酒精、凉味剂和有机酸的组合物在制备降血压及改善绝经期女性激素水平的组合物上的用途的制作方法

1.本发明属于医药及食品领域，具体涉及酒精、凉味剂和有机酸的组合物在制备降低轻中度高血压人群血压及改善绝经期女性激素水平的药品、食品或保健品上的用途。


背景技术：

2.大多数人忙于工作，压力大，社交场合经常过量饮酒，又缺乏锻炼，随着生活和工作压力的不断增加，会导致很多疾病发生，比如血压升高、性激素水平减退等问题。大量研究显示长期过量饮酒会导致血压升高。虽然可以通过药物等治疗手段得到缓解，但是由于部分人需要社交难以避免饮酒，因此，通过药物治疗高血压的效果会大打折扣。
3.绝经期是女性一生中生理变化的重要时期，女性进入绝经期后卵巢功能逐渐衰退，内分泌功能开始降低，至月经停止后卵巢内分泌功能消失，从而进入衰老阶段。女性激素与生长、发育、衰老同步。绝经后期女性健康问题更多体现在各种组织器官退行性改变，出现更年期症状以及绝经后的一系列衰老症状，包括骨质疏松症、心脑血管疾病、认知功能障碍，白内障、一些癌症等。同时还会出现一系列自主神经失调的现象，如心悸、眩晕、头疼、失眠、耳鸣。有些人还会出现神经精神症状，如注意力不集中、情绪激动、情绪波动大、易怒、焦虑不安或者是情绪低落、抑郁、不能自我控制、记忆力减退等。
4.女性进入绝经期，下丘脑-垂体-卵巢轴(hpoa)功能呈渐进性衰退，雌二醇(e2)分泌渐少至消失，睾酮(t)仍有分泌，卵泡生成素(fsh)、黄体生成素(lh)分泌逐渐升高。绝经过渡期晚期和绝经期lh和fsh较生育期显著上升。
5.而伴随着性激素水平减退导致的一系列躯体症状和神经精神症状问题，如心悸、眩晕、头疼、失眠、耳鸣、注意力不集中、情绪激动易怒、焦虑不安或者是情绪低落、记忆力减退问题等在医院检查大多数无法得到有效治疗及改善，部分人一般也会采用食疗或服用保健品的方式进行改善，但这些方式并不能短期内有效缓解，且食疗及保健品服用时间较长，见效慢，难以坚持。


技术实现要素：

6.本发明提供酒精、凉味剂和有机酸的组合物在制备降低轻中度高血压人群血压及改善绝经期女性激素水平的药品、食品或保健品上的用途。
7.进一步地，所述组合物酒精含量为1～99％vol，凉味剂含量为0.05～500ppm，有机酸含量为150～30000ppm。
8.优选地，所述组合物酒精含量为30～80％vol，凉味剂含量为10～200ppm，有机酸含量为1000～10000ppm。
9.更优选地，所述组合物酒精含量为30～60％vol，凉味剂含量为10～100ppm，有机酸含量为1000～6000ppm。
10.进一步地，所述凉味剂为具有激活温度感受器trpm8受体的物质。包括乙酸薄荷
酯、乳酸l-薄荷酯、丁二酸单薄荷酯、戊二酸单l-薄荷醇酯、l-薄荷醇乙二醇碳酸酯、l-薄荷醇丙二醇碳酸酯、3-l-薄荷烷氧基-1,2-丙二醇、3-(l-薄荷烷氧基)-2-甲基-1,2-丙二醇、n-乙基-2-异丙基-5-甲基-环己烷甲酰胺、n,2,3-三甲基-2-异丙基丁酰胺、薄荷脑或薄荷酮中的至少一种。
11.进一步地，所述有机酸为甲酸、乙酸、丙酸、乳酸、丁酸、丁二酸、戊酸、己酸、庚酸、辛酸、壬酸、癸酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸、草酸、油酸、亚油酸、棕榈酸或月桂酸中的至少一种。
