人脐带间充质干细胞外泌体在防治动脉粥样硬化药物中的应用

1.本发明涉及医药技术领域，特别涉及人脐带间充质干细胞外泌体在制备防治动脉粥样硬化药物中的应用。


背景技术：

2.心脑血管疾病的发生是我国人民最主要的死亡原因，而动脉粥样硬化是心脑血管疾病的主要病理基础，因此，防治动脉粥样硬化是防治心脑血管疾病发生发展的关键所在，具有重大的临床价值和意义。目前，防治动脉粥样硬化的药物主要包括降血脂类药物(他汀类等)、抗血小板类药物(阿司匹林等)和抗凝类药物等(华法林等)。但上述药物的长期应用均可造成一些不良反应的发生，影响了药物的治疗效果和患者的治疗信心，存在着一定的局限性。因此，提供一种安全可靠，可长期应用的抗动脉粥样硬化的药物就显得迫切而必要。
3.动脉粥样硬化的发病原因十分复杂，发病机制也尚未完全阐释清楚。经典的发病机制认为是血管中的巨噬细胞和血管平滑肌细胞在脂质代谢障碍的情况下吞噬了氧化低密度脂蛋白，并沉积在血管中形成粥样坏死物，导致了血管动脉粥样硬化。然而，随着对动脉粥样硬化发生发展机制研究的深入，目前学界普遍的认为动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病。2017年公布的一项临床研究结果表明“消炎药”卡那奴单抗显著降低了因血栓导致的心血管疾病的复发率，且这一作用并非通过降低胆固醇水平，为抗动脉粥样药物的开发提供了一种新的思路。
4.人脐带间充质干细胞是一种具有多向分化能力和自我更新能力的干细胞。因其具有取材容易、来源充足、培养简单、不涉及道德伦理等方面的问题等诸多优点，被广泛研究和应用。近年来研究发现，移植到体内的干细胞仅极少一部分直接分化为特异性实质细胞，它们更主要是通过旁分泌一些生物活性分子动员内源性细胞参与组织修复再生等。外泌体是一种由真核细胞分泌的包含了多种rna和蛋白质的膜性小囊泡，可通过旁分泌的方式实现来源细胞与周围细胞的信息传递。现有技术中公开了将人脐带间充质干细胞及其外泌体用于治疗ⅰ型糖尿病、皮肤损伤和视网膜视神经元损伤等，但未见将其应用于防治动脉粥样硬化的报道


