生物体内氧化还原电位测定装置和生物体内氧化还原电位测定方法、以及生物体内氧化还原电位验证方法与流程

1.本发明涉及生物体内氧化还原电位测定装置和生物体内氧化还原电位测定方法、以及生物体内氧化还原电位验证方法。


背景技术：

2.生物体内的大部分代谢反应是基于伴有电子移动的氧化还原反应。所谓氧化还原(redox)是还原(reduction)与氧化(oxidation)的合成词，氧化还原电位由伴有电子授受的氧化还原反应的半反应的平衡状态下的氧化型与还原型物质(氧化还原对)的比率来定义。能斯特(nernst)公式表示与电极反应对应的平衡电极电位e=e0 (rt/nf)ln([ox]a/ [red]b)：[化学式1](ox和red为氧化还原体系的氧化体和还原体，e-为电子，a、b、n为分子或电子的数量)。e0为相对于标准氢电极的标准电极电位。如下述的非专利文献1所示，1967年williamson等人对烟酰胺二核苷酸nadh/nad

之比测定各自的代谢产物，并测定了氧化还原电位。另外，2001年shapiro等人对谷胱甘肽2gsh/gssg直接测定各自的浓度，从而测定了氧化还原电位。如下述的非专利文献2所示，2002年jones等人报道了：关于氧化还原电位的生物学意义，培养细胞的氧化还原电位在细胞增殖期最低，在分化期(稳定状态)为中位，在细胞死亡即细胞凋亡中电位升高，通过控制氧化还原状态来进行细胞功能的调节。
[0003]
如下述的非专利文献3所示，2019年羽鸟观察到细胞内谷胱甘肽的氧化还原状态与各种疾病之间具有相关性，指出了：对于氧化还原平衡的尺度，与其按谷胱甘肽的浓度比(%)来处理，不如按氧化还原电位(mv)来处理，这样可更直观地理解且方便。氧化还原平衡与氧化还原状态被作为由活性氧等引起的氧化应激来研究，通过gfp荧光法探讨了谷胱甘肽氧化传感器的细胞内局部存在。而且，还报道了：通过氧化还原状态控制基因的转录或表达、细胞内物质的局部存在或合成、分解、以及细胞的增殖、分化、细胞死亡。
[0004]
生物体内的ph通过呼吸产生的二氧化碳的调节和肾脏中的代谢而严格地控制，正常值为7.35～7.45。另一方面，呼气中的氢是肠内细菌产生的氢气进入肺循环后排出的氢。用于测定呼气中的氢气浓度的器械为医疗器械classii，其中之一有手持式gastrolyser (bedfont公司、kent、英国)。有人指出：呼气中的氢气浓度根据饮食或运动而变化。如下述的非专利文献4所示，为了诊断消化道疾病而进行的氢呼气试验是根据2017年的北美共识，为了排除饮食的影响，在禁食1夜后摄取检查食物，并在安静状态下测定消化道的通过时间即2小时以上呼气中的氢气浓度。肺循环之后，通过肺内的气体交换，混合静脉血中的由消化道产生的氢气降低至肺泡内氢气分压。该肺泡内氢气分压等于末端呼气氢气分压。血液中的氢气从肺循环经过体循环输送至全身组织，扩散到细胞内。氢气是惰性气体而没有被代谢，因此组织中氢气分压等于末端呼气氢气分压。惰性气体(氮)在体内的半饱和时间为
约30分钟，因此经过半饱和时间的4倍即2小时基本达到平衡状态(1-(½)4=94%)。
[0005]
现有技术文献非专利文献非专利文献1：williamson, d. h., lund, p. & krebs, h.a, the redox state of free nicotinamide-adenine dinucleotide in the cytoplasm and mitochondria of rat liver. the biochemical journal 103, 514-527 (1967)；非专利文献2：jones, d. p, redox potential of gsh/gssg couple: assay and biological significance. methods in enzymology 348, 93-112 (2002)；非专利文献3：羽鸟 勇太, 消化道炎症模型的构建和细胞内氧化还原传感器的适用, yakugaku zasshi 139,1523-1530 (2019)；非专利文献4：rezaie, a.等人, hydrogen and methane-based breath testing in gastrointestinal disorders: the north american consensus. the american journal of gastroenterology 112, 775-784 (2017)。


