一种纳米醋酸阿比特龙组合物及其制备方法及应用与流程

1.本发明涉及药物制剂技术领域，尤其涉及一种纳米醋酸阿比特龙组合物及其制备方法及应用。


背景技术：

2.醋酸阿比特龙，英文名为abiraterone acetate，商品名为的中文名为泽珂，是美国强生(johnson&johnson)制药公司研发的一种口服cyp17抑制剂。其结构式如式ⅰ所示。
[0003][0004]
醋酸阿比特龙通过抑制雄激素合成中的关键酶cyp450c17而降低雄激素水平，该药物可与泼尼松(prednisone)联合使用，用于治疗转移性趋势的前列腺肿瘤患者。醋酸阿比特龙于2011年首先在美国获食品药品监督管理署(fda)批准上市，随后在包括中国、欧盟、日本等全球多个国家和地区上市。
[0005]
醋酸阿比特龙进入人体后通过脱乙酰化转化为具有生物活性的阿比特龙。醋酸阿比特龙是一种亲脂性化合物，在有机溶剂中的溶解度大，但在水中几乎不溶，且渗透性差，属于bcs分类4类，生物利用度低于10％，因此服用剂量为1000mg(250mg/片*4片)。同时醋酸阿比特龙还具有明显食物效应：患者被要求在空腹状态下服用，且保持不仅药物服用前2小时、还包括服用后1小时的空腹状态。以上这些问题都表明该产品存在安全风险：肝脏毒性、食物效应、个体性差异、日服用剂量偏大(1000mg)等，如何通过制剂手段改善该药的生物利用度和个体性差异是目前制药人追求的方向。
[0006]
根据目前的文献报道，现主要有2种提高醋酸阿比特龙口服生物利用度的方法，一是改变药物物理化学性质，提高透膜能力或改善药物溶解特性，如微粉化技术、固体分散体技术、包合技术等。
[0007]
专利cn103446069a公开了一种阿比特龙的口服固体组合物及其制备方法，将醋酸
阿比特龙原料药进行微粉化处理，控制粒径在0-20μm范围内来提高片剂溶出度，但研究后发现原料药单独微粉化并不能明显改善溶出，且粉碎至该粒径范围需要特殊设备。
[0008]
专利cn102743393a公开了一种含有醋酸阿比特龙的药物组合物及制备工艺，将醋酸阿比特龙与亲水性辅料按比例进行粉碎，原料药的粒径为10-30μm，以提高该药物的溶出度及生物利用度。但即使将原料药的粒径微粉化至10-30um，药物溶出度提高仍有限，在ph4.5的添加表面活性剂的介质中15min溶出仅有60％，且生物利用度仍然很低。
[0009]
专利cn103070828a公开了一种含醋酸阿比特龙的固体分散体、片剂及其制备方法，其制备固体分散体，将1：0.5-4的醋酸阿比特龙和聚维酮溶于氯仿中，减压干燥，然后加入水中研磨后再制粒干燥等处理。该专利尽管提高了溶出度，但是该工艺需要制备固体分散体，用到溶剂氯仿，不利用车间安全生产和工人劳动保护，并且溶出提高有限，在ph4.5的添加表面活性剂的介质中10min溶出64％，生物利用度较低。
[0010]
cn102961358a公开了一种醋酸阿比特龙液体胶囊，内容物包括醋酸阿比特龙、溶剂，抗氧化剂，单脂肪酸甘油酯。该专利的处方成分和制备工艺较为复杂，制备过程需要进一步加热，降低了药物稳定性，影响用药安全性，也无法解决药物生物利用度的问题。
[0011]
cn110354094a公开了一种cyp17抑制剂软胶囊及其制备方法，将醋酸阿比特龙溶于脂肪酸甘油酯，然后将溶液灌装入软胶囊。虽然从比格犬的体内数据中看到一定的提高体内溶出度和溶解度，延长在胃肠滞留时间，刺激淋巴转运，减少代谢影响。但由于软胶囊中含有大量的脂肪酸甘油酯，未能消除个体性差异，且稳定性较差。
[0012]
另外一种可以提供生物利用度的方法是将醋酸阿比特龙的粒径降低至纳米级别，当原料药粒径达到纳米级别时，由于其极大的比表面积，溶解度和透膜能力都有了极大的提升。