12.有益效果：本发明通过将凉味剂、有机酸添加到一定酒精浓度的酒基中，或采用含有薄荷醇的天然植物(如薄荷、留兰香等)在各种酒发酵的各个阶段参与发酵得到的凉味剂，并且通过勾调或纯化等手段控制凉味剂、有机酸与酒精含量，制备出了具有降低轻中度高血压人群血压及改善绝经期女性激素水平的组合物。本发明的组合物通过激活副交感神经信号通路在7～14天内就能发挥降低轻中度高血压人群血压及改善绝经期女性激素水平作用，从而很大程度上解决一般食疗和保健品不能够在短期内降低轻中度高血压人群血压及改善绝经期女性激素水平等问题，使机体得到保护、休整和恢复。本发明组合物可运用于医药、食品和保健品领域。
具体实施方式
13.人体是个复杂的系统，通过各种调节作用来维持身体机能平衡，而非单一的进行某一种调节作用。本发明提供酒精、凉味剂和有机酸的组合物在制备降低轻中度高血压人群血压及改善绝经期女性激素水平的药品、食品或保健品上的用途。进一步地，所述组合物酒精含量为1～99％vol，凉味剂含量为0.05～500ppm，有机酸含量为150～30000ppm。优选地，所述组合物酒精含量为30～80％vol，凉味剂含量为10～200ppm，有机酸含量为1000～10000ppm。更优选地，所述组合物酒精含量为30～60％vol，凉味剂含量为10～100ppm，有机酸含量为1000～6000ppm。。
14.本发明的酒精来源为蒸馏酒、发酵酒或食用酒精中的至少一种。
15.其中，所述蒸馏酒为白酒、白兰地、威士忌、伏特加、朗姆酒、杜松子酒、龙舌兰或水果蒸馏酒中的至少一种。
16.其中，所述发酵酒为黄酒、啤酒、葡萄酒、果酒、清酒或奶酒中的至少一种。
17.其中，所述凉味剂为具有激活温度感受器trpm8受体的物质，包括乙酸薄荷酯、乳酸l-薄荷酯、丁二酸单薄荷酯、戊二酸单l-薄荷醇酯、l-薄荷醇乙二醇碳酸酯、l-薄荷醇丙二醇碳酸酯、3-l-薄荷烷氧基-1,2-丙二醇、3-(l-薄荷烷氧基)-2-甲基-1,2-丙二醇、n-乙基-2-异丙基-5-甲基-环己烷甲酰胺、n,2,3-三甲基-2-异丙基丁酰胺、薄荷脑或薄荷酮中的至少一种。
18.其中，所述有机酸为甲酸、乙酸、丙酸、乳酸、丁酸、丁二酸、戊酸、己酸、庚酸、辛酸、壬酸、癸酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸、草酸、油酸、亚油酸、棕榈酸或月桂酸中的至少一种。
19.本发明组合物还包括调节酒精浓度的水。
20.本发明组合物的制备方法，包括以下步骤：凉味剂先溶解于酒精中，再加入有机酸，最后加入水混合均匀，即可。
21.试验结果显示，健康成年人在7～14天的短时间内单独饮用一定剂量的酒精、凉味
剂或有机酸，对降低轻中度高血压人群血压及改善绝经期女性激素水平均没有明显影响。短时间内饮用一定剂量凉味剂和有机酸组合物，以及饮用一定剂量酒精和有机酸组合物，对降低轻中度高血压人群血压及改善绝经期女性激素水平也没有明显影响。但在短时间内饮用一定剂量的酒精、凉味剂和有机酸组合物前后，对降低轻中度高血压人群血压及改善绝经期女性激素水平均有明显改善。
22.本技术中的组合物对人体降低轻中度高血压人群血压及改善绝经期女性激素水平，主要与人体对该组合物中的酒精、凉味剂和有机酸的摄入量有关。考虑到人体对口感的适应及酒精的耐受度，所述组合物的摄入量可以根据组合物中的酒精含量、凉味剂的含量、有机酸含量而定。当组合物中的酒精含量、凉味剂、有机酸的含量低时，可加大组合物摄入量，使得酒精、凉味剂、有机酸的摄入量提高，从而起到降低轻中度高血压人群血压及改善绝经期女性激素水平的作用；当组合物中的酒精含量、凉味剂、有机酸的含量高时，可将组合物用水稀释后饮用，以满足人体对口感的适应及酒精的耐受度的不同要求，同样也能达到降低轻中度高血压人群血压及改善绝经期女性激素水平的效果。
23.表a为推荐的摄入量范围。
24.表a组合物推荐摄入量范围
[0025][0026][0027]