技术实现要素：

[0006]
氧化还原状态通过细胞内的氧化还原对之比或浓度、荧光以氧化还原电位的形式测定。由于无法区分相同物质的氧化状态与还原状态，因此根据代谢产物之比测定nadh/nad

之比，而测定氧化还原电位。另外，由于谷胱甘肽在氧化型的谷胱甘肽二硫化物中成为二聚物，因此需要进行浓度测定。从需要测定细胞质内的代谢物的比率或浓度、荧光的角度考虑，可在培养细胞内进行，但难以测定用于评价生物体内的氧化还原状态的氧化还原电位。一直以来，都难以直接测定人等生物体内的氧化还原电位，故要求测定成为表示人的健康状态的指标的氧化还原电位。
[0007]
氧化还原电位可在生物体内的氧化还原反应为平衡状态时测定。作为氧化还原对之一的氢气与氢离子的平衡状态为：[化学式2]。
[0008]
标准氢电极是浸在以标准压力p
0 (101.3kpa)吹入氢气的氢离子活度为1mol/l的溶液中的铂电极。此时的标准电极电位e0=0v。能斯特(nernst)公式是与电极反应对应的平衡电极电位e=e0 (rt/nf)ln([ox]a/[red]b)：[化学式3](ox和red为氧化还原体系的氧化体和还原体，e-为电子，a、b、n为分子或电子的数量)。即，基于nernst公式的氧化还原电位e在温度为37℃ (310k)下，e=0-(0.061/2)
×
(log[h2]-2log[h

])。氢离子活度[h

]的倒数的对数为ph=-log[h

]。氢气可在标准压力p0下吹入，但即使小于标准压力，根据亨利定律，氢气也会溶存于水溶液中。因此，氢气活性[h2]为氢气分压/标准压力p0。于是，定义为氢气活性[h2]的倒数的对数即氢气指数ph2=-log[h2]。氢/氢离子的氧化还原电位e成为e=-0.061
×
ph 0.031
×
ph
2 (v)。氧化还原电位取决于ph和ph2。其电位变化的比率为0.061v/ph和0.031 v/ph2。
[0009]
在本发明中，测定末端呼气中的氢气分压，通过器械显示氢气分压/标准压力的倒数的对数即氢气指数ph2。氧化还原电位采用体温37℃ (310k)和生物体的ph的正常值7.4、氢气指数ph2，通过运算式e=-0.451 0.031
×
ph
2 (v)测量氧化还原电位e。
[0010]
本发明的生物体内氧化还原电位测定装置是通过呼气氢气分析测定生物体内氧化还原电位的器械，结果以电压的形式显示，本发明的生物体内氧化还原电位测定方法是通过呼气氢气分析测定生物体内氧化还原电位，结果以电压的形式显示。利用生物体内的氢与氢离子之比测定生物体内的氧化还原电位(v)。氧化还原电位通过伴有电子授受的氧化还原反应的半反应的平衡状态下的氧化型与还原型物质(氧化还原对)的比率来定义。因此，利用与平衡电极电位相关的能斯特(nernst)公式求出标准氢电极的电位作为基准点0v。
[0011]
氢气分析包括进行在大气压下的末端呼气的肺泡内氢气分压测定的装置。由于利用标准氢电极始终吹入标准压力p0的氢气的状态为1，因此氢气活度[h2]与氢气分压(pa)/101.3kpa成比例。氢气分析的结果，将氢气指数ph2定义为[h2]的倒数的对数(ph2=-log[h2])来表示。
[0012]
另外，利用上述本发明的生物体内氧化还原电位测定装置和生物体内氧化还原电位测定方法测定的生物体内氧化还原电位不是实际的测定值，而是由规定的运算式得到的值，因此在某种意义上只不过是估计值，因此本发明的生物体内氧化还原电位验证方法要验证该估计值与实测后得到的实际的生物体内氧化还原电位近似。
[0013]
根据本发明，提供生物体内氧化还原电位测定装置，其具有：在氢气指数ph2定义为氢气分压(pa)/101.3kpa的倒数的对数(ph2=-log[氢气分压/101.3kpa])时，对测定对象的人的受检体的氢气指数ph2进行测定的单元；存储单元，其存储规定的运算式；运算单元，其利用通过上述测定氢气指数的单元测定的氢气指数ph2，通过存储在上述存储单元中的上述规定的运算式运算氧化还原电位；以及显示单元，其显示通过上述运算单元运算的上述氧化还原电位。