[0013]
例如，专利wo2014009436报道了一种含有醋酸阿比特龙或其衍生物的纳米混悬液，提高醋酸阿比特龙的溶解度和改善透膜能力。
[0014]
又如，专利cn111617258a报道了一种制备阿比特龙或其衍生物药物组合物的方法，将醋酸阿比特龙和促吸收剂做成纳米混悬液，然后通过添加赋形剂后流化床造粒制备醋酸阿比特龙纳米颗粒，然后压片成微片再灌胶囊，改善产品溶出度和生物利用度，但是日服用仍然需要到达300mg，且未能消除食物对于产品的影响。
[0015]
综上所述，现有的醋酸阿比特龙药物制剂存在以下缺陷：溶出度较低，生物利用度不高；日服用剂量大，存在食物影响效应和个体化差异的风险。


技术实现要素：

[0016]
为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种纳米醋酸阿比特龙组合物，醋酸阿比特龙粒径小，能够显著提高醋酸阿比特龙的生物利用度，促进药物在体内快速吸收。
[0017]
本发明的目的之二在于提供一种纳米醋酸阿比特龙组合物的制备方法，该方法流程简便，成功率高。
[0018]
本发明的目的之三在于提供一种含有纳米醋酸阿比特龙组合物的药物，能够显著提高醋酸阿比特龙的生物利用度，促进药物在体内快速吸收。
[0019]
本发明的目的之四在于将所述纳米醋酸阿比特龙组合物应用于治疗前列腺癌药
物中，能够降低服用剂量，改善服用药物患者个体差异性。
[0020]
本发明的目的之一采用如下技术方案实现：
[0021]
一种纳米醋酸阿比特龙组合物，包含重量百分比为1：(0.1-0.5)：(0.05-0.5)：(5-25)：(5-25)：(0-1)的醋酸阿比特龙、助悬剂、表面活性剂、抗氧剂、溶剂和稀释剂；在所述组合物中，所述醋酸阿比特龙的d90≤1000nm。
[0022]
进一步地，醋酸阿比特龙、助悬剂、表面活性剂、抗氧剂、溶剂和稀释剂的重量百分比为1：(0.2-0.3)：0.1：(10-15)：(10-15)：(0-0.33)。
[0023]
进一步地，在所述组合物中，所述醋酸阿比特龙的d90≤1000nm，例如可以为以下值中的一个：973nm、793nm、506nm、950nm、900nm、850nm、800nm、750nm、700nm、650nm、600nm、550nm、500nm；更加优选地，所述醋酸阿比特龙的d90≤400nm，例如可以为以下值中的一个：400nm、380nm、343nm、350nm、300nm。
[0024]
进一步地，在所述组合物中，所述醋酸阿比特龙的d50≤800nm，例如可以为以下值中的一个：702nm、564nm、213nm、206nm、262nm、800nm、750nm、650nm、600nm、550nm、500nm、450nm、400nm、350nm、300nm、250nm。
[0025]
进一步地，在所述组合物中，所述醋酸阿比特龙的d10≤600nm，例如可以为以下值中的一个：508nm、409nm、122nm、127nm、154nm、600nm、550nm、450nm、350nm、300nm、250nm、200nm、150nm。
[0026]
在本发明中，d90表示样品的累计粒度分布数达到90％时所对应的粒径；当d90≤1000nm，意为粒径小于等于1000nm的颗粒占90％。
[0027]
d50表示样品的累计粒度分布百分数达到50％时所对应的粒径。当d50≤800nm，意为粒径小于等于800nm的颗粒占50％，粒径大于800nm的颗粒也占50％。
[0028]
d10表示样品的累计粒度分布数达到10％时所对应的粒径。当d10≤600nm，意为粒径小于等于600nm的颗粒占10％。
