一种中药组合物

1.本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种中药组合物。


背景技术：

2.脂质代谢紊乱是指先天性或获得性因素造成的血液及其他组织器官中脂质(脂类)及其代谢产物质和量的异常。近30年来随着生活水平的提高，我国人群的血脂水平也逐步升高，血脂异常患病率显著增加并趋于年轻化。中国成人血脂异常总体患病率高达40.40%，我国儿童青少年高胆固醇血症患病率也有明显升高。与脂代谢紊乱相关的重大代谢性疾病不仅涉及到动脉粥样硬化、冠心病、脑卒中等心脑血管疾病，还与糖尿病、肥胖症、高血压、脂肪肝以及代谢综合症具有显著联系。非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease，nafld）是一种常见的代谢性疾病，根据流行病学调查表明，中国的nafld患病率变化与肥胖症、二型糖尿病（diabetes mellitus type 2，t2dm）和代谢综合征流行趋势相平行。目前我国成人总体肥胖、腹型肥胖、t2dm患病率分别高达7.5%、12.3%和11.6%。
3.目前临床上广泛使用的调脂药主要使用他汀类药物，但其具有肝损伤、横纹肌溶解、消化道出血等副作用。中医认为脂代谢异常多为本虚标实之证，张志聪在《灵枢集注》有“精微溢于外则皮肉膏肥，余于内则膏脂丰满”，多与饮食失节、缺乏运动、先天禀赋不足、年老体弱有关。病位在肝脾，与肾、胃关系密切，可涉及五脏。其本在于“湿”、“浊”、“瘀”内聚，脾胃功能失和。本发明结合中医“益气生津、化浊降脂”理论调节脂质代谢紊乱。中药以其多靶点、疗效明显逐渐被人们认可并重视，当前已存有多份关于调节高脂血症的国内申请，具体如下：中国专利申请号cn201510482053.6公开了“一种治疗心脑血管疾病的葛根人参中药制剂及制备方法”，所述中药组合物的各个组成部分及其质量份比如下：葛根12-20份、人参2-10份、冰片0.5-1.5份。在血管扩张，抗凝血和抗自由基三方面有相辅相成的协同功效，可提高临床疗效，无毒副作用，安全性好。
4.中国专利申请号cn201911267513.8公开了“一种治疗糖尿病的组合物和制备方法”，各中药原料的重量组成为人参10-12份、麦冬10-12份、五味子10-12份、葛根10-14份、灵芝10-11份、丹参10-11份、决明子10-15份、田七10-12份、冰片10-12份、桑叶10-13份。此发明见效快、疗效好且无毒副作用。
5.中国专利申请号cn201810595093.5公开了“治疗高血脂症的中药组合物及其制剂方法和用途”所属中药组合物有以下重量份的原料药组成：人参3-8份、姜黄8-18份、白术6-14份、陈皮6-14份、蒲黄6-14份、荷叶5-12份、泽泻5-12份、昆布5-12份、决明子5-12份和山楂5-12份，将姜黄、人参和陈皮采用乙醇水溶液提取，得到醇提物及药渣，将药渣与白术、蒲黄、荷叶、泽泻、昆布、决明子和山楂混合，采用水提醇沉发制得混合提取物，将上述醇提物和混合提取物混合均匀，得到中药组合物。增强其活血化瘀的功效，从而实现气行则血行的目的，血行通畅，血瘀消除，达到治疗高血脂症的效果。
6.中国专利申请号cn201710117303.5 公开了一种“治疗非酒精性脂肪肝病的中药
颗粒剂”，包括如下组份，丹参13份、泽泻10份、柴胡15份、绞股蓝15份、姜黄9份、生山楂12份、首乌藤10份、水红花子10份、决明子15份、茺蔚子15份，制成颗粒。上述诸药合用，共奏泻热清肝，活血降脂之功。此发明所以提供的治疗非酒精性脂肪肝病的中药颗粒剂，药物组分间发挥了协同效应，该中药能有效缓解患者病痛、无毒副作用，见效快，效果显著。