临床研究显示，长期过量摄入酒精可导致血压升高，严重的还会导致心血管疾病的发病和酒精性肝病，甚至发展成肿瘤，对机体免疫系统也有明显影响。研究显示长期大量饮酒可导致大鼠性功能障碍，其产生原因与酒精抑制下丘脑、垂体和性腺轴，降低血清水平而直接抑制大鼠性功能。研究显示长期摄入乙醇大鼠动脉血压水平升高(p＜0.01)，乙醇可能通过抑制β羟化固醇脱氢酶2型参与了高血压的发病过程。
[0028]
研究发现，薄荷醇衍生物可缩短睡眠潜伏期，可拮抗硫代氨基脲的中枢兴奋作用，促进睡眠，改善睡眠质量；同时，l-薄荷醇及其衍生物可明显抑制大鼠海马区谷氨酸受体和乙酰胆碱酯酶的表达量从而改善大鼠的认知能力，提高记忆力，也有研究显示l-薄荷醇及其衍生物对机体具有抗抑郁、抗惊厥和催眠作用。研究人员发现了几种薄荷醇衍生物能激活trpm8，并且它们比薄荷醇具有更高的效能和特异性，具有很大的开发潜力。研究显示，激活trpm8能改善血管张力和预防高血压。
[0029]
有机酸能够调节细胞的免疫系统，诱导宿主细胞产生抗菌肽，达到间接抑菌作用，从而提供机体免疫力，同时有研究报道琥珀酸在大鼠海马cai区对gaba和glu神经递质系统均有调节作用，其可能通过以钙离子为核心的调节机制作用于gaba系统。
[0030]
本发明首次研究了酒精、凉味剂、有机酸的组合物对降低轻中度高血压人群血压
4,5-二磷酸(pip2)，水解生成两种第二信使三磷酸肌醇(ip3)和二酯酰甘油(dag)。m3受体广泛存在于细胞内质网膜上，它是一种能引发内钙释放的通道蛋白，能与ip3结合，引发细胞内钙释放，导致内钙水平的升高，从而启动细胞内钙信号系统，通过依赖钙离子的钙调素等酶类活性的变化来调控一系列的生理过程，例如离子通道功能、细胞周期、腺体分泌等、平滑肌收缩、血管舒张、生殖器勃起。因此m3受体通过plc/pip2/ip3信号通路实现副交感神经的兴奋效应。
[0038]
通过试验发现，本发明组合物可以使毒蕈碱乙酰胆碱受体(m3受体)表达量增加和提高plc/pip2/ip3信号通路中的plc和ip3含量，说明该组合物降低轻中度高血压人群血压及改善绝经期女性激素水平等作用是通过副交感神经信号通路来调节的。
[0039]
下面将通过具体实施例对本发明的实施方式做进一步的解释说明，但不表示将本发明的保护范围限制在实施例所述范围内。
[0040]
实施例1本发明组合物1的制备
[0041]
组合物配方为：凉味剂为乙酸薄荷酯、乳酸l-薄荷酯、丁二酸单薄荷酯按重量比4:4:2配制而成，含量为0.05ppm；有机酸为乙酸、乳酸、丙酸和丁酸按重量比15:10:1:1配比而成，调配后使得有机酸含量为150ppm；酒基为酒精度为4.5％vol的啤酒，再用纯化水调配，使得组合物的最终酒精含量为1％vol，制得组合物1。
[0042]
实施例2本发明组合物2的制备
[0043]
组合物配方为：凉味剂为乙酸薄荷酯、丁二酸单薄荷酯、戊二酸单l-薄荷醇酯和n-乙基-2-异丙基-5-甲基-环己烷甲酰胺按重量比5:3:4:3配制而成，含量为10ppm；有机酸为乙酸、乳酸、丁二酸、戊酸和庚酸按重量比7:5:2:1:1配比而成，调配后使得有机酸含量为1000ppm，酒基为酒精度为40％vol的威士忌，再用纯化水调配，使得组合物的最终酒精度为30％vol，制得组合物2。
[0044]
实施例3本发明组合物3的制备
[0045]
组合物配方为：凉味剂为n,2,3-三甲基-2-异丙基丁酰胺、乳酸l-薄荷酯、丁二酸单薄荷酯、l-薄荷醇乙二醇碳酸酯按重量比5:1:1:3配制而成，含量为100ppm；有机酸为甲酸、乙酸、乳酸、丙酸、辛酸、壬酸和癸酸按重量比1:10:5:1:1:1:1配比而成，调配后使得有机酸含量为6000ppm，酒基为酒精度为60％vol的白酒，制得组合物3。