[0014]
优选的实施方式为：在上述本发明的生物体内氧化还原电位测定装置中，作为上述运算式，在以e为氧化还原电位、以ph2为上述氢气指数时，使用e=-0.451 0.031
×
ph
2 (v)。
[0015]
优选的实施方式为：在上述本发明的生物体内氧化还原电位测定装置中，作为上述运算式，在以e为氧化还原电位、以ph为上述受检体的氢离子指数、以ph2为上述氢气指数时，使用e=-0.061
×
ph 0.031
×
ph
2 (v)。
[0016]
优选的实施方式为：在上述本发明的生物体内氧化还原电位测定装置中，作为上述ph，采用7.3～7.5的值。
[0017]
优选的实施方式为：在上述本发明的生物体内氧化还原电位测定装置中，作为上述ph，采用7.4的值。
[0018]
优选的实施方式为：在上述本发明的生物体内氧化还原电位测定装置中，上述显示单元以显示利用上述测定氢气指数的单元测定的氢气指数ph2的方式构成。
[0019]
根据本发明，提供生物体内氧化还原电位测定方法，该方法包括：在氢气指数ph2定义为氢气分压(pa)/101.3kpa的倒数的对数(ph2=-log[氢气分
压/101.3kpa])时，对测定对象的人的受检体的氢气指数ph2进行测定的步骤；读出存储在规定的存储单元中的规定的运算式的步骤；运算步骤，利用通过上述测定氢气指数的单元测定的氢气指数ph2，通过由上述存储单元读出的上述规定的运算式，运算氧化还原电位；以及显示步骤，显示通过上述运算步骤运算的上述氧化还原电位。
[0020]
优选的实施方式为：在上述本发明的生物体内氧化还原电位测定方法中，作为上述运算式，在以e为氧化还原电位、以ph2为上述氢气指数时，使用e=-0.451 0.031
×
ph
2 (v)。
[0021]
优选的实施方式为：在上述本发明的生物体内氧化还原电位测定方法中，作为上述运算式，在以e为氧化还原电位、以ph为上述受检体的氢离子指数、以ph2为上述氢气指数时，使用e=-0.061
×
ph 0.031
×
ph2(v)。
[0022]
优选的实施方式为：在上述本发明的生物体内氧化还原电位测定方法中，作为上述ph，采用7.3～7.5的值。
[0023]
在上述本发明中，优选的实施方式为：作为上述ph，采用7.4的值。
[0024]
优选的实施方式为：在上述本发明的生物体内氧化还原电位测定方法中，上述显示步骤以显示通过上述测定氢气指数的步骤测定的氢气指数ph2的方式构成。
[0025]
根据本发明，提供生物体内氧化还原电位验证方法，其是用于在氢气指数ph2定义为氢气分压(pa)/101.3kpa的倒数的对数(ph2=-log[氢气分压/101.3kpa])时验证通过所测定的氢气指数ph2和规定的运算式求出的生物体内氧化还原电位与实际的生物体内氧化还原电位近似的生物体内氧化还原电位验证方法，具有以下步骤：步骤1，在构成起泡装置的容器中装入磷酸缓冲液；步骤2，测定上述容器内的磷酸缓冲液的ph和氧化还原电位orp；步骤3，用第1规定时间以第1规定流量对上述起泡装置输送医疗用空气；步骤4，在上述规定时间的送气结束后，再次测定上述容器内的磷酸缓冲液的ph和氧化还原电位orp；步骤5，利用在输送上述医疗用空气之前测定的上述氧化还原电位orp校正在输送上述医疗用空气之后测定的上述氧化还原电位orp；步骤6，排出上述容器内的磷酸缓冲液，在上述容器中装入新的磷酸缓冲液；步骤7，测定上述容器内的上述新的磷酸缓冲液的ph和氧化还原电位orp；步骤8，用第2规定时间以第2规定流量对上述起泡装置输送含有规定浓度的氢的标准气体；步骤9，在上述第2规定时间的送气结束后，再次测定上述容器内的上述新的磷酸缓冲液的ph和氧化还原电位orp；步骤10，利用在输送上述包含规定浓度的氢的标准气体之前测定的上述氧化还原电位orp校正在输送上述包含规定浓度的氢的标准气体之后测定的上述氧化还原电位orp；以及步骤11，利用在上述2个校正步骤中得到的校正后的2个上述氧化还原电位orp，当为上述医疗用空气时ph2设为6.2，当为上述含有规定浓度的氢的标准气体时ph2设为4，掌握相对于ph2的变化的上述氧化还原电位orp的变化方案。