7.可见，当前中药领域存有的关于中药组合物组份多、用药量大、生产成本高，且各组分并不完全是药食同源的中药，因此有必要采用药食同源的中药研发一种组份简单、用药量相对少且安全无毒、生产成本更低的中药组合物。


技术实现要素：

8.本发明拟提供一种中药组合物，该组合物组份简单、用药量相对少、生产成本更低，采用的中药包括：人参、葛根、山楂、决明子，均为药食同源，能充分发挥中药整体调节的优势，可用于制备调节肠道菌群、修复肠粘膜屏障、改善脂代谢紊乱的药物或保健品。
9.为实现上述目的，本发明具体通过下列技术方案得以实现：一种中药组合物，由以下原料及重量份组成：人参5-15份、葛根10-20份、焦山楂5-15份、决明子5-15份。
10.作为优选，中药组合物由以下原料及重量份组成：人参10份、葛根20份、焦山楂15份、决明子8份。
11.本发明还提供了一种中药组合物的制备方法，包括以下步骤：（1）按上述的重量份称取各原料；（2）将步骤（1）所备中药加水6-12倍浸泡0.5h-1.0h，武火煮沸后转文火保持微沸0.5-1h，煎煮2-3次，过滤，合并水煎液；（3）将步骤（2）所得水煎液浓缩，经减压或喷雾干燥制成粉末，即得中药组合物。
12.上述制备方法所得中药组合物通过常规成型工艺制备成胶囊剂、颗粒剂、片剂、散剂、丸剂或口服液的口服制剂。
13.上述制备方法所得中药组合物可用于制备调节肠道菌群的药物。
14.上述制备方法所得中药组合物可用于制备修复肠粘膜屏障的药物。
15.上述制备方法所得中药组合物可用于制备调节脂代谢紊乱的药物。
16.上述制备方法所得中药组合物可用于制备具有调节肠道菌群作用的保健品。
17.上述制备方法所得中药组合物可用于制备具有修复肠粘膜屏障作用的保健品。
18.上述制备方法所得中药组合物可用于制备具有改善脂代谢紊乱的保健品。
19.本发明提供的上述中药组合物的药理作用：人参甘微温，味微苦，归肺脾、心肾经，益气健脾，生津，扶正祛邪；葛根甘辛凉，归脾胃经，能生津止渴，升阳醒脾，人参与葛根益气生津，和调脾之气阴不足，以固其本；焦山楂性味偏酸甘，微温，归脾胃、肝经，有消食化积，行气散瘀之效；决明子味甘，苦咸，微寒，归肝经、大肠经，功用润肠通便，焦山楂能消，决明子可通，以消内聚之“湿、浊、瘀”，使内聚之邪得以消解。四药相合，相辅相成，人参益气，葛根生津，焦山楂消肉食之积，决明子润肠通便，共奏和调气阴、健脾消积、化浊去瘀，改善血脂代谢异常之功效。
20.本发明具备的优点和效果在于，经本发明中药组合物调节后，高脂血症小鼠体重下降明显，通过分析肝系数和病理切片染色，给药组小鼠肝脏脂质堆积、炎性细胞浸润和空
泡样改变均有缓解；血脂四项结果显示，相对于模型组，给药组小鼠高密度脂蛋白胆固醇（hdl-c）显著上升，低密度脂蛋白胆固醇（ldl-c）、总胆固醇（tc）、甘油三酯（tg）水平显著下降；本发明中药组合物通过调节ampk/srebp通路缓解高脂血症；本发明中药组合物能减轻肝组织炎症和全身代谢性炎症；本发明中药组合物有较好的修复肠屏障的作用，这可以有效缓解脂多糖（lps）入血，进而改善炎症和高脂血症；发明中药组合物可以改善肠道代谢物水平；本发明中药组合物缓解高脂血症的机制可能是通过代谢物辛酸实现的。本发明提供的中药组合物药性天然，组份简单、生产成本更低、用药量较少，且为药食同源，各组份相辅相成，共奏和调气阴、健脾消积、化浊去瘀，改善血脂代谢异常之功效，该中药组合物最大程度上发挥中药可以增效减毒的作用，通过调整人体内环境，从而达到治疗疾病的作用，其制备方法简单、效果显著、安全性高。
附图说明