[0046]
实施例4本发明组合物4的制备
[0047]
组合物配方为：凉味剂为丁二酸单薄荷酯、戊二酸单l-薄荷醇酯和n-乙基-2-异丙基-5-甲基-环己烷甲酰胺按重量比1:2:1配制而成，含量为200ppm；有机酸为乙酸、丙酸、柠檬酸、苹果酸和酒石酸按重量比5:1:2:1:1配比而成，调配后使得有机酸含量为10000ppm，酒基为酒精度为12％vol的黄酒，再用食用酒精调配，使得组合物的最终酒精度为80％vol，制得组合物4。
[0048]
实施例5本发明组合物5的制备
[0049]
组合物配方为：凉味剂为n,2,3-三甲基-2-异丙基丁酰胺、3-l-薄荷烷氧基-1,2-丙二醇、l-薄荷醇丙二醇碳酸酯、戊二酸单l-薄荷醇酯按重量比4:2:3:1配制而成，含量为500ppm；将有机酸乳酸、丙酸、己酸、柠檬酸和苹果酸按重量比4:1:1:3:2配比而成，调配后使得有机酸含量为30000ppm，酒基为99％vol的脱水食用酒精，制得组合物5。
[0050]
实施例6本发明组合物6的制备
[0051]
组合物配方为：凉味剂为乙酸薄荷酯、乳酸l-薄荷酯、n,2,3-三甲基-2-异丙基丁酰胺按重量比5:1:2配制而成，含量为50ppm；将有机酸乙酸、己酸、柠檬酸和苹果酸按重量比3:1:4:2配比而成，调配后使得有机酸含量为3000ppm，酒基为酒精度50％vol的白酒，制得组合物6。
[0052]
实施例7本发明组合物7的制备
[0053]
组合物配方为：凉味剂为乙酸薄荷酯、乳酸l-薄荷酯、丁二酸单薄荷酯按重量比4:4:1配制而成，含量为150ppm；将有机酸乙酸、乳酸、丁二酸和酒石酸按重量比5:4:1:2配比，调配后使得有机酸含量为8000ppm，酒基为酒精度70％vol的食用酒精，制得组合物7。
[0054]
对比例1低酒精度的组合物8的制备
[0055]
组合物配方为：凉味剂为乙酸薄荷酯、乳酸l-薄荷酯、丁二酸单薄荷酯按重量比4:4:1配制而成，含量为5ppm；有机酸为乙酸、乳酸、丁酸和己酸按重量比10:10:1:1配比而成，调配后使得有机酸含量为500ppm，酒基为15％vol的清酒用纯水稀释到0.5％vol，制得组合物8。
[0056]
对比例2低凉味剂的组合物9的制备
[0057]
组合物配方为：凉味剂为丁二酸单薄荷酯、戊二酸单l-薄荷醇酯和n-乙基-2-异丙基-5-甲基-环己烷甲酰胺按重量比1:5:2配制而成，含量为0.04ppm；有机酸为乙酸、乳酸、丙酸、戊酸和庚酸按重量比7:5:1:1:1配比而成，调配后使得有机酸含量为2000ppm，酒基为酒精度为53％vol的酱香型白酒，制得组合物9。
[0058]
实施例8低酸度的组合物10的制备
[0059]
组合物配方为：凉味剂为n,2,3-三甲基-2-异丙基丁酰胺、乳酸l-薄荷酯、丁二酸单薄荷酯、l-薄荷醇乙二醇碳酸酯按重量比4:2:3:1配制而成，含量为50ppm；有机酸为乙酸、乳酸、辛酸、壬酸和癸酸按重量比6:5:1:1:1配比而成，调配后使得有机酸含量为100ppm，酒基为酒精度50％vol的食用酒精，制得组合物10。
[0060]
对比例3无酒精的组合物11的制备
[0061]
组合物配方为：凉味剂为n,2,3-三甲基-2-异丙基丁酰胺、戊二酸单l-薄荷醇酯、丁二酸薄荷酯、l-薄荷醇乙二醇碳酸酯按重量比3:2:3:1配制而成，含量为5ppm；有机酸为乙酸、乳酸、丙酸、柠檬酸和酒石酸按重量比5:5:1:2:1配比而成，调配后使得有机酸含量为1000ppm，用纯水进行稀释得到无酒精度样品，制得组合物11。
[0062]
对比例4无凉味剂的组合物12的制备