[0029]
进一步地，在所述组合物中，所述醋酸阿比特龙的聚合物分散性指数pdi≤0.5，例如可以为0.444、0.372、0.154、0.146、0.25、0.35等。
[0030]
进一步地，所述助悬剂为聚维酮，更优选地为聚维酮k30(pvp k30)；所述表面活性剂为十二烷基磺酸钠(sls)和/或多库酯钠；所述抗氧剂为丁基羟基茴香醚(bha)和2,6-二叔丁基对甲酚(bht)的任意组合，更优选地，抗氧化剂为bha和bht的等量混合物；所述溶剂为纯水；所述稀释剂为一水乳糖。
[0031]
本发明的目的之二采用如下技术方案实现：
[0032]
一种纳米醋酸阿比特龙组合物的制备方法，包括以下步骤：
[0033]
混悬液制备步骤：将配方量的溶剂分为至少两部分，其中一部分记为第一溶剂；将配方量的助悬剂和表面活性剂加入所述第一溶剂中，搅拌至完全溶解；然后加入配方量的醋酸阿比特龙，搅拌均匀；接着在搅拌状态下加入配方量的抗氧化剂，搅拌均匀，得到混悬液；
[0034]
研磨步骤：将所述混悬液转移至研磨机中进行研磨，得到醋酸阿比特龙纳米混合液。进行研磨时，研磨机的类型可以是珠式研磨机、行星式研磨机、滚磨机等。研磨体优选为氧化锆研磨珠，研磨珠的直径可以为0.5-10mm，优选地为0.5-1mm，更加优选地为直径为0.65mm的ytz氧化锆研磨珠。研磨时间和速度需要进行预先设定，以保证得到醋酸阿比特龙
25)：(5-25)：(0-1)的醋酸阿比特龙、助悬剂、表面活性剂、抗氧剂、溶剂和稀释剂制备而成；在所述组合物中，所述醋酸阿比特龙的d90≤1000nm。
[0050]
实施例1
[0051]
一种纳米醋酸阿比特龙组合物，配方如下表1所示。
[0052]
表1实施例纳米醋酸阿比特龙组合物配方表
[0053][0054]
实施例1的纳米醋酸阿比特龙组合物按照以下方法制备而成：
[0055]
室温条件下，准确量取155g纯化水，置于烧杯中，在磁力搅拌下加入4g pvp k30和2g sls，搅拌至完全溶解，得辅料溶液。在搅拌下加入20g醋酸阿比特龙原料药，使其分散于辅料溶液中，搅拌均匀。在搅拌状态下加入100mg bha和100mg bht，继续搅拌，得研磨前混悬液。将制备得到的研磨前混悬液转移至研磨机(已装有直径0.65mm的ytz氧化锆研磨珠)的循环筒中。用剩余的纯化水分次洗涤烧杯内壁，洗涤液倒入循环筒中。开启研磨，调节转速至3000rpm，研磨4h后，停止研磨，出料。称重并根据重量计算一水乳糖添加量，在搅拌状态下加入6.6g一水乳糖，搅拌10min得药液母液，将药液母液稀释1倍，搅拌下快速冻干可得最终产品。
[0056]
取实施例1的最终产品用稀释剂复溶后进行粒径测试，结果如下表2所示。
[0057]
表2实施例1粒径测试结果记录表
[0058][0059][0060]
实施例2
[0061]
一种纳米醋酸阿比特龙组合物，配方如下表3所示。
[0062]
表3实施例纳米醋酸阿比特龙组合物配方表
[0063][0064]
室温情况下，准确量取261g纯化水，置于烧杯中，在磁力搅拌下加入6g pvp k30和3g sls，搅拌至完全溶解，得辅料溶液。在搅拌下加入30g醋酸阿比特龙原料药，使其分散于辅料溶液中，搅拌均匀。在搅拌状态下加入150mg bha和150mg bht，继续搅拌，得研磨前混悬液。将此混悬液转移至研磨机(已装有直径0.65mm的ytz氧化锆研磨珠)的循环筒中。用剩余纯化水分次洗涤烧杯内壁，洗涤液倒入循环筒中。开启研磨，调节转速至3000rpm，研磨24h。称重并根据重量计算一水乳糖添加量，在搅拌状态下加入6.6g一水乳糖，搅拌10min得药液母液。将药液母液溶质稀释一倍，然后快速冷冻干燥得最终产品。