21.图1为本发明实验1中小鼠体重图；图2为本发明实验1中小鼠肝系数统计结果；图3为本发明实验1中小鼠血脂四项（tg、tc、ldl-c、hdl-c）统计结果；图4为本发明实验1中he染色小鼠肝脏镜下观察图；图5为本发明实验1中油红o染色小鼠肝脏镜下观察图；图6为本发明实验1中小鼠肝脏ampk/srebp通路的蛋白表达图；图7为本发明实验1中he染色小鼠结肠组织镜下观察图；图8为本发明实验1中小鼠结肠组织紧密连接蛋白claudin-1、occludin、zo-1蛋白表达图；图9为本发明实验1中小鼠肝脏中促炎症因子tnf-α、il-8、il-1β、il-18以及抑炎因子il-4、il-10的mrna转录水平图；图10为本发明实验1中小鼠血清中lps、tnf-α、il-6、il-1β、il-4的表达水平图；图11为本发明实验1中小鼠肠道菌群门水平丰度检测结果；图12为本发明实验1中小鼠肠道菌群属水平丰度检测结果；图13为本发明实验1中小鼠肠道菌群代谢产物结构及丰度图；图14本发明实验1中小鼠肠道菌群代谢产物含量较多的前13组差异代谢物峰面积图；图15本发明实验1中小鼠肠道菌群代谢产物中的差异代谢物图：propionic acid（丙酸）、caprylic acid（辛酸）、malic acid（苹果酸）、phenylpyruvic acid（苯丙酮酸）、nicotinic acid（烟酸）；图16为本发明实验2中辛酸、苯丙氨酸、苹果酸、丙酸、烟酸的mts结果；图17为本发明实验2中hepg2的血脂四项检测结果；图18本发明实验2中辛酸对hepg2细胞脂质堆积的影响图；图19为本发明实验2中辛酸对hepg2细胞中ampk/srebp通路相关基因的mrna转录水平影响图；图20为本发明实验2中辛酸对hepg2细胞炎症的影响图。
具体实施方式
22.下面结合实施例对本发明做进一步说明。由于本发明包括数值范围，实施例不能穷举。故仅列出以下实施例以说明情况。
23.实施例1（1）按下列质量份的组分备料：人参5份、葛根10份、焦山楂5份、决明子5份；（2）将步骤（1）所备中药加水10倍浸泡0.5h，武火煮沸后转文火保持微沸0.5h，过滤；药渣再加水8倍，武火煮沸后转文火保持微沸1h，过滤，同法再煎煮1次，合并三次水煎液；（3）将步骤（2）所得水煎液浓缩，经减压干燥、粉碎、过筛制得粉末，即得中药组合物。
24.实施例2（1）按下列质量份的组分备料：人参10份、葛根20份、焦山楂15份、决明子8份；（2）将步骤（1）所备中药组合物，加水8倍浸泡1h后，以武火煮沸后转文火保持微沸40min，过滤，完成第一次煎煮；第二次煎煮和第三次煎煮加水6倍，均以武火煮沸后转文火保持微沸40min，过滤，合并三次水煎液；（3）将步骤（2）所得水煎液浓缩，经喷雾干燥、粉碎、过筛制得粉末，即得中药组合物。
25.实施例3（1）按下列质量份的组分备料：人参15份、葛根15份、焦山楂10份、决明子15份；（2）将步骤（1）所备中药加水12倍浸泡0.5h，武火煮沸后转文火保持微沸1h，过滤；药渣加水10倍，武火煮沸后转文火保持微沸1h，过滤；合并两次水煎液；（3）将步骤（2）所得水煎液浓缩，经喷雾干燥、粉碎、过筛制得粉末，即得中药组合物。
26.实施例4（1）按下列质量份的组分备料：人参3份、葛根4份、焦山楂4份、决明子3份；（2）将步骤（1）所备中药加水12倍浸泡0.5h，武火煮沸后转文火保持微沸1h，过滤；药渣加水10倍，武火煮沸后转文火保持微沸1h，过滤；合并两次水煎液；（3）将步骤（2）所得水煎液浓缩，经喷雾干燥、粉碎、过筛制得粉末，即得中药组合物。
27.实施例5（1）按下列质量份的组分备料：人参25份、葛根30份、焦山楂25份、决明子25份；（2）将步骤（1）所备中药加水12倍浸泡0.5h，武火煮沸后转文火保持微沸1h，过滤；药渣加水10倍，武火煮沸后转文火保持微沸1h，过滤；合并两次水煎液；（3）将步骤（2）所得水煎液浓缩，经喷雾干燥、粉碎、过筛制得粉末，即得中药组合物。