[0063]
组合物配方为：将有机酸乙酸、丁二酸、己酸、柠檬酸和苹果酸按重量比5:1:1:5:4配比而成，调配后使得有机酸含量为2000ppm，酒基为酒精度为53％vol的酱香型白酒，制得组合物12。
[0064]
对比例5无有机酸的组合物13的制备
[0065]
组合物配方为：凉味剂为n,2,3-三甲基-2-异丙基丁酰胺、3-l-薄荷烷氧基-1,2-丙二醇、l-薄荷醇丙二醇碳酸酯、戊二酸单l-薄荷醇酯按重量比4:2:2:1配制而成，含量为100ppm；酒基为酒精度60％vol的食用酒精，制得组合物13。
[0066]
对比例6无有机酸的组合物14的制备
[0067]
组合物配方为：凉味剂为乙酸薄荷酯、丁二酸单薄荷酯、薄荷醇、薄荷酮按重量比10:8:2:1配制而成，含量为0.05ppm；酒基为酒精度为1％vol的食用酒精，制得组合物14。
[0068]
对比例7无有机酸的组合物15的制备
[0069]
组合物配方为：凉味剂为乙酸薄荷酯、乳酸l-薄荷酯、丁二酸单薄荷酯、戊二酸单l-薄荷醇酯、l-薄荷醇乙二醇碳酸酯按重量比4:1:1:1:2配制而成，含量为10ppm；酒基为酒精度30％vol的食用酒精，制得组合物15。
[0070]
对比例8无有机酸的组合物16的制备
[0071]
组合物配方为：凉味剂为3-l-薄荷氧基-2-甲基-1,2-二羟基丙烷、n-乙基-2-异丙基-5-甲基-环己烷甲酰胺、2-异丙基-n-2，3-三甲基丁酰胺按重量比1:3:1配制而成，含量为500ppm；酒基为酒精度99％vol的食用酒精，制得组合物16。
[0072]
上述组合物中的酒精、凉味剂和有机酸量如表b所示。
[0073]
表b不同组合物中的酒精、凉味剂和有机酸量
[0074]
组合物酒精含量/％vol凉味剂含量/ppm有机酸含量/ppm110.0515023010100036010060004802001000059950030000650503000770150800080.555009530.04200010505010011-510001253-20001360100-1410.05-153010-1699500-[0075]
效果验证
[0076]
对实施例和对比例制备的组合物各项指标进行轻中度高血压人群血压及绝经期女性激素水平作用效果评定。具体方法如下：
[0077]
轻中度高血压人群血压、心率测试
[0078]
试验对象：收缩压在140-179mmhg或舒张在90-109mmhg，年龄介于25-68岁之间，无酒精过敏史或其他不能饮酒情况的轻中度高血压者，共计31名。入组人员在充分了解研究酒样及研究检测方法与要求、签署知情同意书后，统一进入研究。
[0079]
研究方法：参试者前3天不饮酒，从第4天开始饮酒，晚餐时伴餐饮酒，由自愿者固定饮量50ml，连续饮用14天。参试者测试饮用前后早晚的血压、心率。期间停用其他酒类、功能性饮料、保健品等，原本在服用降压药的人群，保持服药方式和剂量不变。
[0080]
统计方法：采用t检验，p《0.05表示差异有统计学意义。
[0081]
按照上述试验方法对饮用实施例和对比例制备的组合物的轻中度高血压人群早
晚血压进行测试后，得到如下表1所示的结果。
[0082]
表1轻中度高血压人群饮用前后血压变化
[0083]
[0084]
[0085][0086]
通过以上研究结果发现：饮用实施例中组合物的实验组，其早晚血压水平均有不同程度降低，低酸度和无有机酸的组合物10和13～16也有少量降低，但增加比例不如组合物1～7。而无酒精和低酒精度，以及无凉味剂和低凉味剂的对比例血压水平饮用前后基本无差异。证明本发明组合物能降低轻中度高血压人群早晚血压水平，所有组饮用前后心率没有显著差异(p＞0.05)。