[0026]
优选的实施方式为：在上述本发明的生物体内氧化还原电位验证方法中，将上述步骤1～上述步骤5重复多次，使用多次的测定结果的平均值，同样将上述步骤6～上述步骤10重复多次，使用多次的测定结果的平均值。
[0027]
生物体将作为环境的温度、营养素、氧等的变化作为来自外界的信号接收。另外，根据代谢要求的变化，而将相对的低氧状态或作为底物的葡萄糖的不足等变化作为内源性信号接收，为了维持生物体的恒定性稳态而控制细胞功能。这种信号之一有包含活性氧物种的氧化应激。在生物体内有谷胱甘肽、硫氧还蛋白等还原系统，从nadh或nadph接受能量以维持恒定性。这种氧化还原反应的状态在生物体内被称为氧化还原状态，作为氧化还原电位进行测定。氧化还原电位由各自的氧化还原对规定，作为其一的谷胱甘肽的细胞内浓度为3-10mm，因大量存在而具有缓冲功能。另一方面，nadh的浓度为97-168µm，始终在tca循环与电子传递系统之间再利用。即，在以这些氧化还原对为指标的情况下，氧化还原电位的变化并不敏锐，如果不是代谢状态大幅变化的培养细胞的增殖状态、分化、细胞凋亡，则电位没有变化。
[0028]
在本发明中，利用作为氧化还原状态的指标之一的氢/氢离子的氧化还原电位来评价生物体内的氧化还原状态。生物体内的氢离子浓度在ph=7时为40nm。呼气试验的氢浓度为13ppm (早朝空腹时6-20ppm)时的生物体内氢浓度为氢气的溶解度(1282l
×
atm/mol)～10nm。即，为谷胱甘肽的百万分之一、nadh的千分之一以下。在酸碱平衡下的血液中的阳离子中，氢离子浓度少至40nm，为钠离子浓度130meq/l的百万分之一，变化敏锐。暗示了：作为氧化还原平衡的指标的基于氢/氢离子的氧化还原电位的变化较以谷胱甘肽或nadh为指标敏锐1000倍～100万倍。
[0029]
根据本发明，可更敏锐地获取短期的代谢状态的变化。迄今为止，只能获取如细胞的增殖、分化、细胞死亡这样的长期变化。如果是可重复测定的敏锐的指标，则可获取作为外界的环境或内源性的代谢要求的变化。例如，根据禁食与饮食、安静与运动，可在氢呼气试验中看到变化。另外，由于体内的氢分压约2小时达到平衡，因此以生物体内的氧化还原电位为指标，可测定疾病或用于治疗的药剂的影响。因此，认为如果可测定氧化还原电位，则不仅可应用于环境或代谢状态的评价，还可应用于疾病的评价或治疗方法的开发。
附图说明
[0030]
[图1]是显示本发明的生物体内氧化还原电位测定装置的优选实施方式的框图(block diagram，方块图)。
[0031]
[图2]是显示用于本发明的生物体内氧化还原电位验证方法的系统的优选实施方式的框图。
[0032]
[图3]是用于说明本发明的生物体内氧化还原电位验证方法的曲线图。
具体实施方式
[0033]
以下，参照附图对本发明的优选实施方式进行说明。
[0034]
图1是显示本发明的生物体内氧化还原电位测定装置的优选实施方式的框图。本发明的生物体内氧化还原电位测定方法的优选实施方式也按照图1进行说明。
[0035]
本发明中，虽然是测定作为被测定者的人的生物体内的氧化还原电位，但因电阻
的关系而难以直接测定例如生物体的血液或内脏、肌肉等中的氧化还原电位，因此在本发明中使用被测定者的呼气。ph2测定部10是通过受试者吹入呼气而测定呼气中的氢气指数ph2。作为ph2测定部10，例如可使用半导体式氢浓度计，即，将被加热金属氧化物半导体与氢气接触时产生的电阻值的变化作为氢气浓度来检测的仪器、例如理研计器株式会社的sg8541。ph2测定部10的输出信号表示所测定的氢气指数ph2，被输送至运算/控制部14。在存储部16预先存储有规定的运算式，根据需要，存储运算/控制部14中的运算结果。输入部12用于对运算/控制部14给出运算开始的指示、或者用于在运算/控制部14设定后述的氢离子指数ph的值。
[0036]