28.实施例6（1）按下列质量份的组分备料：人参30份、葛根60份、焦山楂45份、决明子24份；（2）将步骤（1）所备中药加水12倍浸泡0.5h，武火煮沸后转文火保持微沸1h，过滤；药渣加水10倍，武火煮沸后转文火保持微沸1h，过滤；合并两次水煎液；
（3）将步骤（2）所得水煎液浓缩，经喷雾干燥、粉碎、过筛制得粉末，即得中药组合物。
29.经相关动物实验分析验证，上述实施例1-6中制备所得的中药组合物相比，存在如下优缺点：配方1（实施例1）调节肠道菌群、修复肠黏膜屏障、调节脂代谢紊乱作用微弱，体现为：
①
肠道菌群结构及丰度变化略有改善；
②
肠黏膜屏障受损有微弱的修复作用；
③
体重变化略有减轻，血脂指标中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇略有下降，高密度脂蛋白胆固醇略有升高；
④
对炎症因子调节作用较弱。
30.配方2（实施例2）相比配方1来说，调节肠道菌群、修复肠粘膜屏障、调节脂代谢紊乱作用显著，可降低促炎因子的表达，缓解机体炎症，体现为：
①
肠道菌群结构及丰度显著差异，配方2干预后益生菌增加，致病菌减少；
②
肠黏膜屏障得到修复，紧密连接蛋白occludin、zo-1、claudin-1显著上升；
③
血脂指标中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇下降，高密度脂蛋白胆固醇升高；
④
显著下调炎症因子tnf-α、il-6。
31.配方3（实施例3）相比配方2来说，调节肠道菌群、修复肠粘膜屏障、调节脂代谢紊乱作用比配方2弱，对炎症因子有一定的调节作用，但效果较配方2弱，体现为：
①
肠道菌群结构及丰度有差异，配方3干预后致病菌减少，但对益生菌无显著调节作用；
②
肠黏膜屏障有一定修复作用，紧密连接蛋白occludin、zo-1、claudin-1呈上升趋势；
③
血脂指标中甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇下降，高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇无明显差异；
④
可下调炎症因子tnf-α、il-6，但无统计学差异。
32.对比1（实施例4）相比配方1来说，调节肠道菌群、修复肠黏膜屏障、调节脂代谢紊乱作用不显著，相比配方1更弱，体现为：
①
肠道菌群结构及丰度无明显变化；
②
肠黏膜屏障受损依然存在；
③
体重变化不明显，血脂指标中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇无明显变化；
④
对炎症因子无调节作用。
33.对比2（实施例5）相比配方2来说，调节肠道菌群、修复肠粘膜屏障、调节脂代谢紊乱作用比配方2弱，对炎症因子有一定的调节作用，但效果较配方2弱，体现为：
①
肠道菌群结构及丰度有差异，对比2干预后致病菌减少，但对益生菌无显著调节作用；
②
肠黏膜屏障有一定修复作用，紧密连接蛋白occludin、zo-1、claudin-1呈上升趋势；
③
血脂指标中甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇下降，高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇无明显差异；
④
可下调炎症因子tnf-α、il-6，但无统计学差异。
34.对比3（实施例6）相比配方2来说，调节肠道菌群、修复肠粘膜屏障、调节脂代谢紊乱作用比配方2弱，对炎症因子有一定的调节作用，但效果较配方2弱，体现为：
①
肠道菌群结构及丰度有差异，但无统计学差异；
②
肠黏膜屏障有一定修复作用，紧密连接蛋白occludin、zo-1、claudin-1呈上升趋势；