[0087]
绝经期女性激素水平测试
[0088]
试验对象：选择来自四川、重庆、广东、黑龙江、甘肃、浙江、陕西、安徽等8省市，符合研究标准的绝经期(1-10年)的女性自愿者35名，年龄50-62岁，平均年龄(55.63
±
3.65)岁。绝经年限(5.32
±
2.51)年，其中绝经＜5年15人，绝经5-9年16人，绝经≥10年4人。入组人员在充分了解测试酒及研究方法与要求、签署知情同意书后，进入研究。
[0089]
饮用量与时间：晚餐伴餐饮用测试酒50ml/天/人，连续30天。测试期间停止饮用其他酒、功能饮料及保健品等。采用自身前后对照，连续饮酒30天后的女性激素及一氧化氮(no)与饮酒前(0天)的指标进行对照分析。
[0090]
研究指标
[0091]
血清学指标：饮用前、饮用30天后，分别采血，检测卵泡刺激素(fsh)、黄体生成素(lh)和一氧化氮(no)。
[0092]
血液样本检测单位：成都里来科技有限公司。
[0093]
统计方法：spss 22.0软件，配对样本t检验。
[0094]
按照上述试验方法对饮用实施例和对比例制备的组合物的绝经期女性卵泡刺激素(fsh)指标进行测试后，得到如下表2所示的结果。
[0095]
表2绝经期女性饮用前后卵泡刺激素(fsh)(miu/ml)变化
[0096]
组合物样品饮用前饮用后增加/降低％组合物164.3562.41-3.01组合物265.6263.26-3.60组合物367.2864.45-4.21
组合物466.1363.58-3.86组合物565.3463.07-3.47组合物666.2163.28-4.43组合物765.9763.26-4.11组合物865.0264.83-0.29组合物966.1965.78-0.62组合物1064.8563.61-1.91组合物1165.6765.720.08组合物1265.6165.46-0.23组合物1364.863.58-1.88组合物1466.1264.95-1.77组合物1565.7464.58-1.76组合物1664.9263.61-2.02
[0097]
通过以上研究结果发现：饮用实施例中制备的组合物的实验组，其卵泡刺激素(fsh)水平有所降低，低酸度和无有机酸的组合物10和13～16也有少量降低，但降低百分比不如组合物1～7。而无酒精和低酒精度，以及无凉味剂和低凉味剂的对比例卵泡刺激素(fsh)水平饮用前后基本无差异。证明本发明组合物能降低绝经期女性fsh含量，从而说明组合物可通过降低绝经期女性fsh来改善激素水平。
[0098]
按照上述试验方法对饮用实施例和对比例制备的组合物的绝经期女性卵泡刺激素/黄体生成素(fsh/lh)指标进行测试后，得到如下表3所示的结果。
[0099]
表3绝经期女性饮用前后卵泡刺激素/黄体生成素(fsh/lh)变化
[0100]
[0101][0102]
通过以上研究结果发现：饮用实施例中制备的组合物的实验组，其卵泡刺激素/黄体生成素(fsh/lh)比例均有降低，低酸度和无有机酸的组合物10和13～16也有少量降低，但降低百分比不如组合物1～7。而无酒精和低酒精度，以及无凉味剂和低凉味剂的对比例fsh/lh比例降低几乎没有。证明本发明组合物能一定程度上降低绝经期女性卵泡刺激素/黄体生成素(fsh/lh)比例，从而说明组合物可通过降低fsh/lh比例改善绝经期女性激素水平。
[0103]
按照上述试验方法对饮用实施例和对比例制备的组合物的女性一氧化氮(no)指标进行测试后，得到如下表4所示的结果。
[0104]
