utr之间。123.根据权利要求119-122中任一项所述的重组rna复制子，其中所述小核糖核酸病毒选自塞内卡病毒、心病毒和肠道病毒。

技术总结
本公开内容涉及溶瘤病毒衍生出的复制子及其衣壳化。本公开内容还涉及一个或多个编码有效负载分子的转基因向所述复制子中的掺入。本公开内容进一步涉及将编码溶瘤病毒的复制子和/或重组RNA分子包封到颗粒中以及所述复制子和/或颗粒用于治疗和预防癌症的用途。制子和/或颗粒用于治疗和预防癌症的用途。制子和/或颗粒用于治疗和预防癌症的用途。


技术研发人员：洛伦娜
受保护的技术使用者：昂克诺斯公司
技术研发日：2021.05.28
技术公布日：2023/1/31