[0065]
取实施例2的最终产品用稀释剂复溶后进行粒径测试，结果如下表4所示。
[0066]
表4实施例2粒径测试结果记录表
[0067][0068][0069]
实施例3
[0070]
一种纳米醋酸阿比特龙组合物，配方如下表5所示。
[0071]
表5实施例纳米醋酸阿比特龙组合物配方表
[0072]
[0073]
室温条件下，准确量取155g纯化水，置于烧杯中，在磁力搅拌下加入4g pvp k30和2g sls，搅拌至完全溶解，得辅料溶液。在搅拌下加入20g醋酸阿比特龙原料药，使其分散于辅料溶液中，搅拌均匀。在搅拌状态下加入100mg bha和100mg bht，继续搅拌，得研磨前混悬液。将制备得到的研磨前混悬液转移至研磨机(已装有直径0.65mm的ytz氧化锆研磨珠)的循环筒中。用剩余纯化水分次洗涤烧杯内壁，洗涤液倒入循环筒中。开启研磨，调节转速至3000rpm，研磨9h后，停止研磨，出料，搅拌10min得药液母液。将药液母液稀释1倍，搅拌下快速冻干可得最终产品。
[0074]
取实施例3的最终产品用稀释剂复溶后进行粒径测试，结果如下表6所示。
[0075]
表6实施例3粒径测试结果记录表
[0076][0077]
实施例4
[0078]
一种纳米醋酸阿比特龙组合物，配方如下表7所示。
[0079]
表7实施例纳米醋酸阿比特龙组合物配方表
[0080][0081]
室温条件下，准确量取155g纯化水，置于烧杯中，在磁力搅拌下加入4g pvp k30和2g sls，搅拌至完全溶解，得辅料溶液。在搅拌下加入20g醋酸阿比特龙原料药，使其分散于辅料溶液中，搅拌均匀。在搅拌状态下加入100mg bha和100mg bht，继续搅拌，得研磨前混悬液。将制备得到的研磨前混悬液转移至研磨机(已装有直径0.65mm的ytz氧化锆研磨珠)的循环筒中。用剩余纯化水分次洗涤烧杯内壁，洗涤液倒入循环筒中。开启研磨，调节转速至2000rpm，研磨0.5h后，停止研磨，出料，搅拌10min得药液母液。将药液母液稀释1倍，搅拌下快速冻干可得最终产品。
[0082]
取实施例4的最终产品用稀释剂复溶后进行粒径测试，结果如下表8所示。
[0083]
表8实施例4粒径测试结果记录表
[0084][0085]
实施例5
[0086]
一种纳米醋酸阿比特龙组合物，配方如下表9所示。
[0087]
表9实施例纳米醋酸阿比特龙组合物配方表
[0088][0089]
室温条件下，准确量取155g纯化水，置于烧杯中，在磁力搅拌下加入4g pvp k30和2g sls，搅拌至完全溶解，得辅料溶液。在搅拌下加入20g醋酸阿比特龙原料药，使其分散于辅料溶液中，搅拌均匀。在搅拌状态下加入100mg bha和100mg bht，继续搅拌，得研磨前混悬液。将制备得到的研磨前混悬液转移至研磨机(已装有直径0.65mm的ytz氧化锆研磨珠)的循环筒中。用剩余纯化水分次洗涤烧杯内壁，洗涤液倒入循环筒中。开启研磨，调节转速至2000rpm，研磨10min后，停止研磨，出料，搅拌10min得药液母液。将药液母液稀释1倍，搅拌下快速冻干可得最终产品。
[0090]
取实施例5的最终产品用稀释剂复溶后进行粒径测试，结果如下表10所示。
[0091]
表10实施例5粒径测试结果记录表
[0092][0093]
效果验证
[0094]
1、药代动力学实验方案与结果
[0095]
1.1药代动力学方案
[0096]
1.11实验方案设计
[0097]
取16只雄性sd大鼠，单次经口灌胃给药，口服给药组动物给药前禁食过夜(10-14小时)。实验设计方案如下表11所示。