表4女性饮用前后一氧化氮(no)(umol/l)变化
[0105]
组合物样品饮用前饮用后增加/降低％组合物125.1632.8130.41组合物225.6835.7439.17组合物325.7236.1540.55组合物424.9734.2437.12组合物525.2833.7233.39组合物625.8336.1139.80组合物725.2535.4940.55组合物825.1825.641.83组合物924.8624.940.32组合物1025.5530.8820.86组合物1126.0425.82-0.84组合物1225.3925.440.20组合物1325.7830.3717.80组合物1425.8130.6318.67组合物1525.9430.9619.35组合物1625.0830.5221.69
[0106]
通过以上研究结果发现：饮用实施例中制备的组合物的实验组，其一氧化氮水平均显著增加，低酸度和无有机酸的组合物10和13～16没有明显增加。无酒精和低酒精度，以及无凉味剂和低凉味剂的对比例一氧化氮水平增加几乎没有。证明本发明组合物能很有效
提高绝经期女性一氧化氮水平，从而说明组合物可通过提高女性一氧化氮水平来改善绝经期女性性器官充血，使女性更易获得快感。
[0107]
综上数据可知，本发明组合物具有降低轻中度高血压人群血压及改善绝经期女性激素水平的作用，同时还发现伴随着唾液分泌增加并持久的现象。通过该现象分析，本发明组合物降低轻中度高血压人群血压及改善绝经期女性激素水平的作用可能是通过激活副交感神经信号通路来调节的。故通过测试m3受体表达量和信号通路中plc与ip3的含量，可反应副交感神经信号通道被激活。试验方法如下：
[0108]
spf级雄性小鼠，适应性喂养7天后，按照随机数字表达法随机分组，每组10只。空白对照组：生理盐水组；实验组1：组合物6；实验组2：50％vol纯食用酒精；实验组3：含有组合物6的凉味剂50ppm的水溶液；实验组4：含有组合物6的有机酸3000ppm的水溶液。
[0109]
给药方法：按照15ml/kg剂量，注射器分别吸取生理盐水及各实验组样品，向小鼠口腔内缓慢分次滴入。每天给药一次，连续给药三天。
[0110]
第三天给药后30分钟，采用脊柱脱臼法处死小鼠，取小鼠下颌下腺组织，置于均浆机匀浆，7500r/min离心5min，取上清液。采用酶联免疫吸附(elisa)法测定m3、plc和ip3含量。得到如下表5所示的结果。
[0111]
表5下颌下腺组织匀浆m3、plc和ip3含量
[0112]
实验分组m3(pg/ml)plc(ng/ml)ip3(ng/ml)空白对照组9.128
±
0.4916.702
±
1.1965.210
±
0.493实验组115.935
±
0.81111.156
±
1.98310.108
±
2.002实验组210.081
±
1.1326.989
±
0.9586.951
±
0.894实验组39.965
±
0.9587.027
±
1.3545.836
±
1.031实验组49.425
±
1.6817.562
±
1.6166.741
±
1.258
[0113]
由以上研究结果发现：饮用组合物6的实验组1，其m3表达量及plc和ip3的含量与对照组相比均有上升(p＜0.05)，单独只含有酒精、凉味剂和有机酸的实验组2、3、4与对照组相比基本无差异，说明本发明组合物可以增加m3受体的表达和激活副交感神经的plc/ip3通道。
[0114]
通过上述试验结果，可以验证本发明组合物能通过激活副交感神经信号通路降低轻中度高血压人群血压及改善绝经期女性激素水平作用，该组合物可广泛运用于医药及食品、保健品领域。