一种斑点叉尾鮰鱼鳔生物活性胶原蛋白肽的提取工艺的制作方法

1.本发明涉及生物酶解提取技术领域，尤其涉及一种斑点叉尾鮰鱼鳔胶原蛋白肽的提取工艺。


背景技术：

2.胶原蛋白是一种生物性高分子物质，具有多种生物功能是动物结缔组织中扮演结合组织的角色。胶原蛋白是生物科技产业最具关键性的原材料之一，也是需求量十分庞大的最佳医用、保湿、修复、延缓衰老、营养等材料。是维持皮肤与组织器官形态、结构的主要成分，也是修复各损伤组织的重要原料物质。
3.过去获取天然胶原蛋白及其胶原肽的主要途径来源于畜禽动物皮组织，也存在感染疯牛病和其它相关疾病的可能而限制了人们对陆生哺乳动物胶原蛋白及其制品的使用。现今正在逐步转向鱼类皮、鳞等胶原蛋白肽的方法，鱼胶原蛋白在一些方面明显优于陆生动物的胶原蛋白，比如具有低抗原性、低过敏性等特性，可能逐步替代陆生动物胶原蛋白。
4.全世界鲶形目鱼类达100多种，均属于无鳞经济鱼类，鮰鱼具有杂食性偏肉性、生长快、适应范围广、肉质营养丰富，生活于水体中平衡上下活动是鱼鳔，其鱼鳔含有最丰富的胶原蛋白。世界上鲶形目鱼类无肌间刺便于加工成各种水产制品，但是鱼鳔处于加工低端水产制品处理，目前有极少数加工企业采用酸碱等有机溶剂提取斑点叉尾鮰鱼鳔的胶原蛋白，较易造成环境污染，产品质量纯度低与杂质含量高以及化学物质第二次污染等，对人体产生副作用。