[0098]
表11实验设计方案
[0099][0100]
注：对照组为市售未经纳米研磨的醋酸阿比特龙样品，按照组合物的配方配制而成。
[0101]
1.12供试品配制
[0102]
给药当天配制(灌胃给药前1小时左右配制，给药前混悬液摇匀)。溶媒：0.4％羧甲基纤维素钠(cmc)水溶液。
[0103]
1.13给药方式
[0104]
给药前称重，根据体重，计算给药量。通过灌胃给药。
[0105]
1.14采血时间点
[0106]
po采血点0.33hr、0.66hr、1hr、1.5hr、2hr、4hr、8hr、24hr。
[0107]
1.15血浆样品处理
[0108]
经颈静脉或其他合适方式采血，每个样品采集约200μl/时间点，k2-edta抗凝，采集后放置冰上。血液样本采集后置于冰上，并于1小时之内离心分离血浆(离心条件：6800g，6分钟，2-8℃)。血浆样本在分析前存放时则放于-80℃冰箱内。
[0109]
1.2实验结果
[0110]
采用验证过的lc-ms/ms分析方法测定血浆样品中阿比特龙的浓度。通过不同时间点的血药浓度数据，运用phoenix winnonlin计算其主要药代动力学参数，血浆中阿比特龙的主要药代动力学数据见表12。
[0111]
表12口服给药后血浆中阿比特龙主要药代动力学参数(mean
±
sd，n＝4)。
[0112][0113]
分析表12中的实验数据，禁食给药的雄性大鼠剂量40mg/kg受试制剂(cj-2103-03，d90＝380nm)的血浆中阿比特龙的cmax为176.76
±
34.32ng/ml，暴露量auc(0-t)为963.01
±
243.48h*ng/ml，auc(0-∞)为965.53
±
235.00h*ng/ml，分别是剂量40mg/kg对照组(市售的醋酸阿比特龙原料药)的1.8、2.0和1.96倍。且受试制剂cj-2103-03(实施例3)血
浆中阿比特龙达峰时间较快，tmax为1.50
±
1.19h，说明本发明实施例将醋酸阿比特龙研磨成纳米混悬液能够显著提高醋酸阿比特龙的生物利用度，并且促进药物在体内的快速吸收。特别是当纳米混悬液的粒径d90为380nm时，效果最佳，为最佳实施方式。
[0114]
2、偏光显微镜(plm)测试
[0115]
2.1取现有市售的醋酸阿比特龙原料药(市售未经纳米研磨的醋酸阿比特龙样品，对照组样品)进行偏光显微镜(plm)测试，测试结果如图1所示。
[0116]
从图1中可看出，现有市售的醋酸阿比特龙原料药呈片状结晶，结晶大小不均一，这些特性会影响醋酸阿比特龙的吸收和生物利用度。
[0117]
2.2取实施例4的样品进行偏光显微镜(plm)测试，测试结果如图2所示。
[0118]
从图2中可看出，与现有市售的醋酸阿比特龙原料药对比，实施例4经过研磨形成的纳米混悬液，其结晶粒径相对于未研磨的醋酸阿比特龙原料药的结晶粒径，从100微米左右降低到1000nm以下。用马尔文激光粒度检测仪测量活性成分醋酸阿比特龙的粒径，发现其d90为793nm。结合表12中的结果，在禁食给药的雄性大鼠剂量受试制剂的血浆(实施例4，cj-2103-04，d90＝793nm)中阿比特龙的暴露量auc(0-t)为811.59
±
96.99h*ng/ml，auc(0-∞)为814.08
±
178.08h*ng/ml，分别是未研磨对照组(市售的醋酸阿比特龙原料药)的1.69和1.65倍。说明本发明实施例将醋酸阿比特龙研磨成不同粒径的纳米混悬液能够不同程度地提高醋酸阿比特龙的生物利用度。
[0119]
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。