技术实现要素：

5.本发明提供了人脐带间充质干细胞外泌体在制备防治动脉粥样硬化药物中的应用，其目的是为了解决背景技术存在的上述问题。
6.为了达到上述目的，本发明的实施例提供了人脐带间充质干细胞外泌体在制备防治动脉粥样硬化药物中的应用。
7.进一步的，所述人脐带间充质干细胞外泌体用于减少动脉粥样硬化斑块面积。
8.进一步的，所述人脐带间充质干细胞外泌体用于减低血清甘油三脂浓度和总胆固
醇浓度。
9.进一步的，所述药物还包括药学上可接受的载体，所述载体为赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、缓释剂、吸收促进剂、表面活性剂、润滑剂中的至少一种。
10.进一步的，所述药物剂型为片剂、丸剂、胶囊剂或针剂。
11.进一步的，所述药物可接受任何形式的功能强化修饰，所述功能强化修饰是将所述人脐带间充质干细胞外泌体连接上具有靶向性的适配体/抗体，或用纳米颗粒包裹。
12.进一步的，所述药物的受试者患有，怀疑患有，或患动脉粥样硬化和/或与脂代谢相关的疾病。
13.更进一步的，所述受试者为人类或非人类哺乳动物。
14.本发明还提供了人脐带间充质干细胞外泌体在制备防治动脉粥样硬化食品或功能性食品中的应用。
15.本发明通过动物实验证明了人脐带间充质干细胞及其外泌体对于改善经高脂喂养的载脂蛋白e(apoe)敲除小鼠的动脉粥样硬化非常有效。在经高脂喂养的apoe小鼠动脉粥样硬化模型中，脐带间充质干细胞及其外泌体干预后，血清中甘油三脂和总胆固醇的浓度明显降低(p＜0.05)；油红o染色结果显示动脉中的粥样斑块面积较溶剂对照组明显降低(p＜0.05)。
16.因此，人脐带间充质干细胞及其外泌体可以用于制备防治动脉粥样硬化的药物、药物组合物或保健品，为防治动脉粥样硬化提供了新的安全有效的生物治疗手段。
17.本发明的上述方案有如下的有益效果：
18.本发明提供一种人脐带间充质干细胞及其外泌体在制备防治动脉粥样硬化药物或保健品中的应用，通过静脉注射提取的人脐带间充质干细胞及其外泌体，实现降低血清中甘油三脂和总胆固醇的浓度，减少动脉粥样硬化斑块面积，进而达到了防治动脉粥样硬化的目的，为安全有效防治动脉粥样硬化提供一种新的途径。
附图说明
19.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
20.图1是本发明实施例人脐带间充质干细胞外泌体透射电镜图；
21.图2是本发明实施例中经正常或高脂饲料喂养，同时用磷酸盐溶液或人脐带间充质干细胞或其外泌体干预三个月后的apoe敲除小鼠主动脉大体油红o染色结果对比图，图2a是指主动脉大体油红o染色代表性图片，图2b是指大体油红o的统计数据；
22.图3是本发明实施例中各组血脂含量的检测结果。
具体实施方式
23.为使本发明要解决的技术问题、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图及具体实施例进行详细描述。
24.除非另有定义，下文中所使用的所有专业术语与本领域技术人员通常理解含义相
同。本文中所使用的专业术语只是为了描述具体实施例的目的，并不是旨在限制本发明的保护范围。
25.除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。
26.本发明针对现有的问题，提供了人脐带间充质干细胞外泌体在制备防治动脉粥样硬化药物中的应用。
27.进一步的，所述人脐带间充质干细胞外泌体用于减少动脉粥样硬化斑块面积。
28.进一步的，所述人脐带间充质干细胞外泌体用于减低血清甘油三脂浓度和总胆固醇浓度。
29.进一步的，所述药物还包括药学上可接受的载体，所述载体为赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、缓释剂、吸收促进剂、表面活性剂、润滑剂中的至少一种。
30.进一步的，所述药物剂型为片剂、丸剂、胶囊剂或针剂。
31.进一步的，所述药物可接受任何形式的功能强化修饰，所述功能强化修饰是将所述人脐带间充质干细胞外泌体连接上具有靶向性的适配体/抗体，或用纳米颗粒包裹。
32.进一步的，所述药物的受试者患有，怀疑患有，或患动脉粥样硬化和/或与脂代谢相关的疾病。
33.更进一步的，所述受试者为人类或非人类哺乳动物。
34.本发明还提供了人脐带间充质干细胞外泌体在制备防治动脉粥样硬化食品或功能性食品中的应用。
35.本发明通过动物实验证明了人脐带间充质干细胞及其外泌体对于改善经高脂喂养的载脂蛋白e(apoe)敲除小鼠的动脉粥样硬化非常有效。在经高脂喂养的apoe小鼠动脉粥样硬化模型中，脐带间充质干细胞及其外泌体干预后，血清中甘油三脂和总胆固醇的浓度明显降低(p＜0.05)；油红o染色结果显示动脉中的粥样斑块面积较溶剂对照组明显降低(p＜0.05)。
36.本发明发明人应用人脐带间充质干细胞及其外泌体进行了动物实验，通过对高脂喂养的apoe敲除小鼠干预，观察到人脐带间充质干细胞及其外泌体能够显著抑制动脉粥样硬化斑块的形成。
37.实施例：
38.人脐带间充质干细胞及其外泌体可防治高脂喂养的apoe敲除小鼠动脉粥样斑块形成
39.小鼠模型：选取6周龄的apoe敲除雄性spf级小鼠，体重为18～20g，均从江苏常州卡文斯实验动物有限公司购买。每组4只小鼠，自由进食水，维持昼夜节律。
40.分组实验：将apoe敲除雄性spf级小鼠随机分为3组，包括高脂饲料 溶剂对照组、高脂饲料 人脐带间充质干细胞组、高脂饲料 人脐带间充质干细胞外泌体组；每组4只。
41.造模：对各组小鼠分别进行不同喂养的同时进行干预。
42.给药方式：
43.高脂饲料 溶剂对照组(control)：小鼠进行高脂饲料喂养，同时进行磷酸盐缓冲液尾静脉注射，尾静脉注射的体积为100μl，每周一次，干预三个月后收集样本。
44.高脂饲料 人脐带间充质干细胞组(hucmscs)：小鼠进行高脂饲料喂养，同时进行
脐带间充质干细胞尾静脉注射，尾静脉注射的体积为100μl，每周一次，干预三个月后收集样本。
45.高脂饲料 人脐带间充质干细胞外泌体组(hucmscs-exo)：小鼠进行高脂饲料喂养，同时进行脐带间充质干细胞外泌体尾静脉注射，尾静脉注射的体积为100μl，每周一次，干预三个月后收集样本。
46.图1是本实施例人脐带间充质干细胞外泌体透射电镜图；
47.图2是本实施例中经正常或高脂饲料喂养，同时用磷酸盐溶液或人脐带间充质干细胞或其外泌体干预三个月后的apoe敲除小鼠主动脉大体油红o染色结果对比图，图2a是指主动脉大体油红o染色代表性图片，图2b是指大体油红o的统计数据；
48.图3是本实施例中各组血脂含量的检测结果。
49.以上所述是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明所述原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。