③
血脂指标中甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇下降，高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇无明显差异；
④
可下调炎症因子tnf-α、il-6，但无统计学差异。
35.综上，配方2（实施例2）为最优方案。
36.将上述实施例1-6中所述的中药组合物通过常规成型工艺制备成胶囊剂、颗粒剂、片剂、散剂、丸剂或口服液的口服制剂，均不影响该中药组合物调节脂代谢紊乱的作用。
37.以下对本发明所述配方2（实施例2）制备所得中药组合物的药理作用进行详细阐
述。
38.通过实验1探讨本发明中药组合物对高脂血症小鼠的肠道菌群结构、丰度和肠粘膜屏障完整性以及机体炎症水平的药效学作及机制；探讨中药组合物对ampk/srebp通路和相关基因的调节作用。
39.通过实验2探讨本发明中药组合物缓解脂代谢紊乱的机制可能是通过哪种代谢物实现的，明确差异代谢物的治疗效果，对ampk/srebp通路和相关基因的调节作用，以及炎症水平的调节作用。
40.实验1采用喂食高脂饲料复制高脂血症小鼠模型。50只雄性c57bl/6j小鼠，随机分为正常对照组（control）、模型对照组（model）以及中药组合物低、中、高剂量组（tcm-l、tcm-m、tcm-h）共5组。将上述实施例2制备所得中药组合物，以小鼠的重量计算，分别按3.445g/kg、6.89g/kg、13.78g/kg的生药剂量乘以实施例2的制药当量，加适量生理盐水溶解，分别制成所述低、中、高剂量的中药组合物药液，各组同一剂量的药液其体积相等。正常对照组、模型对照组每日灌胃等量体积的生理盐水，中药组合物低、中、高剂量组每日灌胃等量体积相应浓度的中药组合物药液，每组灌胃4周，每天灌胃1次，实验结束后取材检测相关指标。
41.1. 本发明中药组合物可降低高脂血症模型小鼠体重及肝系数，同时降低甘油三酯（tg）、总胆固醇（tc）、低密度脂蛋白胆固醇（ldl-c），增加高密度脂蛋白胆固醇（hdl-c），缓解肝脏脂质沉积，其可能作用机制为通过调节ampk/srebp通路发挥的。
42.高脂饲料造模后小鼠体重增长的速度明显加快，经本发明中药组合物调节后小鼠体重下降明显（如图1）；同时，模型组肝系数显著升高，给药后肝系数明显降低（如图2）。
43.模型组小鼠血清中tc、tg、ldl-c含量显著升高，hdl-c显著降低；本发明中药组合物调节后tc、tg、ldl-c显著降低，hdl-c显著升高（如图3）。
44.he染色肝脏镜下观察可见，模型组小鼠肝脏有明显空泡样改变和炎性细胞浸润，经本发明中药组合物干预后，空泡基本消失，炎性浸润有很大缓解（如图4）；油红o染色肝脏镜下观察可见，模型组小鼠肝脏有大片脂滴红染，细胞脂滴沉积严重，经本发明中药组合物干预后脂滴基本消失（如图5）。
45.为了进一步探讨本发明中药组合物调节脂代谢的机理，我们观察了该组合物对脂代谢相关通路ampk/srebp通路进行了观察，结果显示模型组小鼠肝脏中p-ampk蛋白磷酸化水平明显下降，srebp-1蛋白的表达上升；本发明中药组合物调节后p-ampk蛋白磷酸化水平明显上升，srebp蛋白的表达下降，提示本发明中药组合物可以激活ampk，从而抑制srebp，减少脂肪酸、胆固醇和甘油三酯合成（如图6）。
46.2. 本发明中药组合物可修复高脂血症模型小鼠的肠黏膜屏障，减轻肝脏及血中的炎症反应he染色小鼠结肠组织镜下观察可见，模型组小鼠结肠有浆膜层破损，杯状细胞数量少，肠黏膜绒毛缺损较多，有大片炎性浸润；本发明中药组合物干预后杯状细胞数量增多，肠黏膜绒毛缺损恢复较好，炎性细胞浸润减少（如图7）。模型组小鼠结肠紧密连接蛋白claudin-1、occludin和zo-1表达下降，经本发明中药组合物干预后均显著上升，提示本发明中药组合物有较好的修复肠屏障的作用（如图8）。