由运算/控制部14运算而得到的生物体内氧化还原电位被输送至显示部18，显示为数值。需要说明的是，上述输入部12、运算/控制部14、存储部16、显示部18也可由个人电脑的键盘和鼠标、中央运算处理单元(cpu)、存储器(ram、rom)、显示器构成。这种情况下，为了将ph2测定部10的输出信号以适当的形式供给至个人电脑的usb输入部，根据需要使用省略图示的界面。显示部18除了显示上述生物体内氧化还原电位，还显示上述测定的氢气指数ph2。需要说明的是，运算/控制部14除了上述运算以外，还可按照由输入部12输入的来自装置的操作者的指示控制存储部16或显示部18。
[0037]
在存储部16预先存储有用于计算生物体内氧化还原电位e的运算式。运算式的基本为e=-0.061
×
ph 0.031
×
ph
2 (v)。这里，如上所述，ph为7.35～7.45，因此可通过输入部12将该范围内的适当的值输入至运算部。另一方面，由于ph的变化范围仅为7.35～7.45，因此也可将其例如固定为7.4。因此，也可通过输入部12输入7.4作为ph、或者将该7.4预先存储在存储部16，对其进行使用，但已编入7.4作为ph，可将上述基本的运算式简化为e=-0.451 0.031
×
ph
2 (v)。因此，在将ph固定为7.4的情况下，可在存储部16预先存储经简化的运算式e=-0.451 0.031
×
ph
2 (v)以代替基本的运算式。需要说明的是，也可在存储部16预先存储上述基本的运算式和经简化的运算式两者，根据需要，按照来自输入部12的指示读出任一个运算式而提供给运算部14。
[0038]
接下来，给出使用上述经简化的运算式而测定的氧化还原电位的几个实际的测定例。
[0039]
测定条件和测定对象者等测定日期时间：2018年9月26日、上午8点～9点；病例1：23岁女性、有吃早饭、氢气分压0.1pa、氢气指数ph2=6.0、氧化还原电位e=-0.265v。
[0040]
病例2：44岁男性、没吃早饭、氢气分压1.9pa、氢气指数ph2=4.72、氧化还原电位e=-0.305v。
[0041]
病例3：34岁女性、有吃早饭、氢气分压4.6pa、氢气指数ph2=4.34、氧化还原电位e=-0.317v。
[0042]
以下的表显示包括上述病例1～3在内总计10个病例的测定结果。
[0043]
[表1]
接下来，对用于本发明的生物体内氧化还原电位验证方法的系统的优选实施方式进行说明。
[0044]
图2是显示用于本发明的生物体内氧化还原电位验证方法的系统的优选实施方式的框图。该系统具有：医疗用空气源20、氢气源22、2个流量计24、26、切换阀28、起泡装置30、设置在构成起泡装置30的容器31内的ph和电位测定装置36、界面40、显示器42和存储部44。起泡装置30可利用通常用作空气加湿器的装置，经由导管32向容器31内导入从外部供给的气体，使导入的气体在容器31内的液体中起泡(气泡化)，从容器31的上部空间经由排出管34排出至外部。
[0045]
医疗用空气源20是将医疗用空气减压至200kpa后输送。氢气源22输送包含10pa的氢的空气(标准气体)。从医疗用空气源20输送的经减压的医疗用空气和从氢气源22输送的包含氢的空气分别经由流量计24、26，由切换阀28选择任一个，供给至起泡装置30。起泡装置30是通常用作空气加湿器的装置，在构成其的容器31内可加入磷酸缓冲液(10mm、ph7.1) 46。作为所涉及的磷酸缓冲液，例如可使用富士胶片和光纯药株式会社制造的166-23555 pbs (-)。利用图2对本发明的生物体内氧化还原电位验证方法的优选实施方式进行说明。
[0046]
在构成起泡装置30的容器31中装入磷酸缓冲液(10mm、ph7.1) 46。利用ph和氧化还原电位测定装置36测定容器31内的磷酸缓冲液的ph和氧化还原电位orp。作为ph和氧化还原电位测定装置36，例如可使用株式会社custom制造的ph6600和orp-6600s。ph和氧化还原电位测定装置36的输出信号经由信号传递路径38和界面40提供给显示部42和存储部44。若测定ph和还原电位、并存储于存储部44，则操作切换阀28，用第1规定时间以第1规定流量对起泡装置30输送医疗用空气。这里，作为第1规定流量，设为0.5l/分钟，作为第1规定时间，设为1小时。作为医疗用空气，例如可使用air water公司制造的医疗用空气(与大气同样包含0.6ppm的氢)。