技术实现要素：

5.本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种斑点叉尾鮰鱼鳔胶原蛋白肽的提取工艺。
6.为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
7.一种斑点叉尾鮰鱼鳔胶原蛋白肽的提取工艺，包括以下步骤：
8.a、将斑点叉尾鮰鱼鳔用浓度为0.02～0.03％食用碱(na2co3)、2.3～2.7％食盐(nacl)、食品级双氧水0.07～0.09％的混合溶液，在10～12℃不断搅拌的条件下进行脱非胶原蛋白、脂肪、色素处理4～5小时；
9.b、将上述经过三脱处理好后的鱼鳔，用清水漂洗至中性或弱酸性，将处理好的鱼鳔表面水分滤干后进行胶体磨磨成胶体处理；
10.c、将绞碎的斑点叉尾鮰鱼鳔调节ph值至4～5，按斑点叉尾鮰鱼鳔重量1.5
‰
的比例添加200万单位/克的胶原蛋白复合酶，在18℃低温条件下保温酶水解约 24小时；
11.d、将上述的酶解液进行3000d-5000d的分子筛过滤，过滤胶原蛋白肽酶解液体通过调节酶失去活性等电点进行灭活处理，调节ph值至5.8，离心机 5000r/min时间20min离心沉淀鱼胶原蛋白肽胶体状；
12.e、对离心后胶体状的胶原蛋白肽进行-45℃低温真空冷冻干燥、气流超微粉碎所
获取胶原蛋白肽粉状成品。
13.所述步骤b中鱼皮表面水分处理方法为低温条件下滤干或振动筛振动筛干水分。
14.所述步骤b中鱼鳔磨碎方法为机械绞肉机绞碎。
15.与现有技术相比，本发明的有益效果是：
16.1.本发明以鮰鱼类加工后的鱼皮为原料提取胶原蛋白肽，使斑点叉尾鮰鱼鳔充分利用产生高值化产品；
17.2.采用酶水解的方法提取有效物质，克服了传统化学方法提取过程中第二次有毒有害药物与重金属残留的技术难题，产品安全无毒副作用；
18.3.应用本发明酶水解提取鱼鳔胶原蛋白后排放的废水对生态环境不产生面源污染，达到国家ⅰ至ⅱ级排放标准；
19.4.本发明采用释碱结合食盐食用双氧水溶液去除非胶原蛋白、脂肪、脱色，提高了提取胶原蛋白肽的纯度、低脂、无黑色素，ⅱ型胶原蛋白肽纯度高达95％以上，其相对分子量范围为1000～5000d(道尔顿)；
20.5.本发明胶原蛋白肽整个提取过程在低温条件下进行维系胶原蛋白肽的生物活性；
21.6.本发明获取的胶原蛋白肽原料产品用途范围广，可广泛用于医药、食品添加剂、化妆品、保健食品等行业；
22.7.本发明所需提取设备较简单，操作方便，原料来源范围广，省力和生产成本低。
具体实施方式
23.下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
24.实施例1
25.本发明实施例取斑点叉尾鮰鱼鳔原料5千克，用浓度为0.025％食用碱 (na2co3)、2.5％食盐(nacl)、食用双氧水0.09％的混合溶液与原料按10：1，在10～12℃不断搅拌的条件下处理脱非胶原蛋白、脂肪、色素处理4～5小时。三脱处理后的鱼鳔用清水多次洗涤，直至鱼鳔的ph值5.0，用纯净无菌水清洗后滤干鱼鳔上有水分，鱼鳔用胶体磨磨成胶体按原料与水1：8.5比例加入纯净无菌水，再按原料底物重量的1.5
‰
比例添加200万单位/克的胶原蛋白复合酶 7.5克，在18℃低温条件下酶水解24小时，酶解液经过调节酶失活的等电点灭活，再调节胶原蛋白最佳ph值5.8，用离心机5000r/min离心20min，浆体状的胶原蛋白肽进行-40℃低真空冷冻干燥、超微粉机粉碎获取成品，最后获得斑点叉尾鮰鱼鳔原料的提取率18.12％，带生物活性的胶原蛋白肽906克。ⅱ型胶原蛋白肽分子量为1000～5000道尔顿。
26.实施例2
27.本发明实施例取斑点叉尾鮰鱼鳔原料5千克，用浓度为0.025％食用碱 (na2co3)、2.5％食盐(nacl)、食用双氧水0.09％的混合溶液与原料按10：1，在10～12℃不断搅拌的条件下处理脱非胶原蛋白、脂肪、色素处理4～5小时。三脱处理后的鱼鳔用清水多次洗涤，直至鱼鳔的ph值5.0，用纯净无菌水清洗后滤干鱼鳔上有水分，鱼鳔用胶体磨磨成胶体按原料与水1：8.5比例加入纯净无菌水，再按原料底物重量的1.5
‰
比例添加200万单位/克的胶原蛋白复合酶5 克，在18℃低温条件下酶水解24小时，酶解液经过调节酶失活的等电点灭活，
再调节胶原蛋白最佳ph值5.8，用离心机5000r/min离心20min，浆体状的胶原蛋白肽进行-40℃低真空冷冻干燥、超微粉机粉碎获取成品，最后获得斑点叉尾鮰鱼鳔原料的提取率16.19％，带生物活性的胶原蛋白肽809.5克。ⅱ型胶原蛋白肽分子量为1000～5000道尔顿。
28.实施例3
29.本发明实施例取斑点叉尾鮰鱼鳔原料5千克，用浓度为0.025％食用碱(na2co3)、2.5％食盐(nacl)、食用双氧水0.09％的混合溶液与原料按10：1，在10～12℃不断搅拌的条件下处理脱非胶原蛋白、脂肪、色素处理4～5小时。三脱处理后的鱼鳔用清水多次洗涤，直至鱼鳔的ph值5.0，用纯净无菌水清洗后滤干鱼鳔上有水分，鱼鳔用胶体磨磨成胶体按原料与水1：8.5比例加入纯净无菌水，再按原料底物重量的1.5
‰
比例添加200万单位/克的胶原蛋白复合酶6 克，在18℃低温条件下酶水解24小时，酶解液经过调节酶失活的等电点灭活，再调节胶原蛋白最佳ph值5.8，用离心机5000r/min离心20min，浆体状的胶原蛋白肽进行-40℃低真空冷冻干燥、超微粉机粉碎获取成品，最后获得斑点叉尾鮰鱼鳔原料的提取率17.05％，带生物活性的胶原蛋白肽852.5克。ⅱ型胶原蛋白肽分子量为1000～5000道尔顿。
30.实施例4
31.本发明实施例取斑点叉尾鮰鱼鳔原料5千克，用浓度为0.025％食用碱 (na2co3)、2.5％食盐(nacl)、食用双氧水0.09％的混合溶液与原料按10：1，在10～12℃不断搅拌的条件下处理脱非胶原蛋白、脂肪、色素处理4～5小时。三脱处理后的鱼鳔用清水多次洗涤，直至鱼鳔的ph值5.0，用纯净无菌水清洗后滤干鱼鳔上有水分，鱼鳔用胶体磨磨成胶体按原料与水1：8.5比例加入纯净无菌水，再按原料底物重量的1.5
‰
比例添加200万单位/克的胶原蛋白复合酶 8.5克，在18℃低温条件下酶水解24小时，酶解液经过调节酶失活的等电点灭活，再调节胶原蛋白最佳ph值5.8，用离心机5000r/min离心20min，浆体状的胶原蛋白肽进行-40℃低真空冷冻干燥、超微粉机粉碎获取成品，最后获得斑点叉尾鮰鱼鳔原料的提取率18.22％，带生物活性的胶原蛋白肽911克。ⅱ型胶原蛋白肽分子量为1000～5000道尔顿。
32.以上各个实施例中，当用水清洗三脱斑点叉尾鮰鱼鳔，然后将其滤干水分后磨碎浆体，均选择具物理破碎功能的设备斑点叉尾鮰鱼鳔进行破碎，不限定特有的设备，如绞肉机、组织捣碎机、绞体磨等。
33.以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。