47.肠黏膜屏障受损则导致“肠漏”，炎症因子表达增加。模型组肝脏的促炎症因子
tnf-α、il-8、il-1β、il-18的mrna转录水平明显升高，抑炎因子il-4和il-10的mrna转录水平明显降低；本中药组合物干预后tnf-α、il-8、il-1β、il-18的mrna转录水平明显降低，il-4和il-10的mrna转录水平明显升高（如图9）。
48.模型组小鼠血清中lps、tnf-α、il-6的含量明显上升，il-4显著下降；本中药组合物干预后血清中lps、tnf-α、il-6的含量明显下降，il-4的含量明显上升（如图10）。以上结果提示，本发明中药组合物不仅能减轻肝脏脂质堆积，还可以缓解体内的代谢性炎症和肝脏炎症。
49.3. 本发明中药组合物可调节高脂血症小鼠肠菌代谢本发明中药组合物干预对高脂血症小鼠后，小鼠肠道菌群门水平中，优势菌门厚壁菌门（firmicutes）丰度下降，拟杆菌门（bacteroidetes）丰度上升（如图11）。
50.属水平中，模型组拟杆菌属（lactobacillus）、akk菌属（akkermansia）、desulfovibrio、oscillospira、odoribacter、clostridium、streptococcus、双歧杆菌属（bifidobacterium）、[prevotella]、dehalobacterium、sutterella等菌属呈下降趋势，其中desulfovibrio、oscillospira、clostridium、streptococcus、bifidobacterium、[prevotella]、sutterella、ralstonia在本发明中药组合物调节后呈上升趋势；模型组allobaculum、adlercreutzia、[ruminococcus]、burkholderia、dorea、coprococcus、bacteroides、luteimonas呈上升趋势，给药后allobaculum、[ruminococcus]呈下降趋势（如图12）。
[0051]
在肠道菌群的代谢产物检测中，模型组代谢物中氨基酸、碳水化合物有含量升高，本发明中药组干预后降低；模型组肠内容物中胆汁酸、有机酸、脂肪酸含量降低，本发明中药组干预后升高（如图13）。
[0052]
我们进一步分析肠道菌群的差异代谢物，我们分析了含量较高的前13种差异代谢物（如图14），通过追溯源文件数据，得出每组各代谢物的峰面积，其峰面积越大，表明此代谢物在所有代谢物中比重越高，最终我们选取前五种在模型组降低，给药后升高的差异代谢物（如图15）：propionic acid（丙酸）、caprylic acid（辛酸）、malic acid（苹果酸）、phenylpyruvic acid（苯丙酮酸）、nicotinic acid（烟酸），在细胞中进行差异代谢物回补实验，进一步探讨此代谢物对于高脂血症的缓解作用机制。
[0053]
实验2本实验根据上述实验1所得结论的差异代谢物，在细胞中进行差异代谢物回补实验，进一步探讨此代谢物对于高脂血症的缓解作用机制。
[0054]
以购于中国科学院典型培养物宝藏委员会昆明细胞库的hepg2细胞为样本，用含10%的胎牛血清培养，培养液比例为：dmem：胎牛血清：双抗=80:9:1，细胞培养于37℃，co2含量5%的培养箱中。采用游离脂肪酸（free fatty acid，ffa）造模，浓度为500μmol/l，油酸：棕榈酸=2:1。用mts法检测五种代谢物的细胞毒性。使用ffa干预hepg2细胞24h，再根据mts结果确定辛酸、苯丙氨酸、苹果酸、丙酸、烟酸的给药浓度，通过检测细胞血脂四项，选出干预效果最好的代谢物，再以此代谢物干预造模成功的细胞，检测分子实验相关指标。检测细胞中tc、tg、hdl-c、ldl-c的含量；油红o染色镜下观察hepg2细胞脂质沉积；western blot检测细胞ampk/srebp通路相关蛋白的表达；荧光定量pcr检测ampk/srebp通路和炎症因子相关的mrna表达。