[0047]
在第1规定时间的送气结束后，利用ph和还原电位测定装置36再次测定容器31内的磷酸缓冲液的ph和氧化还原电位orp，将所测定的电位存储于存储部44。接着，利用在输送医疗用空气之前测定的氧化还原电位orp校正在输送医疗用空气之后测定的氧化还原电位orp。例如，若在输送医疗用空气之前测定的氧化还原电位orp为230mv，则以该电位作为基准的0mv。即，如果在输送医疗用空气之后测定的氧化还原电位orp为243mv，则从该值中
减去230mv，将243mv校正为13mv。
[0048]
排出容器31内的磷酸缓冲液，在容器31中加入新的磷酸缓冲液。与上述同样地测定容器31内的新的磷酸缓冲液的ph和氧化还原电位orp。在测定和测定值的存储结束后，用第2规定时间以第2规定流量对起泡装置30输送包含规定浓度的氢的标准气体。这里，作为第2规定流量，设为0.5l/分钟，作为第2规定时间，设为1小时。另外，作为规定浓度，例如为100ppm，例如可使用air water公司制造的标准气体。
[0049]
在第2规定时间的送气结束后，利用ph和电位测定装置36再次测定容器31内的新的磷酸缓冲液的ph和氧化还原电位orp并存储。利用在输送包含规定浓度的氢的标准气体之前测定的氧化还原电位orp校正在输送包含规定浓度的氢的标准气体之后测定的氧化还原电位orp。这里，如果测定电位为174mv，则如上所述减去230mv，校正后的电位为-56mv。
[0050]
使用如此操作而得到的校正后的2个氧化还原电位orp，在为医疗用空气时ph2为6.2，在为包含规定浓度的氢的标准气体时ph2为4，掌握相对于ph2的变化的氧化还原电位orp的变化方案。即，如图3的曲线图所示，由于ph2为4时氧化还原电位orp为
‐
56mv、ph2为6.2时氧化还原电位orp为13mv，因此利用连接这些点的线段制作图3的曲线图。ph的变化在使空气起泡时为0.007
±
0.021、在氢标准气体(10pa)时为0.060
±
0.008。另外，氧化还原电位的变化在使空气起泡后为13.3
±
17.6mv、在标准氢气时为-56.0
±
13.5mv。
[0051]
基于上述测定的图3的曲线图的制作是在测定为1次的情况下进行了说明，为了减少测量误差，优选多次(例如3次以上)进行上述电位的测量，取测量结果的平均值。图3的曲线图中，在表示ph2为4的电位和ph2为6.2的电位的曲线图的线段的两端的上下延伸的线段分别表示标准偏差。线性回归直线显著(y=-180.8 32.2
×
ph2、r2=0.83、p=0.011)。由于是磷酸缓冲液，所以ph=7.1且起泡后的变化小于0.1，但氧化还原电位orp由于起泡的空气中的氢分压而变化32mv/ph2，与能斯特公式一致。因此，当ph恒定时，氧化还原电位与起泡的空气中的氢气分压的ph2成比例。
[0052]
若对这一点进行探讨，则在给出上述y的式中，r2为决定系数。其是评价通过回归得到的值实际上有多大程度的一致的指标。决定系数r2通常取0～1的范围，值越大越可适当地体现数据。接下来，考虑作为回归系数(直线斜率)为0的概率(无关)的概率，回归系数为零的概率用p表示，这次因小于作为显著水平的0.05，故表示电位的变化与氢气指数ph2成比例。决定系数r2表示回归直线与数据有多大程度的一致，p表示回归系数为0的概率，因小于显著水平5%，故判断为在统计学上显著。
[0053]
产业实用性根据本发明的生物体内氧化还原电位测定装置和生物体内氧化还原电位测定方法，可使用人的呼气测定氢气指数ph2，并利用该测定值推测难以直接测定的生物体内氧化还原电位，因此可简易地掌握外来患者或住院患者、其他接受健康诊断的人等的健康状态，不仅可应用于环境或代谢状态的评价，还可应用于疾病的评价或治疗方法的开发，因此，可用于进行健康诊断和各种疾病的治疗的诊断/治疗产业。另外，根据本发明的生物体内氧化还原电位验证方法，使用标准气体和磷酸缓冲液等，可简便地验证通过上述的本发明的生物体内氧化还原电位测定装置和生物体内氧化还原电位测定方法测定的氧化还原电位与实际的电位近似，因此同样可用于诊断/治疗产业。