[0055]
1.本发明中药组合物可促进五种差异代谢物调节hepg2的tc、tg、ldl-c和hdl-c在淋巴细胞增殖检测法（mts法）检测细胞活力和药物对于细胞的毒性时，结果越接近1则说明药物既不会促进细胞增殖也不会对细胞产生毒性。
[0056]
由图16所示，我们选取接近于1的给药浓度，则辛酸的给药浓度为2mmol/l、1mmol/l，苯丙氨酸给药浓度为0.5mmol/l、0.25mmol/l、0.125mmol/l，苹果酸为0.25mmol/l、0.125mmol/l，丙酸为4mmol/l、2mmol/l，烟酸为0.5mmol/l、0.25mmol/l、0.125mmol/l。
[0057]
由图17所示，五种代谢物干预后，对于tc的调节，苯丙氨酸效果最好，辛酸次之；对于tg的调节，辛酸最好，烟酸次之；对于ldl-c的调节，辛酸和苯丙氨酸都较好；对于hdl-c的调节，辛酸、苯丙氨酸、苹果酸都较稳定且效果良好。因此本次细胞实验选用辛酸干预hepg2细胞，探讨其作用机制。
[0058]
2.本发明中药组合物可促进辛酸代谢，其中辛酸可减轻hepg2脂质堆积以及调节ampk/srebp通路，缓解炎症he染色镜下观察hepg2细胞爬片可见模型组红染较严重，脂滴明显，辛酸干预后脂滴明显减少（如图18）。同时，模型组hepg2细胞中ampkα1的转录水平明显下调，fas、acc、srebp-1c的转录水平显著上调；辛酸干预后ampkα1的转录水平明显上调，fas、acc、srebp-1c的转录水平显著下调（如图19），这提示辛酸可以激活ampk，从而抑制srebp，减少脂肪酸、胆固醇和甘油三酯合成。
[0059]
炎症基因转录水平中，模型组hepg2细胞tnf-α、il-8的转录水平显著上调，il-4、il-10的mrna转录水平显著下调；辛酸干预后tnf-α、il-8的转录水平显著下调，il-4、il-10的mrna转录水平显著上调（如图20）。以上结果提示辛酸能够促进hepg2细胞抑炎因子mrna的转录，抑制hepg2细胞促炎因子mrna的转录。
[0060]
通过上述实验1和实验2的实验结果显示：经本发明中药组合物调节后，高脂血症小鼠体重下降明显；通过分析肝系数和病理切片染色，给药组小鼠肝脏脂质堆积、炎性细胞浸润和空泡样改变均有缓解；血脂四项结果显示，相对于模型组，给药组小鼠hdl-c显著上升，ldl-c、tc、tg水平显著下降；本发明中药组合物通过调节ampk/srebp通路缓解高脂血症；本发明中药组合物能减轻肝组织炎症和全身代谢性炎症；本发明中药组合物有较好的修复肠屏障的作用，这可以有效缓解lps入血，进而改善炎症和高脂血症；本发明中药组合物可以改善肠道代谢物水平；本发明中药组合物缓解脂代谢紊乱的机制可能是通过代谢物辛酸实现的。
[0061]
该中药组合物有疗效好、应用安全、毒副作用小等优点，所制得的产品质量稳定，使用方便，更适合于临床用药，无任何副作用，疗效显著、无后遗症，因此，该中药组合物可用于制备调节肠道菌群的药物、修复肠粘膜屏障的药物、调节脂代谢紊乱的药物，或用于制备具有调节肠道菌群作用的保健品、具有修复肠粘膜屏障作用的保健品、具有改善脂代谢紊乱的保健品。
[0062]
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。